Blaj Mădălina

Seria A, Gr.6

Microanaliza ionilor cu importanță biologică și farmaceutică

 "Murine studies regarding the tissue intake of different magnesium compounds"

Studii privind concentrația tisulară ai diferiților compuși ai magneziului

(Authors: CORINA MOISA , LAURA GRAȚIELA VICAȘ , MARIANA GANEA , ERIKA

ANDREA LEVEI , OANA CADAR , CRISTIAN BERCE)

Published on Revista" Farmacia ", august 2018, Vol. 66, 1; pag. 176-180

http://www.revistafarmacia.ro/201801/art-23-Moisa_Cadar_Berce_176-180.pdf

Rezumat

În această lucrare a fost studiată concentrația tisulară a magneziului, prin determinarea

conținutului de magneziu în diferite organe (inimă, ficat, splină, rinichi și plămân) la șoareci, în
urma administrării diferiților compuși ai magneziului. Au fost administrate doze de 25, 50, 100,
200 și 300 mg orotat, sulfat, oxid, carbonat, citrat și clorură de magneziu, la grupuri a câte 2
șoareci, pentru fiecare doză și compus. Rezultatele au arătat o scădere a concentrației de
magneziu în ordinea: orotat > sulfat > clorura > carbonat > citrat > oxid. În cazul administrării de
orotat, carbonat și clorură de magneziu nu au fost observate efecte secundare, în timp ce la
administrarea de oxid și citrat de magneziu s-a observat o ușoară laxație,iar în urma administrării
de sulfat de magneziu efectul laxativ a fost mai pronunțat. Concentrația cea mai mare de
magneziu a fost determinată în ficat, iar concentrația cea mai scăzută în plămâni. Este foarte
probabil că structura chimică a orotatului de magneziu să permită o mai bună biodisponibilitate a
ionilor de magneziu și apariția implicită a unei concentrații mai mari de magneziu la nivel tisular,
comparativ cu ceilalți compuși de magneziu studiați.

Introducere

Magneziul (Mg) este al doilea cation intracelular cel mai abundent după potasiu și al
patrulea mineral abundent în organism după calciu, potasiu și sodiu . Conținutul total de Mg din
corpul uman adult este raportat a fi ~ 20 g, comparativ cu 1000 g de calciu total . Din totalul de
Mg găsit în organism, 65% se află în oase, 33% în spațiul intracelular și doar o mică cantitate în
spațiul extracelular (2%) și compartimentul intravascular (<1%) .În plus, Mg este o componentă
structurală a diferitelor țesuturi, în special a oaselor. Nivelurile adecvate intracelulare de Mg sunt
esențiale pentru viață, deoarece Mg este un co-factor fundamental pentru reacții biochimice
vitale, mai ales cele care depind de adenozintrifosfat și este un regulator important al ciclului
Krebs și glicoliză . Deficiența de Mg este cauzată în principal de epuizarea conținutului de
minerale în soluri și, în consecință, în fructe și legume. Din acest motiv, o mare parte a populației
ia suplimente de Mg pentru a crește aportul de acest mineral. Mg este absorbit în intestin, este
stocat în principal în oase și excretat prin rinichi și fecale. În general, suplimentele alimentare
sunt ingerate pentru a furniza substanțele nutritive care sunt lipsite în dietă, întărirea imunității
organismului, ajută persoanele cu variații fiziologice și biochimice genetice și în combaterea
stărilor de boală . Cei mai comuni compuși ai Mg găsiți în suplimentele sunt clorură și sulfat.
Deoarece analiza de plasmă Mg oferă informații cu privire la mai puțin de 1% din Mg din
organism, am evaluat concentrațiile de Mg în diferite organe ale șoarecilor (splină, plămâni,
rinichi, inimă și ficat), în scopul de a identifica compușii cu cea mai bună disponibilitate tisulară.

Materiale și metode

Reactivi

Orotatul de Magneziu (C10H6MgN4O8), sulfat de magneziu (MgSO4 x 7H2O), oxid de

magneziu (MgO), clorură de magneziu (MgCl2 x 6H2O), carbonat de magneziu (MgCO3), citrat
de magneziu (Mg3 (C6H5O7) 2), HNO3 65 % și H2O2 30% au fost achiziționate de la Merck,
Germania. Toate diluțiile au fost preparate utilizând apă ultrapură .

Animale

Șoareci masculi adulți CD1 (n = 62), cu o greutate medie de 26,92 ± 0,21 g au fost
utilizați după carantină și aclimatizare. Animalele au fost menținute în camere de mediu
controlate (temperatură standard de 22 ± 2 ° C, umiditate relativă de 55 ± 10%) într-un ciclu
lumină/ întuneric de 12/24 . Grupurile au fost randomizate în diferite cuști. Toate protocoalele
experimentale au fost aprobate de Comitetul de etică a Universității de Medicină și Farmacie
„Iuliu Hațieganu“ și au fost efectuate în conformitate cu Directiva UE 63/2010. Studiul a fost
efectuat în conformitate cu liniile directoare ARRIVE pentru raportarea de cercetare pe animale,
iar animalele au fost îngrijiți în conformitate cu orientările europene.
Procedura și colectarea datelor

Pentru fiecare individ, cantități de 25, 50, 100, 200 sau 300 mg de diferiți compuși ai Mg
au fost dizolvați (orotat, sulfat, clorură și citrat) sau suspendați (carbonat și oxid) în apă distilată
și administrate prin gavaj, utilizând tuburi de alimentare din plastic flexibil . Pentru fiecare
tratament au fost utilizate grupuri de 2 persoane. 2 ore după administrare, animalele au fost
eutanasiate folosind metoda dislocării cervicale, urmată de recoltarea de organe interne (inimă,
plămâni, ficat, splină, rinichi). A fost înregistrată greutatea fiecărui organ. Probele de digestie au
fost realizate folosind un amestec de HNO3 65% și H2O2 30% (10: 1, v: v) într-un vas închis
cu sistem pentru microunde digestie din politetrafluoretilenă , în conformitate cu metoda
descrisă de Zhao și colab. Probele au fost cantitativ transferate în baloane cotate de 10 ml și
diluate până la semn cu apă ultrapură. Concentrația Mg (mg / l) în fiecare organ a fost determinat
prin ICP-OES Optima 5300 DV (Perkin Elmer, USA), după digestie, urmată de conversia în mg /
kg. Standardele de calibrare (0,1, 0,2, 0,5, 1, 2, 4 și 6 mg / l) au fost preparate prin diluarea
soluției etalon stoc (1000 mg / l) în 0,5% (v / v) HNO3.

Rezultate și discuție

Greutățile medii ale organelor studiate au fost: 0,169 ± 0,031 g de inimă, plămân 0,206 ±
0,027 g, ficat 1,606 ± 0,144 g, splină 0,155 ± 0,038 g și rinichi 0,338 ± 0,032 g. Conținutul de
Mg a fost calculată ca diferența dintre conținutul de Mg determinat în organele indivizilor de
testare și de control. Tabelul de mai jos prezintă conținutul mediu în Mg determinat în fiecare
organ, pentru dozele și compușii administrați. Conținutul de Mg a variat considerabil în toate
țesuturile. Cel mai ridicat conținut de Mg a fost găsit în splină, în cazul administrării de 200 mg
Mg-citrat, în timp ce cea mai mică în plămâni, în cazul administrării de 25 mg Mg-oxid. Valorile
Mg au scăzut în următoarea ordine: splină> rinichi> ficat> inimă> plămân. Conținutul ridicat de
Mg în rinichi ar putea fi explicat prin faptul că homeostazia Mg este menținută în principal prin
rinichi, prin reglarea vitezei de excreție . Conținutul de Mg în compuși administrați fost calculat
pe baza formulei chimice, considerând greutatea moleculară. Astfel, cel mai mic conținut de Mg
(1,8 mg) a fost găsit în 25 mg Mg-orotat, în timp ce cea mai mare (181 mg) în 300 mg de Mg-
oxid.
Conținutul de Mg în organele studiate în funcție de compusul Mg administrat și de doză:

Mg-compoziție Doză Conținut Mg (mg/g)

Inimă Splină Rinichi Plămân Ficat
(mg)
Orotat 25 0.145 0.200 0.180 0.116 0.161
50 0.150 0.210 0.186 0.121 0.166
100 0.160 0.220 0.195 0.135 0.179
200 0.171 0.230 0.210 0.141 0.191
300 0.168 0.220 0.198 0.151 0.201
Sulfat 25 0.130 0.193 0.145 0.079 0.145
50 0.140 0.210 0.150 0.088 0.149
100 0.155 0.153 0.160 0.090 0.151
200 0.160 0.229 0.180 0.102 0.160
300 0.135 0.220 0.130 0.089 0.145
Oxid 25 0.122 0.191 0.130 0.076 0.142
50 0.125 0.200 0.131 0.084 0.152
100 0.144 0.152 0.130 0.088 0.157
200 0.154 0.228 0.150 0.098 0.158
300 0.130 0.216 0.139 0.090 0.113
Clorură 25 0.140 0.196 0.175 0.110 0.155
50 0.145 0.210 0.185 0.115 0.161
100 0.160 0.218 0.203 0.122 0.172
200 0.170 0.225 0.215 0.132 0.185
300 0.165 0.220 0.201 0.121 0.165
Carbonat 25 0.137 0.194 0.170 0.105 0.150
50 0.140 0.200 0.173 0.111 0.155
100 0.150 0.215 0.181 0.120 0.160
200 0.161 0.220 0.190 0.125 0.175
300 0.155 0.215 0.185 0.115 0.161
Citrat 25 0.152 0.210 0.185 0.120 0.170
50 0.160 0.220 0.201 0.132 0.179
100 0.170 0.232 0.218 0.162 0.192
200 0.185 0.243 0.235 0.171 0.220
300 0.180 0.239 0.221 0.160 0.216

Acumularea de Mg în diferite organe a fost calculat ca procentul conținutului de Mg în

fiecare organ și conținutul de Mg în compus și doza administrată. Cel mai scăzut Mg% a fost
găsit pentru 300 mg Mg-oxid (0,01%), în timp ce cea mai mare Mg% pentru 25 mg Mg-orotat
(10,2%). Aceste date sugerează că compusul chimic este mai important decât doza administrată,
în cazul selecției pentru suplimentele de Mg. Acumularea medie în organele țintă ale fiecărui
compus de Mg, indiferent de doza administrată, este prezentată în figura e mai jos. Scăderea
eficienței acumulării în următoarea ordine: orotat> sulfat> clorură> carbonat ≥ citrat> oxid. Cea
mai mare acumulare medie a fost găsită în țesutul hepatic. Solubilitatea scăzută a acidului orotic
în mediu apos și structura chimică a Mg-orotate favorizează disocierea sale intracelulare. Astfel,
acidul orotic acționează ca un transportor care transportă Mg în celule.

În figura de mai jos se obervă acumulare medie în organele țintă ale compușilor Mg
 Figure 2.
Acumularea Mg în organele studiate,penutr fiecare compus Mg în funcţie de doza
administrată de substanţă activă este prezenztă în Figura2.

Cantitatea de Mg (%) acumulată a scăzut odată cu creșterea dozei administrate pentru

toate țesuturile, sugerând că suplimentele sunt mai eficiente la doze mai mici decât la doze mari..
O posibilă explicație a acestui fapt ar putea fi faptul că organismul poate stoca cantități limitate
de Mg și absorbția este mai mare atunci când nivelul de Mg este mai mic. În selectarea terapiei
Mg, un rol important este jucat, de asemenea, de efectele adverse care pot să apară. În studiul de
față, modificările de comportament, motilitate și reflexie nu a avut loc. Cu toate acestea, în cazul
Mg-sulfat, între administrare și recoltare de organe, a fost observat efectul laxativ.

Concluzii

Concentrațiile de Mg în țesuturile de șoareci sunt scăzute indiferent de doza administrată

și variază în următoarea ordine: ficat> rinichi> splină> inimă> plămân. Concentrația de Mg în
toate organele investigate scade odată cu creșterea cantității de Mg administrată oral, după cum
urmează: orotat> sulfat> clorură> carbonat ≥ citrat> oxid. În urma administrării orale a
compușilor Mg studiate, au apărut reacții adverse gastrointestinale pentru sulfatul de magneziu,
citrat și oxid și se intensifică odată cu creșterea dozei administrate, în timp ce pentru orotatul de
Mg, clorură și carbonat, aceste efecte au fost absente. Lipsa efectelor secundare, precum și
concentrațiile mari de Mg, măsurate după administrarea de Mg-orotat, indică oroatatul de Mg ca
sursă de Mg care poate fi utilizat pentru a suplimenta deficiența oligoelementului din dietă.