NSMNRI ARTIFICIALE

CUPRINS
ANTOMIA I FIZIOLOGIA APARATULUI GENITAL FEMEL.........................................................1
1.1. Descrierea i funciile organelor de reproducie......................................................................1
1.2. Ciclul sexual (cldurile) i semnele cldurilor........................................................................3
1.3. Fecundaia i gestaia..............................................................................................................4
ORGANIZAREA I DOTAREA PUNCTULUI DE NSMNRI ARTIFICIALE, UTILIZAREA
APARATURII I INSTRUMENTARULUI...........................................................................................6
2.1. Amplasarea i organizarea punctului de nsmnri artificiale..............................................6
2.2. Agenii frigorifici i echipamentul criogenic necesar conservrii i manipulrii materialului
seminal congelat.................................................................................................................................6
2.3. Instrumentar i materiale necesare pentru efectuarea nsmnrilor artificiale......................7
2.4. Operaiuni pregtitoare n vederea nsmnrilor artificiale cu m.s.c...................................8
2.4.1.
Identificarea femelelor n clduri i stabilirea momentului optim al nsmnrii.........8
2.4.2.
Pregtirea aparaturii i instrumentarului pentru decongelarea m.s...............................9
2.4.3.
Pregtiri specifice nsmnrii cu m.s.c. n paiete......................................................10
2.4.4.
Pregtirea i echiparea instrumentarului pentru nsmnare......................................11
BIBLIOGRAFIE..................................................................................................................................13

ANTOMIA I FIZIOLOGIA APARATULUI GENITAL FEMEL

1.1. Descrierea i funciile organelor de reproducie

Prile componente ale apartului genital la vac (de la exterior ctre interior)
snt: vulva, vaginul, uterul ( cu cervix, corp i coarne uterine) oviductele i ovarele.
Vulva reprezint segmentul extern al aparatului genital i prezint urmtoarele pri
anatomice: dou labii (buze) i dou comisuri; una superioar de form rotunjit i una
inferioar mai ascuit i prevzut cu un fascicol subire de fire de pr. n interior, n unghiul
dintre labiile vulvei se gsete clitorisul.
Vestibulul vaginal este situat ntre vulv i vagin i este separat de acesta printr-un pliu
circular la nivelul meatului urinar care apare pe planeul vulvei la civa centimetri naintea
clitorisului. Meatul urinar este zona de deschidere a uretrei pentru eliminarea urinei din vezica
urinar. napoia acestei zone se gsete un pliu nfundat (diverticulul suburetral) care poate
induce n eroare operatorul nsmntor n dirijarea pipetei sau pistoletului ctre cervix.
Vulva, clitorisul i vestibulul vaginal formeaz organele genitale externe i sunt
segmente comune aparatului reproductor i urinar cu rol n actul copulaiei (mperecherii),
parturiiei (ftrii) i eliminrii urinei.
Vaginul este situat napoia vestibulului vaginal i face jonciunea cu cervixul. Este de
form cilindric, mai dilatat n jurul "florii involte"i are o lungime de aprox. 20 cm, n
funcie de vrsta femelei i numrul de gestaii. Peretele vaginului este rezistent, elastic i

formeaz numeroase falduri longitudinale. Cervixul sau gtul uterin este situat ntre vagin i
corpul uterin. Este de form cilindric cu o lungime de 6-10 cm i un diametru de 3-6 cm. n
partea anterioar cervixul prezint aa numita "floare involt" o formaiune alctuit din cute
ale mucoasei cervicale, dispuse pe 2-3 rnduri, cu un numr mare de pliuri rare care asigur
nchiderea ermetic a canalului cervical, cu excepia perioadei de estru i n timpul actului
ftrii. n timpul cldurilor (estru) canalul cervical este mai dilatat i permite scurgerea
mucusului specific.
Corpul uterin situat ntre cervix i coarnele uterine, are o form cilindric i o lungime
de 7-8 cm. Principalele funcii ale corpului uterin sunt: faciliteaz deplasarea rapid a
supermatozoizilor dup nsmnare, protejeaz zona de implantare (nidaie) a zigotului
(ovulului fecundat) i asigur substanele nutritive pentru embrion i fetus.
Coarnele uterine, sunt dispuse n continuarea corpului uterin i au o form cilindric,
cu o lungime de 30-35 cm (n funcie de vrsta femelei i numrul de gestaii) i un diametru
de 3-5 cm. Coarnele uterine sunt suspendate de plafonul caviti abdominale i pelvine prin
intermediul ligamentelor largi. Ele au rolul de a asigura hrnirea ovulului fecundat pn la 3540 de zile de la instalarea gestaiei.
Oviductele, de form tubular, sunt situate n continuarea coarnelor uterine i au o
lungime de 20 cm. Mucoasa oviductelor este prevzut cu numeroi "cili" (formaiuni
asemntoare firelor de pr) care asigur ascensiunea spermatozoizilor spre zona de ntlnire
cu ovulul.
Vaginul, uterul i oviductele formeaz cile genitale interne care au rol n actul
fecundaiei, nidaiei, dezvoltrii fetusului pe parcursul gestaiei, precum i expulzrii acestuia
n timpul parturiiei.
Ovarele reprezint organele de reproducie eseniale i sunt situate n poriunea
terminal a oviductelor, pe planeul cavitii pelvine. La vac i bivoli ovarele au form
oval cu o lungime de 3-5 cm, o lime de 2 cm i o greutate de 14-20 g; ovarul drept este,
n majoritatea cazurilor, mai mare dect cel stng. La palpare prezint o consisten denselastic cu suprafaa neregulat datorit prezenei foliculilor ovarieni i a corpilor galbeni n
diferite faze de evoluie. Ele au rol n producerea ovulelor i a hormonilor sexuali feminini:
hormonii estrogeni i progesteronul.
Ca structur ovarul prezint, dinspre exterior spre interior, urmtoarele pri
componente:
- epiteliul de nveli, format dintr-un singur rnd de celule cubice sau cilindrice;
- albugineea, reprezentat printr-un strat foarte subire de esut conjunctiv;
- zona cortical compus din parenchimul ovarian i din strom alctuit din esut
conjunctiv;
- zona medular, foarte vascularizat, este format din esut conjunctiv i rare fibre
musculare netede.
n parenchimul ovarian se dezvolt dou feluri de foliculi ovarieni:
- evolutivi sau gametogeni din care, prin procese de dezvoltare i difereniere, vor lua
natere ovulele;
- involutivi sau atrezici, rezultai n urma degradrii sau distrugerii ovocitelor.
Pe parcursul perioadei de evoluie, foliculii ovarieni trec prin stadiile de foliculi
primari, secundari i maturi.
Foliculii primari (primordiali) prezint un corp mic, sferic, numit ovocit, nconjurat de
un strat de celule foliculare, limitat la exterior de o membran subire numit teaca folicular.
Numrul foliculilor primari variaz n funcie de vrsta femelei: la natere n ovarul
unei viele se gsesc cca 80.000 de foliculi primari, la 3 luni 70.000 - 75.000, iar la vrsta de
10 ani 2.500.
Fenomenul de atrezie folicular ncepe nc din timpul vieii embrionare.

Foliculii secundari sau n cretere, reprezint cel de-al doilea stadiu al evoluiei
foliculare i ei sunt alctuii dintr-o membran periferic vitroas sub care se gsesc mai
multe straturi de celule foliculare. n centrul foliculului n cretere se gsete ovulul, ceva mai
mare n volum, nconjurat, n majoritatea cazurilor, de o materie amorf - numit membran
pelucid. Celulele foliculare care nconjoar ovulul sunt dispuse n form de coroan
numit coroana radiat. Concomitent cu creterea foliculului ncepe s apar i lichidul
folicular secretat de celulele foliculare. Lichidul folicular, puin vscos i transparent, crete
cantitativ atunci cnd foliculul ajunge la maturitate i conine o mare cantitate de hormoni
estrogeni.
Foliculii maturi (de Graaf) au o form sferic i dimensiuni variabile n funcie de
specie (la vac diametrul lor este de 12-15 mm).
Evoluia ovulelor este condiionat att de factori externi ct i de cei interni.
Ovulaia este fenomenul de dehiscen a foliculului de Graaf i de expulzare a
ovocitului din folicul. La vac ovulaia se produce spontan, la sfritul cldurilor, iar ovulul
i pstreaz capacitatea fecundant cca 6-8 ore. Dup dehiscen, cavitatea foliculului se
umple cu o substan albuminoas care se coaguleaz sub forma unui cheag n locul cruia se
va dezvolta ulterior corpul galben.
n evoluia sa corpul galben trece prin trei stadii: corp galben de clduri, corp galben
gestativ i corp galben persistent. Cnd ovulaia nu este urmat de fecundaie, corpul galben
are o evoluie scurt i se numete periodic sau de clduri. Dac se produce fecundaia urmat
de gestaie se numete corp galben de gestaie i persist n ovar pe toat perioada de gestaie.
Cea de a treia form de corp galben, corpul galben persistent, este o formaiune
anormal i poate s apar atunci cnd nu s-a instalat gestaia; el persist, mpiedicnd
manifestarea ciclului sexual.
1.2. Ciclul sexual (cldurile) i semnele cldurilor
Vaca este un animal poliestric sau policiclic, cu repetarea ciclic a estrului pe tot
parcursul anului dar, cu o intensitate mai mare primvara i toamna.
Durata ciclului sexual la aceast specie este n medie de 21 de zile, cu variaii ntre 15
i 25 zile.
Stadiile ciclului sexual se pot caracteriza astfel:
- stadiul de proestru cu o durat medie de 3 zile (4-7 zile), se caracterizeaz prin
creterea i dezvoltarea foliculului ovarian. Este perioada premergtoare estrului i se
caracterizeaz prin congestia i hiperemia (nroirea) treptat a mucoaselor segmentelor
aparatului genital;
- stadiul de estru sau perioada propriu-zis de clduri are o durat medie de 18 ore, cu
variaii ntre 24-36 de ore. n acest stadiu vocile au, sub influena hormonilor estrogeni care
ating pragul maxim, un comportament sexual caracteristic, manifestat prin stri de agitaie,
reducerea poftei de mncare i a produciei de lapte, urinri dese i n cantiti mici, salturi pe
alte animale, poziie campat etc.
Comportamentul sexual este mai bine exteriorizat cnd vacile sunt n padoc sau la
pune (sar pe alte vaci, accept saltul altora i efectueaz micri caracteristice actului
sexual) permind o mai bun depistare a femelelor n clduri. Examinnd vaca n clduri
observm tumefierea labiilor vulvei i scurgerea unui mucus filant, transparent, pe la
comisura inferioar a vulvei.
Ovulaia se produce la 10-14 ore dup ncetarea manifestrii cldurilor, deci la
nceputul stadiul de metestru;
- stadiul de metestru sau perioada de regresie, are o durat medie de 6 zile, cu variaii
ntre 5 i 7 zile. n aceast perioad are loc ovulaia i formarea corpului galben, iar pe plan

comportamental se constat dispariia strii de nelinite i a celorlalte semne caracteristice

cldurilor, revenirea poftei de mncare i a produciei de lapte;
- stadiul de diestru sau de linite, se caracterizeaz prin regresia corpului galben i prin
nceputul dezvoltrii unui nou folicul. Prezint o durat cu o variabilitate destul de mare ntre
6 i 14 zile. n acest stadiu, la un examen transrectal, se poate palpa pe ovar un corp galben
proeminent, de consisten moale i un uter rigid care se contract uor.
Dup apariia pubertii, ciclurile sexuale se repet n mod ritmic, n medie la 21 zile,
pn la climacterium. n condiii normale aceast ritmicitate este ntrerupt numai n timpul
gestaiei i n perioada postnatal.
Dup ftare, ciclurile sexuale se reiau la 21-60 de zile n funcie de starea de sntate a
femelei, nivelul produciei de lapte, tehnologia de exploatare etc. Astfel, s-a constatat o
prelungire a acestei perioade cu 3-4 zile la vacile subnutrite, la cele cu producii mari de lapte,
la femelele ntreinute n stabulaie permanent etc. Dup avort, ciclurile sexuale se reiau n
funcie de perioada cnd s-a produs avortul: dup un avort n stadiul de zigot sau embrion
(nceputul gestaiei) ciclurile sexuale reapar dup aproximativ 3 sptmni, n timp ce dup
avortul fetal (stadiu avansat de gestaie) ciclurile sexuale se reiau dup trecerea perioadei
normale de gestaie.

1.3. Fecundaia i gestaia

Fecundaia este procesul esenial n fiziologia reproduciei i const din unirea celor
dou celule sexuale - ovulul i spermatozoidulpentru a da natere unei celule noi, numit ou
sau zigot.
Eliminarea ovulului de ctre ovar i captarea acestuia n pavilionul trompei uterine,
coborrea ctre treimea superioar a oviductului la locul de ntlnire cu spermatozoizii, depui
n vagin prin mont i intracervical prin nsmnare artificial, constituie etapele principale
premergtoare fecundaiei.
Celulele sexuale, ovulul i spermatozoidul, au o durat de via limitat n afara
ovarului i respectiv a testiculului; ovulul are o viabilitate de 5-6 ore, iar spermatozoidul de 12 zile. Acest lucru impune ca spermatozoizii cu capacitate fecundant maxim s ajung n
oviduct concomitent cu eliberarea ovulului din foliculul ovarian.
Procesele fiziologice complexe care au loc n cadrul mecanismului fecundaiei la
mamifere, se desfoar n patru etape i anume:
- prima etap, caracterizat prin "asaltarea" ovulului de ctre spermatozoizi n treimea
superioar a oviductului i eliberarea acestuia de celulele foliculare care formeaz coroana
radiat. Aceast etap se caracterizeaz prin participarea unui numr mare de spermatozoizi
nefiind selectiv, deci pot participa i spermatozoizi de la alte specii;
- etapa a II-a const n ptrunderea spermatozoizilor prin membrana pelucid pn la
spaiul perivitelin. Aceast etap este selectiv, deci numai spermatozoizii aceleeai specii pot
penetra membrana pelucid. Ptrunderea prin membrana pelucid se poate realiza de un
numr redus de spermatozoizi, cei mai viguroi i prin orice punct;
- etapa a III-a a fecundaiei const n traversarea membranei viteline de ctre
spermatozoidul fecundant. Este o etap deosebit de selectiv, spermatozoidul fecundant fiind
i cel mai viguros;
- etapa a IV-a a fecundaiei const n asimilarea reciproc a nucleilor celor dou celule
sexuale, numite n acest stadiu pronucleu femel i respectiv pronucleu mascul. Fuzionarea
pronucleilor se numete amfimixie.

Dup realizarea acestui fenomen, pronucleii celor dou celule sexuale i nceteaz
existena, lund natere o nou celul, oul sau zigotul.Durata total a fecundaiei nu depete,
de regul, 12-16 ore, cea mai mare parte din timp fiind afectat proceselor din ultima etap.
Realizarea n condiii normale a fecundaiei este condiionat de o serie de factori
favorizani, printre care calitatea ovulului i a spermatozoidului joac rolul esenial.
Ovulul trebuie s ndeplineasc n principal urmtoarele condiii: s migreze n
treimea superioar a oviductului n timp de cca 6-8 ore i s fie fecundabil, adic n stadiul n
care modificrile morfo-fiziologice l fac apt pentru fecundare. Spermatozoidul trebuie s aib
mobilitate i capacitate fecundant maxime.
Gestaia este procesul fiziologic prin care ovulul fecundat se dezvolt n cavitatea
uterin i se transform ntr-un nou organism, care este apoi expulzat, prin actul ftrii, n
mediul exterior.
n timpul gestaiei, organismul matern asigur procesele nutritive, respiratorii i de
excreie ale ftului, absolut necesare creterii i dezvoltrii lui n perioada intrauterin. n
aceast perioad este necesar adaptarea organismului femelei, mai ales n a doua parte a
gestaiei, cnd datorit creterii ftului acesta este solicitat din ce n ce mai mult. Instalarea
unui echilibru fiziologic ntre cele dou organisme constituie premiza desfurrii normale a
gestaiei, de la fecundare pn la parturiie.
n timpul vieii intrauterine, pe parcursul evoluiei sale, produsul de concepie trece
prin trei etape sau stadii: stadiul de ou sau zigot, stadiul de embrion i stadiul de ft.
Stadiul de ou sau zigot ncepe din momentul formrii oului sau zigotului i dureaz
pn la nidaie (fixarea zigotului pe mucoasa uterin). n acest stadiu, zigotul trece prin fazele
de morul, blastul i gastrul. Dezvoltarea produsului de concepie este influenat n mare
msur de factorii genetici i factorii legai de mediul uterin.
Insuficienta pregtire a endometrului, procesele inflamatorii i supurative, contraciile
uterine exagerate, sunt factori care influeneaz negativ stadiile de dezvoltare ale zigotului i
procesul de nidaie, determinnd ntreruperea gestaiei n faz incipient. La vac stadiul de
zigot dureaz 8-13 zile.
Stadiul de embrion cuprinde perioada de la nidaie pn la apariia circulaiei
placentare. Procesele cele mai importante care au loc n acest interval de timp
sunt nidaia i organogeneza.
Nidaia este procesul prin care gastrula se fixeaz n endometru, unde produsul de
concepie rmne ancorat pn la parturiie. Organogeneza reprezint procesul de formare a
esuturilor, organelor i aparatelor noului organism, precum i a anexelor fetale. Are o durat
de cteva sptmni.
Stadiul fetal, este perioada de dezvoltare ca fetus i reprezint mai bine din 2/3 din
dezvoltarea intra-uterin. n acest stadiu au loc intense procese de cretere a aparatelor i
sistemelor. De asemenea, n acest stadiu se desvrete conturarea corpului fetal, se formeaz
anexele fetale i se stabilete circulaia placentar, care funcioneaz pn la sfritul gestaiei.
La vac, n majoritatea cazurilor, ftul este aezat n cornul uterin drept n decubit lateral, cu
membrele adunate, capul fixat pe stern i orientat, de regul, ctre cervix.
Durata gestaiei este n medie de 285 zile (278-293) la vac i de 315 zile (300-320) la
bivoli. Durata gestaiei poate fi influenat de o serie de factori; cum sunt:
- vrsta mamei. Primiparele (femelele la prima ftare) i femelele n vrst au o durat
a gestaiei mai lung;
- sexul produilor. Gestaia cu produi de sex mascul este mai lung dect cea cu
produi de sex femel;
- numrul produilor. Gestaia este mai scurt cu 2-3 zile n cazul ftrilor gemelare;
- alimentaia i starea de ntreinere. Femelele hrnite i ngrijite n mod
corespunztor au o durat a gestaiei mai scurt;

- climatul. n regiunile cu climat tropical gestaia este mai scurt dect la femelele
crescute n regiuni cu climat mai rece.

ORGANIZAREA I DOTAREA PUNCTULUI DE NSMNRI ARTIFICIALE,

UTILIZAREA APARATURII I INSTRUMENTARULUI

2.1. Amplasarea i organizarea punctului de nsmnri artificiale

Amplasarea i organizarea punctului de nsmnri artificiale (PIAV) la taurine se
face difereniat n funcie de forma de proprietate, numrul de animale deservite, tehnologia
de exploatare utilizat (stabulaie cu ntreinere legat sau liber,ntreine pe pune n tabere
de var etc) i trebuie s ndeplineasc urmtoarele cerine:
- s fie amplasat ct mai aproape de adposturile de animale din cadrul fermei sau
exploataiilor din sectorul privat (sat, comun);
- s permit accesul uor al mijloacelor de aprovizionare cu material seminal congelat
i azot lichid;
- s fie organizat n dou ncperi: o camer pentru activitatea de laborator i pentru
evidena activitii de reproducie i o camer pentru nsmnarea propriu-zis a femelelor
prevzut cu stand de mont i utilitile aferente.
- s dispun de surs de ap potabil i de cldur (reou electric, boyler, aragaz);
- s fie pardosit cu materiale care s permit executarea lucrrilor de curenie i
dezinfecie.
2.2. Agenii frigorifici i echipamentul criogenic necesar conservrii i manipulrii
materialului seminal congelat
Cel mai important agent criogenic folosit n congelarea i conservarea materialului
seminal este azotul lichid (N2). Azotul lichid este incolor, transparent (ca apa) nu are miros i
nu este toxic. Se solidific la temperatura de -2200C, nu este inflamabil, nu menine arderea i
nu prezint pericol de explozie. Intr foarte greu n reacie cu alte substane. Lsat mult timp
descoperit, n contact cu aerul, condenseaz oxigenul din aer.
Azotul lichid are masa molecular de 28,016, densitatea de 0,8081 (este mai uor
dect apa) i punctul de fierbere la -195,80C.
n tehnica de congelare i conservare a materialului seminal, azotul lichid este unicul
agent criogenic utilizat. ncorporat n containere de diferite capaciti i compartimente
interioare, azotul lichid permite conservarea de lung durat a produselor biologice. Pe
aceast baz s-au putut constitui bnci de sperm care stocheaz cantiti enorme de doze de
material seminal (de ordinul milioanelor).
Aerul lichid este un amestec de oxigen i azot lichid i are o temperatur iniial de
fierbere de -1900C. n contact cu impuritile organice prezint pericol de explozie.

Oxigenul lichid are o culoare uor albstruie, fierbe la temperatura de -1830C, iar n
contact cu impuritile organice produce explozii puternice.
n prezent s-a renunat la utilizarea aerului i oxigenului lichid n tehnica de congelare.
Helium lichid (Hl3) are punctul de fierbere la temperatura de
-269,90C i este un
puternic agent criogenic. A dat rezultate bune n tehnica de congelare i conservare a
produselor biologice, ns datorit costului de preparare foarte ridicat nu se folosete n
practic.
2.3. Instrumentar i materiale necesare pentru efectuarea nsmnrilor artificiale
Pentru toate sistemele de ambalare a materialului seminal congelat, punctul de
nsmnare trebuie s dispun de:
- baie-marin termoreglabil sau surs pentru nclzirea apei (reou electric,
boyler, aragaz);
- termose zootehnice cu gura larg i capacitatea de 2 l;
- termometru de baie;
- termometru de camer;
- pense inoxidabile obinuite;
- pense hemostatice cu brae de 30-50 cm;
- cleti metalici pentru fixarea tijelor canistrelor n timpul extragerii dozelor din
container;
- 2-3 speculumuri vaginale (pentru vaci i viele) necesare diferitelor investigaii
sau tratamente;
- lamp frontal cu anexe;
- mnui din plastic pentru explorare rectal;
- vaselin neutr;
- vase pentru splarea, dezinfecia i sterilizarea prin fierbere a instrumentarului;
- lighean;
- irigator cu furtun;
- materiale consumabile: vat, tifon metraj, spun, detergeni, alcool sanitar,
sod de rufe;
- ustensile pentru curenie (gleat, lopat, mturi);
- materiale de protecie.
Pentru materialul seminal congelat n fiole (0,8-1 ml) sunt necesare:
- stative de lucru;
- pile pentru retezarea captului fiolelor;
- pipete de nsmnare cu suzete;
- pipete cu adaptor i sering de plastic tip I.T.M..
Pentru materialul seminal congelat n paiete trebuie asigurate:
- 2-3 goblete de rezerv;
- foarfeci chirurgicale drepte;
- hrtie de filtru sau tifon;
- pipete universale tip "SEMTEST";
- pistolet Cassou, care se afl nc n dotarea unor puncte de nsmnare;
Pentru material seminal congelat n granule (pastile) este nevoie de:
- stative metalice cu orificii, care s permit intrarea fiolelor cu diametrul de 1012 mm;
- pile pentru retezarea captului fiolelor;
- fiole cu soluie extender;
- tije cu extremitatea oval sau lingurie cu coada lung pentru extragerea
granulelor din flacoane;
- baie-marin termoreglabil sau vas pentru ap n care sunt plasate stativele.

Efectuarea nsmnrilor artificiale la grajd, n tabere de var, la pune sau la

domiciliul deintorilor de animale necesit dotarea punctului cu o trus utilat corespunztor
pregtirii i nsmnrii materialului seminal decongelat. Aceast trus trebuie s fie format
din:
- 1 termos cu gur larg (capacitatea de 1 litru);
- 1 pung de polietilen cu pipete cu dop conic;
- 1 foarfece drept;
- 1 termometru;
- 1-2 tije pentru fixarea paietei n pipet;
- 1-2 tije piston;
- 1-2 piese metalice (inele conice) pentru sprijinul degetelor la mnuirea
pistonului;
- 1 flacon cu alcool, tifon sau hrtie de filtru;
- 1 pens metalic pentru extragerea paietelor din goblete;
- 1 pung de polietilen cu pipete pentru seringa de plastic, tip ITM;
- 2-3 seringi, tip ITM;
- 2-3 piese cauciuc -adaptor;
- 2-3 suzete cauciuc;
- mnui de plastic pentru explorare rectal;
- carnet pentru nregistrarea nsmnrilor.
2.4. Operaiuni pregtitoare n vederea nsmnrilor artificiale cu m.s.c.
Identificarea femelelor n clduri i stabilirea momentului optim al nsmnrii

Depistarea la timp a femelelor n clduri i alegerea momentului optim al nsmnrii

reprezint factori determinani n activitatea de reproducie la taurine.
Identificarea femelelor n clduri trebuie fcut cu deosebit grij pentru evitarea
pierderilor de cicluri care pot s se ridice la peste 20 %.
Apariia i modul de manifestare a cldurilor sunt influenate de condiiile de cretere
i exploatare, dar i de starea de sntate a femelelor.
Pentru depistarea femelelor n clduri este necesar s se cunoasc timpul, locul,
metodele i procedeele de depistare.
innd cont de faptul c timpul de manifestare a cldurilor este n medie de 18 ore, iar
la 1/3 din vaci de numai 12 ore, se recomand s fac dou observaii zilnice a cte 30 de
minute, dimineaa foarte devreme nainte de administrarea hranei i seara trziu dup
executarea tuturor lucrrilor tehnologice.
n privina locului de depistare a femelelor n clduri, acesta depinde de sistemul de
ntreinere folosit: n cazul ntreinerii n stabulaie legat, depistarea se face n adpost, n
padoc sau pe pune unde vacile i vielele se scot zilnic; la ntreinerea n stabulaie liber
femelele trebuie s se grupeze pe stri fiziologice, iar depistarea se face n adpost, n padoc
sau pe pune.
Pentru depistarea femelelor n clduri se folosesc metode biochimice, etologice,
biologico-chimice i de laborator.
Metodele biochimice se bazeaz pe modificrile anatomo-fiziologice ce apar n timpul
cldurilor: mucoasa vaginal se nroete i se edemaieaz, vulva se nroete i din ea se
scurge un lichid sticlos, ugerul este edemaiat, laptele i modific compoziia, scade
producia, temperatura corpului crete uor etc.
Metodele etologice se bazeaz pe modificrile comportamentale care apar n aceast
perioad; animalele sunt nelinitite, devin atente la zgomote sunt uor speriate, mugesc

frecvent, urineaz des i n cantitate mic, apetitul este capricios, dar cu sete pronunat,
manifest interes, pentru cei din jur, nconvoaie spinarea, mic i ridic coada, se angajeaz
n lupte, fac micri caracteristice actului sexual, accept saltul etc.
Metodele biologico-chimice se utilizeaz n cazul ntreinerii libere a femelelor. n
acest scop se folosesc tauri vasectomizai sau vaci androgenizate.
Se pot folosi i metode de laborator, bazate pe analiza frotiului vaginal, msurarea
vscozitii mucusului, dozarea progesteronului din snge i lapte etc.
De regul, cldurile se manifest mai evident n timpul sezonului cald, n timpul
micrii n padoc sau pe pune.
Depistarea femelelor n clduri este o operaiune tehnic de mare importan care
trebuie executat de specialitii zoo-veterinari, de lucrtorii fermelor sau de proprietarii de
taurine.
Pentru urmrirea i depistarea femelelor n clduri se folosete planul individual de
ftri i nsmnri, graficul zilnic de urmrire a ciclului de clduri, calendarele de
reproducie etc.
Momentul n care se execut nsmnarea, dup depistarea cldurilor, condiioneaz
procesul de fecunditate. La stabilirea momentului optim al nsmnrii trebuie avute n
vedere particularitile biologice ale funciei de reproducie la aceast specie.
Durata medie a cldurilor este de 18 ore la vaci i 15 ore la viele. Cldurile apar
ealonat la 70 % din femele i brusc la 30%, n funcie de starea de ntreinere, ovulaia se
produce la 10 ore dup ncetarea cldurilor. Durata de deplasare a spermatozoizilor de la locul
de depunere pn n oviduct, unde are loc fecundarea, este de 6 ore. Ovulul este apt pentru
fecundare timp de 8-10 ore iar spermatozoizii i menin capacitatea fecundant, n tractusul
genital femel, timp de 18-24 ore. innd cont de aceste aspecte rezult c perioada optim
pentru nsmnare este ntre 15 i 30 de ore de la declanarea cldurilor.
n practic, se recomand s se efectueze dou nsmnri la un interval de 10-12 ore.
n aceste condiii femelele se nsmneaz imediat dup ce au fost depistate i se
rensmneaz la 10-12 ore.
nsmnarea se va efectua ntr-un loc linitit, iar timp de 12 ore se evit orice factor
care ar putea reduce rata concepiei.
Pregtirea aparaturii i instrumentarului pentru decongelarea m.s.

n vederea decongelrii m.s., tehnicianul sau operatorul de nsmnri trebuie s

efectueze o serie de lucrri de pregtire a cror succesiune este urmtoarea:
- pregtirea slii de nsmnare (curenie, pregtirea ustensilelor pentru evacuarea
dejeciilor, verificarea sistemului de contenie);
- echiparea operatorului (halat, or cauciucat, cizme de cauciuc);
- pregtirea materialelor de protecie (mnui de piele, ochelari de protecie) i
verificarea existenei materialelor de intervenie imediat (comprese de tifon, unguent, vas
ap);
- asigurarea apei calde i a instrumentului necesar decongelrii materialului seminal;
- pregtirea termosului sau vasului de decongelare i a termometrului;
- procurarea materialelor necesare toaletei organelor genitale (vat, vaselin, mnui
de plastic, speculum);
- pregtirea microscopului i a materialelor necesare verificrii m.s. decongelat (lame,
lamele, pipete "Pasteur", vas cu ap etc);
- aezarea pe masa de lucru a instrumentarului de nsmnare;
- pregtirea registrului de nsmnri a fiei ginecologice sau buletinului de examen
ginecologic pentru verificarea situaiei fiecrei femele ce urmeaz a fi nsmnat;

- aducerea lng masa de lucru, n poziie convenabil de lucru, a containerului cu

m.s.c.;
- stabilirea pentru fiecare femel ce urmeaz a fi nsmnat m.s.c. care va fi utilizat,
respectiv nominalizarea taurului donator;
- consultarea schemei de coninut a containerului i stabilirea locului de unde urmeaz
a fi extrase dozele de m.s. la reproductorii stabilii;
- pregtirea carnetului n care se nregistreaz succesiv nsmnrile efectuate n ziua
respectiv (nr. matricol femel, cod taur, observaii etc.);
- verificarea conteniei femelei la standul de nsmnare, nregistrarea numrului
matricol i efectuarea toaletei regiunii vulvare;
- cotarea nivelului azotului lichid (numai la datele fixate) i nregistrarea lui. Aceast
operaiune se execut zilnic, la prima or a programului de activitate, indiferent dac sunt sau
nu programate nsmnri n ziua respectiv.
Pregtiri specifice nsmnrii cu m.s.c. n paiete

Extragerea paietelor din container i decongelarea lor. Pentru prevenirea deteriorrii

morfo-fiziologice a celulei spermatice n timpul decongelrii, este necesar s se respecte
urmtoarele norme tehnice:
- extragerea paietei din goblet trebuie s se fac n acel loc din interiorul
containerului unde temperatura este de cel puin -120 0C, respectiv la nivelul fundului de dop a
containerului. Dac gobleta este plin cu azot lichid, acoperind bine paietele, poate fi ridicat
i mai sus, spre mijlocul gtului containerului;
- este interzis inerea gobletei, chiar i pentru un timp foarte scurt, la nlimea gtului
containerului unde temperatura ajunge la
-50, -600C;
- extragerea dozei din goblet trebuie fcut rapid i sigur; acest lucru presupune ca
operatorul nsmntor s cunoasc foarte bine modul cum sunt aezate canistrele cu goblete
n interiorul recipientului;
- scparea paietei pe jos sau pe masa de lucru ct i extragerea altei doze dect cea
programat conduce la deprecierea m.s.. Aceste doze nu se vor mai introduce n gobleta cu
azot lichid;
- se interzice decongelarea mai multor doze deodat, deoarece dup decongelare ele
trebuiesc folosite imediat (cteva minute);
- pentru prevenirea ocurilor "a frigore" instrumentarul cu care se lucreaz trebuie s
aib aceeai temperatur sau foarte apropiat de cea indicat pentru decongelare;
- nu este permis nici utilizarea m.s. din paietele fisurate sau din cele care au venit n
contact cu apa; contactul cu apa depreciaz calitatea acestuia prin modificarea brusc a
presiunii osmotice.
Extragerea i decongelarea materialului seminal trebuie s se fac n urmtoarea
ordine:
- verificarea cu termometrul de baie a apei din vasul de decongelare;
- aplicarea ochelarilor i mnuilor de protecie;
- extragerea dopului containerului;
- ridicarea canistrei cu goblete la nivelul indicat i fixarea acesteia cu ajutorul
cletelui;
- prinderea cu pens a captului paietei fr a fi strivit;
- extragerea paietei i scuturarea ei, n afara containerului, de eventualele resturi de
azot lichid; n caz contrar exist riscul fisurrii paietei;
- introducerea rapid a paietei n vasul destinat decongelrii;

- aezarea corect a canistrei la locul destinat din interiorul containerului;

- astuparea gtului containerului cu dopul original.
Decongelarea materialului seminal de taur ambalat n paieta de tip "SEMTEST" se
face la temperatura de +34 pn la +350C, timp de 1 minut pentru nsmnare i de +37 pn
la +380C timp de 2 minute pentru examenul mobilitii spermatozoizilor.
Se interzice cu desvrire citirea datelor nscrise pe paiet nainte ca aceasta s fie
scufundat n baia de decongelare.
Pregtirea i echiparea instrumentarului pentru nsmnare

Imediat dup decongelare paieta se scoate din baie se terge pe toat lungimea ei cu
tifon sau hrtie de filtru (trebuie s fie perfect curat) dup care se verific datele nscrise pe
ea, respectiv codul i numrul de ordine al arjei. n continuare, n urmtoarea ordine, se va
proceda la:
- omogenizarea coninutului paietei prin 2-3 rsturnri succesive, prin prindere ntre
degetul mare i cel arttor;
- nclzirea prin frecare a tecii metalice a pistoletului cu ajutorul unei buci de tifon
sau hrtie de filtru;
- constatarea prezentei bulei de aer la extremitatea superioar a paietei; n cazul n care
nu este format se aplic, cu degetul arttor, lovituri uoare pe tubul paietei;
- secionarea perfect orizontal, cu ajutorul unui foarfece drept, a captului superior al
paietei, la mijlocul bulei de aer;
- introducerea paietei n poziie vertical, n camera pistoletului, cu dopul de laborator
n jos;
- aplicarea ghenei (pipetei de material platic) peste paieta introdus n pistolet, pn la
mularea perfect peste extremitatea acesteia;
- fixarea ghenei de corpul pistoletului, la baza acestuia, cu ajutorul inelului de plastic;
- introducerea i glisarea, cu atenie, a tijei-piston n interiorul pistoletului, pn n
momentul cnd extremitatea pistoletului a intrat n contact cu dopul de laborator; - se verific
etaneitatea paietei cu vrful ghenei prin apsarea uoar a pistonului pn la apariia unei
picturi de material seminal;
Echiparea pipetei universale tip "SEMTEST"
Pentru echiparea acestei pipete operatorul are nevoie de:
- pipete universale (ghene);
- 1-2 tije metalice galvanizate;
- 1-2 tije piston.
Pentru introducerea i fixarea paietei decongelate n pipeta universal tip "SEMTEST"
se procedeaz astfel:
- se extrage o ghen din punga de material plastic care se taie la un col i apoi se
nchide prin ndoire cu ajutorul unei cleme;
- se nclzete pipeta prin frecare cu tifon sau hrtie de filtru;
- se introduce paieta n lumenul pipetei cu captul deschis nainte (dup secionarea
dopului uzinal);
- urmeaz mpingerea uoar a paietei spre dopul conic, cu ajutorul tijei metalice
galvanizat, pn cnd captul deschis al paietei a intrat i s-a fixat etan pe vrful conic al
pipetei, pe o lungime de 1-2 cm;
- n continuare se aplic i se fixeaz prin mpingere suportul metalic la extremitatea
opus vrfului paietei. Acesta servete la sprijinirea degetelor n momentul cnd se acioneaz
asupra tijei piston, n timpul inoculrii materialului seminal;

- se introduce tija-piston pn la contactul cu dopul de laborator al paietei;

- se mpinge, printr-o micare lung, tija-piston, pn dispare bula de aer i apare la
extremitatea conic a pipetei universale pictura de material seminal.
Dup verificarea la microscop a calitii materialului seminal (folosind pictura
obinut) se poate executa nsmnarea femelei.

BIBLIOGRAFIE

1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.

Bogdan, Al i colab. 1981 - Reproducia animalelor de ferm. Edit. Scrisul romnesc, Craiova
Dumitrescu, I. i colab. 1976 - Reproducia la bovine. Edit. Ceres, Bucureti.
Liciu, Gh. i colab.1985 - Ghid tehnic al operatorului de nsmnri artificiale la taurine.
Edit. Ceres, Bucureti.
Liciu, Gh., 2000 - Reproducia dirijat la taurine. Edit. Ceres, Bucureti.
Lupan, V., Chilimaru, S., Ujic, V.,1997 - Tehnologia creterii bovinelor. Edit. "Tipografia
central", Chiinu.
Roca, O., 1993 - Biotehnica reproduciei la bovine prin nsmnare artificial.
tefnescu, Gh. i colab. 1999 - ndrumtorul cresctorului de animale. Fundaia Naional
"Satul Romnesc", Bucureti.
Tnase, D. i colab. 2000 - Biotehnici i biotehnologii de reproducie n zootehnie. Edit. "Ion
Ionescu de la Brad", Iai.