ASIGURAREA CALITATII

IN MICROBIOLOGIE
Conf. Dr. CARMEN PANZARU

REFERENTIAL:
Ghid pentru acreditarea laboratoarelor de
microbiologie: EA -04/10 Accreditation
for microbiological laboratories (European
Co-operation for Accreditation)
Standard romn SR EN ISO 15189
ISO Organizaia Internaional de
Standardizare (organisme internaionale
de standardizare din peste 140 ri).

ASRO (Asociaia de standardizare din

Romnia) organism naional de
standardizare recunoscut de Guvernul
Romniei (persoana juridic de drept privat,
apolitic, neguvernamental)
RENAR (Asociaia de Acreditare din
Romnia)- organism de drept privat,
neguvernamental, avnd ca obiectiv
acreditarea organismelor din infrastructura
de evaluare a conformitii

Standardizarea ansamblu de convenii

care faciliteaz schimbul de produse,
servicii i informaii utile, garantate calitativ
Tratat de microbiologie clinic, 2009,
D. Buiuc
CLSI 2011

Personal
persoan cu experien si calificat
Opinii si interpretari ale rezultatelor:
MEDIC!!!!
Competena: monitorizat continuu

Mediu
Acces restrictionat
Construit pe principiul fr cale de
intoarcere
Separarea activitilor in timp si spatiu

Mediu
Spaii separate/zone de activitate clar
desemnate pentru:
Zone de receptie si depozitare probe
Prelucrarea probelor
Intretinerea tulpinilor de referin
Pregtirea mediilor, inclusiv sterilizarea
Marimea spatiului: in conformitate cu
reglementrile nationale in vigoare

Mediu
Echipamentul laboratorului nu ar trebui in
mod obinuit mutat intre spatii pentru a
evita contaminarea incruciat (ex
pipetele)
Aerul conditionat: filtrele trebuie inspectate
i intreinute corespunzator

Mediu
Reducerea contaminrii:
Suprafee netede ale pereilor, podelelor, tavanelor
i meselor. Faiana nu este recomandat
Imbinri concave intre podele, pereti, tavan
Jaluzele plasate la exterior
Dulapuri suspendate
In laborator nu se afla altceva decat strictul
necesar pentru activitate

Mediu
Tavane:
Suprafata neteda, cu spoturi
Daca nu este posibil:
dovezi documentate c se controleaz
riscurile poteniale
Program de curatenie

Mediu
Monitorizarea condiiilor de mediu:
Progam documentat de curenie (care ar
trebui sa tina cont de rezultatele monitorizrii
condiiilor de mediu):

Mobila
Suprafete
Echipamente
Procedura pentru rezolvarea contaminrii
accidentale

Mediu
Monitorizarea aeromicroflorei:
sptmnal in laboratorul de microbiologie

Teste de sanitaie
sptmnal in laboratorul de microbiologie

ESTIMAREA INCERTITUDINII
REPETABILITATEA
REPRODUCTIBILITATEA
Componenete individuale ale incertitudinii:
Pipetarea, cntarirea, efectele de diluare: s se
demonstreze c sunt inute sub control
Laboratoarele ar trebui s fie contiente de
incidena rezultatelor fals negative sau pozitive

Repetabilitate apropierea acordului dintre

rezultatele unor masuratori succesive ale
aceleasi marimi masurate in aceleasi
conditii de masurare
Reproductibilitate apropierea acordului
dintre rezultatele masuratorilor succesive
ale aceleasi marimi masurate in aceleasi
conditii de masurare

Echipament intreinere, etalonare

si verificarea performanei
Program documentat pentru:
Intreinerea
Calibrarea
Verificarea funcionarii echipamentelor

Ghid pentru Intretinerea laboratorului

Tipul
echipamentului

Cerine

Frecvena
sugerat

a)
b)
c)

Curtai i dezinfectai
suprafeele interne

a)
b)

Termostate
Figidere
Congelatoare

c)

Lunar
Cnd este necesar
(ex la 3 luni)
Atunci cnd este
necesar (ex anual)

Centrifugi

a) Service
b) Curire si
dezinfectare

a)
b)

Anual
La fiecare utilizare

Autoclave

a) Sevice complet
b) Verificarea sigurantei
vasului sub presiune

a)

Anual sau conform

recomandarii
producatorului
Anual

b)

Tipul echipamentului

Cerine

Frecvena sugerat

Hota de siguran

Service complet si
verificri mecanice

Anual sau conform

recomandrii
producatorului

Microscoape

a) Service
b) Curire i
dezinfectare

a)
b)

pH-metre

Curare electrod

La fiecare utilizare

Balane

a)
b)

a)
b)

Jar pentru anaerobioz

Curire/dezinfectare

Echipament volumetric

Decontaminare, curare La fiecare utilizare

i sterilizare

Laborator

a)Curati i dezinfectai a)
suprafeele de lucru, b)
b) Podelele
c)
c) Celelalte suprafete

Curire
Service

Anual
La fiecare utilizare

Fiecare utilizare
Anual

Dup fiecare utilizare

Zilnic
Saptamanal
La fiecare 3 luni

Ghid pentru Intreinerea laboratorului

Evitarea contaminrii incruciate datorit
echipamentului
Ideal: 2 autoclave
1 singur: program de sterilizare i curenie documentat

Indrumri privind etalonarea

Tipul echipamentului

Cerinte

Frecventa sugerata

Termometre de referin
(lichid)

Re-etalonare trasabil
complet
Punct unic

La fiecare 5 ani

Termometre de lucru

Verificate pe baza
termometrelor de
referin

Anual

Balane

Etalonare trasabil
complet

Anual

Greuti de calibrare

Etalonare trasabil
complet

5 ani

Greuti de verificare

Verificare pe baza
Anual
greutatii de calibrate sau
verificate, imediat dupa
etalonarea trasabila

Sticla volumetric

Etalonare gravimetric

Anual

Anual

Tipul echipamentului Cerinte

Frecventa sugerata

Microscoape

Etalonare trasabil la Initial

micrometru (unde este
cazul)

Centrifugi

Etalonare trasabil

Etalonare set de operatii care stabileste, in

anumite conditii, relatiile dintre valorile
cantitatilor indicate de instrumentul de
masurare sau sistemul de masurare sau
valorile reprezentate printr-o masurare
amaterialului sau un material de referinta
si valorile corespondente obtinute din
standarde

Indrumari privind validarea echipamentului si

verificarea performantei
Tipul echipamentului

Cerinte

Frecventa sugerata

Echipamente cu
temperatura controlat
(termostat, frigider,
congelator)

a.

a.

initial, la fiecare 2
ani i dup reparaie

b.

Zilnic

Etuva

a. Obtineti stabilitatea si
uniformitatea
temperaturii
b. Monitorizati
temperatura

a. initial, la fiecare 2 ani

si dup reparaie

a.

a.

Autoclav

b.

b.

Obtinei stabilitatea
si uniformitatea
temperaturii
Monitorizai
temperatura

Stabilii
caracterisiticile
pentru
incarcari/cicluri
Monitorizati
temperatura/timpul

b. Zilnic/la fiecare
utilizare
initial, la fiecare 2
ani i dup reparaie

b. Zilnic/la fiecare
utilizare

Tipul echipamentului

Cerinte

Frecventa sugerata

Hota de siguran
microbiologic

a.

a.

b.
c.

Stabilii
performana
Monitorizare
microbiologic
Monitorizarea
fluxului de aer

b.
c.

Iniial, i dup
reparaie
Sptmnal
La fiecare utilizare

Cronometre

Verificai in baza in
baza semnalului de
timp national

Anual

Microscoape

Verificai alinierea

Anual

pH-metre

Ajustati utilizand cel

putin 2 soluii
tampon de calitate
adecvat

Zilnic/la fiecare utilizare

Balante

verificai la zero i citind Zilnic/la fiecare utilizare

in baza greutatilor
de verificare

Tipul echipamentului

Cerinte

Frecventa sugerata

Pipete

Verificati acurateea i
precizia volumului
eliminat

In mod regulat (s fie

luat in calcul
frecvena si natura
utilizrii)

Numrtor de colonii

Verificai in baza
Anual
numarului obtinut manual

Centrifugi

Verificati viteza in baza

Anual
unui tahometru
independent calibrat

Jar anaerob

Verificati cu indicator
anaerobic

Fiecare utilizare

Mediul laboratorului

Teste de aeromicroflor
i sanitaie

Sptmnal

Reactivi i medii de cultur

Trebuie verificat conformitatea fiecrui lot de reactivi
critici, iniial i pe parcursul perioadei de valabilitate, cu
tulpini de referinta (ex coloraia Gram)
Medii de cultur (preparate in laborator/gata preparate)
pH, sterilitate, volum
Proprieti nutritive, selective i difereniale
Inregistrri cu privire la specificatiile fabricantului: numele
mediului, suplimente, termen de valabilitate, conditii de
depozitare, certificat de calitate
Loturile de medii ar trebui s fie identificabile
Etichetare adecvat

Materiale de referinta si culturi de

referinta
Certificat de calitate: furnizeaz trasabilitatea
masuratorilor
Utilizarea tulpinilor de referinta
Tuplini de referinta recunoacute de catre
organismul de acreditare
Sub-cultivate o data
Stocuri de referinta

Repicaje
Culturi de lucru: pe panta de geloza simpla,
la 4 grd C
Utilizarea de rutina
verificarea puritatii culturii si testari
biochimice
!!! Subcultivarea o data !!!

Prelevarea
Conform manualului de recolt a probelor
Transportul i depozitarea: in condiii care
s menin integritatea eantionului
Durata eantionrii ar trebui inregistrat
Procedura cu privire la calitatea si
cantitatea podusului patologic i criterii de
respingere a probei
Procedura pentru pstrarea i eliminarea
probelor

Eliminarea deeurilor contaminate

Conform cu reglementrile naionale
Autoclavarea materialului contaminat: zilnic
Predarea deeurilor firmelor specializate: max
la 48 ore

Asigurarea calitii rezultatelor/controlul

calitii performantei
Controlul intern al calitii
Procedurile desfurate in laborator in scop
diagnostic
Utilizarea de eantioane martor
Utilizarea de materiale de referin (tulpinile
de referinta)
Contraprobe

Asigurarea calitii rezultatelor/controlul

calitii performanei
Controlul extern al calitii
Programe de control extern

Exprimarea rezultatelor
Rezultat calitativ
absent pentru o unitate definit

Rezultat cantitativ
mai putin decat limita de detecie pentru unitatea
definit
prezent/absent in cantitatea sau volumul definit

Diagnosticul microbiologic al infeciilor

tractusului respirator superior (ITRS)
Condiia microbiologic a TRS
Entiti nosologice
Spectru etiologic
Medii de cultur utilizate
Microorganisme identificate
Stabilirea semnificaiei clinice a izolatelor
Formularea corect a rezultatului