Tema 2.

Nucleul
1. Caracteristica general a nucleului.
2. Anvelopa nuclear.
3. Matricea nuclear.
4. Nucleolul.
5. Cromatina.
6. Nivelurile de organizare a cromozomilor.
7. Structura cromozomului metafazic.
1. Caracteristica general a nucleului.
Nucleul este o structur intracitoplasmatic prezent n toate celulele eucariote cu excepia eritrocitelor
adulte. Nucleul ndeplinete dou funcii importante:
depoziteaz majoritatea informaiei genetice din celul (conine 98% din ADN-ul celular);
controleaz i regleaz activitatea celulei.
Nucleul este alctuit din matrice sau suc nuclear, cromatin sau cromozomi, nucleoli i anvelopa nuclear.

Fig.1. Structura nucleului

n compoziia nucleului intr ADN, ARN, dou tipuri de proteine (histonice i nehistonice), diferii
compui organici i anorganici. Lipidele i glucidele se gsesc n cantiti mici.
Nucleul coordoneaz desfurarea proceselor vitale prin controlul sintezei enzimelor celulare, iar
organizarea celulei prin sinteza proteinelor de structur. n fluxul genetic informaional exist trei puncte cheie:
replicarea ADN, transcrierea genetic (transcripia ARN) i traducerea mesajului genetic (translaia). Replicarea
ADN i transcripia se realizeaz n nucleu, iar translaia n citoplasm.
2. Anvelopa nuclear.
Anvelopa nuclear este o membran dubl prevzut cu pori. Membrana extern a nveliului nuclear
continu cu RE rugos. n locurile unde foia intern continu cu cea extern se formeaz pori nucleari, iar spaiul
dintre membrane este numit perinuclear (20-40 nm) i comunic cu RE. Porii reprezint circa 10% din toat
suprafaa nveliului nuclear (la mamifere).
Complexul porului nuclear
Complexul porului nuclear este compus din porul propriu-zis de form octagonal cu un diametru de 60
nm, trei inele cu diametrul de 120 nm. Inelul este format din opt granule proteice globulare cu diametrul de 15 nm
care dau o form octagonal. n centru este prezent granula central cu rol de diafragm fin. Canalul porului are
lungimea de 15 nm i diametrul de 9 nm. Porul nuclear interacioneaz cu matricea nuclear prin intermediul unor
filamente cu diametrul de 4-8 nm, care se termin pe inelul intern.

Fig. 2. Structura porului nuclear

Prin intermediului porilor se realizeaz transportul macromoleculelor din nucleu n citoplasm i invers:
1) din citoplasm sunt importate n nucleu proteine ale matricei nucleare, enzime de sintez a acizilor
nucleici, proteine ce fac parte din componena proteinei, proteine ribozomale;
2) din nucleu n citoplasm se export precursori ai ribozomilor, particule formate din complexe de ARNm
cu proteine speciale, ARNt.
3. Matricea nuclear.
Matricea nuclear reprezint scheletul de natur proteic care nglobeaz cromatina i nucleolii i care se
sprijin pe membrana nuclear. Aceasta are un rol esenial n organizarea nucleului, sinteza ADN sau ARN, n
medierea semnalelor hormonale, diviziune etc.
Matricea nuclear este compus din dou pri:
matricea nuclear propriu-zis reprezentat de scheletul sau reeaua proteic i este alctuit din proteine
stabile cu mas molecular mare;
fraciunea labil a matricei care este legat de reeaua proteic i conine proteine solubile cu mas
molecular mic, molecule organice mici, substane anorganice i ap.
Cea mai mare parte din proteinele ce intr n alctuirea matricei nucleare este reprezentat de proteine
nehistonice, la care se adaog i enzimele nucleare. Enzimele nucleare catalizeaz sinteza ADN, ARN etc.
Proteinele nehistonice sunt o familie de proteine foarte heterogene att ca mas molecular, ct i particulariti
chimice.
Rolul matricei nucleare
Matricea nuclear menine forma nucleului i stabilitatea sa n interfaz. Modificarea matricei nucleare sunt
strns cuplate cu funciile nucleului: organizarea cromatinei, replicarea ADN, transcripia i transportul intranuclear
al ARN.
Matricea nuclear poate regla fluiditatea membranei nucleare, fluiditate necesar la rndul ei funciei
matricei nucleare, n special n cea de transport al subunitilor ribozomale prin porii nucleari.
Matricea nuclear poate modifica structura cromatinei, fenomen important pentru replicarea ADN i
transcripia ARN.
n timpul mitozei 95% din proteinele matricei nucleare sunt distribuite n citoplasm. n refacerea
nucleului dup diviziune un rol important l joac glicolizarea acestor proteine la nivelul Aparatului Golgi. n
nucleol scheletul ar avea rol de suport pentru depozitarea subunitilor ribozomale.
4. Nucleolul.
Nucleolul (ocup circa 30% din volumul nucleului) e prezent la toate celulele eucariote cu excepia
celulelor blastomerilor, n care nu are loc biosinteza proteinelor proprii. El conine 3 componeni principali: ADN
3%, ARN 7%, proteine 90%.
Nucleolul nu este separat prin membran de restul nucleului. Numrul i volumul nucleolilor depinde de
etapa funcional a nucleului (n celulele omului teoretic pot fi maxim 10 nucleoli mici la nceputul interfazei i un
nucleol mare la sfritul interfazei). Nucleolii ocup circa 30% din volumul nucleului
La microscopul electronic se disting 3 zone componente ale nucleolului:
componentul granular particule cu diametrul 15-20 nm, ce reprezint precursori ribosomali;
componentul fibrilar alctuit di fibre de ADN de 5nm (pe care se sintetizeaz ARNr) i fibre de
transcripi;
componenta amorf a spaiilor dintre fibre i granule, se gsete la periferia nucleolului.
Rolul nucleolului este sinteza ARNr i stocarea i asamblarea precursorilor ribosomali. Segmentul de ADN
(cromozom) n care se conin gene ce codific ARNr organizator nucleolar. La om exist 5 perechi de
cromozomi cu organizatori nucleolari care controleaz formarea nucleolilor la sfritul mitozei (13, 14, 15, 21, 22).
n nucleol are loc sinteza a 3 fracii de ARNr (5.8S, 18S, 28S) i stocarea precursorilor ribosomali. De pe
ADN se transcrie un precursor-ARNr 45S, care este procesat n 3 fracii mai mici (5.8S, 18S, 28S). ARNr 5S este
sintetizat n afara nucleolilor. Moleculele de ARNr se asociaz cu proteine ribosomale sintetizate n citoplasm i
importate n nucleu. Particulele ribonucleoproteice (RNP) sunt transportate n citoplasm sub form de subuniti
ale ribosomilor (40S i 60S).

5. Cromatina.
Cromatina reprezint cromozomii despiralizai n interfaz, este compus din ADN, proteine histone,
proteine nehistone i ARN. Cromatina poate fi considerat o nucleoprotein n care proteinele histone i nehistone
interacioneaz att ntre ele, ct i cu ADN-ul.
La microscopul optic se pot observa granule, reele de filamente i corpusculi numii cariozomi, care se
coloreaz cu colorani bazici. Din punct de vedere al interaciunii cu coloranii bazici, cromatina se clasific n
dou categorii:
eucromatina se coloreaz slab cu coloranii bazici;
heterocromatina se coloreaz intens cu coloranii bazici.
Eucromatina reprezint regiunea cromatinei care conine gene structurale i este zona funcional activ a
ADN-ului, de pe care are loc transcrierea informaiei ereditare (transcripia). Aceasta este slab condensat i se
replic timpuriu, la nceputul perioadei S a interfazei.
Heterocromatina reprezint segmente de cromatin inactiv genetic care nu este transcris. Este condensat
puternic i se replic tardiv n faza S. Se disting dou tipuri de heterocromatin: constitutiv i facultativ.
Heterocromatina facultativ reprezint secvene care n anumite condiii se pot dspiraliza i transforma n
eurocromatin. Heterocromatina constitutiv conine ADN repetitiv sau satelit. Acest tip nu se transform niciodat
n eucromatin.
Organizarea molecular a cromatinei. Componentele moleculare ale cromatinei sunt urmtoarele:
ADN (30-40%) n cei 46 de cromozomi din setul diploid al celulei somatice umane se conin 46 molecule
liniare de ADN cu o lungime de 7109 pb.
Proteine histonice (40%) sunt polipeptide bazice, ce conin peste 22% aminoacizi bazici, n special
arginin i lizin. Exist 5 fracii de histone: H 1, H2A, H2B, H3, H4. Proteinele histonice nu au specificitate de esut.
Proteinele histonice stabilizeaz dublul helix de ADN, inducnd o structur teriar nivel elementar de organizare
a ADN la eucariote. Din punct de vedere funcional histonele mpiedic asocierea enzimei ADN-polimeraza la
ADN i blocheaz transcripia.
Tab. 1. Caracteristica proteinelor histonice
Tipul de histon
Aminoacizi predominani
Nr. de aminoacizi
Masa molecular
H1
Lizina
215
21500
H2A
Leucina, lizina
129
14000
H2B
Serina, prolina, lizina
125
13775
H3
Arginina, cisteina
135
15320
H4
Arginina, lizina
102
11280
Proteine nonhistonice (20%) sunt proteine acide cu un coninut mrit de aminoacizi acizi (acid glutamic
i acid aspartic). Sunt heterogene, au o mobilitate mare, ndeplinesc funcii catalitice n metabolismul ADN-ului i
expresia informaiei genetice (polimeraze, ligaze, topoizomeraze, SAR, factori de transcripie). O cantitate mare a
proteinelor nonhistonice este prezent n cantiti egale n esuturile active i inactive.
ARN este prezent n cromatin fiind produsul de sintez de pe ADN, n special transcripi primari i
ARNnm (de ex. ARN din componena primazei, telomerazei, etc.).
6. Nivelurile de organizare a cromozomilor.
E cunoscut faptul c lungimea total a tuturor 46 de molecule de ADN n nucleu constituie 2m i conin
3.2 mlrd pb. Lungimea total a ADN-ului din toate celulele corpului uman constituie 10 11 km, distan mai mare de
1000 de ori dect distana de la Pmnt la Soare. Apare ntrebarea cum ncap aceste molecule foarte lungi n
nucleul celulei? mpachetarea ADN-ului ntr-un cromozom presupune existena ctorva nivele de organizare sau
condensare, fiecare fiind responsabil de un anumit grad de compactizare i micorare a lungimii ADN-ului.
Primul nivel nucleosomic este determinat de asamblarea ADN-ului cu histonele i formeaz filamentul
de cromatin (DNP) cu un diamentru de 11 nm (1 nm = 109 m). n cadrul acestui nivel molecula de ADN se
scurteaz de 6 ori. Fiecare nucleosom const dintr-un miez histonic format din 8 proteine 2H2A, 2H2B, 2H3, 2H4
i o secven de ADN cu o lungime de 146 pb (ADN-linker). ADN-ul nfoar de 2 ori octamerul histonic.
Segmentul internucleosomal e format din ADN dublu helicoidal, care conine 60 de nucleotide asociat cu histona
H1. Filamentul polinucleozomic de cromatin are aspectul unui irag de mrgele. care intr n componena unui
miez histonic.
Al doilea nivel solenoidul este reprezentat de fibra de cromatin de 30 nm ce rezult din
superspiralizarea filamentului de cromatin. Acest nivel de compactizare scurteaz molecula de ADN de 40-60 ori.
Solenoidul reprezint o superspiral de dreapta cu 6 nucleozomi per tur. Trecerea cromatinei de la nivelul I la II
este determinat de modificrile chimice ale histonei H 1. Fosforilarea H1 se asociaz cu superspiralizarea
filamentului de cromatin (DNP), iar defosforilarea H 1 cu despiralizarea solenoidului. Acest lucru este important

n reglarea activitii genelor. Histona H 1 este asociat att cu miezul nucleozomic, ct i cu segmentul ADN linker
i are rol n stabilitatea nucleozomului.
Al treilea nivel de compactizare este reprezentat de mpachetri suplimentare, formnd structuri mai
complexe denumite bucle. Fibra secundar sufer un nou proces de condensare i rezult fibra teriar buclat
(supersolenoidul) 300-700 nm. O bucl conine 20.000-80.000 nucleotide, iar acest tip structural de cromatin e
meninut de un suport structural n nucleu denumit matrix nuclear sau ax cromozomial (scaffold) prin
intermediul unor proteine acide SAR (Scaffold Associated Regions).
Al patrulea nivel reprezint condensarea buclelor ce duce la formarea cromatidelor cromozomului
metafazic. Fiecare cromatid are grosimea de la 700 la 1200 nm, iar ADN n cromozom se scurteaz de 10,000
ori. Datorit proprietii cromatinei de a se compactiza n nucleul celulei umane cu diametrul de m (1 m = 10 -6
m) ncap 46 molecule de ADN cu lungimea total de 2 m.

Fig. 3. Nivelurile de organizare a cromozomilor

7. Structura cromozomului metafazic.

Cromozomii au fost pui n eviden pentru prima dat de W. Hofmeister n 1840 i au fost denumii astfel
de W. Waldeyer n 1888 (din greac chroma culoare, soma corp). Sunt structuri permanente n nucleu,
depoziteaz, replic, transmit informaia genetic din generaie n generaie.
Cromozomii au form de bastonae, filamente curbate etc. Cromozomul metafazic este format din 2
cromatide surori identice unite prin centromer la nivelul unei zone care se numete constricie primar.

Fig. 4. Cromatidele cromozomului metafazic

Centromerul este punctul de unire a cromatidelor i de asamblare a kinetocorilor. Perechea de kinetocori

(disc trilamelar din fibre de cromatin superior organizate) reprezint situsurile de ancoraj ale microtubulilor
fisului de diviziune celular. Regiunea centromeric a cromozomului la eucariote are o lungime de sute de mii de
pb i este format din ADN i proteine specifice. ADN-ul centromeric conine secvene de nucleotide repetitive
care intervin n recunoaterea cromozomilor omologi la conjugare, meninerea celor dou cromatide surori pn la
sfrit de metafaz i separarea lor n anafaz.
Din punct de vedere morfologic, cromozomii pot fi: metacentrici (cu brae egale), submetacentrici (cu brae
aproape egale), acrocentrici (cu brae inegale, braul scurt, proximal p, braul lung, distal q, telocentrici (cu
centromerul terminal). Fiecare cromosom este format din 2 filamente longitudinale cromatide. Fiecare cromatid
este alctuit dintr-o singur macromolecul de ADN asociat cu histone. Cromatidele sunt alctuite din alte 2

filamente cromatice rsucite n jurul celuilalt cromoneme. Spiralizarea cromomerelor n timpul diviziunii celulare
este inegal i se pot observa nite ngrori (noduri) cromomere, care se coloreaz intens cu colorani bazici. La
unii cromozomi se mai observ i constricii secundare sub form de strangulri, care sunt asociate cu nucleolul.
Segmentul terminal al unui cromozom, separat printr-o constricie secundar se numete satelit. Poriunile
terminale ale cromozomilor eucariotelor telomeri reprezint complexe din ADN i proteine specifice.

Fig. 5. Telomerii cromozomilor la eucariote

La procariote toate moleculele de ADN sunt circulare fapt care previne degradarea lor enzimatic. La
eucariote ADN are structur liniar, de aceea pentru a asigura protecia de exonucleaze i individualitatea
cromozomilor (mpiedic rearanjamentele cromozomice) apare o structur specific din secvene scurte repetate de
ADN. Captul 3' al moleculei de ADN este mai lung, format dintr-o secven conservat (GGGGTT)n i formeaz
o bucl prin legturi de hidrogen nespecifice G-G.
Cromozomii omologi sunt cromozomii perechi, care sunt identici dup lungime, structur, amplasarea
centromerului i alte elemente de structur. Un cromozom omolog este de origine patern, altul de origine matern.