Analiza microbiologica a apei

Conditii de potabilitate a apei

Pentru a fi potabila apa trebuie sa indeplineasca anumite conditii:

Organoleptice (gust, miros)
Fizice (temperatura, turbiditate, culoare, pH,
radioactivitate, conductibilitate electrica)
Chimice (substante organice, anorganice,
subst.ce dau duritatea apei saruri de Ca si Mg)
Bacteriologice


Conditii bacteriologice
Flora proprie = germeni psihrofili (criofili)
germeni care se dezv.la 22C (saprofiti)

Flora mezofila germeni care se dezv. la
37C (germeni de provenienta umana si
animala)
Indicatori bacteriologici de contaminare a
apei
1) Nr. total de germ. la 37C / 1 ml apa
2) Nr. probabil de germeni colli
3) Nr. probabil de Streptococi intestinali
(enterococi de grup D) saprofiti ai omului
4) Det. bacteriofagilor enterici (anti-Esherichia
colli, anti-Salmonella thyphi)
5) Det. germ. sulfitoreducatori (Clostridii)
6) Det. germ. care se dezv. La 22C
Analizele curente si obligatorii: 1), 2) si 3)
Metode de recoltare
Apa se recolteaza in recipiente de sticla
sterilizate la 180C
Daca se recolteaza apa de robinet se
sterilizeaza flaconul cu tiosulfat care neutraliz.
Cl din apa
Transp.flacoanelor: in conditii izoterme la +4C
Analiza microbiologica se face la max.6-8 ore
din momentul recoltarii probelor.
Determinarea NTG la 37C
din proba de apa se fac dilutii zecimale;
din fiecare dilutie se insamanteaza cate 1 ml
pe o placa Petri peste care turnam geloza
simpla; se fac miscari de rotatie in plan
orizontal pt.ca geloza sa inglobeze apa
insamantata.
se incubeaza la 37C, 48 ore
NTG 37C / ml = n x d , n= nr.colonii
N d= inversul dilutiei
N= nr.placi

Nr. probabil de germeni colli
2 teste : a) de prezumtie
b) de confirmare
a) intr-o eprubeta cu un mediu lichid cu lauryl
sulfat + lactoza in care se aseaza un tub de
fermentatie Durham cu gura in jos (rol:
capteaza gazul care se form.prin fermentarea
lactozei)
Se incub. la 37C, 48 ore (test de imbogatire)

Reactie (+) virarea culorii in galben

Nr. probabil de germeni colli

b) Confirmarea prezentei germ.colli: insamantare
cu ansa din tubul Durham (+) la testul anterior
pe un mediu solid Levine specific pt.colli
Se incub. la 37C, 24 ore
Confirmare colonii de germ.colli in picaturi
de fuxina (rosii-violet in centru, cu irizatii spre
periferie)
! Caracteristic pt.germ.colli: aparitia unui reflex
verde-metalic la supraf.mediului

Nr. probabil de enterococi (Streptococi
fecali)
Germ.saprofiti ai intestinului
Se gasesc in nr. mult mai mic decat colli
(10%, restul colliformi)
Rezista mai mult in apa decat colli riscul
transmiterii enterovirusurilor
Evidentiati prin 2 teste:
a) de prezumtie: se insamanteaza apa pe
bulion cu azida de sodiu; se incub. la 37C,
48 ore
Reactie (+) aparitia unui sediment alb care la
agitare nu se descompune
Nr. probabil de enterococi (Streptococi
fecali)
b) Testul de confirmare: strapungem cu ansa
sedimentul format, insamantare pe acelasi
mediu de cultura + indicator de culoare =
brom-crezol (violet); se incub. la 44,5C, 24
ore
Confirmare virarea culorii de la violet la
galben si aparitia de sediment
Analize complementare
- in epidemii hidrice sau cand se alege o noua sursa de apa
Det. bacteriofagilor enterici (anti-Esherichia
colli, anti-Salmonella thyphi)

Det. germ. sulfitoreducatori (Clostridii)

Det. germ. care se dezv. la 22C


Determinarea bacteriofagilor enterici
Rezista in apa mai mult decat bacteriile
Se pot evidentia chiar daca germ.respectiv a
disparut
Proba de apa se insamanteaza cu ansa dintr-
o cultura de Esherichia colli, apoi pe geloza
simpla, se incub. la 37C, 24 ore
Daca in proba de apa exista bacteriofagi
zone de liza a coloniilor (liza clara completa,
liza incompleta, liza in plaja) apa nepotabila !
Determinarea germ.sulfitoreducatori
(Clostridii)
Anaerobi sporulati cu dubla provenienta: naturala de
pe sol si intestinala.
Prezenta lor in apa contaminare f.veche
Se foloseste un mediu solid cu sulfit de Na si FeCl2
care se toarna in eprubete; se insamanteaza cate 1
ml apa, se incub.la 37C
Reactie (+) aparitia de colonii negre (se formeaza
FeS)
Confirmare: insamantare cu ansa din coloniile negre pe
un mediu cu lapte; se incub.la 37C in conditii de
anaerobioza formarea unui cheag = prezenta
Cl.perfringens in apa

Determinarea germ.la 22C
Se gasesc in mod natural in apa,
determinarea florei saprofite arata gradul de
poluare: cand apa are germ.supraadaugati
flora saprofita e inhibata.
Normal flora supraadaugata: endogena = 3:1
Se insamant.pe geloza simpla, incub.la 22C

NTG 22C / ml = n x d
N
Norme sanitare privind valoarea
indicatorilor microbiologici in apa potabila
NTG / ml Colliformi/
100 ml
Sulfito-
reducatori
Apa
robinet
d(+)

< 20

0

0
Apa
robinet
d(-)

< 100

3

0
Apa de
fantana

< 300

100

2