2/15/2010

IMUNIZAREA ARTIFICIAL

IMUNOTERAPIA I
IMUNOPROFILAXIA BOLILOR
INFECIOASE

Formele imunizrii artificiale:

- Imunizare activ prin administrarea n organism a unor
Ag microbiene (vaccinuri)
- Imunizare pasiv bazat pe ntroducerea n organism a
unor preparate ce conin Ac specifici
Imunoprofilaxia o metod specific de prevenire
colectiv sau individual a maladiilor infecioase, ce are la
baz crearea imunitii artificiale specifice.
Imunoterapia metode specifice de tratament prin
intermediul vaccinurilor, serurilor imune, etc.

Primul vaccin 1885 (contra rabiei, Louis

Pasteur)
In prezent milioane de vieti salvate anual
gratie vaccinarii contra 6 maladii ale copiilor
(difterie, tetanos neonatal, tuse convulsiva,
tuberculoza, rujeola, poliomielita). Aceste
vaccinuri sunt administrate la 80% copii din
toata lumea.
Variola maladie eradicata in 1970, dupa 10
ani de la lansarea de OMS a campaniei
mondiale de vaccinare.
Urmatoarea maladie poliomielita

Prevenirea maladiilor infecioase depinde de

controlul (sau eliminarea) sursei de infecie
(aceasta prevede ntreruperea lanului de
transmitere) i ridicarea rezistenei
individuale (utilizarea apei potabile,
alimentaie sntoas, respectarea igienei
personale, etc.).
Cea mai eficace strategie imunizarea
artificial.

Vaccinurile sunt produse biologice cu

proprieti de imunogen, constituite din
microorganisme vii sau omorte, din
componentele lor sau din toxine modificate.
Fiind administrate la om sau animale induc o
imunitate artificial activ IAA - (umoral,
celular, mixt) fr s provoace efecte nocive.
Imunitatea postvaccinal (IAA) se instaureaz
relativ lent, la 15-20 zile de la ultima inoculare,
i dureaz timp variabil (luni-ani-toat viaa).

Dar maladiile infectioase raman un mare

pericol anual 13 mln de decesuri.
Nu exista (este imposibil de obinut) vaccinuri
contra tuturor agentilor patogeni
Aparitia mi/o noi, modificarea continua a mi/o
(HIV, HCV, virusul gripal)
O directie noua elaborarea vaccinurilor
contra cancerului.

2/15/2010

Vaccinarea primar (de baz) confer organismului

memorie imunologic. Vaccinrile de rapel
(revaccinarea) se utilizeaz pentru stimularea unui
rspuns imun secundar, mai rapid si mai intens
Calitile unui vaccin ideal:
- Imunogenitate nalt
- Lipsit de efecte secundare
- Uor disponibil
- Stabil
- Ieftin
- Simplu la administrare i eficace (s creeze imunitate
stabil de lung durat)

1.
2.

1.
2.
3.
4.
5.
6.

Clasificarea vaccinurilor
T R A D I I O N A L E (clasice)
Corpusculare (vii atenuate, inactivate)
Subunitare (vaccinuri chimice, anatoxinele)
DE PERSPECTIV
Sintetice
Ribosomale
Anti-adezive
Recombinante
Vaccinuri hibride
Vaccinuri nucleotidice

C. Atenuarea dirijat a virulenei prin:

- Factori fizici (cultivarea la t neadecvate vaccinul antiantrax (42 C), vaccinul anti-pestos (16 C))
- Cultivarea n prezena unor compui chimici nefavorabili
(ex.: BCG obinut de Calmette i Guerin prin cultivarea
tulpinii de Mycobacterium bovis timp de 13 ani pe medii cu
bil)
- Prin factori biologici pasaje multiple pe animale sau pe
culturi celulare (Pasteur a efectuat 133 pasaje a suspensiei
de creier de la cine turbat intracerebral iepurilor,
obinnd un virus atenuat)
- Prin inginerie genetica (inactivarea genelor de patogenitate mutaii la nivelul genelor de patogenitate)

Eficiena vaccinrii depinde de:

Calitile imunogene ale vaccinului
Durata persistenei vaccinului n organism
Capacitatea organismului vaccinat de a
elabora rspuns imun eficient

Vaccinurile vii atenuate reprezint tulpini de bacterii

sau virusuri vii cu virulena redus, dar cu capacitate
imunogen pstrat.
Cile de obinere
A. Selecia tulpinilor naturale cu virulena redus
- Vaccinul E (contra tifosului exantematic)
- Vaccinul EV (antipestos)
- Vaccinul Brucella N19 (antibrucelos)
B. Utilizarea mi/o nrudite genetic, avirulente pentru
specia uman
(ex.: virusul vacciniei utilizat n profilaxia variolei)

Alte vaccinuri vii atenuate: anti-tularemic, antipoliomielitic, anti-gripal, anti-rujeolos, antirubeolic, anti-parotidit epidemic, etc.
Avantajele vaccinurilor vii:
- Imunogenitate nalt, o inoculare unic induce
imunitate solid i de lung durat
- Se administreaz pe cale natural (intranazal,
per os, percutan, etc)
- Induce imunitate local i general

2/15/2010

Dezavantaje:
- Pot provoca complicaii postvaccinale
(accidente alergice, efect teratogen)
- Revenirea la forma virulent cu riscul bolii
infecioase induse (ex.: poliomielit paralitic,
etc)
- Pericol de inducere a maladiei la persoane cu
imunodeficiene (BCG-ita, etc)
- Multiple contraindicaii
- Durat de pstrare limitat

Autovaccinul este un vaccin inactivat preparat

din tulpina microbian izolat de la un bolnav
i inoculat aceluiai bolnav pentru stimularea
imunitii specifice.
Autovaccinul este indicat pacienilor care
sufer de procese cronice: stafilodermii,
streptodermii, candidoze, dizenterie cronica,
etc
Obinerea vaccinurilor inactivate i a
autovaccinului n Ghidul practic

Vaccinurile subunitare (acelulare, chimice)

constau din componente antigenice majore,
capabile s induc un rspuns imun protector,
extrase prin diferite metode din celulele
bacteriene (digestie enzimatic, hidroliz cu
acidul tricloracetic, etc)
Ex.: vaccinul anti-pneumococic, antimeningococic, anti-hemofilus (conin
polizaharide capsulare), etc.

Vaccinurile inactivate (omorte) constau din

culturi bacteriene sau virale nalt virulente
inactivate prin cldur (60 C 1 or), prin
ageni chimici (formaldehid, fenol, aceton),
radiaii, ultrasunet, etc.
Exemple de vaccinuri inactivate: anti-tifoidic, antidizenteric, anti-choleric, anti-pertusic, antistafilococic, anti-gripal, anti-poliomielitic, etc.

Avantajele vaccinurilor inactivate:

Exclud riscul infeciei post-vaccinale
Stabile la pstrare
Dezavantaje:
Imunogenitate redus (sunt necesare inoculri
repetate)
Durat limitat a imunitii 6 12 luni
Eficacitate variabil
Necesitatea unei concentraii mari de Ag
Administrarea prin injecii (stimuleaz slab sau deloc
imunitatea local)

Anatoxinele sunt vaccinuri subunitare obinute din

exotoxine bacteriene.
Etapele de obinere a anatoxinelor
1. Cultivarea tulpinii toxigene n mediu lichid
2. Separarea exotoxinei prin filtrare
3. Tratarea cu formol 0,3-0,4 % timp de 3-4 sptmni la
39-40 C. Toxinele pierd toxicitatea, dar i pstreaz
capacitatea imunogen
4. Purificarea anatoxinei (salinizare cu sruri de amoniu,
precipitare cu alcool...)
5. Concentrarea
6. Determinarea puterii anatoxinei n RN (floculare) cu
seruri antitoxice specifice

2/15/2010

Anatoxinele se utilizeaz n profilaxia specific

a infeciilor cauzate de mi/o toxigene
stimulnd producerea antitoxinelor.
Exemple de anatoxine: difteric, tetanic,
gangrenoas, botulinic, holeric,
stafilococic, etc.
Avantajele vaccinurilor subunitare:
sunt lipsite de efecte secundare
- stabilitate la pstrare
Dezavantaje imunogenitate redus,
necesitatea inoculrilor repetate

I.

II.

Pentru sporirea imunogenitii vaccinurilor inactivate

i subunitare se utilizeaz substane speciale adjuvani.
Adjuvanii minerali (hidroxidul de Al, fosfatul de Ca,
emulsii uleioase) genereaz o reacie inflamatoare
care reine eliminarea Ag i favorizeaz prezentarea
lui limfocitelor T
Adjuvanii biologici (unele bacterii: Bordetella
pertussis, Corynebacterium parvum, Mycobacterium
tuberculosis, sau componente bacteriene ex.
ribosomi bacterieni ) induc expresia moleculelor de
co-stimulare pe suprafata CPA, stimuland aceste
celule sa secrete citokine care vor activa limfocitele T.

Strategii vaccinale noi

(vaccinuri de perspectiv)
I.
Vaccinuri sintetice: se obin prin sinteza polipeptidelor
ce reprezint epitopii liniari (ex.: toxina choleric, virusul
poliomielitic). Sunt lipsite de efecte secundare.
Dezavantaje: dificil de identificat epitopii,
imunogenitate foarte redus.
II.
Vaccinuri ribosomale (Ag adsorbite pe ribosomi din
tulpina de Mycobacterium bovis din vaccinul BCG)
III. Vaccinuri anti-adezive (din fimbrii sau mucopolizaharide
de adeziune). Administrate pe mucoase stimuleaz
imunitatea local (sIg A)
Ex.: vaccinul antidizenteric, antipertusic

IV. Vaccinuri recombinante (vaccinuri moleculare, subunitare): gene ce codific polipeptide imunogene sunt
integrate prin intermediul unor vectori (plasmide, fagi
moderai) n cromosomul unor levuri, bacterii sau celule
animale, care vor produce polipeptidul vaccinant (ex.:
vaccinul anti-hepatit B, anti-gripal)
V. Vaccinuri constituite din vectori infecioi recombinani
(vaccinuri hibride). Se obin prin inseria unor gene ce
codific Ag vaccinante (epitopi) n genomul unui vector
viral sau bacterian, care ulterior se inoculeaz la
persoanele imunizate.

2/15/2010

Vectorii nu sunt patogeni, dar sunt capabili s se multiplice

un timp ndelungat n organism, inducnd un rspuns
imun mixt (umoral si celular) contra produsului genei
inserate i contra vectorului.
Ex.: vaccinuri contra hepatitei B, rujeolei, infeciei herpetice
tip1 (vectori virusul vacciniei, adenovirusuri).
Sunt n studiu vaccinurile contra hepatitei B i tetanosului,
n calitate de vectori servind salmonele (S.Typhimurium,
S.Typhi), vaccinul recombinant HIV-rujeola, HIV-BCG,
vaccinuri anticancer.

O varianta a vaccinurilor hibride reprezint

utilizarea anvelopelor virale vide (goale) sau a
anatoxinelor pentru delivrarea Ag straine si
prezentarea lor celulelor imunocompetente
(sisteme de delivrare si prezentare a
antigenelor). Aceste sisteme nu se multiplica in
organism (vectori ne-replicativi), fiind inofensivi
si in acelasi timp foarte imunogeni.

VI. Imunizarea genetic, bazat pe utilizarea ADN microbian

(vaccinuri nucleotidice).
Consta in imunizarea persoanelor cu ADN ce codeaza un Ag
microbian inserat intr-o plasmida bacteriana. Plasmida este
captata de CPA ale gazdei si Ag este produs in interiorul CPA
cu stimularea ulterioara a limf T si inducerea imunitatii
celulare.
Gena ce codific Ag vaccinant este introdusa n unele celule ale
organismului (ex.: celule musculare). Administrarea se face
i/m sau prin bombardarea cu particule a tegumentului. ADN
patrunde in celula musculara care va sintetiza ulterior Ag. Se
induce un rspuns imun umoral i celular puternic si de lunga
durata.
Se afl n testare vaccinuri contra HIV i gripei, contra hepatitei
B.
Avantaje: ieftine, eficace, lipsite de riscuri post-vaccinale
Temeri: mutaii oncogene, rspuns imun anti-ADN

n funcie de nr Ag din componena unui vaccin

se disting:
- Vaccinuri monovalente (anatoxina botulinic A,
sau B, sau C...)
- Vaccinuri polivalente (anatoxina botulinic
polivalent ABCDEF)
- Vaccinuri complexe, compuse din Ag provenite
din specii microbiene diferite (DT, DTP, TABTe)
- Vaccinuri adsorbite (deponente, conjugate) au
Ag fixate pe adjuvani (AD, ADT, ADTP, etc)

Indicaiile vaccinrilor
Vaccinri generale, conform calendarului de
vaccinri (in Caietul pentru lucrari de
laborator). Sunt specifice pentru fiecare ar i
sunt obligatorii.
Vaccinri selective (contingente de risc, situaie
epidemic, etc)
Vaccinurile sunt utilizate cu scop de
imunoprofilaxie, uneori pentru terapia
infeciilor cronice (bruceloz, dizenterie,
gonoree, stafilo-, streptodermii)

Imunizarea artificial pasiv se realizeaz cu

preparate biologice ce conin Ac (seruri
imune, Ig, gamma-globuline, etc), utilizate cu
scop de seroterapie sau seroprofilaxie.
Imunitatea artificial pasiv se instaleaz
imediat dup administrarea preparatului, fiind
limitat n timp (max. 3 sptmni).
Din momentul n care Ac exogeni sunt
eliminai, organismul redevine receptiv la
infecie.

2/15/2010

Serurile imune sunt preparate biologice ce

conin Ac specifici fa de diferii ageni
patogeni i produse ale acestora.
Dup provenien exist:
1. Seruri imune omologe
- De la convalesceni
- De la voluntari imunizai activ (seruri
hiperimune, specifice)
- Din sngele donatorilor i snge placentar
(seruri standarde, normale)

2. Seruri imune heterologe, obinute prin

hiperimunizarea animalelor (cai, cmile, lame)
Avantaje: titru dozat de Ac, lipsa pericolului de
infectare cu HIV, virusuri hepatice, etc
Dezavantaje:
- Sunt eliminate mai rapid (aprox. 7 zile)
- Coninnd proteine strine, produc
sensibilizarea organismului

Serurile imune native conin pe lng Ig i alte

proteine ale sngelui (albumine) responsabile
de reacii alergice.
Serurile imune purificate i concentrate sunt
lipsite de albumine, care sunt eliminate prin
procedee speciale (precipitare cu sulfat de
amoniu, prin digestie enzimatic,
electroforez)

Avantajele serurilor omologe:

- Nu provoac sensibilizarea organismului
- Asigur o protecie de durat maxim (aprox. 30
zile)
Dezavantaje:
- Pericolul transmiterii virusurilor hepatice, HIV,
etc
- Titruri variabile de Ac
- Volum limitat

Dup modul de aciune se disting:

1. Seruri antibacteriene (anti-meningococic, anti-antrax),
ridic sensibilitatea bacteriilor la aciunea fagocitelor i
complementului. Se dozeaz n ml (seruri netitrate)
2. Seruri antivirale (ex.: ser anti-rabic). Neutralizeaz
infeciozitatea virusurilor.
3. Seruri antitoxice (anti-difteric, anti-tetanic, antibotulinic, etc). Neutralizeaz exotoxinele bacteriene
(blocheaz fixarea de receptorii celulari). Activitatea lor
este apreciat prin titrare i msurat n UA (UI).
4. Seruri mixte (ex.: antigangrenos)

Imunoglobulinele (gamma-globulinele). Se obin din

seruri omologe rafinate prin procedee care extrag
numai gamma-globulinele i realizeaz o concentraie a
Ig de 15-20 ori fa de serul nativ.
- Ig normale sunt extrase din amestecuri de plasm de la
sute-mii de donatori sau snge placentar. Se utilizeaz
n seroprofilaxia rujeolei, hepatitei A i n terapia
pacienilor cu deficit umoral primar.
- Ig hiperimune (specifice) se obin din seruri de
convalesceni sau ale persoanelor imunizate (Ig antiantrax, Ig anti-leptospirozic)

2/15/2010

Cile de administrare intramuscular,

intravenos.
Modul de administrare
- Serurile imune omologe, Ig se administreaz n
doz unic fr precauii
- Serurile heterologe, administrate parenteral,
pot provoca reacii adverse (reacii
anafilactice, boala serului, febr). Cauza:
albuminele se comport ca un alergen.

Dac testul este negativ (peste 20-30 minute

reacie local pn la 9 mm) se ntroduce
subcutan a doua doz de 0,1-0,5 ml de ser
nediluat. Peste 30-60 minute n lipsa reaciei
se recurge la ntroducerea ntregii doze
curative.
Dac testul este pozitiv (reacie local peste
10 mm) exist pericolul reaciilor alergice.

Combaterea reaciilor serice:

1. Utilizarea serurilor imune purificate i
concentrate
2. Utilizarea Ig (gamma-globulinelor)
3. Anamneza pentru recunoaterea unei
eventuale stri de sensibilizare
4. Efectuarea testrii pentru depistarea
sensibilitii la serul heterolog. n acest scop
se utilizeaz testul intradermic cu 0,1 ml din
diluia 1:100 a serului prescris.

n acest caz se recurge la metoda de desensibilizare

acut, propus de Besredca. Ea const n
administrarea repetat, la interval de 20 min., a
dozelor crescnde din serul respectiv, la nceput
diluat 1:100 subcutan, trecndu-se treptat la ser
nediluat intramuscular.
Mecanismul: la ntroducerea dozelor mici de ser se
evit acumularea cantitilor mari de substane
biologic-active (histamin, serotonin,
bradikinin, etc), responsabile de declanarea
anafilaxiei.

n caz de necesitate administrarea serului va fi

nsoit de administrarea preparatelor antihistaminice sau serul va fi administrat sub narcoz
(scoaterea din funcie a scoarei cerebrale).
Cerinele fa de preparatele biologice ce conin Ac:
- Sterilitate
- Inofensivitate
- Apirogenitate
- Aviditate nalt
- Activitate de lung durat