INDRUMAR HEMATOLOGIE APLICATIE LASERCYTE ANALIZOR HEMATOLOGIE

5 diff

Forma:disc biconcav cu o zona centrala palida

Morfologia hematiilor
Dimensiune: 6 -7microni
HEMATII CAINE
Grosime mai putin de 2 microni

MCV: 50fl la 75 fl

Durata de viata: 100- 120 zile

STIATI CA:

EXISTA APROXIMATIV 350.000.000 DE HEMATII INTR-O SINGURA

PICATURA DE SANGE
LA CAINE, FIECARE HEMATIE TRAIESTE APROAPE 4 LUNI
TIMPUL DE VIATA A NEUTROFILELOR (HALF-LIFE) ESTE DE 6 ORE
EXISTA INTRE 500-1000 DE HEMATII PENTRU FIECARE CELULA ALBA
O CELULA ALBA ESTE DUBLA CA DIMENSIUNE FATA DE HEMATII
CAND SUNT IMATURE HEMATIILE SUNT MARI, NUCLEATE APOI DEVIN MAI
MICI SI ISI PIERD NUCLEII LA MATURITATE

HEMATII PISICA

Forma:Disc biconcav cu o zona centrala palida

Dimensiune:5-6microni

Grosime: mai putin de 2 microni

MCV:40fl- 55fl

Timp de viata : 60-70 zile

Indicator general de sanatate

Pentru a vedea starea generala de sanatate a unui pacient,examenul hematologic trebuie sa fie
considerat unul de rutina.Acest examen ne da informatii despre cauzele unei stari de oboseala
nejustificata de exemplu.
Deobicei pacientii cu hemoragii,boli cronice,sau alte tulburari de hemoliza vor avea un numar
de hematii redus.Cand exista o hemoragie, organismul inceara sa mentina presiunea arteriala
prin redistribuirea fluidelor,ceea ce va scadea concentratia relativa a hematiilor(exceptie de la
aceasta situatie ste pierderea brusca de sange).Foarte rar se intampla ca pacientii sa prezinte
policitemie - cresterea numarului de hematii. Aceasta situatie aparand cel mai frecvent ca
urmare a deshidratarii de cele mai multe ori.

Maturizarea hematiilor
n RBC = celule rosii nucleate ( Nucleated Red Cells)

Formele foarte imature ale hematiilor sunt clasificate ca si celule rosii nucleate.Ele sunt mai mari
fata de hematiile normale si inca mai contin AND,si deobicei aceste celule nu parasesc maduva
osoasa.
Ele se maturizeaza la acest nivel si odata transformate in reticulocite pierd partea de nucleu fiind
eliberate in circulatia sangvina.
Prezenta hematiilor nucleate in circulatie sugereaza o eliberare anormala a acestora din maduva
osoasa, fenomen ce apare in anemii,stress, intoxicatie cu plumb, procese tumorale hepatice sau
splenice sau in cazul unor anumite leziuni ale maduvei osoase.

Hematii nucleate

Corpusculi Howell Jolly

Fragmente nucleare ce se gasesc

mai ales in hematii de pisica unde
nevoia de hematii este mare.

Acesti corpusculi nu pot fi detectati

de analizoare automate .

Acestia trebuie identificati in

Hematii normale de caine frotiuri.
 Analizoarele automate de hematologie ce utilizeaza impedanta NU POT face distinctia
intre dimensiunea nucleilor hematiilor si celulele albe lizate ceea a ce face sa se obtina
un numar fals ridicat de celule albe si astfel sa fie afectat numarul total de celule albe.
HEMATIILE NUCLEATE FIIND INCLUSE IN CATEGORIA CELULELOR ALBE.

Reticulocitele

Reticulocitele sunt hematii imature ce au parcurs aproape complet stadiile de dezvoltare de la

nivelul maduvei osoase si care au fost eliberate in circulatie.Numarul reticulocitelor reprezinta
un parametru definitoriu in diferentierea anemiilor. Numarul absolut de reticulocite este
indicator al capacitatii unui pacient de a produce noi hematii.
In anemie, productia de hematii este diminuata pana la un punct cand nu mai poate tine pasul
cu indepartarea acestora din circulatie si ca urmare numarul de hematii cat si hematocritul
sunt scazute.Pentru a compensa acest efect , se vor ,,varsa,, in circulatie un numar mare de
reticulocite care nu au ajuns la maturitate.De aceea in anemie se observa cresterea
numarului de reticulocite.
Exista categorii diferite de reticulocite.La caine toate reticulocitele sunt agregate, la pisica
trebuie facuta o distictie intre cele agregate si cele punctate.Reticulocitele punctate
reprezinta aproape 17% din totalul hematiilor la o pisica sanatoasa.
 Reticulocitele agregate apar ca si celule rosii cu o retea reticulara albastruie atunci
cand se utilizeaza coloratia cu albastru de metilen. Acesta categorie de reticulocite au
o importanta deosebita in diagnosticul anemiei.
 Reticulocitele punctate apar ca celule rosii cu puncte albastre (scattered).
Reticulocitele punctate sunt ,, red herrings,, esentiali si nu au relevanta in diagnostic.

Reticulocite
punctuate

Reticulocite
agregate

Reticulocite punctate si agregate la o pisica cu

anemie hemolitica regenerativa

Cainii sanatosi au pana la 1% reticulocite

agregate.Pisicile sanatoase pot avea pana la 0,4% reticulocite agregate.
Parametrii de evaluare al hematiilor

Dimensiune; forma; distributie; culoare; structura

Valorile hematiilor

Veterinarii isi doresc sa identifice cativa parametrii importanti ce reflecta structura si functia
hematiilor.
Aceste masuratori sunt utilizate pentru
1) evaluarea oxigenului transportat la tesuturi
2) detectarea anomaliilor de forma si dimensiune a hematiilor ce pot ajuta la identificarea
diferitelor modificari patologice ale sangelui.
Multe dintre aceste teste sunt efectuatw de aparate automate prin analizarea unei singure
probe de sange prelevate intr-un recipient ce contine EDTA ca anticoagulant.

Hematocritul (HCT)

Hematocritul sau volumul celular (PVC –packed cell volume) reprezinta raportul dintre
numarul de hematiii relativ la cantitatea totala de sange din tub (plasma). La caine valoarea
HCT este de 40-59% iar la pisica de 29-50% .Un hematocrit scazut este intalnit in anemie
pe cand unul crescut in policitemie.

Hgb

Masurarea concentratiei de hemoglobina este un indicator precis a capacitatii de a a transporta

oxigen a hematiilor la tesuturi.In mod obisnuit, sistemele hematologice ce au ca principiu de
functionare impedanta masoara cantitatea de Hgb printr-o metoda chimica utilizand cianuri.
Aceasta metoda duce la liza chimica a eritrocitelor (distrugerea citoplasmei) ceea ce face ca
hemoglobina sa fie distribuita in proba si sa fie masurata ca si un component colorat si
vizualizat la aceiasi lungime de unda.Concentratia de hemoglobina fiind direct corelata cu
cantitatea de lumina absorbita la o lungime de unda de 540nm.

Lasercyte utilizeaza 3 lungimi de unda

diferite : 470nm (albastru), 535 nm (verde)
si 660 nm ( rosu) – pentru a determina
concentratia de hemoglobina ; SI NU
UTILIZEAZA SUBSTANTE TOXICE PENTRU
DETERMINARE.

Numararea celulelor rosii

Aceasta numarare identifica numarul actual de hematii prezent intr-o proba de sange.
Numararea hematiilor nu este procentuala si reprezinta numarul de hematii dintr-un microlitru
de sange.Fiecare laborator are propriile lui limite pentru numararea hematiilor dar media
este cuprinsa intre 5.6-8.5 x103 hematii /microlitru la caine si de 5-10x106 /microlitru la pisica.
MCV - Volumul mediu corpuscular

Acesta reprezinta volumul mediu al tuturor eritrocitelor numarate intr-o proba. Aceast
parametru este exprimat in unitati de volum, in acest caz in femtolitri ( 10 -15L).Valorile medii
sunt de 39-55 pentru pisica si de 60-70 pentru caine.Cand volumul corpuscular mediu este
scazut sangele este definit ca microcitic (mai mic decat normal).Normocitic se refera la un
sange normal iar macrocitic la un sange ce are volumul mediu corpuscular mai mare decat
normal.

MCV SI COMPETITORII

TREBUIE TINUT CONT CA SISTEMELE CU IMPEDANTA NU MASOARA DECAT

DIMENSIUNEA HEMATIILOR SI CA MULTE LUCRURI POT INTERFERA CU
DIMENSIUNEA SI FORMA HEMATIILOR.

DE CE SA GHICESTI DACA ESTE UN RASPUNS MEDULAR OSOS CAND AI

POSIBILITATEA DE A DETERMINA NUMARUL ABSOLUT AL RETICULOCITELOR ?

RDW

Deoarece masurarea MCV-ului reprezinta numai media volumului celular, este normal ca
acesta sa varieze de la o celula la alta.Astfel de variatie in volumul celular se bazeaza pe
varsta medie a populatiei de hematii, si este definit ca anizocitoza.Unele aparate pot masura
modificarile in ceea ce priveste anizocitoza utilizant un parametru denumit largimea
distributiei celulelor rosii ( RDW- red cell width) ce identifica cat de mult variaza distributia
hematiilor.

MCH - Concentratia medie de hemoglobina corpusculara

Acest parametru reprezinta concentratia medie de hemoglobina din fiecare hematie si se

exprima ca si unitate de masa. Este obtinuta prin impartirea hemoglobinei la numarul de celule
rosii pentru a determina cantitatea de hemoglobina per celula; aproximativ 30x10 -12 grame
per litru.

NUMAI LASERCYTE POATE DA UN RAPORT COMPLET PRIVIND

PARAMETRII HEMATOLOGICE MAJORI PENTRU ANEMIE -
MCV;RDW; NUMARUL DE RETICULOCITE SI PROCENTUL ACESTORA.
MCHC - Concentratia medie a hemoglobinei corpusculare.

Se calculeaza prin impartirea cantitatii de hemoglobina la hematocrit si se exprima

procentual.Valorile normale pentru pisica si caine sunt 30-36,9. Celulele cu MCHC normal,
ridicat sau scazut vor fi definite ca normocromice, hipercromice sau hipocromice.Acest
parametru este important in determinarea tipului de anemie.

Numararea reticulocitelor

Numarul reticulocitelor este important pentru a putea face distinctia intre anemie
regenerativa sau nonregenerativa.Detectarea si numararea reticulocitelor agregate sunt
importante pentru evaluarea clinica a abilitatii cainilor si pisicilor de a produce noi
hematii.Reticulocitele peste 60.000ul la pisica si 80.000 ul la caine indica o anemie
regenerativa.Un procent normal de reticulocite la pisica este cuprins intre 0.0-0.4% si la caine
intre 0.0-1.5%.

Frotiu sange caine cu numar

crescut de reticulocite;
reticulocitele sunt mai mari
decat celulele normale si sunt
de o culoare stearsa
Bolile hematiilor

Volumul de sange

Anemia este o maladie majora a hematiilor( RBC, hematocrit si hemoglobina).Apare cand

volumul de sange circulant scade si abilitate de a transporta oxigen pune in pericol viata
pacientului.Cererea de noi hematii este atat de mare incat maduva osoasa va fi suprasolicitata
si va elibera celule imature - reticulocite. Devreme ce reticulocitele sunt mai mari decat cele
hematiile normale vor fi in consecinta modificari ale parametriilor hematiilor in ceea ce
priveste numarul, dimensiunea si varsta acestora. De exemplu, dimensiunea medie a hematiilor
poate creste si MHCH va descreste pentru ca reticulocitele nu contin hemoglobina in
totalitate. Interrelatia intre parametrii hematici -HCT,RBC, MCV, MHCH si reticulocite-
permite veterinarilor sa clasifice anemia pentru a observa daca maduva osoasa este capabila
sa reactioneze eficient. TOTI ACESTI PARAMETRII SUNT SIMPLI INDICATORI-
NUMARUL ABSOLUT AL RETICULOCITELOR ESTE INDICATORUL DEFINITORIU
PENTRU A EVALUA REACTIVITATEA MADUVEI OSOASE.
Anemia este rareori o boala primara, mult mai des ea este insa rezultatul unui proces
morbid.Tratamentul deobicei nu este tintit direct catre anemie exceptie facand starile de
urgenta cum ar fi pierderile acute de sange, cand pacientul necesita transuzie.Cauza anemiei
trebuie identificata si corectata.Anemia este sindromul asociat cu alte maladii cel mai des
intalnit de veterinari.

In mod general, anemia se clasifica in: regenerativa si nonregenerativa. Semnele clinice ale
anemiei sunt: mucoase palide, slabiciune, oboseala si cresterea ratei cardiace.
Anemia regenerativa este un raspuns adecvat al maduvei osoase prin care se elibereaza in
circulatie hematii imature –reticulocite .Anemia regenerativaeste deasemenea si rezultatul
pierderii de sange ( hemoragie) sau a hemolizei.
In anemia nonregenerativa,raspunsul maduvei osoase este ineficient sau inadecvat.Hematiile
imature-reticulocite nu sunt eliberate in circulatie in cazul unei leziuni medulare osoase.
Numarul absolut al reticulocitelor este utilizat pentru evidentierea capacitatii de regenerare.

Anemiile regenerative

Anemia determinata de pierdere de sange

Anemia in astfel de cazuri apare cand exista pierderi masive de sange in cateva minute sau
ore.Pierderile de sange pot fi interne sau externe.
O cantitate mica de sange pierduta in raport cu greutate corporala este tolerata dar o cantitate
mare nu est.Terapia de inlocuire trebuie initiata precoce pentru a mentine volumul adecvat
de sange si de a preveni socul.
Anemia nu este evidenta in timpul perioadei initiale de pierdere acuta de sange. Dureaza
aproximativ 4 ore pana la scaderea accentuata a numarului de hematii.Numarul de
reticulocite nu este evident pentru primele 3 zile astfel incat acest tip de anemie poate fi
confundat cu o anemie de tip depresor ( acest tip de anemie este astfel clasific din punc de
vedere clinic).

Pierderea cronica de sange

Pierderea cronica de sange in cantitati mici ( hemoangiosarcoame, boli parazitare cu paraziti
hematofagi- purici, ancilostoma) pot conduce la aparitia anemiei. Un raspuns regenerativ se
initiaza dar deobicei este mai putin intens decat cel din pierderile acute de sange.

PIERDERILE ACUTE SAU CRONICE DE SANGE MODIFICA SI NUMARUL

CELULELOR ALBE;LEUCOCITELE CRESC IN CATEVA ORE DE LA INITIALIZAREA
ANEMIEI ACUTE

TROMBOCITELE POT DEASEMENEA SA CREASCA CA URMARE A

MOBILIZARII LOR.

Anemiile hemolitice
(normocitica; normocromica)

Anemiile hemolitice apar cand distrugerea hematiilor depaseste capacitatea maduvei osoase de
a produce si elibera in circulatie noi celule.
Deasemenea poate apare cand distructia celulara si productia medulara cresc dar parametrii
hematici raman aceiasi.Indiferent de cauza, viata hematiilor este scurtata.Distructia hematiilor
poate apare datorita anomaliilor membranare, leziunilor celulare, modificarilor osmotice,
oncotice sau datorita lizei mediate imun. Aceasta distructie sau hemoliza poate apare
intravascular sau extravascular cu macrofagele hepatice sau splenice.In ambele cazuri fierul
ramas din distructia celulara devine disponibil pentru productia de noi celule rosii la nivel
medular osos.De aceea anemia hemolitica este mai regenerativa( aproape de 3 ori) decat cea
determinata data de pierderea de sange.Cele mai frecvente forme de anemie hemolitica sunt :
  Anemia hemolitica mediata imun (IHA) este o tulburare in care supravietuirea celulara
este de scurta durata deoarece sistemul imun al pacientului distruge hematiile
acestuia.Acest proces se pare ca apare atunci cand anticorpii imbraca suprafata
hematiilor – deveniind tinta macrofagelor hepatice.

ANEMIILE MEDIATE IMUN HEMOLITICE

POT FI DETERMINATE DE: FELV,
EHRICHIA, HAEMOBARTONELLA

 Anemiile hemolitice mediate imun au un raspuns regenerativ dar nu mai mult de 2-3
zile.
Se recomanda efectuare unui frotiu pentru observarea schizocitelor sau a corpilor
Heinz;deasemenea efectuarea de Comb test sau de detectie si titrare a anticorpilor.

Anemiile nonregenerative
Deficientele nutritionale ca malnutritia, mineralo-vitaminic sau deficitul de proteina pot
contribui la severitatea anemiei. Rareori un deficit nutritional poate genera singur
anemia.Supresia medulara osoasa apare cel mai frecvent cand exista supresia celor trei tipuri
de celule (hematii,celule albe si trombocite)si numai ocazional cand este supresata productia de
hematii. In mod evident medicamentele chimioterapice, analgezice cat si bolile infectioase ca
FeLv sau infectia cu E.canis pot determina supresia.
Anemia ce apare in bolile cornice renale este nregenerativa, normocitemica (dimensiune
normala) si normocromica (culoare normala) si sunt determinate de deficitul de eritropoietina.

Policitemia
Aceasta este definita prin cresterea masei de hematii circulante.PCV/HCT, HgB si numarul de
hematii sunt mai mari decat normal in conditiile unei cresteri relative sau absolute a
hematiilor circulante.Policitemia nu este o maladie frecventa dar poate apare la animalele cu
TP –proteine totale-scazut ca urmare a deshidratarii.Aceasta putandu-se datora ingestiei unei
cantitati mici de apa de catre animalul bolnav.HCT-ul revine la normal odata cu restabilirea
starii de hidratare.Animalele cu policitemie prezinta diaree, voma sau poliurie.Veterinarul
trebuie sa masoare electrolitii – Vetstat, Vettest-ul pentru masurarea proteinelor totale si
albuminei si Lasercyte pentru masurarea parametrilor sangvini.

HCT – MAI MARE DE 60% TREBUIE SA VA ALERTEZE

CU PRIVIRE LA PREZENTA POLICITEMIEI.

UNELE RASE DE CAINE AU UN HCT MAI MARE DECAT NORMAL.

DACA ANIMALUL TRAIESTE LA ALTITUDINI MAI MARI DE 6000FT

HCT-ul VA FI MARE DECAT NORMAL.
Diagnosticul Anemiei

Se vor lua in consideratie datele obtinute din istoricul si examinarea animalului.Daca animalul
este asimptomatic iar istoricul sugereaza o instituire recenta a semnelor clinice, anemia
probabil se datoreaza pierderii sau distrugerii celulare si probabil va fi regenerativa daca nu a
trecut suficient timp pentru a deveni regenerativa.Daca animalul are o istorie de boala cronica,
anemia este nonregenerativa .

Cu alte cuvinte INTOTDEAUNA UTILIZATI VALOAREA ABSOBULTA A

RETICULOCITELOR PENTRU CLASIFICAREA SI ABORDAREA ANEMIILOR.

ANEMIA REGENERATIVA: REPREZENTA NUMAR CRESCUT DE RETICULOCITE SI INDICA

FAPTUL CA MADUVA OSOASA INCEARA SA ACOPERE DEFICITUL DE HEMATII.

UN NUMAR ABSOLUT DE RETICULOCITE MARE DE 60.000UL LA CAINE SI DE 50.000 UL

LA PISICA INDICA ACEST TIP DE ANEMIE.

ANEMIE NONREGENERATIVA : UN NUMAR MIC SI CHIAR ABSENTA RETICULOCITELOR

INDICA FAPTUL CA MADUVA OSOASA NU RASPUNDE EFICIENT LA DEFICITUL DE
HEMATII.