Machine Translated by Google

Teste de laborator pentru virusul variolei maimuțelor

Îndrumări intermediare

23 mai 2022

Puncte cheie

• Scopul răspunsului global la focarul de variola a maimuței în mai multe țări este de a opri focarul.
• Orice persoană care îndeplinește definiția de caz suspectat pentru variola maimuță ar trebui să i se ofere testare.

• Tipul de eșantion recomandat pentru confirmarea diagnostică a variolei maimuțelor în cazurile suspectate este materialul leziunii cutanate, inclusiv
tampoane de exsudat de leziune, acoperișuri de la mai mult de o leziune sau cruste de leziune.

• Confirmarea de laborator a probelor dintr-un caz suspect se face utilizând testarea de amplificare a acidului nucleic (NAAT), cum ar fi în timp real sau reacția convențională
a polimerazei în lanț (PCR). NAAT poate fi generic pentru orthopoxvirus (OPXV) sau specific pentru monkeypoxvirus (MPXV, de preferat).

• Toate manipulările efectuate în laborator ale probelor provenite din cazuri suspectate, probabile sau confirmate de variola a maimuței trebuie
să fie efectuate conform unei abordări bazate pe risc.

• Pe lângă NAAT, secvențierea este utilă pentru a determina clada virusului și pentru a înțelege epidemiologia. Statele membre sunt puternice
încurajat să partajeze datele despre secvența genetică MPXV în baze de date disponibile și accesibile publicului.

• Statelor membre li se solicită să notifice imediat OMS în temeiul Regulamentului Internațional de Sănătate (IHR) 2005 cu privire la rezultatele pozitive de laborator, inclusiv
un test de laborator generic OPXV care așteaptă confirmarea. • OMS poate ajuta statele membre să acceseze teste prin trimitere. Dacă este necesar, statele membre

pot contacta persoana relevantă

Biroul Regional al OMS.

Introducere

Monkeypoxvirus (MPXV) este un virus ADN dublu catenar, un membru al genului orthopoxvirus din familia Poxviridae . Poxvirusurile provoacă boli la oameni și la multe alte animale;
infecția are ca rezultat de obicei formarea de leziuni, noduli cutanați sau erupții cutanate diseminate. Alte specii de ortopoxvirus (OPXV) patogene pentru oameni includ virusul variolei
bovine și virusul variolei (care provoacă variola, care a fost eradicată).
Virusul Vaccinia este, de asemenea, un OPXV care a fost folosit pentru vaccinarea oamenilor și a fost un instrument cheie pentru eradicarea variolei, realizat în 1980.
MPXV este numit datorită detectării sale inițiale la maimuțe. MPXV poate fi găsit în principal la rozătoare, totuși rezervorul este nedeterminat. Există două clade cunoscute de MPXV,
una endemică în Africa de Vest și una în regiunea Bazinului Congo.

Prezentarea tipică a variolei maimuțelor este bine descrisă și constă într-o scurtă perioadă prodromală febrilă urmată de dezvoltarea progresivă a unei erupții cutanate clasice cu leziuni
indurate și ombilicate (deprimate central), începând de pe cap sau față și progresând până la membre și trunchi.
Leziunile progresează toate în același stadiu de la macule, la papule, la vezicule, la pustule și eventual la cruste care se usucă și cad după două până la patru săptămâni. Adesea există
enantem (răni sau ulcere) în gură și leziunile pot afecta ochii și/sau zona genitală. Ganglionii limfatici umflați sunt tipici variolei maimuțelor. Cu toate acestea, leziunile pot fi hemoragice
sau se pot coalesce în bule mari. În acest focar din mai multe țări, au existat sugestii că progresia leziunilor poate fi atipică, începând din zona genitală. Multe persoane care se confruntă
cu această afecțiune pot fi testate pentru alte boli infecțioase în momentul depistarii.

Acest ghid servește pentru a oferi recomandări intermediare laboratoarelor și părților interesate implicate în diagnosticarea variolei maimuțelor. Aceste recomandări au fost pregătite
de OMS în consultare și revizuite de experți de laborator în domeniu, cu experiență în manipularea și detectarea MPXV și OPXV și cei cu experiență în dezvoltarea de teste de diagnostic
pentru OPXV. Pentru țările care au standarde de reglementare care se aplică testelor clinice de laborator efectuate pe specimene umane, aceste standarde de reglementare trebuie
respectate în mod corespunzător.
OMS monitorizează îndeaproape evoluțiile legate de acest focar și va revizui și va publica recomandări actualizate, după caz. Dacă nu se fac revizuiri, acest document va expira într-un
an (mai 2023).

Indicații pentru testare

Orice persoană care îndeplinește definiția pentru un caz suspect ar trebui să i se ofere testare.(1) Decizia de a testa ar trebui să se bazeze atât pe factori clinici, cât și pe factori
epidemiologici, legați de o evaluare a probabilității infecției. Datorită gamei de afecțiuni care cauzează erupții cutanate și deoarece prezentarea clinică poate fi mai des atipică în acest
focar, poate fi dificil să se diferențieze variola maimuței exclusiv pe baza prezentării clinice, în special pentru cazurile cu o prezentare atipică. Prin urmare, este important să se ia în
considerare și alte cauze potențiale ale leziunilor cutanate discrete
sau o erupție cutanată diseminată; Exemple de alte etiologii pentru leziuni cutanate asemănătoare în diferitele stadii de dezvoltare includ virusul herpes simplex, virusul varicela zoster,
virusul molluscum contagiosum, enterovirusul, rujeola, scabie, Treponema pallidum (sifilis), infecțiile bacteriene ale pielii, alergiile la medicamente, parapoxvirusurile ( provocând orf și
afecțiuni înrudite) și chancroid (2).

-1-
Machine Translated by Google
Testare de laborator pentru virusul variolei maimuțelor: îndrumări intermediare

Colectarea, expedierea și depozitarea specimenelor

Proceduri de siguranță. Trebuie asigurată utilizarea procedurilor standard de operare (SOP) adecvate, iar personalul de laborator trebuie să fie instruit pentru îmbrăcarea și scoaterea
corespunzătoare a echipamentului individual de protecție (EIP), colectarea, depozitarea, ambalarea și transportul probelor. Toate probele colectate pentru investigații de laborator trebuie
considerate ca potențial infecțioase și manipulate cu prudență. Trebuie luate măsuri pentru a minimiza riscul de transmitere de laborator pe baza evaluării riscului atunci când se testează
probe clinice de rutină de la pacienți confirmați sau suspectați de variola maimuță. Acestea pot include limitarea numărului de personal care testează eșantioane numai la personalul cu
competență dovedită, purtând EIP adecvat, folosind precauții standard aplicate riguros și evitarea oricăror proceduri care ar putea genera aerosoli infecțioși. Acolo unde este cazul și
disponibil, este încurajată luarea în considerare a vaccinării în rândul personalului. Dezinfectanții eficienți includ compuși de amoniu cuaternar și 0,5% (sau 200 ppm) înălbitor (proaspăt
făcut).

Respectarea riguroasă a ghidurilor de prevenire și control al infecțiilor trebuie să fie asigurată în timpul colectării și manipulării probelor (Managementul clinic și ghidurile IPC sunt în curs de
dezvoltare)

Specimen de colectat. Tipul de eșantion recomandat pentru confirmarea de laborator a variolei maimuțelor este materialul leziunii cutanate, inclusiv tampoanele de suprafață a leziunii și/sau
exudat, acoperișuri de la mai mult de o leziune sau cruste leziunii. Tamponați leziunea energic, pentru a vă asigura că este colectat ADN viral adecvat. Pot fi utilizate atât tampoane uscate, cât
și tampoane plasate în medii de transport viral (VTM). Două leziuni de același tip trebuie colectate într-un singur tub, de preferință din locații diferite de pe corp și care diferă ca aspect.
Leziunile, crustele și lichidele veziculare nu trebuie amestecate în același tub. Dacă resursele permit acest lucru, pot fi colectate două tuburi pentru a minimiza riscul de prelevare slabă sau de
inhibitori, totuși doar unul ar trebui testat, iar al doilea ar trebui testat numai în cazul în care primul oferă rezultate neconcludente. Pe lângă un specimen de leziune, se încurajează recoltarea
unui tampon orofaringian. Cu toate acestea, datele privind acuratețea acestui tip de eșantion pentru diagnosticare sunt limitate pentru variola maimuței, prin urmare, o probă negativă pe
tampon de gât trebuie interpretată cu prudență.

Deoarece focarul actual este încă în curs de investigare, colectarea de tipuri suplimentare de specimene în scopuri de cercetare poate fi luată în considerare dacă este permisă de comisia de
evaluare etică adecvată și există suficientă expertiză medicală și de laborator pentru colectarea, manipularea și depozitarea lor în siguranță.
Acestea pot include urina, materialul seminal, tamponul rectal și/sau genital la indicație bazată pe prezentarea clinică, inclusiv localizarea leziunilor. Sângele EDTA poate sprijini detectarea
MPXV, dar poate să nu conțină nivelul ridicat de virus găsit în probele de leziuni, deoarece orice viremie apare la începutul cursului infecției, de obicei în perioada prodromală și înainte ca
leziunile cutanate să devină manifeste. Prelevarea unei biopsii a leziunii în timpul etapei maculare ar trebui luată în considerare numai dacă este indicată clinic și trebuie efectuată numai de
personal cu pregătire adecvată. Aceste tipuri de specimene suplimentare nu sunt destinate diagnosticului de rutină și nu trebuie colectate în afara setărilor de cercetare. Mai multe detalii
despre colectarea și depozitarea specimenelor sunt incluse în anexă.

Detectarea anticorpilor din plasmă sau ser nu trebuie utilizată singură pentru diagnosticarea variolei maimuțelor. Cu toate acestea, detectarea IgM de la pacienții bolnavi acut recent sau IgG
în probe de ser pereche, colectate la cel puțin 21 de zile, prima fiind colectată în timpul primei săptămâni de boală, poate ajuta la diagnosticare dacă probele testate dau rezultate
neconcludente. Vaccinarea recentă poate interfera cu testarea serologică.

Ambalarea și expedierea probelor clinice. Specimenele trebuie păstrate la frigider sau congelate în decurs de o oră de la colectare și transportate la
laboratorul cât mai curând posibil după colectare. Manipularea și depozitarea corectă a probelor în timpul transportului sunt esențiale pentru teste de diagnosticare precise (vezi Anexa).
Transportul specimenelor trebuie să respecte orice reglementări naționale și/sau internaționale aplicabile, inclusiv Regulamentul model al ONU și orice alte reglementări aplicabile, în funcție
de modul de transport utilizat. Pentru transportul international,
Specimenele din cazuri suspectate probabile sau confirmate de MPXV, inclusiv probe clinice, izolate virale și culturi trebuie să fie transportate în categoria A, UN2814 „substanță infecțioasă,
care afectează oamenii”. Toate specimenele transportate trebuie să aibă ambalaj triplu adecvat, etichetare și documentație. Transportul necesită un expeditor certificat de mărfuri
periculoase. Pentru informații despre cerințele de expediere a substanțelor infecțioase, vă rugăm să consultați Ghidul OMS privind reglementările pentru transportul substanțelor
infecțioase 2021-2022 (3).

Depozitarea specimenelor. Probele colectate pentru investigarea MPXV trebuie refrigerate (2 până la 8°C) sau congelate (-20°C sau mai puțin) în termen de o oră după colectare. Dacă
transportul depășește 7 zile pentru proba de testat, probele trebuie păstrate la -20°C sau mai puțin. Se recomandă depozitarea pe termen mai lung (>60 de zile de la recoltare) la -70°C. ADN-
ul viral prezent în materialul leziunii cutanate este relativ stabil dacă este păstrat într-un mediu întunecat, rece, ceea ce poate fi luat în considerare atunci când lanțul rece nu este ușor
disponibil (4), dar transportul la temperatura camerei nu este recomandat până când studiile ulterioare nu oferă dovezi că calitatea probei este nu compromis. Ciclurile repetate de îngheț-
dezgheț trebuie evitate deoarece pot reduce calitatea probelor. Pe lângă materialele de colectare specifice indicate în anexă, alte materiale și echipamente necesare pot include: containere
de transport și pungi de colectare a probelor și ambalaje triple, frigidere și pachete frigorifice sau gheață carbonică, echipamente sterile de extragere a sângelui (de exemplu ace, seringi și
tuburi); etichete și markere permanente, EIP și materiale pentru decontaminarea suprafețelor.

Metode și algoritm de testare de laborator

Testarea pentru prezența MPXV ar trebui efectuată în laboratoare echipate corespunzător de către personal instruit în procedurile tehnice și de siguranță relevante. Confirmarea infecției cu
MPXV se bazează pe testarea de amplificare a acidului nucleic (NAAT), folosind reacția în lanț a polimerazei (PCR) în timp real sau convențională, pentru detectarea secvențelor unice de ADN
viral. PCR poate fi utilizată singură sau în combinație cu secvențierea. Mai multe grupuri au dezvoltat protocoale PCR validate pentru detectarea OPXV și mai precis MPXV, dintre care unele
includ distincția bazinului Congo.
și cladele Africii de Vest (5–9). Unele protocoale implică doi pași, în care prima reacție PCR detectează OPXV, dar nu identifică ce specie. Acesta poate fi apoi urmat de un al doilea pas, care
poate fi bazat pe PCR sau poate utiliza secvențierea, pentru a detecta în mod specific MPXV. Înainte ca un test să fie utilizat pentru a testa probe clinice umane într-un laborator, acesta trebuie
validat și/sau verificat în laborator de către personal instruit corespunzător.

-2-
Machine Translated by Google
Testare de laborator pentru virusul variolei maimuțelor: îndrumări intermediare

Reactivi. Reactivii trebuie păstrați conform recomandărilor producătorului. Există un număr de seturi de primeri și secvențe de sondă pentru testele PCR pentru OPXV și în mod specific MPXV
care au fost publicate în literatură și pot fi utilizate pentru dezvoltarea internă a analizelor în laboratoare cu capacități adecvate (5-7). Trusele PCR care detectează OPXV sau în mod specific
MPXV sunt în curs de dezvoltare (10,11), dar nu sunt disponibile în prezent truse comerciale PCR sau serologie. Materialul de control pozitiv pentru testele PCR poate fi comandat de la
inițiative specializate (12). Cea mai bună practică este ca controlul pozitiv să fie inclus la o concentrație scăzută (peste limita de detectare), dar ușor de detectat; includerea materialelor de
control al calității, acolo unde este posibil, poate ajuta la controlul oricăror probleme de testare. Controalele ar trebui să ofere informații despre (1) calitatea probei, (2) calitatea acidului
nucleic și (3) calitatea procesului. PCR poate fi extrem de sensibilă, așa că trebuie depuse eforturi pentru a limita contaminarea și ar trebui utilizate controale negative la fiecare cursă pentru
a se asigura că nu a avut loc contaminarea. Controalele de integritate a probei (de exemplu, RNaza P), controalele de extracție, pozitive și de inhibiție pot ajuta la distingerea unui fals negativ
de un adevărat negativ. Controalele trebuie utilizate în conformitate cu POS de laborator. Dacă oricare dintre controalele testului eșuează, testarea trebuie repetată.

Eliminarea deșeurilor. Toate deșeurile care pot conține MPXV trebuie decontaminate înainte de eliminare prin utilizarea unei metode aprobate, cum ar fi autoclavarea sau dezinfecția chimică,
conform procedurilor specifice de laborator.

Microscopia electronică. Microscopia electronică poate fi utilizată pentru a evalua proba pentru un potențial poxvirus, dar având în vedere disponibilitatea testelor moleculare și abilitățile
tehnice înalte și facilitatile necesare, această metodă nu este utilizată în mod obișnuit pentru diagnosticarea poxvirusurilor.

Cultura virală. Izolarea virusului nu este recomandată ca procedură de diagnosticare de rutină și trebuie efectuată numai în laboratoare cu experiență și cu unități de izolare adecvate.
Deoarece aceste metode nu sunt recomandate ca parte a diagnosticului de rutină, detaliile specifice pentru aceste metodologii nu sunt acoperite în acest document.

Interpretarea rezultatelor de laborator

Confirmarea infecției cu MPXV ar trebui să ia în considerare informațiile clinice și epidemiologice. Detectarea pozitivă folosind un test OPXV PCR urmată de confirmarea MPXV prin PCR și/sau
secvențiere sau detectarea pozitivă folosind testul MPXV PCR în cazurile suspectate în zone endemice și non endemice indică confirmarea infecției cu MPXV. Deși este de preferat să se
efectueze teste de confirmare specifice MPXV, detectarea pozitivă folosind testul OPXV PCR este considerată suficientă pentru confirmarea de laborator a cazurilor suspecte în țările
neendemice. Statelor membre li se solicită să notifice imediat OMS cu privire la cazurile confirmate în laborator.

Atunci când prezentarea clinică și epidemiologia sugerează o infecție cu MPXV în ciuda rezultatelor PCR negative, testarea serologică poate fi utilă pentru a investiga în continuare infecția
anterioară în scopuri epidemiologice. O serie de factori ar putea contribui la rezultate fals negative, cum ar fi calitatea slabă a specimenului, manipularea sau transportul greșit sau motive
tehnice inerente testului, de exemplu eșecul extracției ADN.

Pe lângă utilizarea secvențierii pentru diagnostic, datele secvențelor genetice (GSD) pot oferi, de asemenea, informații valoroase pentru a ajuta la înțelegerea originilor, epidemiologiei și
caracteristicilor virusului, de exemplu dacă cazurile apar dintr-o singură introducere sau mai multe introduceri din alte locații. Secvențierea MPXV din cât mai multe probe pozitive de la diferiți
pacienți este recomandată în această etapă. OMS încurajează cu fermitate țările și laboratoarele să partajeze GSD, inclusiv date brute ori de câte ori este posibil, în timp util, prin bazele de
date disponibile cu acces public. GSD poate fi generat folosind metode Sanger sau de secvențiere de generație următoare (NGS).

Managementul riscului biologic

Se recomandă ca toate manipulările probelor provenite din cazuri suspectate, probabile sau confirmate de variola maimuțelor în laborator să fie efectuate conform unei abordări bazate pe
risc. Fiecare laborator ar trebui să efectueze o evaluare locală (adică, instituțională) a riscurilor. La manipularea specimenelor biologice, trebuie îndeplinite cerințele esențiale de biosecuritate,
similare cu cele denumite anterior nivelul 2 de biosecuritate, și trebuie aplicate măsuri de control sporite pe baza evaluării locale a riscurilor.

MPXV poate fi contractat în timpul etapei de prelucrare a probei din material contaminat sau procese defecte. Prin urmare, biosecuritate sporită
sunt recomandate măsuri în plus față de cerințele de bază, inclusiv următoarele în scopul testării clinice fără propagarea virusului:

• Specimenele de la pacienți cu suspiciune de infecție cu MPXV trebuie manipulate într-un cabinet de biosecuritate de clasă I sau II funcțional, înainte de prelevare.
inactivare. Specimenele inactivate în mod corespunzător nu necesită un cabinet de biosecuritate.

• Personalul de laborator trebuie să poarte EIP adecvat, în special pentru manipularea probelor înainte de inactivare. • Acolo unde este necesară

utilizarea unei centrifuge pentru o procedură, trebuie utilizate cupe de siguranță sau rotoare sigilate.

Ar trebui luate în considerare măsuri suplimentare de control pentru procedurile specifice, inclusiv procedurile de formare a aerosolilor, în conformitate cu evaluarea locală a riscurilor. Pentru
mai multe informații despre cerințele de bază de biosecuritate și măsurile de control sporite, vă rugăm să consultați cea de-a patra ediție a Manualului de biosecuritate al OMS (13).

Sănătate la locul de muncă

Diverse vaccinuri împotriva variolei, care conțin virusul vaccinia, oferă protecție încrucișată împotriva altor OPXV, inclusiv variola maimuței, prin urmare, autoritățile naționale de sănătate ar
trebui să efectueze o evaluare a riscurilor și să ia în considerare dacă organizează imunizarea lucrătorilor din domeniul sănătății, inclusiv personalul de laborator și alt personal care este expus
riscului de apariție. este necesară expunerea la indivizi sau specimene cu MPXV. (14). Un vaccin nereplicabil constând din tulpina modificată de vaccinia Ankara cunoscută sub numele de MVA-
BN a fost aprobat pentru prevenirea variolei (care a fost declarată eradicată în 1980) în 2013.

-3-
Machine Translated by Google
Testare de laborator pentru virusul variolei maimuțelor: îndrumări intermediare

În 2019, a fost aprobat și pentru prevenirea variolei maimuțelor de către două autorități de reglementare stricte. Acest vaccin poate fi luat în considerare și
pentru prevenirea variolei maimuțelor în mediul profesional. Un medicament antiviral a fost aprobat pentru tratamentul variolei și al maimuței.
Îndrumări cu privire la imunizare și tratament vor fi furnizate separat.

Raportarea cazurilor și a rezultatelor testelor

Laboratoarele ar trebui să respecte cerințele naționale de raportare. Toate rezultatele testelor, pozitive sau negative, ar trebui raportate imediat autorităților
naționale. Statelor părți la RSI li se reamintește obligațiile lor de a împărtăși cu OMS informațiile relevante de sănătate publică pentru evenimentele pentru
care au notificat OMS, utilizând instrumentul de decizie din anexa 1 la RSI (2005) (15).

Rețea globală de laboratoare

Accesul la testarea de laborator în timp util și precisă a probelor din cazurile investigate este o parte esențială a diagnosticului și supravegherii acestei
infecții emergente. Toate țările ar trebui să aibă acces la teste fiabile fie la nivel național, fie prin trimitere către laboratoare din alte țări care doresc și sunt
capabile să efectueze diagnosticul OPXV sau MPXV. OMS, prin birourile sale regionale, poate ajuta statele membre să acceseze teste prin trimitere. Acolo
unde este cazul și efectuată în siguranță, inactivarea probelor în laboratorul local poate facilita trimiterea și ușura provocările logistice. Țările sunt încurajate
să-și împărtășească datele secvenței pentru o mai bună înțelegere a focarului actual. Centrele SUA pentru Controlul și Prevenirea Bolilor sunt Centrul
Colaborator al OMS pentru Variolă și Alte Infecții cu Poxvirus (Statele Unite ale Americii) și Instituția Federală de Cercetare Bugetară - Centrul de Cercetare
de Stat pentru Virologie și Biotehnologie, „VECTOR” (Federația Rusă) este OMS Centrul Colaborator pentru Diagnosticarea Ortopoxvirusului și Depozitul
pentru Tulpinile de Virus Variola și ADN.

Proces și Metodologie

Acest document a fost elaborat în consultare cu experți externi la nivel mondial în domeniul OPXV și alte expertize de laborator. De asemenea, au fost
consultați personalul OMS din întreaga organizație cu expertiză în diagnosticul de laborator, epidemiologie și management clinic. Această versiune a ghidului
încorporează cele mai recente înțelegeri și caracteristici ale virusului și abordează întrebările și problemele primite de la birourile de țară și regionale ale
OMS și de la alte canale.

Limitări

Acest ghid servește pentru a oferi recomandări intermediare pentru diagnosticarea infecției cu MPXV în contextul focarului actual de mai multe țări din țările
neendemice din mai multe regiuni ale lumii (mai 2022). OMS va emite actualizări suplimentare ale acestor îndrumări intermediare, dacă este necesar. Acest
ghid va fi actualizat pe măsură ce devin disponibile informații mai specifice despre epidemiologia acestui focar.

Planuri de actualizare

OMS lucrează cu experți din întreaga lume și continuă să monitorizeze situația îndeaproape pentru orice modificări care ar putea afecta acest ghid interimar.
OMS va emite o nouă actualizare. În caz contrar, acest ghid intermediar va expira la un an de la data publicării.

Colaboratori

Colaboratori externi cu expertiză în domeniu: Meera Chand, Daniel Bailey, Claire Gordon, Tommy Rampling și Susan Hopkins, UKHSA,
Regatul Unit al Marii Britanii și Irlandei de Nord; Rinat Maksyutov, VECTOR, Federația Rusă; Andreas Nitsche, Institutul Robert Koch,
Germania; Chantal Reusken, RIVM, Olanda; Marion Koopmans, Centrul Medical Erasmus, Olanda; Francesca Colavita, Anna Rosa Garbuglia, Institutul
Spallanzani, Italia; Jacqueline Weyer, Institutul Național pentru Boli Transmisibile, Africa de Sud.
Colaborator extern: Christina Hutson, CDC, Statele Unite ale Americii.

Sediul OMS și personalul biroului regional colaboratori: Ali Ahmed Yahaya, Amal Barakat, Lisa Carter, Sébastien Cognat, Manish Kakkar,
Kazunobu Kojima, Belinda L. Herring, Rosamund Lewis, Jairo Mendez-Rico, Karen Nahapetyan, Dhamari Naidoo, Bernard Onoja, Mark D Perkins, Jilian Sacks,
Satoshi Shimada, Lorenzo Subissi, Karin Von Eije, Maria Van Kerkhove și Pushpa Wijesinghe.

Declaratie de interese

Experții din rețea au completat un acord de confidențialitate și o declarație de interes. Au fost revizuite formularele de declarație de interese și nu au fost
identificate conflicte cu privire la suportul acestui ghid.

-4-
Machine Translated by Google
Testare de laborator pentru virusul variolei maimuțelor: îndrumări intermediare

Referințe

1. Organizația Mondială a Sănătății. Supraveghere, investigare de caz și urmărire a contactelor pentru Monkeypox [Internet]. Disponibil de la:
https://apps.who.int/iris/bitstream/handle/10665/354486/WHO-MPX-Surveillance-2022.1-eng.pdf

2. Organizația Mondială a Sănătății. Gestionarea epidemilor: fapte cheie despre bolile mortale majore. [Internet]. Disponibil de la:
https://apps.who.int/iris/handle/10665/272442

3. Organizația Mondială a Sănătății. Ghid OMS privind reglementările pentru transportul substanțelor infecțioase 2021-2022 [Internet]. Disponibil de la:
https://www.who.int/publications/i/item/9789240019720

4. McCollum AM, Damon IK. Variola maimuță umană. Boli infecțioase clinice. 2014 15 ian;58(2):260–7.

5. Li Y, Zhao H, Wilkins K, Hughes C, Damon IK. Teste PCR în timp real pentru detectarea specifică a ADN-ului tulpinii virusului variolei maimuțelor din Africa
de Vest și Bazinul Congo. Jurnalul de Metode Virologice. 2010 Oct;169(1):223–7.

6. Schroeder K, Nitsche A. Test PCR multicolor, multiplex în timp real pentru detectarea poxvirusurilor umane-patogene. Sonde moleculare și celulare. 2010
Apr;24(2):110–3.

7. Maksyutov RA, Gavrilova EV, Shchelkunov SN. Diferențierea specifică speciei a virusurilor variolei, variolei și varicelo-zosterilor prin test PCR multiplex în timp
real. Jurnalul de Metode Virologice. 2016 oct;236:215–20.

8. Ropp SL, Jin Q, Knight JC, Massung RF, Esposito JJ. Strategia PCR pentru identificarea și diferențierea variolei și a altor ortopoxvirusuri. J Clin Microbiol.
1995 Aug;33(8):2069–76.

9. Espy MJ, Cockerill III FR, Meyer RF, Bowen MD, Poland GA, Hadfield TL și colab. Detectarea ADN-ului virusului variolei prin LightCycler PCR. J Clin Microbiol. 2002
iunie;40(6):1985–8.

10. Li D, Wilkins K, McCollum AM, Osadebe L, Kabamba J, Nguete B, et al. Evaluarea GeneXpert pentru diagnosticul de variolă umană.
Am J Trop Med Hyg. 8 februarie 2017;96(2):405–10.

11. Townsend MB, MacNeil A, Reynolds MG, Hughes CM, Olson VA, Damon IK și colab. Evaluarea Tetracore Orthopox BioThreat®
test de detectare a antigenului folosind ortopoxvirusuri cultivate în laborator și mostre clinice pentru bolile erupțiilor cutanate. Jurnalul de Metode Virologice.
2013 ian;187(1):37–42.

12. Arhiva europeană a virusurilor. Monkeypox virus [Internet]. Disponibil de la: https://www.european-virus-archive.com/search/node/monkeypox

13. Organizația Mondială a Sănătății. Manual de biosecuritate în laborator, ediția a 4-a [Internet]. 2020. Disponibil de la:
https://www.who.int/publications/i/item/9789240011311

14. Organizația Mondială a Sănătății. Reuniunea Grupului consultativ strategic de experți privind imunizarea, noiembrie 2013 — concluzii și recomandări =
Réunion du Groupe stratégique consultatif d'experts sur la vaccination, noiembrie 2013 — conclusions et recommandations [Internet]. Disponibil de la:
https://apps.who.int/iris/handle/10665/242164

15. Organizația Mondială a Sănătății. Reglementările Internaționale de Sănătate (2005) Ediția a treia [Internet]. Disponibil de la:
https://www.who.int/publications/i/item/9789241580496

-5-
Machine Translated by Google
Testare de laborator pentru virusul variolei maimuțelor: îndrumări intermediare

Anexă. Colectarea și depozitarea probelor

Tipul specimenului Materiale de colectare Temperatura de depozitare Scopul colectării

Material pentru leziuni ale pielii, inclusiv:
Tampoane de exudat de leziune
Leziuni acoperișuri
Cruste leziuni
Tampoane flocate din dacron sau Dați la frigider (2-8 °C) sau congelați (- Recomandat pentru diagnostic
poliester cu VTM sau tampon uscat 20°C sau mai puțin) în decurs de 1 oră
de la colectare; -20°C sau mai puțin după 7
zile

Tampon orofaringian Tampoane flocate din dacron sau Vezi deasupra Recomandat pentru diagnostic, dacă
poliester cu VTM sau tampon uscat este fezabil, în plus față de materialul leziunii
cutanate

Tampoane rectale și/sau genitale Tampoane flocate din dacron sau Vezi deasupra A fi luat în considerare pentru cercetare

poliester cu VTM sau tampon uscat (urmând liniile directoare de etică)

Urină Tub de colectare steril Vezi deasupra A fi luat în considerare pentru cercetare

(urmând liniile directoare de etică)

sperma Tub de colectare steril Temperatura camerei <1h (apoi -20°C sau A fi luat în considerare pentru cercetare

mai mică) (urmând liniile directoare de etică)

Tot sângele Tub de colectare steril cu Vezi deasupra A fi luat în considerare pentru cercetare
EDTA (urmând liniile directoare de etică)

Ser Tuburi de separare a serului Dați la frigider (2-8 °C) sau congelați (- Pentru a fi luate în considerare pentru serologie

20°C sau mai puțin) în decurs de 1 oră pentru a ajuta diagnosticarea sau cercetarea

de la colectare; -20°C sau mai puțin după 7 (urmând liniile directoare de etică)

zile

Plasma tub de colectare cu EDTA Vezi deasupra Pentru a fi luate în considerare pentru serologie

pentru a ajuta diagnosticarea sau cercetarea

(urmând liniile directoare de etică)

© Organizația Mondială a Sănătății 2022. Unele drepturi rezervate. Această lucrare este disponibilă sub CC BY-NC-SA 3.0 IGO licență.

Număr de referință OMS: WHO/MPX/Laboratory/2022.1

-6-