INGINERIA TISULARĂ –

TESUT OSOS
Curs IX-X
Prof. Dr. Ing. Mariana
IONIȚĂ
Drd. Ing.
George Mihail VLASCEANU
 IT a materialului osos
Osul = tesut inalt specializat, adaptat solicitărilor mecanice prin modelare şi remodelare

Trei funcţii fundamentale

 funcţia de suport structural
 funcţia de echilibru mineral
 funcţia de hematopoeză
ECM mineralizata - rigiditate, rezistenta, dar si un anumit grad de elasticitate
Celule - osteoblaste, osteocite, osteoclaste

https://ww.bing.com/images/search?view=detailV2&id=AD2DAAE330692FE97F451349AA2CED4E263E66AA&thid=OIP.CpG3LVfQwJv95Z1QzLPeowHaET&mediaurl=https%3A%2F%2Fwww.prstemcell.org%2Fimages%2Farticle%2Fst
ructura-osului.jpg&exph=346&expw=595&q=os+spongios&selectedindex=0&ajaxhist=0&vt=0
 IT a materialului osos
Matrice organica – 35 % - 95% colagen tip I, 5% PG si proteine non-
colagenice);
Matrice anorganica – 65 % - depozite de saruri, in principal Ca si fosfati
sub forma de hidroxiapatita).

Cortical sau spongios (trabecular).

https://ro.pinterest.com/pin/140948663313505864/
 IT a materialului osos

Cele mai comune cauze ale distrugerii osoase sunt:

o Traumele;
o Infectiile;
o Bolile degenerative (osteomielita, osteoporoza);
 IT a materialului osos
Defectele osoase:
o Lipsa tesutului osos dintr-o anumita zona a organismului in care ar trebui sa existe,
in mod normal si care rezulta in formarea unei pseudoartroze;

o Metode de reconstructie osoasa: decorticarea, excizia si fixarea, grefarea osului

spongios, metoda de reconstructie prin transport intern de os (metoda Ilizarov),
ingineria tisulara.

https://ourorthopaedics.blogspot.com/2010/01/83-ilizarov-external-fixator.html
 IT a materialului osos

• grefarea osoasa, stabilita în 1800

• înlocuia lipsă de material osos cu autogrefă sau alogrefa
 IT a materialului osos
Matrice biocompatibila și biodegradabila introdus într-un defect osos pentru a
induce vindecarea oaselor

• scaffolduri goale
• scaffolduri complexe - sisteme de livrare sau purtatoare de celule, factori de
crestere, medicamente

https://free3d.com/3d-model/sponge-spongy-bone-structure-3574.html
 IT a materialului osos
Factori importanți implicați în proiectarea de scaffold-uri pentru reconstructii osoase
 IT a materialului osos
Procesabilitate, ușor de realizat în forme neregulate de constructii care se
potrivesc cu defectele in oase.
 IT a materialului osos
Bioceramicile
Biopolimerilor
Polimeri sintetici
Polimer sintetic /
biopolimeri

Materiale
compozite
Polimeri și ceramică ( biosticle )
Polimeri-nanotuburi de carbon ( CNT )
Compozite biopolimer - grafena
 IT a materialului osos
Bioceramicile

Scaffold Composition Pros Cons Stiff or

Moldable
Hydroxyapatit Ca10(PO4)6(OH)2 native brittle & resorbs slowly stiff
e (HA) inorganic
bone matrix
Beta- native bone significantly less bone
Tricalcium Ca3(PO4)2 calcification stiff
laid down than β-TCP
Phosphate minerals resorbed
(β-TCP)
Calcium sulphate CaSO4·2H2O highly moldable not native bone material moldable
& easily
shaped
composed of not as much known
Octacalcium
Ca8H2(PO4)6.5H2O native bone about material as stiff
Phosphate
minerals, traditional calcium
osteoinductive phosphate
customizable &
Advanced can be generated new & underdeveloped
variable desired moldable
nanomaterial technology
s characteristics
 IT a materialului osos
Biopolimerilor

chitosan , colagen sau fibrină

• biocompatibilitate , biodegradabilitate, bioadezivitatea, activitate antibacteriană , etc
• prelucrabilitate precara , proprietăți mecanice și costuri ridicate.

Polimeri sintetici
• procesare excelenta, biocompatibili și biodegradabili cu rata de degradare modulabila
• proprietati mecanice previzibile și reproductibile
• provoca reacții inflamatorii persistente, nefiind compatibil sau capabil să integreze
cu țesuturile gazdă.
 IT a materialului osos

Polimer sintetic / biopolimeri .

• fabricate în varietate de forme ( hidrogeluri, filme, fibre, bureți, și

micro- , nano -particule)

• de obicei, aceste materiale prezintă modulul lui Young de 1.8-4 GPa

iar modulul lui Young pentru pentru os variază de la aproximativ 17
GPa în direcție longitudinală la aproximativ 10 GPa în plan transversal.

• amestecurile polimer sintetic - biopolimer necesită schimbări chimice

semnificative în structura lor pentru astfel de aplicații. Totuși efectuarea
acestor modificări chimice implica adesea utilizarea unor compuși care pot
induce citotoxicitate.
 IT a materialului osos
Materiale compozite
Polimeri și ceramică ( biosticle )
• au capacitatea de a se degrada in vivo sunt candidații ideali pentru scaffold-uri care
se degradează treptat, în timp ce noul tesut este format

Polimeri-nanotuburi de carbon ( CNT )

Datorită funcționalităților acestora CNT pot furniza urmărire mai bună a celulelor,
conductivitatea electrică, livrarea de factorii de crestere sau medicament, și
consolidarea mecanică a scaffold-urilor.
Rugozitate modulabila.
 IT a materialului osos

Citotoxicitatea CNT
• catalizatorul metalic folosit la fabricarea CNT

• pentru aplicații biomedicale, în special cele care implică plasarea

în interiorul corpului, se confruntă cu problema toxicitatea legată
și de inserție CNT dintre bistratul lipidic al membranei celulare,
ceea ce conduce la perturbarea membranei si moartea celulelor
 IT a materialului osos
Compozite biopolimer - grafena

• conductivitate electrică si termica bună

• excelente proprietati mecanice
• capacitate de ranforsare superioara CNTs
 IT a materialului osos

Metode terapeutice:

Terapia celulara difera de ingineria tisulara

TC = in cadrul unui tesut, sunt aplicate celule, spre a le substitui pe cele distruse si a se
recapata functiile si integritatea acestuia;

IT= mai complexa, incluzand: molecule bioactive (osteoinductie), insamantarea unor

celule si substituenti celulari in matrici 3D (raspuns la semnale, etc), suport nutritional
adecvat (angiogeneza).
 IT a materialului osos

Celulele implicate in remodelarea osoasa:

o Osteoblaste;
o Osteoclaste;
o Osteocite;
o Preosteoblaste;
o Macrofage osoase, regasite pe suprafetele endosteale si/sau periosteale;
 IT a materialului osos

Grefarea osoasa, stabilita în 1668 sau 1800

Autogrefă osoasa – “gold standard”

Avantaje

Osteoconductiv (arhitectura ideala)

Osteoinductia (factori de crestere)
Osteogeneza (celule, vase de
sange )

Dezavantaje
surse reduse
morbiditatea zonei de prelevare
 IT a materialului osos
Alogrefa osoasa
A
v
a
n
t
a
j
e
Osteocond
uctiv /
Osteoindu
ctiv

Dezavanta
je
• riscul de
transmiter
e a bolilor
 IT a materialului osos
Alogrefa osoasa

• Stare naturala -activitate antigenica ridicata, timp limitat pentru a

testa imunogenitate / boli

• Stare congelata din stare naturala – mai puțin antigenic, timp de

testare pentru boli (reglementate strict de către FDA), pastreaza
proprietatile biomecanice, eficiente ca grefe structurale

• Deshidratate (congelate)- mai puțin antigenic, timp pentru a fi testate

pentru boli, pot fi păstrat la temperatura camerei până la 5 ani,
proprietățiile mecanice se degradeaza.
 IT a materialului osos
Grefa osoasa - matrice osoasă demineralizată

Matrice osoasă demineralizată (MOD) - este produsa prin extracția acidă

din alogrefa (os cortical)

MOD –proteine necolagenice, colagen de tip 1 (schela osteoconductiva),

daca se adauga factori de creștere (osteoinductive).

MOD este disponibil în mai multe forme - pulbere liofilizată, granule, gel,
chit, și benzi.

Capacitate de regenerare osoasa depinde de procesul de

fabricație.
 IT a materialului osos
Substituenti de os
hidroxiapatita coralina / hidroxiapatita

Aprobat de FDA in 1992, este produs din schelet de coral

marin, are structura asemănătoare de pori cu osul
spongios.

2013, în revista Biomedical Materials- vindecarea osului

a fost observată în fiecare dintre pacienți după patru
luni, dar sa biodegradat complet după doi ani.

Consens ?

Blocuri de hidroxiapatita coraline pot rămâne vizibile pe

radiografii de până la 10 ani.
 IT a materialului osos
Substituenti de os
hidroxiapatita coralina / hidroxiapatita

Încorporarea
parțială a grefei de hidroxiapatită la un an
post-operator
 IT a materialului osos
Substituenti de os

Comercializate -ProOsteon de Interpore Cross

Disponibil în dimensiuni diferite de blocuri și granule

ProOsteon 500- Resorbție foarte lenta

ProOsteon 500 R-Numai un strat subțire, resorbție mai

rapida
 IT a materialului osos
Substituenti de os pe baza de colagen
Aprobate de FDA în 1991

Xenogrefe constând din benzi tip spongy de colagen bovin, combinate cu

hidroxiapatita.

Matricea pe bază de colagen este osteoconductiva.

Rezistenta la compresiune este mai mică decât cea a osului spongios, ele
sunt cu succes utilizate ca grefa de suprafață

Collagraft (Zimmer)
Healos (Depuy)
 IT a materialului osos
Substituenti de os pe baza de fosfat de calciu

- pastă injectabila
- de 4 până la 10 ori rezistența la
compresiune mai mare decat osul spongios

- proprietati osteoconductive

- util în cazul în care rezistența mecanică Vitoss (Orthovita)

suplimentară este necesara ChronOS (Synthes)
Conduit (DePuy)
- studiile au demonstrat că 95 la sută din Cellplex TCP (Wright Medical)
Various Their (Therics)
fosfatul de calciu este resorbit în 26-86
saptamani
 IT a materialului osos
Substituenti de os pe baza de fosfat de calciu

• Injectabil
 IT a materialului osos
Substituenti de os pe baza de sulfat de calciu

Se resoarbe în 4 până la 12 săptămâni, făcându-l cel mai rapid dintre

produsele osteoconductive disponibile în prezent.

Datorită ratei rapide de resorbție, sulfat de calciu este folosit pentru

extinderea (extender) timpului de viata a grefei osoase.

Proprietati mecanice slabe.

Osteoconductiv.

Osteoset, Calceon 6, Bone

Blast, etc
 IT a materialului osos

Restaurarea structurii si functiilor in cadrul ingineriei tisulare osoase:

o Scaffoldurile pentru substitutia osoasa

o Prin combinarea cu proteine morfogenice osoase (BMP) se obtin efecte sporite de

vindecare;

o Grefele compozite constau de regula dintr-o matrice osteoconductiva si agenti

bioactivi, care aduc proprietatile de osteoinductie si osteogeneza;
 IT a materialului osos
Proteine morfogenice osoase recombinante

BMP-2 (Infuse) Medtronics

BMP-7 (OP-1) Stryker Biotech
BMP-9

Leaga receptorii prezenti la nivelul membranei celulelor stem mezenchimale,

receptorii produc un semnal care determina transformarea celulelor in celule
progenitoare specifice.

Limitari- costuri extrem de ridicate, sarcina, cancer, imaturitate a oaselor.

 IT a materialului osos
Proteine morfogenice osoase recombinante
BMP-2

 0.75 mg/ml BMP-2

 1.50 mg/ml BMP-2

Reducere de 44% riscului de pseudartroza la doze

mari de BMP-2

• fractură se vindeca mult mai rapid

• semnificativ mai puține intervenții
• esuarea datorata proprietatilor mecanice mai
mici
• rata infecțiilor mai mica
 IT a materialului osos

Terapia celulara (TC)

TC = in cadrul unui tesut, sunt aplicate celule, spre a le substitui pe cele distruse si a se
recapata functiile si integritatea acestuia;

IT= mai complexa, incluzand: molecule bioactive (osteoinductie), insamantarea unor

celule si substituenti celulari in matrici 3D (raspuns la semnale, etc), suport nutritional
adecvat (angiogeneza).
 IT a materialului osos

Celulele implicate in remodelarea osoasa:

o Osteoblaste;
o Osteoclaste;
o Osteocite;
 IT a materialului osos

Restaurarea structurii si functiilor in cadrul ingineriei tisulare osoase:

o Presupune izolarea, cultura si reimplantarea celulelor; aceasta din urma necesita
folosirea unui scaffold; (+GF)

o Cele mai potrivite celule sunt cele stem mezenchimale, avand ca principal avantaj
faptul ca reprezinta o sursa celulara atat pentru repararea osoasa, cat si pentru cea
cartilaginoasa;
 IT a materialului osos

Celulele stem :
(A) se diferentiaza direct in celule specifice tesutului, substituindu-le pe cele afectate;
(B) influenteaza indirect regenerarea tisulara, prin secretia de factori solubili, care promoveaza
vascularizarea, proliferarea si diferentierea celulara;
(C) moduleaza procesele inflamatorii.
 IT a materialului osos

Surse de celule stem:

o Embrionare: diferentiere in osteoblaste fara implicarea

teratogenezei;

o Fetale: provenite:
o In perioada de inceput spre mijlocul sarcinii, din sange,
maduva osoasa (cele mai utile), ficat, timusul
pancreatic sau din tesutul osos;
o In perioada finala, din cordonul ombilical (protocoale
foarte bine stabilite);
 IT a materialului osos

Surse de celule stem:

o Adulte mezenchimale, de provenienta:

o Medulara (mediul de cultura trebuie sa fie bogat in
fosfati);
o Periostala (capacitate de mineralizare si
neovascularizare mai buna si eficacitate in vindecare);
o Adipoasa (liposuctie sau indepartarea chirurgicala a
tes. adipos = considerate in general reziduuri medicale;
necesita cresterea FA si a altor proteine osteogenice;
rezultate slabe)
o Pluripotent-induse: sursa autologa; se pot diferentia in
osteoblaste sau CSA (prin inducerea unui fenotip mezenchimal);
 IT a materialului osos

Biomateriale pentru scaffolduri:

o Naturale: organice (colagen, ac. hialuronic) sau anorganice (HA, fosfat tricalcic).
o cele polimerice prezinta avantajul posibilitatii de remodelare de catre
celulele gazdei, iar natura fibroasa permite controlul structural si al
porozitatii, insa dezavantajul lor principal este se regaseste in faptul ca
telopeptidele din acesti polimeri pot genera reactii imunologice si influenta
anumite proprietati, precum rigiditatea redusa sau rata mare de degradare;
o Sintetice: cele mai utilizate: esterii (poli-α-hidroxi) saturati (PLA, PGA, PLGA, PCL);
o pot fi proiectate si modelate a.i. sa prezinte propietati chimice si fizice
specifice;
o limitate dpdv al proprietatilor de bioactivitate (biocompatibilitate, osteo-
inductie si conductivitate, etc);
o Compozite.
 IT a materialului osos

Factori de crestere:

o BMP, factori de diferentiere si

factorul de crestere si transformare
beta (TGF-β);
o Exista 5 tipuri de TGF-β, dintre
care TGF- β3 prezinta cea mai
mare influenta in stimularea
proliferarii MSC si
condrogeneza; in
o Mecanismele
interconexe. sunt complexe si