HEMATOPOIEZA

DR. CRISTINA MAMBET

 HEMATOPOIEZA
Formarea continuă de elemente figurate ale sângelui
susținută de celulele stem hematopoietice (CSH)
generate în cursul perioadei embrionare

CSH – populație celulară rară a măduvei osoase

• capacitate de autoreînnoire – menținerea nr
• capacitatea de se diferenția în toate liniile celulare
sangvine
AUTOREÎNNOIREA ȘI DIFERENȚIEREA CSH
 CSH - ORIGINE
CSH de tip adult (definitive) iau naștere în Z27-40 ale dezvoltării embrionare în
regiunea aortă-gonadă-mezonefros (AGM)

• exprimă markerii de suprafață pentru caracteristici pentru progenitorii

hematopoietici primitivi: CD34+, CD45+, Ve‐Cad+, CD43+, CD38−, negativi
pentru markerii de linie

• exprimă proto-oncogene și factori de transcripție ce controlează stadiile

inițiale ale hematopoiezei: Gata‐2+, Gata‐3+, c‐myb+, SCL/TAL1+, c ‐kit+,
flk‐1/KDR+

• pot asigura repopularea hematopoietică multilineară pe termen lung atunci

când sunt transplantate la șoareci imunodeprimați

• pot fi retransplantate, indicând astfel capacitatea lor de auto-reînnoire

• CSH din regiunea AGM prezintă o rată înaltă de replicare (la fiecare 3.5-4
săptămâni comparativ cu media de 40 săptămîni de la adult)
 CSH - ORIGINE
• S4-5: CSH generate în regiunea AGM vor migra în ficatul fetal →
expansiune masivă → L5 colonizează măduva osoasă

• Precursor comun celule hematopoietice – endoteliu vascular

• 1932 - Murray introduce termenul de hemangioblast

• 1998 - celulele mezodermale izolate din celulele stem embrionare

de șoarece diferențiate in vitro pot da naștere ambelor linii
celulare

• studiile in vivo pe embrion de șoarece nu au reușit să demonstreze

existența hemangioblastului
 CSH - ORIGINE
• Actual: endoteliu hemogenic din zona AGM

Populație endotelială specializată → CSH definitive printr-un

proces de tranziție endotelial-hematopoietică, mai degrabă
decât printr-o diviziune asimetrică

Dejana E, et al. Nat Commun. 2017

 HETEROGENITATEA CSH

• CSH de termen lung (CSH-TL, long-term HSC) asigură o repopulare a

întregului sistem hematopoietic pe o durată de minimum 16 săptămâni
într-un transplant primar și cel puțin într-un transplant secundar

• CSH de termen intermediar (CSH-TI), CSH de termen scurt (CSH-TS),

progenitorii multipotenți (PMP) au capacitatea de a produce toate tipurile
de celule diferențiate dar determină o repopulare tranzitorie în
transplantele primare (și uneori în transplantele secundare)

• Heterogenitatea în capacitatea de autoreînnoire se corelează direct cu

perioada de timp în care CSH rămân în stare dormantă (latentă)

• Majoritatea CSH sunt dormante (se divid odată la 149-193 zile)

• CSH pot fi activate reversibil sub acțiunea semnalelor de stres →

menținerea constantă a hematopoiezei (se divid odată la fiecare 28-36 zile)
 HETEROGENITATEA CSH

• CSH-TL - orientate preferențial către linia mieloidă

• CSH-TS - orientate preferențial către linia limfoidă

• CSH-TI - populație mixtă, echilibrată de CSH

• 2013: identificarea unor CSH capabile să se diferențieze

predominant pe linia megakariocitară cu producere de
trombocite

Subseturi celulare distincte în compartimentul CSH ce contribuie

în mod diferit la generarea de celule sangvine mature
 MODELUL TRADIȚIONAL AL
HEMATOPOIEZEI
▪ Model piramidal – ierarhie celulară: CSH →
progenitori multipotenți, oligopotenți și unipotenți →
diferențiere în celule sangvine mature

▪ Model bazat în principal pe sistemul de definire a

tipului celular cu ajutorul markerilor de suprafață,
furnizat de analiza de sortare a celulelor vii activate
prin fluorescență (FACS, engl., fluorescence-activated
cell sorting)
MODELUL TRADIȚIONAL AL HEMATOPOIEZEI

PMC – progenitor
mieloid comun

PLC – progenitor
limfoid comun

PGM - progenitor
granulocitic-
monocitar

PME - progenitor
megakariocitic-
eritroid
VARIANTE DE MODELE IERARHICE

PMPL

- progenitori multipotenți cu un
priming limfoid
- capacitate de diferențiere
combinată limfo-mieloidă
- și-au pierdut potențialul de a
genera liniile megakariocitară
și eritroidă
VARIANTE DE MODELE IERARHICE

subseturi distincte de PMP

orientate mieloid (PMP2 și PMP3)
ce cooperează cu PMP orientate
limfoid (PMP4) în producerea de
elemente figurate ale sângelui
VARIANTE DE MODELE IERARHICE

PME pot fi derivați direct din

CSH prin diviziune asimetrică,
fiind scurtcircuitate stadiile de
PMP și PMC
VARIANTE DE MODELE IERARHICE

caracterizarea imunofenotipică a unei

subpopulații din compartimentul CSH-TL
cu restricție în diferențiere către linia
megakariocitară (CSH-Mgk, engl.,
megakaryocyte-biased/restricted) care dă
naștere direct la megakariocite
Hematopoieza bazată pe „continuumul” de diferențiere al
CSH și progenitorilor

Celulele cu restricție în diferențiere către o singură linie iau naștere dintr-un

continuum de celule stem și progenitori hematopoietici nediferențiați, prin
activarea unor programe specifice de expresie genică
(Velten et al, Nat Cell Biol 2017)
CITOKINELE CU ROL ÎN HEMATOPOIEZĂ

▪ Familie de liganzi extracelulari ce pot stimula răspunsuri

biologice în diverse celule, prin legarea și activarea unor
receptori conservați din punct de vedere structural și funcțional

▪ Mesageri intercelulari

▪ Acțiune autocrină, paracrină sau endocrină

▪ Pleiotropism și redundanță

▪ Citokinele hematopoietice controlează producția de elemente

figurate ale sângelui atât în condiții bazale cât și ca răspuns la
factori de stres (infecții, sângerări, hipoxie)
 CITOKINELE HEMATOPOIETICE

▪ Identificate și purificate pe baza capacității acestora de a susține

formarea de colonii in vitro din celulele progenitoare

▪ Secretate de celulele stromale din măduva osoasă, limfocite,

monocite, precum și de organe non-hematopoietice (rinichi, ficat)

▪ Citokine cu acțiune la nivelul compartimentului CSH/PMP:

- Factorul celulelor stem (engl., stem cell factor, SCF, steel factor)
- Ligandul FLT-3 (engl., fms-like tyrosine kinase 3)
- Trombopoietina (TPO)
- Interleukina (IL)-3
 CITOKINELE HEMATOPOIETICE

▪ Citokine cu acțiune restrictivă asupra unor linii celulare specifice:

- Eritropoietina (EPO) la nivelul progenitorilor eritroizi

- Factorul de stimulare a coloniilor granulocitare (engl.,
granulocyte colony-stimulating factor, G-CSF) necesar pentru
diferențierea și activarea neutrofilelor
- Factorul de stimulare a coloniilor granulocitare și monocitare
(engl., granulocyte macrophage colony-stimulating factor, GM
CSF) ce favorizează producerea de granulocite și monocite)
- IL-5 cu rol central în producția de eozinofile, IL-4, IL-7 și
interferonul-γ (IFNγ) necesare limfopoiezei
 CITOKINELE HEMATOPOIETICE

▪ TPO exercită acțiuni asupra mai multor tipuri celulare:

- deține un rol major în controlul producției de megakariocite și
trombocite
- implicată în același timp în menținerea stării de latență a CSH
de tip adult

▪ EPO, G-CSF și GM-CSF sunt utilizate terapeutic pentru

stimularea producției de eritrocite și respectiv de neutrofile în
diverse citopenii congenitale sau dobândite
 ACȚIUNEA CITOKINELE HEMATOPOIETICE

2 modele

▪ instructiv: citokinele ar transmite semnale specifice CSH și PMP,

orientând astfel angajarea pe o linie de diferențiere celulară =
ROL ACTIV

▪ stocastic (selectiv): angajarea pe o linie de diferențiere

a progenitorilor hematopoietici multipotenți precum și
diferențierea celulară terminală sunt rezultatul acțiunii factorilor
de transcripție ce activează programe unice de expresie genică,
iar citokinele furnizează semnale permisive pentru creștere și
supraviețuire = ROL PERMISIV
 RECEPTORI

▪ Citokinele semnalizează prin două clase majore de receptori:

- receptorii tirozinkinazici (RTK): c-kit pentru SCF, FLT-3
pentru ligandul FLT-3,
- superfamilia de receptori pentru citokine: nu au activitate
kinazică intrinsecă, fiind asociați cu tirozinkinaze
citoplasmatice, membrii ai familiei de Janus kinaze (JAK)
pentru a asigura propagarea semnalului

▪ Receptorii pentru citokine de tip 1 (receptori homodimerici)

sunt receptorii pentru citokinele hematopoietice: EPOR, TPOR
(MPL), G-CSFR (CSF3R)
RECEPTORII HEMATOPOIETICI