MEDII DE CULTURA

• suporturi materiale si nutritive care servesc la

cultivarea bacteriilor

• amestecuri de substante care asigura

cultivarea microorganismelor
 Scopuri
• Izolarea in cultura pura
• Identificare
• Diagnostic, tratament
• Producerea industriala a unor substante
(prepararea vaccinurilor)
• Controlul sterilitatii sau incarcarcaturii
microbiene a unor elemente de mediu (apa,
alimente)
 Conditii
1. Surse de C, N, apa, substante minerale, energie,
substante nutritive, factori de crestere

2. pH optim, temperatura optima

3. Aero/anaerobioza

4. Sterile
 Ingrediente

• Peptona
• Extracte sau infuzii de carne
• Agenti de solidificare: agar
• Indicatori de pH: turnesol, rosu fenol
• Agenti selectivi
• Zaharuri
 Prepararea mediilor de cultura

• Amestecul ingredientilor: proportie, ordinea

indicata
• Determinarea si ajustarea pH-ului
• Repartizarea in recipiente adecvate
• Sterilizarea
• Controlul sterilizarii si al calitatii mediului
Clasificarea mediilor de cultura
Dupa consistenta: lichide
solide
semisolide

Dupa provenienta: naturale

sintetice

Dupa compozitie si scop: simple

complexe
speciale
 Clasificarea mediilor de cultura
• Medii complexe
– de utilitate generala: - uzuale
- cu proteine native
– Medii speciale
• selective
• de imbogatire
• anaerobi
• teste biochimice
Medii simple: Apa peptonata
Bulion simplu
Geloza simpla

Medii complexe: bulion sange

geloza sange
geloza chocolatie
 Medii lichide- bulion simplu

• Categoria: Mediu de
bază
• Componente: macerat
de carne + peptonă +
NaCl 0,5%
• Utilizare: pentru
germeni nepretenţioşi
 Geloza simpla
• Categoria: Mediu de bază
• Componente: bulion simplu + agar-agar
 Geloza simpla
• Categoria: Mediu de bază
• Componente: bulion simplu + agar-agar
 Geloza lactozata

• Categoria: Mediu
diferenţial
Componente:
geloză simplă +
lactoză + albastru
bromtimol
• Utilizare: studierea
fermentării lactozei
 Geloza sange

• Categoria:
Mediu compus
• Componente:
geloză simplă
răcită la 45°C +
sânge
defibrinat 10-
20%
 Geloza socolatie

• Categoria: Mediu
special
• Componente:
geloză simplă răcită la
60-80°C + sânge
• Utilizare: cultivarea
neisseriilor,
hemofililor
 Mediul Chapman

Categoria: Mediu
selectiv şi diferenţial
(evidentiaza o proprietate
biochimica a tulpinii)
Componente: geloză
simplă + NaCl 7,5% +
manitol + roşu fenol
Utilizare: selectiv
pentru stafilococ
 Medii folosite pentru enterobacterii
(agar, lactoza, indicatori de pH)
 Drigalski
 Istrate
 McConkey
 Levine

Bacteriile care degradeaza lactoza din mediu =

lactozo pozitive
Bacteriile care nu degradeaza lactoza din mediu =
lactozo negative
 Mediul Levine

• Categoria: Mediu selectiv

şi diferenţial
• Componente:
geloză simplă + eozină +
lactoză + albastru de
metilen
• Utilizare: cultivarea
enterobacteriilor (E.coli)
 ADCL (Leifson)

• Categoria: Mediu
selectiv şi diferenţial
• Componente: geloză
simplă + săruri biliare +
lactoză + roşu neutru
• Utilizare: cultivarea
shigelelor şi salmonelelor
• Mediul BSA: vibrionul holeric

• Mediul Chapman : stafilococi

• Mediul Lowenstein-Jensen: bacilul TBC

• Mediul OCST: bacilul difteric

• Mediul Sabouraud: fungi

 Mediul Muller - Hinton
• Categoria: Mediu special
• Utilizare: Efectuarea antibiogramelor
 Mediul OCST
• Categoria: Mediu
de îmbogăţire
(favorizeaza X
bacteriilor, mai ales
cand acestea sunt in
concantratie mica)
• Componente: ou +
cisteină + ser +
telurit de potasiu
• Utilizare: cultivarea
bacililor difterici
 Mediul Sabouraud

• Categoria: Mediu special

• Componente:
geloză simplă +
maltoză/glucoză +
antibiotice

• Utilizare: cultivarea
fungilor
Mediul Lowenstein-Jensen
 Metode de insamantare

• Insamantare = punerea in contact a unei

culturi bacteriene sau a unui produs patologic
cu mediile de cultura.
• Izolare = repicarea unei singure colonii pe
alte medii de cultura cu scopul de a obtine
cultura pura
• Cultura bacteriana = totalitatea bacteriilor
crescute in/pe suprafata unui mediu de
cultura
 Tehnici de insamantare
• Tehnica insamantarii prin epuizare:
– Scop: obtinerea coloniilor izolate
• Insamantarea prin intepare (pe medii solide
aflate in tuburi)
• Insamantarea in panza
 Caracterele culturii microbiene pe medii solide
• Colonia= ansamblu localizat, alcatuit din populatie
pura de bacterii provenite dintr-un singur parental.

Pe mediu solid se descrie:

- forma coloniei - producerea de pigment
- marimea coloniei - consistenta coloniei
- suprafata coloniei - emulsificabilitatea
- marginile coloniei - mirosul culturii
Pigment
 Caracterele culturii microbiene pe medii solide
• Colonia= ansamblu localizat, alcatuit din populatie
pura de bacterii provenite dintr-un singur parental.

Colonii S (smooth)
• Colonii R (rough): B.anthracis, C.diphteriae,
M.tuberculosis
MYCOBACTERIUM
TUBERCULOSIS PE
MEDIUL LOWENSTEIN
 HEMOLIZA
STAFILOCOC
- α COMPLETA
- β CALD-RECE
β α (se clarifica la 4°C)

STREPTOCOC
- α INCOMPLETA

VERZUIE
- β COMPLETA
 Clasificare – hemoliza pe geloza sange

• hemoliza β:
= streptococi β
-hemolitici
• hemoliza  -
incompleta, verzuie
• streptococi γ -
nehemolitici,