Diagnostic in infectia VHC

Diagnosticul infeciei VHC

TESTE EXEMPLE APLICATII COMENTARII

SEROLOGICE ELISA de Nu pot ELISA-sensibilitate

detectie Ac anti diferenia mare, n populaii cu risc
VHC ntre o sczut de infecie are
infecie acut, valoare predictiv mic
RIBA / Western cronic sau
Blot
vindecat
MOLECULARE TESTE Diagnosticul Detecia timpurie a infectiei
CALITATIVE infectiei active O singur determinare
RT-PCR negativ-neconcludent

TESTE Aprecierea Nu exclude diagnosticul

CANTITATIVE rezultatelor infeciei
-Rt-PCR terapiei
-b-DNA
TESTE DE Secveniere Genotipuri Apreciaz durata
GENOTIPARE nucleotidic, Subtipuri tratamentului i prognosticul
RFLP, LiPA Qvasispecii rspunsului virusologic
Patternul serologic al infectiei VHC acute
cu vindecare
anti-
HCV
Ac anti VHC
Symptoms +/-

HCV RNA

ALT
ALT

Normal
0 1 2 3 4 5 6 1 2 3 4
Months Years
Time after Exposure
 Patternul serologic al infectiei VHC
care cronicizeaza
anti-
HCVVHC
Ac anti
Symptoms +/-

HCV RNA

ALT
ALT

Normal
0 1 2 3 4 5 6 1 2 3 4
Months Years
Time after Exposure
 Diagnosticul infeciei VHC
TESTE EXEMPLE APLICATII COMENTARII

SEROLOGICE ELISA Nu pot diferenia ntre o ELISA-sensibilitate mare, n

RIBA / Western Blot infecie acut, cronic populaii cu risc sczut de
sau vindecat infecie are valoare predictiv
mic
MOLECULARE TESTE Diagnosticul Detecia timpurie a
CALITATIVE infectiei active infectiei
RT-PCR O singur determinare
negativ-neconcludent

TESTE Aprecierea Nu exclude diagnosticul

CANTITATIVE rezultatelor infeciei
-RT-PCR terapiei (RVS-
-b-DNA rspunsul
virusologic
sustinut
TESTE DE Secveniere Genotipuri Apreciaz durata
GENOTIPARE nucleotidic, Subtipuri tratamentului i
RFLP, LiPA Qvasispecii prognosticul
Anti-HCV / HCV RNA Interpretare clinic
Anti-HCV negativ, HCV-RNA Absena infeciei VHC
negativ
Anti-HCV pozitiv, HCV-RNA Infecie VHC acut sau cronic
pozitiv (activ)
Infecie acut recent n care nu
a avut loc nc seroconversia
Anti-HCV negativ, HCV-RNA Infecie cronic la un pacient
pozitiv imunosupresat

Anti-HCV pozitiv + HCV RNA negativ

Infecie vindecat
Viremie cu nivel redus sau fluctuant, intermitent negativ
 Succesul terapeutic in hepatita cronica C
Raspunsul virusologic sustinut (RVS)
8
7 IFN+RBV
ARN VHC (UI/mL)

Recadere in timpul tratamentului

6 Nonresponderi
5 Recadere dupa
oprirea tratamentului
4
scadere 2 log
3
2 RVR EVR EoT
Limita de
1 detectie RVS
0
-6 0 6 4 12 36 42 48 54 60 66 72 78
TRATAMENT
Timp (saptamani)
Genotipare VHC LiPA

Distributia genotipurilor VHC pe glob, OMS 2009

LiPA
Line Probe Assay
genotipare

Hibridizare cu sonde
moleculare cu
specificitate pentru
regiuni conservate
din cadrul
genotipurilor si
subtipurilor
evidentierea profilului
specific unui
genotip prezent in
ampliconii din
5NTR si core.
Diagnostic
V.H.A.
 EVOLUTIA MARKERI DE INFECTIE VHA
HEPATITA A NU CRONICIZEAZA!!
simptomatologie
ALT IgG

IgM
Viremie

Infectie
VHA in MF

0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13
saptamana
Diagnostic hepatita acuta A = detectie Ac anti VHA IgM (ELISA de captura)
Ac anti VHA IgG = vindecare sau vaccinare
ELISA de detectie anticorpi de clasa IgM
ELISA de captura
ETAPE

1. Incubare ser pacient 1h la 37C

2. Spalare
Ag marcat
enzimatic = 3. Incubare conjugat 30 min la 37C
conjugat
4. Spalare
IgM
5. Incubare substrat 20 min la t. camerei

Anti-IgM 6. Citire la spectrofotometru DO, CO

Utilizarea metodelor moleculare in
infectiile virale:
HIV, hepatite, papilomavirusuri
infectia HIV
infectia VHB
Monitorizarea evolutiei naturale /sub tratament a hepatitei virale B
Initierea tratamentului pt hepatita cronica B

infectia VHC
Diagnosticul infectiei active + Aprecierea rezultatelor terapiei
GENOTIPARE - apreciaz durata tratamentului i prognosticul

infectia HPV
Detectia ADN HPV (PCR)
GENOTIPARE genotipuri high risk si low risk