Specializarea laboratorului: Testarea ADN - Secventierea ADN-ului.
Secventierea ADN
Reprezinta succesiunea de proceduri utilizate pentru identificarea secventei de
nucleotide intr-un lant de ADN.
Secventierea chimica
(Maxam – Gilbert)
Necesita:
Bazata pe inducerea unor -un lant simplu de ADN;
modificari chimice ale ADN- -un primer;
ului si apoi clivarea -ADN-polimeraza;
lantului la nivelul acestor -nucleotide marcate
modificari; radioactiv sau fluorescent
Marcarea ADN-ului supus Avantaje:
secventializarii la unul din - sensibilitate ridicata;
capetele sale, - protocoale Bi-Directionate de
denaturarea,urmata de
secventiere ce pot determina peste 2000
separarea prin electroforeza baze pe reactie;
in gel a celor doua catene; - costuri reduse;
- secventiere automata;
- erori reduse;
- aparataj usor de folosit;
3130 Genetic Analyzer
Sistem automat de
umplere cu polimer
Electroforeza capilara
Recipient polimer
Anod Fereastră de detecţie
Metode de baza:
Metoda de terminare a lantului
(Metoda Sanger)
consta din replicarea
Aplicatii:
ADN-ului monocatenar
-secventierea cADN;
incepand de la un
-confirmarea mutatiilor;
punct precis de
-Medicină legală:ADNmt;
initiere, replicarea fiind
-identificare genelor alele;
apoi intrerupta in
Mereu pregatiti sa va ajute: functie de baza
•Sef laborator-Baitoi Silvia; existenta in secventa
•Panificare familiala si consult genetic-
de analizat de catre
Macovei Veronica; dideoxinucleotide ;
•Medic sef terapeut- Vames Mariana;
•Sef departament “Inginerie Genica”-
Maidanschi Veronica;
Electroforeza in gel
•Director laborator,medic genetician -
Caldare Irina;
Sistemul
de capilare
Cuptor
Dispozitiv pentru încarcare
probe, catod
Au elaborat: grupa 1101
Macovei Veronica; Caldare Irina; Baitoi Silvia;
Maidanschi Veronica;Vames Mariana.