Disciplina: Aparataj și tehnologii pentru controlul mediului

___Godoroja Gheorghe___
(Numele și prenumele elevului)
Lucrarea practică nr. 8
Tema: Cromatografia cu hârtie.
Separarea aminoacizilor prin cromatografia de repartiție pe hârtie
Obiective:
 Familiarizarea cu principiul de lucru a cromatografiei pe hârtie.
 Explicarea tehnicii de obținere a cromatografiei pe hârtie (algoritmul de analizare).
 Evidențierea metodelor de identificare a substanțelor pe cromatogramă.
 Alcătuirea algoritmului de separarea aminoacizilor prin cromatografia de repartiție pe
hârtie, în baza informației din manual.

Planul lucrării practice:

1. Cromatografia pe hârtie.
2. Separarea aminoacizilor prin cromatografia de repartiție pe hârtie.
1. Cromatografia pe hârtie
Cromatografia pe hârtie este o metodă de separare cromatografică planară utilizată
pentru separarea unor substanțe sau compuși colorați. Fiind o metodă mai veche, astăzi este
folosită mai mult în scop didactic, iar în locul ei se folosesc alte tehnici de cromatografie
planară, precum cromatografia pe strat subțire. Metoda este bazată pe repartiția lichid-lichid.
Principiul cromatografiei pe hârtie: 
Substanțele aplicate pe hârtia cromatografică trec în faza mobilă și se separă
deplasându-se prin capilarele hârtiei cu diferită viteză.
Capacitatea de separare:
Rf = h/H
h – mărimea de deplasare a zonei substanței;
H – mărimea de deplasare a frontului solventului.
Faza mobilă folosită este de obicei un amestec de solvent organic polar cu apa, iar faza
staționară este apa. Rolul hârtiei este de a oferi un suport pentru apă, aceasta fiind de fapt faza
staționară (cromatografie lichid-lichid). Faza mobilă urcă de-a lungul fazei staționare
datorită capilarității.
Algoritmul obținerii cromatografiei pe hârtie
O picătură de soluție analiză se aplică pe hârtia de filtru

Se usucă hârtia îmbibată cu soluția analizată

Hârtia uscată se atârnă vertical într-un vas cu solvent

Obținerea cromatogramei pe hârtie

Identificarea substanțelor pe cromatogramă

 Schema cromatografiei pe hârtie: se observă migrarea compușilor pe hârtia îmbibată
cu fază mobilă.
Metodele de identificare a substanțelor pe cromatogramă:
a) după colorația zonelor formate pe cromatogarmă
b) după developarea zonei cu reactivi chimici speciali
c) după fluorescența în lumina ultravioletă.

Avantajele cromatografiei pe hârtie:

 este o metodă simplă în lucru;
 nu necesită utilaj costisitor;
 îmbinarea separării cu determinarea sau identificarea.

2. Separarea aminoacizilor prin cromatografia de repartiție pe hârtie.

Sarcina de lucru:
 Studiați informația din manual, pag. 288-290.
 Alcătuiți algoritmul de separare a aminoacizilor prin cromatografia de repartiție pe
hârtie, în baza informației din manual, pag. 288-290.

Surse bibliografice recomandate elevilor:

1. Posîpaiko V., Kozîrieva N., Logacieva I. Metode chimice de analiză. Chișinău:
Universitas, 1992.

Sarcini didactice:
1. Explicați principiul și tehnica cromatografiei pe hârtie conform algoritmului.
2. Alcătuiți algoritmul de separare a aminoacizilor prin cromatografia de repartiție pe
hârtie, în baza informației din manual, pag. 288-290.

Profesor: Alla Banari, profesor de discipline ecologice, grad didactic superior

 Algoritmul de separare a aminoacizilor prin cromatografia de
repartitie pe hirtie:
taiati hirtia de filtru comform deminsiunilor

duceti o dreapta de 2,5 cm de la marginea hirtiei

desenati 6 cerculete cu diametru de 3-4 mm si distanta de 2 cm unul de altu

aranjati hirtia pe o sticla curata

aplicati pe punctele schitate picaturile de solutie

aplicare solutiilor se repeta de 8-10 ori

spalati minile cu sapun

rasuciti foaia in forma de cilindru

coaseti marginile in asa fel ca sa nu se suprapuna

turnati in cilindru de sticla solvent

aranjati cilindrul de hirtie in cel de sticla

acoperiti cilindrul si lasati-l pe o zi

scoateti cilindrul de hirtie

 scoateti atele si aranjati hirtia sub nisa pentru uscare

cromatograma se devalopeaza cu solutie acetonica de ninhidrina

uscati cromatograma si incalziti-o atent la flacara

Explicați principiul și tehnica cromatografiei pe hârtie conform

algoritmului.

Cromatografia pe hârtie este o metodă analitică utilizată pentru a separa

substanțele sau substanțele chimice colorate. In prezent , este utilizat în principal
ca un instrument de predare, care a fost înlocuit în laborator prin alte metode
cromatografice cum ar fi cromatografia în strat subțire (TLC). O variantă de
cromatografie pe hârtie, cromatografia bidimensională implică utilizarea a doi
solvenți și rotirea hârtiei cu 90 ° între ele. Acest lucru este util pentru separarea
amestecurilor complexe de compuși cu polaritate similară, de exemplu,
aminoacizi .

Setarea are trei componente. Faza mobilă este o soluție care parcurge faza
staționară, datorită acțiunii capilare . Faza mobilă este, în general, un amestec de
solvent organic nepolar, în timp ce faza staționară este apa anorganică polară.
Aici se folosește hârtie pentru a susține faza staționară, apa. Moleculele de apă
polare sunt ținute în spațiul gol al rețelei de celuloză a hârtiei gazdă. Diferența
dintre TLC și cromatografia pe hârtie este că faza staționară în TLC este un strat
de adsorbant (de obicei silicagel sau oxid de aluminiu ), iar faza staționară în
cromatografia pe hârtie este hârtie mai puțin absorbantă.