Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
Curs 3 MG Structura Genei Oct 2010
Curs 3 MG Structura Genei Oct 2010
GENELOR
Conf. dr. E.V. GORDUZA
11
U.M.F IAI
un segment de cromozom,
precis delimitat,
continuu (indivizibil),
ocup o poziie fix,
numit locus*
determin un anumit caracter
GENA =
GENA X
locus
CARACTER
Cromozom
Polialelie
U.M.F IAI
GENA
PROTEIN
mutaie 1
CARACTER
Culoarea ochilor
(ochi negri)
mutaie 2
Gene alele
M1
Variant / alel
normal
OCHI ALBATRI
M2
Variant / alel
anormal
ALBINISM OCULAR
U.M.F IAI
U.M.F IAI
HETEROZIGOI COMPUI
U.M.F IAI
U.M.F IAI
gene
A
cromozom
U.M.F IAI
Genele nealele,
- situate foarte aproape una de alta pe
acelai cromozom,
- nu segreg (nu se separ) n meioz i
- se transmit mpreun (n bloc) de la
prini la descendeni.
meioz
gamei
U.M.F IAI
gene marker
U.M.F IAI
DEZECHILIBRUL DE NLNUIRE
Uneori o gen mutant (morbid) (B) se
asociaz mai frecvent cu o anumit alel a
locusului marker = asociere alelic
preferenial sau dezechilibru de
nlnuire
Ex.: 85% dintre bolnavii cu hemocromatoz
ereditar (HE) din Europa au o mutaie
unic (n codonul 282 din gena HFE) care
se asociaz cu alela HLA A3
Explicaie: cei mai muli bolnavi cu HE
provin dintr-un strmo comun (efect de
fondator) care a avut gena mutant
asociat cu HLA A3
Prezena mutaiei HE a avut efecte benefice
n trecut, cnd alimentaia era srac n fier
Hemocromatoza ereditar
Boal ereditar (AR)
frecvent, 1:400
Absorbie crescut de fier
ce produce acumulare
excesiv de fier n ficat
(ciroz), cord (insuficien
cardiac), pancreas
(diabet), piele
(pigmentaie bronzat),
glande endocrine.
Gena HFE pe cromozomul
6p lng gena HLA A
10
U.M.F IAI
11
U.M.F IAI
INTERSEXUALITATE
PHF prin deficit de
21-hidroxilaz (AR)
12
Hiperplazie
suprarenalian
Hipofiz
Mecanism de feed-back
negativ
SUPRARENAL
Deficit de 21-hidroxilaz
Blocarea sintezei
de glucocorticoizi
Blocarea sintezei de
mineralocorticoizi
Deficit de cortizol
Deficit de aldosteron
Rspuns inadecvat
la infecii i stress
Conversia cvasicomplet a
colesterolului n androgeni
Exces de androgeni
13
U.M.F IAI
DIAGNOSTIC PRENATAL
prin nlnuire genic
?
Risc 25%
INTERSEXUALITATE
PHF prin deficit de
21-hidroxilaz (AR)
14
U.M.F IAI
15
U.M.F IAI
?
Risc 25%
16
U.M.F IAI
?
Risc 25%
17
U.M.F IAI
18
U.M.F IAI
CO
Profaza
meioz I
Gamei
M
recombinani
19
U.M.F IAI
MECANISM CO:
- sinapsa (gen la gen) a
cromozomilor omologi (n zigoten);
- ncruciarea cromatidelor (chiasm);
- ruperea lor la locul de contact +
schimb EGAL de gene
- rezult o nou dispoziie a genelor
parentale = RECOMBINARE GENIC
OMOLOAG.
Recombinarea genic omoloag SURS
IMPORTANT DE VARIABILITATE.
20
U.M.F IAI
CARACTERISTICILE CO:
Recombinrile genice omologe,
produse n meioz prin CO, sunt
fenomene aleatorii i
imprevizibile;
frecvena de producere a CO ntre
dou gene/ loci este direct
proporional cu distana fizic
dintre ele; aplicaii n
cartografierea genic.
21
U.M.F IAI
IMPORTANA CUNOATERII
CO
CO INEGAL:
mperechere greit a unor secvene
asemntoare dar neomologe, situate
pe cromosomii omologi prin CO
schimbul inegal de segmente
deleii i duplicaii genice.
RECOMBINARE OMOLOAG NEALELIC
BOLI GENOMICE.
22
U.M.F IAI
U.M.F IAI
24
U.M.F IAI
1.1.REGIUNEA CENTRAL
transcris integral n ARN
mesager precursor (ORF*);
alternana de secvene
codante = exoni i
necodante = introni
ncepe cu:
- situsul de iniiere al
transcripiei (SIR sau
INR) i
- regiunea netrasnlat
5UTR ce se ncheie cu
codonul iniiator ATG
Situs de
iniiere al
transcripiei
codon iniiator
5-CCAGCCATG-3
25
* ORF=
U.M.F IAI
EXONII
secvene transcrise
n pre ARNm i
pstrate n ARNm
matur.
Regiuni codante pt
anumite pri din
protein = domenii.
26
U.M.F IAI
INTRONII
(secvene intercalare=IVS)
Secvene necodante
Transcrise iniial n preARNm i
apoi decupate precis i
ndeprtate din ARNm matur,
alctuit numai din asamblarea
exonilor (matisare)
ncep cu 5 GT i sfresc cu
AG 3 semnale pentru
enzimele implicate n matisare
decupare precis.
Rol puin cunoscut intervin
probabil n matisarea
alternativ (selecia anumitor
exoni)
27
U.M.F IAI
Regiunea central se
termin cu o secven
3UTR necodant ce
conine:
Unul din codonii stop (TAA;
TAG, TGA)
Situsul de terminare al
transcripiei (AATAAA)
Situsul de poliadenilare
locul de desprindere a
moleculei de ARNm sintetizat
i adugare unui segment
poliadenilic (rol n stabilitatea
i transportul ei din nucleu)
28
U.M.F IAI
1.2. REGIUNILE
LATERALE
Flancheaz regiunea
central (ORF)
Netranscrise
Rol de reglare a
transcripiei
29
U.M.F IAI
ANATOMIA UNEI
GENE CARE
CODIFIC PROTEINE
PROMOTOR
Situs de specificitate tisular
Situs de modulare a activitii genice
Servete la:
iniierea transcripiei - (fixarea ARN polimerazei)
reglarea anumitor gene n anumite esuturi (specificitate tisular),
n anumite stadii de dezvoltare (specificitate temporal) sau la
anumite semnale / stimuli din mediu (ex. hormoni)
Reglarea intensitii transcripiei
30
U.M.F IAI
REGIUNEA LATERAL
5
U.M.F IAI
b. REGIUNEA LATERAL 3
ARNm.
32
U.M.F IAI
2. TIPURI DE GENE
2.1. Gene comune i gene
specifice
Gene comune - ubicuitare
(housekeeping genes)
Se exprim n toate celulele.
Codific proteine
indispensabile funciilor celulare
fundamentale.
Trasncripie continu, la nivel
sczut.
Gene specifice:
Expresie limitat spaial
(anumite esuturi / celule) sau
temporal (anumite stadii)
Codific proteine specifice
33
U.M.F IAI
U.M.F IAI
TEHNOLOGIA ADN
a ianugurat era ingineriei
moleculare cu multiple i
importante aplicaii practice:
analiza structurii, cartografierii
lu funciei genelor;
elucidarea patogeniei bolilor
genetice i dobndite (infecii,
cancere);
diagnosticul bolilor:
preimplantator, prenatal,
presimptomatic;
biosinteza unor molecule
terapeutice (insulin, hormon de
cretere, eritropoietin etc)
tratamentul bolilor genetice i
terapia genic
35
U.M.F IAI
1. CLONAREA ADN
Clonarea ADN este amplificarea selectiv a unei
gene sau fragment de ADN prin multiple runde de
replicare care vor produce un numr mare de copii a
fragmentului respectiv, ce vor permit analiza structurii i
funciei sale.
2 tipuri majore de clonare:
Celular, in vivo, utilizeaz mecanismul natural de replicare
a unor fragmente de ADN obinute prin diferite metode i
introduse cu ajutorul unor vectori (plasmide, bacteriofagi,
cromozomi artificiali) n celule gazd (bacterii, levuri)
Acelular, in vitro, folosind o reacie de plomerizare n lan
(PCR)
36
U.M.F IAI
Trei metode:
(1). Secionarea ADN
genomic, cu ajutorul
enzimelor de restricie;
Enzimele de restricie (Pr.
Nobel, 1978) recunosc i taie
ADN la nivelul unor secvene
nucleotidice specifice
(situsuri de restricie)
producnd fragmente de ADN
cu capete adezive.
37
U.M.F IAI
U.M.F IAI
U.M.F IAI
40
U.M.F IAI
41
U.M.F IAI
U.M.F IAI
U.M.F IAI
U.M.F IAI
45