Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
Tehnică
Etapele prin care se efectuează metoda sunt următoarele:
1
2
Gelul este pus într-o cuvă cu tampon de migrare, ai cărei electrozi sunt cuplaţi la sursa de
curent continuu. Migrarea se opreşte în momentul în care albastrul de bromfenol din tamponul în
care probele au fost solubilizate a ajuns la limita inferioară a gelului.
3
cu un conjugat reprezentat de un ser anti-gammaglobuline specifice, cuplate cu o enzimă (ser de
iepure anti-gammaglobulină umană cuplat cu fosfatază alcalină).
Incubaţia cu acest conjugat este urmată de un nou ciclu de 4-5 spălări, ce îndepărtează excesul de
conjugat nelegat.
Vizualizarea benzilor corespunzătore complexelor antigen-anticorp, se realizează prin
adăugarea substratului enzimei, ce va fi descompus de aceasta într-un produs colorat insolubil.
4
În cazul în care anticorpii din conjugat au fost marcaţi cu izotopi radioactivi, detecţia se
realizează prin autoradiogramă (impresionarea unui film radiologic în dreptul complexului imun).
Evaluarea rezultatelor
5
Dg. HIV
6
7
8
1. Control pozitv
2. Proba pozitva
3. Test negativ
9
A – control strip showing antibody responses to key HIV proteins
10