03.04.

2011

VARIABILITATEA
Sursele variabilitii Mutaiile genice i consecinele lor

Variabilitatea proprietatea organismelor vii de a prezenta diferene interpopulaionale, intrapopulaionale sau intrafamiliale. Variabilitatea poate fi ereditar sau neereditar. Poate implica modificri ale materialului genetic ale fenotipului sau numai ale fenotipului.

Sursele variabilitii
Variabilitatea genotipic Mutaiile genice, cromozomiale i genomice Recombinrile genice, cromozomiale i genomice Migraiile populaionale Variabilitatea fenotipic Modificaii prin aciunea modulatoare a factorilor de mediu n limitele normei de reacie; Modificaii prin aciunea patologic a factorilor de mediu n afara normei de reacie; Anomalii prin aciunea distructiv a factorilor de mediu, teratogeni
3

Variabilitatea asigur:
Polimorfismul genetic individual; Polimorfismul fenotipic individual normal; Adaptarea organismelor n diferite condiii ale mediului selecia natural; Rspunsul diferit la aciunea unor factori de mediu (medicamente, alimente, toxine); Susceptibilitatea la anumite infecii; Predispoziia la anumite boli (cancer, diabet, hipertensiune...); Apariia diferitor stri patologice (anomalii de dezvoltare, boli genetice i boli negenetice); Evoluia speciei.
4

Modificri adaptive n limitele normei de reacie

Mutaiile
Mutaiile sunt modificri accidentale, permanente i ereditare ale materialului genetic;

Fenotipic

Modificri ontogenetice Anomalii spontane determinate de factorii de mediu Fenocopiile

Variabilitate
Recombinarea genomic

Combinativ

Recombinarea intercromozomial Recombinarea intracromozomial

Pot afecta genomul nuclear sau genomul mitocondrial;

Genotipic
Mutaional

Mutaiile genomice Mutaiile cromozomiale Mutaiile genice

5

Pot implica ntreg genomul (poliploidii i aneuploidii), un cromozom sau civa crs (aberaii cromozomiale echilibrate i neechilibrate); o gen sau o secven de nucleotide (mutaii genice, punctiforme)
6

03.04.2011

Mutaiile
Pot fi omogene n toate celulele organismului (mutaii generative) sau pot fi n mozaic, afectnd numai un grup de celule somatice (mutaii somatice);
Cauze:

Mutaii genice nucleare

Erori ale replicrii (10-10 per p.b. per diviziune) Erori de reparaie a leziunilor ADN ca rezultat a aciunii RI, RUV, SC, modificrilor BA)

Pot aprea spontan sau pot fi induse de aciunea unor factori mutageni fizici, chimici sau biologici;

Substituii nucleotidice = mutaii punctiforme Deleii sau inserii nucleotidice Mecanisme: Mutaii dinamice

Pot afecta regiunile necodante ale genomului mutaii neutre, sau pot afecta regiunile codante, producnd modificri fenotipice patologie (mutaii nefavorabile, morbide) sau modificri evaluante (mutaii favorabile).
7

Polimorfisme ADN Protein anormal cu proprieti noi, ctig sau pierdere de funcie Protein normal n cantiti anormale cu ctig sau pierdere de Consecine: funcie
8

Mutaiile punctiforme
(50% din toate mutaiile genice, se ntlnesc n majoritatea bolilor genice)

Substituii la nivelul exonilor

Codon sens
nonesens

Substituiile pot fi:

Codon STOP
codon STOP codon sens

Tranziii Transversii

AG (PuPu) TC (PyPy) AT (PuPy) AC (PuPy) GT (PuPy) GC (PuPy)

samesens

Substituiile pot interesa secvenele nucleotidice: codificatoare - exonice necodificatoare - intronice la nivelul regiunilor reglatoare

missens
9

Mecanisme: pot aprea spontan sau erori de replicare sau provocate de aciunea unor factori mutageni.

10

Substituii
Tranziii GAU
(Asp) Missens

CAU
(His) Missens

UAG
(Stop) Nonsens

UAA
(Stop) Nonsens

AAU Transversii
(Asn) Missens

UAU
(Tyr)

UAC
(Tyr) Samesens

UUU
(Phe) Missens

UGU UCU
(Ser) Missens (Cys) Missens

11

12

03.04.2011

Indivizii homozigoi recesivi Hemoglobin anomal

AT 17
Distrugerea rapid a celulelor falciforme Anemie Supraactivitatea mduvei osoase Creterea cantitii mduvei osoase

Hematii falciforme (n form de secer) Lipirea celulelor i blocarea circulaiei sanguine Acumularea celulelor falciforme n splin

Dereglri locale n alimentare sanguin Defecte cardiace Defecte n activitatea muscular Defecte n tractul gastrointestinal Defecte renale Dereglri renale Fibroza 14 splinei

Dilatarea cordului

Afectarea plmnilor Pneumonie

Dereglri cerebrale Paralizie

Diminuarea activitii mintale

13

Defecte scheletale

Dereglri cardiace

Dureri nespecifice

Consecinele substituiilor
Exonice modificri calitative ale proteinelor:
apariia unui aminoacid diferit n polipeptid; scurtarea polipeptidului; alungirea polipeptidului.

Deleiile i inseriile genice

Tipuri: Mecanisme de producere: Consecine
deleia sau inseria 1 sau mai multor nucleotide decalarea fazei de lectur (25% din mutaii, majoritatea bolilor genetice); deleia sau inseria unor fragmente genice mai mari (6%)

Intronice:
fr modificri n sinteza polipeptidului; defecte de splicing protein anormal;

Crossing-over inegal; Schimbul inegal ntre cromatidele surori.

La nivelul regiunii reglatoare modificri n cantitatea de polipeptid sintetizat:

Non-expresie; Activarea neautorizat.
15

protein anormal sau absent.

16

Mutaii cu decalarea fazei de lectur

Adiia sau deleia unei perechi de nucleotide (sau dou sau patru) din secvena codificatoare a genei poate determina schimbarea fazei de lectur n ARNm i ca rezultat modificarea polipeptidului. Aceste mutaii pot provoca stoparea prematur a translaiei, inseria incorect a unor aminoacizi n lanul polipeptidic. Ca rezultat produsul genic este defect.

Mutaii dinamice
Se caracterizeaz prin expansiunea repetrilor unor secvene trinucleotidice intragenice; Se caracterizeaz prin instabilitate n timpul diviziunilor celulare (n special n ovogenez); Pot afecta funcia genei i determina fenotipuri patologice; Penetrana mutaiilor dinamice este determinat de numrul repetiiilor:
Stri benigne polimorfizme alelice; Premutaii; Mutaii complete.

17

18

03.04.2011

Unele boli genetice sunt cauzate de expansiune secvenei trinucleotidice

Boala Localiz. Mod de transm. Microsatelit Alela normal Premutaie Mutaie complet Efect parental

Sindromul X-fragil cu retard mental ereditar

1: 4000 din brbai; 1:7000 din femei; Fenotip:
Retard mental Achiziie tardiv a limbajului Anomalii de comportament Dismorfie facial Macroorhidie pospubertar Semne generate de displazia esutului conjunctiv Matern

Sindromul X-fragil 1:4000 Distrofia muscular 1:8000 Ataxia Friedreich 1:50000 Boala Huntington 1:12000

Xq27.3

XL

CGG

<60

60-200

>200

19q13.3

AD

CTG

<30

50-80

>100

Matern

9q13

AR

GAA

<25

36-100

>100

Matern

1:500 femei este purttoare de premutaii

4p16.3

AD

CAG

<36

>36

Patern
19 20

Sindromul X-fragil

Mutaia Substituia unui nucleotid de tip tranziie (CT) n insulele CpG din gena pentru FGFR3 (4p16.3);

Consecina

Boala

Activitatea permanent, Acondroplazia chiar i n absena ligandului, a receptorului de tip 3 pentru factorul de cretere a fibroblatilor;

deleia a 3 p.n. din Pierderea Phe din poziia Fibroza gena CF n poziia 508 a proteinei CFTR (ce chistic 508 (F508del); are funcia de canal de (Mucoviscidoza) clor la polul apical a celulelor epitaliale);

21

22

mutaia

de tip missens (GACGTC) n codonul 6 al genei pentru globin (Glu6 Val);

mutaia

Substituia aminoacidului Sicklemia Glu cu Val din poziia 6 n - (Anemia globin i sinteza HbS; falciform)

mutaia

la nivelul exonului 6 a genei pentru GAL-1-P-uridil transferaza (Gln188Arg);

mutaia

Deficitul sau absena enzimei galactozo-1-fosfaturidilt ransferazei;

Galactozemia

de tip non-sens Se produce substituia Gln - talasemia n gena pentru -globin din poziia 39 cu un stop(Gln39X); codon i sinteza unei forme trunchiate de -globin;
inseria

genei PAH (peste 400 tipuri de mutaii);

deleii

Deficitul fenilalaninhidroxilazei, enzim ce transform Phe n Tyr; Modificarea structurii distrofinei - protein ce menine integritatea membranelor celulelor musculare;

Fenilcetonuria

a 4 nucleotide ntre nucleotidele 1277 i 1278 ale genei pentru HEXA (12771278insTATC);

Deficiena sau absena enzimei lizozomale hexozaminidaza A (HEXA) i acumularea gangliozidului GM2 n neuronii SNC;

Boala TaySachs (Gangliozidoza GM2)

n regiunea 59 sau zona central a genei pentru distrofin (Xp21);

Distrofia muscular Duchenne (DMD)

23

24

03.04.2011

Efectul fenotipic al mutaiilor patogene

Mutaiile sunt cauze frecvente ale bolilor sau predispoziiei la boal; Efectul fenotipic al mutaiilor depinde de:
Efectul mutaiei asupra funciei proteinei (pierdere sau ctig) Tipul i funcia proteinei (enzim, receptor, canal, protein structural...) Gradul de manifestare a fenotipului la heterozigoi; Fondul genetic al persoanei (interaciuni nealelice); % de celule afectate; Originea parental a genei n cazul bolilor de amprentare.
25

Boli cu pierdere de funcie:

FH hipercolesterolemia familial 1:500 lipsa receptorului la LDL; PKU FENILCETONURIA; BOLILE LIZOSOMALE

Boli cu ctig de funcie efect de dozaj:

Boala Charcot-Marie-Tooth degenerescen nervoas periferic; Acondrodisplazia activitate permanent a receptorului de cretere a fibroblatilor , n absena ligandului; Inversia sexual la indivizii 46,XY prin duplicaia genei DAX

Boli prin achiziia unor proprieti noi a proteinelor mutante

Alela Pittsburg a alfa1-antitripsina (care n mod normal inhib elastaza) inhib trombina tulburare de coagulare letal; Boala Alzheimer producerea unei proteine toxice prin mutaia genei pentru -ameloid

Boli prin expresia heterocronic sau ectopic:

Diferite forme de cancer; Persistena ereditar a hemoglobinei fetale
26