Sunteți pe pagina 1din 13

MICROBIOTA NORMALA A CAVITATII BUCALE

-streptococi, stafilococi, bacili difteromorfi, coci Gram negativi si mai rar ciuperci.
-unele din aceste specii sunt patogene (Str. pneumoniae, Neisseria meningitidis, Candida).
-densitatea florei microbiene in cavitatea bucala este foarte mare (la nivelul suprafetei dintilor si
santurilor gingivale- sediul unei bogate flore anaerobe)
*lipsa igienei orale - Streptococcus mutans produce cariile dentare
-(condiii de promiscuitate) apar protozoare ca Entamoeba gingivalis i Trichomonas tenax.
-*Strept. sanguis, Strept. mutans, Strept. mitior si Actinomyces viscosus - colonizeaza preferential
suprafata dentara;
- Strept. salivarius si Veillonella, se localizeaza predilect la nivelul limbii si mucoasei bucale;
-Fusobacterium, Bacteroides, Spirochetele, se concentreaza pe suprafata gingiilor.
*Determinanati ai conditiei microbilogice a cavitatii bucale
- colonizarearea microbian a cavitii orale incepe din momentul angajarii fatului in procesul
nasterii
- conditii favorabile colonizeaza diverse situsuri (conditii nefavorabile sunt eliminate)
Retenia microorganismelor*.
Aderena. bacteriile adera la celulele epiteliale ale mucoaselor, smalul dentar i dentin,
formeaz coagregate intergenerice.
(aderena Streptococcus salivarius la receptori specifici de pe suprafaa limbii i altor esuturi moi
orofaringiene prin fimbrii)

Coagregate: Streptococcus sanguis + Actinomyces naeslundii Streptococcus sanguis sau S.


mutans +Corynebacterium matruchotii i Fusobacterium nucleatum
matricea extracelular vascoasa asigur aderena multor bacterii pe smal i dentin, ca de
pild Streptococcus mutans care formeaz din abunden glucani, sau ali streptococi orali levani. n aderena la dini a actinomicetelor este implicat probabil acidul hialuronic.
Situsuri protectoare permit retenia unor bacterii slab aderente.
fosetele ocluzale, defectele smalului (fisuri .a.) -specii de Veillonella.
matricea polizaharidic format de unii streptococi orali, unele neisserii i actinomicete sau
Rothia dentocariosa pe suprafaa dinilor - rein alte bacterii
*crevasele gingivale - Prevotella melaninogenica, variate treponeme
Eliminarea microorganismelor favorizat dedescuamarea continu a epiteliului malpighian,fluxul salivar, micrile limbii i prilor
moi,masticaia,deglutiia,aciunea abraziv a alimentelor.
in crevasele gingivale- prin fluxul fluidului crevicular i fagocitoz.
*Multiplicarea bacteriilor- factori determinanti;
nutrientii provin din: alimentele ingerate, saliv, celule descuamate, fluidul crevicular, iar unii
sunt de origine bacterian

-capacitatea alimentelor ingerate de a favoriza dezvoltarea microbiotei orale ine de compoziia,


consistena i frecvena ingestiei.
-carbohidraii cu greutate molecular mic i solubili, (zaharoza din zahr, lactoza din lapte)metabolizai direct de microbiota oral, favorizeaz mai ales creterea sau/i retenia
bacteriilor cariogene ale plcii dentare*

-*alimentele macromoleculare cu aciune abraziv i trecere rapid prin gur sunt defavorabile
acumulrii de bacterii orale
-dizaharidele (zaharoz, lactoz) i monozaharidele (glucoz, fructoz) in combinatii solide
-favorizeaz acumularea de plac dentar cariogen*.

Saliva *aminoacizi, glucoz,factori de cretere ( vitaminele)


celulele descuamate (dup liza lor n saliva hipoton)-surs de nutrieni pentru microbiota
oral.
Fluidul crevicular- *vehiculeaz proteine serice i tisulare, aminoacizi, glucoz, vitamine,
fagocite (gingii normale- fluidul crevicular elimin bacteriile neaderente prin splare i
fagocitoz; in boala parodontal acest transsudat prin nutrienii pe care i conine, favorizeaz
nmulirea Treponemelor i speciilor de Prevotella i Porphyromonas din pungile gingivale)
Potenialul de oxidoreducere (Eh)*

-speciile anaerobe - Prevotella, Porphyromonas, Fusobacterium, Treponema i unele specii de


Actinomyces-cresc preferenial sau exclusiv n crevasele gingivale ori pungile parodontale(medii
puternic reducatoare)
-specii de Actinomyces, Campylobacter cresc in microaerofilie
-specii de Neisseria sp., levurile cresc in aerobioza

interespH -streptococii orali i lactobacilii sunt organisme acidogene prin fermentarea


carbohidrailor- dar la pH-ul sub 5,0 realizat postprandial n placa dentar cresc numai
Streptococcus mutans i Lactobacillus casei, cele mai cariogene specii.
Streptococcus salivarius, S. sanguis, S. mitis i Actinomyces viscosus cresc mai lent la pH 5,5
i deloc la pH 5,0.
Candida (Candida albicans) genereaz i tolereaz pH acid, dar nu sunt asociate plcii
dentare, ci mucoaselor orale.
Interaciunile bacteriene*(+-)
Porphyromonas sp. i Prevotella spp. sunt dependente de vitamina K, produs de Veillonella
i de hemina din sange;
Campylobacter spp. i Wolinella sunt dependente de H, produs de Veillonella.
Treponemele cultiv numai n prezena unor amine (putrescein, cadaverin) ori acizi grai
volatili (izobutirat) rezultai din metabolismul unor bacterii anaerobe.
Capnocytophaga spp., Eikenella corrodens i Actinobacillus actinomycetem comitans au
nevoie de cantiti mari de CO2; rezultat din metabolismul bacteriilor anaerobe.
S. sanguis, S. oralis, S. mitis- produc peroxid de hidrogen (H2O2) -limiteaz creterea
bacteriilor anaerobe.
Prevotella ori Porphyromonas -produc bacteriocine bactericide asupra altor tulpini ale propriei
specii ori speciilor nrudite.
Castigarea florei bacteriene bucale

*speciile pionier ale cavitii orale sunt dominate de bacterii aerobe facultativ anaerobe i
microaerofile: Neisseria, Streptococcus salivarius, Streptococcus oralis, Staphylococcus,
Lactobacillus.
la cteva sptmni dup natere -apariia unor specii anaerobe: Veillonella alcalescens,
Fusobacterium spp
*sugarul i copilul- pe smalul dentar se selecteaz i se nmulesc streptococii productori de
biofilm adeziv (n principal glucan): S. mutans i S. sanguis,apar specii de Actinomyces i
Rothia dentocariosa.
adolescentul. dinii definitivi - (fosete ocluzale mai profunde, suprafeele interdentare mai
mari,coletul mai pronunat la jonciunea smalului cu dentina, creterea profunzimii crevaselor
gingivale favorizeaz formarea plcii dentare).
Campylobacter, Actinomyces, Fusobacterium, Leptotrichia, treponeme din crevasele gingivale
se diversific, cresc numeric
adultul -aciunea factorilor disbiotici care dezechilibreaz tot mai mult microbiota climax.
Batranii -edentaia, prin dispariia crevaelor gingivale- reduce numrul i varietatea bacteriilor
anaerobe din gur.
Disbioze care provoaca- carii dentare, boal parodontal, candidoze:

-diet i obiceiuri alimentare- zaharoz, lactoz, glucoz (in diverse produse) -favorizeaz nmulirea
bacteriilor cariogene din placa dentar
-edentaia i proteze insuficient adaptate funcional- accentuarea pliurilor comisurale unde se scurge
i staioneaz saliv favorizeaz o supranmulire a Candidei albicans care poate cauza cheilite
-proteza dentar total- numrul bacteriilor, n special anaerobe, capabile s antagonizeze levurile
este mai mic, iar proteza total separ mucoasa palatin de fluxul salivar i mpiedic aciunea
abraziv a limbii i alimentelor- levurile se nmulesc - candidoza mucoasei palatine.
Placa bacteriana (dentara)
Este un sistem ecologic aderent (biofilm) la suprafata dintilor format dintr-un substrat organic si
un complex bacterian
acumulat mai ales n arii retentive cum sunt: marginea gingival, spaiile interdentare, fosetele
ocluzale
Biofilmul este alcatuit din:-streptococi(60-90%)-dintre bacteriile care colonizeaza smaltul dentar in
primele 4h dupa periaj, coagrega (prin adezine) cu un set de colonizatori timpurii (Actinomices,
Capnocitophaga, Eikenella, Haemophilus, Prevotella, Veillonella), nu coagrega cu colonizatori
tardivi(Porphyromonas gingivalis)
Efecte ale dezvoltrii speciilor pionier i celor din prima succesiune sunt:sinteza de matrice
polizaharidic, modificarea Eh-ului, pH-ului, acumularea de catabolii i ali produi bacterieni care
pregtesc urmtoarele succesiuni bacteriene cu maturarea plcii.
Matricea polizaharidic este produs de streptococii orali (glucanii i levanii), de unele actinomicete
(acidul hialuronic), de Neisseria spp. i Rothia dentocariosa.

Scderea potentialului de oxido-reducere (Eh), acumularea unor catabolii bacterieni -condiii pentru
dezvoltarea n plac a bacteriilor anaerobe foarte exigente: specii de Prevotella, Porphyromonas,
Fusobacterium, Treponema (in cca 7 zile)
pH-ul scade datorita bacteriilor fermentative acidogene(streptococii) dezvoltarea bacteriilor acidofile
(lactobacilii)

Placa supragingivala
streptococii i cocii gram-negativi -colonizare iniial
primii bacili se dispun mpreun cu cocii n monostrat.
bacteriile filamentoase apar dispuse perpendicular pe suprafaa dintelui cu numeroase
microcolonii de coci gram-pozitivi printre ele.
se formeaz agregate bacteriene rezultate prin ataarea Streptococcus sanguis la filamentele
de Corynebacterium matruchotii .
ziua a 14-a placa maturizat = peste 35 de specii microbiene.
Placa subgingivala
placa supragingivala modificari inflamatorii(edemul marginii gingivale)
crestere a
fluidului ce curge in spatiul crevicular gingival schimba compozitia bacteriana a placii
subgingivale(dominat net de bacteriile anaerobe)
Are 3 zone formate din:
bacterii aderente la dinte
bacterii asociate epiteliului
bacterii situate apical
Placa supragingivala
Placa subgingivala
Streptococi orali
S. mutans
+ la +++
0
S. sobrinus
+ la +++
0
S. sanguis
+++
+
S. oralis
++
++
S. Milleri
+ la +++
0
Coci gram-negativi
Neisseria spp.
+
0
Veillonella spp
++
++
Bacili i bacterii filamentoase gram pozitive
Corynebacterium spp.
++
Lactobacillus spp.
+
+/Eubacterium spp.
+
Actinomyces spp.
++
+/- la ++
Rothia dentocariosa
+
Bacili i bacterii filamentoase gram-negative
Porphyromonas gingivalis
0
0la +
Prevotella melaninogenica
+/+/-la +
Fusobacterium spp.
+/+/- la ++
Leptotrichia buccalis
+
Treponema spp.
+/+/- la +++
Actinobacillusactinomycetemcomitans +/0la +
Capnocytophaga ochracea
+/+/- la +

Campylobacter spp.
Eikenella corrodens
Haemophilus spp.
Wolinella spp.
Alte microorgansime
Mycoplasma orale
M. salivarium
Entamoeba gingivalis
Trichomonas tenax

0
+/+
0
0
0
0
0

0la +
+/0la +

+
+
0 la +
0 la +

TARTRUL DENTAR (placa bacteriana mineralizata)


-Saliva=soluie saturat n fosfat de calciu determin calcifierea plcii pe suprafeele dentare din
dreptul canalelor secretorii ale glandelor salivare majore (faa lingual a incisivilor inferiori - canalele
glandulare submaxilare i sublinguale; faa vestibular a molarilor superiori - canalele glandelor
parotide).
-Calcifierea debuteaz ntre 1 i 14 zile de la formarea plcii prin depuneri cristaline de fosfat de
calciu.ncepand din matricea stratului profund al plcii n jurul unor bacterii cum sunt n principal
Corynebacterium matruchotii, dar i specii de Veillonella, Neisseria, Haemophilus, Porphyromonas
sau Prevotella.
-*specii bacteriene predominante : Streptococcus oralis, S. sanguis, actinomicete,constant izolate
mai sunt: Prevotella melaninogenica, Leptotrichia buccalis, Fusobacterium spp., Neisseria, iar
frecvent Selenomonas spp.
-Tartrul se poate forma chiar n interval de numai 2 sptmni, dar devine depozitul cristalin, dur,
caracteristic dup cteva luni.
Suprafaa rugoas a tartrului favorizeaz formarea rapid de plac dentar, care la rndul ei se
calcific i ngroa stratul de tartru,placa bacterian de pe suprafaa tartrului este mai agresiv
asupra parodoniului.
Gingivita (acuta sau cronica)
- initiata de iritatia locala, urmata de invazia microbiana; placa subgingivala este totdeauna prezenta.
-manifestari gingivoragia
- de obicei nu exista durere
Gingivita ulcero-necrotica (boala Vincent)
- initial apar uceratii la nivelul gingiei, afectand prevalent spatiile interdentare
- leziunile ulcerative se extind in suprafata si in profunzime, instalandu-se zone de necroza a
epiteliului cu constituirea de false membrane cenusii (halitoza caracteristica, tulburari de gust si
dureri vii la masticatie)
febra, limfadenopatie regionala si stare generala alterata.
- in absenta tratamentului, infectia se extinde spre faringe si alte tesuturi moi, constituindu-se
gingivo-stomatita gangrenoasa.
Pericoronarita
- inflamarea opercului gingival ce acopera molarul de minte

-se insoteste, frecvent, de trismus ce apare secundar iritatiei maseterilor; nedrenata, infectia se
poate extinde de-a lungul planurilor fasciale spre tesuturile moi.

Sunt 3 grupe de semne care delimiteaza 3 diagnostice de baza:


-sanatos- fara semne de inflamatie,
- fara semne clinice evidente de pierdere aatasarii (insertie epiteliala)

-gingivita prezenta placii bacteriene


- semne clinice de inflamatie
- nu sunt semne evidente ale pierderii atasarii
- marginea gingivala este la nivelul jonctiunii smalt-cement(nu are retractie)
- fara punga adevarata

-periodontita - semne clinice evidente ale pierderii atasarii (punga adevarata)


- semne clinice de inflamatie

Complicatii locale ale paradontitei abcesul paradontal marginal, carii de colet, leziuni
pulpare(pulpite, necroze pulpare, gangrena pulpara, acutizari ale inflamatiei gingiei, retractii
gingivale
Abcesul periodontal (difuz sau localizat)
-

Inchiderea pungii parodontale si reducerea drenajului pungii


este intotdeauna in comunicare cu spatiul periodontal, din care puroiul poate fi evidentiat prin
digitopresiune

Carii de colet apar datorita placii bacteriene, uneori pe zona lacunelor cuneiforme
Pulpitele - bacteriile trec in pulpa din spatiul periodontal, prin apex sau prin canaliculele dentinare
Necroza pulpara afectarea pulpei fara infectarea microbiana (apare prin traumatismul dintelui)
Gangrena pulpara si paradontita apicala- se produc prin punga parodontala care ajunge pana la apex
si infecteaza zona apicala

. Infectiile spatiilor fasciale profunde


infectiile odontogene si cele orofaringiene se pot extinde spre spatiile fasciale din zona
craniana inferioara si portiunea cervicala superioara.
infectii ale spatiilor din jurul fetei (spatiul masticatorilor, bucal, al parotidelor);

infectii ale regiunii suprahioide (submandibular, sublingual, laterofaringian infectii ale regiunii
infrahioide sau gatului (retrofaringian, spatiul pretraheal
Angina Ludwig
infectia unui numar variat de spatii anatomice (sublingual si submandibular)
In 50% - 90% din cazuri, se identifica o origine dentara a anginei, cel mai frecvent fiind implicat
al doilea sau al treilea molar mandibular.
Infectia are forma clinica a unei celulite indurate, rapid extensiva, afectand bilateral planseul
bucal.
se constata o tumefactie ferma, voluminoasa, a spatiului submandibular, impingand limba
spre cerul gurii. De obicei, sunt prezente febra si manifestari sistemice
(sepsis).
CARIA DENTAR=condiie distructiv a es.dentar dur (poate progresa spre inflamaie i
devitalizarea es pulpar, extindere spre aria periapical a dintelui).
Apariia i progresia leziunilor carioase - fenomen complex de interaciune a factorului microbian cu
factori care in de gazd, de regimul alimentar, timp.
ETIOLOGIA CARIEI DENTARE
Bacteriile implicate n iniierea cariei dentare sunt, toate, acidogene.
streptococii din grupul mutans (Streptococcus mutans, Streptococcus sobrinus) au rol principal
(relaie direct ntre numrul de streptococi i dezvoltarea bolii
grupul streptococilor mutans poate fi mprit:
dup tipul carbohidratului de perete n 7 serotipuri notate de la a la g.
dup criteriul omologiei ADN-ului cromosomal, sunt mprii n cinci grupe, notate cu cifre
romane.
toate serotipurile au potenial cariogen, dar tipul c (grup I) pare s fie patogenul cheie n
iniierea cariei dentare la om (S. mutans), maimu (S. macacae) i obolan (S. fetus).
Lactobacillus -bacili gram-pozitivi nesporulai, mari, aranjai izolat sau n lanuri,cultiv pe medii
complexe, creterea fiind favorizat de microaerofilie sau anaerobioz.
din cariile dentinei sunt izolai n numr mare lactobacilii, Eubacterium , Bifidobacterium.
cariile de suprafa radicular - Actinomyces, prezente i n leziunile carioase profunde.
Caria dentar este iniiat prin demineralizarea acid a smalului cauzat de activitile metabolice
ale bacteriilor zaharolitice din plac (streptococii mutans ct i lactobacilii produc mari cantiti de
acid prin fermentarea zaharurilor din alimentele consumate
S. mutans este un mare productor de dextrani extracelulari insolubili, cu care ader ferm la
suprafaa dinilor
Aprecierea riscului cariogen -teste, bazate pe principii microbiologice, clinice, epidemiologice
(determinarea indicelui de corelaie dintre factorul microbian (bacterii i/sau produi ai metabolismului
bacterian) i incidena cariei
Teste curent utilizate pentru aprecierea riscului cariogen (dup Newman i Nisengard, 1989)
Numrul lactobacililor
Snyder
Fosdick
Reductazei
Amilazei
Capacitatea tampon a salivei
Evidenierea streptococilor mutans (cel mai bun)

cuantificarea nefelometric a lactobacililor prezeni n saliv


PCR pentru evidenierea ADN-ului cromosomal la S.mutans
Tratamentul periodontitei
-In periodontita adultului - : Doxici clina, Macrolide, Cefalosporine ,asociate tratamentului
stomatologic local periodontal.
In periodontita avansata- tratament stomatologic de specialitate (debridare mecanica si indepartarea
minutioasa a placii dentare), administrarea concomitenta de Metronidazol( 2 g/zi).
In gingivita ulcero-necrotica,-asocierea de Penicilina G (4-6mil.U/zi) cu Metronidazol (2 g/zi).
In periodontita juvenila-Tetraciclina (2g/zi) (peste varsta de 10 ani), sau Doxiciclina (100 mg/zi), numai
asociat tratamentului stomatologic local
-Tratamentul infectiilor supurative odontogene
terapiei antibacteriane, tratament stomatologic de specialitate: drenajul colectiei, indepartarea
tesuturilor
Penicilina G (6-10 mil.U/zi), in monoterapie sau asociat cu Metronidazol (2 g/zi), administrat
i.v., pe o durata de 10-14 zile.
Cefoxitina (gen. II), in doza de 6-8 g/zi sau Ceftizoxima (gen.III) 2-4 g/zi.
forme clinice fara elemente de gravitate- Amoxicilina ,Augumentin, Ciprofloxacina (in monoterapie sau asociata cu Metronidazol).
In prezenta infectiilor severe (infectii ale spatiilor profunde)includ: o betalactamina un
aminoglicozid (gen.II sau III) Fluorochinolona.
dintre betalactamine se recomanda antibiotice ce fac parte:
fie din grupul Penicilinelor antipseudomonas: Piperacilina + Tazo- bactam (Tazocin) sau
Ticarcilina +Acid clavulanic (Timentin); in ambele cazuri, se administreaza doza maxima:
12g/zi;
fie dintre Carbapeneme: Imipenem/cilastatin (Tienam) - 2g/zi.
Dintre Aminoglicozide: Gentamicina (2x80mg/zi) sau Amikacina
(2x500mg/zi).
Dintre Fluorochinolone: Ciprofloxacina(2x500mg/zi) sau Pefloxa- cina (2x400 mg/ zi).
Observatie: Tratamentul chirurgical, la fel de important ca si cel antibiotic, trebuie aplicat la
momentul oportun si anume, in stadiul de
colectare a focarului supurativ si nu in acela de infectie difuza localizata; daca momentul
inciziei este incorect ales, se va declansa doar bacteriemia (cu risc major de diseminare a
infectiei), fara a se obtine insa si drenajul colectiei purulente.
Actinomicoza
boala infectioasa cu evolutie cronica, determinata de Actinomyces israeli, uzual incadrat in
flora saprofita (endogena) a cavitatii bucale.
Rezervorul de germeni: pacienti cu portaj cronic de specii de Actinomyces in flora saprofita
bucala, gingivodentara.
Factori favorizanti ai bolii:
igiena deficitara a cavitatii bucale;
existenta unor infectii cronice multiple dento-alveolare neglijate;
preexistenta, anterior debutului bolii cu aproximativ 21-30 de zile, a unor manopere
chirurgicale stomatologice neprotejate antibiotic
forme clinice: cervico-faciale, pulmonare, intestinale, cerebrale si, mai rar, chiar sepsis

examen bacteriologic, efectuat din secretia purulenta, insamantat pe medii anaerobe


imbogatite (rezultat tardiv, daca exista o flora aerob- anaeroba);
Tratament - Penicilina G, administrata parenteral, in doze de 2 x 5 mil.U/zi, timp de 4-6
saptamani, pana la remisia com pleta a fenomenelor locale.
Tratament antibiotic alternativ: Augmentin (Amoxiclav), p.o.,
3 x 1 g/zi.
Tratament chirurgical : drenajul abceselor si rezolvarea traiectelor fistuloase, in scopul evitarii
recidivelor
Genul Candida si boala la om
Sunt ciuperci unicelulare care se inmultesc prin inmugurire
Cuprind specii saprofite si patogene pentru om si animale. Candida albicans- cea mai
cunoscuta

Caractere morfologice
-

Celule sferice, ovoide, cu muguri multipolari(blastospori), diametrul=2-15 microni, cu


pseudomicelii simple sau ramificate formate din celule asezate cap la cap de 50-600 microni
lungime
Formatiuni caracteristice sunt clamidosporii =elemente patognomonice celule regulat sferice
cu diametrul de 7-15 microni
Traieste in medii solide si lichide obisnuite, in anaerobioza si aerobioza, la 18-40oC (optim la
30-37oC si medii cu adaus de antibiotice)
Colonii pe medii solide mari, alb-galbui, cremoase

Boala la om:
Candidomicoze, infectii localizate si generalizate, caracterizate prin leziuni variabile ca
intindere, gravitate si aspect histopatologic ale pielii, mucoaselor si viscerelor
- Candidomicoze bucale si peribucale-glosita levurica, stomatita eritematoasa, gingivita,
stomatita pseudomembranoasa, amigdalita levurica, infectie generalizata a mucoasei bucale
- Candidmicoze ale ale pilii si fanerelor
- Candidomicoze genitale
- Candidomicoze genitale
- Candidomicoze viscerale
- Candidomicoze septicemice
- Alergii la Candida
Tehnici utilizate pentru diagnosticul bolilor parodontale
1. Tehnici bazate pe examenul microbiologic al produsului prelevat din punga parodontal:
Examenul microscopic direct
Cultivarea, izolarea i identificarea bacteriilor din leziune
Identificarea unor enzime specifice n prelevatul subgingival
Tehnici imunofluorescente
Latexaglutinarea
ELISA
Numrtoarea leucocitelor n lichidul crevicular
PCR
-

Pentru examenul direct, este prelevat exsudatul inflamator din crevasele gingivale sau punga
parodontal (cnd este deja format), dup ndeprtarea plcii bacteriene supragingivale. Cnd
punga parodontal lipsete i exist doar detaarea gingiei marginale, prelevarea se face cu ajutorul
conurilor din hrtie de filtru sterile, care sunt introduse cu blndee n sulcusul gingival i sunt
meninute cca 1 minut. Apoi, sunt retrase cu grij din cavitatea oral i introduse n tuburi cu mediu
de transport reductor fluid (e.g., bulion thioglicolat) pentru a asigura viabilitatea bacteriilor anaerobe
i microaerofile.
Cnd este prezent punga parodontal, este prelevat coninutul acesteia cu ajutorul unei chiurete
sterile. Punga chiuretat este introdus ntr-un tub cu mediu de transport reductor.
Pentru examenul bacteriologic, tuburile coninnd probele de la pacieni sunt centrifugate,
supernatantul ndeprtat, iar din sediment sunt efectuate:
Preparat umed ntre lam i lamel ce va fi examinat la microscopul cu fond ntunecat pentru
evidenierea treponemelor orale asociate.
Frotiu colorat Gram, pentru examenul citobacterioscopic (prezena i intensitatea reaciei
inflamatorii, categorii microscopice prezente n prob).
nsmnarea pe medii de cultur selective pentru bacilii gram-negativi anaerobi (e.g., WilkinsChalgrene cu vancomicn i acid nalidixic) i pentru Actinobacillus actiomycetemcomitans (e.g., agartripcaz-soia-snge, cu neomicin i bacitracin). Culturile sunt incubate anaerob, respectiv
microaerofil i urmarite 4-7 zile deoarece majoritatea speciilor implicate au cretere lent.
Din coloniile suspectate ca aparinnd patogenilor parodontali (coloniile mici, negre, lucioase pot
aparine speciilor de Prevotella, cele mai mari, brune - speciilor de Porphyromonas etc.) sunt
efectuate:
teste de identificare biochimic,
cromatografie, PCR (dac sunt posibiliti tehnice) - asigur identificarea rapid i precis a
izolatelor din pungile parodontale,
antibiograma, prin metoda diluiilor, cu aflarea concentraiei minime inhibitorii, sau prin metode
rapide, moderne cu determinarea punctelor de ruptur pentru unul sau mai multe antibiotice.
Imunofluorescena cu concentrare de particule identific bacteriile din prob printr-o reacie antigenanticorp ce utilizeaz anticorpi monoclonali marcai cu fluorescein. Msurarea cantitii de
fluorescein absorbit de prob permite i cuantificarea bacteriilor identificate. Fa de metodele
clasice (microscopie, cultivare), dar i fa de alte tehnici imunologice (ELISA, latex-aglutinare),
utilizarea imunofluorescenei pentru diagnosticul bolilor parodontale are mcar dou avantaje: este
rapid (rezultatele sunt obinute n 1-2 ore de la prelevarea produsului) i permite prelucrarea
concomitent a unui numr mare de probe (pn la 400).
Dintre testele enzimatice, mai utilizat este BANA, bazat pe capacitatea Porphyromonas gingivalis i a
altor anaerobi de a hidroliza un derivat sintetic al tripsinei: benzoyl-DL-argininnaftilami| (BANA). Este
un test rapid (necesit 15 minute), colorimetric, care coreleaz bine cu numrul spirochetelor din
prob, fiind util pentru orientarea diagnosticului dar, mai ales, pentru aprecierea prognosticului bolii.
De exemplu, un test BANA intens pozitiv sugereaz un numr mare de spirochete n prob i evoluia
nefavorabil a bolii.
Cuantificarea polinuclearelor neutrofile din exudatul crevicular este simpl i rapid, dar numai cu
valoare orientativ.
Serodiagnosticul, bazat pe evidenierea anticorpilor anti - Actinobacillus actinomycetemcomitans i
anti - Porphyromonas gingivalis, nu este deoeamdat util deoarece nu au fost gsite diferene
semnificative ntre titrul acestor anticorpi la persoane sntoase i cele cu boal parodontal.

Controlul microbiologic al canalelor radiculare, ca parte a terapiei endodontice


Izoleaz dintele interesat cu o dig steril, din cauciuc autoclavabil; dac dintele are cavitate
carioas important sau fractur coronar, nlocuiete diga cu rulouri din vata. sterile.
Antiseptizeaz suprafaa extern a dintelui vizat, dar i dinii adiaceni, folosind: ap
oxigenat 3%, iodofor, alcool izopropilic 50%.
ndeprteaz dentina cariat i creeaz acces spre camera pulpar.
Inser n canalele radiculare deschise conuri sterile din hrtie de filtru, ct mai profund, spre
apexul dintelui. Altemativ, pot fi folosite ace Miller meate cu vat, sterile.
Menine conurile, respectiv acele meate, n canale cca 2 minute, apoi retrage-le cu grij,
pentru a evita contaminarea prelevatelor cu flora oral.
Imerseaz conurile/acele n medii de cultur lichide: bulion infuzie cord-creier pentru
bacteriile aerobe i facultative i bulion thioglicolat pentru bacteriile anaerobe. Manipularea
conurilor/ acelor se face cu o pens steril.
Incubeaz tuburile astfel nsmnate la 37C pentru 48-72 ore, chiar 96 de ore n cazul
mediilor pentru anaerobi. Tulburarea mediului indic prezena microorganismelor pe canal i
impune ndeprtarea lor naintea obturrii definitive.
n cazul studiilor de cercetare a etiologiei infeciilor pulpare, tehnica de recoltare este aceeai,
dar culturile din mediul lichid trebuie repicate pe medii agarizate adecvate pentru obinerea
coloniilor bacteriene necesare identificrii i testrii sensibilitii la antibiotice a microbilor
izolai.
Diagnosticul abceselor periapicale
Prelevarea puroiului este fcut prin aspiraie cu ac i sering sterile, dup antiseptizarea regiunii cu
alcool etilic sau alcool izopropilic 50%.
Deoarece principalele bacterii implicate sunt anaerobe, este recomandat sistemul "sering anaerob"
Altenativ, produsul poate fi descrcat imediat dup prelevare ntr-un mediu de transport reductor. n
laborator, prelevatul este omogenizat i nsmnat pe trei tipuri de medii agarizate: medii mbogite
pentru incubare aerob, medii mbogite pentru bacterii anaerobe i medii selective pentru bacilii
gram-negativi anaerobi. Plcile incubate aerob sunt citite dup 2-3 zile, dar cele incubate anaerob
sunt urmrite zilnic timp de 7 zile. Din coloniile izolate sunt practicate teste biochimice de identificare
i antibiograma.
Dei accesibil, diagnosticul microbiologic al infeciilor periapicale nu este efectuat curent deoarece:
1. mediile de cultur i sistemele de identificare a anaerobilor sunt scumpe, conducnd la o relaie
cost-beneficiu negativ;
2. principalii ageni etiologici - Prevotella i Porphyromonas, cultiv lent, astfel c rezultatele sunt
obinute dup 2-3 sptmni, cnd nu mai pot fi utile pacientului investigat.
Din aceste motive, astfel de teste sunt fcute periodic, n cadrul studiilor de supraveghere
epidemiologic a rezistenei la antibiotice a bacteriilor implicate n infecii periapicale
n cazul gingivitelor cronice, tulpinile isolate : Peptostreptococcus,S. oralis, Actynomices , Candida ,
Eubacterium , S. anginosus Stafilococul , Fusobacterium , Wolinella, Porphyromonas .
n aceast afeciune domin fl orala gram pozitiv, facultativ anaerob i anaerob.
n cazul parodontitelor marginale cronice superficiale : Candida , Fusobacterium ,
Peptostreptococcus , Porphyromaonas ,
Actynomices , Eubacterium , Prevotella, Wolinella , Bacillus ,S anginosus , Tannerella forsythia
.

La acest tip de parodontopatie domin fl ora G (-) fa de cea G (+) cu dominaia clar a celei
anaerobe.
Ca distribuie a speciilor se constat c cea mai mare pondere o dein cocii G (+)
Peptostreptococcus spp strict anaerobi urmai de bacilii G (-) n ordinea descresctoare
numericl: Fusobacterium,
Por phyromonas i Prevotella, dar, per ansamblu,domin bacilii G (-)
Parodontita marginal cronic profund : Prevotella , Porphyromonas

, Fusobacterium , Wolinella , Tannerella forsythia , Eubacterium , Peptostreptococcus

un numr de tulpini mai mic dect n cazul precedent,gradul de virulen a acestor germeni
este foarte bine cunoscut i atest rolul etiologic al acestora,n acest form de boal
n parodontita marginal cronic mixt lucrurile stau astfel: Prevotella , Porphyromonas,
Tannerella forsythia ,Peptostreptococus , Fusobacterium ,Eubacterium , S. anginosus ,
Candida, Wolinella.
Prelevarea probelor buco-dentare

Tehnici utilizate pentru diagnosticul bolilor parodontale


1. Tehnici bazate pe examenul microbiologic al produsului prelevat din punga parodontal:
Examenul microscopic direct
Cultivarea, izolarea i identificarea bacteriilor din leziune
Identificarea unor enzime specifice n prelevatul subgingival
Tehnici imunofluorescente
Latexaglutinarea
ELISA
Numrtoarea leucocitelor n lichidul crevicular
PCR
prelevarea trebuie realizat naintea aplicrii tratamentului cu antibiotice i chimioterapice;
se vor recolta poriunile cele mai caracteristice i cu semnificaie etiologic;
este necesar s se recolteze o cantitate suficient.
recoltarea dup decolarea gingiei n jurul dintelui bolnav

a) Recoltare cu tamponul-numai n cazul n care spaiul creat este suficient de mare pentru a
ptrunde tamponul. Se cur zona pentru ndeprtarea debriurilor alimentare, apoi se
dezinfecteaz regiunea din care urmeaz s se recolteze proba. Se scoate tamponul steril din
tub i se terge, rotind tamponul pe zona lezat. Se introduce tamponul n tub. Se recolteaz
dou probe. Se noteaz tuburile cu coduri nsoite de o fi de identificare ce cuprinde date
despre pacient (nume, prenume, vrst, sex, regiunea de recoltare a probei, elemente legate de
istoricul bolii). Transportul la aborator se face n maximum 1 or

b) Recoltare cu bulete din vat. Se cur zona pentru ndeprtarea debriurilor alimentare, se
dezinfecteaz regiunea din care urmeaz s se recolteze proba apoi se scoate, cu o pens
steril, buleta din tubul eppendorf, colectarea probei microbiologice se realizeaz prin
tamponarea regiunii lezate. Se introduce buleta n tubul eppendorf, se nchide capacul.

Obligatoriu se recolteaz dou probe, notndu-se tuburile cu coduri nsoite de o fi de


identificare ce cuprinde date despre pacient nume,prenume,vrsta, sex, regiunea de recoltare a
probei elemente legate de istoricul bolii). De asemenea, transportul se face n maximum 1 or.
c) Recoltare cu conuri de hrtie de filtru. Conurile de hrtie de filtru se pregtesc i se sterilizeaz ca
buletele de vat. Se cur zona pentru ndeprtarea debriurilor alimentare, se dezinfecteaz
regiunea din care urmeaz s se recolteze proba. Se scoate, cu o pens steril, conul de hrtie
de fi ltru din tubul eppendorf, se introduce conul de hrtie de filtru, cu vrful ascuit, n regiunea
incriminat pentru recoltarea probei patologice. Apoi conul de hrtie de filtru se introduce napoi
n tulbul eppendorf i se nchide. Obligatoriu se recolteaza dou probe. Se noteaz tuburile i se
nsoesc de o fi de identificare ce cuprinde date despre pacient (nume, prenume, vrst, sex,
data recoltrii, regiunea de recoltare a probei, elemente legate de istoricul bolii),iar transportul
se face n maximum 1 or de la recoltare.
Cnd este prezent punga parodontal, este prelevat coninutul acesteia cu ajutorul unei
chiurete sterile. Punga chiuretat este introdus ntr-un tub cu mediu de transport reductor.
Pentru examenul bacteriologic, tuburile coninnd probele de la pacieni sunt centrifugate,
supernatantul ndeprtat, iar din sediment sunt efectuate:
Preparat umed ntre lam i lamel ce va fi examinat la microscopul cu fond ntunecat pentru
evidenierea treponemelor orale asociate.
Frotiu colorat Gram, pentru examenul citobacterioscopic (prezena i intensitatea reaciei
inflamatorii, categorii microscopice prezente n prob).
nsmnarea pe medii de cultur selective pentru bacilii gram-negativi anaerobi (g., WilkinsChalgrene cu vancomicn i acid nalidixic) i pentru Actinobacillus actiomycetemcomitans ( agartripcaz-soia-snge, cu neomicin i bacitracin). Culturile sunt incubate anaerob, respectiv
microaerofil i urmarite 4-7 zile deoarece majoritatea speciilor implicate au cretere lent.
Din coloniile suspectate ca aparinnd patogenilor parodontali (coloniile mici, negre, lucioase pot
aparine speciilor de Prevotella, cele mai mari, brune - speciilor de Porphyromonas etc.) sunt
efectuate:
teste de identificare biochimic,
cromatografie, PCR - asigur identificarea rapid i precis a izolatelor din pungile parodontale,
antibiograma, prin metoda diluiilor, cu aflarea concentraiei minime inhibitorii, sau prin metode
rapide, moderne cu determinarea punctelor de ruptur pentru unul sau mai multe antibiotice.
Imunofluorescena cu concentrare de particule identific bacteriile din prob printr-o reacie antigenanticorp ce utilizeaz anticorpi monoclonali marcai cu fluorescein. Msurarea cantitii de
fluorescein absorbit de prob permite i cuantificarea bacteriilor identificate. Fa de metodele
clasice (microscopie, cultivare), dar i fa de alte tehnici imunologice (ELISA, latex-aglutinare),
utilizarea imunofluorescenei pentru diagnosticul bolilor parodontale are dou avantaje: este rapid
(rezultatele sunt obinute n 1-2 ore de la prelevarea produsului) i permite prelucrarea concomitent
a unui numr mare de probe (pn la 400).