Compoziția chimică , potențialul antioxidant in vitro și

activită țile antimicrobiene ale uleiurilor esențiale și

hidrosolilor din strugurii nativi americani Muscadine
Vasil Georgiev , 1, * Anthony Ananga , 2, 3 Ivayla Dincheva , 4 Ilian Badjakov , 4 Velizar
Gochev , 5 și Violeta Tsolova 2
 Informații despre autor Note despre articol Informații privind drepturile de autor și
licență Declinare a răspunderii

Mergi la:

Abstract

Uleiuri esențiale și hidrosoli din două soiuri de struguri muscadine

( Muscadinia rotundifolia(Michx.) Mici.) au fost obținute prin hidro-
distilarea florilor și a cojilor de boabe. Două zeci și trei de compuși
volatili au fost identificați în uleiurile esențiale din florile de
muscadină și două zeci de substanțe volatile în hidrosolii
corespunză tori. Compoziția substanțelor volatile din cojile de boabe a
fost semnificativ diferită de cea a florilor de viță de vie. Potențialul
antioxidant al uleiurilor și hidrosolurilor esențiale investigate a fost
evaluat folosind cinci teste in vitro: metoda DPPH (2,2-difenil-1-
picrilhidrazil), TEAC (capacitate antioxidantă echivalentă Trolox),
FRAP (putere antioxidantă reducă toare a fericului), CUPRAC (cupric).
capacitatea antioxidantă reducă toare de ioni) și NO (testul de captare
a radicalilor de oxid nitric). Uleiurile esențiale din florile ambelor
soiuri au ară tat cea mai puternică putere antioxidantă , în timp ce
hidrosolii au fost semnificativ mai puțin activi.Bacillus
cereus , Staphylococcus aureus , Escherichia coli și Pseudomonas
aeruginosa . Cu toate acestea, uleiurile esențiale din florile ambelor
soiuri au prezentat activită ți antifungice moderate împotriva Candida
albicans ., care au fost mai puternice pentru uleiul de la „Carlos” (soiul
de muscadină albă ). Din câ te cunoștințele noastre, acesta este primul
raport privind obținerea și caracterizarea uleiurilor esențiale și
hidrosolilor din struguri muscadin. Acest studiu a demonstrat
variațiile compușilor aromatici acumulați în flori și coajele mature ale
boabelor de struguri muscadine și a evaluat posibilele lor activită ți
antioxidante și antimicrobiene. Rezultatele prezentate vor sta la baza
cercetă rilor viitoare, axate pe o mai bună înțelegere a mecanismelor
moleculare și de reglare implicate în biosinteza și acumularea
compușilor aromatici în strugurii muscadin.

Cuvinte cheie: Vitis rotundifolia Michx., compuși volatili, coajă de

struguri, activitate antifungică
Mergi la:

1. Introducere

Uleiurile esențiale sunt amestecuri de compuși volatili din plante cu

mirosuri distinctive. Pe lâ ngă aplicațiile lor tradiționale ca ingrediente
de parfum în produsele cosmetice și de parfumerie, în ultimul deceniu,
un numă r tot mai mare de uleiuri esențiale a fost studiat pentru
posibile aplicații în medicină , aromoterapie, pentru prelungirea
termenului de valabilitate a produselor alimentare sau în agricultură ,
ca biopesticide [ 1 , 2 , 3 , 4 , 5 ]. De obicei, la temperatura camerei,
majoritatea uleiurilor esențiale sunt lichide care sunt insolubile sau au
o solubilitate foarte scă zută în apă [ 6 ]]. Uleiurile esențiale pot fi
obținute din plante aromatice prin diferite metode; Au fost raportate
distilare cu abur, hidro-distilare, extracție cu solvent, extracție Soxhlet,
distilare-extracție simultană , extracție cu microunde fă ră solvent și
extracție cu halocarburi (Freon) [ 7 , 8 ]. Cu toate acestea, hidro-
distilarea este cea mai populară metodă clasică . Prin această metodă
se pot obține atâ t ulei esențial, câ t și hidrosol. Hidrosolul este faza de
apă distilată după separarea uleiului esențial [ 9 ]. Chiar dacă
hidrosolii sunt un produs secundar al procesului de distilare a
uleiurilor esențiale, ei conțin totuși anumite cantită ți de substanțe
volatile polare sau parțial miscibile cu apa și pot avea proprietă ți
aromatice valoroase sau activită ți biologice [ 10 ].]. Majoritatea
uleiurilor esențiale au prezentat activită ți antioxidante și/sau
antimicrobiene remarcabile, ceea ce le-a fă cut obiecte atractive pentru
dezvoltarea de aditivi naturali pentru îmbună tă țirea calită ții
alimentelor, sau pentru includerea ca substanțe active în produse
cosmeceutice [ 6 , 11 , 12 , 13 ].

Strugurii sunt una dintre cele mai importante culturi de fructe din
lume. Datorită formă rii aromei vinului, studiul substanțelor volatile
din struguri este foarte important în vinicultură . Pâ nă în prezent,
majoritatea eforturilor de cercetare s-au concentrat pe investigarea
compozițiilor volatile ale boabelor de struguri, sucurilor, vinurilor și
musturilor și se cunosc foarte puține lucruri despre volatilele din flori
sau alte pă rți ale viței de vie [ 8 , 14 , 15 , 16 , 17 ]. Cu toate acestea,
cele mai multe investigații ale compușilor volatili din struguri au
implicat aplicarea analizei spațiului de cap, care nu permite colectarea
uleiurilor esențiale și nu poate fi utilizată pentru evaluarea activită ților
biologice.

Muscadina ( Muscadinia rotundifolia (Michx.) Small.) a fost prima

specie de struguri nativă cultivată în Statele Unite [ 18 ]. Strugurii
muscadine diferă semnificativ de strugurii europeni ( Vitis vinifera L.)
nu numai prin fiziologia lor, compoziția fitochimică , toleranța la boli,
aromă și gust, ci și prin numă rul de cromozomi somatici (40 ( n = 20)
în muscadină vs. 38 ( n = 19) la strugurii europeni)
[ 19 , 20 ]. Muscadinele sunt bine cunoscute pentru efectele lor de
promovare a să nă tă ții datorită amestecului lor unic de substanțe
fitochimice cu activită ți biologice remarcabile [ 18 ].]. Cu toate acestea,
se cunosc foarte puține despre compușii volatili, responsabili de
formarea aromei specifice de muscadină [ 21 , 22 , 23 ]. Din câ te
cunoștințele noastre, pâ nă în prezent nu au existat cercetă ri axate pe
caracterizarea compoziției chimice și a activită ților biologice ale
uleiurilor esențiale și hidrosolurilor din strugurii muscadin.

În acest studiu, uleiurile esențiale și hidrosolii din flori și coajă de

fructe de pă dure a două soiuri de muscadine, Muscadinia
rotundifolia roșie (Michx.) Small., soiul „Noble”, și galbenul Muscadinia
rotundifolia (Michx.) Small., soiul „Carlos” , au fost obținute prin hidro-
distilare. Compozițiile chimice ale uleiurilor și hidrosolurilor esențiale
obținute au fost determinate folosind tehnica cromatografie gazoasă -
spectrometrie de masă (GC-MS), și au fost evaluate potențialul
antioxidant și activită țile antimicrobiene ale acestora.
Mergi la:

2. Rezultate și discuții
2.1. Compoziții de uleiuri esențiale și hidrosoli
Flori și fructe de pă dure coapte din soiul roșu, Noble, și soiul galben,
Carlos, de struguri muscadin au fost colectate și utilizate pentru
distilarea uleiurilor esențiale (figura 1).

figura 1
Flori ( a ) și boabe coapte ( c ) de galben M. rotundifolia (Michx.) Mici. soiul „Carlos”, și
flori ( b ) și boabe coapte ( d ) de M. rotundifolia roșie (Michx.) Mici. soiul „Nobil”.

Florile de la ambele soiuri au fost colectate în timpul fazei de

înflorire. Maturitatea boabelor de muscadină a fost evaluată pe baza
pH-ului, acidită ții titrabile și conținutului de zahă r. Boabele din soiul
Carlos au fost colectate câ nd au atins pH-ul 2,99, o aciditate titrabilă
(TA) de 4,3 g/L și un conținut de zahă r de 13,49° Brix. În mod similar,
boabele din soiul Noble au fost colectate câ nd au atins pH-ul 3,05, o
aciditate titrabilă a (TA) de 4,2 g/L și un conținut de zahă r de 14,30°
Brix. Cojile boabelor au fost separate de pulpe și folosite pentru
distilare.
Randamentele obținute pentru uleiurile esențiale din florile Carlos și
florile nobile au fost de 0,56 ± 0,002% ( g / g ) și 0,90 ± 0,048%
( g / g ) (conținutul uscat de flori proaspete înainte de distilare a fost
de 33,98% pentru Carlos și 31,78% pentru Nobil). Randamentele
obținute pentru uleiurile esențiale din pielea de boabe Carlos și Noble
au fost de 0,012 ± 0,0001% ( g / g ) și 0,010 ± 0,0007% ( g / g ).)
(conținutul uscat de coajă de fructe de pă dure înainte de distilare a
fost de 18,91% pentru Carlos și 19,66% pentru Noble). Volumele de
hidrosoli colectați pentru toate uleiurile au fost egale - 100
ml. Randamentele mai mici de ulei obținute din cojile de boabe de
struguri de muscadină le definesc ca o sursă ineficientă pentru hidro-
distilarea comercială a volatilelor de viță de vie.

Compoziția calitativă a uleiurilor și hidrosolurilor este prezentată

întabelul 1. În total, 23 de compuși volatili au fost identificați în
uleiurile esențiale din florile de muscadină (reprezentâ nd 81,66–
83,79% din TIC) și 20 de substanțe volatile (reprezentâ nd 93,46–
93,46% din TIC) au fost gă site în hidrosolii corespunză tori (tabelul
1). Uleiurile esențiale din coajele de fructe de pă dure au prezentat
profiluri chimice semnificativ diferite, în care au fost identificate 20 de
substanțe volatile în uleiuri (reprezentâ nd 67,72–80,81% din TIC) și 7
compuși (reprezentâ nd 94,77–95,23% din TIC) au fost gă siți în
corespunză toare lor. hidrosoli. Compușii majori (mai mare de 4%),
gă siți în uleiurile esențiale din florile ambelor soiuri au fost similari, cu
doar ușoare variații în cantită ți: valencene (39,71% la Noble și 34,32%
la Carlos), germacrene D (4,48% la Noble). și 6,94% în Carlos), α-
selinenă (3,28% în Noble și 4,29% în Carlos) și α-cadinol (2,86% în
Noble și 4,30% în Carlos). Pe de altă parte, compozițiile chimice ale
hidrosolurilor de flori diferă semnificativ de cele ale uleiurilor de
flori. Compușii majori identificați au fost: α-terpineol (12,22% în Noble
și 10,39% în Carlos), β-linalool (10. 73% în Noble și 12,44% în Carlos),
4-hidroxi-3-metilacetofenonă (18,94% în Noble și 6,56% în Carlos),
3,4,5-trimetoxitoluen (7,42% în Noble și 4,65% în Carlos) și 1 ,3,5-
trimetioxibenzen (5,04% la Noble și 3,09% la Carlos). În plus, compuși
precum 4-hidroxi-3-metilacetofenona, 3,4,5-trimetoxitoluen, 1,3,5-
trimetioxibenzen, elemicină , nerolidol, ledol și camfor de ienupă r au
fost detectați numai în hidrosoli, dar nu și în uleiurile esențiale din
flori de muscadin. Datorită diferențelor semnificative în compoziția
uleiului esențial și a hidrosolilor respectivi, au fost de așteptat
activită ți biologice diferite. În plus, compuși precum 4-hidroxi-3-
metilacetofenona, 3,4,5-trimetoxitoluen, 1,3,5-trimetioxibenzen,
elemicină , nerolidol, ledol și camfor de ienupă r au fost detectați numai
în hidrosoli, dar nu și în uleiurile esențiale din flori de
muscadin. Datorită diferențelor semnificative în compoziția uleiului
esențial și a hidrosolilor respectivi, au fost de așteptat activită ți
biologice diferite. În plus, compuși precum 4-hidroxi-3-
metilacetofenona, 3,4,5-trimetoxitoluen, 1,3,5-trimetioxibenzen,
elemicină , nerolidol, ledol și camfor de ienupă r au fost detectați numai
în hidrosoli, dar nu și în uleiurile esențiale din flori de
muscadin. Datorită diferențelor semnificative în compoziția uleiului
esențial și a hidrosolilor respectivi, au fost de așteptat activită ți
biologice diferite.

tabelul 1
Compoziția chimică a uleiurilor esențiale și hidrosolurilor din două  M.
rotundifolia (Michx.) Mici. soiuri.

Indicele % din TIC

de EO HY
Compus retenție EO, EO, EO, HY, HY, HY,
*, **,
calculat Nob- Car- Nob- Nob- Car- Nob-
Car- Car-
(Kovats) F B B F B B
F F
Eucaliptol 1031 - - 1.28 0,15 - - - -
β-linalool 1097 0,29 0,11 8,69 5,95 12.44 10.73 7,62 6.50
Myrcenol 1117 - - 5.10 0,08 - - - -
allo -Ocimene 1130 - - 14.05 0,23 - - - -
β-terpineol 1145 - - 1.17 - - - 5.33 6.29
p -Cimen-8-ol 1184 - - - - - - 13.38 7.08
α-terpineol 1190 0,18 0,07 45,42 59,43 10.39 12.22 65,41 72,83
cis -Geraniol 1227 - - 0,86 0,10 1.21 0,15 1.29 1.20
trans -Geraniol 1256 - - 1,38 0,96 2,97 1,58 1.17 0,88
4-hidroxi-3-
metil 1322 - - - - 6,56 18.94 - -
acetofenonă
α-Cubebene 1349 0,13 0,15 - - - - - -
Eugenol 1355 - - 1,69 0,08 - - 1.03 -
Ylangen 1371 0,27 0,69 - - - - - -
α-Copaen 1376 0,41 0,35 - - - - - -
trans -β- 1381 - - 0,87 0,09 - - - -
 Indicele % din TIC
de EO HY
Compus retenție EO, EO, EO, HY, HY, HY,
*, **,
calculat Nob- Car- Nob- Nob- Car- Nob-
Car- Car-
(Kovats) F B B F B B
F F
Damascenonă
3,4,5-trimetoxi
1398 - - - - 4,65 7.42 - -
toluen
1,3,5-trimetioxi
1416 - - - - 3.09 5.04 - -
benzen
β-cariofilenă 1419 3.48 3,72 - - - - - -
(+)-
1439 3.01 3.49 - - - - - -
Aromadendrene
β-Farnesene 1444 2,79 3,72 - - - - - -
α-humulenă 1455 1,64 1.45 - - - - - -
allo -
1462 2,74 3.11 - - - - - -
Aromadendrene
Germacrene D 1479 6,94 4,48 - - - - - -
β-selinenă 1486 3.43 3,75 - - - - - -
Valencene 1490 34.32 39,71 - - - - - -
α-Selinenă 1495 4.29 3.28 - - - - - -
α-Farnesene 1505 2.26 1.29 - - - - - -
α-Selinene, 7-
1517 3.28 2.03 - - 0,35 2,69 - -
epi
α-Cadinene 1539 2.16 2,88 - - - - - -
Elemicină 1555 - - - - 1.23 0,09 - -
Nerolidol 1564 - - - - 0,35 0,12 - -
Ledol 1565 - - - - 0,46 0,25 - -
Globulol 1585 1,53 0,82 - - 3,92 0,60 - -
Veriflorol 1589 - - 0,29 0,65 0,22 0,16 - -
Humulen epoxid
1606 2.21 1.42 - - 0,29 2,97 - -
II
Asarone 1623 - - - - 2.32 0,10 - -
epi -α-Cadinol 1641 1.03 0,68 - - 2,85 4.36 - -
epi -α-Muurolol 1643 1.45 1.08 - - 8,77 6.18 - -
Torreyol 1646 1,64 0,54 - - 3.00 2,74 - -
α-Cadinol 1654 4.30 2,86 - - 22.56 14.26 - -
Camfor de
1690 - - - - 5,83 3.19 - -
ienupăr
Deschide într-o fereastră separată
Car-F—Carlos flori; Car-B — Coji de boabe Carlos; Nob-F—Flori nobile; Nob-B — Piei
nobile de fructe de pă dure; * EO—ulei esențial; ** HY—hidrosol.

Compozițiile volatile ale uleiurilor esențiale din coajele de boabe de

muscadină diferă semnificativ de cele ale uleiurilor esențiale din florile
de muscadină (tabelul 1). Compușii majori identificați în uleiurile
esențiale din pielea fructelor de pă dure au fost: α-terpineol (59,43% în
Noble și 45,42% în Carlos), β-linalool (5,95% în Noble și 8,69% în
Carlos), alo -ocimen (0,23% în Noble ). și 14,05% în Carlos) și mircenol
(0,08% în Noble și 5,10% în Carlos). Ultimii doi compuși s-au
prezentat în cantită ți semnificativ mai mari în pielea de boabe
Carlos. Absența valenenei și a germacrenei D (principalele volatile din
uleiurile de flori) ar putea fi explicată prin reglarea transcripțională a
genurilor (+)-valencen sintaza și (-)-germacren D sintază , ale că ror
niveluri de expresie au un maxim în floarea de viță de vie. mugurii, dar
s-a descoperit că scad în primele etape de dezvoltare a fructelor [ 24 ].

Similar cu hidrosolii din florile de muscadină , compușii majori din

hidrosolii de coajă de boabe au fost α-terpineol (72,83% în Noble și
65,41% în Carlos) și β-linalool (6,50% în Noble și 7,62% în Carlos)
(tabelul 1). Un studiu recent headspace-SPME-GC-MS asupra boabelor
de struguri din soiul „Baga” de Vitis vinifera L. a ară tat că cantită țile de
α-terpineol și linalol din boabe au crescut în timpul coacerii și au
scă zut în etapele de postmaturare [ 25 ]. În cercetarea noastră , am
demonstrat că în strugurii de muscadină , α-terpineolul și linalolul au
ră mas compușii volatili majori în boabele mature. De asemenea, am
gă sit o cantitate relativ mare de alo -ocimenă în coajele de fructe de
pă dure ale soiului Carlos. S-a raportat că  alo -ocimenul sporește
rezistența împotriva ciupercii necrotrofice Botrytis
cinerea la Arabidopsis thaliana [ 26 ]. Concentrațiile mari observate
de allo-ocimenul din cojile de boabe de struguri Carlos ar putea fi unul
dintre factorii fitochimici responsabili pentru rezistența crescută la
boli a acestui soi de muscadine. Cu toate acestea, sunt necesare mai
multe cercetă ri pentru a confirma rolul acestui compus volatil în
apă rarea muscadinei.

Analiza componentelor principale (PCA) a fost utilizată pentru a studia

principalele surse de variabilitate între uleiurile esențiale și hidrosolii
din florile de muscadină și coajele de fructe de pă dure ale soiurilor
Carlos și Noble (Figura 2).

Figura 2
Scree plot ( a ) și scor plot a primelor două componente principale ( b ), identificate prin
analiza componentelor principale (PCA) a compușilor volatili din uleiurile esențiale și
hidrosolii din două  M. rotundifolia (Michx.) Small. soiuri.

Analizele datelor au ară tat că primele cinci componente principale

aveau valori proprii mai mari de 1 (Figura 2A). Aceste cinci
componente explică 97,9% din variația datelor.Figura 2b arată graficul
de scor al primelor două componente principale. Prima componentă
principală (PC1) a avut o valoare proprie de 18,385 și a explicat 44,8%
din variația datelor, în timp ce a doua componentă principală (PC2) a
avut o valoare proprie de 12,608 și a explicat 30,8% din variația
datelor. PC1 a avut asocieri pozitive mari cu β-linalool și transgeraniol ,
în timp ce PC2 a avut asocieri pozitive mari cu 4-hidroxi-3-
metilacetofenona, 3,4,5-trimetoxitoluen, 1,3,5-trimetioxibenzen,
elemicină , nerolidol, ledol , globulol, epi -α-cadinol, epi -α-muurolol,
toreyol, α-cadinol și camfor de ienupă r. După cum se arată înFigura 2b,
prin PC1 a fost posibil să se distingă uleiurile esențiale din florile
ambelor soiuri de hidrosolii lor și uleiurile esențiale și hidrosolii din
pielea de fructe de pă dure. Cu toate acestea, separarea dintre uleiurile
esențiale și hidrosolii obținute din coajele de fructe de pă dure ale
soiurilor de muscadine Noble și Carlos a fost neclară .

2.2. Evaluarea potențialului antioxidant

Potențialul antioxidant al uleiurilor esențiale și hidrosolilor din flori și
coji de fructe de pă dure de M. rotundifolia (Michx.) Small. Soiurile
Noble și Carlos au fost evaluate folosind cinci metode in vitro bazate
pe diferite mecanisme de reacție: două metode de captare a radicalilor
liberi, utilizâ nd atâ t mecanisme de reacție cu transfer de electroni, câ t
și mecanisme de transfer de atom de hidrogen (DPPH și TEAC), două
metode de reducere a ionilor, utilizâ nd doar un singur mecanismul de
reacție de transfer de electroni (FRAP și CUPRAC) și activitatea de
captare a radicalilor de oxid nitric (NO), utilizâ nd mecanismul de
reacție de transfer de electroni cu pierdere secvențială de protoni
[ 27 , 28 ]]. Dintre aceste metode, metodele DPPH și TEAC s-au
caracterizat prin cea mai scă zută specificitate față de natura
antioxidanților, dar cu o bună sensibilitate și o repetabilitate
ridicată . Metodele CUPRAC și FRAP au fost mai selective, foarte
sensibile și mai precise, deoarece se bazează pe un mecanism de
reacție cu un singur electron, în timp ce analiza activită ții de captare a
NO a avut cea mai mică limită de detecție. Datele sunt prezentate
înmasa 2. În general, uleiurile esențiale au ară tat un potențial
antioxidant mult mai puternic în comparație cu hidrosolii. Uleiul
esențial din florile Carlos a prezentat cele mai puternice activită ți
antioxidante în toate testele, urmat de uleiul esențial din florile de
Noble (masa 2). Ambele uleiuri au fost antioxidanți semnificativ mai
puternici ( p ≤ 0,01) decâ t controlul pozitiv (acid galic) (masa 2). Toate
uleiurile au ară tat o capacitate semnificativ mai slabă de a elimina
radicalul DPPH în comparație cu acidul galic (valoarea DPPH de
15.004,86 ± 43,05). Acest lucru ar putea fi explicat prin faptul că testul
se bazează pe o reacție necompetitivă , iar DPPH-ul în sine ar putea
servi atâ t ca sondă de radicali, câ t și ca oxidant și, prin urmare, mulți
antioxidanți pot reacționa lent și pot fi chiar inerți la radicalul DPPH
[ 28 ]. ]. Valorile ridicate observate ale testului CUPRAC s-au datorat
probabil procesului de rulare al ciclului redox din cauza celui mai
scă zut potențial redox al sistemului CUPRAC, care ar putea fi
considerat o indicație pentru prezența compușilor cu acțiune pro-
oxidantă în aceste uleiuri [ 28 ]. ]. Cele patru uleiuri esențiale au
prezentat o capacitate semnificativ mai mare ( p≤ 0,01) pentru a
elimina radicalul oxid nitric decâ t martorul pozitiv (acid galic). Mai
mult, uleiurile esențiale din pielea de fructe de pă dure au prezentat
cele mai mari activită ți de captare a oxidului nitric, cu EC 50 = 10,0 ± 0,
2 mg pentru Carlos și EC 50 = 10,0 ± 0, 4 mg pentru uleiurile de piele de
fructe de pă dure nobile (masa 2). Controlul nivelului de oxid nitric este
un proces fiziologic foarte important, deoarece are funcții de
semnalizare, de reglare și de protecție. Cu toate acestea, atunci câ nd
concentrația locală de oxid nitric este crescută în anumite condiții,
poate iniția formarea de specii de oxid de azot, cum ar fi radicalii
nitroxil și peroxinitrit, care pot deteriora moleculele biologice
[ 29 ]. Controlul nivelului de oxid nitric este foarte important în
dermatologie; acest compus a fost asociat cu eritem, melanogeneză ,
boli inflamatorii ale pielii și cancer de piele [ 29 , 30 ]. Recent, s-a
raportat că oxidul nitric este o parte importantă a mecanismelor de
apă rare a nevertebratelor împotriva paraziților, virușilor și bacteriilor
[ 31 ].

masa 2
Activită țile antioxidante ale uleiurilor esențiale și hidrosolilor din două  M.
rotundifolia (Michx.) Mici. soiuri.

DPPH, uM TEAC, µM FRAP, uM CUPRAC, µM NO, EC 50 **,

Probă Trolox Trolox Eq./g Trolox Trolox Eq./g mg Ulei; µL
Eq./g ulei ulei Eq./g ulei ulei Hidrosol
3173,7 ± 112.986,5 ± 56.286,3 ± 1.141.694,4 ±
EO, Car-F 20,0 ± 0,1 * , d
326,4 * , a 742,3 * , a 466,5 * , a 2455,9 * , a
2549,3 ± 79.276,3 ± 43.884,9 ± 878.509,6 ±
EO, Nob-F 20,0 ± 0,1 * , d
308,8 * , a,b 431,7 * , b 336,9 * , b 1901,9 * , b
2964,7 ± 4239,0 ± 12.400,8 ± 649.043,4 ±
EO, Car-B 10,0 ± 0,2 * , d
116,5 * , a 162,9 * , c 160,0 * , c 1753,3 * , c
1712,0 ± 1382,3 ± 7964,2 ± 575.580,6 ±
EO, Nob-B 10,0 ± 0,0 * , d
256,8 * , b 108,9 * , d 352,5 * , d 2160,2 * , d
1720,0 ± 0,1
HY, Car-F 33,5 ±c 0,7 *  71,8 ± 2,3 * , 22,1 ± 0,6 * ,
,
1,2 ± 0,0 * , de ex
de ex de ex
* , c
2030,0 ± 0,2
HY, Nob-F 39,6 ±c 2,2 *  81,0 ± 0,8 * , 28,6 ± 1,0 * , 14,3 ± 2,6 * , de ex
,

de ex de ex
* , b
1700,0 ± 0,2
HY, Car-B 21,0 ±c 1,5 *  20,2 ± 1,3 * , 19,9 ± 1,0 * ,
,
1,2 ± 0,0 * , de ex
de ex de ex
* , c
HY, Nob- 11,6 ± 0,7 * , 10,5 ± 0,8 * , 17,9 ± 1,0 * , 2220,0 ± 0,2
2,1 ± 1,5 * , de ex
B c de ex de ex
* , a
Control
15.004,9 ± 23.297,7 ± 14.850,4 ± 13.418,2 ±
pozitiv 210,0 ± 0,4
43,1 25,3 77,4 160,4
(acid galic)
Deschide într-o fereastră separată
* Mediile sunt semnificativ diferite de media nivelului de control (comparații multiple
Dunnett cu un control la 99,9% de încredere); înseamnă că nu împă rtă șesc o literă în
superscript în coloană sunt semnificativ diferite (comparații în perechi Tukey,
valoarea 𝑝 ≤ 0,01). ** EC 50 — concentrația efectivă la jumă tate maximă .

Abilită țile observate ale uleiurilor esențiale de muscadină de a elimina

oxidul nitric și radicalii ABTS și de a reduce ionii ferici și cuprici
subliniază potențialul acestor uleiuri ca potențiali aditivi antioxidanti
în produsele cosmetice și pentru îngrijirea pielii.

2.3. Evaluarea activită ții antimicrobiene

Pentru evaluarea activită ților antimicrobiene, au fost testate cele două

uleiuri esențiale din flori, precum și patru hidrosoli din flori și coajă de
fructe de pă dure ale soiurilor Noble și Carlos. Randamentele scă zute
ale uleiurilor esențiale din pielea de fructe de padure Carlos și Noble
(0,012 ± 0,0001% ( g / g ) și respectiv 0,010 ± 0,0007% ( g / g ) nu au
fost suficiente pentru a efectua experimente biologice de încredere.

Activită țile antimicrobiene au fost testate împotriva a două bacterii

Gram-pozitive ( Bacillus cereus ATCC 11778 și Staphylococcus
aureus ATCC 6538), două bacterii Gram-negative ( Escherichia
coli ATCC 8739 și Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027) și o drojdie
dimorfică ATCC 1023 ( Candida 1023) . Rezultatele sunt prezentate
înTabelul 3. Niciunul dintre hidrosoli nu a prezentat vreun efect
antimicrobian. Ambele uleiuri esențiale din florile de muscadină au
prezentat activitate antibacteriană scă zută împotriva bacteriilor Gram-
pozitive (MIC = 1,0 mg/mL) și nicio activitate împotriva bacteriilor
Gram-negative (Tabelul 3). Interesant, ambele uleiuri au prezentat
activită ți antifungice moderate împotriva Candida albicans ATCC
10231 (Tabelul 3). Acest lucru ar putea fi explicat prin concentrațiile
ridicate ale sesquiterpenei germacrene D, care are proprietă ți
antifungice bine cunoscute [ 32 , 33 ]. Mai mult, activitatea antifungică
a uleiului din florile Carlos (MIC = 0,125 mg/mL) a fost de două ori mai
puternică decâ t cea a uleiului din florile nobile (MIC = 0,25 mg/mL),
ceea ce a corespuns cu concentrațiile de aproape două ori mai mari de
germacrene D, α-selinenă și α-cadinol detectate în acest soi (tabelul
1). Acesta este primul raport privind evaluarea activită ților
antimicrobiene ale uleiurilor esențiale și hidrosolurilor obținute prin
hidro-distilarea florilor de struguri. Cu toate acestea, pentru evaluarea
complexă a potențialului antimicrobian al compușilor volatili din
struguri, trebuie efectuate mai multe cercetă ri și experimente cu
diferite soiuri de struguri și microorganisme testate.

Tabelul 3
Activită țile antimicrobiene ale uleiurilor esențiale și hidrosolurilor din două  M.
rotundifolia (Michx.) Mici. soiuri.

Ulei esențial, Ulei esențial,

Control pozitiv
flori, Carlos flori, nobil
Testarea MIC
microorganismului IZ ± IZ ± MIC, IZ ± MBC/MFC
**,
SD *, SD, % SD, ***
%
mm mm ( g / v ) mm ug/mL
( g / v )
Staphylococcus 10,06 ± 9,23 ± 31,30 ±
1.00 1.00 0,125
aureus ATCC 6538 0,12 0,25 0,29
Bacillus cereus ATCC 8,23 ± 8,06 ± 28,30 ±
1.00 1.00 0,125
11778 0,23 0,12 0,30
Escherichia coli ATCC 8,06 ± 8,06 ± 21,00 ±
2.00 2.00 0,25
8739 0,12 0,12 0,28
Pseudomonas 9,60 ±
- >2.00 - >2.00 1.00
aeruginosa ATCC 9027 0,17
Candida albicans ATTC 14,20 ± 12,30 ± 16,60 ±
0,125 0,25 0,25
10231 0,32 0,26 0,29
Deschide într-o fereastră separată
* IZ—diametrul zonei inhibitoare (media ± abaterea standard, n = 3); ** MIC—
concentrație inhibitorie minimă ; *** MBC—concentrație bactericidă minimă ; MFC –
concentrație minimă de fungicid.

Mergi la:

3. Materiale și Metode
3.1. Material vegetal

Flori și coji de fructe de pă dure de culoare roșie ( Muscadinia

rotundifolia (Michx.) Small., cultivar Noble) și galben ( Muscadinia
rotundifolia(Michx.) Strugurii de muscadină mici, soiul Carlos) au fost
culesi din podgoriile experimentale ale Centrului pentru Viticultura și
Cercetarea Fructelor Mici din Colegiul de Agricultură și Ș tiințe
Alimentare de la Florida Agriculture and Mechanical University din
Tallahassee, Florida (30°28′) 32,9″N 84°10′25,9″V). Florile au fost
culese în mai 2015 de la 20 de vițe (10 vițe de vie Noble și 10 vițe de
vie din soiurile Carlos), alese aleatoriu în râ nduri diferite. Plantele au
fost marcate și folosite ulterior pentru a colecta boabe coapte. Boabele
au fost colectate în august 2015 pentru soiul Noble și în septembrie
2015 pentru soiul Carlos. Maturitatea boabelor a fost evaluată pe baza
pH-ului, conținutului de zahă r și acidită ții titrabile. Boabele au fost
culese aleatoriu din diferite ciorchini de-a lungul viței de vie. Probele
au fost prelucrate imediat după recoltare.

3.2. Uleiuri esențiale și hidrosoli

Cinci sute de grame de flori proaspete și un kilogram de coajă

proaspă tă de fructe de pă dure de la ambele soiuri au fost folosite
pentru obținerea uleiurilor esențiale și a hidrosolilor corespunză tori
acestora. Uleiurile esențiale au fost obținute prin distilarea apei într-
un aparat de sticlă de laborator de tip Clevenger (VWR International,
Atlanta, GA, SUA) conform Farmacopeei Britanice, modificată așa cum
este descris în altă parte [ 34 ]. Umiditatea florilor de struguri și a
coajelor de boabe a fost determinată cu un analizor de umiditate
(Mettler Toledo MJ33 Moisture Determination Balance, Mettler-
Toledo, LLC, Columbus, OH, SUA) utilizâ nd protocolul standard al
aparatului pâ nă la obținerea unei greută ți constante. Distilarea a fost
efectuată timp de 4 ore. Uleiurile și hidrosolurile au fost depozitate la -
20 °C înainte de analize.

3.3. Analize GC-MS

Înainte de analizele de cromatografie gazoasă , volatilele din hidrosoli

(50 mL) au fost extrase cu n-hexan (Sigma-Aldrich, Merck KGaA,
Darmstadt, Germania) (3 × 2 mL). După separarea fazelor, fracțiile de
hexan combinate au fost uscate pe sulfat de sodiu anhidru, filtrate și
utilizate pentru analizele GC-MS. Analizele GC-MS au fost efectuate pe
un cromatograf de gaze Agilent Technology Hewlett Packard 7890
A+/MSD 5975 (Hewlett Packard, Palo Alto, CA, SUA), cuplat cu un
Agilent Technology 5975C inert XL EI/CI MSD (Hewlett Packard, Palo
Alto). , CA, SUA) spectrometru de masă . A fost utilizată o coloană HP-
5MS (30 m × 250 μm × 0,25 μm). Temperatura coloanei a fost
menținută la 60 °C timp de 2 minute, crescută la 260 °C la 5 °C pe
minut și menținută la 260 °C timp de 8 minute. Volumul de injectare a
fost de 1 μL și a fost utilizat un raport de împă rțire de
10:1. Temperatura injectorului a fost setată la 250 °C. Debitul gazului
purtă tor (heliu) a fost de 1 ml/min. Sursa MS a fost setată la 230 °C, iar
MS quad a fost de 150 °C. EI/MS au fost înregistrate la 70 eV. Indicii de
retenție (RI) ai compușilor au fost înregistrați cu un standardamestec
de calibrare n -hidrocarburi (C9–C36) (Restek, Teknokroma, Spania)
folosind software-ul AMDIS 3.6. Compușii din uleiuri esențiale și
hidrosoli au fost identificați prin RI (Kovats) și spectre de masă
calculate, în comparație cu cei ai compușilor de referință incluși în
baza de date Wiley/NIST sau în literatura de specialitate
[ 35 ]. Rezultatele au fost exprimate ca procente relative din curentul
ionic total (TIC).

3.4. Teste de activitate antioxidantă

Testul DPPH a fost efectuat așa cum este descris în altă parte [ 36 ] cu
unele modifică ri. Pe scurt, 2,85 ml de soluție 0,1 mM de DPPH (radical
1,1-difenil-2-picrilhidrazil, Sigma-Aldrich) în metanol (Sigma-Aldrich)
au fost amestecați cu 0,15 ml de probă (uleiuri esențiale au fost
dizolvate în metanol, în timp ce hidrosolii) au fost testate
direct). Reacția a fost efectuată timp de 15 minute, la 37 °C în
întuneric, iar scă derea absorbanței (517 nm) a fost mă surată față de
metanol (Shimadzu UV-Vis 1240, Shimadzu Corp., Kyoto,
Japonia). Soluții Trolox (acid 6-hidroxi-2,5,7,8-tetrametilcroman-2-
carboxilic, Sigma-Aldrich) la concentrații de 0,1; 0,2; 0,3; 0,4 și 0,5 mM
au fost utilizate pentru a construi curba de calibrare
standard. Activitatea antioxidantă a fost exprimată ca echivalenți
Trolox (TE) mM per gram de ulei esențial.

Testul TEAC a fost efectuat așa cum este descris în altă parte [ 36 ] cu
unele modifică ri. Pe scurt, radicalul ABTS a fost generat prin
amestecarea alicote egale de soluție 7 mM de ABTS (acid 2,2′azinobis
(3)-etilbenztiazolin-6-sulfonic, Sigma-Aldrich) în H20 și soluție 2,45 mM
de persulfat de potasiu (Sigma). -Aldrich) în H20 timp de 16 ore. Apoi, 2,85 ml de
ABTS +
 proaspă t diluatsoluția a fost amestecată cu 0,15 ml de probă
(uleiuri esențiale au fost dizolvate în metanol, în timp ce hidrosolii au
fost testați direct). Reacția a fost efectuată timp de 15 minute, la 37 °C
în întuneric, iar scă derea absorbanței (734 nm) a fost mă surată față de
metanol (spectrofotometru Shimadzu UV-Vis 1240). Soluțiile Trolox la
concentrații de 0,1, 0,2, 0,3, 0,4 și 0,5 mM au fost utilizate pentru a
construi curba de calibrare standard. Activitatea antioxidantă a fost
exprimată ca mM TE per gram de ulei esențial.

Testul FRAP a fost efectuat așa cum este descris în altă parte [ 36 ] cu
unele modifică ri. Pe scurt, 3 mL de reactiv FRAP proaspă t preparat (10
pă rți de tampon de acetat de sodiu 300 mM cu pH 3,6; 1 parte de
soluție TPTZ 10 mM (2,4,6tripiridil-s-triazine, Sigma-Aldrich) în 40
mM HCI și 1 parte din soluție 20 mM de clorură de fier (III) hexahidrat
(Sigma-Aldrich) în H2O) a fost amestecat cu 0,1 ml de probă (uleiuri
esențiale au fost dizolvate în metanol, în timp ce hidrosolii au fost
testați direct). Proba martor a fost preparată în același mod, dar fă ră
adă ugarea de antioxidant. Reacția a fost efectuată timp de 4 minute la
37 °C și absorbanța (593 nm) a probelor investigate a fost citită față de
absorbanța martor (spectrofotometru Shimadzu UV-Vis
1240). Soluțiile Trolox la concentrații de 0,1, 0,2, 0,3, 0,4 și 0,5 mM au
fost utilizate pentru a construi curba de calibrare standard. Activitatea
antioxidantă a fost exprimată ca mM TE per gram de ulei esențial.

Testul CUPRAC a fost efectuat așa cum este descris în altă parte [ 36 ]
cu unele modifică ri. Pe scurt, 1,0 mL 10 mM diclorură de cupru hidrat
(Sigma-Aldrich) a fost amestecat cu 1,0 mL 7,5 mM neocuproină
(Sigma-Aldrich), 1 mL 1 M tampon acetat de amoniu (pH 7,0), 0,1 mL
de probă de ulei esențial investigat (dizolvate) în metanol, în timp ce
hidrosolii au fost testați direct) și 1,0 mL H2O. Proba martor a fost
preparată în același mod, dar fă ră adă ugarea de antioxidant. Reacția a
fost efectuată timp de 20 de minute la 37 °C, iar modifică rile
absorbanței (450) nm au fost mă surate față de absorbanța martor
(spectrofotometru Shimadzu UV-Vis 1240). Soluțiile Trolox la
concentrații de 0,1, 0,2, 0,3, 0,4 și 0,5 mM au fost utilizate pentru a
construi curba de calibrare standard. Activitatea antioxidantă a fost
exprimată ca mM TE per gram de ulei esențial.

Activitatea de captare a radicalilor de oxid nitric (NO) a fost mă surată

așa cum este descris în altă parte [ 37] cu unele modifică ri. Pe scurt,
1,0 mL din diferite concentrații de probă (uleiuri esențiale au fost
dizolvate în metanol, în timp ce hidrosolii au fost testați direct) au fost
amestecați cu 1,0 mL 5 mM soluție de nitroprusiat de sodiu (Sigma-
Aldrich) în PBS (soluție salină tampon fosfat). A fost preparată și o
probă martor care conține toți reactivii cu excepția probei de
testat. Amestecuri au fost incubate timp de 150 de minute la 25 °C,
apoi a fost adă ugată o alicotă egală de reactiv Griess (Sigma-
Aldrich). Absorbanța (546 nm) a cromoforului format a fost mă surată
atâ t pentru probele martor, câ t și pentru cele testate
(spectrofotometru Shimadzu UV-Vis 1240), iar procentul de inhibare a
NO a fost calculat pentru fiecare concentrație de probă . Datele au fost
utilizate pentru exprimarea activită ții antioxidante ca concentrații pe
jumă tate eficiente ( EC50 ).

Acidul galic a fost folosit ca martor pozitiv pentru fiecare metodă

antioxidantă utilizată .

3.5. Evaluarea activită ții antimicrobiene

Efectele antimicrobiene ale uleiurilor esențiale și hidrosolurilor au fost

testate împotriva bacteriilor Gram-pozitive Bacillus cereus ATCC
11778 și Staphylococcus aureus ATCC 6538, precum și a bacteriilor
Gram-negative Escherichia coli ATCC 8739 și Pseudomonas
aeruginosa y ATCC 9027, east și Can dididamorphic . albicansATCC
10231. Toate tulpinile au fost depuse în Colecția de Cultură microbiană
a Departamentului de Biochimie și Microbiologie (Universitatea din
Plovdiv, Bulgaria). Tulpinile bacteriene au fost depozitate pe agar
nutrițional (NA-HiMedia Ltd., HiMedia Laboratories GmbH, Einhausen,
Germania.) și tulpinile de drojdie pe agar Sabouraud dextroză cu
cloramfenicol (SDA, HiMedia Ltd.). Soluțiile stoc ale probelor pentru
testarea antimicrobiană au fost preparate prin dizolvarea compusului
respectiv în 2% DMSO (Sigma-Aldrich Co.). Activitatea antibacteriană a
probelor a fost evaluată în conformitate cu metoda de referință M2-A9
de la Clinical Laboratory Standard Institute (CLSI) pentru testele de
susceptibilitate a discurilor antimicrobiene [ 38 ] și metoda de
referință CLSI M7-A7 pentru testele de susceptibilitate antimicrobiană
de diluție pentru bacteriile care cresc aerob.39 ]. Activitatea
anticandidală a uleiurilor esențiale a fost realizată conform metodei de
referință CLSI M44-A2 pentru testarea sensibilită ții la difuzia
discurilor antifungice a drojdiilor [ 40 ] și metoda de referință CSLI
M27-A3 pentru testarea sensibilită ții antifungice a drojdiilor cu
diluare în bulion [ 41 ]]. S-au preparat, de asemenea, martori constâ nd
din mediu inoculat fă ră probă testată și fă ră DMSO, precum și cu
DMSO. Concentrația de DMSO în testul de diluare a bulionului a fost
scă zută pentru a menține efectul asupra creșterii microbiene la
minimum. Activitatea antimicrobiană determinată prin testele de
microdiluție în bulion a fost exprimată ca concentrație inhibitorie
minimă (MIC) în µg/mL. MIC a fost definită ca cea mai mică
concentrație a compusului testat la care a fost detectată inhibarea
totală a creșterii microbiene. Activitatea antimicrobiană a uleiurilor
esențiale determinată prin teste de difuzie pe disc a fost exprimată ca
diametrul zonei inhibitoare în mm (IZ, mm). Diametrele IZ au fost
mă surate la cel mai apropiat milimetru pe scara zonei cu antibiotice
(HiMedia Laboratories Ltd.). Activită țile antimicrobiene ale
ciprofloxacinei (CPH 5µg/disc, HiMedia Laboratories Ltd.) și
fluconazolului (FLC 25µg/disc,

3.6. Analiza datelor

Toate analizele au fost efectuate în trei exemplare cu trei mă sură tori

tehnice independente. Rezultatele sunt exprimate ca valori medii cu
abateri standard (±SD) ( n = 3). Mediile au fost comparate statistic
folosind ANOVA unidirecțional cu testul de comparație perechi
Tukey. Comparațiile multiple Dunnett cu un control au fost utilizate
pentru a compara mediile cu controlul pozitiv. Diferențele dintre medii
au fost considerate semnificative pentru valorile 𝑝 ≤ 0,01. Testele
statistice au fost efectuate folosind software-ul statistic MiniTab 17
(Minitab INC, State College, PA, SUA).
Mergi la:

4. Concluzii

Acest studiu a raportat pentru prima dată compoziția chimică ,

potențialul antioxidant și proprietă țile antimicrobiene ale uleiurilor
esențiale și hidrosolurilor din flori și coajă de fructe de pă dure a două
soiuri de muscadine: soiul roșu M. rotundifolia Noble și M.
rotundifolia galben .soiul Carlos. Compușii volatili majori gă siți în
uleiurile esențiale din florile de muscadină au fost valenena,
germacrena D, α-selinena și α-cadinolul, în timp ce compușii majori
identificați în uleiurile esențiale din piele și hidrosoli de boabe de
muscadină au fost α-terpineol și β-linalool. Toate uleiurile esențiale
obținute au prezentat un potențial antioxidant mult mai mare decâ t
hidrosolii. Uleiurile au ară tat un potențial crescut de a reduce ionii
ferici și cuprici și de a elimina oxidul nitric și radicalii ABTS. Cu toate
acestea, pentru o evaluare completă a potențialului antioxidant al
substanțelor volatile de muscadină , experimente suplimentare care
implică teste in vivo pentru evaluarea activită ților antioxidante ale
acestora trebuie efectuate în cercetă rile viitoare. Uleiurile esențiale,
obținute din florile ambelor soiuri de muscadină , au prezentat
activită ți antifungice moderate împotrivaCandida albicans . Din câ te
cunoștințele noastre, acesta este primul raport care obține și
caracterizează uleiuri esențiale și hidrosoli din struguri
muscadin. Acest studiu a demonstrat existența unor variații
importante ale compușilor aromatici acumulați în florile și coajele
mature ale boabelor de struguri muscadine. Rezultatele prezentate vor
sta la baza cercetă rilor viitoare axate pe o mai bună înțelegere a rolului
fiziologic al compușilor aromatici din vița de vie de muscadină și ar
putea fi considerate primul pas în studiul biosintezei și acumulă rii
compușilor volatili în strugurii de muscadină .
Mergi la:

Mulțumiri
Autorii recunosc asistența lui Matteo Voltarelli, enolog și maestru de
pivniță la Centrul pentru Viticultura și Cercetarea Fructelor Mici,
FAMU, SUA, pentru sprijinul să u în determinarea maturită ții fructelor
de pă dure.
Mergi la:

Contribuții ale autorului

Conceptualizare, VG; Analiză formală , VG, AA și IB; Achizitie finantare,

VT; Investigație, VG, ID și VG; Metodologie, VG, IB și VG; Resurse,
VT; Supraveghere, AA; Validare, VG, ID și VG; Vizualizare, VG; Scriere
— schiță originală , VG; Scriere — revizuire și editare, AA și VT
Mergi la:

Referințe
1. Pavela R., Benelli G. Uleiuri esențiale ca biopesticide ecologice? Provocă ri și
constrâ ngeri. Trends Plant Sci. 2016; 21 :1000–1007. doi:
10.1016/j.tplants.2016.10.005. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
2. Winkelman WJ Aromaterapie, produse botanice și uleiuri esențiale în
acnee. Clin. Dermatol. 2018; 36 :299–305. doi:
10.1016/j.clindermatol.2018.03.004. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
3. Sarkic A., Stappen I. Uleiurile esențiale și compușii lor individuali în cosmetice -
O revizuire critică . Produse cosmetice. 2018; 5:11 . doi:
10.3390/cosmetics5010011. [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
4. Taghavi T., Kim C., Rahemi A. Rolul volatilelor naturale și al uleiurilor esențiale
în extinderea termenului de valabilitate și controlul microorganismelor
postrecoltare ale fructelor mici. Microorganisme. 2018; 6 :104. doi:
10.3390/microorganismes6040104. [ Articol gratuit PMC ] [ PubMed ]
[ CrossRef ] [ Google Scholar ]
5. Jaradat N., Adwan L., K'aibni S., Zaid AN, Shtaya MJY, Shraim N., Assali M.
Variabilitatea compozițiilor chimice și activită țile antimicrobiene și antioxidante
ale uleiurilor esențiale de frunze de ruta chalepensis din trei regiuni
palestiniene. BioMed Res. Int. 2017; 2017 :9. doi:
10.1155/2017/2672689. [ Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google
Scholar ]
6. Bakkali F., Averbeck S., Averbeck D., Idaomar M. Efectele biologice ale uleiurilor
esențiale — O revizuire. Food Chim. Toxicol. 2008; 46 :446–475. doi:
10.1016/j.fct.2007.09.106. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
7. Lucchesi ME, Chemat F., Smadja J. Extracția cu microunde fă ră solvenți a
uleiului esențial din ierburi aromatice: Comparație cu hidro-distilarea
convențională . J. Chromatogr. A. 2004; 1043 :323–327. doi:
10.1016/j.chroma.2004.05.083. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
8. Buchbauer G., Jirovetz L., Wasicky M., Nikiforov A. Headspace analysis of vitis
vinifera (vitaceae) flowers. J. Essential. Ulei Res. 1994; 6 :311–314. doi:
10.1080/10412905.1994.9698383. [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
9. Jalali Heravi M., Sereshti H. Determinarea componentelor uleiurilor esențiale
ale artemisia haussknechtii boiss. Folosind simultan hidrodistilare-spațiu de cap
static fază lichidă microextracție-cromatografie gazoasă spectrometrie de masă . J.
Chromatogr. A. 2007; 1160 :81–89. doi:
10.1016/j.chroma.2007.05.096. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
10. Edris AE Identificarea și cuantificarea absolută a principalelor componente
arome solubile în apă izolate din hidrosolurile unor plante aromatice. J.
Essential. Ursul de ulei. Plante. 2009; 12 :155–161. doi:
10.1080/0972060X.2009.10643705. [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
11. Jentzsch P., Ramos L., Ciobotă V. Spectroscopie raman portabilă pentru
distincția uleiurilor esențiale utilizate în industria cosmetică . Produse
cosmetice. 2015; 2 :162. doi: 10.3390/cosmetics2020162. [ CrossRef ] [ Google
Scholar ]
12. Pandey AK, Kumar P., Singh P., Tripathi NN, Bajpai VK Uleiuri esențiale: Surse
de antimicrobiene și conservanți alimentari. Față. Microbiol. 2017; 7 doi:
10.3389/fmicb.2016.02161. [ Articol gratuit PMC ] [ PubMed ]
[ CrossRef ] [ Google Scholar ]
13. Amorati R., Foti MC, Valgimigli L. Activitatea antioxidantă a uleiurilor
esențiale. J. Agric. Food Chim. 2013; 61 :10835–10847. doi:
10.1021/jf403496k. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
14. Rocha SM, Coutinho P., Barros A., Delgadillo I., Coimbra MA Stabilirea
profilului volatil de soi al musturilor din white vitis vinifera l. Soiuri. J.
Sci. Agricultura alimentară. 2007; 87 :1667–1676. doi:
10.1002/jsfa.2872. [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
15. Augustyn P., Rapp A., Van Wyk C. Some volatile aroma components of vitis
vinifera l. CV. Sauvignon blanc. Sud. Afr. J. Enol. Vitic. 1982; 3 :52–60. doi:
10.21548/3-2-2382. [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
16. Gil M., Bottini R., Berli F., Pontin M., Silva MF, Piccoli P. Compuși organici
volatili caracterizați din boabele de viță de vie (vitis vinifera l. Cv. Malbec) cresc
înainte de recoltare și ca ră spuns la uv -b radiatii. Fitochimie. 2013; 96 :148–
157. doi: 10.1016/j.phytochem.2013.08.011. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google
Scholar ]
17. Kaula CM, Boss PK Comparația compușilor volatili majori din strugurii riesling
și cabernet sauvignon (vitis vinifera l.) de la recoltare pâ nă la recoltare. Aust. J.
Vin de struguri Res. 2010; 16 :337–348. doi: 10.1111/j.1755-
0238.2010.00096.x. [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
18. Xu C., Yagiz Y., Zhao L., Simonne A., Lu J., Marshall MR Calitatea fructelor,
proprietă țile nutraceutice și antimicrobiene a 58 de soiuri de struguri muscadine
(vitis rotundifolia michx.) cultivate în Statele Unite. Food Chim. 2017; 215 :149–
156. doi: 10.1016/j.foodchem.2016.07.163. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google
Scholar ]
19. Zhuang J., Peng R.-H., Cheng Z.-M., Zhang J., Cai B., Zhang Z., Gao F., Zhu B., Fu
X.-Y., Jin X. -F., şi colab. Analiza la nivelul genomului a presupuselor gene ale
familiei ap2/erf în vitis vinifera. Sci. Hortic. 2009; 123 :73–81. doi:
10.1016/j.scienta.2009.08.002. [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
20. A Marshall D., J Stringer S., D Spiers J. Stilbene, acid elagic, flavonol și
conținutul fenolic al soiurilor de struguri muscadine (vitis rotundifolia
michx.). Farmacia. Culturi. 2012; 3 :69–77. doi:
10.2174/2210290601203010069. [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
21. Horvat RJ, Senter SD Identificarea constituenților volatili din boabele
scuppernong (vitis rotundifolia) J. Food Sci. 1984; 49 :64–66. doi:
10.1111/j.1365-2621.1984.tb13669.x. [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
22. Lamikanra O. Constituenții aromatici ai vinurilor muscadine1. J. Alimentare
Cal. 1987; 10 :57–66. doi: 10.1111/j.1745-
4557.1987.tb00289.x. [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
23. Baek HH, Cadwallader KR, Marroquin E., Silva JL Identificarea compușilor de
aromă predominanți în sucul de struguri muscadine. J. Food Sci. 1997; 62 :249–
252. doi: 10.1111/j.1365-2621.1997.tb03978.x. [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
24. Lü cker J., Bowen P., Bohlmann J. Vitis vinifera terpenoid cyclazes:
Identificarea funcțională a două sesquiterpene sintetaze cdna care codifică (+)-
valenen sintaza și (-)-germacren d sintaza și expresia mono- și sesquiterpene
sintetaze în viță de vie flori si fructe de padure. Fitochimie. 2004; 65 :2649–
2659. doi: 10.1016/j.phytochem.2004.08.017. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google
Scholar ]
25. Coelho E., Rocha SM, Delgadillo I., Coimbra MA Headspace-spme aplicat la
evoluția componentelor volatile varietale în timpul vitis vinifera l. CV. Coacerea
„Baga”. Anal. Chim. Acta. 2006; 563 :204–214. doi:
10.1016/j.aca.2005.11.018. [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
26. Kishimoto K., Matsui K., Ozawa R., Takabayashi J. Analysis of defensive
responses activated by volatile allo-ocimene treatment in arabidopsis
thaliana. Fitochimie. 2006; 67 :1520–1529. doi:
10.1016/j.phytochem.2006.05.027. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
27. Dimitrić Marković JM, Pejin B., Milenković D., Amić D., Begović N., Mojović M.,
Marković ZS Activitatea antiradicală a delfinidinei, pelargonidinei și malvinului
față de radicalii hidroxil și oxid nitric: calculele cerințelor energetice ca predicție
a posibilelor mecanisme antiradicale. Food Chim. 2017; 218 :440–446. doi:
10.1016/j.foodchem.2016.09.106. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
28. Anterior RL, Wu X., Schaich K. Metode standardizate pentru determinarea
capacită ții antioxidante și a fenolicilor din alimente și suplimente alimentare. J.
Agric. Food Chim. 2005; 53 :4290–4302. doi: 10.1021/jf0502698. [ PubMed ]
[ CrossRef ] [ Google Scholar ]
29. Cals-Grierson MM, Ormerod AD Funcția oxidului nitric în piele. Oxid de
azot. 2004; 10 :179–193. doi: 10.1016/j.niox.2004.04.005. [ PubMed ]
[ CrossRef ] [ Google Scholar ]
30. Kammeyer A., Luiten RM Evenimente de oxidare și îmbă trâ nire a
pielii. Imbatranire Res. Rev. 2015; 21 :16–29. doi:
10.1016/j.arr.2015.01.001. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
31. Rivero A. Nitric oxide: O moleculă antiparazitară de nevertebrate. Tendințe
Parasitol. 2006; 22 :219–225. doi: 10.1016/j.pt.2006.02.014. [ PubMed ]
[ CrossRef ] [ Google Scholar ]
32. Petrović S., Pavlović M., Maksimović Z., Milenković M., Couladis M., Tzakou O.,
Niketić M. Compoziția și activitatea antimicrobiană a uleiului esențial de
marrubium incanum desr.
(lamiaceae). Nat. Prod. comun. 2009; 4 :1934578X0900400324. doi:
10.1177/1934578X0900400324. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
33. Powers CN, Osier JL, McFeeters RL, Brazell CB, Olsen EL, Moriarity DM, Satyal
P., Setzer WN Activită ți antifungice și citotoxice a șaizeci de uleiuri esențiale
disponibile comercial. Molecule. 2018; 23 :1549. doi:
10.3390/molecules23071549. [ Articol gratuit PMC ] [ PubMed ]
[ CrossRef ] [ Google Scholar ]
34. Georgiev V., Marchev A., Nikolova M., Ivanov I., Gochev V., Stoyanova A., Pavlov
A. Compoziții chimice ale uleiurilor esențiale din frunze și flori de salvia ringens
sibth. Et sm. Crește să lbatic în bulgaria. J. Essential. Ursul de
ulei. Plante. 2013; 16 :624–629. doi:
10.1080/0972060X.2013.854490. [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
35. Adams RP Allured Publishing Corporation; Carol Stream, IL, SUA: 2007.
Identificarea componentelor uleiurilor esențiale prin cromatografie
gazoasă /spectrometrie de masă ; p. 804. [ Google Scholar ]
36. Marchev A., Ivanov I., Denev P., Nikolova M., Gochev V., Stoyanova A., Pavlov
A., Georgiev V. Activită țile inhibitoare, antioxidante și antimicrobiene ale
acetilcolinesterazei ale salviei tomentosa morii. Ulei esențial. J.
Biosci. Biotehnologia. 2015; 4 :219–229. [ Google Scholar ]
37. Kumar R., Phani KG, Chaurasia OP Activitatea antioxidantă in vitro a
extractului metanolic de rhodiola imbricata edgew. Pharmacogn. J. 2010; 2 :157–
161. doi: 10.1016/S0975-3575(10)80084-7. [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
38. Institutul de standarde clinice și de laborator . Aprobat Standard-Ediția a 9-a
M2-A9. Wayne, PA, SUA: 2006. Standarde de performanță pentru testul de
susceptibilitate a discurilor antimicrobiene. [ Google Scholar ]
39. Institutul de standarde clinice și de laborator . Aprobat Standard - Ediția a 7-a
M7-A7. Wayne, PA, SUA: 2006. Metode pentru testele de sensibilitate
antimicrobiană de diluare pentru bacteriile care cresc aerob. [ Google Scholar ]
40. Institutul de standarde clinice și de laborator . Aprobat Standard-Ediția a II-a
M44-A2. Wayne, PA, SUA: 2009. Metoda de referință pentru testarea
susceptibilită ții la difuzia discurilor antifungice a drojdiilor. [ Google Scholar ]
41. Institutul de standarde clinice și de laborator . Aprobat Standard-Ediția a 3-a
M27-A3. Wayne, PA, SUA: 2008. Metoda de referință pentru testarea sensibilită ții
antifungice cu diluare în bulion a drojdiilor. [ Google Scholar ]