ASIGURAREA CALITATII

IN MICROBIOLOGIE

Conf. Dr. CARMEN PANZARU
REFERENTIAL:
Ghid pentru acreditarea laboratoarelor de
microbiologie: EA -04/10 Accreditation
for microbiological laboratories (European
Co-operation for Accreditation)

Standard romn SR EN ISO 15189
ISO Organizaia Internaional de
Standardizare (organisme internaionale
de standardizare din peste 140 ri).
ASRO (Asociaia de standardizare din
Romnia) organism naional de
standardizare recunoscut de Guvernul
Romniei (persoana juridic de drept
privat, apolitic, neguvernamental)

RENAR (Asociaia de Acreditare din
Romnia)- organism de drept privat,
neguvernamental, avnd ca obiectiv
acreditarea organismelor din infrastructura
de evaluare a conformitii
Standardizarea ansamblu de convenii
care faciliteaz schimbul de produse,
servicii i informaii utile, garantate calitativ

Tratat de microbiologie clinic, 2008,
D. Buiuc

NCCLS 2009
Personal
persoan cu experien si calificat

Opinii si interpretari ale rezultatelor:
MEDIC!!!!

Competena: monitorizat continuu
Mediu

Acces restrictionat

Construit pe principiul fr cale de
intoarcere

Separarea activitilor in timp si spatiu

Mediu
Spaii separate/zone de activitate clar
desemnate pentru:
Zone de receptie si depozitare probe

Prelucrarea probelor

Intretinerea tulpinilor de referin

Pregtirea mediilor, inclusiv sterilizarea

Marimea spatiului: in conformitate cu
reglementrile nationale in vigoare




Mediu
Echipamentul laboratorului nu ar trebui in
mod obinuit mutat intre spatii pentru a
evita contaminarea incruciat (ex
pipetele)

Aerul conditionat: filtrele trebuie inspectate
i intreinute corespunzator

Mediu
Reducerea contaminrii:
Suprafee netede ale pereilor, podelelor, tavanelor
i meselor. Faiana nu este recomandat

Imbinri concave intre podele, pereti, tavan

Jaluzele plasate la exterior

Dulapuri suspendate

In laborator nu se afla altceva decat strictul
necesar pentru activitate
Mediu
Tavane:
Suprafata neteda, cu spoturi

Daca nu este posibil:
dovezi documentate c se controleaz
riscurile poteniale
Program de curatenie
Mediu
Monitorizarea condiiilor de mediu:
Progam documentat de curenie (care ar
trebui sa tina cont de rezultatele monitorizrii
condiiilor de mediu):
Mobila
Suprafete
Echipamente
Procedura pentru rezolvarea contaminrii
accidentale

Mediu
Monitorizarea aeromicroflorei:
sptmnal in laboratorul de microbiologie

Teste de sanitaie
sptmnal in laboratorul de microbiologie
ESTIMAREA INCERTITUDINII
REPETABILITATEA

REPRODUCTIBILITATEA

Componenete individuale ale incertitudinii:
Pipetarea, cntarirea, efectele de diluare: s se
demonstreze c sunt inute sub control
Laboratoarele ar trebui s fie contiente de
incidena rezultatelor fals negative sau pozitive
Repetabilitate apropierea acordului dintre
rezultatele unor masuratori succesive ale
aceleasi marimi masurate in aceleasi
conditii de masurare

Reproductibilitate apropierea acordului
dintre rezultatele masuratorilor succesive
ale aceleasi marimi masurate in aceleasi
conditii de masurare
Echipament intreinere, etalonare
si verificarea performanei

Program documentat pentru:
Intreinerea
Calibrarea
Verificarea funcionarii echipamentelor

Ghid pentru Intretinerea laboratorului
Tipul
echipamentului
Cerine Frecvena
sugerat
a) Termostate
b) Figidere
c) Congelatoare
Curtai i dezinfectai
suprafeele interne
a) Lunar
b) Cnd este necesar
(ex la 3 luni)
c) Atunci cnd este
necesar (ex anual)
Centrifugi a) Service
b) Curire si
dezinfectare
a) Anual
b) La fiecare utilizare
Autoclave a) Sevice complet
b) Verificarea sigurantei
vasului sub presiune
a) Anual sau conform
recomandarii
producatorului
b) Anual
Tipul echipamentului Cerine Frecvena sugerat
Hota de siguran Service complet si
verificri mecanice
Anual sau conform
recomandrii
producatorului
Microscoape a) Service
b) Curire i
dezinfectare
a) Anual
b) La fiecare utilizare
pH-metre Curare electrod La fiecare utilizare
Balane a) Curire
b) Service
a) Fiecare utilizare
b) Anual
Jar pentru anaerobioz Curire/dezinfectare Dup fiecare utilizare
Echipament volumetric Decontaminare, curare
i sterilizare
La fiecare utilizare
Laborator a)Curati i dezinfectai
suprafeele de lucru,
b) Podelele
c) Celelalte suprafete

a) Zilnic
b) Saptamanal
c) La fiecare 3 luni
Ghid pentru Intreinerea laboratorului
Evitarea contaminrii incruciate datorit
echipamentului
Ideal: 2 autoclave
1 singur: program de sterilizare i curenie documentat
Indrumri privind etalonarea
Tipul echipamentului Cerinte Frecventa sugerata
Termometre de referin
(lichid)
Re-etalonare trasabil
complet
Punct unic
La fiecare 5 ani

Anual
Termometre de lucru Verificate pe baza
termometrelor de
referin
Anual
Balane Etalonare trasabil
complet
Anual
Greuti de calibrare Etalonare trasabil
complet
5 ani
Greuti de verificare Verificare pe baza
greutatii de calibrate sau
verificate, imediat dupa
etalonarea trasabila
Anual
Sticla volumetric Etalonare gravimetric Anual
Tipul echipamentului Cerinte Frecventa sugerata
Microscoape Etalonare trasabil la
micrometru (unde este
cazul)
Initial
Centrifugi Etalonare trasabil
Etalonare set de operatii care stabileste, in
anumite conditii, relatiile dintre valorile
cantitatilor indicate de instrumentul de
masurare sau sistemul de masurare sau
valorile reprezentate printr-o masurare
amaterialului sau un material de referinta
si valorile corespondente obtinute din
standarde
Indrumari privind validarea echipamentului si
verificarea performantei
Tipul echipamentului Cerinte Frecventa sugerata
Echipamente cu
temperatura controlat
(termostat, frigider,
congelator)
a. Obtinei stabilitatea
si uniformitatea
temperaturii
b. Monitorizai
temperatura
a. initial, la fiecare 2
ani i dup reparaie

a. Zilnic
Etuva a. Obtineti stabilitatea si
uniformitatea
temperaturii
b. Monitorizati
temperatura
a. initial, la fiecare 2 ani
si dup reparaie

a. Zilnic/la fiecare
utilizare
Autoclav a. Stabilii
caracterisiticile
pentru
incarcari/cicluri
b. Monitorizati
temperatura/timpul
a. initial, la fiecare 2
ani i dup reparaie

b. Zilnic/la fiecare
utilizare
Tipul echipamentului Cerinte Frecventa sugerata
Hota de siguran
microbiologic
a. Stabilii
performana
b. Monitorizare
microbiologic
c. Monitorizarea
fluxului de aer
a. Iniial, i dup
reparaie
b. Sptmnal
c. La fiecare utilizare
Cronometre Verificai in baza in
baza semnalului de
timp national
Anual
Microscoape Verificai alinierea Anual

pH-metre Ajustati utilizand cel
putin 2 soluii
tampon de calitate
adecvat
Zilnic/la fiecare utilizare
Balante verificai la zero i citind
in baza greutatilor
de verificare
Zilnic/la fiecare utilizare
Tipul echipamentului Cerinte Frecventa sugerata
Pipete Verificati acurateea i
precizia volumului
eliminat
In mod regulat (s fie luat
in calcul frecvena si
natura utilizrii)
Numrtor de colonii Verificai in baza
numarului obtinut manual
Anual
Centrifugi Verificati viteza in baza
unui tahometru
independent calibrat
Anual

Jar anaerob Verificati cu indicator
anaerobic
Fiecare utilizare
Mediul laboratorului Teste de aeromicroflor
i sanitaie
Sptmnal
Reactivi i medii de cultur
Trebuie verificat conformitatea fiecrui lot de reactivi
critici, iniial i pe parcursul perioadei de valabilitate, cu
tulpini de referinta (ex coloraia Gram)
Medii de cultur (preparate in laborator/gata preparate)
pH, sterilitate, volum
Proprieti nutritive, selective i difereniale
Inregistrri cu privire la specificatiile fabricantului: numele
mediului, suplimente, termen de valabilitate, conditii de
depozitare, certificat de calitate
Loturile de medii ar trebui s fie identificabile
Etichetare adecvat
Materiale de referinta si culturi de
referinta
Certificat de calitate: furnizeaz trasabilitatea
masuratorilor
Utilizarea tulpinilor de referinta
Tuplini de referinta recunoacute de catre
organismul de acreditare

Sub-cultivate o data

Stocuri de referinta (congelator: 6 luni)



Repicaje

Culturi de lucru: pe panta de geloza simpla,
la 4 grd C (1 2 luni)

Utilizarea de rutina
verificarea puritatii culturii si testari
biochimice

!!! Subcultivarea o data !!!



Prelevarea
Conform manualului de recolt a probelor
Transportul i depozitarea: in condiii care
s menin integritatea eantionului
Durata eantionrii ar trebui inregistrat
Procedura cu privire la calitatea si
cantitatea podusului patologic i criterii de
respingere a probei
Procedura pentru pstrarea i eliminarea
probelor
Eliminarea deeurilor contaminate
Conform cu reglementrile naionale
Autoclavarea materialului contaminat: zilnic
Predarea deeurilor firmelor specializate: max
la 48 ore

Asigurarea calitii rezultatelor/controlul
calitii performantei

Controlul intern al calitii
Procedurile desfurate in laborator in scop
diagnostic
Utilizarea de eantioane martor
Utilizarea de materiale de referin (tulpinile
de referinta)
Contraprobe

Asigurarea calitii rezultatelor/controlul
calitii performanei

Controlul extern al calitii
Programe de control extern
Exprimarea rezultatelor
Rezultat calitativ
absent pentru o unitate definit
Rezultat cantitativ
mai putin decat limita de detecie pentru unitatea
definit
prezent/absent in cantitatea sau volumul definit