Metode acceptate de reglementare pentru evaluarea BE

Pentru majoritatea produselor generice topice, stabilirea

bioechivalenței necesită demonstrarea echivalenței
farmaceutice și a echivalenței terapeutice. Autorităţile
de reglementare solicită frecvent evaluarea echivalenţei
terapeutice
printr-una din două opțiuni: (i) teste farmacodinamice,
potrivite numai pentru corticosteroizi sau;
(ii) studii clinice comparative ale obiectivelor.
Studiile clinice de evaluare necesită, de obicei, o
analiză randomizată, dublu-orb, controlată cu placebo
și un studiu de grup paralel . Se anticipează că numărul
de subiecții care trebuie incluși în aceste studii clinice
ar trebui să aibă relevanță statistică (n
> 500), deoarece permeabilitatea pielii este afectată de
mai mulți factori și, de asemenea, din cauza
eficacitatea terapeutică modestă a unor produse de
referinţă. Datorită complexității lor, acestea
studiile sunt simultan cea mai scumpă parte a cercetării
și dezvoltării produselor generice topice
programele și cel cu riscuri mai mult implicate. Din
aceste motive, mulți autori afirmă
că studiile clinice sunt metoda cea mai puțin precisă,
sensibilă și reproductibilă
demonstra bioechivalența.
Testele farmacodinamice constituie o alternativă la
studiile clinice ale obiectivelor când
evaluarea bioechivalenței produselor generice topice.
Această metodă se bazează pe proprietățile de
vasoconstricție ale corticosteroizilor care sunt capabili
să inducă o piele locală
răspuns de albire.

Metode alternative pentru evaluarea BE a Produselor Generice Topice

2.2.1. Microdializa

Microdializa este o tehnică in vivo în care concentrațiile medicamentului sunt continuu

monitorizate într-un țesut folosind o sondă de dializă semipermeabilă, goală și ultrasubțire plasată
în derm.
Structura sa poroasă acționează ca un „vas artificial”, permițând schimbul de molecule difuzabile
din fluid extracelular în sondă și invers. De obicei, forma și dimensiunea porilor sondelor sunt
selectate în mod corespunzător cu substanța activă studiată.
Microdializa este un instrument promițător în cercetarea bioechivalenței dermice, deoarece
permite determinarea în timp real a diferiților parametri farmacocinetici, cum ar fi absorbția,
timpul de înjumătățire, metabolism, eliminare. Un avantaj semnificativ al acestei tehnici este
capacitatea sa de a reflecta o creștere a permeabilității pielii bolnave, așa cum a demonstrat
lucrările lui García Ortiz și ale colaboratorilor (García Ortiz et al., 2009, 2008).

Mai multe locuri de prelevare ale aceluiași voluntar pot fi studiate simultan și detectarea acestora
biomarkeri specifici produși ca răspuns la stimulii medicamentului sunt de asemenea posibili.
Cu toate acestea, microdializa are unele limitări intrinseci, inclusiv (i) dificultatea de a evaluează
formulările topice cu doze mici (cum ar fi corticosteroizii), (ii) experimentele sunt de obicei
limitat la 8-10 ore, deoarece sonda induce inflamarea țesuturilor, (iii) dificultate în a reproduce cu
acuratețe introducerea și fabricarea sondei, (iv) dificultate selectați un debit adecvat. În plus,
monitorizarea foarte lipofilă și legată de protein substanțele pot fi, de asemenea, provocatoare, în
ciuda utilizării unei bobine deschise în această situație sonda poate depăși dificultatea abordată.
Astfel de sonde sunt utilizate în flux deschis microperfuzia, o tehnică care împărtășește aceleași
principii ca și microdializa, totuși, în această metodă lichidul interstițial este colectat continuu
fără a necesita a membrana (Abd et al., 2016). Chiar dacă compoziția chimică sau dimensiunea
analitului este nu mai este un obstacol, probele de microperfuzie cu flux deschis sunt din același
motiv mai multe complicat de procesat decât probele de microdializă și necesită un pre-tratament
(Yacobi et al., 2014). Schimek și colaboratorii au încercat să abordeze această problemă prin
dezvoltarea unui analiză de spectrometrie de masă în tandem lichidă de înaltă rezoluție, de
performanță ultra-înaltă metodă. Rezultatele lor sunt destul de promițătoare, deoarece au reușit să
obțină un rezultat remarcabil limita inferioară de cuantificare, care, la rândul său, a oferit o
acuratețe și precizie excelente pentru cuantificarea concentraţiilor scăzute uzuale caracteristice
microperfuziei deschise mostre

Metode dermatofarmacocinetice
Metoda dermatofarmacocinetică, denumită în mod obișnuit stripping bandă, este a procedură
minim invazivă in vivo în care benzile de bandă sunt aplicate secvenţial şi îndepărtat pe suprafața
pielii. Prin această tehnică straturile stratului cornos sunt colectate în fiecare bandă de bandă,
conținutul acestora fiind prelucrat de metode analitice adecvate. Presupunerea de principiu a
acestei proceduri este că cantitatea de medicament colectată în benzi de-a lungul timpului,
reprezintă rata și amploarea medicamentului în piele. Cu alte cuvinte, această metodă permite
determinarea profilului dermatofarmacocinetic al medicamentului, care poate fi folosit în
continuare pentru a compara produsul de testat (generic) cu referința produs. În 1998, FDA a
emis un ghid interimar de îndepărtare a benzii pentru a evalua bioechivalența produselor
medicamentoase topice. Protocolul sugerat impunea îndepărtarea benzii de piele trebuie efectuată
în nu mai puțin de opt locații, fiind primele patru folosite pentru caracterizare faza de absorbție a
medicamentului și locurile rămase pentru a descrie faza de eliminare. Îndrumarea a sugerat că
procedura de îndepărtare a benzii ar trebui făcută în momente diferite puncte, definite anterior în
conformitate cu perioada de echilibrare a medicamentelor (FDA, 1998). Cu toate acestea, din
cauza rezultatelor contradictorii cu aceleași disponibile commercial gel de tretinoin, FDA a retras
acest ghid în 2002. Mai multe rapoarte au abordat principalele probleme ale tehnicii, care au
dictat lipsa acesteia reproductibilitatea. În primul rând, rezultatele pot fi afectate dacă stratul
cornos nu este locul de acțiune, dacă calea foliculară este o cale de penetrare relevantă pentru
produsul testat iar dacă funcţia de barieră este compromisă. În al doilea rând, ghidul nu a oferit o
perspectivă solidă asupra cantitatea/adâncimea stratului cornos care ar trebui colectată în benzile
de bandă. Motivate de gama de metode, mai multe grupuri de cercetare, precum și autorități de
reglementare, au continuat să dezvolte noi protocoale capabile să minimizeze complexitatea
procedurii și, în același timp, să crească reproductibilitatea acesteia. O strategie de optimizare
deosebit de relevantă a tehnicii de stripare a benzii se referă la abordarea „de două ori”,
dezvoltată de profesorul Richard H. Guy și profesorul Annete Bunge. Principalele modificări ale
acestei noi proceduri sunt următoarele: (i) se analizează un singur timp de preluare și un singur
timp de eliminare; (ii) autorii au dezvoltat proceduri stricte de curățare care asigură că excesul de
formulă este îndepărtat în mod corespunzător înainte de întinderea benzii; (iii) îndepărtarea
aproape întregului strat cornos în timpul experimentului (și, prin urmare, a majorității, dacă nu a
întregului medicament); și, în final, (iv) metoda nu aruncă primele benzi de bandă (Benson și
Watkinson, 2012; N’Dri-Stempfer și colab., 2008). Datorită simplității metodei, procedura este
mai puțin sensibilă la diferențele interlaboratoare.
Mai mult, sunt necesari mai puțini subiecți, deoarece fiecare voluntar este capabil să furnizeze
mai multe măsurători repetate și, astfel, sporind puterea statistică a analizei. O lucrare interesantă
a lui Cordery și colaboratori, a comparat rezultatele metodei de stripare a benzii (folosind
metodologia descrisă anterior), cu studiile de permeație in vitro pentru a evalua
biodisponibilitatea a trei formulări topice marcate de diclofenac cu diferite concentrații (1%, 2%
și 3). %) și diferite forme de dozare (soluție și geluri). Rezultatele de stripare a benzii obținute au
putut să coreleze performanța mai mare a unei formulări (o soluție de diclofenac 2%), care avea
un amplificator de permeație cunoscut (DMSO), absent în celelalte două. formulări. Ambele
metode – permeația in vitro și striparea pe bandă – au dezvăluit rezultate similare, consolidând
potențialul acestor tehnici de a genera informații complementare, utile în timp ce se evaluează
biodisponibilitatea medicamentelor topice.