Diagnosticul bacteriologic al

TB
 Examenul microscopic

 Se practica pe frotiu din proba

clinica respectiva si identifica
micobacteriile punand in evidenta
proprietatea de acid –alcoolo-
rezistenta
 Frotiul se prepara steril (ansa
bacteriologica), se usuca la aer(
la temperatura camerei sau pe o
platina incalzitoare),nu se usuca
la flacara
 Fixarea : se tine lama cu pensa si
se trece partea opusa frotiului
prin flacara becului de gaz de 3
ori
 Coloratia ZIEHL-NEELSEN
 Pentru evidentierea
BAAR este coloratia de
referinta
 Se mai poate face cu
substante fluorescente:
cu auramina-rhodamina
 Colorarea cu fuxina la
cald pentru a permite
intrarea colorantului in
interiorul micobacteriilor,
si astfel se coloreaza in
rosu
 Coloratia ZIEHL-NEELSEN
 Decolorarea cu acid –
alcool (alcool 70° si acid
sulfuric) pana la
disparitia macroscopica
a coloratiei rosii
 Se decoloreaza toate
structurile cu exceptia
micobacteriilor care
raman colorate in rosu
 Pt contrast recolorare cu
albastru de metilen
 Examenul microscopic
 Ex se face la microscopul optic cu obiectiv cu
imersie 100x
 Micobacteriile apar ca niste bastonase subtiri,
rosii, usor incurbate, +/_granulare, izolate sau
grupate in perechi sau grupuri, pe fond
albastru
 Se numara BAAR de pe 100 de campuri
microscopice
 Rezultatele se exprima cantitativ in functie de
densitatea bacililor pe lama
 Sensibilitatea e relativ mica fiind necesara
prezenta a cp 10000 bacili/ml pt un rezultat
pozitiv
Exprimarea semicantitativa a rezultatelor ex mo
al sputei pt prezenta BAAR- obiectiv imersie
1000x
 Cultura micobacteriilor
 Este metoda de referinta pentru diagnosticul TB
 Permite identificarea tulpinei de micobacterie si
ulterior testarea sensibilitatii acesteia la
medicamentele antituberculoase
 Probele clinice contaminate(sputa) trebuie
decontaminate cu antiseptice obisnuite si omogenizate
 Ulterior se centrifugheaza si se neutralizeaza cu un
acid slab
 Produsul astfel preparat sau direct daca e sterila proba
se inoculeaza pe mediile de cultura
 MEDIUL LÖWENSTEIN
JENSEN
 Cultura pe medii solide reprezinta
standardul de referinta pt izolarea MTB
 Perioada de crestere a MTB este de 4-6
saptamani
 Cultura pe medii lichide cu detectie
radioactva /fluorescenta permite
detectarea lor in 1-2 saptamani
,dar e mai scumpa si mai putin disponibila
MEDIUL LÖWENSTEIN
JENSEN
 Cultura micobacteriilor
 Coloniile MTB pe medii
solide sunt rorunde,
galben- palide,
conopidiforme, cu
suprafata rugoasa,
izolate sau confluente in
functie de densitatea
bacililor din inoculul
initial
 Identificarea speciei se
face prin teste bichimice
 Exprimarea rezultatelor
se face semicantitativ in
functie de densitatea
coloniilor
 REFERINTE

 http://images.google.ro/imgres?imgurl=http://telmeds.org/AVIM/Abac
terio/mycobacterias%2520y%2520nocardia/El_medio_de_cultivo_se_ll
ama_Lowenstein_Jensen.JPG&imgrefurl=http://telmeds.org/AVIM/A
bacterio/mycobacterias%2520y%2520nocardia/mycobacterias_nocardi
a.htm&h=600&w=900&sz=171&hl=ro&start=15&um=1&tbnid=4P7B
wIflgWEkmM:&tbnh=97&tbnw=146&prev=/images%3Fq%3DLowen
stein%2BJENSEN%26svnum%3D10%26um%3D1%26hl%3Dro%26l
r%3Dlang_ro%26sa%3DG

 Tuberculoza- curs pentru studenti, 2004- Institutul de Pneumologie

“Marius Nasta” Programul National de Control al Tuberculozei

 http://faculty.plattsburgh.edu/jose.deondarza/Bio406/Handouts/notes_
09.htm