INTRODUCERE

IMUNOLOGIA - este tiina care se ocup cu studiul

mecanismelor aprrii antiinfecioase, mecanisme prin care
organismul reuete s discrimineze structurile proprii, fa de
cele strine, non-self. (P. Kourilsky - Discriminarea ntre self
i non-self este inima imunologiei).
Mecanismele supravegherii imunologice sunt asigurate de
ctre sistemul imun, care cuprinde organe, celule i mediatori
chimici variai.

APRAREA ANTIINFECIOAS cuprinde dou

categorii de mecanisme biologice:
REZISTENA NATURAL - cu mecanisme
nespecifice, nnscute, de aprare imunologic, determinate
genetic i cu specificitate de specie, asigurate prin:
bariere fizice de organ, bariere cutanate i mucoase
factori celulari;
factori umorali.
 IMUNITATEA DOBNDIT - cu mecanisme specifice,
dobndite, de aprare mpotriva unui anumit agent infecios (cu
determinism genetic), prin intermediul:
imunitii mediate celular (IMC);
imunitii umorale (IU).
Astfel se realizeaz i se pstreaz memoria imunologic
fa de respectivul agent infecios.

CAPITOLUL 39
REZISTENA NATURAL
Mecanismele de aprare respective sunt prezente la toi
indivizii unei anumite specii i reprezint prima linie de aprare
la contactul cu orice agent infecios (lipsa specificitii).

FACTORII REZISTENEI NATURALE

BARIERE ANATOMICE
Tegumentele
integritatea lor structural constituie o barier mecanic
(excepii: genurile Leptospira, Treponema care pot ptrunde prin
tegument intact);
 filmul lipidic superficial al pielii are un pH acid, care
confer un efect bactericid.
Mucoasa respiratorie:
barier mecanic;
mucusul nglobeaz microorganismele care sunt expulzate
prin tuse;
mucusul conine lizozim cu efect antibacterian.
Mucoasa conjunctival:
lacrimile ndeprteaz bacteriile, att prin intermediul
lizozimului, ct i prin splare mecanic.
Mucoasa digestiv:
microorganismele sunt permanent ndeprtate prin
intermediul peristaltismului intestinal;
aciditatea gastric i secreiile pancreatico - biliare au un
efect bactericid.
Mucoasa urogenital:
jetul urinar ndeprteaz permanent microorganismele;
flora comensal local i pH-ul vaginal acid realizeaz un
efect bactericid;
spermina din lichidul seminal determin efectul bactericid.
 FACTORI UMORALI
Lizozimul:
efect bactericid asupra bacteriilor gram pozitive.
Sistemul complement:
rol virocid pentru virusurile mari, nvelite;
rol imunomodulator;
rol opsonizant;
efect bactericid asupra bacteriilor gram negative.
Sistemul properdinic:
activarea fagocitozei;
activarea complementului;
rol bactericid.

FACTORI TISULARI I CELULARI

Polipeptide bazice (de tipul protaminei i histonei);
acizi grai din esuturi - cu efect bactericid;
Interferonii - cu aciune antiviral;
Enzime ale fagocitelor - cu efect bactericid.
 MICROBIOCENOZE
Populaiile bacteriene comensale, specifice unor anumite
teritorii ale organismului, mpiedic suprapunerea bacteriilor
patogene prin:
competiia pentru substane nutritive; bacteriocine.

FEBRA
reprezint un mecanism nespecific al aprrii imunologice,
prezent n majoritatea infeciilor;
stimuleaz mecanismele cooperrii ntre diverse celule
imunologice;
limiteaz multiplicarea agenilor infecioi, prin alterarea
temperaturii optime de dezvoltare a acestora.

FAGOCITOZA I INFLAMAIA
reprezint mecanismul major al ndeprtrii
microorganismelor, mecanism n care factorii celulari au un rol
esenial.
Din sistemul fagocitar mononuclear fac parte:
celula su angajat (celula de origine a elementelor
celulare hematopoetice)
 monoblastul
promonocitul
monocitul (din snge periferic, monocitul circulant)
macrofagul (din esuturi, spre exemplu macrofagele
difereniate):
din ficat;
din plmn (macrofagul alveolar);
din seroase (macrofagul pleural sau peritoneal);
din sistemul nervos (microglia);
din esutul osos (osteoclaste);
din esutul conjunctiv (histiocit);
din mduva osoas;
din splin i ganglioni limfatici.
macrofagele din diferite exudate;
celulele Langerhans multinucleate;
celule de corp strin, toate acestea fiind prezente n orice
esut inflamat.
Durata tranzitului celular n fiecare compartiment (la om)
este de:
2 - 3 zile n mduva osoas;
 3 - 4 zile n snge;
1 - 5 sptmni n esuturi.
Acest flux dublu de celule snge esuturi reprezint
aproxi-mativ 13,5 milioane de celule/kg/zi. Numrul total al
macrofagelor este de ordinul miliardelor (aproximativ 2,5
miliarde / kg corp).
Macrofagele tisulare prezint o mare heterogenitate structural
i funcional n funcie de esutul n care apar i n funcie de
starea macroorganismului (sntate sau boal).
receptorii celulari de suprafa ai macrofagelor
Aceti receptori sunt foarte diveri (aproximativ 30 tipuri),
im-plicai n fagocitoz sau rspuns imun.
receptorii pentru fragmentul cristalizabil (Fc) al
imunoglobulinelor
a) sensibili la proteinaze - leag selectiv subclasele de IgG1 i
IgG3 monomere (aa - numiii anticorpi citofili, cu afinitate
celular).
b) rezisteni la proteinaze - mediaz legarea eficient a
complexelor antigen - anticorp sau a agregatelor de
imunoglobuline, favoriznd fagocitarea lor (la om leag n
special IgG2 i IgG4).
 Receptorii pentru FC ai imunoglobulinelor A sunt implicai
n aprarea imunologic la nivelul sistemului imun al
mucoaselor.
receptori pentru complement
a) receptori pentru componentul C3 al sistemului complement
(n special pentru C3b)
b) receptori pentru componentul C5 al sistemului
complement (C5a)
Prezena fraciunii C3b reprezint un element necesar
pentru promovarea fenomenelor fagocitozei.
diveri receptori pentru interleukine (IL2) n special pentru
interleukinele implicate n activarea macrofagului i n
proliferarea acestuia.
receptorii pentru fibronectin
Favorizeaz adeziunea macrofagelor de resturi celulare sau
fibrin, contribuind la ndeprtarea lor din organism.
receptori pentru glicoproteine i lipoproteine normale i
alterate
2 macroglobulin proteinaze.
receptori pentru molecule HLA cu rol n determinismul
proceselor de cooperare celular.
SISTEMUL FAGOCITAR MONONUCLEAR I
FAGOCITOZA

FAGOCITOZA / PINOCITOZA
Macrofagele au capacitatea de a internaliza (de a
ENDOCITA) foarte activ substane lichide (pinocitoza de la
grecescul pinein = a bea) sau substane solide (fagocitoza de la
fagein = a mnca)

Fagocitoza poate fi de natur:

imun - mediat prin receptorii Fc i ai sistemului
complement
macrofagele reprezint a doua linie celular de celule
fagocitante (dup PMN) i nu distrug complet
microorganismele.
legarea particulelor este posibil i la temperaturi sczute
(la 4C), dar ingestia acestora este condiionat de temperaturi
mai mari de 20C. Prin acest mecanism s-ar putea explica
frecvena mai mare a infeciilor respiratorii n sezonul rece.
neimun - mediat prin alt tip de receptori
se realizeaz curirea unui teritoriu de resturi celulare,
spre exemplu n repararea plgilor, fiind totui discutabil
intervenia macrofagelor n embriogenez.
 FUNCIA SECRETORIE
Macrofagul secret aproximativ 100 produi de secreie, cu
diverse structuri i efecte biologice, de exemplu:
produi enzimatici: - enzime lizozomale, colagenaze,
elastaze, lipoproteinlipaze, fosfataze, fosfolipaze, etc.
produi cu rol antiinfecios:
interleukina 1 (IL1), lizozim
interferoni,
compui ai sistemului complement
citokine - factorul necrozant tumoral, factorul de stimulare
al coloniilor de granulocito - macrofage, factori
limfostimulatori.
Interleukina 1 este o glicoprotein cu greutate molecular
de aproximativ 15.000 , secretat de ctre macrofag, cu roluri
impor-tante:
acioneaz asupra limfocitelor THelper;
stimuleaz producia de interleukin 2 (IL2);
stimuleaz proliferarea limfocitelor B (i indirect a
anticorpilor);
amplific efectele reaciilor inflamatorii i imunitare.
Tabelul nr. 19 - Principalii produi de secreie ai macrofagelor
(dup Zarnea)
ENZIME:
Lizozim
Arginaz
Lipoprotein lipaz
Angiotensina
Convertaz

PROTEAZE NEUTRE:
Activatorul plasminogenului
Colagenazele de tip I, II, III, IV, V
Proteinazele citolitice
Elastazele

HIDROLAZE ACIDE:
Proteinaze
Peptidaze
Glicozidaze
RNA-aze
DNA-aze
Lipaze
Fosfataze
Sulfataze

METABOLII AI
OXIGENULUI:
H2O2
Anionul superoxid
Radicalul hidroxil
Singlet oxigen

COMPONENI AI COMPLEMENTULUI:
C1, C2, C3, C4, C5
Factorii B, F, D
Properdin LIPIDE BIOACTIVE:
Prostaglandina E2
Tromboxan B2
Leucotriena C

PROTEINE PLASMATICE:
Fibronectin
Factorul I (inactivatorul C3b)
Factorul H (inactivator-accelerator al C3b)
Proteine de coagulare
Factorii V, VII, IX, X
Tromboblastin celular
Transcobalamina II
Apolipoproteina E

METABOLII AI NUCLEOTIDELOR:
cAMP
Timidin
Uracil
Acid uric

FACTORI DE REGLARE FUNCIONAL:

Interferoni
Interleukina 1
Factori chemotactici pentru neutrofile

FACTORI STIMULATORI AI PROLIFERRII PENTRU:

Fibroblati
Endotelii
Celule B
Celule T
Factorul stimulator al coloniilor
Precursori ai eritrocitelor

FUNCIA DE COOPERARE CU SISTEMUL IMUN

macrofagul este principala celul prezentatoare de antigen
(CPA), celul care realizeaz o degradare menajat a
antigenului, pentru developarea epitopilor semnificativi din
punct de vedere imunologic.
Macrofagul particip la cooperrile celulare n vederea
realizrii rspunsului imun (cu limfocitul B, T - diverse
subclase, etc.)
 FAGOCITOZA
Fenomenul a fost descris n 1884 de ctre Metschnikov.
Fagocitoza reprezint proprietatea unor celule de a ngloba
i digera particule strine; cuprinde procese de endocitoz
(pinocitoz, fagocitoz).
Fagocitoza se realizeaz prin intermediul fagocitelor
profesioniste:
Polimorfonucleare neutrofile (microfage)
Macrofagele sistemului fagocitar mononuclear (macrofage)

Tabelul nr. 20. Principalele caracteristici de difereniere ntre

microfage i macrofage.
Microfage (PMN) Macrofage
celule cu via scurt (ore, zile)
sunt primele celule care fagociteaz (primele care ajung la
locul infeciei)
diger total bacteriile fagocitate prin enzimele lizozomale
mieloperoxidaz prezent n lizozomi
neutrofilele sunt foarte active
eozinofilele fagociteaz complexe antigen - anticorp i au
rol antiparazitar
 au pe suprafa receptori pentru C3 i pentru FC al IgG
celule cu via mai ndelungat
celule mai puin mobile
a doua linie celular care fagociteaz
diger parial bacteriile fagocitate
numrul de lizozomi crete n macrofagul activat
nu au mieloperoxidaz
intervin n special asupra bacteriilor care au un parazitism
celular
reprezint principala celul prezentatoare de antigen
(CPA), realiznd degradarea menajat a antigenului
celul citotoxic
au pe suprafa receptori pentru C3 i pentru FC al IgG

Fig. nr. 17. Migrarea PMN n focarul inflamator (dup Galin,

1980)

ETAPELE FAGOCITOZEI
 Chemotaxia - reprezint migrarea dirijat a fagocitelor
nspre stimuli care reprezint un gradient de concentraie.
Opsonizarea - etapa de pregtire a fagocitozei (opsonein
= a pregti pentru mncare), cu recunoaterea particulei strine
i ataarea sa pe suprafaa fagocitului.
nglobarea - penetrarea substanei strine n fagocit
Omorrea i digerarea microorganismelor, prin mecanisme
oxidative i neoxidative.

Chemotaxia
Factorii chemotactici pot fi de origine bacterian sau pot fi
componente ale organismului gazd.
Factorul C5a este cel mai important factor chemotactic al
organismului gazd.
Ali factori chemotactici ai gazdei:
componente ale sistemului complement
histamina, kalikreina, derivai arahidonici
limfokine sau factori eliberai de ctre neutrofile.
Aceti factori determin mobilizarea fagocitelor n focarul
inflamator.
Opsonizarea
 Este condiionat n principal de prezena pe macrofage a
receptorilor celulari cu afinitate mare pentru IgG i C3 al
sistemului complement. Fenomenul poate fi specific sau
nespecific.
Opsonizarea specific
Majoritatea bacteriilor trebuie acoperite cu anticorpi i/sau
complement, pentru a putea fi fagocitate.
Receptorul pentru fragmentul FC al imunoglobulinelor de
pe suprafaa fagocitelor acioneaz ca i liganzi, atand
bacteriile pe suprafaa fagocitelor (imunoglobulinele formeaz o
punte de legtur ntre fagocit i bacterie).
Opsoninele specifice, active n absena complementului
sunt imunoglobulinele IgG1 i IgG3.
Opsoninele specifice, active n prezena complementului
sunt imunoglobulinele IgG2, IgG4,IgM, care duc la eliberarea
fragmentului C3b, care se ataeaz pe suprafaa bacteriei.
Opsonizarea nespecific
Se realizeaz n prezena fibronectinei, care mrete
aderena celulelor de substraturi, de suprafeele rugoase sau de
suprafaa diferitelor componente ale peretelui celular bacterian.

nglobarea
 Fagocitul emite prelungiri ale membranei celulare
(pseudopode), acoper bacteria pentru a forma o vezicul
fagocitar. Formarea fagozomului (vezicula fagocitar) este
consecina unui proces progresiv de nglobare, care implic
apoziia continu de liganzi i receptori, pn cnd particula va
fi complet nchis. Griffin (1976) a denumit acest proces
mecanism de fermoar .

Fig. nr. 18. Formarea fagozomului (dup Zarnea)

Omorrea i distrugerea microorganismelor fagocitate

- Fagozomii fuzioneaz cu lizozomii i formeaz
fagolizozomi
Majoritatea microorganismelor fagocitate sunt distruse n
fagolizozomi n cteva minute sau aproximativ dou ore.
Mecanismele distrugerii microorganismelor sunt mecanisme:
oxidative
neoxidative.
Mecanismele oxidative - prin aa-zisa explozie
respiratorie genereaz O2-, H2O2, HO- i acid hipocloros i
hipohalogeni sub aciunea mieloperoxidazei. inta
mecanismelor oxidative o reprezint lipidele nesaturate
membranare, enzimele sau acizii nucleici. Aceste evenimente
biochimice au loc n fagolizozomi (n special oxidarea glucozei
prin un-tul hexozo - monofosfat).
Fig. nr. 19. Mecanismele oxidative care contribuie la efectul
bactericid al PMN (dup Ivanof i colaboratorii)

Mecanismele neoxidative - polipeptidele bazice, lizozimul,

lactoferina, pH - ul acid (n special la nivelul fagolizozomului)
exercit un rol bactericid. Unele bacterii, dei sunt nglobate n
macrofage - nu pot fi distruse (ex.: Mycobacterium
tuberculosis); astfel, acestea sunt ferite de aciunea celulelor
sistemului imunitar sau a chimioterapicelor.
Pentru a crete eficiena de fagocitare a macrofagului, prin
intermediul interleukinelor elaborate de ctre limfocitul T, se
obine aa - numitul macrofag activat (cu o cantitate crescut
de enzime lizo-zomale).
Macrofagele particip la eliminarea celulelor infectate cu
virusuri (fie direct, fie indirect - prin intermediul interferonului
produs, care stimuleaz mecanismele citotoxicitii).

INFLAMAIA
 Reprezint o succesiune de reacii vasculare, umorale sau
celu-lare fa de ageni infecioi sau fizico - chimici.
Reaciile inflamatorii sunt locale i se caracterizeaz prin:
- eritem (rubor)
- edem (tumor)
- creterea temperaturii locale (calor)
- durere (dolor)
- tulburri funcionale (functio lesa)

Factorii vasculari
Leziunea determin - vasodilataie
- creterea permeabilitii capilare
- modificri ale celulelor epiteliale vasculare, care
favorizeaz diapedeza.

Factorii celulari
Spre locul infeciei, se deplaseaz prin diapedez, n urma
stimulilor chemotactici: polimorfonucleare (sunt primele celule
care ajung n focarul inflamator), monocite, limfocite.
 Fagocitele nglobeaz i diger microorganismele din
focarul inflamator. Celulele imunologice vor coopera, n
vederea realizrii rspunsului imun.
Factorii umorali
fibrinogen (care se transform n fibrin, cu rol de
localizare a focarului)
lizine - lizozim (cu rol bactericid)
sistem complement (mediator al inflamaiei), activat pe cale
clasic sau alternativ
ali mediatori: histamina, serotonina, catecolamine, kinine,
factor Hagemann, leucokinine, limfokine, sistem prostaglandine-
tromboxan, substana lent reactiv anafilactic (SRS - A)
Activitatea mediatorilor inflamaiei se face ca urmare a
modificrilor din focarul inflamator. Totui, cel mai important
mediator l reprezint sistemul complement, care promoveaz:
vasodilataia capilar
creterea permeabilitii vasculare
eliberarea enzimelor lizozomale (n fagocitoz)
lezarea membranelor celulare.
Unii mediatori ptrund n circulaia general i determin
sindromul de faz acut al inflamaiei concretizat prin:
 creterea proteinei C reactive (foarte semnificativ - n
infeciile bacteriene i n mod discret n infeciile virale)
creterea vitezei de sedimentare a hematiilor
creterea numrului de polimorfonucleare neutrofile
creterea fibrinogenului i a cantitii haptoglobinelor
creterea titrului sistemului complement

CAPITOLUL 40
SISTEM IMUN. ORGANE LIMFOIDE
Rspunsul imun reprezint rspunsul organismului agresat
prin intermediul agenilor infecioi (bacterii, parazii, virusuri,
etc.). Rspunsul imun este realizat prin intermediul unui sistem
specializat n acest sens, denumit sistem imun. Componentele
acestui sistem (organe, celule i molecule) se gsesc n tot
organismul i constituie aproximativ 1% din greutatea corpului.

Tabelul nr. 21 - Componentele sistemului imun (dup Olinescu)

:
ORGANE LIMFOIDE PRIMARE Timus
Mduva osoas
Echivalentele bursei lui Fabricius
 SECUNDARE Ganglioni limfatici
Splina
Apendicele
Plcile Peyer
Foliculi limfatici din mucoase i submucoase
CELULELE GRANULOCITE Neutrofile
Eozinofile
Bazofile
MONOCITE Macrofage
Celule dendritice
LIMFOCITE De tip T (cu subpopulaii)
De tip B
Celule NK (natural killer)
Celule K (killer)
Celule LAK (celule ucigae activate prin limfokine)
MOLECULE IMUNOGLOBULINE IgG, IgA, IgM, IgE, IgD
ALTELE Molecula HLA
Diveri receptori imunitari (ex.: TCR)
Sistem complement
Citokine (monokine, limfokine)

ORGANELE LIMFOIDE

Organele limfoide prezint o structur fin reticular,

structur n ochiurile creia se dispun celule cu rol imun.
Organele limfoide sunt delimitate la exterior de o capsul
conjunctiv, din care pornesc spre interior travee, ce realizeaz
compartimente interioare.

Clasificarea organelor limfoide

Se realizeaz dup dou criterii :
1. Modul de apariie n embriogenez:
Organele limfoide primare apar iniial n evoluia
filogenetic i n embriogenez. Se denumesc i organe limfoide
centrale, pe baza importanei n producerea i diferenierea celor
dou tipuri de limfocite (timusul - pentru limfocitele T i
echivalentele bursei lui Fabricius - pentru limfocitele B).
2. Aspecte funcionale:
 Organele limfoide primare educ precursorii celulari
pentru realizarea funciilor lor (ctigarea imunocompetenei).
Organele limfoide secundare sau periferice, (enumerate
anterior) reprezint sediul n care celulele maturate i
desfoar activitatea.
Organele limfoide secundare sunt foarte bine vascularizate,
ceea ce favorizeaz :
ntlnirea limfocitelor cu diverse antigene
recircularea celulelor sistemului imunitar i rentoarcerea
acestor celule n teritoriile specifice (zone timus dependente,
populate de ctre limfocitele T i zonele timus independente
populate de ctre limfocitele B).

CELULE LIMFOIDE

Tabelul nr. 22. Distribuia limfocitelor T i B n diferite organe

limfoide i n sngele periferic (Olinescu)
Organul limfoid Celule prezente %
T B
Timus 100 0
Mduva osoas 0 100
Canal toracic 80-90 4-10
Ganglioni limfatici 60-80 20-35
Splin 30-50 50-60
Plci Peyer 30-35 60-70
Snge periferic 60-80 5-25

Cantonarea celulelor n teritorii specifice se numete

fenomen de stabilire a domiciliului (englez - homing) i se
realizeaz prin intermediul unor receptori specifici de natur
polipeptidic, respectiv antigenul CDW44 de pe suprafaa
limfocitelor i a celulelor neuronale, cu o greutate molecular de
85 - 95 k . Acest receptor pentru ecotaxie conine trei duble
legturi disulfidice intralan, cu diverse locuri de fixare a
oligozaharidelor. Acest receptor recunoate (n prezena
calciului) polizaharidele bogate n G-6-P sau M-6-P de la nivelul
ariilor limfoide.
Sistemul de homing asigur posibilitatea de maturare n
continuare a limfocitelor (sub aciunea stimulilor antigenici) i
transformarea lor n celule efectoare sau cu memorie
imunologic.

Teoria seleciei clonale Burnet

 n ontogenez se difereniaz limfocite capete de clon, aa
numite clone interzise, care nu declaneaz rspuns imun fa
de antigenele self, proprii organismului (astfel se previn
fenomene autoimune).
n perioada extrauterin, antigenele funcioneaz ca i
presori selectivi, acionnd asupra celulelor capete de clon
capabile s discrimineze structurile non-self (strine
organismului). Limfocitele sunt principalii ageni de
discriminare self-non self, att n perioada intrauterin, ct i
n perioada extrauterin.
Diferenierea limfocitelor i ctigarea imunocompetenei
este un proces care se desfoar n numeroase etape, cu
modificri gradate ale antigenelor de suprafa celular
(consecutive unor procese de reasortare genetic).
Din punct de vedere funcional, limfocitele T (i cele B) se
pot afla n urmtoarele stadii de maturare :
Precursori celulari - care nu exprim pe suprafaa lor nici
un fel de receptori (n afar de cei pentru homing); sunt celule
tinere, fr funcii, n curs de maturare.
Celule naive - i-au dobndit imunocompetena (pot
recunoate antigene specifice), dar nc nu au avut ocazia s i
exercite funciile.
Celulele efectoare - celule imunocompetente care au venit
n contact cu anumite antigene i care devin celule cu memorie
imunologic (pot recunoate un antigen pe care l-au mai
ntlnit).

Dezvoltarea ontogenetic a limfocitelor

Celula surs apare n viaa fetal n sacul vitelin, apoi n
ficat i n timus, unde se difereniaz. Cu puin timp nainte de
natere i apoi pentru tot restul vieii, mduva hematogen preia
funcia de furnizare a celulei surs limfoide.
Din celula surs limfoid se difereniaz :
limfocitele T - migreaz n timus n sptmna a opta a
vieii intrauterine
- se difereniaz sub influena timozinei, timopoetinei i a
fac-torului umoral timic, n subpopulaiile caracteristice (etapa
timic);
- diferenierea lor continu i dup migrarea acestora n
organele limfoide secundare, n zonele timodependente (etapa
posttimic).

Fig. nr. 20. Maturarea limfocitelor T (dup Haeney, 1984)

limfocitele B - se difereniaz din celula surs, n
sptmna a 8-a a vieii intrauterine
- se ajunge la celula pre-B, caracterizat prin prezena n
citoplasm a IgM. Diferenierea continu cu apariia unui
limfocit B imatur imunologic (cu receptori de suprafa - IgM
monomerice). Dup sptmna a 13-a de via se difereniaz
limfocitul B imunocompetent, cu receptori membranari - IgM i
IgD monomerice.

Fig. nr. 21. Dezvoltarea limfocitului B (dup Ivanof i

colab., 1982)

- Angajarea imunologic a limfocitului B imunocompetent

se realizeaz dup natere, sub influena stimulilor antigenici,
care determin apariia plasmocitului secretor de
imunoglobuline. (Etapa dependent de antigen).

limfocitele nule - nu au markerii caracteristici limfocitelor

B sau T.
- n proporie de 10 % din totalul celulelor limfoide.
- populaie foarte heterogen de celule, cu diferite roluri
imunologice :
Celulele NK - ucigae naturale (natural killer)
Celulele K - ucigae (killer) - produc citotoxicitate de-
pendent de anticorpi
 Celulele LAK - ucigae activate prin limfokine; produc
citotoxicitate stimulat prin iL2 i INF .
Celulele B sau T - precursori, care nu au nc markerii
imunologici caracteristici.
Extraordinara heterogenitate a limfocitelor poate fi
exprimat i pe baza unor criterii :
Morfologice - limfocit mic / limfocit mare
- limfocit neted / limfocit cu viloziti
Durat de via - limfocite cu durat de via scurt sau
lung
(memoria imunologic)
Proprieti fizice - densitate, mobilitate, ncrcare electric
Funcionale - n funcie de rolul bine stabilit n declanarea
rspun-sului imun

Limfocitele T - reprezint efectorii imunitii mediate

celular (IMC). Cuprind subpopulaii celulare, care ndeplinesc
anumite funcii imunologice:
Limfocitele TH
helper, ajuttoare (65% din totalul celulelor T)
marker de difereniere : CD4
 ajut proliferarea i diferenierea celulelor imunitare
stimuleaz maturarea limfocitului B, apariia plasmocitelor
i pro-ducia de imunoglobuline
stimuleaz limfocitele citotoxice s distrug celulele int
ajut exercitarea funciilor supresoare de ctre limfocitul T
supresor
stimuleaz activitatea celulelor ucigae naturale,
poteneaz activitatea macrofagelor
stimuleaz producerea mediatorilor specifici de tipul
interleukinelor.
Enumernd aceste roluri, se deduce faptul c lfTH deine
rolul central n evoluia rspunsului imun i deine rolul
dirijorului orchestrei de celule imunologice.
Limfocitele TA (Amplifying T cell) realizeaz
amplificarea proliferrii i diferenierii celulelor T killer. Ca i
limfocitele TH i limfocitele TA sunt supuse restriciei
complexului major de histocompatibilitate (CMH)
Limfocitele TS
supresoare au rol esenial n modularea rspunsului imun,
limitnd, pondernd - att rspunsul imun mediat celular, ct i
cel mediat umoral.
 Markerul de difereniere este CD8 (CD - cluster of
differentiation = antigen de difereniere)
Activitatea lor este supus restriciei complexului major de
histocompatibilitate
Limfocitele T contrasupresoare (TCS) contracareaz
activitatea lfTS, acionnd sinergic cu lftH
Limfocitele TC
citotoxice, efectoare
posed structura de difereniere CD8 (lfT8+)
celulele acioneaz direct i specific (sub restricia CMH)
asupra celulelor allogene cu complex CMH diferit de cel
propriu, uciderea realizndu-se n absena anticorpilor i
sistemului complement
Efectul citocid se realizeaz (dup activarea specific)
asupra:
- celulelor infectate cu virusuri
- celulelor tumorale
- celulelor grefelor incompatibile.
Limfocitele TDH - particip n reaciile de
hipersensibilitate de tip tardiv i au capacitatea de a recruta
macrofagele i de a delimita situsul de infecie (acioneaz sub
restricia CMH).
 Dup rol, subpopulaiile limfocitelor T le putem clasifica
drept reglatoare : lfTH, lfTA, lfTS, lfTDH sau efectoare : lfTC.
n ansamblu, limfocitele T mature au caracteristicile :
Sunt principalii ageni de discriminare self - non self
produc mediatori solubili (aa numitele limfokine )
prezint subpopulaii celulare cu rol reglator sau efector
produc efecte importante n aprarea organismului :
activitate citotoxic mediat celular
aciune antiviral, antitumoral, antifungic, antiparazitar,
antigref incompatibil
particip la procese de cooperare celular foarte complexe,
eseniale pentru evoluia unui rspuns imun eficient
i pot autoregla propriile funcii, rspunznd la propriile
citokine
interacioneaz n special cu antigene de natur proteic i
le leag prin intermediul unor receptori specializai, receptorii
celulei T (T cell receptor = TCR)
nu prezint imunoglobuline de suprafa (ancorate) aa cum
prezint limfocitele B, dar prezint pe suprafa structuri de
difereniere CD4 (lfTH) sau CD8 (lfTS, lfTC).
 Limfocitele T posed receptori pentru hematii de oaie, cu
posibilitatea aglutinrii acestora n absena anticorpilor i/sau a
sistemului complement (rozete neimune).
Limfocitele T se transform blastic i n prezena unor
mitogeni nespecifici, spre exemplu fitohemaglutinina i
concavalina A.
exist limfocite T cu memorie imunologic.

Limfocitele B
Reprezint mpreun cu descendenii lor difereniai
(limfoblastele i plasmocitele) - efectorii imunitii umorale,
fiind singurele celule capabile s sintetizeze imunoglobulinele
cu rol de anticorpi.
Deriv (la mamifere) din celule educate, instruite de la
nivelul mduvei osoase.
Nu posed subpopulaii celulare i recunosc antigene libere
sau legate.
Se transform blastic n prezena antigenelor.
Posed pe suprafaa lor un numr impresionant de
receptori, n special de natur imunoglobulinic
(imunoglobulinele M i D - monomer, cu rol de receptori pentru
antigen).
Receptori de suprafa ai limfocitelor B
 Imunoglobulinele M i D monomerice:
Au o structur diferit comparativ cu cele secretate,
deoarece prezint o secven hidrofob transmembranar
suplimentar, care le ancoreaz n membrana celular.
Celulele care evolueaz spre plasmocit prin intervenia
stimulului antigenic i pierd receptorii membranari i i
dezvolt mecanismele moleculare necesare sintezei proteic
1 Bnoglobulinele);
Un plasmocit sintetizeaz o singur clas de
imunoglobuline; restul populaiilor de limfocite B din organele
limfoide vor sintetiza alte clase de anticorpi;
Experimental s-a demonstrat distribuia difuz a acestor
receptori imunoglobulinici pe suprafaa limfocitelor B i
redistribuirea lor pentru a forma grupri polare de tipul
bonetelor (fenomen de capping) n cazul n care se produce
stimularea antigenic.
Redistribuirea imunoglobulinelor de suprafa este urmat
de internalizarea lor, mpreun cu antigenul, prin endocitoz.
Acesta reprezint semnalul necesar pentru transformarea blastic
a limfocitelor B.
Markeri fenotipici neimunoglobulinici
 Pe lng imunoglobulinele de suprafa, celulele B prezint
o serie de antigene i receptori care pot fi identificai cu ajutorul
AMC.
Semnificaia acestor markeri nu este nc complet
cunoscut.
Marea majoritate a markerilor respectivi sunt implicai n
interaciunile limfocitelor B cu celelalte celule. Astfel de
structuri sunt :

antigene1 B (codificate de ctre CMH), care servesc

ca un dicionar de recunoatere a structurilor strine
receptorii pentru fragmentul FC al imunoglobulinelor G
receptorii pentru interleukine
receptorii pentru fragmentul C3 al sistemului complement
Limfocitele B formeaz rozete imune cu eritrocitele
heterologe, n prezena anticorpilor (de natur IgM) i a
sistemului complement (aa zise rozete EAC = eritrocite -
anticorpi - complement).
receptori pentru mitogeni: limfocitele B sunt insensibile la
aciunea fitohemaglutininei i a concavalinei A (care sunt foarte
active asupra limfocitelor T) dar sunt activate de mitogeni
lipopolizaharidici.
 Limfocitele B sunt celule mai mici i dense i ader
puternic de suprafee de sticl sau nylon, comparativ cu
limfocitele T.
Plasmocitele - reprezint ultimul stadiu de difereniere al
limfocitelor B. ntre limfocitul B activat (limfoblast B) i
plasmocit exist stadiul de plasmoblast.
sunt rar prezente n circulaie; apar n medulara
ganglionilor limfatici, pulpa roie splenic, lamina proprie a
esutului limfoid respirator (BALT), gastrointestinal (GALT) i
mduv.
nu posed receptorii limfocitelor B pe suprafa, n schimb
imunoglobulinele secretate acoper ntreaga suprafa celular.
Plasmocitele pot secreta aproximativ 2000 - 10.000 molecule de
imunoglobuline pe secund. Anticorpii produi au aceeai
specificitate ca i moleculele imunoglobulinelor membranare ale
clonei de celule B din care provin plasmocitele.

Limfocitele B cu memorie - provin din celulele B mature,

care dup stimularea antigenic nu sufer diferenierea spre
plasmocit, ci revin la stadiul de limfocit mic, cu via lung (luni
sau ani). Aceste limfocite cu memorie imunologic nu posed
receptori pentru FC, C3 sau IgD monomer. Pot s fie mai uor
stimulate dect celulele naive i mpreun cu limfocitele T cu
memorie - determin rspuns imun secundar.
 Celulele NK (Natural Killer)
Celulele ucigae naturale distrug fr restricia CMH celule
tumorale, celule infectate viral sau bacterian sau celule proprii,
modificate antigenic.
Aceste celule au rol important n aprarea organismului,
avnd rol reglator asupra celulelor hematopoetice i n special
asupra limfocitelor B (regleaz anticorpogeneza).
Celulele NK au o durat redus de via, nu sunt aderente i
nu sunt fagocitare.
Aparin unei subpopulaii limfocitare distincte, numit LGL
(large granular lymphocites - limfocite granulare mari), a cror
caracteristic morfologic principal este existena granulelor
azurofile intracitoplasmatice.
Celulele NK posed receptori pentru FC dar nu au
receptori pentru complement i nici imunoglobuline de
suprafa. Prezena pe suprafaa lor a markerilor de difereniere
CD2, CD4 i producia de interleukin 2 face plauzibil ipoteza
derivrii celulelor NK din linia limfocitar T.
Celulele NK recunosc i leag spontan celulele int, pe
care le distrug foarte rapid (cteva ore). Existena i funciile
celulelor NK sunt influenate de ctre urmtorii factori :
 vrsta subiectului (la vrstnici, activitatea i producia
acestor celule scade, fapt care explic o inciden mai mare a
tumorilor n preajma vrstei a treia)
factori genetici (exist indivizi cu un numr crescut de
celule NK, n timp ce alii prezint puine celule NK i o
marcat predispoziie spre tumori).
radiaiile, hormonii corticosteroizi, histamina, teofilina,
stressul - scad producia celulelor NK.
interleukina 2, interferonii, BCG, activeaz funciile lor
citotoxice nespecifice.

Celulele K (Killer)
Acest tip de celule realizeaz citotoxicitatea dependent de
anticorpi (ADCC = antibody dependent cellular cytotoxicity).
n acest tip de citotoxicitate, celula efectoare distruge
nespecific orice int care a fost recunoscut specific de ctre
moleculele de anticorpi. Pentru o singur celul int (Ex.:
hematii, limfocite deviate neoplazic, fibroblaste, etc.) sunt
necesare aproximativ 100 molecule de IgG, excesul de anticorpi
inhibnd activitatea litic.
Interferonii nu activeaz ADCC.
Citostaticele inhib acest tip de citotoxicitate.
 Celulele LAK
sunt celule ucigae activate prin intermediul limfokinelor
(IL2 sau INF ).
efectul antitumoral al celulelor LAK este evident n
sinergism cu efectul celulelor NK

CAPITOLUL 41
ANTIGENE I IMUNOGENE

Antigenul (imunogenul) - este reprezentat de ctre orice

substan strin care poate induce declanarea unor reacii
imunologice i care poate interaciona specific cu efectorii
imunitari.
Imunogenicitatea - capacitatea unei substane de a induce
un rspuns imun; de aceea, termenul mai corect pentru antigen
este sinonim cu imunogen.
Specificitatea antigenic - se refer la un anumit tip de
rspuns imun indus (caracteristic unui anumit antigen, unui
anumit epitop)
- 1 epitop reprezint situsul de pe un antigen care
interacioneaz cu o molecul de anticorp i care imprim
specificitatea imunologic prin structura sa (proteic sau
polizaharidic).
- 1 epitop este alctuit din civa aminoacizi sau cteva
polizaharide i reprezint imunogenul la scar molecular.
Proprietile fundamentale ale antigenului (imunogenului)
sunt:
Imunogenicitatea
Specificitatea

FACTORI CARE CONDIIONEAZ

IMUNOGENICITATEA:

Condiii filogenetice
- anumit substan este cu att mai imunogen, cu ct
aceasta este mai ndeprtat din punct de vedere filogenetic.
Astfel, antigenele bacteriene, virale, parazitare etc., ndeplinesc
aceast condiie.
- Constituenii proprii organismului pot deveni strini
(non-self) dac sufer modificri induse viral, bacterian,
tumoral, toxic, etc.
- Uneori, nu sunt recunoscute ca self aa - numitele
antigene sechestrate anatomic, (din cristalin, testicul, etc.) - n
momentul n care acestea trec n mod accidental n circulaie (n
urma traumatismelor). Din cauza poziiei anatomice particulare,
aceste antigene cantonate n cristalin, gonade, creier nu sunt
recunoscute ca self de ctre sistemul limfoid n perioada
embriofetal.
Caracterul de non-self nu este dat de prezena unor
molecule unice, originale pentru un organism, ci adesea este dat
de ctre modificri minime, care se traduc prin prezena unui
aminoacid sau monozaharid diferit.
Reaciile care apar n grefele de esuturi i organe
(exogene) au atras atenia asupra existenei pe suprafaa
celulelor respective a unor antigene care induc rspuns imun din
partea receptorului, urmate de respingerea grefei respective.
Aceste antigene difer de la individ la individ, exprimarea lor pe
suprafaa celulelor fiind codificat de ctre genele complexului
major de histocompatibilitate uman, aflat pe cromozomul 6.
CMH posed 3 regiuni genetice: CMH clasa I, a II - a i a III - a
ce codific antigenele HLA corespunztoare (human leucocytar
antigens)si componente ale complementului (vezi cap. Baza
genetic a rspunsului imun).

Antigenele HLA clasa I - Sunt prezente pe suprafaa tuturor

celulelor nucleate din organism i reprezint adevrate carnete
de identitate biochimic i genetic pentru fiecare individ n
parte. Pentru ca un anume antigen s fie recunoscut de ctre un
limfocit T citotoxic (CD8) - este necesar restricia HLA,
restricia CMH. Aceste molecule fac diferenierea self-non-
self i devin inta sistemului imunitar n trei situaii:
pentru respingerea de esuturi i organe incompatibile (non-
self)
cnd suprafaa celulelor proprii e modificat prin antigene
virale tumorale etc.
cnd moleculele HLA sufer procese de uzur sau
mutaii, ele devin autointe care vor fi eliminate.

Antigenele HLA clasa a II-a au o distribuie celular mai

limitat, n special pe suprafaa celulelor imunocompetente
(limfocit T, limfocit B, macrofag) i au un rol esenial n
declanarea reaciilor imunitare, prin interaciuni i cooperri
celulare, funcionnd ca un dicionar de recunoatere a
structurilor strine organismului.
Receptorii TCR de pe suprafaa limfocitelor T (receptori pentru
antigen) posed specificitate dubl: att pentru antigene, ct i
pentru o molecul HLA de pe suprafaa celulelor cu care
interacioneaz.

n concluzie, antigenele HLA clasa I intervin n prezentarea

antigenelor endogene ctre limfocitele T citotoxice, n timp ce
antigenele HLA clasa a II-a se asociaz cu antigene exogene
prelucrate, pe care le prezint limfocitul T helper (CD4).
Recunoaterea asociat a antigenului i a produilor CMH,
funcioneaz ca un sistem de siguran cu dou chei, care pe
de o parte limiteaz potenialul distructiv al limfocitelor i pe de
alt parte asigur eficiena rspunsului imun.
Astfel, se demonstreaz faptul c sistemul imunitar a
evoluat n aa fel nct ambele tipuri de molecule HLA servesc
ca i indicatoare rutiere pentru celulele T, ghidndu-le spre
antigen.

Fig. nr. 22 - Receptorul pentru antigen al limfocitului T (dup

Klein)

Condiii fizico-chimice. Greutatea molecular.

Pentru ca o substan s fie imunogen, GM minim trebuie
s fie de aproximativ 10000 . Cu ct o substan posed o GM
mai mare, cu att imunogenicitatea acesteia crete, prin creterea
numrului de epitopi. Epitopii sunt situsuri antigenice specifice,
capabile s interacioneze cu molecule de anticorpi. Numrul de
epitopi al unui antigen constituie valena unui antigen.
Imunogenicitatea antigenului este direct proporional cu valena
sa.
 Fig. nr. 23 - Structura unui antigen (imunogen)

Conformaia spaial a antigenului

 Sela (1969) demonstreaz faptul c, din punct de vedere
fizico-chimic exist dou categorii de epitopi:
- epitopi secveniali (lineari) - a cror imunogenicitate poate
fi modificat prin schimbarea secvenei monomerilor.
- epitopi conformaionali - structuri stereo-spaiale
particulare, cu modificarea imunogenicitii prin modificarea
configuraiei spaiale (de obicei a proteinelor globulare.

Fig. nr. 24 - Structura unui imunogen conformaional

(epitopii sunt numerotai 1,2,3,4,5)
n majoritatea situaiilor, anticorpii produi de proteinele
naturale recunosc mult mai bine epitopii conformaionali, dect
pe cei secveniali.
n aceste situaii, legturile antigen - anticorp sunt de tip
lact - cheie, pe baza potrivirilor de conformaie steric.
Epitopii conformaionali au o imunogenicitate crescut i o
gam larg de specificitate.

Accesibilitatea epitopilor
Zonele imunogene (epitopii) trebuie s fie dispuse la
suprafaa celulelor, pentru a fi accesibile efectorilor sistemului
imunitar. Antigenele corpusculare sunt fragmentate n macrofag
i epitopii vor fi ulterior dispui pe suprafaa acestuia (din
aceast cauz, macrofagul reprezint principala celul
prezentatoare de antigen (CPA) care poate expune i zone
imunologice aa - zise ascunse).

Natura chimic a antigenului

Imunogenele sunt substane organice macromoleculare:
Proteinele
- n special cele cu greutate molecular mare sunt foarte bune
imunogene, mult mai eficiente dect celelalte.
Polizaharidele
- sunt mai puin imunogene dect proteinele.
Lipidele, acizii nucleici
- sunt slabe imunogene, dar imunogenicitatea acestora crete n
substane complexe (lipoproteine, nucleoproteine, etc.)

Complexitatea structural a moleculei de antigen

Cu ct heterogenitatea moleculei de antigen crete, cu att
imunogenicitatea este mai exprimat. Astfel, antigenele
nucleoproteice, glicoproteice, lipoproteice sunt mai bune
imunogene dect antigenele simple.
 Izomerismul optic
Influeneaz imunogenicitatea, moleculele cu reziduuri de
aminoacizi levogiri (L) fiind mai imunogene dect cele cu
aminoacizi dextrogiri (D). (Explicaia este c moleculele L pot fi
mai uor degradate enzimatic n fagolizozomii celulelor
fagocitare).

Rigiditatea moleculei de antigen

O molecul stabil, rigid este mai bun imunogen
dect o molecul flexibil. Spre exemplu, gelatina dei are o
greutate molecular mare este lipsit de rigiditate. Dac acestei
substane i se mrete coninutul n Tyr sau n Trp, molecula
devine stabil i antigenic.

Persistena moleculei de antigen n organism

Persistena epitopilor n organism influeneaz
imunogenicitatea substanei respective. Polimorfonuclearele
neutrofile distrug epitopii n totalitate i funciile imune nu pot fi
stimulate. Dac antigenul persist nedegradat n fagocit, scade
imunogenicitatea substanei respective, pn la anularea ei. Se
demonstreaz astfel nc o dat - importana degradrii menajate
a antigenului, cu expunerea epitopilor specifici.
 Cantitatea de antigen
- Dozele mici de antigene induc formarea unor cantiti mici
de anticorpi, cu mare afinitate i specificitate pentru antigenele
respective.
- Dozele foarte mici de antigen stimuleaz n mod
preferenial limfocitele T, inducnd imunitatea mediat celular i
chiar memorie imunologic.
- Administrarea unei doze foarte mari de antigen poate fi
urmat de fenomenul de paralizie imunologic, ce se
caracterizeaz prin lipsa rspunsului imun.

Modalitatea de administrare a antigenului:

- Administrarea antigenelor n doze fracionate, la diferite
intervale - asigur un rspuns imun mult mai bun dect doza de
antigen unic.
- n funcie de natura antigenelor i cantitatea acestora,
asocierea antigenelor poate produce un efect sinergic n cursul
imunizrii
- Administrarea antigenelor mpreun cu anumii adjuvani
asigur o imunogenicitate superioar.
- Antigenele solubile, macromoleculare sunt mai imunogene
cnd sunt inoculate intradermic, dect pe cale intravenoas.
- Administrarea parenteral a antigenului ofer avantajele
contactului rapid cu celulele imunocompetente (protejeaz
antigenul de degradarea enzimatic posibil prin enzime
digestive).
Toate aceste constatri experimentale stau la baza regulilor
de administrare ale vaccinurilor.

Rolul factorilor genetici

A fost demonstrat experimental pe linii genetic pure de
oareci (linii inbread). Astfel de experimente au dovedit faptul
c markerii HLA pun amprenta unicitii individuale a
rspunsului imun. Spre exemplu, David C. i Mac Devitt
demonstreaz faptul c anumii oareci, incapabili de rspuns
imun la un antigen dat, pot produce, prin ncruciarea cu un
oarece hibrid (care rspunde la acel antigen) - un rspuns imun
normal la antigenul incriminat. Genele care controleaz
reactivitatea imun au fost denumite gene Ir (immune
response, adic genele rspunsului imun individualizat).
David C., analiznd semnificaia regiunii genetice I (a
complexului H2 de la oarece), afirm faptul c genele Ir au 6
categorii funcionale:
gene Ir care confer susceptibilitatea individului la boli
infecioase
gene Ir care intervin n procese de cooperare celular
 gene Ir care confer susceptibilitate crescut la boli
autoimune i alergice
gene implicate n sinteza unor mediatori imunologici
gene ce intervin n diferenierea celulelor imunocompetente
gene care codific respingerea de gref incompatibil
Factorii genetici influeneaz att mecanismele rezistenei
natu-rale, ct i mecanismele imunitii dobndite.

Vrsta organismului
Rspunsul imunologic al vrstelor extreme este mai slab (n
mod fiziologic) dect la maturitate.
La copii putem lua n discuie imaturitatea sistemului
limfoid, n timp ce la vrstnici putem constata declinul funciilor
acestui sistem.
Alterarea rspunsului imunitar la subiectul vrstnic:
Diminuarea mecanismelor rezistenei naturale
Involuia timusului i alterarea funciilor diverselor
subclase ale limfocitelor T
Alterarea rspunsului imun umoral, calitativ i cantitativ
Cooperri celulare defectuoase: limfocit T - limfocit B
Diminuarea reactivitii limfocitelor
 Consecinele patologice ale supravegherii imunitare la
subiectul vrstnic se produc prin fragilitate la aciunea agenilor
etiologici infecioi i prin frecvena crescut a maladiilor
autoimune i a bolii canceroase.
Nicolleti C. i colaboratorii au studiat modalitile de alterare a
rspunsului imun umoral la vrstnici, pornind de la experimente
pe animale. Studiul demonstreaz faptul c anticorpii
antifosforilcolinici (antipneumococ) - produi de ctre oareci
vrstnici (BALBC: 18 - 22 luni) sunt diferii din punct de vedere
structural i funcional, comparativ cu anticorpii produi de ctre
oarecii tineri (3-4 luni). Anticorpii produi de ctre oarecii
vrstnici au un coninut idiotipic mai srac i o capacitate de
legare a antigenului mai sczut.

MODALITI DE CLASIFICARE ALE ANTIGENELOR

(dup OLINESCU)

1. Dup natura antigenelor:

- Naturale (existente n natur)
- Sintetice (obinute artificial)
2. Dup sursa lor:
- Exoantigene (antigene exterioare organismului)
- Endoantigene (antigene proprii organismului, modificate
prin tumori, infecii virale, mbtrnire, etc.)
3. Dup gradul de nrudire genetic:
- Autohton (autolog) antigene proprii unui individ
- Singen (izolog) - antigenele provin de la indivizi ai aceleai
specii, dar identici din punct de vedere genetic (ex.: gemenii
monozigoi sau linii de animale inbread).
- Alogen (omolog) - provin de la subiecii aceleai specii,
diferii din punct de vedere genetic (ex.: sistemul ABO i
sistemul Rh)
- Xenogen (heterolog) - antigenele provin de la specii
diferite.
4. Dup necesitatea prezenei limfocitelor T, antigenele pot fi:
- Timodependente - pentru a declana reacii imune au
nevoie de prezena limfocitelor T (marea majoritate a
antigenelor naturale).
- Timoindependente - nu necesit prezena limfocitelor T,
realiznd stimularea direct a limfocitelor B. De exemplu:
flagelina, endotoxinele, polivinilpirolidona, etc., cu epitopi care
se succed n mod repetativ.
5. n funcie de necesitatea de prelucrare a antigenului, la
nivelul celulei prezentatoare de antigen - CPA.
- Tipul I - nu necesit prelucrarea. Ex.: fibrinogenul,
proteinele Listeriei monocitogenes.
- Tipul II - necesit doar desfurarea moleculei de
antigen, cu evidenierea epitopilor si. Ex.: lizozim, mioglobin,
ribonucleaz.
- Tipul III - necesit degradarea moleculei (ovalbumin,
citocromul C)
6. Natura antigenelor agenilor infecioi.
- Antigene bacteriene (somatice i difuzibile):
Somatice
- ale peretelui celular: polizaharidul C, endotoxinele bacililor
gram-
- capsulare: polizaharidele pnemnococice
- ribozomale: antigen P al bacteriilor patogene
- flagelare: antigenul H al Salmonellei
- piliare: proteina M piliar streptococic
- Antigene parazitare, micotice, virale (somatice)
 Difuzibile
- toxine: ex.: toxina difteric
- enzime extracelulare: ex.: hialuronidaza stafilococic.
7. Dup natura antigenelor organismului:
- Antigene HLA clasa I - exprimate pe suprafaa tuturor
celulelor nucleate ale organismului, confer noiunea de self
- Antigenele HLA clasa II - exprimate pe suprafaa celulelor
care intervin n cooperri imunologice
- Antigene eritrocitare: - antigenele sistemului ABO, Rh,
MN (stabilesc regulile transfuzionale)
8. Dup modalitatea de utilizare a antigenelor:
- n scop diagnostic: folosind antigene cunoscute, se pot
detecta prin reacii serologice - anticorpii specifici din serul de
bolnav.
- n scop profilactic: pentru prepararea vaccinurilor:
- corpusculare (ex.: bacterii cu virulen atenuat sau bacterii
omorte)
- difuzibile (ex.: anatoxine, preparate din exotoxine)

9. Dup capacitatea de declanare a rspunsului imun:

- Antigene incomplete - haptene
 Haptena este o substan cu greutate molecular mic,
incapabil s produc singur un rspuns imun, dar care poate
deveni imunogen (poate induce sinteza anticorpilor) - prin
cuplare cu o molecul carrier (purttor)
Haptena - este de obicei de natur polizaharidic i confer
n mare parte specificitatea antigenului respectiv (are o GM sub
10.000 i aproximativ 1 - 10 epitopi)
induce preponderent rspuns imun umoral
Carrier- purttorul haptenei este de natur proteic
- prin cuplare cu haptena determin apariia unui antigen
complet, imunogen
- rspunsul imun indus este puternic, n special de tip mediat
celular
Haptenele autocuplante sunt substane cu greutate
molecular mic (ex.: sruri de diazoniu), care se pot cupla
spontan cu proteinele organismului, determinnd apariia unor
afeciuni dermatologice imunoalergice. Prin aceste haptene
autocuplante s-ar putea explica i mecanismul alergiei la
Peniciline.
Antigenul complet - substan capabil s produc singur
rspuns imun (ex.: polipeptidele, substane complexe chimic)
FACTORI CARE INFLUENEAZ SPECIFICITATEA
ANTIGENIC

Specificitatea antigenic este asigurat prin anumite pri

ale moleculei de antigen, denumite epitopi.
Un epitop este alctuit din civa aminoacizi sau cteva
polizaharide, dintre care unul este imunodominant i asigur
specificitatea antigenic. Specificitatea este influenat nu numai
de compoziia chimic a moleculei respective, ci i de
conformaia ei steric (epitopi conformaionali).
Orice modificare n structura chimic sau conformaional
a unui antigen duce la schimbri de specificitate.
S-au obinut informaii privind specificitatea antigenic,
prin studii experimentale asupra lipopolizaharidului Salmonellei
(antigenul O).

Fig. nr. 25 Lipopolizaharidul genului Salmonella.

uniti repetitive compuse
din 3-6 monozaharide

Specificitatea antigenic a Salmonellelor se datoreaz:

ordinii n care sunt dispuse aceste monozaharide
 tipului de legtur chimic ( sau glicozidic)
ramificrii oligozaharidului.
Astfel, se explic specificitatea antigenic diferit a celor
1500 de specii ale genului Salmonella.

Specificitatea epitopilor proteici depinde de:

secvena aminoacizilor n cazul proteinelor fibrilare
conformaia stereospaial a proteinelor globulare.

Valena antigenului este dat de numrul de epitopi al

antigenului i este direct proporional cu acest numr.
Structura unitii repetitive ale diverselor grupuri antigenice
ale genului Salmonella este:

Salmonella paratiphi A - formula epitopilor este 1,2,12.

Epitopul imunodominant 2, cu structura polizaharidic de
tipul:

Salmonella paratiphi B - formula epitopilor 1,4,5,12

Epitopul imunodominant 5, cu structura:
COMPLEXUL IMUN ELEMENTAR (CIE)

CIE este complexul AG - AC format la nivel molecular,

ntre epitop (aparinnd antigenului) i paratop (aparinnd
anticorpului).

Fig. nr. 26 Complexul imun elementar (dup Klein, 1991)

Legturile epitop - paratop sunt realizate prin fore fizice,

(sunt reversibile), structurile implicate fiind complementare
steric (modelul minilor care se strng)

Conceptul de imunon
Un antigen ideal trebuie s declaneze rspunsul imun
primar i va avea urmtoarele proprieti:
greutatea molecular s fie ideal (> 10.000 )
 molecula s aib o structur linear, s fie flexibil,
hidrofil i ca-pabil s interacioneze liber cu receptori de
suprafa
rspunsul imun s necesite cooperri celulare minime
numrul minim de epitopi coninut s fie aproximativ 10.
(Concept elaborat de ctre Dintzis i colaboratorii - 1976)

CAPITOLUL 42
IMUNOGLOBULINE

STRUCTUR I FUNCII
Imunoglobulinele sunt glicoproteine (82 - 96% polipeptide
i 4 - 18% carbohidrat) a cror sintez este indus prin prezena
n organism a unor substane strine (antigene). Dein rolul
esenial n reaciile de imunitate umoral.
Imunoglobulinele sunt secretate de ctre plasmocit, sub
influena stimulului antigenic specific; ele migreaz
electroforetic - n marea lor majoritate - n zona
gamaglobulinelor i mai puin n cea a globulinelor.
Imunoglobulinele se gsesc n:
plasm
lichide extravasculare
 saliv, lacrimi, lapte, etc. (anticorpi circulani)
esuturi (sistemul imun al mucoaselor)
fixai citofil pe membrana limfocitelor, macrofagelor,
polimorfonuclearelor, mastocitelor, prin intermediul
fragmentului lor cristalizabil FC.
Observaie: Anticorpii nu pot strbate bariera
hematoencefalic sau filtrul renal (n condiii normale,
fiziologice - deci nu apar n lichidul cefalorahidian sau urin).
Imunoglobulinele reprezint aproximativ 20% din
proteinele plasmatice totale.

Funciile imunologice ale Ig sunt variate:

neutralizarea toxinelor bacteriene
neutralizarea efectului citopat indus de virusuri
formarea complexelor antigen - anticorp, cu activarea
sistemului complement n vederea aciunii bactericide
realizarea reaciilor citotrope
aprarea antibacterian i antiviral la nivelul porii de
intrare a agen-ilor etiologici, prin IgA secretorii
promovarea fagocitozei (opsonizarea specific)
realizarea citotoxicitii dependente de anticorpi
 realizarea unor efecte nocive n unele situaii, precum
reaciile de hipersensibilitate i agresionarea structurilor self n
bolile autoimune
rolul diagnostic, folosind diverse reacii antigen - anticorp
rolul terapeutic: ex. - folosind anticorpi monoclonali.
Studiul structurii imunoglobulinelor a fost iniiat de ctre
R. Porter i G. Edelman, care au scindat molecula
imunoglobulinic n lanuri i fragmente care au fost studiate
ulterior, din punct de vedere biochimic i funcional.
R. Porter (1959) - prin prelucrarea enzimatic a Ig cu
papain, obine trei fragmente, din care dou puteau fixa
antigenul; (din aceast cauz le-a denumit Fab = fragment
antigen binding = fragment capabil s lege antigenul) i unul
care cristaliza, pe care l-a denumit FC - fragment cristalizabil.
Fragmentul Fab leag antigenul monovalent, cu care nu
formeaz complexe vizibile (GM Fab: 45 k ).
Fragmentul FC (GM: 55 k ) fixeaz complementul i se
poate lega citofil la receptorii FC de pe membrana diverselor
celule imunologice.
Fig. nr. 27, 28 - Structura unui monomer imunoglobulinic
Prin scindarea cu pepsin, se obine un fragment bivalent,
cu cele dou fragmente Fab unite ntre ele, care particip la
reacii de aglutinare i precipitare.
 G. Edelman - reducnd cu 2 mercaptoetanol legturile
disulfidice ale moleculei, a izolat 4 lanuri polipeptidice: dou
lanuri mai grele, cu greutate molecular de 50 k (lanuri H =
heavy) i dou lanuri uoare, cu greutate molecular de 20 - 25
k (lanuri L = light).
Lanurile Ig sunt unite ntre ele prin legturi disulfidice - S
- S -. Aceste legturi sunt eseniale pentru asigurarea structurii
tridimensionale a moleculei i formarea unor domenii, cu
diferite funcii imunologice.

Lanurile L
- sunt dou tipuri, distincte din punct de vedere antigenic: k
(kappa) i (lambda)
- ntr-o molecul de imunoglobulin, lanurile uoare sunt
ambele fie , fie k
- frecvena lanurilor Lk este mai mare (se ntlnesc la
aproximativ 60% din totalul populaiei)
- sunt comune pentru toate clasele de imunoglobuline i
reprezint aproximativ 1/2 dintr-un lan greu H (216 aminoacizi)

Lanurile H
- conin epitopi variai care confer caracterul de clas al
imunoglobulinelor:
- lanurile H - aparin IgM
- lanurile H - aparin IgG
- lanurile H - aparin IgA
- lanurile H - aprin IgE
- lanurile H - aprain IgD
- conin aproximativ 446 de resturi de aminoacizi, dintre care
108-125 corespund regiunii variabile i 321-325 corespund
regiunii constante.
- diferitele clase de catene H se asociaz cu funcii efectoare
diferite:
IgG - prezint cele mai multe particulariti funcionale ale
AC
- determin imunitatea pasiv la ft
- sunt principale imunoglobuline de rspuns imun secundar
IgM - asigur rspunsul imun primar
- e important n liza bacteriilor
- monomerul constituie un receptor pentru antigen de pe
suprafaa limfocitelor B
IgA - asigur rezistena imunitar la nivelul mucoaselor
- are o activitate important antiviral, la nivelul porii de
intrare
 IgD - constituie un receptor pe suprafaa limfocitelor B, n
fazele timpurii ale diferenierii lor
IgE - are un rol de reagin, cu rol de mediator n reaciile
alergice.
Studierea secvenelor lanurilor L sau H au artat faptul c
n fiecare lan polipeptidic exist zone variabile (notate V)
situate spre captul amino terminal i zone constante (notate cu
C), situate spre poriunea carboxi terminal a imunoglobulinei.
Zonele variabile ocup 1/2 din lungimea lanului L i
respectiv 1/4 din regiunea lanului H.
Zonele VL + VH formeaz domeniul variabil al
imunoglobulinei, ce reprezint situsul de combinare al
imunoglobulinei (denumit paratop) cu epitopii. Complexul imun
epitop - paratop este complexul imun elementar, complexul
imun la nivel molecular. O molecul monomer de Ig posed 2
paratopi. Suprafaa paratopului este de 100 2.
La nivelul paratopilor (situai la extremitatea distal a
fragmen-tului Fab) exist zone imunologice hipervariabile, ntre:
- aminoacizii 24 - 34, 50 - 55, 87 - 89 pentru VL
- aminoacizii 30 - 36, 50 - 56, 86 - 91, 95 - 100 pentru VH
Aceste regiuni hipervariabile realizeaz antigenicitatea
(imunogenicitatea) anticorpilor, fiecare paratop putnd s
constituie la rndul su un epitop pentru un alt anticorp (reeaua
idiotip - antiidiotip Jerne, cu rol probabil n ponderarea
rspunsului imun).
Paratopii imunoglobulinelor conin i regiuni cu
variabilitate mai puin exprimat, aa - numitele regiuni cadru,
care realizeaz arhitectura spaial a situsului de combinare cu
epitopii. Regiunile - cadru reprezint aproximativ 85 % din
lungimea domeniilor variabile.
Poriunile constante ale lanurilor L i H ale
imunoglobulinelor reprezint 1/2 din lanul L i 3/4 din lanul
greu H. Legturile disulfidice contribuie la realizarea domeniilor
constante CL, CH1, CH2, CH3.
Domeniile variabile le putem denumi similar, VL, VH.
n concluzie, lanul L posed 1 domeniu variabil (VL) i un
domeniu constant (CL), pe cnd lanul H (greu) - conine un
domeniu variabil (VH) i 3 comenii constante (CH1, CH2,
CH3).
Domeniile CH2 i CH3 aparin fragmentului cristalizabil al
imunoglobulinei (FC), n timp ce domeniile VL, VH, CL, CH1 -
aparin fragmentului Fab.
Un domeniu conine aproximativ 100-110 aminoacizi;
analiza cristalografic cu raze X a artat faptul c domeniile
imunoglobulinice sunt formaiuni globulare compacte, rotunjite
sub form de bucl, lanurile polipeptidice fiind pliate la
interior. Regiunile pliate compact sunt mai protejate fa de
proteoliz, comparativ cu zonele extinse, care sunt foarte uor
accesibile.
Fiecare domeniu imunoglobulinic este stabilizat printr-o
legtur
- S - S -, situat central. Lanurile imunoglobulinice sunt
orientate n direcii opuse i stabilizate prin legturi de hidrogen
intercatenare, astfel nct iau o form tridimensional, denumit
structur .

Fig. nr. 29 - Reprezentarea schematic a domeniilor din

structura imunoglobulinei (Klein)

ntre domeniile adiacente se stabilesc dou tipuri de

interaciuni:
interaciuni de tip cis - pe vertical, ntre dou domenii
nvecinate
Interaciuni de tip trans - pe orizontal, ntre domenii
situate pe lanuri diferite
Diametrul unui domeniu este de aproximativ 3,5 nm.
n realizarea funciei de anticorp, o mare importan o are
regiunea balama, care confer flexibilitatea Fab pe FC, prin
realizarea unor unghiuri cu deschidere variabil cuprinse ntre
0 i 180 . De aici rezult forma monomerului
imunoglobulinic - respectiv Y sau T.
- Regiunea balama are 15 aminoacizi. Are o structur
primar unic, poriunea ei central constnd din dou legturi
disulfidice, legate la un helix de prolin, care confer rigiditatea
lanului polipeptidic, restrngndu-i rotaia.
- Regiunea balama asigur transducia semnalelor de la Fab
la FC i este situat la jumtatea lanurilor grele H.
- Regiunea balama conine un situs care interacioneaz cu
fragmentul C1q al sistemului complement i poate interaciona
cu receptorul pentru FC de pe membrana limfocitelor B, PMN -
lor sau macrofagelor.
- Regiunea balama conine glicin, prolin, cistein n
cantiti mari i realizeaz o asociere ntre Fab i fragmentul FC.

Tabelul nr. 23. - Diverse funcii ale unor domenii ale moleculei
de imunoglobulin - IgG (dup Olinescu)
Fragmentul sau domeniul Funcia
VH+VL = Paratop sau situs combinativ Leag antigenul
(epitopii)
CH1+CL Legturi asigurate ntre sistemul combinativ i
fragmentul cristalizabil
Leag fraciunea C4,6 a sistemului complement
Regiunea balama Conine legturi disulfidice ntre
lanurile H (grele)
Unete fragmentul Fab i FC
Realizeaz transducia semnalelor de Fab la FC, dup
legarea epitopilor
Permite poziionarea n spaiu a Fab i asigur mobilitatea
moleculei de imunoglobulin
Leag fragmentul C1q al complementului
CH2 Leag C1q
Controleaz rata de catabolizare a imunoglobulinei
CH3 Leag molecula la receptorul FC de pe monocite i
macrofage
CH4 Domeniu suplimentar la IgE (fixare pe mastocite i
bazofile); apare i la IgM

Fragmentul imunoglobulinic cristalizabil FC conine

domeniile CH2 i CH3 ( CH4 la IgE i IgM) i posed
urmtoarele funcii:
 Interacioneaz cu proteinele sistemului complement
(exist dou situsuri de legare cu C1q, cte unul pentru fiecare
monomer) i care funcioneaz independent. Interaciunea cu
factorul reumatoid se realizeaz la nivelul domeniului CH2,
molecula IgG de la reumatici fiind diferit conformaional,
comparativ cu cea a indivizilor sntoi.
Transportul transplacentar al imunoglobulinelor este posibil
datorit legturii moleculei prin FC, la membrana celulelor
placentei.
Fragmentul FC conine determinani antigenici de clas:
(IgG), (IgM), (IgE), (IgA), (IgD) i de subclas:
1, 2, 3, 4 (IgG1, G2, G3, G4); 1, 2(IgM1, M2); 1, 2
(IgA1, A2).
Fig. nr. 30. - Structura celor 4 subclase de IgG (Klein,
1991)
Confer proprietatea de citofilie; FC asigur interaciunea
moleculei de imunoglobulin cu receptorii FC de pe membrana
macrofagelor, limfocitelor, celulelor killer, celulelor NK etc.,
mai ales prin domeniul CH3. La IgE, interaciunea cu
mastocitele i bazofilele are loc prin domeniul suplimentar CH4.
Reglarea catabolismului moleculei de imunoglobulin,
domeniul CH2 controlnd timpul de njumtire pentru
diferitele clase i subclase de Ig.
 Fragmentul FC conine receptori pentru proteina A (SpA)
stafilococic, att la nivelul CH2, ct i la nivelul CH3.
Interaciunea proteinei A stafilococice cu IgG liber i - a gsit o
aplicare practic: obinerea de anticorpi hibrizi legai prin SpA,
folosirea SpA n plasmaferez ca mijloc de epurare a
moleculelor de IgG care au legat antigene tumorale, etc.
Fragmentul cristalizabil FC conine componenta
carbohidratic a imunoglobulinei, sub forma a dou catene
laterale, cu structur simpl sau complex. Componenta
carbohidratic mpiedic interaciunile prea puternice protein -
protein (ntre domenii, ntre diverse molecule de Ig sau ntre Ig
i celule).
Coninutul n glucide (glucoz, galactozamin, manoz,
fucoz, acid sialic) variaz ntre 3% (IgG) i 13% din masa
molecular a diferitelor imunoglobuline.
Pe lng reglarea interaciunilor imunoglobulinice,
glucidele structurale ar putea avea i alte funcii:
Realizarea i/sau meninerea unei conformaii eseniale
pentru sinteza imunoglobulinelor
Creterea solubilitii imunoglobulinelor
Rol de spaiator ntre domenii i lanuri
Rol n reglarea catabolismului prin protecie fa de
degradarea proteolitic.
 Experimental s-a demonstrat c regiunile FC ale Ig - lor pot
fi clivate proteolitic, cu producerea unor fragmente biologic
active, cu rol de reglare a rspunsului imun. Exemple de peptide
imunoreglatoare, obinute prin scindarea FC:
Rigina - este tetrapeptid: Gly - Gln - Pro - Arg, derivat din
domeniul CH3 al IgG1. Are rolul de stimulator al fagocitozei.
Tuftsina - este tetrapeptid: Thr - Lys - Pro - Arg, prezent n
poziiile 289- 292 n domeniul CH2, la toate subclasele IgG
umane. Are rolul de stimulator al fagocitozei.
Peptidul biologic activ - deriv din scindarea CH3 la IgG1
umane; are capacitatea de augmentare a secreiei de anticorpi.

HETEROGENITATEA IMUNOGLOBULINELOR

n definirea heterogenitii imunoglobulinelor se utilizeaz

criterii:
greutatea molecular
constanta de sedimentare
coninutul de carbohidrai
rata de catabolizare (timp de njumtire)
ncrctura electric
 sensibilitatea la substane reductoare
caracterizarea antigenic:
- epitopii de clas i subclas (lanuri H)
- natura antigenic a lanurilor L - , K (tipul
imunoglobulinei)
- epitopi de allotip (lanuri L i H)
- epitopi de idiotip (fragment Fab)
Astfel, heterogenitatea Ig - lor poate fi:
Heterogenitatea de izotip - de clas, de subclas, de tip
Heterogenitate de allotip
Heterogenitate de idiotip

Izotipul imunoglobulinelor
Heterogenitatea de clas, subclas i tip caracterizeaz toi
in-divizii unei anumite specii.
Clasa imunoglobulinelor este dat de ctre epitopi
caracteristici, situai pe lanul H:
- IgG - epitop caracteristic:
- IgA - epitop caracteristic:
- IgM - epitop caracteristic:
- IgE - epitop caracteristic:
- IgD - epitrop caracteristic:
Subclasa imunoglobulinelor este asigurat prin epitopi
situai tot pe lanurile H:
- IgG - conin 4 epitopi de subclas:
1: IgG1 (66% din totalul moculelor IgG)
2: IgG2 (23% din total IgG)
3: IgG3 (7%)
4: IgG4 (4%)
- IgA - are 2 epitopi de subclas:
1: IgA1
2: IgA2
- IgM - epitopii 1 i respectiv 2 definesc subclasele IgM1
i IgM2.
Tipuri de Ig
- epitopii lanurilor L caracterizeaz dou tipuri LK i L .
ntr-o molecul de Ig cele 2 lanuri sunt identice (fie , fie K).
Astfel fiecare izotip are dou forme, sau K.

Allotipul imunoglobulinelor
 Caracterizeaz anumite grupuri de indivizi ale aceleai
specii i e asigurat prin epitopi caracteristici situai la nivelul
regiunilor constante ale lanurilor L i H.
Spre exemplu, sistemul Gm - situat pe lanurile H ale IgG
are 25 de factori allotipici (Gm1,..., Gm25; Gm= gamma
marker)
sistemul Am - situat pe lanurile H 2 ale IgA2 are 2
factori allotipici, notai Am1, Am2.
factorii Km (Inv) - pe lanurile LK. (Kapa marker are 3
factori allotipici: Km1, Km2, Km3).
Detectarea particularitilor allotipice ale
imunoglobulinelor are aplicaii n:
- Studiul sintezei in vivo i a evoluiei Ig
- aprecierea reuitei grefelor de esut hematopoetic
- stabilirea sau excluderea paternitii
- antropologie
- genetica populaiilor.
Idiotipul imunoglobulinelor
Fiecare imunoglobulin are specificitate pentru un epitop,
con-ferind imunoglobulinelor heterogenitate de specificitate,
dat de natura situsului de combinare (paratopului).
 Idiotipurile (idios = individual) au fost descoperite de ctre
Oudin (1974), care a demonstrat faptul c anticorpii anti
Salmonella tiphi produi pe iepure, injectai unui alt iepure cu
acelasi allotip ca i donatorul, induc formarea de anticorpi care
reacioneaz specific cu anticorpii produi de ctre primul
animal. Se demonstreaz astfel c datorit unicitii lor
structurale, anticorpii la rndul lor pot deveni an-tigene.
Specificitatea idiotipic este legat de prezena regiunilor
hipervariabile ale lanurilor L i H, datorit prezenei unor
epitopi individuali, denumite idiotopi (epitopi). Colecia de
idiotopi din structura unei molecule de Ig formeaz idiotipul ei.
Fiecare Ig are un idiotip unic sau particular (idiotip
privat); au fost descrise i idiotipuri comune, (idiotip
public), prezente pe imunoglobuline diferite, care reacioneaz
ncruciat. Exprimarea unui anumit idiotip ar fi legat de genele
care aparin familiei supergenice a imunoglobulinelor.
Anticorpii specifici pentru idiotopi ar aciona ca elemente
re-glatoare n activitatea sistemului imunitar (reeaua idiotip -
antiidiotip Jerne) care intervine probabil n ponderarea
rspunsului imun.

Funcii biologice efectoare ale imunoglobulinelor

Imunoglobulina M
 Apare sub dou forme: monomer (legat de membrane) i
polimer (liber n ser - pentameric).
IgM monomer
- Constituie un receptor pentru antigen pe suprafaa
limfocitelor B.
- Formele monomer se gsesc n ser n concentraii extrem
de re-duse, n afeciuni imunologice precum: lupusul eritematos
sistemic, ataxia - teleangiectazia sau macroglobulinemia
Waldenstrm.
IgM pentameric
- Cu o greutate molecular de aproximativ 950.000 i
formula (L2H 2)5, lan caracteristic .
- Fiecare pentamer conine un lan peptidic J (lan de legtur
- joining chain), care are rol n polimerizarea subunitilor
imunoglobulinice. Greutatea molecular a lanului J este de
aproximativ 20.000 . Datorit piesei de legtur, cele 5 uniti
monomerice sunt aezate radiar (n stea) cu 5 brae (vezi fig.
nr.31).
- IgM pentamerice reprezint 5% pn la 10% din totalul
imunoglobulinelor din organism.
- IgM constituie anticorpii de rspuns imun primar, care apar
dup primul contact cu antigenul. Exist pe Fab - urile
imunoglobulinei aproximativ 10 situsuri de legare cu antigenul
(valena - 10), dar efective ar fi doar 5 situsuri, pentru c restul
ar putea fi mascate.
- Din cauza dimensiunilor mari, imunoglobulinele M nu pot
traversa bariera placentar (prezena lor la un nou nscut pune
diagnosticul infeciilor contactate n perioada intrauterin: in-
fecia rubeoloas, citomegalic, toxoplasmoza, etc.)
- Imunoglobulinele M pentamere sunt principalele
imunoglobuline aglutinante, pot realiza i reacii de precipitare
i prezint o mare capacitate de activare a sistemului
complement, capacitate de aproximativ 100 de ori mai mare
dect cea a imunoglobulinelor G. Activarea sistemului
complement prin intermediul IgG se poate realiza numai cu
condiia existenei a dou molecule foarte apropiate, care s lege
prin fragmentele FC componenta C1q, condiie obligatorie
pentru declanarea reaciilor enzimatice activatoare. Este
suficient o molecul IgM pentameric pentru activare, deoarece
se realizeaz condiia obligatorie de legare a C1q ntre dou
fragmente FC. Situsul pentru C1q este situat la nivelul
domeniilor C 3 - C 4 i devine accesibil n urma schimbrilor
de conformaie ale moleculei dup fixarea antigenului. Lanul J
(Joing) nu are nici un rol n fixarea componentelor sistemului
complement.
- n dezvoltarea ontogenetic apare prima dat - clasa
imunoglobulinelor M; de asemenea IgM apar precoce i n
rspunsul imun.
- Aceast clas de Ig confer i activitatea bactericid a
serului.
- Imunoglobulinele M secretorii dimerice apar ca o
consecin a unui deficit n IgA secretorii.
- Sinteza imunoglobulinelor M este cel mai puin influenat
de aciunea unor factori imunodepresori.
- IgM reprezint forma sub care se gsesc anticorpii naturali
ai grupelor sanguine.
- Concentraia IgM n ser este cuprins ntre 0,5 - 1,9 mg/ml,
iar concentraia lor extravascular este de aproximativ 20%.
Sinteza IgM se face ntr-un ritm de 6 - 8 mg / kg corp / zi iar
timpul lor de njumtire este cuprins ntre 5 i 7 zile.
Fig. nr. 31. Structura IgM pentamer (Klein, 1991)

Imunoglobulina G
- Reprezint 75-80% din totalul imunoglobulinelor din serul
uman normal. Greutatea lor molecular este de circa 150 k .
- Sunt imunoglobuline monomerice, apar dup stimulul
antigenic secundar. Moleculele IgG care apar n cursul
stimulului secundar sau prin comutare dup stimulul primar,
inhib sinteza anticorpilor IgM printr-un proces feed-back,
intrnd n competiie cu antigenele.
- Concentraia n ser a IgG este cuprins ntre 8 i 12 mg/ml,
cu o durat de njumtire de aproximativ 23 zile. Sinteza IgG
se realizeaz ntr-un ritm de 30 mg/ml, cu o durat de
njumtire de aproximativ 23 de zile. Sinteza IgG se realizeaz
ntr-un ritm de 30 mg/kg corp/zi. Lanul caracteristic este , cu
4 subclase 1, 2, 3, 4 - corespunztoare IgG1, IgG2, IgG3,
IgG4.
- Sinteza moleculelor IgG aparinnd diverselor subclase este
condiionat de natura stimulului antigenic. Spre exemplu,
antigenele Rh activeaz sinteza anticorpilor IgG1 i IgG3,
polenul activeaz sinteza anticorpilor IgG4 iar dextranul induce
sinteza IgG2.
- Astfel, dozarea cantitativ a IgG totale ar putea fi uneori
irelevant, deoarece n unele afeciuni exist doar modificri la
nivelul subclaselor IgG, fr influenarea IgG totale. Spre
exemplu, n infecii severe ale aparatului respirator cresc mult
IgG2 i IgG4 n dauna celorlalte subclase IgG.
- Subclasele IgG difer ntre ele privind natura legturilor
disulfidice ntre lanurile grele, prin determinani de subclas i
prin proprieti biologice.
Tabelul nr. 24 - Proprieti ale subclaselor IgG. (Olinescu)
Proprietatea IgG1 IgG2 IgG3 IgG4
Procent din totalul moleculelor IgG 66% 23% 7% 14%
Lan greu, epitopi specifici 1 2 3 4
Timp de njumtire specific 23 zile 23 zile 8 zile 23
zile
Fixarea complementului + + + -
Transfer transplacentar + + + +

- Imunoglobulinele G trec transplacentar i asigur aprarea

imun a nou-nscutului
- Moleculele IgG activeaz complementul pe cale clasic,
excepia fiind subclasa IgG4.
- Moleculele IgG au un rol esenial n neutralizarea toxinelor,
virusurilor, bacteriilor; intervin n reacii de citotoxicitate
anticorpo - dependent (ADCC).
- Moleculele IgG promoveaz fagocitoza, fiind opsonine
specifice.
- Moleculele IgG se pot fixa la piele, cu excepia IgG2.

Tabelul nr. 25 - Proprietile biologice ale diverselor clase de

imunoglobuline umane (dup Olinescu A).
Proprietatea Clasa de imunoglobine
IgG IgA IgM IgD IgE
Lanul greu este de tip
Concentraia n ser (mg/ml) 8-12 1,4-4,0 0,5-1,9 0,03-0,4
0,0001
Greutatea molecular (k ) 150-160 170 n ser, 400 n
secreii 900 185 190
Concentraia extravascular (%) 60 60 20 25 50
Coeficient de sedimentare S 7 7;9;11 19 7 8
Greutatea lanului H (k ) 53 56 65 69 72
Nr. domeniilor lanului H 3 3 4 3 4
Hidrai de carbon (%) 2-5 8-10 10-12 12-15 11-12
Numrul subclaselor 4 2 - - -
Nr. situsurilor combinative 2 2;4;6 2 sau 10 2 2
Prezena lanurilor de unire J - + + - -
Rezistena la 56 C + + + - -
Rezistena la 2-mercapto-etanol ++ - ++ -
Determinante izotipice (subclase) 1;2;3;4 1;2 - - -
Sinteza (mg/kg/zi) 30 8-27 6-8 0,4 ?
Catabolism (%/zi) 3 12 14 ? 2,5
Perioada de njumtire (zile) 21 (la IgG3=7) 7 5,1
2,8 2,3
Capacitatea de fixare a complementului (cale clasic) + (IgG4
nu) - ++ - -

Imunoglobulina A
- Clasa IgA este alctuit din IgA serice i IgA secretorii, cu
particulariti distincte.
- Clasa IgA are o tendin evident de a produce polimeri cu
con-stante de sedimentare 10S, 13S, 15S, 18S, care corespund
unor imunoglobuline di-, tri-, tetra- sau pentamere.
- Subclasele IgA au fost stabilite pe baza unor diferene
multiple i au fost notate IgA1 i IgA2.
Subclasa IgA1 - se gsete n proporie de 80% n ser i are
lanul mai scurt cu aproximativ 40 de resturi de aminoacizi.
Epitopul caracteristic de subclas este 1. Nu prezint markeri
genetici allotipici pe FC. Viteza ei de sintez este de
aproximativ 24 mg/kg corp/zi, iar timpul su de njumtire n
ser este de aproximativ 6 zile.
Subclasa IgA2 - reprezint 20% din IgA serice, cu epitop
caracteristic de subclas 2. Pe catena H prezint doi markeri
A2m(1) corespunznd tipului caucazian i A2m(2)
corespunznd raselor mongoloid - negroide. Viteza de sintez a
IgA2 este 21,3 mg/kg corp/zi iar timpul de njumtire n ser
este de aproximativ 4, 5 zile.
 Dup Schiff (1986), diferenele ntre subclasele IgA1 i
IgA2 in i de structura regiunii balama (coninut n aminoacizi,
rezisten la proteoliz).
Imunoglobulinele A serice sunt prezente n special sub
form monomer (greutate molecular aproximativ 162 kilo );
la om, formele polimere sunt ntlnite mai frecvent n
mieloamele cu IgA, cu grad de polimerizare individualizat.
Funciile imunoglobulinelor A serice sunt foarte puin
cunoscute:
- Au activitate de anticorp extrem de slab
- Ig serice au un efect opsonizant foarte slab, dei fagocitele
prezint receptori pe suprafaa lor pentru fragmentul cristalizabil
- IgA serice nu pot fixa complementul i nici nu l pot activa
singure
- La om, rolul IgA serice ar putea fi asociat cu ndeprtarea
unor cantiti mici de antigene provenite din alimente sau ar
putea lega antigene din snge pe care le-ar putea transporta la
nivelul mucoaselor (la nivelul sistemului imun al mucoaselor)
- IgA serice pot participa, deci, la reacii de neutralizare i
precipitare.
Imunoglobulinele A secretoare (IgAs) sunt prezente n
secreiile de la nivelul mucoaselor. Apar sub form dimeric (60
- 80%), restul sub form polimeric.
 IgA secretorie este principala imunoglobulin existent n
se-creiile salivare, nazale, gastrointestinale i mamare, fiind
secretat de ctre plasmocitele laminei propria.
IgA secretorii prezint o greutate molecular de
aproximativ 400 k , formate din doi monomeri unii printr-o
pies de legtur J (Joing). Dimerul conine o protein
suplimentar, denumit component secretor sau piesa CS
care este sintetizat de ctre celulele endoteliale. Piesa S ajut la
traversarea celulelor epiteliale de ctre dimer i confer
rezisten fa de aciunea proteazelor de la nivelul mucoaselor.
Aceast tanscitoz epitelial este favorizat de ctre un
receptor imunoglobulinic polimeric care are n componena sa i
piesa secretorie.
Componentul secretor este o globulin nenrudit cu
imunoglobulinele i foarte bogat n glucide. Este format din
737 aminoacizi, cu secven cunoscut.
Dup modelul Heremans (1974), componentul secretor s-ar
nfura n jurul fragmentelor cristalizabile ale monomerilor
IgAs, extinzndu - se de la o regiune balama la alta, fapt care
mrete sta-bilitatea moleculei i, de asemenea rezistena la
proteoliz prin intermediul enzimelor existente n secreiile
mucoaselor.
n diferite secreii ale organismului uman. IgAs se gsete
n concentraii diferite. Astfel, cantitile de IgAs sunt: n saliv:
28mg%; n colostru: 151mg%; n secreii oculare: 7 mg%; n
secreii bronice: 10 - 70 mg%; n intestinul subire: 75mg%; n
vezicula biliar: 50 mg%; n prostat: 25 mg%; n secreiile
vaginale: 6 mg%.

Fig. nr. 32 - Structura IgA secretoare (Klein, 1991)

Funciile efectoare ale IgAs se caracterizeaz prin:

aprare local antiviral (la poarta de intrare), suprimnd
ataarea virusurilor pe receptorii specifici
activitate bactericid crescut la poarta de intrare
rol de reglare a componenei florei microbiene de la nivelul
mucoaselor. Indivizii cu deficit n IgA sunt susceptibili la boli
autoimune, la infecii ale cilor respiratorii. Deficitul genetic n
IgAs se poate compensa prin IgM secretorii.
Protecia fa de infecii respiratorii i digestive ale nou
nscu-tului, prin prezena IgA secretorii n laptele matern.
Sinteza proprie a IgAs ncepe aproximativ la 30 zile dup
natere. Sugarii alimentai natural sunt mai protejai fa de
infecii dect cei alimentai artificial.
Mrirea aviditii fa de antigene i capacitatea IgAs de a
interconecta mai multe particule strine.
 minimalizarea efectului toxinei holerice, probabil prin
mpiedi-carea atarii subunitii B pe celulele epiteliului
intestinal. Capacitatea IgAs de a participa direct la distrugerea
microorganismelor cu proprieti invazive - este foarte
controversat.

IgAs pot participa i n reaciile de citotoxicitate mediate

celular - dependente de anticorpi.
Anticorpii IgAs nu pot aglutina, precipita antigene
corpusculare, dar pot activa complementul pe cale alternativ
(nu pe cale clasic). Rolul opsonizant al IgAs este foarte slab
(aproape ab-sent).
Concentraia IgA serice este de 1,4 - 4 mg/ml cu timp de 1/2 de
7 zile.
Imunoglobulina E
IgE are o structur monomer, cu epitop caracteristic de
clas . Lanurile prezint 5 domenii i au o concentraie
mare n hidrai de carbon (11%). Greutatea molecular a IgE
este de aproximativ 190 k .
IgE sunt prezente n snge n concentraii reduse
(aproximativ 250 ng/ml de ser) sau 0,004% din totalul Ig.
Celulele care sintetizeaz IgE au fost evideniate
preferenial n mucoasele respiratorii gastrointestinale i n
ganglionii regionali.
 Timpul de njumtire al IgE circulante este de
aproximativ 4 zile, iar a celor fixate pe celule (mastocite,
bazofile) este de 7 - 14 zile.
Anticorpii IgE nu activeaz sistemul complement, se leag
prin intermediul FC (domeniul CH4) pe membrana mastocitelor,
bazofilelor, inducnd degranularea acestora i eliminarea
aminelor vasoactive (histamina, serotonina, leucotriene,
substana SRS - A, factorul chemiotactic pentru eozinofile). De
aceea, aceti anticorpi sunt denumii anticorpi reaginici,
hemocitotropi, fiind implicai n procese de hipersensibilitate
de tip I anafilactic i n aprarea antiparazitar.
Rspunsul n IgE este precoce, imediat dup rspunsul IgM
i nainte de rspunsul IgG, nivelul seric IgE fiind influenat
genetic iar limfocitele T supresoare au un rol important n
reglarea sintezei lor.
Concentraia IgE n ser crete n alergii i parazitoze pn
la 25.000 - 30.000 ng/ml.
IgE contribuie la ndeprtarea unor helmini din intestin,
prin intermediul unor factori chemiotactici pentru eozinofile i
prin expulzarea paraziilor din organele care conin muchi
netezi care se contract prelungit.
Efectul IgE n reaciile de Hipersensibilitate de tip I este
predominant nefavorabil.
 Imunoglobulina D
Descoperit n anul 1965 de ctre D. S. Rowe i F.L.Fahey
n serul unui bolnav cu mielom.
Concentraia seric a IgD este foarte sczut - 40 mg/ml,
reprezentnd 0,2%- 1% din imunoglobulinele totale.
Greutatea molecular a IgD este de aproximativ 180 k i
con-stanta de sedimentare 7S.
Epitopul caracteristic de clas este . Lanul are 3
domenii constante i o regiune balama foarte lung, cu o mare
susceptibilitate la proteoliza enzimatic. Molecula IgD este
monomeric, bivalent, cu un timp de njumtire foarte scurt
(aproximativ 3 zile).
Funciile biologice ale IgD sunt urmtoarele:
Receptor pentru antigen pe suprafaa limfocitelor B mature
(B + B ) - IgD fixate.
IgD serice nu fixeaz i nu activeaz complementul, nu
traverseaz placenta, nu produc reacii citotrope (nu se fixeaz
pe monocite, limfocite, mastocite).
IgD fixate ar putea constitui receptori necesari n
diferenierea celular i n instalarea memoriei celulare
Concentraia IgD serice crete progresiv de la natere pn
la vrsta de 15 ani, dup care nivelul su rmne constant toat
viaa.
 IgD are o slab activitate de anticorp fa de antigene
tiroidiene, nucleare, insulin, proteine din lapte (efect
nefavorabil - posibil fenomene autoimune)
IgD are aciuni limitate n timp, prin marea susceptibilitate
la degradarea termic i enzimatic.

SISTEMUL IMUN AL MUCOASELOR (SIM)

Sistemul imun al mucoaselor este reprezentat prin esutul

limfoid asociat mucoaselor tractului respirator, digestiv,
urogenital. SIM se ntreptrunde cu sistemul imunitar sistemic
dar ntre cele 2 sisteme exist diferene:
Celulele SIM sunt distribuite n structurile limfoide ale
laminei propria a mucoaselor. Celulele SIM acioneaz
preferenial asupra anumitor antigene care pot adera la epitelii.
Celulele limfocitare B produc n mod preferenial IgA
secretorii, rezistente la degradarea proteolitic, spre deosebire de
sistemul imun sistemic, care determin formarea predominant
de IgM i IgG.
Iniierea rspunsului imun este determinat de ptrunderea
antigenelor ingerate sau inhalate, pe calea celulelor epiteliale
specializate ale mucoaselor. n intestinul subire, epiteliul
asociat foliculilor limfoizi conine celule M (membranare)
subiri, care transport antigenul spre interior, printr-un sistem
tubular. Celulele similare, care capteaz antigenele au fost
evideniate i n epiteliul bronhic, al criptelor amigdaliene i n
apendice.
Sistemul imun asociat cu intestinul este denumit GALT
(gut associated lymphoid system) iar cel asociat cilor
respiratorii - BALT (Bronchus associated lymphoid tract).
Prezentarea antigenelor determin migrarea limfocitelor T i B
sensibilizate n ganglioni limfatici i de aici, pe calea canalului
toracic - n circulaia sanguin.
Dup ce au circulat prin limf i n sngele periferic,
limfocitele se rentorc la nivelul mucoaselor, datorit unor
receptori imunologici de stabilire a domiciliului (fenomenul
de homing). Rentoarcerea celulelor nu se face numai la
situsul iniial de plecare, ci prin diseminare n toate insulele
limfoide ale submucoaselor. Aceast diseminare de limfocite T
i B sensibilizate amplific rspunsul imunitar prin antrenarea
ntregului sistem de aprare al mucoaselor. Astfel, sistemul
imunologic comun al mucoaselor Common mucosal
immunological system ar explica interrelaiile GALT i BALT
(vezi fig. 33). Producia IgA secretoare este n legtur cu
sistemul imun al mucoaselor, n timp ce producia IgA serice
aparine sistemului imun sistemic. Aceast diferen este
meninut i de lipsa de corelaie dintre activitile SIM i SIS.
 Pe lng IgAs, diferitele secreii ale mucoaselor conin i
imunoglobuline aparinnd altor clase; n mucoasa duodeno-
jejunal exist plasmocite productoare preponderent de IgM, n
timp ce n mucoasa gastric i nazal 3% - 5% dintre plasmocite
secret IgG. Plasmocitele productoare de IgA sunt ntlnite la
nivelul tractului aeroalimentar superior i n glanda lacrimal.
Aprarea imunitar la nivelul mucoaselor este rezultatul
unor mecanisme imunologice complexe (care includ Ig i celule
NK) mecanisme care se adaug funciei de barier natural
pentru antigene variate.

CONTROLUL GENETIC AL SINTEZEI

IMUNOGLOBULINELOR

Heterogenitatea extraordinar a imunoglobulinelor

(aproximativ 1090 anticorpi diferii - dup Urbain, 1987) se
poate explica exclusiv prin mecanisme genetice, n timpul
dezvoltrii ontogenetice a limfocitului B (Tonegawa, Premiul
Nobel 1976).
Mecanismele genetice care asigur variabilitatea
anticorpilor ar putea fi explicate prin :
existena unor gene de variabilitate (V) care n timpul
dezvoltrii ontogenetice a limfocitului B sufer diverse mutaii
(teoria mutaiei somatice).
existena unui numr mare de gene separate care codific
zonele variabile VL i VH (teoria liniei germinative)

Fig. nr. 33 - Reprezentarea interrelaiilor GALT i BALT (dup

Zarnea)

existena unui numr mare de gene de legtur J (Joing)

care favorizeaz recombinrile genetice ntre genele care asigur
variabilitatea (ipoteza recombinrilor somatice).
Sinteza imunoglobulinelor urmeaz etapele obligatorii :
c) sinteza lanurilor polipeptidice H
d) sinteza lanurilor uoare L
e) asamblarea lanurilor L i H
f) adugarea componentelor glucidice ale imunoglobulinei
g) eliminarea moleculelor imunoglobulinice din plasmocit,
dup realizarea polimerizrii
h) comutarea sintezei Ig
La om, genele care codific sinteza lanurilor :
LK - sunt localizate pe cromozomul 2
L - sunt localizate pe cromozomul 22
H - sunt situate pe cromozomul 14
Organizarea genelor codificante ale catenei H
Aparatul genetic este alctuit din exoni (zone codificante)
i introni (zone necodificante, care favorizeaz procesele
recombinrilor genetice).
Prin splicing (rupere i nndire) - se elimin anumii
exoni i se obbin structuri foarte variate ale lanurilor
imunoglobulinice.
Exonii codificani ai zonelor variabile H sunt :
V - de variabilitate (VH1 VH200)
D - de diversitate (DH1 - DH20)
J - de legtur (JH1 - JH4)
Exonii C codific zonele constante, cu specificitate de clas i
subclas. Succesiunea exonilor C este urmtoarea, dinspre
captul 5 spre 3 :
Fig. nr. 34 - Reprezentarea schematic a rearanjrilor genetice
produse n limfocitele B n cursul sintezei de IgM (Rougeon,
1985)
Trecerea de la o clas de imunoglobuline la alt clas de
imunoglobuline, prin procese de reasortare genetic, se numete
comutarea de izotip. Comutarea de izotip are loc numai n
limfocitele B, mature din punct de vedere imunologic.
Recombinarea exonilor unui lan H ncepe cu:
1 exon D(x) cu 1 Exon J(y), cu formarea structurii
D(x)J(y).
Exemplu : D15 cu J4 D15J4
D1 cu J1 D1J1
1 exon V(z) cu complexul D(x)J(y)
Exemplu : V(11)D15J4, V(180)D20J3 etc.
Complexul VzDxJy codific zonele variabile H.
n final, VzDxJy sufer o recombinare cu un exon C :
VzDxJy + C IgM (de rspuns imun primar)
VzDxJy + C IgG (de rspuns imun secundar)

Fig. nr. 35 - Comutarea izotipic (Klein, 1991)

 Fiecare gen CH are o secven Switch (de comutare)
nspre captul 5 , secven ce favorizeaz comutarea izotipic.
Fiecare segment V sau D prezint nspre gena J aa - zise
secvene semnal de recunoatere. Aceste structuri, mpreun
cu intronii (secvene - spaiator), favorizeaz procesele
recombinrii genetice prin formarea unui sistem trunchi i
bucl (stem and loop), de fapt o structur tridimensional
care aduce aproape ntocmai exonii care vor suferi recombinri
genetice, Dx - Jy, cu deleia enzimatic a segmentului ADN
dintre cele 2 regiuni implicate.
Procesul de legare combinatorial amplific diversitatea
anticorpilor, datorit variabilitii diferitelor puncte legare.
Variaiile joncionale sunt legate de o anumit imprecizie a
situsurilor de recombinare, care modific secvena ADN la
nivelul jonciunilor VH - DH, DH - JH
(VL -JL) limitate ca amploare n cazul catenelor L, reprezint o
surs crescut de diversitate n cazul catenelor H, datorit
posibilitii de citire a informaiei genetice D (de diversitate) n
trei cadre de citire diferite, apar modificri semnificative n
secvena de aminoacizi.
Gradul de variabilitate (aproximativ) al lanurilor H este
asigurat prin asortarea aleatorie a:
200 gene V x 20 gene D x 4 gene J = 16.000 catene H
 Numrul de variaii produse prin flexibilitate joncional
este de cte 2,5 pentru fiecare pereche VH - DH i DH JH.
Diversitatea conferit de genele DH i JH este apreciat cu
factorul 5. n concluzie,
16.000 catene H x 2,5 x 2,5 x 5 = 500.000 catene H
La aceast cifr, se poate realiza diversitatea suplimentar
(printr-un factor N), diversitate produs probabil prin mutaii
somatice sau prin recombinri ntre segmente genetice ale
laturilor L i H, care ofer un repertoriu potenial de
imunoglobuline - de miliarde de anticorpi diferii.
Organizarea genelor codificante ale lanurilor L
Sinteza lanurilor LK este codificat astfel pentru zonele
variabile,
aproximativ 300-600 exoni Vk
5 exoni J, de legtur (4 activi)
Sinteza lanurilor L este codificat prin cteva gene V
i 5 exoni J, dintre care activi sunt doar 3. Zonele constante ale
lanurilor uoare sunt codificate prin 6 pn la 9 exoni C, cu
specificitate de lan sau K. Lanurile L au o diversitate
genetic sczut.
Recombinrile genice se realizeaz ncepnd cu exonii
V(x) J(y), recombinri ce sunt amplificate prin prezena
intronilor i a secvenelor semnal de recunoatere. Numrul
mare de gene Vk ofer o variabilitate nalt a lanurilor uoare
LK (600VK x 4J = 2400), aspect necesar pentru realizarea
variabilitii situsurilor combinative ale imunoglobulinelor.
n final, complexului V(x) J(y) i se ataeaz un segment
constant C(z). Ansamblul V(x) J(y)C(z) este transcris ntr-un
ARN premesager, apoi secvenele ARN care corespund
intronilor i secvenelor genetice mute sunt excizate,
obinndu-se un mARN funcional care este codificat la nivel
ribozomal n lan L.
Posibilitile de variabilitate ale lanurilor L sunt sporite i
prin mutaii somatice punctiforme, cu referire special la genele
V i J inclusiv prin realizarea unei variabiliti la locul de
recombinare. Prin asociere combinatorial, o anumit caten H
dat (indiferent de clasa sau subclasa creia i aparine) este
teoretic capabil s se asocieze cu oricare dintre catenele LK sau
L , produse de ctre celul. Aceast reunire este necesar,
pentru a realiza configuraia i specificitatea paratopilor.
Dei repertoriul potenial (teoretic) de anticorpi diferii
atinge cteva miliarde, repertoriul disponibil (practic) este de
ordinul a cteva milioane de paratopi diferii, prezeni la un
moment dat n sistemul imunitar al organismului respectiv.
Numrul paratopilor disponibili, efectivi, reali, este cu mult mai
mare dect numrul antigenelor cu care organismul respectiv
interacioneaz pe parcursul vieii.
 Genele care asigur diversitatea genetic a
imunoglobulinelor fac parte dintr-o familie supergenic V,D,J
(familia supergenic a Ig) care asigur i controlul genetic al
variabilitii receptorilor pentru antigen de la nivelul limfocitelor
T (TCR) i a CD-urilor de difereniere dup mecanisme similare
celor prezentate anterior : recombinri ale unor gene V, D, J, C;
flexibilitatea joncional; unirea imprecis a segmentelor de
gene; asocierea combinatorial, mutaii somatice, etc.
Toate aceste evenimente genetice apar n cursul
ontogeniei limfocitelor B i T.

ANTICORPII MONOCLONALI

Anticorpii monoclonali (AMC) sunt anticorpi cu

specificitate restrns, care interacioneaz cu un singur epitop.
Producerea AMC a fost impulsionat datorit numeroaselor
i avantajoaselor aplicaii ale acestora:

APICAIILE AMC
Studiul receptorilor de suprafa celular, prin marcarea
AMC cu substane fluorescente sau radioactive. Astfel, prin
AMC se pot evidenia i antigene de difereniere limfocitar,
care fac corelaia ntre fenotipul limfocitului i funcia sa. Prin
AMC se poate urmri ontogeneza limfocitelor B i T, prin
studierea grupelor de difereniere CD (cluster of
differentiation).
Spre exemplu, structura CD4 evideniaz un limfocit T
helper, iar structura CD8 caracterizeaz limfocitele T citotoxice
i limfocitele T supresoare.
Utilizarea AMC n scop diagnostic:
- n boli infecioase cu etiologie bacterian, viral, micotic,
pa-razitar
- n boli genetice (trisomia 21)
- n sarcin (utiliznd AMC antigonadotrofin corionic)
- n testarea compatibilitii HLA a grefelor
- n identificarea diverselor tipuri de celule maligne n
organism
- determinarea diferenelor antigenice ntre virusuri
- studiul structurii i variabilitii genetice a anticorpilor
Utilizarea AMC n scop terapeutic:
- Utilizarea AMC cu scopul neutralizrii infeciozitii virale
(inhibarea atarii virusului pe suprafaa celulelor susceptibile)
- Utilizarea AMC ca factori imunosupresori n transplantele
de or-gane, n bolile autoimune i alergice (ex.: AMC anti-CD3,
CD4, LFA-1)
- Utilizarea AMC n terapia specific antitumoral
- Utilizarea AMC pentru purificarea interferonilor n scop
terapeutic
- Conjugarea medicamente - AMC, pentru vehicularea unor
citostatice
- Cuplarea AMC cu imunotoxine, cu scopul potenrii
reaciilor de citotoxicitate. Metoda este util pentru distrugerea
celulelor int care poart pe suprafaa lor un numr redus de
antigene (cu imunogenicitate redus)
- Imunolipozomii - realizarea unor conjugate lipozomi AMC,
cu scopul ghidrii lipozomilor spre anumite celule int

Tehnologia obinerii anticorpilor monoclonali

AMC se obin prin tehnologia hibridomului i sunt de
fapt o variant in vitro a proteinelor mielomatoase, deoarece
se selecteaz o singur clon de limfocite care sintetizeaz
anticorpi cu specificitatea dorit (pentru un singur epitop).
Utilizarea limfocitelor B normale este o metod care nu
ofer rezultate mulumitoare, deoarece plasmocitele nu
supravieuiesc n culturi de celule. Pentru a compensa acest
neajuns, se realizeaz fuzionarea celulelor B cu celule tumorale,
care sunt imortale (au o capacitate de supravieuire nelimitat
n culturi de celule).
Celulele tumorale folosite sunt celule de mielom multiplu
(plasmocitom), care prolifereaz necontrolat, producnd cantiti
mari din aceeai imunoglobulin monoclonal.
Dup fuzionarea limfocitului B (care precizeaz tipul
imunoglobulinei monoclonale) cu celula mielomatoas, se
adaug n mediul de cultur hipoxantin, aminopterin i timin
(mediul HAT). n mediul HAT vor supravieui i se vor
multiplica nedefinit numai celulele de hibridom, care produc
hipoxantin guanin - ribozil transferaza. Celulele nefuzionate
mor.
Celulele de hibridom (fuzionate) sunt distribuite n plci cu
godeuri, respectiv o celul hibrid / godeu.
Se selecteaz astfel clona dorit care se multiplic n vitro,
dup care se va inocula intraperitoneal la un oarece consangvin,
care va produce ulterior cantiti mari de imunoglobuline
monoclonale (20 mg de protein la 1 ml de lichid ascitic, zilnic
recoltndu-se aproximativ 2 - 10 ml de lichid).
Dei randamentul metodei de obinere a AMC este bun,
inocularea repetat a AMC de origine murin la om - va stimula
puternic rspunsul imun al gazdei fa de proteina exogen;
exist chiar riscul inactivrii anticorpului inoculat.
 Pentru ndeprtarea acestor neajunsuri, s-au obinut
anticorpi himerici, alctuii n zona variabil VL i VH ntocmai
ca AMC murini, dar cuplai cu CL, CH1, CH2, CH3 umane. i
aceti anticorpi himerici sunt imunogeni, singura speran n
diminuarea imunogeneticitii lor fiind obinerea AMC prin
tehnologia ADN - ului recombinant, cu specificitate izotipic
uman.

Fig. nr. 36 - Schema producerii anticorpilor monoclonali

(Zarnea, 1990)

CAPITOLUL 43
SISTEMUL COMPLEMENT

Sistemul complement (C) reprezint un sistem biologic de

amplificare a rspunsului imun, constituit din 9 fraciuni (C1 -
C9) i 11 proteine globulare distincte (C1 - alctuit din
subfraciunile C1q, C1r, C1s).
Funciile biologice ale sistemului complement sunt variate:
 Bacterioliza (liza bacteriilor, mai ales a bacteriilor gram
negative)
Liza virusurilor mari nvelite sau liza celulelor infectate cu
virus
Promovarea fagocitozei (componentul C3 constituie o
opsonin specific)
Activarea degranulrii mastocitelor i bazofilelor
Reacii de citotoxicitate (liza celulelor strine sau liza
celulelor proprii, realizat n boli autoimune, hemoliz imun)
Rol n inflamaie (anafilotoxin, chemotactism, creterea
perme-abilitii vasculare i contracia muchilor netezi, etc.)

Factorii sistemului complement se gsesc n ser n stare

inactiv, dar pot fi activai enzimatic, pe calea clasic i pe calea
alternativ (properdinic).
Activarea componentelor sistemului complement se
realizeaz prin clivare proteolitic, n urma acestui fenomen
rezultnd dou fragmente diferite a sau b:
Un fragment activ n clivarea componentului urmtor n
secven
Un fragment ce se fixeaz pe membrana celular.
 Activarea componentelor se realizeaz n sistemul de
cascad enzimatic. Etapa esenial a activrii este obinerea
fraciunii C3, placa turnant ntre activarea C pe cale clasic i
cea pe cale alternativ.
Activarea pe cale clasic ncepe de la C1, e iniiat de
prezena complexului AG-AC i are o evoluie rapid i
eficient. Proteinele specifice cii sunt C1, C2 i C4.
Activarea pe cale alternativ ncepe de la C3 i este mai
lent. Calea properdinic este declanat prin intermediul
endotoxinelor bac-teriene, proteazelor lizozomale sau
agregatelor imunoglobulinice (IgA, IgE). Calea de activare
altern prezint proteine specifice: factorii D, B, I, H i
Properdina (P).

ACTIVAREA SISTEMULUI COMPLEMENT PE CALE

CLASIC

Calea clasic este activat prin sisteme antigen anticorp

situate pe suprafaa unor membrane celulare.
Componentul C1 este unitatea de recunoatere a sistemului
complement i este alctuit din trei subuniti C1q, C1r, C1s
meninute asociate n prezena ionilor de calciu.
 C1q are o greutate molecular de 400 k i este alctuit din
6 subuniti, reunite n Y, aspectul conferit fiind acela de
buchet de lalele. Fiecare extremitate are aspectul globular i
reprezint situsuri de legare pe domeniul CH2 al IgG i probabil
CH3 al IgM. Interaciunea cu antigenele determin o modificare
conformaional a imunoglobulinelor, care descoper situsul
de legare de pe FC pentru C1q. n cazul IgM, legarea i
activarea C1 poate fi efectuat de ctre o singur molecul, n
timp ce n cazul IgG sunt necesare dou molecule de
imunoglobulin G, situate foarte aproape una alta, pe suprafaa
celulei. Diferitele subclase de IgG au o capacitate de legare a C
inegal: IgG3>IgG1>IgG2. IgG4, IgA, IgD, IgE nu prezint
receptori pentru sistemul complement.
Activarea unei fraciuni se noteaz C . C se fixeaz pe
situsul S1 al membranei celulare. C1q activeaz C1r i C1s.
C1q,1r,1s se leag prin legturi necovalente n prezena
calciului, realiznd factorul C .
C scindeaz C2 i C4 n fragmentele C2a, C2b i C4a,
C4b. Fragmentul C4b se ataeaz de membrana celular n
poziia S2, apoi se leag C2a n acelai situs, n prezena ionilor
de magneziu.
Enzima C2aC4b reprezint C3 convertaza clasic, ce
cliveaz fragmentul C3 n dou fragmente: C3a i C3b.
Fragmentul C3b se ataeaz pe membrana celular n situsul S2,
alturi de C4b2a. Fragmentul C3a trece n faz lichid,
ndeplinind diverse roluri imunologice.
 Complexul C4b2a3b are rolul C5 convertaz, care
scindeaz factorul C5 n fragmentul C5a, care trece n faz
lichid i C5b care ataeaz n situsul S3. Reaciile enzimatice se
ncheie la C5, dup care urmeaz sim-ple reacii de adsorbie.
C5b leag C6 i C7, rezultnd C5b67, la care se ataeaz apoi
C8 (tot n situsul S3), rezultnd complexul C5b678. Complexul
rezultat prezint ase poziii de legtur pentru C9, rezultnd un
complex decamolecular activat C5b6789.
Din punct de vedere funcional, moleculele
complementului C5b,C6,C7,C8,C9 reprezint complexul de atac
al membranei, care va realiza funciile citolitice, prin crearea
unor microcanale membranare prin care se pierde coninutul
celular.

Fig. 37 - Reprezentarea fazelor de activare ale sistemului

complement (Zarnea)
Tabelul nr. 26 - Principalele proprieti ale proteinelor
sistemului complement (Zarnea, 1990)
Componentul Greutatea molecular ( ) Mobilitatea
electroforetic Concentraia seric ( g/l)
C1 900.000 200-300
C1q 410.000 150-180
C1r 85.000 50
C1s 85.000 100
C2 110.000 30
C3 205.000 80
C4 210.000 400-450
C5 C5a 11.000
C5b 195.000 80
C6 128.000 75
C7 121.000 53
C8 155.000 80
C9 79.000 200
B 93.000 200
D 25.000 1,5
P 220.000 10-25
C1INH 109.000 180

CALEA ALTERNATIV (PROPERDINIC)

Factorii de activare ai acestei ci sunt reprezentai prin

factori variai (endotoxine, Ig polimerizate, properdina).
Principalul factor de iniiere al cii se numete Fi (factorul de
iniiere), cu GM de 170 , care este o pseudoglobulin format
din dou lanuri peptidice.
Factorul de iniiere activeaz factorul B ( 1 glicoproteina
cu greutate molecular 93 ) i l cliveaz n fragmentul Bb (ce
se unete cu C3b, rezultnd C3bBb) i fragmentul Ba ce trece n
faz lichid (reacii catalizate prin proteina H i Mg2+).
Complexul C3bBb reprezint convertaza solubil C3, care va
activa componentul C5, cu formarea ulterioar a complexului de
atac al membranei celulare (C5b6789).
Factorul B este supus clivrii n cele 2 fragmente Bb i Ba sub
aciunea factorului D ( globulin cu GM 24 ).
Fragmentele Ba trec n faz lichid, n timp ce fragmentele Bb
se vor ataa la alte molecule C3b, complexele C3bBb fiind
stabilizate sub influena properdinei P (cu GM 223 , protein
tetrameric). Se formeaz convertaza properdin dependent, cu
formarea complexului de atac al membranei.

Fig. 38 - Calea alternativ de activare a sistemului complement

(Haeney, 1984)

Mecanisme de control ale activitii sistemului C

Pentru a preveni eventuale boli autoimune, cu agresionarea
structurilor proprii exist sisteme complexe de reglare ale
activitii sistemului C. Cele mai cunoscute sunt urmtoarele:

Factorul C1 inhibitor (C1INH)

Recunoate factorii C1r i C1s i le inhib activitatea.
Factorul C1INH este o glicoprotein cu o GM de 105 k , care
nu influeneaz concentraia de C1 nativ, inactiv.

Factorul I
Inactiveaz factorii C2, C4 i activitatea cii alternative.
 Factorul I (cofactor H) cliveaz i distruge C3b (inhibiia
preferenial a cii alternative se realizeaz prin intervenia
competitiv a factorului H, care va forma complexul inactiv
C3bH, complex ce nlocuiete fragmentul Bb din convertaza
C3bBb).

Degradarea enzimatic a factorului Bb diminueaz

activitatea cii alternative.

Factorul C4BP (n corelaie cu factorul I) sunt responsabile

pentru reglarea activitii C4b.

Vitronectina (proteina S) previne legarea complexului

C5b67 pe suprafaa membranelor biologice (inhib activitatea
complexului de atac al membranei).

Factorii XI i XII ai coagulrii controleaz activitatea C1

fa de C2 i C4 n calea clasic.

FUNCII BIOLOGICE ALE COMPONENTELOR

SISTEMULUI C
 Cele mai importante proprieti biologice ale sistemului
complement se refer la intervenia n procesele inflamatorii i
aprarea antiinfecioas. Realiznd sinteza acestor proprieti s-a
confirmat experimental faptul c:
C1 are rol n neutralizarea viral.
C1q, C1r, C1s iniiaz liza virusurilor i precipitarea
complexelor imune.
C2 crete permeabilitatea vascular i stimuleaz contracia
muchilor netezi.
C3a i C5a
- au rol de anafilotoxine i au rol chemiotactic (factorul C5a este
cel mai important factor chemiotactic al gazdei)
- produc contracia muchilor netezi
- cresc permeabilitatea vascular, prin aciunea lor combinat
asupra mastocitelor, bazofilelor i determin aflux leucocitar n
esuturile infectate
- rol n eliminarea unor complexe imune
- C5a activeaz enzimele lizozomale i stimuleaz fagocitoza
prin PMN.
C3b - realizeaz imunoaderena (reprezint o opsonin
specific i promoveaz fagocitoza).
- asigur deplasarea complexelor imune n zonele n care
rspunsul imun este mai intens
- favorizeaz mecanismele citotoxicitii dependente de
anticorpi (ADCC).
C4b - realizeaz imunoaderenden
- rol important n neutralizarea viral
C5b - iniiaz liza celular.
C6,7,8,9 - complex de atac al membranei (realizeaz liza
celular).

Reglarea sintezei componentelor sistemului complement

Reglarea genetic a componentelor sistemului complement

este asigurat prin genele CMH clasa a III a. Genele
codificante ale C2, C4 i ale factorului B sunt localizate la
nivelul braului scurt al cromozomului 6 uman.
Reglarea biochimic
Sinteza proteinelor sistemului complement este reglat i
prin citokine (spre exemplu, INF stimuleaz sinteza C2, IL1 i
IL6 stimuleaz sinteza C3) sau histamine (receptorul pentru
histamin H1R stimuleaz sinteza componentelor C, spre
deosebire de H2R care poate uneori inhiba sinteza).
Mecanismele de reglare i control cantitativ i calitativ
(func-ional) ale componentelor sistemului C sunt extrem de
complexe, la nivel genetic, celular i molecular.

CAPITOLUL 44
BAZELE GENETICE ALE RSPUNSULUI IMUN
Baza genetic a rspunsului imun este asigurat de ctre un
complex de gene strns asociate, cu rol esenial n
compatibilitatea esuturilor, recunoaterea antigenelor strine,
reglarea rspunsului imun, individualitatea i specificitatea
rspunsului imun denumit complex major de
histocompatibilitate (CMH).
La om, informaia genetic pentru CMH este localizat pe
braul scurt al cromozomului 6, cu locusurile genetice (A,B,C)
ale CMH clasa I, cu locusurile (D/DR, DQ, DP, DN) ale CMH
clasa a II a. Locusurile genetice C2,C4S,C4F, Bf codific
sinteza unor componente ale sistemului complement.
Ansamblul genelor CMH codific sistemul HLA (Human
Leucocyte Antigens), descoperit de ctre Dausset, prin studii
fcute asupra aglutinabilitii leucocitelor.
ORGANIZAREA GENETIC A CMH

Organizarea genetic a CMH clasa I

Locusurile genetice A,B,C codific antigenele HLA clasa I,

care sunt prezente pe suprafaa tuturor celulelor nucleate din
organism i asigur individualitatea genetic i biochimic a
fiecrui individ n parte.
Gena B ocup o poziie central pe harta regiunii, fiind
situat la o distan aproximativ egal de gena A i gena D/DR
(aproximativ 0,85 cM).
Polimorfismul sistemului HLA se explic prin existena
mai multor alele pentru fiecare locus genetic n parte. Pentru
exemplificare, exist cel puin 24 de alele distincte pentru
locusul A i cel puin 50 de alele distincte pentru locusul B.

Organizarea genetic a CMH clasa a II-a

Regiunea genetic HLA-D conine 5 subregiuni distincte:

DR, DQ, DP, DN, DO, iar regiunea HLA-I conine genele Ir, de
rspuns imun individualizat.
 Genele CMH clasa a II-a ce codific lanuri sunt
desemnate prin litera A, n timp ce genele CMH clasa a II-a ce
codific lanurile ale moleculelor HLA - sunt desemnate prin
litera B.
Spre exemplu, subregiunea genetic HLA-DR cuprinde
locusurile genetice HLA-DR A1, HLA-DR A2, HLA-DR B1,
HLA-DR B2, etc., cifra asociat indicnd o anumit
specificitate a antigenului. Moleculele DR-B1 codific
specificitile DR de la DR1 la DRW18, moleculele DR-B3
codific specificitatea DRW52, iar DR-B4 codific DRW53.
Subregiunea HLA-DQ conine dou seturi de gene HLA-
DQ A1 i HLA-DQ B1, respectiv HLA-DQ A2 i HLA-DQ B2,
ultimele dou fiind pseudogene. Lanurile DQ- i DQ- sunt
extrem de polimorfe. Moleculele DQ- codific specificitile
DQW1 - DQW9. Deoarece fiecare n parte are 2 subregiuni DQ,
cte una pe fiecare din cei doi cromozomi (matern i patern),
nseamn c exist dou gene diferite DQ-A1 i dou gene DQ-
B1, care se altur tip cis-trans. mperecherea de tip cis se
refer la asocierea lanurilor sau codificate de ctre genele
aceluiai cromozom, pe cnd recombinarea trans se refer la
mperecherea genelor de pe cromozomi opui. Moleculele
codificate prin recombinarea trans a genelor se numesc
molecule hibrid i sunt cauze importante de asociere a
sistemului HLA cu diferite boli.
Subregiunea HLA-DP conine, de asemenea, dou seturi de
gene (HLA-DP A1, HLA-DP B1 i HLA-DP A2 cu HLA-DP
B2), ultimele dou fiind de fapt pseudogene. Moleculele DP
codific specificitatea pentru antigenele DPW1-DPW6. Exist la
heterozigoi 4 gene distincte DP, care se pot recombina cis i
trans n anumite condiii.
Subregiunile DN i DO
Subregiunea DN conine o singur gen HLA-DN A, iar
subregiunea DO conine gena DO-B, gene care n mod normal
nu se exprim in vivo dar pot fi puse n eviden prin reacii in
vitro. n prezent nu se cunoate funcia acestor gene.
Regiunea genetic I - codific rezistena individual la
infecie
Fig. nr. 39 - Organizarea genetic a CMH uman [1]

Hrile genetice clasice plaseaz genele Ir (de rspuns imun

individualizat) n cadrul CMH clasa a II-a.

Organizarea genetic a CMH clasa a III-a

Structura sa este polimorf. Exist 4 alele care determin

patru forme alternative ale factorului properdinic (BF), care pot
fi evideniate prin separare electroforetic:
o form cu migrare rapid (fast form BF sau BF-F);
 o form cu migrare lent (slow form BF sau BF-S);
o form rar cu migrare rapid (BF-F1);
o form rar cu migrare lent (BF-S1).
Exist 2 alele pentru codificarea factorului C2 (S.C) (C2C
i C2A) - prezente n mod constant i o alel C2QO prezent
foarte rar.
Exist 7 alele codificante pentru locusul C4A i 3 alele
codificante pentru locusul C4B (10 alele codificante pentru
factorul C4 al sist. C).
Antigenele HLA codificate de ctre CMH clasa I i II au
structuri imunoglobulin - like (sunt glicoproteine membranare
integrate) i au un rol extrem de important n procesele de
recunoatere imunologic

Bazele genetice ale heterogenitii imunoglobulinelor

Sistemul imunitar uman posed o capacitate virtual
nelimitat de a produce anticorpi diferii. Diversitatea genetic a
superfamiliei genice a imunoglobulinelor este asigurat prin
recombinri variate ale segmentelor genice V (de variabilitate),
D (de diversitate), J (de legtur), C (constante), procese
genetice care asigur att variabilitatea imunoglobulinelor dar i
a moleculelor imunoglobulin-like, cu rol n interaciunile
celulare (molecule HLA clasa I, clasa a II-a, receptorul celulei
T, receptorii CD2, CD4, CD8).
Alturi de procesele de recombinare ale segmentelor V, D,
J, C, pentru asigurarea diversitii lanurilor L sau H exist i
alte surse de diversitate genetic a imunoglobulinelor:
Mutaiile somatice
Acest tip de mutaii apar att n regiunile V,
corespunztoare situsului de legare al antigenului, ct i n
zonele adiacente, denumite regiuni cadru. AC de tip mutant
apar n fazele tardive ale rspunsului imun.
Flexibilitatea de legare
Alt i Honjo au semnalat posibilitatea adugrii unor
nucleotide inexistente n ADN-ul din celula embrionar la
jonciunea DH-JH. Ele formeaz o regiune nou, N, introdus n
structura ADN de ctre o polimeraz ADN, prezent n celulele
B imature. Ea poate aduga la ntmplare nucleotide la
extremitile 3 ale unei catene ADN, nainte de a lega situsurile
de jonciune.
Asocierea combinatorial
Este procesul prin care o caten H dat, indiferent de clasa
sau subclasa creia i aparine, este teoretic capabil s se
asocieze cu oricare dintre catenele LK sau L produse de ctre
celul.
 Posibilitatea comutrii clasei de imunoglobuline
Analiza genetic a locusului CH a demonstrat faptul c
genele respective sunt precedate de ctre secvene de
comutare (switch), cu rol de situs activ n schimbarea clasei
lanurilor H. Aceste recombinri sunt nsoite de deleia regiunii
C i a altor regiuni din genom intercalate. Se presupune c
intervin n acest mecanism, dou proteine cu rol n comutare,
care recunosc i leag dou regiuni switch, ce preced gene
diferite. Astfel se poate realiza comutarea chiar la gene
ndeprtate, cum ar fi C C .
Demonstrnd potenialul uria de amplificare a informaiei
ge-netice prin reasortarea genelor, familia supergenic a
imunoglobulinelor codific i majoritatea receptorilor sistemului
imunitar.

ANTIGENELE HLA

Structura antigenelor HLA clasa I

Antigenele de histocompatibilitate sunt glicoproteine

membranare integrate. Sunt alctuite dintr-o caten grea
(similar imu-noglobulinelor), cu 3 domenii extracelulare (de cte
90 aminoacizi fiecare), un domeniu transmembranar i un
domeniu transcitoplasmatic. Catena are un domeniu situat
aminoterminal ( 2) n care exist situsurile recunoscute de ctre
celulele sistemului imunitar. Restul moleculei aparine unor
regiuni ct.
Catena este asociat necovalent cu o caten uoar, 2
microglobulina. Aceasta are dou molecule asociate, Qa i Tla,
care fac parte, de asemenea, din familia supergenic a
imunoglobulinelor. Funciile moleculelor Qa i Tla sunt mai
puin cunoscute i se pare c acioneaz n domeniul
recunoaterii antigenului. Nu se cunoate de ce exist acest
sistem doar pentru moleculele CMH clasa a I i pentru
moleculele CMH clasa a II-a - nu. (v. Fig. nr. 40).

Fig. nr. 40 - Structura moleculelor HLA I i HLA II [1]

Structura antigenelor HLA clasa a II-a

Moleculele HLA clasa a II-a sunt dimeri, respectiv catena
este catena grea (GM: 35 k ) i are domeniile A , E ;
catena este catena uoar (GM: 28 k ) (structur Ig - like)
i are domeniile A , E . Fiecare dintre aceste domenii posed
cte 90 aminoacizi. Pe domeniile 1, 1, 2 se structureaz
situsurile n care vor ptrunde antigenele pentru care exist
specificitate. Polimorfismul extraordinar al antigenelor HLA -
este asigurat prin reasortri genetice ale genelor de variabilitate
(V), diversitate (D), de legtur joining (J), constante ( C) (v.
Fig. nr. 24).

Rolurile imunologice ale antigenelor HLA clasa I

Aceste molecule sunt prezente pe suprafaa tuturor

celulelor nucleate din organism. Reprezint adevrate carnete
de identitate biochimic i genetic pentru fiecare individ n
parte. Pentru ca un anume antigen s fie recunoscut de ctre un
limfocit T citotoxic CD8 - este necesar restricia HLA.

Aceste molecule fac diferenierea self - non-self i devin

inta sistemului imunitar n 3 situaii:
pentru respingerea de transplante de esuturi i organe
incompatibile (non-self);
cnd suprafaa celulelor e modificat prin antigene virale,
tumorale sau substane chimice.
cnd moleculele HLA sufer modificri prin mutaie,
devin autointe care vor fi eliminate.
Rolurile imunologice ale antigenelor HLA clasa a II-a

Aceste molecule au o distribuie celular mai limitat, n

special pe suprafaa celulelor imunocompetente (limfocit B,
limfocit T, macrofag, etc.). Uneori, celulele care n mod normal
nu exprim pe suprafaa lor molecule HLA clasa a II-a (spre
exemplu - celulele endoteliale sau tiroidiene), le pot exprima n
condiii necunoscute. Exprimarea anormal a acestor antigene a
constituit un element important pentru explicarea asocierilor
sistemului HLA cu diferite boli (v. Tabelul nr. 10).
Moleculele HLA clasa a II-a au un rol esenial n
declanarea reaciilor imunitare, prin interaciuni i cooperri
celulare, funcionnd ca un dicionar de recunoatere ale
structurilor strine organismului.
Interaciunile eficiente ntre limfocitele TH (CD4) i
macrofagele care prezint antigenele, ca i cooperarea celular
dintre limfocitul T i B, au loc numai dac celulele respective
posed antigene Ia, care funcioneaz ca i elemente de restricie
CMH.

Dup Buss este probabil c genele care codific antigenele

Ia sunt gene Ir, dar nu toate genele Ir codific antigene Ia.
Antigenele Ia (immunity associated) au un rol important n
generarea unei decizii a organismului (dac declaneaz sau nu
un rspuns imun).
Limfocitele T posed receptori cu specificitate dubl
(TCR=T cell receptor), att pentru antigene, ct i pentru o
molecul CMH de pe suprafaa celulelor cu care interacioneaz.
Pentru a activa limfocitele T, macrofagul prezint pe suprafaa
sa att antigenul, ct i o molecul HLA clasa a II-a (o molecul
Ia). Celula T activat trimite semnale stimulatoare (helper)
unei celule B. Limfocitele T supuse restriciei CMH sunt
denumite limfocite T-CMH. Exist ns i limfocite TH-Ig, care
funcioneaz i fr restricie CMH.

Tabelul nr. 27 - Specificitile HLA cunoscute n prezent

 n concluzie antigenele HLA clasa I intervin n prezentarea
antigenelor endogene ctre limfocitele T citotoxice, n timp ce
antigenele HLA clasa a II-a se asociaz cu antigene exogene
prelucrate, pe care le prezint limfocitului TCD4. Recunoaterea
asociat a antigenului i a produilor CMH, funcioneaz ca un
sistem de siguran cu dou chei, care, pe de o parte limiteaz
potenialul distructiv al limfocitelor i pe de alt parte asigur
eficiena rspunsului imun.
Astfel, se demonstreaz faptul c sistemul imunitar a
evoluat n aa fel nct ambele tipuri de molecule HLA,
codificate de ctre genele CMH, servesc ca i indicatoare
rutiere pentru celulele T, ghidndu-le spre antigen.

RELAIA: ANTIGENE HLA - PREDISPOZIIE LA BOAL

Ipoteze ale acestei asocieri

Au fost propuse 5 ipoteze pentru a explica asocierile

sistemului HLA cu diferite boli. Acestea sunt urmtoarele:
Moleculele HLA reprezint receptori pentru agenii
etiologici
 Anumite molecule HLA pot constitui receptori pentru
virusuri, toxine, alte substane strine. Spre exemplu, antigenul
HLA B27 este un receptor posibil pentru un virus insuficient
definit, care ar cauza spondilita anchilozant.
Ca suport a acestei ipoteze este observaia conform creia
i alte molecule de pe suprafaa celulelor imunologice pot
constitui receptori pentru virusuri (de exemplu, structura CD4 a
limfocitului T constituie un receptor pentru virusul
imunodeficienei umane.)
Moleculele HLA sunt selective pentru anumite peptide.
Este posibil ca o anumit secven de aminoacizi din
structura moleculei HLA - s poat lega (n mod anormal), un
fragment antigenic peptidic, rezultnd un complex imun
nerecunoscut ca self, complex care va fi atacat de ctre un
limfocit CD8 (citotoxic). Prin aciunea limfocitului, se
declaneaz boala.
Receptorul pentru antigen al celulei T (TCR) confer
predispoziia la boal
Recunoaterea antigenului de ctre celula T este sub
restricia moleculei HLA, codificat de CMH. Spre exemplu,
presupunnd c indivizii cu HLA B27 prezent (cu risc pentru
spondilita anchilozant) pot s formeze un complex imun ntre
molecula B27 i virusul cauzal, complex recunoscut n mod
corespunztor de ctre un TCR, atunci toi indivizii cu acelai
tip de TCR - vor face boala manifest.
 Agenii etiologici care mimeaz structura antigenelor HLA
Din cauza similaritii structurale a antigenului cu molecula
HLA, rspunsul imun va fi deturnat mpotriva antigenului
HLA respectiv, acesta fiind rspunsul autoimun. Aceast teorie a
ctigat cea mai mare credibilitate din cauza unei observaii
experimentale: antigenul HLA B27 este asociat cu sindromul
Reiter n aceeai msur ca i cu spondilita anchilozant.
Sindromul Reiter la indivizi cu antigenul HLA B27 pozitiv, se
declaneaz adeseori dup mbolnviri de dizenterie provocate
de Shigella flexneri. S-a constatat faptul c tulpinile bacteriene
amintite posed o plasmid, care codific o protein cu 5
aminoacizi din lanul proteic, identici cu 5 aminoacizi din
structura antigenului HLA B27. Deoarece anumii indivizi au
aceast similaritate de structur HLA cu agentul etiologic, ei
sunt predispui la boal, n lumina teoriei expuse.
Exprimarea moleculelor HLA clasa a II-a pe suprafaa
celulelor este aberant
Aceast ipotez se refer doar la bolile asociate cu sistemul
HLA clasa a II-a. Moleculele de pe suprafeele celulare sufer
un proces de uzur continu. Degradarea moleculelor HLA
clasa a II-a de pe suprafaa celulelor poate fi similar unui
proces de prelucrare a antigenului. Un fragment peptidic al
unei astfel de molecule prelucrate poate s fie asociat n
situsul de legare al unei molecule HLA clasa a II-a, pentru a
forma un complex imun i pentru a declana un rspuns
imunologic mpotriva acestei molecule specifice.
Modele de calcul statistic privind asocierile sistemului HLA cu
anumite stri patologice

Cercettori americani au cuantificat asocierea anumitor stri

patologice cu un anumit antigen HLA predispozant, prin
calcularea riscului relativ (RR) pentru o anumit afeciune :

p+ = numrul pacienilor care au un anumit antigen HLA

particular;
p- = pacienii care nu au acel antigen HLA;
c+ = numrul indivizilor din lotul de control care posed
antigenul HLA
c- = indivizii din lotul de control care nu au acel antigen HLA
particular.
Se observ faptul c riscul relativ este cu att mai mare, cu
ct antigenul HLA predispozant pentru o anumit boal este mai
ntlnit la pacieni.
Riscul absolut (RA) reprezint ansa ca un individ care
posed antigenul HLA predispozant s i contacteze afeciunea
respectiv. RA se calculeaz dup formula:
P = prevalena bolii n populaia general;
p+, c+ = au semnificaia de mai sus.
Deoarece exist diferene semnificative n frecvena unui
antigen HLA ntre diferitele grupuri rasiale, este necesar s
comparm grupul populaional studiat cu indivizi din lotul de
control din aceeai ras.

Strile patologice cunoscute pentru care prezena unor anumite

haplotipuri HLA constituie un risc relativ

Din cele prezentate, se deduce faptul c toate variaiile

individuale ale rspunsului imun sunt corelate cu antigenele
codificate de ctre complexul major de histocompatibilitate.
Pornind de la identitatea genetic a frailor gemeni
monozigoi i diversitatea genetic a celorlali frai (dizigoi i
frai obinuii), se pot aduce noi informaii privind controlul
genetic al rspunsului imun i al evoluiei unei infecii. Sunt
puine date din literatur privind rezultatele experimentelor
efectuate pe gemeni; studiile respective au constituit un model
de cercetare.
 n ncheiere, se vor prezenta strile patologice cunoscute (v.
Tabelul nr. 10). pentru care prezena unor anumite haplotipuri
HLA constituie un risc relativ:

Tabelul nr. 28 - Strile patologice asociate sistemului HLA

(Abba Terr)

BOALA HLA RISC RELATIV:

Boala Hodgkin A1 1,4
Hemocromatoza idiopatic A3
B14 8,2
4,7
Boala Behcet B5 6,3
Hiperplazia suprarenal congenital B47 15,4
Spondilita anchilozant B27 87,4
Rectocolita ulcerohemoragic B27 14
Sindromul Reiter B27 37
Uveita anterioar acut B27 10,4
Tiroidita subacut B35 13,7
Psoriazis vulgar CW6 13,3
Dermatita herpetiform DR3 15,4
Enteropatia glutenic DR3 10,8
Sindromul Sicca DR3 9,7
Boala Addison idiopatic DR3 6,3
Boala Graves DR3 3,7
Diabetul insulino-dependent DQW7
DR2
DR3
DR4 9
3,3
6,4
2
Miastenia gravis DR3 2,5
Lupus eritematos sistemic DR3 5,8
Scleroza multipl DR2 4,1
Nevrita optic DR2 2,4
Sindromul Goodpasture DR2 15,9
Artrita reumatoid DR1
DR4
DRW8 9,6
4,2
3,6
Pemfigus DR4 14,4
Nefropatia cu IgA DR4 4
Tiroidita Hashimoto DR5 3,2
Anemia pernicioas DR5 5,4

CAPITOLUL 45
ROLUL LIMFOCITELOR N RSPUNSUL IMUN

Participarea limfocitelor n rspunsul imun este iniiat prin

interaciunea cu un antigen specific.
Celulele imunologice prezint receptori, structuri specifice
care recepioneaz semnale din mediul ambiant, semnale pe care
ulterior le traduc n limbaj biochimic spre constituenii
celulari.

Receptorii sunt proteine sau glicoproteine membranare

integrate n membrana celular i conin zone distincte pentru:
- recunoatere
- transducia semnalului
- iniierea rspunsului imun.

Prezena receptorilor de pe suprafaa celulelor imunologice

poate fi identificat cu ajutorul:
- serurilor antireceptor
- prin tratare cu anticorpi marcai fluorescent
- izotopilor radioactivi.

ROLUL LIMFOCITELOR B N RSPUNSUL IMUN

Receptorii pot fi distribuii uniform pe ntreaga suprafa a

celulei (difuz) sau pot fi distribuii discontinuu, la un pol al
celulei (ex.: fenomenul de beretare). Exist o mare mobilitate
a Ig - receptor, fapt care explic beretarea la nivelul suprafeei
limfocitului B, dup contactul cu antigenul.
Evenimentele descrise mai sus se refer la o aglomerare a
complexelor AG receptor imunoglobulinic al limfocitului B,
(iniial pete fluorescente) pn la formarea unui conglomerat
AG receptori imunoglobulinici, dispui la un pol al celulei
(bereta).
Complexele AG-AC formate vor fi endocitate, transducia
semnalelor declannd modificri biochimice complexe, care se
concretizeaz n:
mrirea permeabilitii membranei celulare
activarea ATP azei
creterea nivelului celular de cAMP i cGMP.
sintez crescut de acizi nucleici i fosfolipide.

Fig. 41 - Reprezentarea schematic a fenomenului de beretare

(Gotze i Brger, 1986)

n urma acestor evenimente biochimice se produce

transformarea blastic a limfocitului B angajat i limfoblastul
rezultat se difereniaz apoi n plasmocit, care prezint o sintez
accelerat de glicoproteine (imunoglobuline). Plasmocitul este
principala celul productoare de imunoglobuline (2000
molecule/secund), respectndu-se succesiunea urmtoarelor
evenimente:
Sinteza lanurilor polipeptidice (separat pentru lanurile H -
sinteza unui lan H durnd 60 secunde i separat lanurile L cu
o durat de sintez de 30 de secunde)
 Asamblarea moleculei de imunoglobulin ine cont de clas
i sub-clas, n modaliti variate:
H+H H2 ; H2 + L H2L ; H2L + L H2L2
H+H H2 ; L + L L2 ; H2 + L2 H2L2
H+L HL ; H + L HL ; HL + HL H2L2
Apoi moleculele de imunoglobulin H2L2 ajung n max. 20
minute prin cisternele ergastoplasmice n aparatul Golgi, de
unde sunt trans-portate prin vezicule de membran i secretate.
Ataarea componentei glucidice se realizeaz n timpul
transportului intracelular
Etapa final se refer la secreia imunoglobulinelor, expuse
iniial pe suprafaa plasmocitului i apoi clivate enzimatic i
eliminate n circulaie.
Imunoglobulinele polimerice sunt secretate de ctre celul
n forma final (spre ex.: IgM- pentamer), chiar dac n
plasmocit Ig se gsesc numai sub form de monomeri.
Imunoglobulina A secretoare este secretat de plasmocit
sub forma unui dimer cu o pies J, care la trecerea prin celula
epitelial a mucoasei primete componentul secretor sintetizat
de ctre celula respectiv.
La un moment dat, un plasmocit (sau oricare celul din
seria lfB limfoblast proplasmocit) produce un set de
imunoglobuline care aparin aceleai clase, subclase, tip, allotip,
idiotip, cu aceeai specificitate i aviditate pentru antigen. Prin
mecanisme genetice se poate realiza comutarea de izotip a Ig -
lor.
Angajarea limfocitului B este nsoit i de un rspuns
proliferativ puternic, nu numai de o diversificare n morfologia
i funciile celulei (nainte de imunizare predomin limfocitele B
mici, dup imunizare predomin limfoblastele i plasmocitele).
n cursul diviziunilor blastice ale limfocitului B activat,
unele limfoblaste (prin diviziune asimetric) revin la aspectul de
limfocit B mic, cu memorie imunologic i cu o durat
prelungit de via.
Pentru antigenele timodependente, rspunsul imun generat
de limfocitul B are nevoie i de cooperarea limfocitelor TH.
Pentru antigenele timoindependente (flagelina polimerizat,
polizaharide bacteriene) angajarea limfocitului B se face fr
intervenia limfocitului T.

PARTICIPAREA LIMFOCITULUI T N RSPUNSUL IMUN

Limfocitele T sufer fenomenul de transformare blastic

(prin fenomene biochimice precum cele discutate anterior la
limfocitul B), fr etap de beretare, deoarece limfocitele T nu
posed receptori imunoglobulinici pentru antigen.
Angajarea limfocitelor T n rspunsul imun se realizeaz
sub aciunea unui antigen specific, (avnd ca rezultat o
expansiune clonal) sau sub aciunea unor mitogeni nespecifici
(precum fitohemaglutinina i concavalina A), ce determin o
activare policlonal.
Dup Reinhery i colaboratorii (1986), activarea i
proliferarea limfocitelor T este determinat n principal de ctre
interleukina 2 (IL2). Celulele T n repaus posed puini receptori
pentru IL2, dar dup activare numrul acestor receptori crete
semnificativ.
Creterea progresiv a numrului de receptori pentru IL2
este urmat de o faz de sintez i secreie accentuat de IL2,
care se leag pe receptorii celulelor care au produs-o.
Legarea unei cantiti suficiente de IL2 amorseaz
diviziunea celular i creterea sintezei acizilor nucleici.
n absena stimulilor caracteristici pentru limfocitul T,
reapar n numr mare receptorii pentru antigen (TCR) i
reducerea numeric a receptorilor pentru IL2. Exprimarea
tranzitorie a receptorilor pentru IL2 funcioneaz ca un sistem de
siguran, care elimin riscul proliferrilor necontrolate prin IL2.
Aa se explic de ce proliferarea celulelor T poate fi stimulat
prin IL2 provenit din surse exogene. IL2 induce sinteza altor
citokine i stimuleaz i activitatea limfocitelor T citotoxice.
Tabelul nr. 29 Principalii mitogeni limfocitari utilizai n
Imunologie (dup Zarnea)
Denumirea Sursa Greutatea molecular
Fitohemaglutinina (PHA) Phaseolus vulgaris 140.000
Concavalina (ConA) Canavalia ensiformis 51.000
Lectina de soia Glycine max 120.000
Lectina din germeni de gru Triticum vulgare 36.000
Lectina din ricin (RCA) Ricinus comunis 120.000

Dup cum rezult din tabelul precedent, mitogenii nespecifici

sunt polizaharide extrase din plante, care produc expansiunea
clonal doar a limfocitelor T.
Rolul limfocitelor T n imunitatea celular este major n:
Aprarea fa de infecii bacteriene, n special mpotriva
acelor ageni etiologici care prezint parazitism celular:
Mycobacterium, Brucella, Ricketsia, Treponema,
Aprarea antiviral (limfocitele T citotoxice distrug
celulele infectate cu virusuri)
Aprarea antiparazitar (ex.: Toxoplasma, Plasmodium,
Trypanosoma, Leishmania)
 Aprarea antimicotic (ex.: Candida, Cryptococcus,
Histoplasma, Supravegherea imun fa de celule strine,
mutante, mbtrnite sau modificate tumoral
Respingerea transplantelor i grefelor incompatibile
Hipersensibilitatea de tip tardiv (HTT) aspect
imunopatologic (reacie de hipersensibilitate de tip IV, produs
mai probabil prin intervenia limfocitelor T specializate TDH
(T delayed hipersensitivity) i a macrofagului activat. HTT
reprezint un aspect al IMC.
Memoria imunologic prin angajarea sa n rspunsul
imun, limfocitul T transformat blastic revine la aspectul de
limfocit T mic, devenind principala celul recirculant cu
memorie imunologic (iniiaz rspunsul imun secundar)
Reglarea imunologic limfocitul T helper reprezint
dirijorul orchestrei celulelor imunologice implicate n
rspunsul imun. Pe de alt parte, limfocitele T secret o
diversitate de citokine cu rol n amorsarea reaciilor imune
(activarea macrofagelor, limfocitelor, etc.) i n procesele
inflamatorii.

CAPITOLUL 46
TIPURI DE IMUNITATE
CLASIFICARE DUP CELULA EFECTOARE

Imunitate umoral (IU) efectorii: limfocitul B i

plasmocitul
Imunitatea mediat celular (IMC)- limfocitul T cu
subpopulaiile sale i macrofagul activat

CLASIFICARE DUP MODALITATEA DE CTIGARE A

IMUNITII

Imunitate activ
- amorsarea mecanismelor imunologice, cu apariia limfocitelor
cu memorie imunologic
- sunt implicate ambele forme de imunitate (IU+IMC)
- este de lung durat
- singurul dezavantaj faptul c imunitatea activ are nevoie de
un interval de laten pentru a se instala.
- Natural se obine dup trecerea printr-o infecie sau la un
contact cu un antigen
- Artificial se obine n urma vaccinrilor

Imunitate pasiv
- se realizeaz numai pentru imunitatea umoral
- este util n terapia bolilor infecioase, deoarece rspunsul
imun este foarte prompt, cu dezavantajul c protecia
imunologic este de scurt durat
- Natural: - se refer la trecerea IgG transplacentar de la
mam la ft sau trecerea IgA secretorii (prin laptele matern)
- Artificial: - se refer la administrarea serurilor imune
(serotera-pie)
- transferul IMC este imposibil de realizat practic; n mod
teoretic, IMC s-ar putea transfera printr-o limfokin (factor de
transfer) i limfocite T obinute de la un subiect imun, care n
final ar determina imunitate activ.

CLASIFICAREA DUP EFECTUL BIOLOGIC AL

IMUNITII
 Efect biologic favorabil - supraveghere imunologic i
corect aprare antiinfecioas i antitumoral
Efect biologic nefavorabil - manifestri imunologice
aprute prin alterri calitative sau cantitative ale rspunsului
imun (constituie obiectul de studiu al Imunopatologiei)

CAPITOLUL 47
DIAGNOSTIC IMUNOLOGIC

REACII ANTIGEN - ANTICORP

Asocierea unui anticorp cu antigenul su specific depinde

de interaciunea necovalent dintre epitop i paratop; definirea
reaciilor AG - AC se bazeaz pe consecinele formrii
complexului imun elementar.

Bazele moleculare ale interaciunii AG - AC:

Reaciile AG - AC se bazeaz pe complementaritatea

structural dintre epitop (aparinnd AG) i paratop (aparinnd
AC). Complexul imun elementar este complexul AG - AC la
nivel molecular, descris precum modelul ,,cheie - broasc sau
modelul ,,minilor care se strng. Complementaritatea
stereospaial epitop - paratop genereaz noi fore fizice de
atracie, precum forele electrostatice, legturi de hidrogen, fore
van der Waals.
Din cauza legturilor fizice dintre reactani, reaciile AG -
AC sunt ntotdeauna reversibile; AC nu altereaz AG.
Reversibilitatea (disocierea complexelor AG - AC) poate fi
considerat o reacie unimolecular n care viteza de reacie este
dependent de concentra-ia complexului imun. Dup studii n
care reactanii au fost marcai radioactiv, timpul de njumtire
al reaciilor antigen - anticorp a fost estimat ca durat minim de
trei ore, pn la T1/2 maxim de 8 zile.
Interaciunile AG - AC depind de concentraiile
reactanilor, complexele imune formndu-se cu probabilitate
maxim la concentraii echimoleculare ale AG i AC.
n reaciile imunologice, specificitatea, afinitatea i
aviditatea anticorpilor au un rol extrem de important.
Specificitatea - reprezint capacitatea unui anticorp de a
deosebi antigenul fa de care a fost produs, fa de alte antigene
cu structur asemntoare. Serurile imune incomplet purificate
pot determina reacii imunologice ncruciate.
 Afinitatea msoar fora de legare dintre un epitop i un
paratop, respectiv suma forelor de atracie i de repulsie dintre
cele dou componente ale sistemului imun elementar.

Constanta de afinitate (Ka) sau de ,,echilibru se poate

calcula dup formula:

Ka = Kas / Kdis = [AG - AC] / [AG] x [AC] , unde:

Ka = constanta ratei de asociere
Kdis = constanta ratei de disociere
[AG] = concentraia epitopilor
[AG - AC] = concentraia complexului imun
[AC] = concentraia situsurilor de legare liber a AC
[,,X] = concentraia molar
Constanta K va fi mare pentru complexele imune cu
afinitate crescut.

Aviditatea caracterizeaz energia medie a interaciunii de

legare a unui antigen cu epitopi multipli i diferii, cu anticorpii
specifici indui de ctre acetia. Spre deosebire de afinitate, care
furnizeaz date despre natura fizico-chimic a interaciunilor
AG-AC, aviditatea este semnificativ pentru antigenele naturale,
care sunt multivalente n realitate. Avantajul multivalenei este
faptul c aceasta crete energia de legare de 103 ori n cazul IgG
(bivalente) i de 107 ori n cazul IgM (multivalente).
Afinitatea i aviditatea crescut a anticorpilor specifici
determin reacii imunologice favorabile organismului: protecie
antibacterian, antiviral, antimicotic, antiparazitar,
antitumoral, neutralizarea efectului citopat viral etc.
Complexele imune cu afinitate sczut persist n circulaie sau
se depun n unele esuturi (spre exemplu, glomerulul renal) i
determin variate consecine imunopatologice.
La temperatura corpului, crete viteza de asociere a AG cu
AC specifici, de aceea majoritatea reaciilor imunologice cu
scop diagnostic (aglutinare, precipitare, etc.) se incubeaz la
37oC. Pentru evidenierea crioaglutininelor, incubarea reaciei se
face la temperaturi sczute (4oC).
Tipul de reacie imunologic observat depinde de starea
fizic a antigenelor, precum i de condiiile experimentale (ex.:
temperatura optim sau pH-ul optim al reaciei, cuprins ntre 6,5
i 8,5). Spre exemplu, antigenele particulate genereaz reacii de
aglutinare, antigenele solubile produc reacii de precipitare.
Sensibilitatea reaciilor AG - AC cu rol diagnostic poate fi
cuantificat prin numrul efectiv de particule necesare pentru a
produce o reacie vizibil; spre exemplu, 107 celule bacteriene
produc o reacie de aglutinare evident, spre deosebire de 6 x
1012 molecule de antigen solubil care produc o reacie de
precipitare detectabil.
Teoria ipotezei unitare a anticorpilor postuleaz faptul c
fiecare molecul de anticorp poate desfura mai multe tipuri de
reacii imunologice, corespunztor specificitii respective
(,,anticorpi multipoteni).
Reaciile AG - AC cu scop diagnostic sunt foarte variate;
toate reaciile serologice i propun evidenierea anticorpilor
specifici i ti-trarea lor. Creterea progresiv a titrului
anticorpilor semnific infecii n evoluie.

Principalele reacii imunologice cu rol diagnostic pot fi

clasificate:
Reacii de agregare
Reacii de aglutinare - pe lam
- n tuburi
- pe suport (ex.: latex aglutinare,
hemaglutinare pasiv)
Reacii de precipitare - precipitarea inelar
- reacia de floculare
- precipitare n gel
 - difuzie simpl - Metoda Oudin
- Imunodifuzia radial Mancini
- difuzie dubl - Metoda Outcherlony
- Imunelectroforeza
- Contraimunelectroforeza
Reacii AG - AC cu participarea complementului
Bacterioliza, Virionoliza virusurilor nvelite
(Imunocitoliza)
Imunhemoliza
Imunocitoaderena (ex: rozete EAC) i opsonizarea
Imunoaderena, imunocitotoxicitatea
Reacia cu fixarea sistemului complement (RFC, cu
variantele tehnice: Ida Bengston, Kolmer, Bradstrecet Taylor
etc.)
Reacii cu anticorpi monoclonali (AMC) specifici
Reacii AG - AC cu complexe imune vizualizate prin
artificii tehnice
Imunofluorescena (IF) - metoda direct i indirect
Radioimunotestarea (RIA) - metoda direct i indirect
Teste imunoenzimatice (ELISA) - metoda direct i
indirect
 Reacii de seroneutralizare (RSN) - pentru diagnosticul
infeciilor virale
Principiul reaciilor, tehnica de lucru i interpretarea
acestora sunt descrise la lucrrile practice. Alegerea uneia sau
alteia dintre reacii, pentru diagnosticul unei boli infecioase - se
bazeaz pe mai multe criterii: natura agentului etiologic,
sensibilitatea reaciei, clasa imu-noglobulinelor de identificat
(ex.: titruri nalte de IgM semnific infecie acut) i nu n
ultimul rnd, la noi n ar, n funcie de posibilitile materiale
ale laboratorului respectiv.

TESTE CARE EVIDENIAZ IMUNITATEA ME-DIAT

CELULAR

Imunitatea mediat celular are ca efector specific limfocitul

T, iar ca celul asociat, macrofagul.
Prin testele de imunitate celular se poate aprecia
funcionarea normal a IMC; diminuarea rspunsului imun
celular se poate observa n afeciuni congenitale, infecii virale,
bacteriene, fungice, parazitare, cancere, hepatite cronice, etc.
 Testele IMC pun n eviden i existena unui rspuns imun
celular specific fa de un anumit antigen (ex.: i.d.r. la
tuberculin, brucelin etc.)
Testele IMC pot fi efectuate in vivo i in vitro. Clasificarea
reaciilor este urmtoarea:
Teste in vivo
Intradermoreacia, care evideniaz starea de
hipersensibilitate de tip tardiv (prototip - i.d.r. la tuberculin).
Reacia investigheaz IMC global i prezena macrofagului
activat prin limfokinele limfocitului TH.
Teste in vitro
Testele sunt foarte complexe, nefiind introduse n
activitatea de rutin. Mai frecvent utilizate sunt:
Numrarea limfocitelor T
Evaluarea raportului dintre limfocitele TCD4 i TCD8.
(Raportul lfTCD4 / lfTCD8 >1 semnific valori normale,
valoarea subunitar fiind expresia imunosupresiei).
Capacitatea de proliferare (ca rspuns imun) la un stimul
mitogen. Se evideniaz prin:
Transformarea blastic a limfocitelor
Cultura limfocitar mixt (MLC).
Capacitatea productiv de citokine se investigheaz prin:
 Evidenierea MIF i LIF (factori de inhibare ai migrrii
macrofagelor i respectiv ai leucocitelor polimorfonucleare)
Evidenierea factorilor mitogeni limfocitari (FML) i ai
limfotoxinelor
Evidenierea interferonului sau a factorilor chemiotactici.
Manifestarea citotoxicitii (lfTCD8) fa de celula int:
Teste de limfocitotoxicitate - evideniaz mecanismele
distrugerii celulei int, care are izotopi radioactivi ncorporai.
Eliberarea n supernatant a izotopului se detecteaz cu ajutorul
unor contoare speciale. Testele au aplicabilitate n determinarea
i tipizarea antigenelor HLA, n imunitatea antitumoral i
antiviral.
Flow-citometria
Reprezint o metod modern de diagnostic, care realizeaz
identificarea i sortarea celulelor aflate ntr-un flux lichid, pe
baza unui parametru fizic sau chimic care le caracterizeaz.
Flow-citometrele utilizeaz diverse tipuri de lasere, numrtoare
electronice de celule i programe computerizate de sortare
celular (500 - 7000 celule/secund, cu puritatea sortrii de
97%). Pentru detectarea antigenelor de suprafa celular se
utilizeaz anticorpi monoclonali specifici, fluorocromi (IF),
fluorocitokine. Fluorokinele sunt interleukine cuplate cu o
substan fluorescent, pentru detectarea unor subpopulaii
celulare cu rspuns imun diferit la variai mesageri chimici
imunologici (IL1, IL2, IL6, LiF etc). Se deschid noi perspective
de cercetare i diagnostic n imunologie, prin avantajele oferite
de flow-citometrie, metod care poate preciza:
Coninutul celular n acizi nucleici
Numrul reticulocitelor
Proporia: limfocite, monocite, granulocite n sngele
periferic (in-clusiv transpunere grafic)
Raportul dintre limfocitele TCD4 i TCD8
Histocompatibilitatea, n vederea realizrii unui transplant
(prin determinarea unor antigene HLA)
Rezistena celulelor tumorale la terapia citostatic
Nivelul proliferrilor celulare (prin detectarea markerului
CD69 prin testul Fastimmune)
Nivelul citotoxicitii anumitor celule
Eficiena fagocitozei (Phago-test)
Producia radicalilor liberi n fagocitoz
Starea metabolismului oricrei celule (influx de Ca2+, K+,
pH intern)
Noiuni de citogenetic
 Prezena unor autoanticorpi fixai pe suprafaa sau n
interiorul unor celule (anticorpi antimuchi neted, AC
antinucleari)
Existena unor molecule de suprafa celular pentru care
nc nu exist anticorpi monoclonali specifici, prin utilizarea
fluorokinelor
Diverse antigene de suprafa celular (CD4, CD8, CD19,
CD20, CD69 etc., antigene HLA, receptori diveri), realizndu-
se ,,imunofenotipizarea celular, cu ajutorul anticorpilor
monoclonali specifici marcai fluorescent. Imunofenotipizarea
celular este cea mai utilizat metod flow-citometric. Firma
Becton - Dickinson a lansat o gam larg de
kit-uri de diagnostic:

Kitul Simul Set IMK Plus, Kitul LeuKaemia

Immunophenotyping - depisteaz hemopatii maligne ,,border-
line. Kitul Tri-Test permite determinarea numrului absolut de
celule CD4, CD8, CD19; kitul Fastimmune evideniaz
proliferarea celular (CD69). Aparatele cele mai moderne
produse de ctre firma respectiv sunt: FACS Vantage i FACS
Calibur care pot realiza o gam larg de operaiuni. Cele mai
recente flow-citometre sunt uor manevrabile (,,user friendly),
precum FACScan sau EPICS, dar n aceste situaii aplicaiile
diagnostice sunt foarte specifice.
 Fig. nr. 42 - Imagini flow-citometrice ale unor subpopulaii
celulare din sngele periferic, cu AC monoclonali ai trusei Simul
Set (Virgil Punescu i colab)

CAPITOLUL 48
MEDIATORI BIOCHIMICI AI RSPUNSULUI IMUN

Citokinele reprezint semnalele absolut necesare (transmise

de ctre celulele imunologice), pentru a regla interaciunile
cooperante cu rol n declanarea unui rspuns imun eficient.
Interleukinele sau citokinele au fost denumite iniial
limfokine (substane secretate de ctre limfocite) sau monokine
(substane secretate de ctre monocite, macrofage).
Interleukinele (IL) sunt substane de natur proteic ce
transmit celulelor imuno-competente semnalele necesare pentru
activarea, proliferarea i diferenierea lor. Interleukinele sunt
considerate a fi imunohormoni care amplific mecanismele
aprrii imunologice.
Identificarea interleukineleor este foarte dificil, din cauza
prezenei lor n organism n doze extrem de sczute (10-10 - 10-
12 M). Semnalul reprezentat de ctre interleukin este prelucrat
numai de ctre celule care exprim receptori specifici pentru
legarea lor; aceste celule imunologice trebuie s fie activate n
prealabil. Pentru purificarea i izolarea interleukinelor s-au
utilizat tehnici ADN recombinant.

Caracterele generale ale interleukinelor sunt urmtoarele:

greutate molecular foarte mic (sub 80 k )
moleculele IL sunt glicozilate
acioneaz autocrin sau paracrin
interacioneaz cu receptori celulari specifici
majoritatea IL regleaz proliferarea i diferenierea
limfocitelor B
nu sunt numeroase (13 specii moleculare diferite, dintre
care bine cunoscute sunt 8)
intervin n cooperrile celulare din rspunsul imun i n
procese de tip inflamator
concentraiile lor sunt minuscule (10-12 M)
Principala clasificare a activitilor atribuite interleukinelor
IL cu rol reglator a activitii celulare imunologice; ex.:
IL2, IL3
interferonii i
factorul inhibitor al migrrii macrofagelor (MIF)
factorul inhibitor al migrrii leucocitelor (LIF)
factorul chemiotactic (CF)
factorul activator al macrofagelor (MAF)
Reglarea activitii altor esuturi:
factorul stimulator al coloniilor de granulocite-macrofage
(CSF-GM)
factorul activator al osteoclastelor (OAF)
Distrugerea celulelor int:
limfotoxinele (perforin i granzim, elaborate de ctre
limfocitele T citoxice)

PRINCIPALELE CITOKINE
Interleukina 1 (IL1)

produs de ctre monocite i macrofage (monokin)

prima sa denumire a fost factorul de activare al
limfocitelor (LAF) n 1972
urmtoarea denumire (1974) a fost factorul de activare al
limfocitelor B (BAF); a fost evideniat datorit capacitii
sale de a stimula producia de anticorpi n absena limfocitelor T
substana conine 270 aminoacizi, greutatea ei
molecular este de 31000
prezint dou forme moleculare ( i )
producia sa poate fi stimulat prin aciunea limfocitelor T
helper activate sau a mitogenilor nespecifici. Dup Dinarello
(1984), IL1 se elibereaz n cantiti mari din macrofage activate
(ca urmare a infeciei) i o parte a IL1 ar exista ca parte
integrant a membranei macrofagului (probabil aceast etap
reprezint etapa eliberrii ini-iale din celul)
rolurile sale imunologice sunt extrem de diverse
IL1 determin proliferarea i diferenierea limfocitelor B,
stimulnd anticorpogeneza fie direct, fie prin intermediul
limfocitelor T helper
 induce apariia receptorilor pentru IL2 i crete sinteza de
IL2 i de factori stimulatori ai coloniilor (poteneaz
hematopoeza)
prin creterea sintezei de IL2 acioneaz indirect asupra
funciilor limfocitelor T citotoxice i a celulelor ucigae naturale
(NK)
IL1 este principalul pirogen endogen (sindrom febril
declanat). Hipertermia are efect antiinfecios.
IL1 determin multiplicarea fibroblastelor i a celulelor
endoteliale
IL1 induce migrarea polimorfonuclearelor neutrofile din
mduv, mobilizarea lor chemotactic, eliberarea lizozimului.
IL1 regleaz rspunsul antiinflamator sistemic prin
producerea proteinelor de faz acut
IL1 stimuleaz producia de colagenaze i protoglandine
(PGF2 crescut explic proteoliza i casexia din infeciile
cronice)
IL1 provoac somnul de und lent
IL1 are rol protector mpotriva radiaiilor
IL1 deprim activitatea plasminogenului
IL1 scade presiunea venoas i pH-ul sanguin
 IL1 deprim sinteza lipoproteinelor i a acizilor grai liberi,
deprim sinteza albuminei
Nivelul IL1 crete n:
Septicemii
Glomerulonefrite
Ciroz hepatic
Sclerodermie sistemic
Diabet insulino-dependent etc.
Nivelul IL1 scade n:
Cancere
Malnutriie
Progresiv cu vrsta
Psoriazis i lupus eritematos sistemic

Interleukina 2 (IL2)

A fost denumit i :
TCGF (T cell growth factor) - factorul de cretere al
celulelor T
 TSF (Thymocyte stimulating factor) - factorul stimulator al
timocitelor
IL2 este produs de ctre limfocitele T activate i a putut fi
obinut experimental din supernatantele unor culturi de
limfocite stimulate cu mitogeni (fitohemaglutinin).
IL2 este de natur glicoproteic, cu GM aprox. 17000 ,
alctuit din 133 de aminoacizi. Precursorul IL2 are 153 de
aminoacizi din care, n urma proteolizei unei secvene de 20
aminoacizi, rezult molecula matur. Timpul de njumtire a
IL2 plasmatice este de aprox. 2-3. Activitatea de sintez a IL2
ncepe la 4 ore de la stimularea antigenic i atinge un maxim
dup 3-5 zile.
Producia IL2 este stimulat de IL1, INF, PHA.
Exist similitudini structurale ntre IL2 i INF. Ambele
molecule sunt formate din sase helixuri i nu conin catene;
helixurile 2, 3, 4, 6 ale IL2 sunt organizate ntr-un buchet,
aceast dispoziie fiind extrem de important pentru legarea
receptorului.
Capacitatea limfocitelor de a rspunde la IL2 este
condiionat de prezena receptorilor pentru IL2, care se gsesc
pe suprafaa celulelor B i T, monocitelor i pe suprafaa
precursorilor mieloizi.
Limfocitele n repaus posed un numr sczut de receptori
pentru IL2 dar n urma stimulrii antigenice, dup aprox. 48 de
ore, 50% dintre celulele respective vor poseda aceti receptori
(aprox. 10000 receptori/celul). Cantitatea receptorilor pentru
IL2 va regla intensitatea rspunsului imun, controlnd de fapt
viteza de diviziune a limfocitelor.
Roluri imunologice
Interleukina 2 stimuleaz proliferarea i diferenierea
limfocitelor T, a unor celule B normale sau leucemice i a
celulelor NK. IL2 stimuleaz diferenierea limfocitelor T helper
1 (Th1) de tip inflamator i T helper 2 (Th2) de tip ajuttor
stimulator, poteneaz aciunea limfocitelor T citotoxice i
producia de anticorpi. La nivel intracelular, IL2 activeaz
sinteza receptorilor pentru transferin i n cazul monocitelor
stimuleaz producia de INF i TNF. Pornind de la acest aspect
s-a ncercat terapia antitumoral cu IL2, dar rezultatele obinute
au fost umbrite de efecte adverse precum insuficiena
respiratorie, tulburri psihice sau gastrointestinale.
Deficitul de IL2 se poate ntlni in AIDS, boala Hoodgkin,
lupus eritematos sistemic; administrarea de IL2 exogen (cu
riscurile
sus-menionate) ar putea ameliora aceste afeciuni.

Interleukina 3
 IL3 prezint o activitate multifuncional, cu rol stimulativ
asupra liniilor celulare hematopoetice majore (hemopoetin
panspecific-PSH). A mai fost denumit i :
multicolony stimulating factor
Histamine-producing cell stimulating factor
PSH-hemopoetin panspecific
IL3 este o glicoprotein cu greutate molecular de aprox.
30 k , cu 134 de aminoacizi, fiind produs de ctre limfocitele
T activate. Reziduurile Pro i Leu din secvena moleculei au un
rol critic n modularea funciilor biologice ale acestei limfocite.
Aciunea IL3 asupra celulelor int este condiionat de
legarea pe receptorul specific (aprox. 1000 de receptori/celul).
Receptorul pentru IL3 are un domeniu extracelular cu 417
resturi de aminoacizi legai printr-un domeniu transmembranar.
Legarea IL3 de receptorul specific determin un efect local
(n situsul n care s-a produs activarea) dup stimuli imunologici
puternici (infestri parazitare sau rejet de gref).
Cele mai multe experimente arat c IL3 nu acioneaz
asupra limfocitelor T i nici n producerea normal (echilibrat)
de celule hematopoetice.
IL3 intervine direct asupra creterii precursorilor multipli
hematopoetici ai granulocitelor, bazofilelor, enzinofilelor,
macrofagelor sau mastocitelor. Excepie fac celulele din seria
eritroid i megacariocitar asupra crora IL3 acioneaz n
prezena eritropoetinei i trombopoetinei. Stimularea
hematopoezei de ctre IL3 este amplificat sub aciunea IL1,
IL6, GM-CSF, etc.
IL3 poate potena rspunsul inflamator indus de ctre
endotox-inele bacililor gram negativi. Dereglarea activitii IL3
n ceea ce privete hematopoeza este unul dintre principalele
mecanisme generatoare de leucemii, cu proliferarea celular
anarhic.
Unii cercettori indic utilizarea IL3 sintetic n terapie,
pentru proliferare celular specific dup grefele de mduv.

Interleukina 4

A fost denumit i:
Factorul inductor al IgG1-Lindquist (1984)
Factorul stimulator nr.1 al celulelor B (Norma, 1984)
IL4 poate fi sintetizat de ctre limfocite T, celule de tip
hibridom sau limfom.
IL4 are o greutate molecular de 20 k ; este sensibil la
degradarea proteolitic i este inactivat la pH 10.
Activarea IL4 este complex:
 IL4 stimuleaz sinteza ADN (prin activarea limfoblatilor
T normali)
IL4 stimuleaz biosinteza anticorpilor din subclasa IgG1 i
supreseaz rspunsul n IgG3 i IgG2b.
Acioneaz sinergic n asociere cu PHA
(fitohemaglutinina), cu proprieti similare IL1.
IL4 reprezint un factor de cretere pentru mastocite.
IL4 regleaz producerea de citokine de ctre celulele T, B,
NK, macrofage i fibroblaste. Prin acest rol imunomodulator
acioneaz ca agent antitumoral i antiinflamator.
IL4 inhib sinteza TNF; la rndul ei, IL4 este inhibat de
ctre INF .
Receptorii pentru IL4 (aprox. 100-1000 receptori pe o
celul T sau B n repaus sau n activitate), au o structur de tip
monomer imunoglobulinic, cu GM de 130 k .

Interleukina 5

A fost denumit iniial factorul nlocuitor al celulelor T.

Denumirea de IL5 a fost propus de Kinashi, Azuma n 1986.
 IL5 este o glicoprotein cu GM cuprins ntre 32 i 60 k .
Receptorul pentru IL5 (GM aprox 48 k ) este exprimat n
exclusivitate pe limfocitele B activate i pe eozinofile.
IL5 acioneaz n principal ca factor de difereniere al
eozinofilelor (efect antiparazitar).
IL5 acioneaz sinergic cu IL1 pentru inducerea sintezei de
IgM i cu IL4 pentru sinteza IgG1.
IL5 poteneaz exprimarea receptorilor pentru IL2 la
nivelul limfoci-telor T, stimulnd cooperrile celulare necesare
rspunsului imun.
IL5 stimuleaz funcia citotoxic anticorpodependent.

Interleukina 6

Cu denumiri anterioare:
Factorul 2 stimulator al celulelor B (BSF-2)
Interferon 2 sau factorul stimulator al hepatocitelor
Este o glicoprotein cu greutate molecular de 21 k , cu
184 de aa.
Este produs de ctre monocite, macrofage, limfocite B i
T activate, mastocite, fibroblaste, astrocite, celule endotoliale,
epiteliale i neoplazice.
 Acioneaz asupra unui numr mare de esuturi i celule, i
anume n:
inducerea diferenierii i activrii limfocitelor B
inducerea proteinelor de faz acut n inflamaii
proliferarea i diferenierea lf T, cu exprimarea receptorilor
pentru IL2
activarea maturrii megacariocitelor
promovarea fagocitozei
proliferarea celulelor mielomatoase, a keratinocitelor
Receptorul pentru IL6 se ntlnete pe suprafaa
limfocitelor T n repaus, a limfocitelor B fr receptor
imunoglobulinic IgG membranar, pe suprafaa celulelor
mielomatoase. Receptorul pentru IL6 este de tip
imunoglobulinic cu GM de 80 k .
Nivelul seric al IL6 crete n boli autoimune, ciroz
hepatic, glomerulonefrite, psoriazis sau neoplazii. Sinteza IL6
poate fi inhibat de IL4, IL10 i TGF .

Interleukina 7

Denumit iniial limfopoetina 1, din cauza aciunii ca

factor de cretere a limfocitelor B i T.
 IL7 este o glicoprotein cu GM de 14.9 k cu 154 de
aminoacizi.
IL7 intervine n proliferarea limfocitelor B imature, pn
cnd lim-focitul B exprim pe suprafaa sa IgM monomer i
intervine n proliferarea limfocitelor T imature (CD4-, CD8-,
CD3+), pn cnd celula T devine imunocompetent i
faciliteaz exprimarea re-ceptorilor pentru IL2.
IL7 activeaz sinteza IL1, IL8 i TNF.

Interleukina 8

Este secretat de ctre limfocitele T sau monocitele

activate, de ctre fibroblaste sau celulele endoteliale.
Este proteina activatoare a neutrofilelor.
IL8 stimuleaz chemotactismul pentru PMN i poteneaz
funciile fagocitare ale acestora.
IL8 crete permeabilitatea vascular i protejeaz celulele
endoteliale mpotriva efectului distructiv al PMN (IL8
poteneaz fenomenele inflamatorii, n general)

Interleukina 9
 Glicoproteina cu GM 30-40 k ( cu 144 de aminoacizi)
este sintetizat de ctre limfocitele T i monocite.
IL9 este un factor ce stimuleaz creterea i proliferarea
limfocitelor T, a mastocitelor, a megacariocitelor i a
precursorilor eritrocitari.

Interleukina 10

Glicoproteina cu GM de 30-40 k , este sintetizat de ctre

limfocitele Th2 (nu ns i de limfocitele Th1), sub influena
stimulilor antigenici i mitogenici.
IL10 stimuleaz timocitele
IL10 induce exprimarea antigenelor CMH clasa a II-a pe
suprafaa membranar a limfocitelor B.
IL10 inhib producia de IL1, IL6, IL8 i TNF.

Interleukina 11

Molecula are o GM de 22 k i aproximativ 199 resturi de

aminoacizi. Este sintetizat de ctre celulele stromale i are
activiti variate, asemntoare cu cele ale IL6.
 IL11 determin sinteza proteinelor de faz acut n
inflamaii
IL11 stimuleaz producerea de imunoglobuline la nivelul
plasmocitoa-melor (aciune sinergic cu IL3)
IL11 acioneaz asupra precursorilor hematopoetici

Interleukina 12

Cu denumiri anterioare :
Factor de cretere al celulelor stem
Factor de cretere al mastocitelor
Factor de stimulare al celulelor NK
IL12 este un dimer cu GM de 20 k i 248 de aminoacizi.
Este produs de ctre fibroblaste, celule stromale, celule ale
carcinoamelor hepatocelulare.
IL12 induce sinteza INF de ctre celulele NK.
IL12 reprezint un factor de cretere al mastocitelor,
precursorilor hematopoetici i al celulelor ucigae naturale.
Sinteza IL12 este stimulat de ctre INF i blocat de IL4
i IL10.
Interleukina 13
Citokina este produs la om prin limfocitele Th i
limfocitele CD8+. Molecula conine 132 de aminoacizi. IL13
acioneaz asupra limfocitelor B, macrofagelor, celulelor NK i
asupra unor celule canceroase. Pentru limfocitele B rspunsul
este proproliferativ, n timp ce limfocitele T nu sunt afectate.
IL13 stimuleaz preferenial sinteza de IgE, cu intervenie
n procesele alergice
IL13 posed aciuni antiinflamatorii, inhibnd sinteza unor
citokine proinflamatorii precum IL1, IL6, IL8, TNF .
IL13 scade fagocitoza i citotoxicitatea dependent de
anticorpi
IL13 ar avea efect anti-HIV, inhibnd replicarea HIV n
monocite, prin inhibarea reverstranscriptazei virale i scderea
concentraiei antigenului p24 viral.
IL13 prezint similitudini structurale cu IL4 i aciuni
parial asemntoare.
Interleukina 14

Identificat n 1991, are o greutate molecular mare (468 de

aminoacizi). Este produs de ctre limfocitele T i stimuleaz
celulele B .
Interleukina 15

Descoperit n 1994, este produs de ctre placent i

celule musculare striate. Greutatea molecular 15 k (cu
aproximativ 162 de aminoacizi). Rolul su imunologic este nc
necunoscut, dar ar putea suplini funcia IL2.

INTERFERONII

Sunt substane de natur glicoproteic, produse sub

influena unor stimuli inductori variai, cu efect antiviral,
antitumoral i imunomodulator.
S-au descoperit urmtoarele categorii antigenice de
interferoni umani, clasificate dup principala celul
productoare :
INF - LEUCOCITAR
- 14 subtipuri diferite din punct de vedere biochimic
- codificat de ctre 14 gene diferite (cromozomul 9)
- rezistent la pH acid (i la temperatura de 56 C)
INF - FIBROBLASTIC (produs de ctre fibroblaste)
- dou subtipuri diferite din punct de vedere biochimic
- codificat de ctre 2 gene diferite (cromozomul 9)
- rezistent la pH acid (i la temperatura de 56 C)
INF - LIMFOCITAR, sau IMUN, produs de limfocitele T
sensibilizate
- un singur tip biochimic, codificat de o singur gen
(cromozomul 12)
- cu cel mai important efect n viroze i neoplazii
- rezistent la pH acid (i la temperatura de 56 C)
INF - produs de ctre celule mononucleare umane stimulate
cu fitohemaglutinin, asemntor cu INF (n studiu).

Principalele proprieti ale interferonilor

Au aciune antiviral, antitumoral, imunoreglatoare.
Au specificitate de specie un tip de INF produs de ctre
celulele unei specii, acioneaz numai asupra speciei respective.
De aceea, tipul de interferon luat n studiu trebuie menionat,
utiliznd un acronim pentru specia productoare : Hu-INF
(human interferon - interferon uman), Mu-INF (murin
interferon - interferon al oarecelui), etc.
Au greuti moleculare cuprinse ntre 17 k (INF ) i 20
k (INF ,INF )
 Nu au specificitate de virus (un interferon indus de ctre un
anumit virus are aciune asupra oricrui alt virus, n cadrul
speciei respective)
Sunt glicoproteine cu inductori foarte variai ai sintezei,
cum ar fi:
ARN dublu catenar natural sau sintetic (poliriboinozinat
poliribocitidilat ) reprezint cel mai bun inductor de interferon.
n mod normal, n timpul replicrii virusurilor cu genom ARN
apare ARN dublu catenar. Este activ n doze mici ( g/ml).
Extracte microbiene ale microorganismelor cu parazitism
intracelular: Ricketsia, Bordetella, Brucella, Listeria, sau
endotoxinele bacteriilor gram negative reprezint inductori
slabi de INF, la doze de ordinul mg.
Aciunea interferonilor este rapid i puternic .
Sistemul INF este cel mai precoce sistem de aprare
antiviral al gazdei: apare la cteva ore dup stimularea
antigenic, efectul este maxim la 24-48 ore de la infectare i
persist de la dou la ase sptmni. Aciunea este puternic,
aproximativ 1-10 molecule de INF protejeaz antiviral o celul
infectat, dup urmtoarea schem:
INF fibroblastic acioneaz iniial la poarta de intrare a
virusului, realiznd alterri ale receptorilor celulari. Dac totui,
virusul depete poarta de intrare, se secret INF leucocitar.
INF sensibilizeaz limfocitele T. Aceste celule activate
produc INF imun, care poteneaz toate mecanismele de
aprare ale gazdei, n special mecanismele citotoxice, prin
celulele killer, celule natural-killer, limfocite Tc, macrofage.
Aprarea imunologic antitumoral se explic prin potenarea
efectelor citotoxice.
Efectul principal antiviral al INF se manifest n etapele de
decapsidare viral, replicare sau transcriere a genomului.
Interferonii nu pot aciona asupra adsorbiei virale sau a
viropexiei; efectul protector este maxim asupra celulelor
adiacente i diminuat proporional fa de celulele ndeprtate.
Mecanismele moleculare antivirale ale aciunii
interferonilor au fost studiate n vitro. Toi interferonii induc
sinteza enzimelor: oligonucleotid polimeraz, activ n prezena
ARN dublu catenar i a ATP i proteinkinaza, cu rol inhibitor n
sinteza proteinelor virionale.
Alte activiti ale INF n imunitate :
creterea numrului de macrofage i intensificarea
fagocitozei, prin exprimarea receptorilor pentru Fc a IgG.
intensificarea activitii microbicide i tumoricide prin
existenta factorului MAF (factorul de stimulare al
macrofagelor).
creterea numrului de molecule CMH de clasa a II-a pe
macrofag i pe celulele imunocompetente.
 INF amplific activitatea celulelor NK, concomitent cu
inhibarea exprimrii genelor oncogene onc n aprarea
antitumoral.
INF amplific mecanismele inflamatorii.
INF stimuleaz maturarea limfocitelor spre plasmocite.
INF inhib sinteza prostaglandinelor produse de IL1 i
proliferarea keratinocitelor.
Concluzionnd, interferonii posed efect antiviral,
antitumoral, proliferativ asupra limfocitelor B i macrofagelor.

FACTORII NECROZANI TUMORALI

Sunt citokine cu aciune antitumoral, cu dou subpopulaii

moleculare diferite :
TNF (casectina) 1985 este secretat de ctre
monocite, macro-fage, limfocite, celule NK, celule endoteliale.
Casexia este rezultatul aciunii TNF , care inhib
lipoproteinlipaza prezent n adipocite
prezint trei subuniti helix, cu greuti moleculare de
17 k , cu 157 de resturi de aminoacizi
 gena codificant este situat pe cromozomul 6, n cadrul
CMH
TNF (limfotoxina) este sintetizat doar de ctre
limfocite, stimulate de INF sau lipopolizaharidele bacteriene
are o structur asemntoare TNF , trimer cu greutate
molecular de 25 k , cu 171 resturi de aminoacizi
gena codificant este situat pe cromozomul 6.
Receptorii pentru TNF sunt de dou tipuri, cu distribuie
celular variat: TNF-R (75 k ) i TNF-R (55 k ), care pot
fixa fiecare att TNF , ct i TNF . Se pare c exist i
receptori solubili pentru TNF (STNF-R), identificai n urina i
serul tuturor indivizilor, n concentraii specifice persoanei
respective. Receptorii solubili pentru TNF rezult prin clivarea
proteolitic a TNF-R sau i pstreaz n continuare
capacitatea de legare a TNF. Receptorii solubili pentru TNF ar
putea avea rolul de a bloca aciunea TNF la concentraii prea
mari. Prezena unor concentraii mari de TNF solubil n preajma
celulelor tumorale, ar putea explica rezistena formaiunii la
TNF-ul administrat exogen. TNF-ul solubil ar putea explica i
efecte paraneoplazice precum anorexia i casexia.
Factorii inductori ai sintezei TNF sunt:
- componente bacteriene
- lectine (fitohemaglutinina, concavalina A, etc.)
- citokine (IL1, IL2, INF , GM-CSF, )
- zimozanul, etc.
Factorii inhibitori ai sintezei TNF sunt multipli :
- glucocorticoizi
- prostaglandinele
- IL4, IL6, IL10
- alfaglobulinele
- histamina, serotonina

Aciunile TNF
Aciune citotoxic tumoral, prin distrugerea vaselor
tumorale i declanarea coagulrii locale (tumorile mari sunt mai
sensibile la aciunea TNF). Activitatea antitumoral a TNF nu
are specificitate de specie. Un alt posibil mecanism de aciune ar
putea fi activarea enzimelor lizozomale ale celulelor cu potenial
citotoxic i chiar fragmentarea ADN-ului celulei int, prin
activarea endonucleazelor endogene.
Rol antiviral tip INF.
Moduleaz producia de citokine (IL1, IL2, IL6, IL8) i de
factori chemotactici i stimuleaz producia proteinelor de faz
acut.
 Activeaz funciile citotoxice (moduleaz eliberarea
radicalilor activi ai oxigenului).
Stimuleaz exprimarea antigenelor HLA clasa I .
Crete aderarea mononuclearelor pe suprafaa endoteliului
vascular.
Inhib angiogeneza.
Produce casexie, hipotensiune arterial, modificri de ritm
cardiac.
TNF produce fenomene de necroz vascular n ocul
septic.
IL1, INF i TNF reprezint ageni ai ocului endotoxic
(rspuns imun n exces, din cauza concentraiei mari de LPZ
bacteriene).
Utilizarea TNF n terapie este nsoit de efecte adverse
(mielosupresie, febr, casexie). Administrarea TNF n asociere
cu INF i IL2 sau asocierea TNF cu anticorpi monoclonali dau
efecte pozitive minime.

ALI MEDIATORI

Factorul de transformare al creterii (TGF)

 Citokin existent n trombocite, rinichi i mduva osoas,
produsa sub aciunea celulelor transformate tumoral sau viral
Exist dou peptide TGF diferite, TGF i TGF , cu
greutate molecular de 25 k , cu structur dimeric (TGF 1,
2 i TGF 1, 2).
TGF este implicat n embriogenez, aprare antiinfecioas
i antitumoral.
TGF acioneaz ca stimulator al proliferrii fibroblastelor i
a celulelor endoteliale (stimuleaz procesele de refacere ale
esutului conjunctiv)
Acioneaz i ca imunosupresor scade capacitatea de
sintez a IgM i IgG, capacitatea citotoxic a celulelor NK i n
mod paradoxal, crete sinteza de IgAs la nivelul mucoaselor.
Aplicaiile terapeutice ale TGF 1 se refer la
administrarea substanei respective nainte de interveniile
chirurgicale, cu rol n cicatrizarea plgilor.
Factorul de stimularea al coloniilor de granulocite-macrofage
(GM-CSF)
Exist o glicoprotein de 22 k , cu 127 de aminoacizi, care
stimuleaz proliferarea i diferenierea precursorilor
hematopoetici i poteneaz funcia macrofagelor i a
granulocitelor.
 Citokina are funcie tumoricid i favorizeaz exprimarea
antigenelor HL-A clasa I pe suprafaa celulelor.
Factorul de stimulare al coloniilor granulocitare (G-CSF)
Foarte asemntor structural cu IL6, cu dou forme
moleculare
G-CSF i G-CSF . Este produs de ctre monocite, macrofage,
celule endoteliale i fibroblaste stimulate imunologic.
Principala aciune se refer la diferenierea granulocitelor
PMN i acioneaz asupra celulelor multipotente.
Factorul de stimulare al coloniilor de macrofage
(M-CSF)
Este sintetizat de ctre monocite, fibroblaste, celule
endoteliale. Glicoproteina are o greutate molecular de 45-90
k i induce formarea de colonii de precursori ai macrofagelor
i mbuntete mecanismele oxidative la nivelul macrofagelor
adulte.
Factorul de activare al trombocitelor (PAF)
PAF este produs de ctre granulocite, cu funcii stimulatorii
pentru trombocite; stimuleaz agregarea trombocitelor la locul
inflamaiei, induce bronhoconstricia i activeaz sinteza IL1.

CAPITOLUL 49
MODULAREA RSPUNSULUI IMUN PRIN COOPERRI
CELULARE

Reaciile imune declanate de ctre un anumit antigen

implic proliferarea clonelor de limfocite cu funciile lor
specifice, pentru realizarea rspunsului imun mediat celular sau
mediat umoral.
Activarea celulelor imunologice se realizeaz prin mai
multe categorii de stimuli :
mesageri primari reprezentai de ctre antigenele care se
fixeaz pe receptorii celulari specifici
mesageri secundari sunt produi biochimici rezultai prin
activarea unor complexe enzimatice
mesageri teriari sunt factori implicai n sinteza de
citokine

Pentru declanarea rspunsului complex limfocitar este

obligatorie etapa de recunoatere a antigenului strin, dup
captarea, prelucrarea i prezentarea lui fracionat (epitopi)
altor celule imunologice. Recunoaterea i prelucrarea
antigenului este realizat prin intermediul celulelor
prezentatoare de antigen, care pot s dein sau nu funcii
fagocitare. Principalele celule cu funcii fagocitare sunt
monocitele sanguine i macrofagele tisulare, eventual astrocitele
cerebrale. Celule prezentatoare de antigen nefagocitare sunt
celulele Langerhans din piele, celulele dendritice i limfocitele
B (din esuturile limfoide).

CELULE PREZENTATOARE DE ANTIGEN

Macrofagele
Aceste celule realizeaz fagocitoza (pentru antigenele
corpus-culare) i pinocitoza (pentru antigenele solubile).
Substanele endocitate sunt degradate pn la nivel peptidic,
apoi asociate cu antigenele CMH clasa a
II-a i ulterior prezentate limfocitelor. Epitopii obinui sunt
peptide cu
10-15 resturi de aminoacizi. Legarea peptidelor la moleculele
CMH n vederea complexului de prezentare se realizeaz la
nivelul situsului molecular de legare (10-25), care se
individualizeaz la nivelul domeniilor globulare 1, 2 pentru
moleculele HLA clasa I i la nivelul domeniilor 1 i 1 ale
moleculelor HLA clasa a II-a.
 Recunoaterea imunologic asociat de numete restricie
CMH. Antigenele endogene (spre exemplu o celul proprie
organismului infectat viral) se asociaz la celulele HLA clasa
I, stimulnd limfocite TCD8 (citotoxice). Moleculele HLA clasa
I au un situs de legare pentru antigen care este n permanen
ocupat de ctre peptidele proprii, la concuren cu ocuparea
acestor situsuri de ctre peptidele exogene. Antigenele exogene
sunt endocitate i degradate i interacioneaz cu antigenele
HLA clasa a II-a, complexul fiind prezentat limfocitelor TCD4
(helper). Dup recunoaterea antigenului de ctre celula T,
limfocitul primete semnale imunologice activatoare.

Limfocitele B
Aceste celule prezint receptori specifici pentru antigen, de
natur imunoglobulinic (IgMm i IgD) i pot prezenta epitopi
semnificativi din punct de vedere imunologic limfocitelor T
(se pot constitui n celule CPA, prezentatoare de antigen). Nu
exist date suficiente dac limfocitele B prelucreaz antigenele
precum macrofagele. Prezentarea antigenului se face tot sub
restricie CMH.

Celulele dendritice
Aceste celule prezint antigenele, att sub restricia CMH,
ct i n absena acesteia (celulele dendritice foliculare nu
utilizeaz restricia CMH, n timp ce celulele dendritice din
medulara timusului utilizeaz aceast restricie).
Informaiile despre antigen ar fi furnizate de ctre celulele
dendritice foliculare, care ar putea reine complexele antigen-
anticorp i le-ar prezenta limfocitelor B cu memorie. Celulele
dendritice limfonodulare coopereaz att cu limfocitele, ct i cu
macrofagele.

TEORIA RECUNOATERII ASOCIATE

Cooperrile celulare necesare elaborrii rspunsului imun

sunt supuse urmtoarelor principii :
Limfocitele TCD8+ recunosc epitopii, n asociere cu
produii genelor CMH clasa I-a, prezeni pe suprafaa tuturor
celulelor nucleate din organism.
Limfocitele TCD4+ interacioneaz cu antigenele strine,
n prezena moleculelor HLA clasa a II-a, aflate pe suprafaa
celulelor imunocompetente (limfocite B, limfocite T,
macrofage.).
Limfocitele T posed receptorii TCR cu specificitate dubl,
att pentru antigen, ct i pentru molecula CMH
corespunztoare interaciunii respective, respectndu-se regulile
sus-menionate.
Mecanismele cooperrilor celulare sunt prezentate simplu
(n scop didactic) i anume modele de cooperare a dou celule
imunologice i respectiv a trei celule imunologice. Bineneles
c in vivo, mecanismele cooperrilor celulare sunt foarte
complexe.

MODELUL INTERACIUNII A DOU CELULE

IMUNOLOGICE

Interaciunea celul prezentatoare de antigen limfocit T

Celula prezentatoare de antigen developeaz epitopii
semnificativi din punct de vedere imunologic i i expune pe
suprafaa sa, pentru a putea fi prezentai limfocitului TH.
(Macrofagele sunt princi-palele celule prezentatoare de antigen,
dup degradarea menajat a acestuia).
Macrofagul secret interleukina 1 i stimuleaz proliferarea
i activarea limfocitelor T CD4 (aceste limfocite activate secret
IL2 dar i factorul de activare al macrofagului MAF, care
augmenteaz procesele fagocitare). Interaciunile celulare se
bazeaz pe restricia CMH.
Cooperarea celular limfocit TCD4-limfocit B
Cooperarea celular limfocit TH limfocit B se realizeaz
sub restricia antigenelor HLA clasa a II-a. Limfocitul T helper
activat transmite semnale stimulatoare i proliferative
limfocitelor B prin citokine, n special prin IL2. Se produce
diferenierea limfocitelor B nspre plasmocit i secreia de
imunoglobuline.
Unele antigene (flagelina polimerizat, polizaharidele
bacteriene) stimuleaz limfocitele B, fr intervenia
limfocitelor T (acestea sunt antigenele timoindependente).
Aceste antigene prezint molecule cu greutate molecular mare,
cu uniti repetitive, greu degradabile in vitro i foarte
persistente n organism.
Antigenele timoindependente stimuleaz sinteza de IgM,
nu ns i sinteza de IgG. Mecanismul respectiv este greu de
explicat: efectul antigenelor timoindependente ar putea fi
mitogenic i s-ar putea exercita asupra anumitor populaii de
limfocite B.
Antigenele timoindependente reprezint marea majoritate a
antigenelor, rspunsul imun umoral fiind condiionat n acest caz
de cooperarea dintre limfocitele B i T.
Fig. nr. 42 - Cooperarea imunologic dintre celula CPA i
limfocitul Th (Klein)
 Fig. nr. 44 - Interaciunea limfocit Th - limfocit B (Zarnea,
1990)

Cooperarea celular limfocit T citotoxic celul int

Celulele Tcitotoxice (CD8+) se leag de celulele int prin
intermediul antigenului i a moleculelor HLA clasa I de pe
suprafaa celular. Efectul citotoxic al limfocitului TCD8+ se
realizeaz prin intermediul limfotoxinelor: perforina i
granzima, care realizeaz microcanalicule membranare n celula
de distrus. Celulele distruse pot fi celule self mbtrnite (cu
antigene HLA expuse unui proces de uzur), celule infectate
viral sau celule modificate tumoral.
Alte modele de cooperare celular dual ar putea fi :
cooperarea limfocit TH limfocit TC, limfocit TS i limfocit B,
limfocit TH limfocit TS. Raportul dintre numrul limfocitelor
TH i numrul limfocitelor TS trebuie s fie supraunitar pentru
un rspuns imun normal. Valoarea subunitar a raportului
limfocite TH / limfocite TS indic imunosupresia (spre exemplu,
n AIDS).
 Fig. nr. 45 - Citotoxicitatea prin intermediul limfocitului Tc
(Klein, 1991)

MODELUL INTERACIUNII A TREI CELULE

IMUNOLOGICE

Interaciunea MF limfocite TH limfocite TB

Modelul se bazeaz pe interaciunea dintre celula
prezentatoare de antigen (cel mai adesea macrofag) cu celule B
i T.
Procesul este complex: macrofagul fragmenteaz antigenul,
ex-pune epitopii semnificativi imunologic i secret IL1, cu rol
stimulator i proliferativ asupra limfocitului T helper. Limfocitul
TH activat secret IL2, cu rol n proliferarea i diferenierea
limfocitului B spre plasmocit secretor de imunoglobuline.
Interaciunea MF limfocit Tcitotoxic celul int
Este un alt model posibil de cooperare celular, care are la
baz teoria dublei recunoateri prin intermediul receptorului
pentru antigen al celulei T. Intervenia macrofagului faciliteaz
prezentarea antigenului. Macrofagul ar putea realiza chiar
fagocitoza resturilor celulare ale celulei int.
Modelele prezentate demonstreaz restricia CMH la
nivelul cooperrilor celulare. Unii cercettori, afirm faptul c
exist o categorie de celule TH nesupus restriciei CMH,
numite TH-Ig. Aceste limfocite TH pot stimula numai celule B
mature care exprim anumite izotipuri de imunoglobuline. De
asemenea, celulele ucigae naturale i exercit efectul citotoxic
n absena restriciei CMH.

n concluzie, parametrii implicai n procesul cooperrilor

imunologice declanate de prezena antigenului sunt :
diverse celule (variate celule prezentatoare de antigen,
limfocite B i T, celule int, etc.)
antigenele HLA clasa I i clasa a II-a de pe suprafaa
celular (restricia CMH)
diverse citokine
 Aceste procese foarte complexe sunt necesare pentru
elaborarea rspunsului imun adecvat i specific.

CAPITOLUL 50
MODULAREA RSPUNSULUI IMUN
PRIN ANTIGEN

Rspunsul imun este influenat cantitativ i calitativ prin

proprietile antigenului i prin proprietile de prezentare ale
acestuia - celulelor sistemului limfoid.
Potenialul reglator al antigenului depinde mai ales de doz,
de imunogenicitatea epitopilor i de accesibilitatea acestora.
Nerespectarea unor minime condiii n privina acestor parametri
va conduce la tol-eran imunitar.

MECANISMELE TOLERANEI IMUNOLOGICE

Tolerana imunitar funcie de proprietile fizico-chimice ale

antigenului
 Scderea greutii moleculare a unui antigen (sub 10.000
) fr modificarea specificitii acestuia, determin scderea
rspunsului imun.
Scderea numrului de epitopi de pe suprafaa antigenului
va de-termina creterea tolerogenitii.
Antigenele neprelucrate la nivelul celulelor prezentatoare
de antigen i cele neaccesibile celulelor sistemului imunitar vor
induce rapid tolerana imun.
Fraciunea solubil sau nemetabolizat a unui antigen
induce tolerana imun mai repede dect o fraciune particulat.
Agregatele moleculare (spre exemplu agregatele
imunoglobulinice) sunt bune imunogene. Dispersia acestor
agregate ar putea induce starea de toleran imunologic.

Tolerana imunitar funcie de modul de administrare al

antigenului
Asocierea unui antigen cu un adjuvant particulat i
poteneaz acestuia imunogenicitatea. Principiul se aplic n
fabricarea vaccinurilor. Adjuvantele clasice se prepar din
substane uleioase (spre exemplu adjuvantul Freud se prepar cu
lanolin, parafin i celule moarte de Mycobacterium
tuberculosis) sau substane minerale (fosfat de aluminiu,
hidroxid de aluminiu, alginat de calciu). Adjuvantele moderne
sunt lipozomi cationici sau lipidul A monofosforilat sau chiar
imunomodulatoare antitumorale, cum este UBENIMEX-ul
(folosit n compoziia vaccinurilor antiHIV moderne).
Administrarea unei doze unice de antigen este mai
tolerogen dect administrarea unor antigene asociate. Dac sunt
asociate minimum dou antigene diferite, capacitatea de rspuns
imun crete. Principiul este folosit n vaccinri, spre exemplu
bivaccinul DT (diftero-tetano) sau trivaccinul DTP (diftero-
tetano-pertusis).
Administrarea antigenului pe cale oral sau inocularea
intravenoas (fr adjuvani) poate genera toleran imunitar.
La administrarea intramuscular, subcutanat sau intradermic,
rspunsul imun apare mai tardiv, dar dureaz mai mult.
Administrarea intradermic a antigenului stimuleaz preferenial
imunitatea mediat celular. Administrarea antigenului n zone
diferite (sau pe ci diferite) ale corpului este mai eficient dect
administrarea unic.
n cazul inoculrilor succesive ale anumitor antigene se
poate instala competiia antigenic, n care primul antigen
blocheaz rspunsul imun pentru antigenul inoculat ulterior.
Acest gen de reglare are importan practic n aplicarea
anumitor scheme de vaccinare.
Inocularea pentru prima oar a antigenului determin
rspunsul imun primar. (Spre exemplu prima doz de vaccin
induce acest tip de rspuns, n timp ce imunizrile rapel induc
rspunsul imun secundar.)
RSPUNSUL IMUN N FUNCIE DE
DOZA DE ANTIGEN

Fig. nr. 46 - Influena dozei de antigen asupra rspunsului

imun (Ivanof i colab., 1982)

Exist o relaie strns ntre doza de antigen i rspunsul

imun. Astfel, exist o toleran imunitar real ; nu se instaleaz
rspunsul imun la doze de ordinul picogramelor (10-12g),
urmat de posibilitatea instalrii unei tolerane imunitare de doz
joas, la cantiti de antigen de ordinul nanogramelor (10-9g).
Pe msura creterii cantitii de antigen la doze de ordinul
microgramelor (10-6g), rspunsul imun crete progresiv, pn la
o doz optim de antigen de ordinul miligramelor (10-3g) pn
la ordinul gramelor. La doze mai mari de antigen dect doza
optim apare tolerana imunitar de doz nalt, prin
suprancrcare antigenic i epuizarea capacitii de rspuns
imun.
Fracionarea unei doze antigenice i inocularea repetat n
timp vor declana un rspuns imun mai amplu dect
administrarea ntregii cantiti n doz unic. Repetarea
stimulului antigenic duce la o amplificare a rspunsului imun,
dac repetarea se face la anumite intervale de timp - intervale
optime. Stabilindu-se pentru fiecare imunogen intervalele
optime dintre inoculri, Zdrodowski a fundamentat legea
intervalelor, utilizat n programele de imunizare (imunizare de
baz, imunizare rapel).

Tolerana imunitar n funcie de maturitatea imunolo-gic a

gazdei
Animalele de experien nou-nscute posed o stare de
toleran imunitar fiziologic, deoarece limfocitul B imatur
induce fenomenul de beretare mult mai greu. Tolerana
imunitar a limfocitului B se poate induce mai lent dect
tolerana imunitar pentru limfocitul T. La nou-nscut exist i
imaturitate a limfocitului TH. n concluzie, cu ct nivelul de
imunocompeten i maturitate imunologic este mai sczut, cu
att tolerana imunitar este mai uor indus. Bineneles c
persoanele cu deficit imunitar au risc crescut n instalarea
toleranei imunologice, comparativ cu persoanele normale.
Rolul influenelor genetice nu este foarte bine stabilit, dar
se ia n considerare influena genelor de rspuns imun
individualizat (Ir), gene care aparin complexului major de
histocompatibilitate clasa a II-a. Inducia toleranei imunitare s-
ar putea realiza indirect, prin stimularea aciunii limfocitelor T
supresoare.
Tolerana imunitar indus prin limfocitele Ts
n procesele imunosupresoare intervin trei tipuri de celule
TS:
Celule TS inductoare
Celule TS reglatoare sau transductoare
Celule TS efectoare
Supresia imun se realizeaz prin feed-back. Celula TS
efectoare inhib funcia limfocitelor TH i a limfocitelor TS
inductoare proprii circuitului respectiv.
Alt activitate a limfocitelor TS se realizeaz n cadrul
reelei idiotipice a sistemului imunitar. Teoria se bazeaz pe
ideea c structurile idiotipice de pe suprafaa celulelor T
reglatoare ar putea funciona ca elemente de ghidare ntr-un
circuit supresor. Idiotipul receptorului T va fi recunoscut de
ctre alt celul, care posed un antiidiotip, procesul
desfurndu-se n lan.
Celulele TS au rolul esenial n meninerea toleranei la self
i n controlul negativ al amplitudinii rspunsului imun.
Tolerana imunitar natural, activitatea sczut a limfocitelor
TS favorizeaz boli autoimune i boli alergice. Activitatea
excesiv a lf TS determin boli cu deficit imun.
Tolerana imunitar indus artificial
Cu scopul tratrii unor boli autoimune sau cu scopul
meninerii unei grefe sau a unui transplant, se apeleaz la factori
imunosupresori, cum ar fi drogurile citotoxice (Ciclofosfamida,
Ametopterina, Azatio-prina), serul antilimfocitar sau iradierea
limfoid total.

CAPITOLUL 51
DINAMICA RSPUNSULUI IMUN UMORAL

ndeprtarea antigenului (imunogenului) din organism se

real-izeaz prin celule imunologice (imunitate mediat celular)
i prin imu-noglobuline cu funcie de anticorpi (imunitate
mediat umoral). Nu se poate face o delimitare strict ntre IMC
i IU, deoarece nu exist sintez de anticorpi fr cooperare
celular ntre celulele imunologice i de asemenea, celulele
imunologice i pot desfura efectul citotoxic n prezena
anticorpilor (citotoxicitate anticorpo-dependent).
Numeroase observaii experimentale arat c exist unele
variaii n cinetica rspunsului imun, n special n cazul
imunitii umorale: rspuns imun primar i secundar.
Particularitile de rspuns imun apar n patru faze distincte:
 faza de laten a rspunsului imun
faza de cretere exponenial a concentraiei Ig-lor
faza de platou
faza de declin

Fig. nr. 47 - Dinamica rspunsului imun umoral

(Ivanof i colab., 1982)

RSPUNSUL IMUN PRIMAR

Faza de laten
Aceast etap are o durat variabil n funcie de mai muli
parametri: cale de inoculare, doza i natura antigenului,
sensibilitatea tehnicilor de detectare. Pentru antigene proteice
solubile, faza poate dura 5-7 zile, iar pentru bacterii aproximativ
14 zile. n acest rstimp, antigenul este fagocitat, prelucrat i
prezentat prin celulele prezentatoare de antigen - limfocitelor
TH i B. n acest rstimp se activeaz toate procesele de
cooperare celular, cu transformarea limfocitelor B n
plasmocite secretoare de anticorpi.
Faza de cretere exponenial a concentraiei Ig
Faza de sintez activ sau de cretere logaritmic dureaz
4-6 zile, n medie. n rspunsul imun primar, titrul IgM este
maxim. IgM polimer este foarte avid i foarte eficient.
Producia de IgG ar ncepe dup dou-trei zile, dar la valori mai
mici dect titrul IgM. Creterea evident a IgG, dup 5-6 zile ar
putea fi legat i de declinul uor al sintezei IgM, care dup
cteva sptmni dispar prin circulaie.
Faza de platou
Rspunsul imun primar, instalat dup un stimul antigenic
unic are o durat variabil (12-16 zile) i corespunde unei
concentraii constante i crescute de imunoglobuline.
Faza de declin
Se caracterizeaz printr-o scdere a titrului de Ig, iniial
lent i apoi rapid i constant. Apare n zilele 21-28, iar durata
fazei depinde de titrul maxim atins i de viteza de catabolism.
Procentul anticorpilor catabolizai zilnic este de 18% pentru IgM
, 7% pentru IgG i 25% pentru IgA. Cel mai lent scade titrul
IgG, titru care se menine timpul cel mai ndelungat.
Rspunsul imun primar fa de antigenele T independente
are ca particularitate predominana sintezei de IgM n toate
fazele.
RSPUNSUL IMUN SECUNDAR

Acest tip de rspuns este indus dup al doilea contact al

organismului cu acelai antigen i prezint anumite
particulariti:
poate fi iniiat cu o doz mai mic de antigen
perioada de laten este foarte scurt
Anticorpii apar mai rapid, ating concentraii mari n ser,
aparin clasei IgG (cu afinitate mare i aviditate sczut pentru
imunogenul declanator)
Sinteza IgG se menine timp ndelungat n rspunsul imun
secundar (faza de platou poate dura luni de zile).
Rspunsul imun secundar poate fi repetat de mai multe ori.
Cu fiecare repetare a stimulului, rspunsul imun apare mai rapid
i cu o intensitate mai mare. Fenomenul are aplicaie n
imunizri. Aceste fenomene sunt posibile prin creterea brusc a
celulelor imunologice cu memorie (o celul precursoare poate
produce aproximativ 1000 celule cu memorie). Diferenierea
limfocitelor B nspre plasmocit este mult mai rapid, deoarece
procesele de cooperare celular evolueaz mai eficient.
 n cazul antigenelor timoindependente, readministrarea
unui antigen de acest tip nu produce un rspuns de tip secundar,
ci unul asemntor cu rspunsul imun primar, cu hiperproducie
de IgM. Aceste antigene nu induc apariia celulelor cu memorie
imunologic.
n rspunsul imun umoral secundar timodependent exist i
sintez de IgM, dar la titruri considerabil sczute, comparativ cu
IgG. Dublarea titrului IgG are loc la fiecare 8 ore n faza
exponenial, cu atingerea titrului maxim n aproximativ 14 zile
(aproximativ de 100 ori mai mare dect titrul maxim IgG din
rspunsul imun primar).
Anticorpii produi n rspunsul imun secundar
timodependent au o afinitate mai mare dect cei produi n
rspunsul imun primar (maturare a afinitii). Nivelul afinitii
depinde i de doza de antigen administrat. Dozele mici de
imunogen favorizeaz creterea afinitii, iar cele mari o inhib.
n cazul dozelor prea mari, celulele cu afinitate mare sunt
saturate, excesul de antigen devenind accesibil i celor cu
afinitate mic, astfel c anticorpii secretai vor avea afinitate
diferit.
n general, n cursul rspunsului imun secundar toate
reaciile imune specifice au cea mai ampl exprimare:
producerea rapid de anticorpi cu efecte protectoare, fie reacii
de hipersensibilitate imediat (mai rar).
 Studiind mecanismele rspunsului imun primar i secundar,
s-a fundamentat legea intervalelor, absolut necesar n
stabilirea unor scheme de imunizare.

CAPITOLUL 52
IMUNOPROFILAXIA I SEROTERAPIA

n anul 1798, Jenner introduce vaccinarea antivariolic,

chiar nainte de a cunoate agentul etiologic al variolei. Jenner a
observat faptul c mulgtorii fac aceast boal foarte rar.
Pornind de la aceast constatare, inoculeaz produs patologic la
om, din leziunile prezente pe ugerele vacilor. Metoda a fost
denumit vaccinare (n limba latin, vacca=vac).
Ulterior (1880), Pasteur a stabilit principiul atenurii
virulenei agenilor patogeni, care a marcat producerea primului
vaccin funda-mentat imunologic (preparat dintr-o tulpin de
Baccilus anthracis atenuat prin cldur).
Vaccinul este un preparat realizat din ageni etiologici
infecioi (bacterii, virusuri, fungi, parazii), care administrat la
om induce imunitatea specific, fr reacii adverse.

VACCINURI CLASICE I MODERNE

 Primele vaccinuri folosite utilizau microorganisme vii,
neatenuate, nlocuite apoi cu germeni atenuai sau omori prin
diverse proceduri fizico-chimice. n afar de vaccinurile cu
antigene corpusculare (exemplu: celule bacteriene) sunt folosite
i vaccinuri subunitare, fracionate (exemplu: vaccinuri
preparate din ribozomi bacterieni vaccinul din ribozomi ai
Mycobacterium tuberculosis, obinut de soii Youmans). Acestea
sunt primele vaccinuri, denumite vaccinuri clasice sau
convenionale. Totui, pe lng valoarea lor profilactic
indiscutabil, uneori pot genera accidente postvaccinale, precum
redutabile reacii alergice sau chiar infecie, n cazul atenurii
inadecvate a tulpinii respective.
Pentru evitarea acestor reacii adverse a fost necesar
obinerea vaccinurilor convenionale ameliorate, ce utilizeaz
antigene nalt purificate, cunoscute din punct de vedere al
virulenei i al epitopilor semnificativi din punct de vedere
imunologic.
Progresele biologiei moleculare a fcut posibil obinerea
vaccinurilor preparate prin tehnologia ADN recombinant, aa
zise vaccinuri de generaia a treia. Spre exemplu: Engerix B,
Recombivax HB utilizate mpotriva hepatitei cu virus B.

Vaccinurile preparate din polipeptide sintetice reprezint o

mare realizare a biochimiei. Se sintetizeaz doar peptidele cu
semnificaie imunologic (epitopi). Acest fragmente pot deveni
imunogene prin cuplarea lor cu molecule carrier = purttor.
Adjuvanii reprezint substane care cresc imunogenicitatea
vaccinurilor purificate, nalt selective. Dei aceste substane sunt
foarte variate, pot stimula limfocitele T helper, procesele de
cooperare celular i producia de citokine.
Adjuvani convenionali sunt reprezentai de gelurile de
oxid (hidroxid sau fosfat de aluminiu). Astfel, anatoxina
difteric (ADPA) este purificat i absorbit pe fosfat de
aluminiu.
Adjuvanii moderni sunt de natur proteic sau lipidic.
Spre exemplu, vaccinul viitorului va fi reprezentat de un
carrier (probabil proteic), pe care se vor fixa epitopii (sintetici)
cu semnificaia imunologic pentru mai multe boli infecioase.
Se realizeaz astfel o poliimunizare.
Pentru prepararea vaccinurilor antivirale se folosesc
adjuvani de tip protein micelar, formele sterice ale acestor
proteine fiind similare celor din nveliul extern viral. Aceste
vaccinuri antivirale sunt foarte imunogene.
Virosomii (imunosomii) sunt structuri purttor artificiale
echivalente lipozomilor i reprezint vezicule fosfolipidice n
care sunt inclui spiculi glicoproteici virali. i virosomii
reconstituie nveliul extern viral dorit.
Iscomii sunt complexe imunostimulatoare, realizate prin
legarea spiculilor glicoproteici virali de substana Quil-A (o
saponin care induce spontan formarea de micele).
Imunogenicitatea iscomilor este mai mare dect cea a
virosomilor.
Lipozomii sunt vezicule fosfolipidice utilizate ca i
purttor, n special pentru vaccinurile antivirale i
antiparazitare.

Fig. 48 - Lipozomi multilaminari (Klein, 1991)

Proteosomii utilizeaz proteine de membran extern din

peretele celular meningococic. Proteosomii sunt structuri
hidrofobe, care formeaz spontan vezicule membranare, avnd o
aciune asemntoare lipozomilor. Proteosomii, recent
descoperii, nu au reacii adverse i reprezint
carrier-ul ideal pentru o gam larg de vaccinuri, mai ales
multivalente. Vaccinurile moderne antiPlasmodium prezint ca
adjuvani proteosomi i o eficacitate crescut.
Vaccinurile antiHIV moderne, n curs de experimentare pe
animale (aproximativ 20 de tipuri diferite) sunt multivalente, cu
epitopi preparai din glicoproteinele de nveli (n special din
glicoproteina 120 zona variabil V3), cu adjuvani de tipul
liposomilor, iscomilor, proteosomilor, imunomodulatori
antitumorali (Ubenimex). Administrarea intranazal a acestor
vaccinuri, crete rspunsul n imunoglobuline A secretoare la
nivelul mucoaselor; administrarea acestor vaccinuri pe cale
parenteral stimuleaz rspunsul imun general (umoral i mediat
celular). Dei aceste vaccinuri moderne par a fi foarte eficiente,
costul lor extrem de ridicat face momentan imposibil profilaxia
n mas antiHIV.
Vaccinurile de generaia a cincea vaccinurile antiidiotip
servesc ca nlocuitori ai antigenelor i au fost propuse ca o
alternativ la vaccinurile convenionale, ADN recombinante sau
chiar celor cu polipeptide sintetice. Vaccinarea are la baz teoria
lui Jerne 1974, (privind reeaua idiotip-antiidiotip, cu rol n
reglarea rspunsului imun) i teoria hibridomului, pentru
producerea anticorpilor monoclonali.
Vaccinurile antiidiotip se bazeaz pe fenomenul de
mimare molecular, prin care anticorpul care poart
imaginea intern a antigenului strin n structura sa, se
comport similar antigenului nsui, inducnd sinteza aceluiai
tip de anticorpi protectori. Se realizeaz astfel un proces de
vaccinare fr antigen (!), antigenele fiind nlocuite de anticorpi
antiidiotip exogeni.
Tehnica respectiv obine o prim categorie de anticorpi
(Ac1), dup imunizarea cu antigenul incriminat. Anticorpii Ac1
sunt folosii pentru imunizarea altor indivizi, obinndu-se
anticorpi Ac2 antiidiotip specifici, cu imaginea intern
(complementar) a antigenului pentru care se realizeaz
imunizarea.
 Vaccinurile antiidiotip sunt indicate pentru antigene ale
agenilor infecioi greu de obinut prin tehnologia ADN
recombinant sau sinteze biochimice. Sunt n curs de
experimentare vaccinuri antiherpetice, antipoliomielit.
Specificitatea nalt riguroas a acestor vaccinuri nu declaneaz
reacii adverse i produce un rspuns imun mediat celular destul
de puternic.
Vaccinurile antiadezive mpiedic ataarea bacteriilor pe
suprafaa mucoaselor i stimuleaz fagocitoza nainte de
colonizarea organismului. La om au fost experimentate
vaccinuri preparate din fimbriile Neisseria gonorheae sau ale E.
Coli. S-a observat faptul c administrarea acestor vaccinuri
determin titruri ridicate de anticorpi serici, fr ns a mpiedica
o colonizare a mucoaselor de ctre bacterii. Va fi necesar
ameliorarea tehnicii de preparare a acestor vaccinuri, pentru a
obine titruri crescute de anticorpi antifimbrii bacteriene, la
nivelul mucoaselor.
Programul Naional de Vaccinoprevenie se bazeaz pe
datele calendarului de vaccinri:
Se stabilesc grupele populaionale i colectivitile de risc
supuse vaccinrii.
Se respect schemele de imunizare stabilite prin consens
internaional, pentru fiecare vaccin n parte.
Se asigur condiiile impuse de respectarea lanului de
frig n scopul transportului i depozitrii vaccinurilor.
 Se constituie echipe de specialiti: epidemologi,
infecioniti, pediatri, care s coordoneze programele de
imunizare de la nivelul dis-pensarelor.
Structura programului de vaccinare n anumite ri ine i
de posibilitile economice i de incidena bolilor transmisibile
din zona respectiv.
Programul Naional de Vaccinoprevenie din Romnia
prevede vaccinarea antituberculoas, antidifteric, antitetanic,
antituse con-vulsiv, antipoliomielit, antirujeol, antihepatit
viral B.

VACCINURI ANTIBACTERIENE I ANTIVIRALE

Vaccinurile antibacteriene obligatorii folosite la noi n ar

sunt:
Vaccinul BCG (Bacil Calmette Guerin), preparat dintr-o
tulpin de bacil tuberculos bovin, atenuat prin pasaje succesive
pe cartof gli-cerinat i biliat, timp de 13 ani. Tulpina respectiv
induce IMC, respectiv hipersensibilitate de tip tardiv la
antigenele bacilului tuber-culos.
 Vaccinul DTP (Diftero-Tetano-Pertusis) conine anatoxin
difteric, anatoxin tetanic i celule bacteriene omorte ale
Bordetelei pertussis.

Vaccinurile antibacteriene neobligatorii (folosite n situaii de

risc epidemiologic) sunt:
Vaccinul antiholeric preparat din celule bacteriene
omorte, utilizat n epidemia de holer.
Vaccinurile anti Pseudomonas preparat tot din celule
bacteriene omorte, este administrat profilactic marilor ari sau
n infecii urinare recidivante de aceast etiologie.
Vaccinul antitifoidic preparat din celule bacteriene
omorte, se administreaz n zone unde febra tifoid este
epidemic.
Vaccinul antistafilococic administrat n infecii
stafilococice cronice

Vaccinurile antivirale obligatorii folosite la noi n ar sunt

vaccinuri convenionale, atenuate sau inactive:
Vaccinul antipolio de tip Sabine preparat din mutante fr
neurotropism ale celor trei tipuri antigenice de virus polio
(atenuat).
 Vaccinul antipolio de tip Salck este un vaccin obligatoriu
n rile dezvoltate, preparat din virioni omori.
Vaccinul antirujeol preparat din tulpina supraatenuat
Edmonston-Schwartz.
Vaccinul Engerix B vaccin obligatoriu antihepatit viral
B (preparat prin tehnologia ADN recombinant) administrat nou-
nscuilor sau grupelor de risc (ex.: personal medico-sanitar).

Vaccinurile antivirale neobligatorii sunt:

Vaccinul antigripal mixtur antigenic a tipurilor
antigenice A,B, i C cu virulen diminuat sau vaccinuri
preparate din mixturi de hemaglutinin i neuraminidaz. Se
administreaz anumitor grupuri de risc.
Vaccinul antirubeolos tulpina Cendhill, vaccin
neobligatoriu la noi, dar obligatoriu n Occident, administrat
sexului feminin la vrsta fertilitii, cu scopul prevenirii
malformaiilor congenitale produse de virus.
Vaccin antirabic preparat din virioni omori (vaccin
Fermi).
Vaccinul antirabic preparat din tulpina atenuat Floury,
administrat dup muctur de animal.
Vaccinul antiamaril (antifebr galben) este administrat
este administrat doar persoanelor care circul n zone endemice.
 ntr-un program de vaccinare trebuie cunoscute avantajele
i dezavantajele vaccinurilor antivirale atenuate sau virioni
omori.

Vaccinuri antivirale cu virulen diminuat

Avantaje:
Puine doze impun un rspuns imun eficace, simulnd
trecerea pacientului prin boala respectiv
Determin rspuns imun mixt IU+IMC
Sunt ieftine (accesibile rilor slab dezvoltate economic)
Se administreaz pe cile naturale de ptrundere ale
virusului (vac-cinul antipolio de tip Sabine se administreaz per
os)
Exist posibilitatea eliminrii din circulaie a virusurilor
slbatice
Dezavantaje:
Revers mutaia cu apariia fenotipului slbatic iniial
Efectul vaccinului poate fi perturbat prin fenomenul de
interferen
Vaccinurile antivirale cu virioni omori
Avantaje:
Au o stabilitate genetic foarte mare
Pot fi administrate i la persoane imuno-deficiente
Controlul inoculrii este uor de efectuat
Dezavantaje:
Necesit cantiti mari de Ag n doze multiple.Ex.: vaccin
antipolio Salck
Contraindicaiile vaccinrilor

Temporare:
Strile febrile ca urmare a unor infecii benigne nu
contraindic vaccinarea, ci doar o amn
Administrarea imunoglobulinelor contraindic vaccinarea
pe o pe-rioad de 4-6 sptmni
Tratamentele cu medicamente imunosupresoare
contraindic vacci-narea 1 pn la 3 luni
Sarcina contraindic vaccinarea cu ageni atenuai, vii.
Riscul tera-togen este foarte mare n primele trei luni de sarcin
Tuberculoza pulmonar activ este o contraindicaie
Definitive:
n afeciuni neurologice grave nu se administreaz
vaccinuri cu neurotropism (ex.: virusul polio, virusul parotiditei)
Afeciuni organice grave, decompensate (insuficiena
cardiac, in-farctul miocardic, nefropatiile cronice) contraindic
vaccinarea
Complicaiile alergice (alergii majore la proteinele aviare)
reprezint o interdicie pentru vaccinare

Principalele reacii adverse ale vaccinurilor

Episoade febrile precoce: ADPA, ATPA, DT, vaccin

antigripal, antihepatitic B
Convulsii (la copil mic): DTP, vaccin antirujeolic
Leziuni supurate, adenopatii: vaccinul BCG, vaccin
antirubeolic, anti hepatit B
Paralizie: 1 caz la 3,2 milioane de doze vaccin antipolio
Sabine
oc vaccinal: 1 caz la 100 000 de administrri; asemntor
ocului anafilactic apare la vaccinuri preparate din endotoxine
Evaluarea eficienei vaccinopreveniei
Se folosesc indicatori epidemiologici, urmnd frecvena
unei anumite boli infecioase n lotul persoanelor vaccinate,
comparativ cu lotul persoanelor nevaccinate
Se folosesc tehnici imunologice care evideniaz prezena
seroconversiei n anticorpi specifici (ex. Trusa Difterotest
reacie de hemaglutinare pasiv pentru demonstrarea eficienei
vaccinrii antidifterice). Trebuie stabilit, de asemenea, dac
nivelul anticorpilor obinut este protectiv.
Procedeele de imunizare sunt benefice pentru indivizi i
reprezint o bun metod de pstrare a sntii populaiei, prin
metodele preveniei. Eradicarea variolei va fi urmat curnd de
eradicarea rujeolei i poliomielitei, conform programelor OMS.

SEROTERAPIA

Serurile imune induc imunitatea pasiv i conin anticorpi

specifici mpotriva unui anumit agent infecios. Aceste seruri se
folosesc n terapia i profilaxia anumitor boli infecioase.
n anul 1890, Behring i Kitasato au demonstrat faptul c
serul animalelor imunizate cu toxina difteric neutralizeaz
toxina. Din anul 1891, serul animalelor imunizate a fost folosit
n terapia difteriei.
n anul 1889, V. Babe a utilizat serul antirabic i vaccinul
n prevenirea rabiei; de aceea l putem considera ntemeietorul
seroterapiei i seroprofilaxiei.
Serurile obinute prin hiperimunizarea animalelor de
experien se numesc seruri heterologe. Dei anticorpii se obin
n cantiti mari, dezavantajul principal l constituie boala
serului sau ocul anafilactic.

Serul uman de la convalesceni nu se mai utilizeaz datorit

pericolului transmiterii hepatitelor virale i a virusului
imunodeficienei ctigate. Prin amestecul serurilor obinute de
la aprox. 1000 de subieci se obin concentrate de
imunoglobuline numite gamaglobuline. Administrarea acestora
nu transmite bolile infecioase sus-menionate, dar pot produce
fenomene de hipersensibilizare prin administrri repetate.
Administrarea corect a agregatelor de imunoglobulin antiRh
pot preveni accidentele prin izoimunizare Rh. Gamaglobulinele
hiperimune se obin din serul unor subieci imunizai specific
prin vaccinare (ex. Gamaglobulin hiperimun antidifteric,
antirabic, antirujeoloas, antiherpetic, antimalaric, etc.)
O alt clasificare a serurilor se poate face dup natura
anticorpilor:
Seruri antibacteriene
Seruri antitoxice conin anticorpi antiexotoxin bacterian
(ser antidiferic, antitetanic, antibotulinic)
Seruri cu anticorpi anticelul bacterian - (ser anti
Pseudomonas)
Seruri mixte anticorpi anti celul bacterian i
antiexotoxin (ser anti Clostridium perfringens, ser
anticrbunos)

Seruri antivirale
exemplu: serul antirabic
n cazul utilizrii serurilor imune, se instaleaz imediat
dup administrare o imunitate pasiv, care persist un timp
scurt. La noi se folosesc serurile: antidifteric, antitetanic,
antibotulinic, antigangrenos polivalent i antirabic. Serurile
trebuie pstrate la temperaturi sczute (4 C) i la ntuneric.
nainte de administrare, fiolele se verific privind termenul de
valabilitate i lipsa impuritilor.

CAPITOLUL 53
MECANISMELE CITOTOXICITII
 Mecanismele citotoxice sunt mecanismele de distrugere ale
celulei int, realizate prin:
limfocitele T citotoxice - CD8, sub restricia CMH.
citotoxicitate mediat celular anticorpo-dependent
(ADCC), produs prin celulele K (Killer) n prezena
anticorpilor specifici.
citotoxicitate prin aciunea anticorpilor specifici i a
sistemului complement (prin complexe imune).
citotoxicitate mediat prin celulele NK (natural Killer), fr
restricie CMH.
citotoxicitate mediat prin enzime lizozomale, eliberate de
la nivelul PMN i macrofagelor.

MECANISME MOLECULARE

n urma contactului dintre celula citotoxic i celula int,

sunt eliberate substane denumite citotoxine, molecule care
realizeaz microcanalicule membranare n membrana intei i
fragmentarea nu-cleului acesteia. Leziunile membranare sunt
tubulare, cu dimensiuni de 5-20 nm.
 Substanele citotoxice sunt serinesteraze i se numesc
perforine i granzime. Pentru formarea unui por membranar,
sunt necesare 3-4 molecule de perforine. Polimerizarea
monomerilor perforinei se realizeaz n prezena Ca2+; apoi
perforinele sufer modificri conformaionale care duc la
polimerizarea lor n dublul fluid fosfolipidic membranar, cu
formarea unor canalicule, prin distorsionarea structurii
membranei. Sistemul C realizeaz distrucia celulei int prin
formare de pori membranari, dup formarea complexului de atac
membranar (proteine polimerizate). Perforinele (citolizinele)
sunt foarte asemntoare componentei C9 a C.
Celula uciga (citotoxic) este protejat de efectul
distrugtor al perforinelor, prin intermediul protectinelor, care
inactiveaz perforinele active, fcnd imposibil ptrunderea
acestora n straturile fosfolipidice.
Perforinele deschid calea granzimelor, care i exercit
efectul distructiv n celulele int, prin porii formai.
Liza celulei int genereaz apoptoza (apo = separare,
ptosis = cdere), cu contracia celulei int, dilatarea
reticulului endoplasmatic i modificri nucleare (agregate
cromatiniene). Din fragmentarea celular rezult corpi
apoptotici care vor suferi un fenomen distructiv secundar, cu
moartea celulei. Ulterior, corpii apoptotici sunt fagocitai de
ctre MF.
 Alte ipoteze afirm rolul redus al citotoxinelor i rolul
consid-erabil al unui fenomen de autoliz intern. Moartea
celular programat (fiziologic) este controlat genetic i poate
include noiunea de moarte apoptotic (din care lipsesc unele
etape - ex.: fragmentarea nucleului). Expunerea la substane care
lizeaz acizii nucleici, privarea de factori de cretere, infecia cu
anumite virusuri, induc moartea celular. Un posibil mecanism
este reprezentat de ctre activarea proteazelor celulare prin
protein - kinaze, sub aciunea Ca2+. Activarea endonucleazelor
fragmenteaz cromatina, favoriznd apoptoza. n 1993 a fost
demonstrat proteoliza intracelular prin convertaza IL1 - i
proteazele nrudite. IL1 - activeaz prin proteoliz unele
enzime precursor, care determin modificrile morfofuncionale
ale morii celulare programate. Al doilea mecanism de aciune al
IL1 - presupune activarea proteolitic a unor factori de reglare
care induc transcripia unor gene cu rol n apoptoz.
Mecanisme apoptotice aberante pot fi activate la pacieni
HIV+, cu inducerea morii limfocitelor TH, mai sensibile la
semnale apoptotice. Clonele self autoreactive se ndeprteaz,
probabil, din organism prin semnale apoptotice. Corpii
apoptotici nefagocitai ar putea produce alterri ale esuturilor n
care apar i autoanticorpi (anti - ADN), oferind nc o ipotez a
originii bolilor autoimune.
O alt explicaie a morii celulare programate o constituie
ceramidele derivate din sfingomielina membranar: iniiaz
direct moartea celular, prin stimularea unor mecanisme
proapoptotice, fie inhib mecanismele anti apoptotice existente.
Ceramidele inhib tran-scripia m-ARN n circa 4-6 ore.
Acumularea ceramidelor poate produce inversarea polaritii
membranei, cu exprimarea pe faa extern a acesteia - a
fosfatidil serinei. Este favorizat recunoaterea i procesul de
fagocitare al celulelor apoptotice de ctre MF.
Rolul granzimelor n apoptoz este insuficient elucidat.
Gran-zimele ptrund n celul prin porii realizai de ctre
perforine i acioneaz n prezena acestor substane. Pentru
fragmentarea ADN, concentraiile de granzime necesare sunt
foarte reduse, aproximativ 10-7 M. Pe lng funciile citotoxice,
granzimelor li s-au atribuit roluri n extravazarea, migrarea i
diferenierea limfocitelor T; granzimele inhib dezvoltarea
tumorilor, prin blocarea aderenei la substrat.
Exist mai multe tipuri de granzime, notate A, B, C, D, E,
F, G, H, Triptaza - 2, Met - aza 1. Acestea produc leziuni la
nivelul membranei nucleare i la nivelul nucleului, clivnd
diverse situsuri: Arg/ Lys, Asp/ Glu, Phe/ Leu, Met/ Leu etc.
Greutatea molecular a granzimelor este cuprins ntre 27 - 33
k . Granzima B este unica serin - proteaz al crei situs de
clivare este situat n apropierea unui reziduu acid; activarea
IL1 este dependent de aceast granzim, foarte abundent n
granulaiile citotoxice. Efectul distructiv al granzimei B asupra
cromatinei se realizeaz prin intermediul ADN - azei I i prin
kinaza p34cdc2. Activarea aberant a kinazei poate induce
fenomenul apoptotic.
 Proteina antiapoptotic cea mai studiat este proteina Bcl-2,
de 26 k , prezent n membrana mitocondrial extern, reticulul
endoplasmic neted i n membrana nuclear. Prin localizarea pe
endomembranele celulare, Bcl-2 inhib peroxidarea
membranelor i eliberarea radicalilor activi ai oxigenului.
Proteina Bcl-2 inhib funcia proteinei p53, protein care poate
declana apoptoza (n anumite situaii), nainte de faza S a
ciclului celular. Alte substane antiapoptotice sunt vitronectina i
fibronectina.
Unele virusuri cu ADN posed mecanisme de anihilare ale
granzimelor prin serpine (cu aciune anti serin - proteaz). Alte
virusuri (probabil cu ARN) pot sintetiza proteine Bcl-2 - like sau
blocheaz influxul Ca2+ intracelular.
Modularea efectului substanelor antiapoptotice ar putea
avea aplicaii n transplantul de organe.

CLASIFICARE FUNCIE DE CELULA EFECTOARE

Mecanismele citotoxicitii mediate prin celulele Tc

Dup recunoaterea imunologic a celulei int, are loc
aderarea limfocitelor Tc (CD8), n prezena Mg2+.
 Faza de programare pentru liz, denumit i srutul
morii necesit aproximativ 10 minute, prezena Ca2+ i o
temperatur optim de 37o C. Apar primele leziuni la nivelul
membranei celulei int.
Faza de liz se caracterizeaz prin pierdere de metabolii i
macromolecule, consecutiv leziunilor membranare.
Celulele Tc se desprind apoi de celula lizat i pot relua
aceast lovitur letal de trei sau ase ori. Celulele Tc (CD8+) au
rol esenial n aprarea antiviral i n respingerea grefelor
incompatibile.

Citotoxicitatea mediat prin macrofage

Este mai lent dect cea produs prin limfocite Tc (dup
aproximativ 24 de ore). Celulele atacate preferenial sunt
celulele tumorale i celulele bacteriene cu parazitism intracelular
(Mycobacte-rium, Brucella, Ricketsia etc.) Citotoxicitatea are
specificitate mai restrns, putnd fi distruse i hematii sau
celulele unor esuturi.

Citoliza mediat de granulocite

Granulocitele PMN fagociteaz i distrug n special
microorganisme piogene. Eozinofilele particip la anumite
reacii de hipersensibilitate de tip imediat i realizeaz un efect
antiparazitar.
Granulocitele posed receptori pentru Fc -ul
imunoglobulinelor i pentru C3 a sistemului C i pot realiza
citotoxicitate Ac dependent.

Celulele NK
Reprezint aprox. 5 % din totalul celulelor mononucleare.
Sunt mai frecvente n splin i mai puin prezente n ganglionii
limfatici. Sunt neaderente, nefagocitare, nu sunt supuse
restriciei CMH i nu au memorie imunologic. Aciunea
celulelor NK este potenat prin in-terferoni. Gradul de activitate
citotoxic a acestor celule este evideniat in vitro prin
capacitatea celulelor NK de a liza celulele marcate cu izotopi
radioactivi.
Dup recunoaterea i formarea de contacte cu celula int,
are loc programarea pentru liz i apoi liza propriu-zis. Celulele
NK purificate secret factori solubili citotoxici, care produc o
liz mai lent (aprox. 18 ore). Activitatea celulelor NK scade
proporional cu vrsta subiectului, fapt care ar putea explica
frecvena crescut a tumorilor la vrstnici.
Activitatea citotoxic este potenat prin interferoni. Aceste
substane mresc numrul celulelor NK legate de celulele int i
cresc capacitatea litic a celor deja legate. Sunt active toate
speciile de interferoni ( , i ). De asemenea, citoliza prin
celule NK este potenat prin IL2. Probabil, efectul stimulator al
IL2 se manifest prin creterea sintezei de INF.
Principala activitate a celulelor NK se refer la controlul
apariiei metastazelor tumorilor (rol antitumoral). Celulele NK
au i activitate antiviral, dar i antifungic i antiparazitar. Au
rol n respingerea grefelor i n reglarea hematopoezei normale.
Proprietile lor imunoreglatoare se refer la reglarea
anticorpogenezei, reglarea activitii celulelor Ts i a imunitii
mediate celular.

Citotoxicitatea prin celule killer

Celulele K produc citotoxicitate dependent de anticorpi,
cu specificitate imunologic. Acioneaz doar asupra celulelor
int acoperite cu anticorpi specifici i produc citotoxicitate n
absena C; sunt neaderente, nefagocitare, nu produc rozetarea
hematiilor.
Liza se realizeaz prin legarea IgG de celula int,
fragmentul Fc al IgG fiind fixat pe celula K. Cantitatea de
anticorpi specifici implicai n acest proces este mai mic dect
cea necesar fixrii sistemului complement. n cazul celulelor K,
imunoglobulinele servesc ca i o punte de legtur cu celula
int. Mecanismele moleculare ale citotoxicitii sunt foarte
asemntoare limfocitelor Tc.
 S-a observat faptul c celulele NK i K au foarte multe
carac-teristici comune; ar putea fi un singur tip de celule
efectoare, care ar putea aciona citotoxic direct (NK) i
indirect prin IgG (celule K).

Citotoxicitatea natural indus de limfokine

Realizat de ctre celulele LAK- Lymphokine Activated
Killers Cells, produc i liza celulelor int rezistente la
activitatea celulelor NK. Studii ulterioare au artat ns c
celulele LAK nu reprezint un grup aparte de celule efectoare, ci
reprezint celule NK cu activitate imunologic potenat prin
IL2.
Fenomenul de citotoxicitate face parte din funcia de
supraveghere imunologic, liznd celule non-self (tumorale,
celule infectate cu diveri ageni etiologici, celule self alterate
sau mbtrnite).

Fig. nr. 49 - Mecanisme citotoxice (dup Zarnea, 1991)

IMUNITATEA ANTITUMORAL

Rspunsul imun specific are un rol major n controlul di-

fuzibilitii i proliferrii tumorilor, n special prin mecanismele
citotoxicitii (celule NK, celule K, macrofage, limfocite T
citotoxice), aciunea sistemului complement i prin unele
interleukine (factorul necrozant tumoral - TNF, IL2, interferoni).
Similitudinea mecanismelor de aprare imunologic
antiviral i antitumoral ntresc ideea c majoritatea tumorilor
prezint o etiologie viral. Virusurile oncogene se pot integra ca
i provirus n genomul celulei infectate, constituind primul
semnal al oncogenezei. Descoperirea genelor oncogene a fost
demonstrat prin transformarea neoplazic in vitro a unor celule
normale. S-a constatat apoi faptul c i celulele indemne conin
secvene genice omoloage oncogenelor, denumite
protooncogene, care codific sinteza unor proteine implicate
n reglarea multiplicrii celulelor normale. Duplicaia genic
(gen protooncogen i gen oncogen viral) ar putea amorsa o
capacitate proliferativ celular anormal, care s iniieze
dezvoltarea tumorii. Conform teoriei supravegherii imune, se
presupune c prin mecanismele imunologice normale se pot
ndeprta aproximativ 103 celule transformate neoplazic, cu
antigene tumorale de suprafa variate: TTSA - antigene
tumorale specifice de transplantare, TSA - antigene tumorale
specifice, TATA - antigene asociate antigenelor TTSA, antigene
oncofetale).
Antigenele TTSA induc proliferarea limfocitelor T
citotoxice n mod preferenial. n aproximativ 38% dintre
tumorile spontane la om, infiltrarea lor cu limfocite Tc variaz
ntre 18% i 87% (Olinescu). Experimental limfocitele Tc ar fi
mai eficiente n regresia tumorilor induse viral, care sunt
puternic imunogene i ar putea avea un rol redus n tumorile
spontane, care sunt slab imunogene. Rspunsul imun
antitumoral n anticorpi specifici este foarte slab (infiltraia
tumorilor cu limfocite B nu depete 1% conform
experimentului discutat anterior). Anticorpii specifici determin
liza celular mediat prin complement, citotoxicitate ADCC i
promoveaz fenomenele fagocitare ca opsonine specifice.
Macrofagele activate prezint activitate tumoricid ntr-un
raport optim 1:1 - celul tumoral : macrofag. n afara efectului
citotoxic direct, macrofagele se constituie n celule prezentatoare
de antigen i n celule secretoare de citokine antitumorale.

Rolul major n aprarea antitumoral l dein celulele NK,

care realizeaz citotoxicitate independent de CMH. Celulele
LAK prezint un potenial antitumoral exacerbat, prin
intervenia stimulatoare a IL2 i INF. Celulele NK scad
progresiv cu vrsta subiectului, fapt care explic frecvena
crescut de apariie a diverselor tumori la vrstnici.
TNF are aciune antitumoral similar INF. Activitatea
TNF nu are specificitate de specie i presupune activarea
endonucleazelor cu fragmentarea ADN-ului celulei int i
activarea enzimelor lizozomale ale celulelor efectoare.

Imunoterapia antitumoral
Imunotoxinele sunt molecule imunoglobulinice IgG
(anticorpi monoclonali) cuplai cu diferii ageni citotoxici,
foarte selectivi: izotopi radioactivi, chimioterapice antitumorale,
toxine (vezi tabelul nr. 26).
AMC cu specificitate dubl (AMC bifuncionali) se obin
prin metode fizico-chimice i de inginerie genetic, prin
asocierea unor jumti de molecule imunoglobulinice cu
specificitate distinct.

Tabelul nr. 30 - Imunotoxine (dup Misfeldt)

IMUNOTOXINA EXEMPLE TUMORA

AMC Anti-Ig idiotip
Anti-receptor pt. IL2 Limfoame cu celule B
Limfoame cu celule T
AMC cuplai cu toxine AMC anti CD5 - Ricin A
AMC anti CD22 - Ricin A
AMC anti CD19 - Ricin A Limfoame cu celule T Limfoame
cu celule B Limfoame cu celule B
AMC cuplai cu citostatice AMC - Chlorambucil
antimelanom Melanom
AMC cuplai cu izotopi radioactivi211 Bismut - anti Th1
Celule T transformate tumoral
AMC cu specificitate dubl AMC anti CD3 i anti TAA
AMC anti CD3 i anti hormon stimulator melanoci-tar Sarcom
Melanom

Descoperirea AMC bifuncionali constituie baza viitorului

tratament antitumoral, mult mai eficient dect experimentele
anterioare: terapia cu TNF este marcat de efecte adverse
precum endocardita necrozant sau reacii de hipersensibilitate;
terapia cu INF este limitat prin toxicitatea medular a acestuia
iar terapia cu celule LAK proprii pacientului este eficient
numai mpotriva tumorilor cu antigene specifice puternic
imunogene.
 Imunoprofilaxia antitumoral este n curs de experimentare
i vizeaz tehnici ADN recombinant pentru sinteza antigenelor
tumorale specifice i nu n ultimul rnd - vaccinuri antivirale
orientate mpotriva virusurilor cu potenial oncogen.

CAPITOLUL 54
IMUNITATE ANTIBACTERIAN, ANTIVIRAL,
ANTIMICOTIC, ANTIPARAZITAR

IMUNITATEA ANTIBACTERIAN

Aprarea imun se realizeaz att prin mijloace nespecifice,

ct i specifice. Rezistena natural, (prin barierele cutaneo-
mucoase i prin factorii cunoscui) - se opune ptrunderii
agenilor patogeni. Cea mai mare parte a bacteriilor patogene
este eliminat de la poarta de intrare prin mecanisme
nespecifice: lizozim, proteina C reactiv, fagocitoza, inflamaia.

Rspunsul imun umoral specific este declanat de ctre

bacterii cu dezvoltare extracelular i de ctre exotoxinele
bacteriene. Bacteriile care au aderat la nivelul mucoaselor
(bronhice i digestive) sunt nlturate prin IgAs.
 Opsonizarea este un proces obligatoriu pentru iniierea
rspunsului imun antibacterian prin sistemul mononuclear
macrofagic. IgG i IgM sunt opsonine specifice, neutraliznd i
unii factori antifagocitari ai unor bacterii (polizaharide
capsulare, proteina M, antigenele O etc.). Anticorpii IgM produc
aglutinarea unor bacterii (mpiedicnd penetrarea) sau produc
liza acestora prin activarea sis-temului complement.
Neutralizarea toxinelor bacteriene se realizeaz prin
anticorpi neutralizani, protectori (anticorpi antidifterici,
antitetanos, antieritrotoxin streptococic etc.).

Rspunsul imun celular este orientat n special mpotriva

bacteriilor cu multiplicare intracelular (Mycobacterium,
Brucella, Lysteria etc.). Aceste bacterii sunt fagocitate de ctre
PMN i macrofage, dar sunt foarte greu de distrus, din cauza
factorilor lor de patogenitate. Macrofagul poate fi activat n
vederea creterii puterii fagocitare, prin intermediul MAF
(Factor de activare al macrofagelor).
Macrofagele infectate sunt distruse prin limfocitele T
citotoxice, cu funcia citocid potenat prin IL2.

IMUNITATEA N VIROZE
Imunitatea n viroze acute
Rspunsul imun limiteaz replicarea viral i diseminarea
virusurilor. Anticorpii neutralizeaz diverse structuri virale sau
efectul citopat tisular, n timp ce IMC acioneaz asupra celulei
int infectat cu virus.
n infeciile virale generalizate, intensitatea rspunsului
imun este mare, deoarece antigenele respective ajung mai repede
la nivelul organelor limfoide; se sintetizeaz cantiti mari de
anticorpi de tip IgM i IgG, care neutralizeaz infectivitatea
viral.
n infeciile virale localizate la nivelul mucoaselor este
indus sinteza local de anticorpi de tip IgAs. Ac neutralizani
fac parte din clasele IgM, IgG, IgA. Dozele mici de antigene
virale induc sintez de IgM (de durat scurt), iar dozele mari de
antigen viral induc sinteze crescute de IgM i IgG. Virusurile
nvelite pot fi distruse prin aciunea sistemului complement.
Rspunsul antiviral mediat celular se realizeaz prin
intermediul limfocitelor T citotoxice, cu activitate potenat prin
limfocitele T helper. Limfocitele Tc sunt mai eficiente n
controlul diseminrii virusurilor, iar celulele NK i celulele
Killer protejeaz organismul fa de reinfecie.
 Interferonii au aciune antiviral nespecific; ating titrul cel
mai nalt n organismul infectat la circa 12 - 48 ore dup
stimularea antigenic. Se previne astfel rembolnvirea cu un alt
virus timp de dou pn la ase sptmni. De aici utilitatea
interferonului n profilaxie i terapie.

Imunitatea n viroze persistente

Infeciile virale persistente au evoluie ncetinit, att n
incubaie, ct i n cursul bolii clinic manifeste. Aceast
incubaie prelungit se poate explica prin existena strii de
provirus (genom viral integrat n genomul celulei gazd).
Persistena infeciei se datoreaz ineficienei mecanismelor
imunologice de aprare specific ale gazdei. Encefalitele
spongioase, cu ageni etiologici precum viroizii sau prionii, nu
induc rspuns imun. Greutatea lor moleculara sub 10.000 le
confer o imunogenicitate extrem de sczut iar reaciile
imunologice nu prezint intensitatea necesar eliminrii
virusului.
n infeciile persistente este posibil nlocuirea virusurilor
virulente cu particule virale defective, ca fenomen al
autointerferenei. n infeciile latente, virusurile se pot cantona n
structuri protejate fa de reacia imun (ex. v. herpetice la nivel
neuronal, v. Epstein Barr la nivelul limfocitelor B). Alterrile
rspunsului imun pot fi considerabile prin distrucia limfocitelor
TCD4, realizat de ctre virusul imunodeficienei umane
(prbuirea imunitii mediate celular). Alteori, reacia IMC
este insuficient prin prezena anticorpilor blocani, care
mpiedic limfocitele T citotoxice s acioneze asupra celulelor
infectate cu virus. Multiplicarea virusului HIV n monocite
explic de asemenea o IMC ineficient.
Un tip particular de infecii cronice l constituie cele
produse de Oncornavirinae, cu o evoluie particular a infeciei -
oncogeneza viral, cu origine n fenomenul de supresie
imunitar.

IMUNITATEA N MICOZE

Aprarea antifungic se realizeaz prin mecanisme

nespecifice i specifice. Mecanismele IMC reprezint rolul
esenial, prin granulocite neutrofile, macrofage i celule NK.
Polimorfonuclearele neutrofile realizeaz aprarea
imunitar fa de specii precum Candida i Aspergillus. Celulele
NK ofer o protecie foarte eficient mpotriva genului Candida,
dar i asupra altor genuri de fungi (ex.: Criptococcus).
Macrofagele acioneaz antifungic prin mecanisme
citotoxice, efectul lor fiind potenat prin MAF, IL3 i INF .
 n micozele localizate superficial (ex.: dermatomicoze),
rspunsul imun este foarte slab i infecia are mare risc de
cronicizare.
n micozele profunde, mecanismele imune sunt de tip
hipersensibilitate tardiv, cu leziuni de tip granulomatos
nodular.
Deficitele imune celulare favorizeaz diseminarea fungilor
n organism, cu apariia micozelor sistemice. Spre exemplu,
Candida albicans poate activa limfocitele T supresoare CD8+,
care agraveaz imunosupresia. Micozele apar n mod
preferenial la subieci cu deficit imunologic timodependent.

IMUNITATEA N PARAZITOZE

Organismul gazd dezvolt un rspuns imun antiparazitar

mixt - mediat celular i mediat umoral. n infecii cu parazii
localizai intracelular imunitatea celular confer rezisten fa
de infecie. Eficiena reaciilor imunologice este extrem de
divers din cauza antigenelor parazitare foarte variate, funcie de
stadiul de dezvoltare al parazitului i funcie de localizrile
acestuia.
 Paraziii se protejeaz mai bine fa de mecanismele
imunologice ale gazdei, prin agresine:
nchistarea parazitului n diverse structuri sau localizarea n
sistemul nervos, blocheaz accesul efectorilor sistemului
imunitar.
Variabilitatea antigenic parazitar este foarte mare, fapt
care suprasolicit mecanismele imunitare.
Paraziii elimin factori imunosupresori: substane
limfocitotoxice sau substane cu rol n clivarea
imunoglobulinelor; Toxoplasma gondii se poate multiplica n
macrofag.
Anticorpii antiparazitari sunt mai puin protectori, chiar
dac se produc la titruri nalte; majoritatea anticorpilor sunt utili
n serodi-agnostic.
Mecanismele IMC reduc diseminarea parazitar prin
limfocitele T activate specific i prin macrofagele activate.
Limfadenopatiile apar constant n infeciile parazitare, ca reacie
la persistena stimulrii Ag.
Granulocitele eozinofile au efecte majore n infeciile
helmintice. IL5 stimuleaz eozinofilopoeza. Limfocitele T
activate stimuleaz producia de IgE, cu rol antiparazitar. IgE
activeaz mastocitele care vor produce factor chemiotactic
pentru eozinofile, histamin, serotonin, heparin i alte
substane vasoactive.
 Limfocitele T helper activeaz rspunsul imun al altor
clone de limfocite B, pentru producerea anticorpilor specifici
mpotriva unor antigene parazitare. Aceti anticorpi intervin n
cadrul reaciei de citotoxicitate celular anticorpo-dependent,
ADCC. Anticorpii antiparazitari specifici pot bloca situsurile de
ataare ale paraziilor pe celulele gazdei sau pot avea rol de
opsonine specifice, pentru stimularea fagocitozei. Eficiena
acestor anticorpi este foarte sczut n infeciile cu protozoare
patogene care colonizeaz intestinul. Rspunsul imun umoral
este ns foarte puternic atunci cnd agentul parazitar se
cantoneaz la nivelul esuturilor (parazit extracelular). Titrul
crescut de anticorpi nu are specificitate foarte nalt, ci mai
degrab imunoglobulinele sunt policlonale.
Helminii pot declana fenomene de hipersensibilitate
imediat i tardiv. Aceast particularitate imunologic poate fi
folosit i n scop diagnostic. Astfel, se utilizeaz teste cutanate
pentru diagnosticul echinococozei, ascaridiozei, trichinelozei,
strongiloidozei etc.
Progresele biologiei moleculare au diversificat spectrul
vac-cinurilor antiparazitare, totui mai restrns dect cel al
vaccinurilor antibacteriene sau antivirale.

CAPITOLUL 55
IMUNOPATOLOGIE
REACII DE HIPERSENSIBILITATE

Reacii imune exacerbate, denumite i alergii (allos - gr.,

nseamn altfel) definesc stri de hipersensibilitate
imunologic. Dup clasificarea cercettorilor P. G. Gell i
Coombs, exist patru tipuri de reacii, primele trei de tip imediat
(mediate de anticorpi) i ultima de tip ntrziat, tardiv-
mediat prin limfocit T i macrofag.
Hipersensibilitatea imediat de tip I, anafilactic.
Hipersensibilitatea imediat de tip II, citotoxic.
Hipersensibilitatea de tip III, mediat prin complexe
imune.
Hipersensibilitatea de tip IV, tardiv, de tip tuberculinic.

Hipersensibilitatea imediat de tip I

Este o stare de activitate exagerat fa de un antigen
(alergen), care poate s apar la orice membru al unei specii
(anafilaxie) sau numai la anumii indivizi predispui,
hiperreactivi (atopie).
Acest tip de reacie este provocat de ctre anticorpii din
clasa IgE, denumii i reagine. Acestea se fixeaz imediat pe
mastocite i bazofile, dup stimulul antigenic. La repetarea
acestui stimul se va declana degranularea mastocitelor i
bazofilelor, cu eliminarea aminelor vasoactive: histamina,
bradikinina, factori chemotactici, leucotriene, cu fenomene
clinice locale (urticarie, eczeme, astm bronic, rinit) sau
generale (oc anafilactic). Acest tip de oc se caracterizeaz prin
prbuirea tensiunii arteriale (prin vasodilataie), spasm bronic
sau glotic i moarte.
Subiecii atopici prezint un nivel seric al IgE mai mare
dect normalul i receptori specifici pentru IgE la nivelul
mastocitelor i bazofilelor n cantiti de 5-10 ori mai mari. Dei
acest tip de hipersensibilitate prezint mari dezavantaje, ar
prezenta totui un efect favorabil n infeciile parazitare (IgE
prezint un cert rol antiparazitar).
Activarea strii de hipersensibilitate reaginic se realizeaz
prin antigene bivalente sau multivalente care se fixeaz la
nivelul IgE. Se formeaz grmezi de IgE, legate de receptori,
la un pol al celulei, aceasta fiind prima etap a activrii
mastocitelor.
Alte mecanisme de activare presupun intervenia
anticorpilor antiidiotipici anti-epitopi Fab a IgE sau a lectinelor
(fitohemaglutinina, concavalina A), care se fixeaz de
componentele glucidice ale Fc ale IgE. (Se explic alergia la
unele fructe).
 Alergenele sunt foarte variate, marea majoritate
neinfecioase (ex.: polen, praf de cas, dejecii de acarieni,
proteine din lapte, ou, antibiotice, anestezice, scuame cutanate,
veninul viespilor, fragi, cpuni, conservani alimentari,
substane cosmetice).
Detectarea acestui tip de hipersensibilitate se realizeaz
prin:
* reacia Prausnitz - Knster (la om)
* testul de anafilaxie pasiv cutanat (la animale)
* testul radioalergosorbent
La subiecii predispui se realizeaz desensibilizri repetate
(cu scop terapeutic, utiliznd doze mici de alergen).

Fig. nr. 50 - Sindromul alergic (dup Vaida)

Alergen
- monocite
Activare celular - limfocit TH
- mastocite
 - bazofile fixare IgE
Mediatori vasoactivi Factori
chemotactici

Histamina- Vasodilataie, edem

- Contracia muchilor netezi Infiltraie celular
(bronhospasm) (Neutrofile,
Eozinofile,
- Hipersecreie de mucus Bazofile)
- Sintez de prostaglandine
Adenozina - Vasodilataia coronarelor
- Contracia muchilor netezi
Proteaze - Inflamaie
- Activarea kininelor
- Sinteza de angiotensine Mediatori ai
PAF - Agregare trombocitar inflamaiei
(eliberare de tromboxan
i serotonin)
- Recrutare eozinofile i PMN
 - Edem
- Hipersecreie de mucus
Protaglandine
- Bronhospasm
- Migrare PMN
Leucotriene
- Spasm, edem
- Scderea funciei cardiace
- Activitate chemiotactic etc.

Hipersensibilitatea de tip II, citotoxic

Acest tip de reacie se produce fa de antigene prezente pe
suprafaa unor celule proprii organismului, prin:
* liza celular declanat prin sistemul complement activat
* opsonizare i fagocitoz
* citotoxicitate anticorpodependent
Activarea sistemului complement are loc n urma
combinrii anticorpilor IgG sau IgM cu antigenele de pe
suprafaa celulei int. Complexul de atac membranar C5b6789
va determina citoliza.
Datorit formrii complexelor antigen - anticorp, celulele
int opsonizate pot fi fagocitate. n situaia compuilor cu
molecul prea mare, care nu pot fi nglobai, se produce
fenomenul fagocitozei frustrate, cu expulzarea coninutului
granulaiilor lizozomale n mediul extern, cu apariia leziunilor
tisulare.
Activarea funciei celulelor ADCC determin liza celulelor
int. Moleculele de IgG realizeaz o punte ntre celula int i
celulele efectoare, prin legarea de antigen prin fragmentul Fab i
prin legarea FC de celula killer.

Sindroamele clinice caracteristice sunt:

* hemoliza posttransfuzional (dup transfuzie cu snge
incompatibil)
* anemia hemolitic autoimun (autoanticorpi antihematii)
* sindromul Goodpasture (autoanticorpi antimembran
bazal a rinichiului sau anticelul pulmonar)
* boala hemolitic a nou nscutului (prin incompatibilitate de
Rh)
* trombocitopenii autoimune (autoanticorpi antitrombocitari)
* sterilitate prin anticorpi antispermatozoizi
* reacii alergice medicamentoase (medicamentele
administrate mai ales parenteral pot forma conjugate de tipul
hapten - purttor, care pot deveni imunogene i pot produce
autoanticorpi).

Hipersensibilitatea de tip III, prin complexe imune (sau Reacia

de tip Arthus)
Organismul uman poate fi uneori expus la un exces de
antigene (infecii persistente, contact repetat cu alergeni externi
n cantiti mari). Excesul de complexe imune produs n
organism atrage depunerea acestor complexe n anumite regiuni
ale acestuia, cu apariia unor reacii lezionale.
Fixarea complexelor imune circulante la nivelul peretelui
capilar sau n anumite esuturi, activeaz trombocitele i
bazofilele, care vor elibera amine vasoactive, care vor provoca
accentuarea permeabilitii vasculare direct proporional cu
fixarea de noi complexe imune. Factorii chemiotactici vor atrage
n focar PMN, care prin enzime lizozomale produc leziuni.
Sistemul complement este activat concomitent cu accentuarea
leziunilor respective pn la apariia necrozei. Aceste distrucii
devin evidente la 3-6 ore de la contactul cu antigenul, de unde i
denumirea de hipersensibilitate de tip intermediar. Anticorpii
efectori ai acestui tip de reacie sunt anticorpii IgG sau IgM
necitofilici. Acetia sunt circulani, precipit antigenul.
Eliminarea lor din circulaie devine foarte dificil la titruri
imunoglobulinice mari. Depunerea complexului antigen -
anticorp este apoi inevitabil, cu apariia leziunilor al cror
mecanism a fost precizat. Locurile de elecie pentru depozitarea
complexelor imune sunt rinichii, articulaiile i jonciunile derm-
epiderm.
Boala serului apare ca i o complicaie a seroterapiei, cu
apariia unor nefrite sau artrite.
Fenomenul Arthus este un exemplu de patologie local,
mediat prin complexe imune. Fenomenul a fost demonstrat
experimental n anul 1903, prin injectri repetate la iepure a
unor antigene solubile. S-a observat faptul c leziunile au aprut
la locul de administrare al antigenului, cu leziuni arteriolare,
microtrombi n vasele mici, cu consecine ischemice. De fapt,
afeciunea este o vasculit acut, n prezena unui titru crescut de
anticorpi precipitani IgG. Clinic, un astfel de fenomen se
observ la diabeticii sensibilizai la insulin.
n lupusul eritematos sistemic, producerea de autoanticorpi
se poate declana fa de autoantigene native sau alterate
(nucleoproteine, histone, ADN), cu apariia leziunilor cutanate
(purpure buloase sau ulcerative), sinoviale sau viscerale
(hepatita sau nefrita prin complexe imune).
n poliartrita reumatoid, antigenul este o molecul
imunoglobulinic, iar anticorpul este factorul reumatoid (IgM
sau IgG anti Ig proprie). Procesul inflamator are loc la nivelul
articulaiilor, ducnd la deformare i anchilozare.
 Lista bolilor produse prin complexe imun este foarte lung,
dar amintim: fibroza chistic, nefropatia malaric, tiroidita
Hashimoto, scleroza multipl, miastenia gravis, sarcoidoza,
boala plmnului de fermier (antigenul este reprezentat de ctre
Micropolyspora faeni), bagasoza (inhalarea prafului de trestie de
zahr), reumatismul articular acut i glomerulonefrita
poststreptococic etc.

Hipersensibilitatea de tip ntrziat, de tip IV, de tip

tuberculinic
n acest tip de hipersensibilitate fenomenele apar tardiv,
dup 24-72 ore sau chiar 10-20 zile de la contactul cu antigenul,
fenomenele fiind locale. Limfocite TDH (DH = delayed
hipersensitivity), sensibilizate de ctre un antigen, la un nou
contact cu acesta, vor elabora limfokine, care vor atrage n
focarul inflamator diverse celule mononucleare, mai ales
macrofage. De subliniat faptul c aceast form de
hipersensibilitate este mediat celular. Fenomenul poate fi indus
de ctre bacterii cu parazitism celular: Mycobacterium, Brucella,
Listeria, Salmonella, Treponema, de ctre fungi patogeni sau de
ctre parazii: Leishmania, Toxoplasma, Schistosoma,
Plasmodium etc., dar i de antigenele celulare non-self ale
grefelor, tumorilor sau ale virusurilor.
Exist mai multe tipuri de hipersensibilitate de tip tardiv:
* Hipersensibilitatea de tip tuberculinic
Const ntr-o reacie inflamatorie la locul de inoculare al
tuberculinei, care apare cu intensitate maxim la 24 - 48 de ore,
la un subiect care are imunitate fa de bacilul tuberculos n
urma infeciei sau dup vaccinarea BCG. Local apare un nodul
indurat, provocat prin infiltraiile cu celule mononucleare. Dup
aprox. 72 de ore, reacia diminu, dar uneori poate persista ca i
reacie de tip granulomatos. Prin intradermoreacia la
tuberculin sau PPD, prin tehnica Mantoux, se depisteaz
persoanele bolnave de tuberculoz.
Acest tip de reacii apar i n bruceloz, morv
(Maleomyces malei), schistosomiaz, histoplasmoz etc.

* Hipersensibilitatea de tip granulomatos

Apare n urma persistenei agentului infecios n interiorul
macrofagelor, din cauza imposibilitii acestora de a-l distruge.
n granulom, macrofagele sunt situate central, nconjurate de
limfocite i fibroblaste. Macrofagele pot fuziona cu
fibroblastele, genernd celule gigant, multinucleate. Exist o
hipersecreie de limfokine, cu rol de mesageri intracelulari,
principala celul secretoare fiind Lf TDH (delayed
hipersensitivity). Exemple din patologie: boala Crohn,
granulomul lepros sau tuberculos.
 Tabelul nr. 31 - Limfokine implicate n reacia de HT tip
IV.
Limfokina Mecanisme de aciune
MIF Factorul de inhibare al migrrii macrofagelor (imobilizeaz
macrofagele la locul reaciei respective)
MAF Factorul de activare al macrofagului - i poteneaz
acestuia capacitatea fagocitar i distructiv, prin creterea
secreiei de enzime lizozomale
MF Factor mitogenic
INF Activeaz macrofagul, formarea celulelor gigante
IL2 Stimuleaz proliferarea limfocitelor T

* Hipersensibilitatea de contact
Acest tip de reacie este provocat de ctre haptene care se
combin cu proteine ale organismului i care sensibilizeaz
limfocitele T, prin intermediul celulelor Langerhans din
epiderm. Reacia const ntr-un infiltrat cu celule mononucleare
care apare la 24 - 72 ore de la aplicarea epidermic a haptenelor.
Expresia clinic a acestei reacii const n dermatita de contact,
provocat de metale (nichel, cobalt), cauciuc, materiale plastice,
cosmetice, medicamente.
* Hipersensibilitatea cutanat bazofilic (reaciile Jones -
Mote)
Apare la 24 de ore de la contactul cu antigenul, infiltratul
predominnd n bazofile, reglarea realiznd-o limfocitele T
supresoare.
Aplicaiile practice ale reaciilor de hipersensibilitate de tip
IV:
* Evaluarea gradului de rezisten al organismului fa de
anumite infecii: tuberculoz, bruceloz, lues etc.
* Evaluarea rspunsului imun celular antitumoral.
* Precizarea compatibilitii donatorului cu cea a receptorului
de transplant.
* Testarea sensibilitii pielii fa de anumite alergene (praf
de cas, polen, compui organici etc.).

IMUNODEFICIENE

Deficitele imune pot fi clasificate n: afeciuni de tip primar

(congenitale, cu determinism genetic) i imunodeficiene
secundare (ctigate). n aceste situaii se remarc o
susceptibilitate crescut fa de infecii, cu ageni etiologici
variai.
Imunodeficienele primare pot afecta global imunitatea (IU
+ IMC) sau o pot afecta parial IU sau IMC). Aceste deficite
imunitare au fost grupate n 4 categorii:
deficitele imunitii umorale (ale limfocitelor B)
deficitele imunitii celulare (ale limfocitelor T)
deficitele sistemului complement
deficitele sistemului fagocitar
Exist i deficite imune mixte (ale limfocitelor T i B), la
nivelul celulelor precursoare. Astfel de afeciuni nu sunt
compatibile cu viaa (disgenezia reticular, agamaglobulinemia
de tip elveian)
Imunodeficienele primare ale limfocitelor B
- Hipogamaglobulinemia de tip Bruton
boal genetic prezent la sexul masculin
cu nivele sczute de IgG i IgA, cu imunitate celular
normal; clinic - infecii piogene cu etiologii variate
se poate trata cu gamaglobuline
- Deficienele imunologice selective
Defecte genetice nelegate de sex
- Deficiene selective n IgM, IgG sau IgA
Deficiena n IgG i IgA, cu IgM normal (este
disgamaglobulinemia de tip I)
Deficiena n IgM i IgA, cu IgG normal (tipul II de
disgamaglobulinemie)
Deficiena n IgG i IgM, cu IgA normal.
Deficitele imune n IgG i/sau IgM se asociaz cu infecii
grave. Imunodeficienele n IgA ar putea genera i boli
autoimune, cum ar fi artritele reumatoide, colitele ulcerative,
anemia hemolitic autoimun, astm bronic, alergii grave. La
unii indivizi, deficitul selectiv n IgAs se poate corecta prin
dimerizarea IgM, cu ataarea piesei J i a componentului
secretor (rezult IgMs).

Imunodeficienele primare ale limfocitelor T

Principalele sindroame clinice sunt:
Deficite predominante ale IMC
- Sindromul Di George
- Sindromul Wiscott - Aldrich
- Ataxia - teleangiectazia.
- Candidozele cronice cutaneo - mucoase.
 Deficite imunitare combinate.
- Deficitul n expresia moleculelor HLA de clasa a II-a
- Deficitele n proteinele de adeziune leucocitar
- Deficitul de activare al limfocitelor T
- Disgenezia reticular (alimfocitoza i agranulocitoza)
- Deficitul n precursorii limfocitelor T

Deficiene ale sistemului complement

Deficienele primare ale sistemului C' pot determina

susceptibilitate crescut la infecii i boli autoimune prin
complexe imune circulante.
Deficitele genetice n C1q, C2, C4, C3, C5, C8, C3b
inactivator se nsoesc de infecii recurente, n special piogenice.
Deficitele genetice n C1r, C1s, C5, C7, C8 se pot asocia i
cu lupusul eritematos sistemic sau fenomenul Raynaud.
Deficitul n C1INH (inactivatorul lui C1, factor de reglare
al activitii sistemului complement) cauzeaz edemul
angioneurotic ereditar. Aceti pacieni prezint o activare
exagerat a cii clasice a sistemului complement, cu eliberarea
fragmentelor vasoactive, care favorizeaz vasodilataia i
edemul. n localizarea laringeal, moartea apare prin asfixie.
Deficitul n C1INH se asociaz cu deficitele n C2 i C4.
Deficienele n C2 sunt cele mai frecvente, dar aprox. 50%
dintre acestea sunt asimptomatice, restul fiind colagenoze.
Deficienele n C3 i C5 se asociaz cu infecii bacteriene
severe.
Deficitele secundare ale sistemului C'
n majoritatea bolilor infecioase, nivelul sistemului
complement scade, probabil prin consum, prin fixare pe
complexe imune sau prin rolul de mediator al rspunsului
inflamator. Complexele imune induc scderea componentelor
C1q, C2, C3, C4. Scderea factorului C3 sub 10% fa de
normal reprezint o cauz favorizant a instalrii infeciilor cu
piogeni (ex.: meningite i pneumonii pneumococice). Factorul
nefritic, descris n 1969 de ctre Spizer, poteneaz clivarea
fraciunii C3, n prezena factorilor B i D ai cii alternative.
Acest factor nefritic cauzeaz o glomerulonefrit acut
postinfecioas sau se poate izola de la pacieni cu lupus
eritematos sistemic.
Hipocomplementia a mai fost observat i n endocardite
bacteriene subacute, n mononucleoz infecioas, malarie sau n
hepatita B; cauzele neinfecioase sunt: malnutriia, ciroza, ocul
endotoxinic.
 Deficiene ale funciei fagocitare
Deficienele fagocitozei intereseaz chemiotaxia, ingestia i
activitatea microbicid.
Deficienele chemiotaxiei se datoresc unor anormaliti
celulare, fiind nsoite de tulburri ale producerii de factori
chemiotactici. Sindroamele clinice se pot clasifica astfel:
Anormaliti celulare primare
- Sindromul Chediak Higashi
- Deficiene ale glicoproteinelor membranare i ale
asamblrii microtubulilor.
Anormaliti celulare secundare
- Scderea chemiotaxiei cu creterea IgE
- Anormaliti asociate cu diabetul zaharat
- Anormaliti asociate cu alte afeciuni
Deficiene umorale
- Anormaliti n producerea factorilor chemiotactici
- Absena antagonitilor inhibitorilor chemiotactici
Deficienele funcionale ale PMN (boala neutrofilelor
lenee) se caracterizeaz prin mobilitate celular sczut
nspre stimulii chemiotactici.
 Defectele funciei fagocitare se traduc prin scderea
capacitii de distrugere a microorganismelor fagocitate.
Absena NADH oxidazei din PMN, duce la incapacitatea
acestora de a distruge bacteriile fagocitate. Funcionarea
defectuoas a mecanismelor exploziei respiratorii, diminueaz
efectele bactericide, cu apariia unor inflamaii cronice de tip
granulomatos, care se pot complica prin abcese.
Neutropenia i deficienele funcionale fagocitare se
exprim clinic printr-o susceptibilitate crescut la infecii
bacteriene, cu localizri respiratorii i cutanate.
Imunodeficienele secundare apar ca i o consecin a altor
afeciuni, putnd afecta separat sau mixt, imunitatea umoral
i cea mediat celular.
Malnutriia energo-proteic produce alterri ale imunitii
mediate celular, cu modificri ale populaiilor limfocitare.
Carena n proteine afecteaz sinteza optim de anticorpi
(structuri glicoproteice).
Infeciile bacteriene, virale sau parazitare diminueaz
capacitatea de rspuns imun, mai probabil prin suprasolicitare.
Spre exemplu, o in-fecie viral diminueaz rspunsul imun
mediat celular, terenul fiind lsat descoperit pentru o infecie
bacterian ulterioar. Este aa-zisul sinergism virus - bacterie
(spre exemplu, o infecie gripal poate fi urmat de o infecie
pulmonar cu Haemophylus influenzae).
 SIDA reprezint un caz particular de imunodeficien viral
dobndit. Distrugerea limfocitelor TCD4 (lf TH) produce o
imunosupresie a IMC, cu apariia infeciilor oportuniste cu
bacterii (ex.: Mycobacterium, Salmonella), virusuri (v.
Citomegalic, v. Epstein - Barr, v. herpes simplex), parazii
(Toxoplasma, Cryptosporidium etc.) i fungi (Candida).
Imunodeficienele secundare pot fi provocate i prin terapia
imunosupresiv (corticosteroizi, radiaii), ageni citotoxici i
afeciuni cu pierderi de proteine (sindrom nefrotic, ciroze,
enteropatii).

AUTOIMUNITATEA

Definete rspunsul imun neadecvat fa de stimulii

antigenici self, prin suprimarea mecanismelor normale de
toleran fa de structurile proprii. Rspunsul imun fa de
propriile structuri poate fi umoral (prin autoanticorpi) sau celular
(prin procesele hipersensibilitii de tip tardiv, prin mecanisme
citotoxice). Conflictul imunologic se manifest clinic prin
apariia unor boli autoimune. Pentru definirea acestui tip de
boal, trebuiesc identificate autoantigenele i mecanismele
patogenice de producere, aspecte care trebuie s se confirme i
experimental. Spre exemplu, patologia encefalitei alergice a fost
demonstrat prin imunizarea animalelor cu proteina mielinic de
baz (MBP); s-a indus o demielinizare inflamatorie similar cu
cea din scleroza multipl.

Autoantigenele pot deveni imunogene prin:

modificarea antigenelor celulare de suprafa
mimare molecular (reacii ncruciate cu antigene strine)
eliberarea n circulaie a antigenelor self sechestrate (ex.:
din cristalin, testicul, tiroid etc.)
anomalii de imunoreglare la nivelul sistemului limfoid (ex.:
clone de limfocite T interzise i reactive, ineficiena
limfocitelor T supresoare, existena unor clone anormale de
limfocite B, hiper-reactive).
Infeciile virale provoac formarea de autoanticorpi destul
de frecvent. Antigenele virale i structurile self se pot asocia,
dnd natere unor noi antigene, spre exemplu se pot forma
complexe cu antigenele de histocompatibilitate sau cu
actomiozina membranar. Infeciile bacteriene altereaz mai
puin structurile celulare, n schimb lipopolizaharidele
bacteriene stimuleaz puternic producia celulelor B competente.
Excesul de anticorpi determin apariia unui exces de complexe
imune circulante, cu depunerea acestora n esuturi i cu
activarea sistemului complement.
 Autoimunitatea indus de medicamente recunoate
prezena unor haptene (medicamentul, substana strin) care se
leg de structurile self, cu apariia unor autoantigene.
Exist predispoziie genetic demonstrat pentru boli
autoimune. Prin complexul major de histocompatibilitate clasa a
II-a se selecioneaz epitopii. Activatorii sau represorii
transcripionali ai moleculelor CMH clasa a II-a se afl sub
controlul unei familii de gene care se afl sub influena unor
stimuli intracelulari (ex.: virali) sau extracelulari (oc termic).
Aceti stimuli pot produce mutaii n secvenele de control ale
genelor CMH i apariia unor molecule cu potenial
autoimunogen. Genele pentru complement i pentru receptorii
acestuia pot fi alterate n unele boli autoimune, fapt care explic
leziunile specifice.

Clasificarea bolilor autoimune (B.A.I)

B.A.I organ - specifice: antigenele respective sunt
cantonate ntr-un singur organ, care prezint manifestri
inflamatorii cronice specifice.
B.A.I. non organ specifice, sistemice: implic
autoantigene situate pe esuturi variate. Modificrile
imunopatologice sunt generalizate.
B.A.I. non - organ specifice, cu leziuni restrnse - leziunile
afecteaz puine organe.
Exemplificri

B.A.I. organ - specifice

- Tiroida Hashimoto - distrucia autoimun a acinilor
tiroidieni; apar anticorpi anti tireoglobulin i anticoloid
tiroidian.
- Tireotoxicoza - Apare o imunoglobulin din clasa G,
cunoscut ca stimulator tiroidian cu aciune prelungit.
- Anemii hemolitice autoimune - Sunt produse prin
autoanticorpi orientai mpotriva unor antigene eritrocitare de
suprafa. Autoanticorpii la cald (interacioneaz cu antigenele
la 37oC) i aparin clasei IgG, sunt aglutinine. Autoanticorpii
la rece aparin clasei IgM i sunt hemolizine.
- Gastritele atrofice autoimune - leziunile sunt provocate prin
autoanticorpi anticelul parietal gastric i prin anticorpi
antifactor intrinsec. Ambele tipuri de anticorpi mpiedic
absorbia intestinal de vitamin B12.
- Vitiligo - produs prin autoanticorpi anti melanocite
- Pemfigus - leziunile apar prin autoanticorpi anti
antidesmozomi.
- Azoospermia - anticorpi anti spermatozoizi.
- Insuficiena ovarian - autoanticorpi anti corpus luteum.

B.A.I. non organ specifice, sistemice

- Lupusul eritematos sistemic - cu manifestri cutanate,
articulare, seroase, renale, hematopoetice produse prin
autoanticorpi antinucleari (anti ADN, anti ARN - proteine),
concomitent cu creterea secreiei de IL2 cu efect proliferativ
asupra celulelor B. Este foarte important i rolul
complementului ca factor lezional, prin aciunea asupra
complexelor antigen - anticorp depuse la nivel tisular. Probabil
etiologia bolii este multifactorial (factori infecioi virali sau
bacterieni: Streptococcus pyogenes, factori de mediu i factori
genetici CMH). Investigaiile imunologice evideniaz:
celula lupic (celula LE - PMN cu nucleu alterat)
rozeta lupic (rozet de PMN n jurul celulei LE) cu scopul
realizrii fagocitozei
anticorpi antinucleari
- Artritele reumatoide - cu etiologie multifactorial (factori
genetici HLA - DR4, DR32 etc., factori endocrini sau
infecioi). Boala apare cu frecvena maxim la 40 - 50 ani,
femeile fiind mai des afectate dect brbaii.
 Factorul reumatoid este o IgM anti IgG uman. Se
formeaz complexe imune n exces. Se activeaz sistemul
complement, cu apariia fenomenelor inflamatorii i apoi
necrotice. Reacia inflamatorie este potenat i prin eliberarea
aminelor vasoactive, activarea mediatorilor plasmatici,
infiltrarea local cu PMN, limfocite T CD4 i CD8. esutul
sinovial se hipertrofiaz, se hipervascularizeaz, se asociaz cu
cheaguri de fibrin (aspect morfopatologic tip panus vascular).
Procesul inflamator se cronicizeaz. IL1 are rol important n
producerea leziunilor prin provocarea eliberrii de
prostaglandine (PGE2) i proliferarea celulelor endoteliale i a
osteoclastelor (resorbie osoas).
Complicaiile sunt destul de frecvente: noduli reumatici,
vasculite, afeciuni pulmonare (sindrom Caplan), afeciuni
oculare (iridociclita, scleromalacia perforans), afeciuni
neurologice i cardiovasculare, amiloidoza, rupturi de tendoane.
Diagnosticul de laborator evideniaz prezena factorului
reumatoid (FR) - testul latex i reacia Waaler - Rose, creterea
proteinei C reactive i hipergamaglobulinemie. Anticorpii
antinucleari apar n 15 - 50% din cazuri (AC anti histone).
- Sclerodermia - apare prin anticorpi anti topoizomeraz I,
an-ticolagen I i IV i prin anticorpi antinucleari.
- Polimiozita - produs prin autoanticorpi antiaminoacil t-
ARN sintetaza.
 B.A.I. non organ - specifice, cu leziuni restrnse
- Ciroza biliar primitiv - se caracterizeaz prin colestaz
intrahepatic, prurit, icter, hepato-splenomegalie. Boala apare
prin aciunea autoanticorpilor antimuchi neted, antinucleari i
anti-mitocondriali. Ultimii anticorpi menionai acioneaz i
asupra rinichilor i asupra celulelor parietale ale stomacului.
- Hepatita cronic agresiv - se caracterizeaz printr-o
necroz a hepatocitelor prin autoanticorpi antihepatocite,
autoanticorpi antimitocondriali i antinucleari. Mecanismul
citotoxicitii se manifest prin celule ADCC.

Terapia bolilor autoimune

Este o terapie imunosupresoare neselectiv (substane
imunosupresoare, corticosteroizi) sau selectiv (cu anticorpi
monoclonali anti CD4, anti CD5, anti CD25, anti receptor T,
antimolecule de adeziune, anti molecule CMH clasa II,
anticitokine etc).
Agenii imunosupresori mai frecvent folosii sunt
Azatioprina, Ciclofosfamida, Ciclosporina A, Metothrexat-ul.
Ciclofosfamida acioneaz preferenial asupra limfocitelor B, iar
Azatioprina i Ciclosporina A inhib funcia limfocitelor T.
Metotrexatul inhib funcia ambelor tipuri de limfocite.
Vaccinul T are un efect preventiv. Clonele patogene sunt
tratate chimic pentru ca TCR s devin imunogen pentru a
determina un rspuns imun puternic al limfocitelor TCD8
(citotoxice), care vor distruge limfocitele T patogene. Acest
tip de vaccin este nc experimental, orientat mpotriva
encefalitelor autoimune. La om este extrem de dificil de izolat
clona patogen de limfocite T.
Asociat imunoterapiei supresoare, substanele
antiinflamatoare sunt bine venite. Se pot utiliza n tratament i
antagoniti ai receptorilor pentru IL1 i inhibitori ai factorilor
chemiotactici, precum inhibitori de IL8 i
MCP-1. Reducerea activitii citokinelor respective determin
scderea infiltratului inflamator, mai ales la nivelul articulaiilor.
Patogeneza bolilor autoimune este extrem de complex i
insuficient cunoscut, motiv pentru care i terapia nu este n
totalitate eficient.