Not iuni

introductive despre metabolism

Toateorganismeleviisegsescpermanentntrocontinuluptpentrusupravieuire.Supravieuirea nseamncorganismeleviidepunefortpentruaiconstruiidezvoltacorpulcuajutorulenergieii amaterialelorbrutedisponibilenmediulcarelenconjoar.Deasemenea,depunefortpentrua protejastructurilenaltorganizatecarelesuntcaracteristicempotrivaforelorcupotenialdistructiv dinmediuldevia.nceledinurm,darnuultimullucru,trebuiespoatssereproducpentrua iasigurasupravieuireacaspecie,petermenndelungat,tiutfiindfaptulcindividualorganismele viiauoduratdevialimitat. Pestetoateacesteasesuprapuneinecesitateadeaseadaptamereulamediuldeviaodatcu schimbareacondiiiloroferitedeacesta. Toateacesteactivitiimpunnecesitateacaorganismeleviispoatdesfuraprocesecareincludn modconstant(iobligatoriu)utilizareadeenergieimaterie.Acestlucrunseamncorganismelevii trebuiesfiecapabiledearealizanmodcontinuucapturareaenergiei,stocareaacesteiadeo manierconvenabiliutilizareaenergiei.Pedealtpartetoateorganismeleviitrebuiesfie capabilespreiamaterie,sotransformedupnecesitilepropriiisoutilizeze,pstrndn acelaitimpicapacitateadeaeliminamateriadevenitinutil. Celmaiimportantaspectrmnecapabilitateadeautilizaenergie.Energiaoputemdefinica potenialuldeadesfuralucru(mecanic). Frenergienusepoatedesfuraactivitateanormalaorganismelorviiiastanseamnncetarea vieiiaceluiorganism. nmodnormalobservareamanifestrilorviului(vieii)cretere,dezvoltare,micare,reproducere areloclanivelmacroscopic(individualsausupraindividual).Darestepedeplincunoscutiacceptat astzictoateorganismeleviiiaubazanprocesecaresedesfoarlanivelmolecular.Aici,prin intermediulunorprocesechimiceaflatesubuncontrolextremdestrict,suntadministrateenergiai materialeleutilizatepentrupstrareaorganismuluinviacudesfurareafunciilorsale. Necesitileenergeticeidemateriealeunuiorganismviupresupuncapabilitialeorganismuluiviu nceeaceprivetepreluareadinmediuaenergieinformelencareesteeadisponibildaria materialelorbruteutilizabileaacumsunteledisponibilenmediulnatural.Deasemenea,aceleai necesitienergeticeidemateriepresupunexistenaunormecanismeprincaremoleculelepreluate spoatfidescompusenelementesimplesimultancugenerareadeenergie,darimecanismede stocareaenergieieliberateideeliberareaacesteiaspreafiutilizatatuncicndiundeeste solicitatdenecesitileorganismuluiviu.Suntnecesareimecanismeprincaremoleculelesimples poatficonvertitenmoleculecomplexe,specificeorganismuluirespectiviaracesteprocesede construciesevordesfuracuconsumdeenergie. Pnlaurm,sintetiznd,putemspunecnoricemomentcompoziiamolecularaunuiorganism viuestesumaproceselordedegradareiacelordesintezcareaulocnorganismulrespectiv.

Metabolism=totalitateatransformrilorchimicelacaresuntsupusesubstanelenorganismul
viu. Maimultcuroldidacticicuscopuluneimaibunesistematizriputemdiscernedoumaridireciide transformareasubstanelornorganismulviu:anabolismulicatabolismul.Deise ntreptrundmereu,fiinddoveditcelementedincilecatabolicepotfioricndutilizatede 1

organismpentrucileanaboliceiinvers,acestedouaspectealemetabolismuluisunt,ngeneral, prezentateistudiateseparat.

Anabolismulestenlnuireadeprocesebiochimicenurmacrorasuntsintetizatesubstanele propriiorganismului.Proceseleanaboliceaulocntotdeaunacuconsumdeenergie. Catabolismulreprezintsumaproceselorbiochimicenurmacroraenergialegturilorchimice esteeliberatspreafiutilizatdectreorganismpentrurealizareafunciilorsale.Procesele cataboliceaulocntotdeaunacueliberaredeenergie.

Esteinteresantderemarcatcncazulorganismelorheterotrofeanabolismulncepe,deobicei,dup osecvencatabolicnecesarpentrudescompunereanutrienilordinhranncompuisimpli utilizabilicamaterialpentrusintezacompuilorproprii. Anabolismulicatabolismulcaproceseantagonicesuntnstrnsinterdependeninupotfi separate.ncetareaanabolismuluiiacatabolismuluilaunorganismviu,cualtecuvintencetarea metabolismului,ducelamoarteaorganismului.

1. Noiuni de energetic la organismele vii

Estetiutclucrulmecanicseefectueazatuncicndunobiectaplicoforasupraunuialtobiecti ischimbacestuiadinurmpoziiasaustareaderepaus/micare.Omulefectueazlucru(mecanic) atuncicndloveteomingesaucndimicpleoapele,daricndgndete.

Lucrul(mecanic)estedefinitcatransferuldeenergiecarearelocdelauncorplaaltulsaudintr unlocnaltul.
Energiautilizatdeorganismeleviiestereprezentatsubmaimulteforme:lumin,electricitate, cldur.Privitcaformdemanifestareenergiapoatefisimpluclasificatcaenergiecineticsau potenial. Energiacineticesteaceaenergieexistentlaunobiectnmicare:opicturdeapncdere, muchiulncontracie,cromozomiinmicaredealungulfibrelorfusuluidediviziunentimpul mitozei(casdmdoarctevaexemple).Energiacineticexistnmulteforme,inclusivenergia termicsaucldura(micareaaleatorieaparticulelor),energiamecanic(micareacoordonata particulelor),energiaelectromagnetic(deplasareaundeielectromagnetice)ienergiaelectric (deplasareaparticulelorcusarcinelectric).Energiapotenialesteaceaenergiestocat/ depozitat.Unobiectposedenergiepotenialprinprismapoziieisalefadeuncmpdeforede atraciesauderespingere.Energiapotenialmbracieadiferiteforme:energie(potenial) gravitaional(atraciadintredouobiecte),energie(potenial)chimic(atracianoruluielectronic ntrolegturchimic). Dacvomanalizacazulparticularalenergieipotenialepecareodeineunsportivcarefacesrituri napdelatrambulinvomobservacenergiapotenialasaestedatoratatracieigravitaionale exercitatentresportiviPmnt(figura1).Deasemeneavomobservacaceaenergiepoteniala aprutcaurmarealucruluimecanicefectuatdemusculaturasportivuluipentruaurcalanivelulde undesevaefectuasritura(saulucrulmecanicefectuatdeliftulcarelaurcatpesportivla respectivulnivel).nacestfelenergianecesarlucruluimecanicefectuatafosttransferatsubforma uneienergiipotenialectreunaltobiectsaulocaie.Srituraimplicautomatcderea.ntimpul cderiienergiapotenialvaficonvertitnenergiecinetic.Esteunlucruimportantdeobservatc energiaafostconvertitndiferiteforme,darnuafostniciodatcreatsaudistrus. 2

 xempluilustr reazfoartebineprimulp principiualtermodinam t icii. Acestex

Primulprinc cipiualter rmodinam micii

Cantitatea atotaldee energiedinunivers u esteconstant. Energianupoateficreat c saudistruscidoa arconvertit dintroform mnalta.D acunobiec ctsauun procesctigocantitatedeen nergieacest lucrusepetrecepeseam mauneipierd derideenerg giecare arelocn naltpartenunivers. Deobice ei,nnatur,organismele eviinuvorg sienergien formeuorutilizabile. ncelemaimulte m situaiio organismelevor v obineenergiesubo anumitfor rmivorfinevoiteso converteasc cntro altform mnaintede eaoputeautiliza. u Deexe emplu,organismelefoto osintetizatoa reaucapacitateade acapta iconvertien nergiaemis deSoaresu ubformarad diaieielectro omagneticenenergialegturilor + chimicedinATPiNA ADPH+H .Ac ceastaestem maideparteconvertitn nenergialeg gturilorchim micedin molecule eledetriozo ofosfai,apoidefructoz i,caultimpas, p ceadeglucoz g .Mec canismelede e degradarecontrolat aglucozeiconduclaob binereadeATP A carepoa atefiutilizat deorganism muln entrucilean nabolicecevor v sintetiza ceilalicomp puinecesariorganismulluincauz.Pede cauzpe altpart temoleculede d ATPsuntutilizateip pentruaactiv vatransporto oriiproteicid dinmembranele celulare. .Transportuldiverselormolecule m con ntragradient tuluideconc centraie(tra ansportactiv v)ducela obinere eauneialteforme f deene ergie:energiiachimicpo otenial.Aceastform deenergie potenia alareomar rensemnta atepentruto oateorganism melevii. Toatemoleculelepre ezintostab bilitatemare dincauzale egturilorchimiceformat tentreatom mii componeni.Lamom mentulformriimolecule eiatomiicom mponeniajungntrosta aremultmaistabil dectce eanativprin nformareaunei u configur raiielectronicestabile.Nu N toateleg turilechimiceau nsacee eaistabilita ate.Energiade d legtur( energialegturiichimice e)esteoms surastabilitiiunei legturichimice.Semsoarnkilojouli k (kJ) iesteechiva alentulcantitiiminime edeenergienecesar pentruruperealegturilor t dintre eceidoiatom mintrunmoldesubstan(semso oarnkJ/mo ol). Aceeaicantitatedeenergieeste eeliberatla aformareale egturiirespective.ntab belulurmto or (tabelul1)seregsescctevavalorialeenerg giilordelegturpentru uneledince elemaicomu une tipuride elegturidincompuiior rganici. Tabelu ul1.Energiimedii m delegturaleuno orlegturico ovalente. Tipulleg gturii Ene ergiamediedelegtur(kJ/mol) 436 6 411 1 459 9 3

391 1 346 6 359 9 799 9 494 4

Putemp presupuneau utomatcen nergiadeleg gtur(energ gianecesarruperiiacele eilegturi)esteo msurastabilitiirelativeares spectiveileg gturi.Prinurmareolegturcuoen nergiealegturii t de 799kJ/m molestedecirca c 2orima aistabildec ctolegturcuoenergieelegturiiidedoar391 1kJ/mol. ntroreaciechimicenergialeg gturilorchim micepreexistentelareac ctanitrebuie edepitsp prease elelegturichimiceiapermite p form marealegtur rilorchimicedinproduiiidereacie,proces rupeace cevaave eacarezulta atdegajareadeenergie. Dacvomfa aceodiagram maenergiil orpoteniale ecares nearate emodificrile eenergieichimicepoten ialecareaulocntimpu uluneireaciiichimicevom observacreactaniisuntplasaipediagram mlapoziiile ecorespunztoarestabiliitiirelative ea legturilorchimicedin d compoziialor(figura 2a).

Energiadeactiv vareesteac ceacantitate edeenergienecesarpe entrutension nareairupe erea

legturil lorchimicelanivelulrea actanilorie eareprezint tdiferenadintre d energ giapotenialastrii detranz ziieienergiapotenial areactani ilor.Dacnsistemesteintrodusen nergiadeact tivare atuncire eactaniivoratingestare eadetranziiie,careesteosituaietemporarnc careseruple egturile chimicelanivelulrea actanilorise s formeazlegturilech himicelanivelulproduillordereacie e. Formare eanoilorlegturiareloccueliberare deenergie.Dacnoilele egturiform mateprezintenergii delegtu urmaimici(suntmaist tabile)dect celedinmo oleculelereac ctantatunci cantitateade eliberatdereacieestemaimared ectceanec energiee cesarpentru uruperealeg gturilor.Ac cesttip dereacieesteunacu c ctignetdeenergie isenumetereacieexo oterm.nalltesituaiien nergia legturilorformateeste e maimar redectcea alegturilor rdinreactaniiacesttip pdereacieeste e unul cuconsu umnetdeen nergie,adicoreacieen ndoterm(fig gura2b). Lamodu ulgeneral,va ariaiadeene ergiecarear relocntroreac r iechimicestenum mitcldurde d reacies sauentalpiedereaciei sesimbolize eazcuH.Pentru P reaciileendoterm mevaloareaHeste pozitiv ntimpcepe entruceleex xotermevalo oareaHest tenegativ. norganismeleviisuntdesntln nitereaciile deardere(o oxidrilecelu ulare).Modif ficareadeen nergie careapa arenacestereaciiestenumitcldu urdeardereiestenotatcuHarde . Oxidarea ere compui ilororganicin prezenaoxigenului o va aconducela adioxiddeca arboniap caproduide d oxidarea aicarbonulu uiihidrogen nului. Dealtfel lorganismele eviisuntloc culdedesf urareamult torreaciien ndoiexot terme.Absor rbiai degajare eadeenergie enacestere eaciimbrac cmulteform me.Reaciile edefotosinte ezlaorganismele 4

capabiledeacestprocessuntbazatepeabsorbiaenergieiradiaiilorelectromagneticedinspectrul vizibil.Pedealtparteuneleorganismevii(licuriciiciuperciluminescente)eliminenergiarezultat dinunelereaciisubformderadiaieelectromagneticdinspectrulvizibil.Celmaiadeseans clduraesteformapecareontlnimcamodalitatedeeliminareaenergiei. nciudafaptuluicnmodnormalreaciileartrebuissedesfoarensensulobineriidecompui custabilitatemaimare,reaciiexoterme,existfoartemulteexemple(maicuseamnlumeavie) carearatcreaciileaulocinsensulcellalt,alobineriidecompuicuinstabilitatemaimare, reaciiendoterme. Studiiledetermodinamicaratcnudoarenergiadetermindesfurareaspontanaunuiproces (unprocescarevaavealocfrasistencontinudinafar).Oproprietatefizic,entropia,estecea caretrebuieavutnvedere.

Entropia,simbolizatcuS,esteomsuragraduluidedezordine(fienceeacepriveteenergia,
fienceeacepriveteobiectele). Entropiaestedirectproporionalcugraduldedezordine.Unexempludecretereagraduluide dezordinei,implicit,aentropieiestedesfacereaunuipachetdecriilsareaacestuiascadliber jos. ncazulreaciilorchimiceentropiavacreteatuncicndreactaniisolizisetransformnproduide reacielichizisaugazoi,cndreactaniilichizisetransformnproduidereaciegazoi,unnumr micdemoleculedereactantsevortransformantrunnumrmaimaredemoleculeprodusde reacie,moleculecugradmaredecomplexitateprinreaciesevorconvertinmoleculesimple. Universulfavorizeazcretereaentropiei,nsceidoifactori,energiaientropiatrebuieavuin vederempreunatuncicndsediscutdespreposibilitateacaunprocesfizicsauchimicsse desfoarenmodspontan.Astfelreaciileexotermeicareinduccretereaentropieivoravealoc spontandeoareceambiifactoriimplicaisuntfavorabili.nopoziiecuaceastsituaiereaciile endotermeidincarevorrezultaproduidereaciecugradredusdeentropienuvoravealoc spontan.Celelaltedousituaiiposibile,reaciileendotermecucretereaentropieiireaciile exotermecuscdereaentropiei,vordepindedetemperaturalacareauloc(tabelul2). Tabelul2.Modificrispontaneinespontane. Cretereaentropiei (favorizat) Scdereaentropiei (defavorizat) Reacieexoterm (favorizat) Spontanlaorice temperatur Spontanlatemperaturi joase Nespontanlatemperaturi nalte Reacieendoterm(defavorizat) Spontanlatemperaturinalte Nespontanlatemperaturijoase Nespontanindiferentdetemperatur Schimbrilevoravealocdoarcuaportnet deenergie

Energia liber
Relaiadintrediferenadeenergie,modificareaentropieiitemperaturadereacieafost descoperitdectrefizicianulamericanJosiahWillardGibbssprefinalulsecoluluialXIXlea.Relaia aceastanepermitesfacemprediciinceeacepriveteposibilitateauneireaciideaavealoc spontansaunu.Gibbsafcutdistinciadintreenergieienergialiber. 5

Energialiber(sauenergialiberGibbs)esteaceaenergiecarepoatefifolositpentrulucru
(mecanic)util. ModificareaenergieilibereGibbssenoteazcuG=GfinalGiniial.ModificrilesuntspontanedacG estenegativ.OmodificarecaracterizatdeGnegativ(spontan)areunechivalentcusensinvers icuGpozitiv.Deaceea,oreaciecuGnegativicareeste,prinurmare,spontanvaavea reaciainverscuGpozitiviaceastavafinespontan.Realizareaaceleireaciiinversepresupune utilizareadeenergieliberobinutdintroaltschimbarecaresprezinteGnegativ.Maimult, transformareaenergieidintroformnaltaimplicpierderideenergiesubformdecldur. Toatetransformriledinuniverssuntguvernatedeacestmoddedesfurare.Dinacestmotivtoate transformrileducdirectsauindirectlacretereaentropieiuniversului.Aceastaestealdoilea principiualtermodinamicii.

Aldoileaprincipiualtermodinamicii
Entropiadinuniverscretecufiecareschimbarecareareloc. Matematic,S>0. Organismeleviiparanclcaprincipiulaldoileaaltermodinamicii.Proceseleanaboliceaucarezultat formareadestructurimolecularenaltordonate,antientropice,plecndusedelaelementerelativ simple,cuentropiemare.Lanivelindividualsausupraindividualorganismeleviiconstruiescstructuri neviidarcuoorganizarenalt.AcestemodificriimpliccretereaenergieilibereGibbs.Toate acesteschimbrigeneratedeorganismeleviisunt,naparen,ncontradiciecuprincipiulaldoilea altermodinamicii,deoarecerezultatullorarcauzaordonareauniversului,fiedoariunpic. Pedealtpartestudiileauartatcoricemicordonareindusdeorganismelevii,porninddela proceseleanaboliceiterminndcustructurilenevii(naltorganizate)construitedeorganismelevii, aucarezultatocretereimaimareaentropieiprinintermediulproceselorcatabolicecuplatesaual celorgeneratoaredeenergienecesareconstruiriidestructurinaltorganizatediverse.Unexemplu simpluarfiuncopilcareducecumnaspregurunfruct.Micareaaceastanupoateavealoc spontan.Cretereadeenergiepotenial(ridicareanlimiilacaresevagsinfinalfructul)i scdereadeenergieliberGibbs(prinpoziionareafructuluilaunnivelmaiordonat)estecuplatcu maimulteprocesefiziologiceibiochimicegeneratoaredeentropie(consumuldeATPiconversiasa nmoleculemaisimpleplusocantitatedeenergieliberutilizabilpentrugenerareagndului, transmitereaimpulsuluinervos,contraciamuscularetc.).Organismulviuobineaceaenergieliber Gibbsnecesarprinconversiamoleculelornaltorganizatedinfruct(idinoricealtealimente)n moleculecugradredusdestructurare(CO2iH2O)irecuperareauneipriaenergieisubforma legturilormacroergicedinmoleculadeATP.Pertotal,graduldeordineasociatcuridicareafructului estemaimicdectgraduldeentropieindusdeproceselenecesareridicriifructului.Carezultat entropiauniversuluicrete. Oanalizatentamoduluicum,aparent,organismeleviinurespectprincipiulaldoileaal termodinamiciiaratc,defapt,laniveluluniversuluicantreg,ordineadeaiciarecarezultatnalt parteoimaimaredezordine,ocretereaniveluluientropieiuniversului. Termeniiendotermiexotermsuntutilizaipentruadescrieschimbrileenergeticetotalecareauloc ntroreaciechimic.DescriereaschimbrilordeenergieliberGibbscareaulocnaceeaireacie chimicsefaceutilizndtermeniiexergoniciendergonic.Oreacieestecatalogatcaexergonic dacaestespontaniprinurmareacompaniatdeoreducereaenergieilibereGibbs(Geste negativ).nmodopusoreacieestecatalogatcafiindendergonicdacanuestespontaniareloc cucretereaenergieilibereGibbs(Gestepozitiv).ValoareaGoferomsuracantitiide energielibernecesarpentrurealizarearespectiveireacii. 6

DacadiscutmdesprecazulparticularicompletgeneralizatalobineriiglucozeidinCO2iH2Oi reversulacestuia,oxidareaglucozeivomavea:

Combinaii fosforilate macroergice

Organismeleviisuntsistemetermodinamicedeschiseaflatentrostaredeprtatdestareade echilibru(carenseamnmoartea). Meninereaorganismuluiviuntrostaredeprtatdeceadeechilibrupresupuneposibilitatea organismuluideaefectuacelpuin3sarciniprincipale.Realizareacelor3sarcinisefaceprin utilizareaenergieilibereobinutedinreaciilecatabolice.nordineaimportaneiloraceste3sarcini sunt: 1. sintezacompuilornecesariorganismului 2. transportulactivalsubstanelormpotrivagradientuluideconcentraie 3. micarealaorganiteleiorganismeleceprezintaceastproprietate Energianecesaracestorproceseiareorigineanmediulnconjurtor. Funciedetipuldeorganismaceastenergiearesursediferite: a) organismelefototrofe(bacteriifotosintetizante,algeiplanteverzi)iauenergiadinmediusub formafizicaenergieielectromagnetice(fotoni)pecaleaprocesuluidefotosintez. b) organismelechemotrofeiprocurenergiaprinoxidareasubstanelornutritive(categoria aceastaincluzndsubstaneanorganicesausubstaneorganice). Deoareceorganismeleviinupotutilizaenergialegturilorchimicedeaceeaimaniercumse ntmplncazulunuimotortermicatuncintreproceselecatabolice,exergonice,generatoarede energieiproceseleanabolice,endergonice,consumatoaredeenergietrebuiesexistenite depozitariaienergieilibere.Acetidepozitarisuntsubstaneomniprezentenorganismelevii,se numescsubstanemacroergicedatoritposibilitiilordeastocaenergiaideaoeliberacumare uurin.Energialiberextrasdinmediu(fiedinenergiaelectromagnetic,fiedinenergia legturilorchimice)estestocatdoartemporarncompuiimacroergici.Acetiaaunaltpotenial energeticconinndomarecantitatedeenergielibercepoatefieliberatcurapiditateatuncicnd estenecesar. Legturachimicacreirupere(ex.hidroliz)estecuplatcueliberareauneimaricantitide energiesenumetelegturmacroergiciestenotatprintrunsimbolspecial: Substanecucaracterpronunatmacroergicsuntesteriaiunorsubstaneorganicecuacidulfosforic sauaciltioesteri.Dintreacestesubstaneceamaidesntlnitesteaciduladenozintrifosforicsau ATPicareestestructuralunnucleozidtrifosfat.CaracteristicpentrumoleculadeATPeste prezenaa2legturimacroergicedetipfosfoanhidridicsaufosfodiesteric.

 ATPfuncioneaznorganismeleviiambivalentdeoareceestevehicululidonoruldeenergieliber celmairspndit,darpoatefiidonornucleotidic.nambelecazuriacestlucruesteposibildatorit cantitiimarideenergieliberpecareoelibereazhidrolizalegturiifosfodiesterice (fosfoanhidridice).nmareamajoritateasituaiiloravemdeafacecutransferulrestuluifosfatla unacceptorcareestealtuldectapa. PrinhidrolizaATPuluicuformareadeADPiaunuiradicalfosfatsaucuformareadeAMPiun radicalpirofosfatrezultmaricantitideenergieliberutilizabildectrecelulavienprocesele metaboliceconformreaciilor1i/sau2.

NH2 N N O
5'

O O P OO

O P OO-

N
1'

N
2'

O
3'

H2C
4'

P O-

H2O H+ 1

OH

OH

H2O H+ 2

O Adenozina
ADP

O O P O-

O O P OO O-

P O-

O-

Adenozina
AMP

+
O P O-

+
O

O P OOH2O H+

Fosfat Pi

HO

O-

HO
Pirofosfat (PPi)

P OO

pirofosfataza

HO

P O-

Fosfat Pi

ValorilecalculateteoreticpentruhidrolizaATPcuobinereadiferiilorproduiposibildehidroliz suntredatentabelul3. Tabelul3.VariaiaenergieilibereGibbspentrureaciiledehidrolizaleATP,AMPipirofosfatului anorganic Reactaniiproduidereacie Ghidroliz(kJ/mol) 32 45

AMP + H2O

Adenozina + Pi

13 29

Variaiaenergieiliberepentruacestereaciinmediulfiziologicnormalalorganismelordepinde foartemultdepHulmediului,deconcentraiaionilormetalicibivaleni(Mg2+,Ca2+)ideforaionic amediului. FormaactivaATPestecomplexulacestuiacuioniideMg2+(saumairarMn2+).Potexistadou formealeacestorcompleciisecunoatecnsoluiiapoaseestefavorizatcomplexul.Pentru convenienanotaieisevasubnelegecdefiecaredatcndvorbimdespreATP(daridespre ceilalinucleozidtrifosfai)nereferimlacomplexeleformatedeacestacuioniideMg2+.

Civafactoricontribuielanivelulridicatalenergieiliberedisponibilizatprinhidrolizalegturilor fosfoanhidridicedinATP: Respingereaelectrostaticlanivelulatomilordeoxigencusarcinnegativdinresturile fosfat(lanivelcelularnscomplexareacuioniideMg2+ducelaoparialneutralizarea acestorsarcinicarearecarezultatoreducereavariaieiGhidroliz) Produiidehidroliz,fiecvorbimdeATPifosfatulanorganicsaudeAMPipirofosfatul,au omultmaibunasolubilitatenmediulapos.Ioniidizolvaisuntautomatmultmaibineizolai ntreei.Scderearespingeriicareaparentregruprilefosfatfavorizeazhidroliza. ProduiidehidrolizauostabilitatemultmaimaredectceaaATP.Electroniidelaatomiide oxigenterminalidinradicaliifosfatsuntmultmaidelocalizaidectceidinatomiideoxigen implicainlegturilefosfoanhidridice.HidrolizaATPcuformareadeADPifosfatanorganic ducelanlocuireaunuiatomdeoxigenaflatntropuntefosfoanhidridiccudoiatomide oxigenterminali.

AltesubstanecurolmacroergicnorganismeleviisuntanalogiaiATPlacarebazaazotatutilizat esteoaltadectadeninaiavemastfel: Pentruguanin,guanozintrifosfatul

OH N H2N O CH2 N

O O P

O-

O O P

O-

O O P O-

N O

OH
guanozintrifosfat

OH

Pentrucitidin,citidintrifosfatul
NH2 N O O O P

O-

O O P

O-

O O P OO CH2 O

OH
citidintrifosfat

OH

Pentruuracil,uridintrifosfatul
O HN O O O P

O-

O O P

O-

O O P OO CH2 O

uridintrifosfat

OH

OH

nafaranucleozidtrifosfailornsistemeleviimaiexistialicompuimacroergici:acilfosfai, enolfosfai,fosfoguanidinele,acetilfosfatul.
O H3C C

O O P OO

O- acetilfosfat

O C H C

P
-

Oacid 1,3-bisfosfogliceric

O OH O P

CH2 O

O-

O C C

OH O

CH2

P O-

O-

acid fosfoenolpiruvic

10

ncazulf fosfoguanidi inelor

H2N+ C N R
fosfogua anidina formula generica g

H N X

O P OO-

substitui indnaceast tformulge eneral

X este R este

CH3 H2C
HH2C CH2

fosfocreatin na (creatinfosf fat)

COO

fosfoarginina (argininfosfat) )

X este R este

CH2

CH NH3+

COOC

Combina aiilemacroe ergicealeaci iduluifosforiicprezintocapacitatepronun p atd detransferal radicalul luifosfatctre t altemolecule.Prezint tinteresfap ptulcfunciedepoten ialuldetransferal 11

restuluifosfatATPareopoziieintermediarnseriamoleculelorfosforilateimportante.Aceast poziieintermediarpermiteATPsfuncionezefoarteeficientcatransportoralradicaluluifosfat. Acestfaptpermitedeasemeneacatransferulradicaluluifosfatssefacspontandelacompuii situaimaisuspescaraenergeticctreADPideasemeneacatransferulsaibloclafeldelaATP ctrecompuiiaflaisubelnscaraenergetic. AsemeneaprecursoriaflaienergeticsubATPsunt:glucoza,fructoza,glicerolul. AstfelATPestedonorulprincipaldeenergieliberutilizatnsistemelebiologice.RezervadeATPa uneiceluleasigurcerineleenergeticepentru12minuteapoifiindnevoiederemprosptareprin intermediulcilorcatabolicecuutilizareasubstanelorsubstratcorespunztoare. RataderemprosptareaATP(turnoverul)estefoarterapiddardepindenmoddeosebitde activitateametabolicacelulei.

Trsturi generale ale cilor metabolice

nceluleleviisintezasaudegradareadiferitelorsubstaneaulocprinintermediulunorseriidereacii catalizatedectreenzime.Acestesuccesiunidereaciipoartdenumireadecimetabolice. Toatereaciilecareaulocnorganismelevii,metabolismul,suntcatalizateenzimaticisunt reversibile.CndoreaciereversibilatingestareadeechilibruvaloareaGdevineegalcuzero ceeacesetraduceiprintrunconinutdeenergieliberGibbsegalcuzero.Ocelulalecreireacii reversibileauatinsechilibrulesteocelulmoart.Organismeleviiaunevoieseviteajungerean aceastsituaieifolosescdiferitemijloacepentruapreveniaceastsituaie.Seprevineacumularea nsoluiacelularacompuilor,sefolosetecompartimentareacelular(laeucariote).Deoarece majoritateacilormetabolicesuntreprezentatedenlnuiridereaciiestenlturatprodusulfinalal ciifieprineliminareasanmediulnconjurtor(CO2caprodusfinalalrespiraiei)sauprinconversia nproduidedepozit(glucozacaprodusfinalalfotosintezei,convertitnamidoncareestedepozitat nstructurispeciale). Compuiichimiciintermediaridariproduiifinaliaicilormetabolicesuntdenumiimetabolii (singularmetabolit). ntrunorganismviuexistomultitudinedecimetabolice. Reaciilediferitelorcimetaboliceaulocsimultannfunciedenevoileceluleiisuntstrictcorelate ntreelepentruaasigurarandamentulieficienauzineicelulare. Metaboliiipotfiinterutilizaidectremaimultecimetabolice. Pentruobinereaunuiprodusutilceluleiestenecesarcaaceacalemetabolicsfieireversibilpe ansamblulei,ceeacepresupuneeliberareauneicantitideenergieliber.Deintrocale metabolicpotexistaireaciireversibile,peansamblu,sensulciimetaboliceestedatdereaciile ireversibile. Dacexistmetaboliicesepotinterconverti,caleadelaAlaBestediferitdecaleadelaBlaA. Acestlucruesteobligatoriupentruaasiguraeliberareacantitiideenergieliberpentruapermite termodinamicdesfurareareaciei.Deasemenea,pentruaputeacontrolainterconversia,demulte oricaleaActreBarelocnaltcompartimentcelulardectcaleaBctreA. Fiecarecalemetabolicareoreaciedeiniiereacestprimmetabolitrezultatavnduniculroldeafi precursornbiosintezaprodusuluifinalalciimetabolicerespective.Decelemaimulteoriaceast 12

etapiniialesteceacudiferenaenergeticceamaimareasigurndnacestfelfluenacelorlalte reaciinsensulobineriimetabolituluidorit.Deasemenea,controlulciimetaboliceseexercitde celemaimulteorilanivelulacesteireaciiiniiale,celedepeparcursfiindmaipuinsupuse controluluiidecurgndfunciedecantitateametabolituluiiniialcareestedisponibil.

Mecanismele reglrii metabolismului

Cilemetaboliceauloccuvitezediferitecorespunztoareroluluiindividualalfiecreian metabolismulorganismului.Vitezelediferite,specificefiecreicimetabolice,suntdeterminate directdectremecanismeledecontrolspecificefiecreicimetabolice.Cercetrileaureliefatc existmaimultetipuridereglareacilormetabolice. Studiereaamaimultecimetabolicecunoscuteaduslaconcluziacexistmaimultemecanismede controlalcilormetabolice.nsdeicilemetaboliceprincipalesuntcunoscutentotalitatedespre mecanismeleimodalitiledereglareaacestoranusecunosctoatedetaliile. Oprimmodalitatedecontrolacilormetaboliceesteconstituitdecontrolareacantitilorde enzimeimplicatenrespectivacalemetabolic.Cantitateafiecreienzimeexistentncelulavieeste strictcontrolatgenetic.Reglareabiosintezeiestecontrolatprininduciairepresiabiosintezei proteinelor.Totreglatesteivitezadedegradareaenzimelor. Oaltmodalitatedecontrolaactivitiienzimaticeesteicontroluldirectalactivitiicataliticea diferitelorenzimerealizatdecelemaimulteoriprinconexiuneinvers(feedback).Modularea activitiienzimelorexistentenceluleoferunmecanismdecontrolfinaldesfurriiproceselor metabolice.Esteunmecanismprincarerspunsulobinutestepromptncondiiileschimbrii necesitilorcelulei/organismuluicaurmareamodificriloraprutencondiiiledemediu. Inhibiiaprinconexiuneinvers,saufeedbackestecaracteristiccilormetaboliceideobicei blocheazprimaenzimaciimetaboliceacestfaptducndlablocareacompletaciimetabolice. Unaltmecanismdereglareestereprezentatdereglareaallosteric(allo=altul;steric=spaial)care constninteraciuneadintreinhibitoriiistimulatoriienzimei.Decelemaimulteoricainhibitor acioneaztocmaiprodusulfinalalciimetabolicesaureaciei. Altposibilitatedereglaresereferlamecanismeledefosforilaredefosforilarealeunorresturide aminoacizidincompoziiaenzimelor.Decelemaimulteorirestulfosforilatdefosforilatesteunrest deserin. Deasemeneareglareasepoatefaceiprinevaluareastatusuluienergeticgeneralalcelulei.Este evidentconcrcturenergeticridicatvaducelablocareareaciilorceduclaeliberareade energie.Reglareafacecancrcareaenergeticaceluleisfiemeninutntrenitelimitenguste spreaasigurastabilitateacelulei.

13

2. M Metab bolism m glu ucidic c

Dacvom mprivicuatenielalume eavieaacu umesteeaas stzipeTerravomobser rvacuuurin nc entropia ageneratde ereaciiletermonucleare edinSoare iconcretizat t(printrealltele)nener rgia emisiforagravita aionalexer rcitatstla baza(aproape)tuturorproceselor p ca aresedesfoarpe Pmnt. Evoluialumiiviiarat tcdepend denadeSoa areesteapro oapetotal.Speciile S care eiausursade energie nenergiale egturilorchimicedinmo oleculeanorg ganicesuntprimitive p can niveldedezv voltarei foartere edusenumer ric.Toatecel lelaltedepin nddirectsauindirectdeenergia e solar rluminoas. Procesul ldecaptareaacesteiene ergiiideco onvertirenenergia e potenialalegt turilorchimiceduce caprimr rezultatpalp pabillaforma areadegluciide.Deaceeavomncepediscuiaco oncretasupra metabolismuluicuglucidele,camolecule m de importancapitalpen ntrubunulm mersallumiivii. v

2. Elem mente de e structur a glucidelor

Glucidele(sauzah harurisauca arbohidrai) suntpolihid droxialdehide esaupolihid droxicetonesau s

compuicarepotfihidroliza h icu uformareaa acestordou categoriidesubstane . Glucidele epotfisimp plesau/icom mplexeipot tgrupantroaceeaimo oleculdela atreipnla cteva miideat tomidecarb bon(alturide d careseg sesciceilaliatomiasociai).Proce entualsuntcelmai binereprezentatgru updecompuiorganicid epeTerrare eprezentndcirca50%d intotalulbio omasei. Clasificareadupnumruldeuniti(carees stecelmaiad deseafolosit t,ounitate reprezentn ndacel element tcenumaipoate p fihidro olizat)nseam mnmprir reaglucidelorntreigrup pe: 1. M Monoglucidesaumonoza aharidesauz zaharurisimp plesauoze 2. D Diglucidesaudizaharide 3. P Poliglucidesa aupolizaharidesaupolio oze Monoglu ucidelesuntcelemaisim mpleglucide. Elenupotfihidrolizate naltecomp ponentenco ondiii normale e.Existdou seriidistinc ctedemono glucidefunc ciedeprezenauneigru prifuncion nale aldehidic cesauauneiacetonicenmolecul. Toateglucid delesuntstru ucturatepor ninddelace elemai simplee exemple,gliceraldehidaidihidroxiac cetonacareau a fiecarectetreiatom idecarbon.

14

nafarastructuriisimple,desfurate,nplan,glucideleprezint,datoritexisteneinaceeai molecul(apropiateunadealta)amaimultorgruprihidroxiliauneigruprialdehidicesau cetoniceposibilitateadeciclizareinterncuformareauneimoleculecarenumaiprezintgruparea aldehidicsaupeceacetonicdarcareareonougruparehidroxil,numithidroxilglicozidic.

nafaraacestorformuleplaneexistaiformuleledereprezentarespaial,baieiscaun,carenedau oideemultmairealistasupradispoziieiatomilorilegturilordintreacetianmoleculaglucidului. Diglucidelesuntglucidecompusealecrormoleculeconindouunitimonoglucidicelegatentre eleprintrolegturglicozidic.Laniveluldiglucidelornumaiputemvorbidespreexistena gruprilorfuncionalecetonicsaualdehidicntructacesteaaufostconvertitedejaprintrecereala formeleciclicealemonoglucidelor. Formareadiglucideloriapoliglucidelorpresupunerealizareadelegturilacareparticipgruparea hidroxilglicozidicinurmarealizriiacestornoilegturisunteliminatemoleculedeap.

15

 Poliglucidelesuntformatedintreisaumaim multeunitimonoglucidi iceunitentr reeleprinlegturi glicozidic cedeacelaifelsaudediferite d tipurii.Oclasificar remaiveche edistingeala anivelulcons siderat astzialpoliglucidelo orcaexistn ndoligoglucid dele(cupnla10unitimonogluciidice)iapoi i uzisecumaimultde10 unitimono oglucidice. poliglucidelepropriu

anumeroasegruprihiidroxilicon nfiguraiamo olecularna ansamblulei permito Prezenanmolecul naltreactivitateaacestor a grupriceeacef facecaglucid delesfieuormodificab bilepringref farea altorgru upefunciona alesau/iaunor u catene laterale.

16

 censtructur ramoleculelo ormonogluc cidelorexist atomideca arboncusub bstituenidif ferii Deoarec (atomid decarbonch hirali)imole eculelensin nesuntmoleculechiraleadic a potrot tiplanullum minii polarizat teisepotprezenta p sub formaadoi izomerioptici,DiL. Cazulcelmaisimpluestecelalgliceraldehide eicareareunsinguratomdecarbon nchiralipot texista doardou umodeledeconfiguraieaizomeril orsioptici. .

Lamolec culelecumaimuliatomidecarbona useriaLa asimetrici,apartenenalaseriaDsau monoglu ucideloreste edatdecon nfiguraiaato omuluideca arbonchiralcel c maidep rtatdegruparea carbonilicsauceton nic(atomuldecarbonc cunumrulde d ordinecel maimare).
H C H HO H H C C C C OH H OH OH H HO H H HO H HO O O C C C C C H OH H H H

CH2OH

CH2OH L-glucoza

D-gluco oza

nmodn normalmonoglucidelere egsitenna aturaparin nserieiD. a,neregsit alcomparati Lglucoza nnatur,prezint p conf figuraieopu uslafiecare ecentruchira ivcuD glucozae existentnnatur.

17

3. Biosinteza glucidelor
3.1. Fotosinteza
Consideraii privind radiaiile electromagnetice Soareleemiteenergiesubformderadiaiielectromagnetice.Acesteasepropagprinspaiusub formdualdeundicorpusculioparte(mic)alorajungepePmnt.Cuoarecareaproximaie discutmdespre1.5x1022kJcareajungpeTerrazilnic.Dinaceastcantitateimensdeenergiecirca 1%esteabsorbiticonvertitdectreorganismelefotosintetizatoare. Radiaiileelectromagneticeemisedesoareacopertotspectruldelungimideund.Dinacest spectrularg,doarofereastrdestuldengustestereprezentatdespectrulvizibil(acelelungimide undlacaresuntsensibilesistemeledefotorecepiealeorganismelorvii). Cuctlungimeadeundestemaimiccuattenergiaundeirespectiveestemaimare(valoarea extremradiaiilegamma). Radiaialuminoasprezintdualitateundcorpusculntructuneleproprietisunttipicedeund, altelesunttipicedeelementmaterialdiscret.Interaciunearadiaieiluminoasecumateriaarelocn pachetediscretedeenergienumitefotoni.Energiaunuifotonestedirectproporionalcufrecvena radiaieicreiaiaparine.Conformteorieicuanticeenergiaradiantpoatefiabsorbitsauemis doarncantitispecificenumitecuante.Absorbiauneicuantedeenergiedectreomoleculduce latrecereaeidinstareadeenergieminimlaostareenergeticsuperioar,unorbitalenergeticmai nalt.Pentrucaspoatabsorbienergieestenecesarcaaceacantitatedeenergiesfieexactcea existentntreceledoustrienergeticealemoleculei.Lamoleculelecomplexe(cazulclorofilelori alcarotenilor)existmaimultelungimideund(zonaalbastruvioleticearoie)lacareaceste moleculeabsorbformndspectrulcaracteristicalfiecreimolecule.Toateacelelungimideund neabsorbitedeclorofilformeazculoareapecareoputemnoivedea.Deaceeaaceastaapare verde,culoareapredominantnregnulvegetal. Moleculelecapabilesabsoarbenergiafotonilorsuntcaracterizatedeprezenanstructuralora lanurilorlungideatomidecarbon,adesealegaintreeiprinlegturidubleconjugate,precumi prezenamultiplelorinelealctuiteexclusivdinatomidecarbonsaucareauialtespeciiatomice. Aceaststructurarepermiteouoarmigrareaelectronilordelaniveleleenergeticeinferioarectre celesuperioare. Deasemeneaodatceunelectronafostexcitatrevenirealastareainiialdestabilitatemaximse poatefacepediferiteci: 1. 2. 3. 4. revenireneradiant emitereadefluorescen transferrezonantdeenergie procesedeoxidoreducere

Situaiaderevenireneradiantsentlnetencazulcndmolecularevinelastareainiialprin conversiaenergieincldur. ncazulfluoresceneirevenirealastareainiialsefaceprinemitereaunuifotondardincauza relaxriielectronuluispreostaremairedusenergetic,energiafotonuluiemisestemaimicdect cearecepionat,decilungimeadeundafotonuluiemisvafimaimaredectaceluiabsorbit.n cazulparticularalclorofileloremisiaarelocnzonainfraroie,dincolodelimitaroievizibila spectrului.

18

ncazult transferuluirezonantdeenergie,ene ergiadeexci itaieestetransferatmo oleculelorad diacente prininte eraciunintreorbitaliimoleculariaia acestora.Omolecul m vec cinuneiaex xcitatepoate eabsorbi fotonule emisdacac cestaestelalungimeade eundcorespunztoare. Procesel ledeoxidoreducere r pre esupuntrans sferulelectro onuluiexcitat tlaomolecu ulnvecinat. Electronulexcitatest tesituatpeun u orbitalele ectronicneo ocupat,cuen nergiemare,ideaceeapoatefi datuneialtemolecule.Moleculele M cu uelectroniex xcitaisuntagen a ireduc torifoarte uorced poatefioalt puternic ci.Revenirealastareainiialseface prinreducer reauneimol lecule(carep t molecul identicsauomolecul convenient tdinmediu ulimediatapropiatalmo oleculeiexcitate). .Transferulrezonant Fotosint tezaestebaz zatpemodeleledetran nsferrezona antideoxid doreducere. r joacun nroldeosebit tnabsorbiaenergieilu uminoasedectrepigmeniiaccesori iitrecereaeictre molecule eledeclorof filntimpce eproceseler redoxsuntim mplicatenfo ormareaoxig genuluii/sa aua + NADPH+ +H . Molecule i structu uri celulare e implicate n procesu ul de fotosin ntez Procesul lfotosintetic csedesfoa arnstructu urinaltspecializatedininteriorulcel ulei.Esteunfapt cunoscutiacceptatclabazaprocesuluide efotosintezstaumolecu ulespecializa atenprelua area energieifotonuluiiconversiaac cesteiaprinr realizareade elegturichimicedetipm macroergicsau s obinere eadeechivalenireductori t cevorfi utilizateapo oidectrece elulpentrus sintezadifer ritelor substane. Molecul lelespecializ zatenprelua areaenergie eifotonilorsu untclorofilel le.Alturide eacesteasegsesci altesubs stanecurolajuttor:ca aroteniifosf sfolipoprotei ine. Clorofile elesuntmagneziuporfiri inederivate biogeneticde d laprotopo orfirinaIX.S Structuracen ntral esteuni ineltetrapiro olic.ncazulclorofilelora aceaststruc cturestepa articularizat prinexisten naunui inelciclo opentanicfuz zionatcunucleulpirolic III.Atomulneionizat n demagneziues stefixatprin2 covalenei2legtu uricoordinati ivedecei4a atomideazo otaicelor4nuclee n pirolic ce.
R1 R2

H3C

I N N

II

R3

Mg

N H3C IV

N III CH3

R4 O CH3 O

O
clorofila - form mula generala

nfunciedesubstitu ueniilateral lideosebimm maimultetipuridecloro ofile:A,B,C1 1,C2,D, bacterioclorofilaAibacterioclorofilaB. CLOROFILA A B C1 R1 R R2 R3 R4 X X

CH CH COOH H

CH CH CH

CH2 CH2 CH2

CH3

CH2

CH H3 CH H3 CH H3

CH CH3

CH2 CH2

19

C2 D BacterioclorofilaA

CH

CH2

CH3

CH
CH2

CH2
CH3 CH3

CH

CH

COOH

X X,GERANIOL

CH

CH3
CH3

O C CH3

CH2

BacterioclorofilaB

O C CH3

CH3

CH2

CH3

ntabeluldemaisusXesterestuldeacidpropionicesterificatcufitol.

nclorofileleA,B,DilabacterioclorofilenucleulpirolicIVesteparialredus. LaclorofilaCavemodubllegturnacelainucleupirolicIV. Grupareacarboxildelanucleulciclopentanicesteesterificatcumetanol.Restuldeacidpropionicde lanucleulpirolicIVesteesterificatcualcooltetraizoprenicsauesteliber.LaclorofileleA,B,Dprecum ilabacterioclorofilaBalcoolulestefitolul,ntimpcelabacterioclorofilaCarputeafifitolulsau geranioluldependentdespeciadebacterii. ClorofileleC1siC2aurestuldeacidpropionicnlocuitcuunrestneesterificatdeacidacrilic. FotoreceptorulprincipalncloroplasteleplantelorverziesteclorofilaAalcreiconinutdepetede 3oripecelalclorofileiB.Ladiatomee,algebrune,aufostdescoperiteclorofileleC. nalgeleroiiesteprezentclorofilaD. BacteriilefotosintetizanteconinbacterioclorofileleAiB. IradiereacloroplastelorproduceofluorescenuormsurabilaclorofileiAntimpcepentru celelalteformedeclorofil,carotenoideialipigmeninuseobservacestfenomen.Deaicise poatededucectoateacestesubstaneservesc,nprincipal,capigmeniauxiliaricareabsorb energialuminoasiotransmiteficientclorofileiA. PelngclorofileleB,C,Dntrepigmeniiauxiliariceimaiimportanisenumrcaroteniidintrecare principalulderivatnmajoritateaplantelorestecarotenul. Bacteriilesulfuroaseverziconincaroten. ncloroplasteleplantelorialgelorverzisentlnescdiferitecarotenoideoxigenatentrecare predominluteina,violaxantina,neoxantina.

20

Altclasdepigmeniauxiliari,maipuinrspndii,sunttetrapiroliicucatendeschiscare formeazgrupareaprosteticaficobiliproteinelor.Posibilcaacetiasfiedefaptprecursorii clorofilelordeastzi. Exemplesuntficoeritrineledinalgeleroiicareconinncalitatedepigmentficoeritrobilinai ficocianineledinalgelealbastreverzicupigmentulficocianobilina.

COOH CH3 CH3 CH CH3 CH2 CH2 COOH CH2 CH2 CH3 CH3 CH2 CH CH3 CH3 CH CH3 COOH CH2 CH2 COOH CH2 CH2 CH3 CH3 CH3 CH2

N H

N H

N ficoeritrobilina

N H

N H

N H

N ficocianobilina

N H

ninteriorulcloroplastelor(sauncromatofori)clorofileleibacterioclorofilelesuntasociatecu proteinespecificerezultndcomplexenumitecromoproteinesaucromoplastine. Bacteriilefotosintetizanteaucasediupentruprocesuldefotosintezcromatoforiceconin bacterioclorofil,maricantitidecaroteniifosfolipoproteine,toatensoitedeenzimelenecesare procesului. Cianofitele(algealbastreverzi)audoipigmenipecarenuimaintlnimlaalteprocariotefiind specificieucariotelorianumeclorofilaAicarotenul. Laeucariote,attlaalgectilaplantelesuperioare,ntlnimorganitecelularespecializatenumite cloroplaste.Datfiindcompoziiaistructuracloroplastuluidariconsideraiileevolutivesepoate lesneobservacncazulcloroplasteloravemdeafacecuorganitecuoautonomieconsiderabil. Cloroplastelesuntdotatecumembranexternasemntoaremembraneicelulare.Straturile acesteimembraneaupermeabilitidiferite,ceaexternfoartepermeabiliceainternvirtual impermeabil.ninteriorgsimstroma.nstromagsimADN,ARNiribozomiimplicainbiosinteza proteinelorpropriicloroplastuluidarienzimelenecesareprocesuluidebiosintezspecific fotosintezei.Stromanconjoarstructurimembranarenumitetilacoideaezatenstivenumite grana.Tilacoidelesuntunitentreeleprinspaiimembranare.Saconstatatcimembranele tilacoidelorsuntdetipdublustrat.Particularestecompoziiaproteicaacestormembrane tilacoidice,existndmulteproteinespecifice.Lipideledinmembranatilacoiduluiauieleo compoziieaparteconinnddoar10%fosfolipidei10%sulfochinovozildiacilgliceroliirestulfiind aproapeexclusivconstituitedindigalactozildiacilgliceroli.Aciziigraidinstructuraacestorlipide complexesuntacizigraicucatenlungdeatomidecarbonicuungraddenesaturarefoartemare ceeaceleconferofluiditatedeosebit,caracteristicceocaptimembraneletilacoidelor.

21

Mecanismul fotosintezei

Schematiciextremdesimplistfotosintezanplantelesuperioareverziicianobacteriipoate fi formulat ca un proces de reducere a dioxidului de carbon de ctre ap cu ajutorul energieisolareabsorbitdeclorofilalocalizatncromatoforisaucloroplaste.

lumina

6CO2 + 6H2O

clorofila

C6H12O6 + 6O2

C6H12O6indicsubstanedingrupulmonoglucidelor. Unele bacterii folosesc alt donor de hidrogen (H2A) pentru reducerea dioxidului de carbon. Acestdonordehidrogenpoatefihidrogenul,hidrogenulsulfurat,tiosulfatul,izopropanolul. ngeneralprocesuldefotosintezpoatefiredatprinecuaia:
lumina

CO2 + 2H2A

clorofila

(CH2O) + 2A + H2O

n 1937 Robert Hill a descoperit c prin iluminarea cloroplastelor n absena total a dioxidului de carbon i n prezena unui acceptor artificial de electroni [Fe(CN)6]3 fericianur ele degaj oxigen concomitent cu reducerea acceptorului la ferocianur [Fe(CN)6]4.PrinacestexperimentHilldemonstreazcadioxiduldecarbonnuparticipdirect nreaciadegenerareaoxigenului. n 1941 S. Rubeni M. Kameh au demonstrat cu izotopul 18O c sursa de oxigen degajat n fotosintezesteapa.
H218O + CO2
lumina clorofila
18O

+ (CH2O)

Experienele menionate i altele asemntoare au condus la concluzia c mecanismul fotosintezei,princareenergiaelectromagneticesteconvertitnenergialegturiichimicea substanelorsintetizate,cuprindedoufazedistincte. 1. reacii dependente de lumin (fotochimice) energia luminoas este utilizat pentru oxidarea apei (sau reductorului H2A) concomitent cu generarea de ATP i NADPH+H+. 2. reacii la ntuneric sau, mai corect, independente de prezena luminii. Utilizeaz ATP i NADPH+H+ pentru a realiza biosinteza glucidelor i ulterior i altor compui biochimicidindioxiddecarboniap.

O alt modalitate, mult mai actual, de a analiza fotosinteza este s o mprimnpatrufazedistinctecarempreunalctuiescprocesulcomplet:

A. absorbiai transferul energiei fotonilor prin intermediul complexelor de tip anten pentrucaptareaenergiei B. transferulprimaralelectronilorctrecentrulreactiv C. stabilizareaenergieicaptateprinprocesesecundare D. sintezaiexportulproduilorstabili. n lumina acestei ultime analize devine limpede c singurul moment n care putem vorbi de dependena de lumin a reaciilor din fotosintez este cel n care este preluat energia
22

fotonului de ctre complexul anten captatoare de lumin. Celelalte sunt doar dependente deacestprocesdarnudepinddirectdeexistenaluminii. Pentru c termenii clasici de reacii la lumin i reacii la ntuneric sunt de mult timp ncetenite i utilizate pentru descrierea procesului de fotosintez le vom utiliza i noi n celeceurmeaz.
Reacii dependente de lumin n fotosintez Mecanismul captrii energiei luminoase Pentruastocaenergiaradiaiilorluminoaseprimullucrucaretrebuierealizatestecaptareaacesteia. Captareaesterealizatdectreansamblulmoleculelordepigmenifotosinteticiasociainantena captatoaredelumin.Nutoipigmeniiauroldecaptatoridefotoni.Darmpreun,ansamblul molecularalanteneiareroluldeacolecta,concentraitransferaenergiactrecentruldereaciedin ansambluundeenergiavaficonvertit. Absorbiafotonilor(captareaacestora)creeazostarespecial,excitat,lanivelulansamblului antencaptatoaredelumin.Stareaaceastadeexcitaresevamaterializa,nceledinurm,prin apariiauneisarciniliberelanivelulcentruluidereacie. Estederemarcatfaptulcsistemulantencaptatoaredeluminnuimplicnfuncionareniciunfel deevenimentchimiccidoarevenimentefizicedetransferrezonantcarepresupunmigrareastriide excitaredelaomolecullaalta.Majoritateamoleculelordepigmentsuntlegatedeproteine specificeiformeazasocierisupramolecularenaltspecifice.nantenelecaptatoaredelumin regsimalturideclorofilaimoleculedecaroteniichiarmoleculealepigmenilorculan tetrapirolicdeschis. Sistemulacestadetipantencaptatoaredeenergieareiunaranjamentspaialasemntorunei plniicupigmeniiaflailaextremiticapabilisabsoarbfotonicuenergiemaimaredectsunt capabilipigmeniidinzonacentral.Transferulenergieiabsorbiteestecelcarerealizeaz uniformizareaenergiilorsprevalorimaimiciisimultanarelocconcentrareaenergiilori direcionarealorsprecentrulreactivcareesteplasatnparteainternaplniei. Sistemulanteneicaptatoaredeenergiecreteieficienacaptriienergieisolarecareeste,dealtfel, oformdiluatdeenergie.Pedealtparteconglomeratulmolecularalanteneicaptatoarede energieareiroluldeaasigurareglareaprocesuluiiproteciampotrivachiaraenergieifotonilor careareipotenialdistructiv. Transformareaefectivaenergieipotenialecaracteristicestriideexcitareareloc(aacumam precizatmaidevreme)ncentruldereaciealantenei.Acestaesteuncomplexproteiccompusdin maimultesubunitiisegseteinclusnmembranatilacoidului.Alturideproteineexistasociate iconcurlafuncionalitatemoleculedeclorofildarialicofactoridetransferalelectronilorcum suntchinoneleiclusterelefiersulf,daripolipeptidehidrofobecaretraverseazmembrana tilacoiduluidemaimulteorintrefaastromalicealumenal. Centruldereaciepropriuzisareundimerspecialdeclorofiliacestaestedonorulprimarde electronialcascadeidetransferaelectronilor.Deimonomeriiacestuidimerdeclorofilsuntidentici structuralcumoleculeledeclorofildinantenacaptatoare,moduldempachetarecucelelalte elementealecentruluidereacieleconferproprietispeciale.Pasulfinalaltransferuluienergiei carearelocnantenacaptatoaredeluminestetransferulenergieictreacestdimercuobinerea unuidimerexcitatelectronic.Stareaexcitatdimeruluideclorofildincentruldereacieesteun reductorfoarteputerniccapabilstransfereelectronulexcitatctreunacceptorcorespunztor devenindastfeluncation. 23

Acestprocesdetransferelectronicesteprimareacieafotosintezei.nacestmodarelocconversia energieifotonuluictreenergiachimic(potenialredox)aacceptoruluiredus.Acestaesteiunul dintrecelemaidelicatemomentedeoareceexistposibilitateatransferuluielectronuluinapoictre dimerulcationiastfelnusarctigaenergiecitoataarficonvertitctreemisiidefotonicu energiemaimic(fluorescen)i/sauemisiedecldur.Sistemulevitacestpasnapoiprin cuplareaacesteireaciidetransferelectronic(deladimerulexcitatdeclorofilctreacceptorul primardeelectroni)cualtereaciisecundarefoarterapidecaresuntcompetitivefade recombinareadimeruluicuacceptorul.Acestereaciiduclaseparareaspaialasarciniinegative ctigatefadesarcinapozitivexistentlaniveluldimeruluideclorofilceeacefaceca posibilitateaderecombinaresscadcuctevaordinedemagnitudine. Rezultatulfinalestecntruntimpfoartescurt(maipuindeonanosecund)speciileoxidati redusdevinseparateprintrunspaiuechivalentcugrosimeauneimembranebiologice(circa30). Procesemailenteintervinapoiistabilizeazsuplimentarenergiastocatspreaoputeaconvertin formemultmaiuordeutilizat.Sistemulesteattdefinacordatnctnmajoritateacazurilor ctigulenergeticestedeunulaunu(unfotonabsorbitperunelectronctigat).Chiaricu pierderilederigoare,necesarepentrustabilizareasistemului,randamentulesteunulimpresionant. Principiulacestadeobinereaelectronuluiexcitatidetransferalluiprinreaciisecundaresprea realizaseparareaspaialnecesaresteunulcomuntuturorcentrelordereaciefotosinteticechiar dacdetaliileprocesuluipotvariauordelauncazlaaltul. Ovariantevolutiv,detransferciclicalelectronilor,esteceancareacceptoriisuccesiviconducn finallatransferulelectronuluiextrasnapoiladimeruldeclorofilrmasnstareadecation.nsine procesulnuesteunulcuctignetdeenergie.Dartransferulelectronuluiestecuplatcurealizarea unuiuorgradientprotonicntrefeelemembraneitilacoiduluiiacestfaptvaducelagenerarea uneicantitideATP. Cazulcelmaifamiliarestecelalorganismelorlacaretransferulesteneciclicicarefolosescapaca donoralelectronilornecesarirefaceriidimeruluideclorofildincentruldereacie.Acesteorganisme prezintdoucentredereacieseparateaparinndladousistemedeantencaptatoaredelumin separateicuproprietiuordiferitenceeaceprivetelungimeadeundpreferatpentru absorbiafotonilor.Funcionareaacestuisistemesteunadetipulunuilandetransferalelectronilor ncaresuntimplicateceledoufotosisteme,denumiteIiII,precumiomultitudinedeverigi intermediaredetransfer.ElectroniivorfiacceptainfinaldeNADP+caresevareducelauncompus stabil,utilcelulei,NADPH+H+.Simultan,protoniigeneraideoxidareaapeilaoxigenmolecular mpreuncuceitransferaicontragradientuluideconcentraie,vorfiutilizailagenerareadeATP,al doileacompusutilcelulei. FotosistemeleIiIIconinacelaitipdeclorofil,clorofilaA,difereneledelungimedeundoptim pentruabsorbiefiinddatorateconformaiilorparticularealecentrelordereaciedinaceste fotosisteme.DinacestmotivfotosistemulIestenumitiP700pentrucabsoarbeoptimlalungimea deundde700nmntimpcefotosistemulIIestenumitiP680pentrucabsoarbeoptimla lungimeadeundde680nm. Funcionarea mecanismului de generare a NADPH+H+ i ATP Reaciilelaluminncepcufotoniicarelovescmembranatilacoidului.Parteaacestoravorfiabsorbii decomplexeledetipantencaptatoaredeluminattalefotosistemuluiIctialefotosistemuluiII. Concretputemdistingetreipridistinctencadrulreaciilordependentedeluminalefotosintezei. 1. Fotoexcitareacareconstnabsobiafotonuluiitrecereaclorofileinstareexcitat.

24

2. Transferulelectronuluiexcitatcareesterealizatprinintermediuluneiseriidetransportori electronicicuplaicumembranatilacoidului.Transferulestecuplatcupompareaprotonilor prinmembranatilacoiduluicuformareaunuigradientprotonic. 3. Chemiosmoza,micareaprotonilorprincomplexulATPsintazeiconcomitentcugenerarea ATP. ProcesuldetransferalelectronilorobinuilanivelulfotosistemelorIiIIestenecicilicdeoarece electroniiextraidindimeruldeclorofildelanivelulcentruluidereaciealfotosistemuluiIIsunt nlocuiicuelectroniextraidelaapprinintermediulunuicomplexenzimaticdeoxidareaapei,iarn cazulfotosistemuluiIelectroniieliberaisuntnlocuiicuceifurnizaideplastocianinaredus.. Procesularepatruetape: A. CaptareaelectronilorprinintermediulanteneicaptatoaredeluminafotosistemuluiIIexcit nfinaldimerulP680dincentruldereaciealfotosistemuluiIIiaracestatransferun electronctreunacceptorprimar,feofitina.Electronulestemaiapoitransferatprinreacii redoxcuplatectreuntransportordeelectroniaflatlibernmembranatilacoidului.Acesta, plastochinona,preiadoielectronidelafotosistemulII(2evenimentedecaptarei expulzare)mpreuncu2protonidepesuprafaastromalamembraneitilacoiduluiise reducelaplastochinol. B. nacelaitimp,oproteinZ,asociatcufotosistemulIIisituatpepartealumenala membraneitilacoiduluirupemoleculadeapnelectroni(necesarireveniriicentruluiactival fotosistemuluiIIlastareasafundamentalspreaputeaacceptaenergiafotoniloriarelua ciclul),protoni(carevorcontribuilagradientulprotonictransmembranar)ioxigencareva prsisubformmolecularcloroplastul. ProteinaZsauMSP(ManganeseStabilisingProtein)sauansamblulenzimaticdescindarea apeiconstituentalfotosistemuluiIIconineuncluster(4ionideMn2+legaideproteine). Ioniidemanganformeazuncomplexcataliticactivnumitcomplexuldeeliberarea oxigenului(CEO)careleagdoumoleculedeappentruafacilitagenerareaoxigenului(o molecul)iducelaeliberareaa4electronii4protoni.AcestCEOfuncioneazciclicprin intermediuluneiseriidestrioxidativecareprobabilincluddiferitecombinaiialeMn3+, Mn4+,Mn5+facilitndextraciaelectroniloriprotonilordelaapieliberareafinala oxigenuluininteriorultilacoidului. C. Electroniisiprotoniistocaisubformaplastochinoluluisuntdespriilafaalumenala membraneitilacoidului,protoniifiindeliberainspaiullumenaliarelectroniifiind transferaicomplexuluidecitocromib6f.Citocromiicomplexuluicitocromicb6fformeazun ansamblumembranarcareconineomoleculdecitocromf,doumoleculecitocromb6cuo FeSprotein(2Fe2S)iunadeplastochinol(QBH2)legat. Arelocastfelmrireagradientuluideprotonilanivelulmembraneitilacoidului,fora chemiosmoticcevafiutilizatdectreATPsintazpentrugenerareadeATP.Dela complexuldecitocromib6felectroniisuntmaiapoitransferaictreplastocianin. Plastocianinaesteoproteinmobilde10,5KDacarearencentrulactivredoxaleiionulde CucoordinattetraedalcupatruliganzireprezentaideunrestdecisteinCys84,metionin Met92idoudehistidinHis37,87.Complexareaatomuluidecuprucuceipatru aminoacizidinlanulpolipeptidicmoduleazpotenialulreductoralcentruluiactival plastocianinei,cupruloscilndntrestriledeoxidareCu+Cu2+.Aceastmodificarela atomuldecuprucondiioneazfuncionareaplastocianineideatransformaeficient electroniidelacomplexulcitocromulb6flafotosistemulI.Plastocianinaredusvaceda electroniictrecationulcentruluidereaciedinfotosistemulI,p700+. D. DouevenimentedeexcitarelanivelulcentruluidereaciealfotosistemuluiIducla excitareaacestuiailaexpulzareactreunacceptorconvenabiladoielectroni.Regenerarea centruluidereaciealfotosistemuluiIsevarealizapeseamaplastocianineireduse. 25

Acceptorul,ferredoxina(oproteincucluster2Fe2S),sevareducepeseamaelectronilor proveniidelafotosistemulIilarnduleivacedaelectroniictreNADPreductazcareva reduceNADP+laNADPH+H+folosinddoiprotonidinstromacloroplastului. E. ProtoniiacumulainspaiullumenalaltilacoiduluiicareaugeneratungradientdepHfa departeastromalamembraneitilacoidicesepotntoarceconformgradientuluide concentraiedoarprincomplexulmultimericalATPsintazeideoarecemembranatilacoidului esteimpermeabilpentruprotoni.Conformultimelordescoperirisetiecpatruprotoni suntnecesaripentrusintezauneimoleculedeATP.Procesulsenumetefotofosforilare.

Dacserealizeazodiagramaenergiilorelectronilordealungulacestuimecanismseobine imagineademaijos.

26

 Ovariantparticular r,ciclic,amecanismulu m uidetransfe eralelectroniloricareu utilizeazdoa ar fotosiste emulIafostdescriscaavnd a locn unelesituaii. i nacestmecanism m cicllicelectronul cedeaz expulzat tdecentrulde d reaciealfotosistemu uluiIestetrecutlaferedo oxincarelc plastoch hinonei.Acea astamaipreiaunelectro ontotdelafe eredoxinaredusi4pro otonidepefa f a stromal amembran neitilacoiduluiiseredu celaplastoc chinol.Acestamigreazla afaalumen nala membra aneitilacoidu uluiundeced deazelectro oniictrecomplexulcitocromicb6fi protoniinspa s iul lumenalaltilacoidului.Electronii itrecdelaco omplexulcitocromicb6flaplastocian ninimaide epartela cationuldincentrulde d reacieal fotosistemu uluiI.naces stmodnuare elocsinteza deNADPH+ +H+dar gradient tuldeproton ni,redus,serealizeaz r as stfelcsepo oaterealizasinteza,redu s,deATP.

27

 nacestmodnuvafiposibildes sfurareare eaciilordinciclculCalvin ndeoareceN NADPH+H+es ste nzabildesfur u riiacestorreacii. indispen Studiiled demicroscopieelectroni icaureleva atcceletreicomplexeproteice p alem membranei tilacoidic ceauolocalizarespecific c. FotosistemulIsedescop permaiales snmembran neletilacoide eloraflaten ncontactdire ectcu + s stromaunde eareaccesNADP N . FotosistemulIIestelocalizatexclusiv vaproapenregiunilestiv vuitealeme embranelor t tilacoidelor. C Complexulb6festeunifo ormdistribuit tpretutindeninmembran

Petotal, ,deiproces suldecaptar reaenergiei ifotonilores steunulcom mplex,finalita ateasaeste e conversi iaenergieifo otonilornenergiachimi icalegtur rilormacroe ergicedinAT TPinpoten nialul reducto oralNADPH H+H+. Mecanis smul sintez zei ATP n cl loroplaste SintezaA ATPnclorop plasteesteasociatcudiisipareaunuigradientde eprotoniprin nmembrana a tilacoidu ului.Mecanis smulsintezei iATPncloro oplastestefo oarteasemntorceluid dinmitocond drii. Ansamblulenzimatic ccarecataliz zeazformar reaATPnclo oroplastprez zintungrad ddesimilarit tate foartem marecomparativcuacelaiprocesce sedesfoarnmitocondrii. ATPsint tazacloroplastuluiestenumitCF0 CF1. CF0pro oteinhidrof fobtransme embranarc careconduce eprotoniiprinmembran natilacoidulu ui. CF1pro oteinhidrof filcucompo oziieoligom meric33 .

28

SubunitileiconinsitusuriledelegareicelecataliticepentruATPiADP,precumipentru ionulfosfat.

leagCF1laCF0. controleazfluxulprotonilordelaCF1laCF0. inhibactivitateacataliticacomplexuluilantunericblocndhidrolizainutilaATP.

Translocaiaprotonilorprinmembranatilacoiduluiesteasociatcuacidifiereaspaiuluitilacoidicla pH=4.Gradientultransmembranardeprotonindusdeluminestede3,5unitipH.Acestgradient depHconstituieforamotricepentrusintezaATPuluidinADPifosfatanorganicprocescatalizatde CF1. ntructansamblulCF1alATPsintetazeiseaflpesuprafaamembraneitilacoidiceexpusspre stromATPulnousintetizatesteeliberatnspaiulstromal. DeoarecepentrufiecareperechedeelectronicenfinalajungesgenerezeNADPHsunttransportai 6protoniiarpentrusintezafiecreimoleculedeATPsuntnecesari3protonisepoateconstatauor clafiecaremoleculdeNADPHformatseformeaz2moleculedeATP. DeasemeneaNADPHformatdeformatdefotosistemulIesteeliberatnstromastfelATPuli NADPHproduinreaciilelaluminalefotosintezeisuntapropiaipoziionalpentrureaciile urmtoarecaredecurglantuneric. Reacii independente de lumin n fotosintez ATPiNADPH+H+formainreaciilelaluminsuntutilizatenreaciilelantunericpentrureducerea dioxiduluidecarbonitransformareaacestuianmodprimarnglucide.Apoiporninddelaglucidese vorobineilipide,proteine,precumitoatecelelaltesubstaneorganice.Caleametabolicprincare planteletransformdioxiduldecarbonnglucideafostelucidatntre19461953deM.Calvin,J. Bassham,A.BensonpurtndnumeledeCiclulCalvin,dupnumeleluiMelvinCalvin(19111997). StrategiadebaznexperimentelelorafostexpunereaculturilordealgeChlorellanatmosfercu 14 CO2pentruperioadevariatedetimpicondiiidiferitedeiluminare. Dupstopareareaciilorcualcoolfierbintesauseparatiidentificatproduiiradioactivi.Aceast calemetabolicestecunoscutcaciclulpentozofosforicreductor,ciclulgalben,caleaC3de fotosintez. EcuaianetacicluluiCalvinesteurmtoarea:
3 CO2 + 6 NADPH + 9 ATP gliceraldehid-3-fosfat + 6 NADP + 9 ADP + 8 Pi

ConformdateloractualeciclulCalvincuprinde4etape: 1. 2. 3. 4. etapadecarboxilare; etapadereducere; etapadesintezaglucidelorcuaseatomidecarboni,consecutiv,amaterialului celular; etapaderegenerareaacceptoruluidioxiddecarbon.

1. Etapa de carboxilare Fixareacarbonuluiesterezultatuluneisingurereacii.

29

netapa1,decarboxilare,moleculadedioxiddecarbonsecondenseazcuribulozo1,5bisfosfatul formnduncompusdetranziiecu6atomidecarboncaresehidrolizeazrepedednddou moleculedeacidD3fosfoglicericconformmecanismului:

CH2 O H H C C C OH OH O PO3H2 H O PO3H2 HO CH2 C

PO3H2

* CO2

H+ HO

CH2 C C

O PO3H2 * COO-

C C

OH OH O PO3H2 H

O OH O PO3H2

CH2

CH2

CH2

ribulozo 1,5 bisfosfat

trans en diol

acid cetonic

CH2 O PO3H2 * HO C COOHO H

HO

CH2 O PO3H2 * C COO(-)

H+

C C

OH OH O PO3H2 HO H

CH2

C C

O OH O PO3H2

intermediar hidratat

CH2

acid D 3 fosfogliceric

Primaetapesteunaputernicexergoniccuodiferendeenergieliberdecirca12Kcalceeace facecaeasfienesenireversibil.Reaciaestecatalizatderibulozo1,5bisfosfatcarboxilaz (RUBISCO)enzimlocalizatpesuprafaastromalamembraneitilacoidice.Ribulozo1,5bisfosfat carboxilazacuprinde15%pnla60%dinproteinelecloroplastuluiiprinurmareesteceamai rspnditproteinnbiosfer. Fiindenzimacheientrecarbonulanorganic(CO2)icarbonulorganiceste,probabil,ceamai importantenzimdepeTerra. Enzimadinplantelesuperioareidinmultemicroorganismefotosintetizanteconstdin8unitimari Lde50KDacodificatedeADNulcloroplastuluii8unitimiciSdecte14KDaspecificatedegenele nucleare.FiecaresubunitateLconineuncentrucataliticiuncentrudereglare,rolulsubunitiiSnu secunoatedarsepresupunecmretevitezadereacieasubunitiiL. Ribulozo1,5bisfosfatcarboxilazadinunelebacteriifotosintetizanteesteundimercudou subunitiidenticecareposedostructurasemntoarecusubunitateaLdelaplante. Enzimaesteconvertitnformacataliticactivnprezendedioxiddecarboniprinlegareaunui ionmetalicdeMg2+.ActivitateaacesteienzimeestereglatdecantitiledeO2,CO2,Mg2+ide valoareapHului. Maiestedenotatcceamaimareparteaazotuluidinfrunzeestelocalizatlanivelulribulozo1,5 bisfosfatcarboxilazei. PlanteleceaucaprimprodusstabilalreaciilorfotosinteticeacidulD3fosfoglicericsenumesc planteC3. 30

Prinfixareaa6moleculedeCO2seobin12moleculedeacidD3fosfogliceric. Fotorespiraia nciudaimportaneisaleiaabundenei,ribulozo1,5bisfosfatcarboxilazaesteoenzimineficient. PentrucentrulsucataliticsuntnpermanentcompetiieattCO2ctiO2.Competitivcureacia consideratnormal,ceadecarboxilare,ribulozo1,5bisfosfatcarboxilazapoatecatalizaoalt reacie,deoxigenare,ncareesteimplicatO2nloculCO2.

HO 2 CH2 O H H C C C OH OH O PO3H2 O2 HO H ribulozo 1,5 bisfosfat C C O OH O PO3H2 + O CH2OPO3H2 C OH O PO3H2 CO2 H C C O OH O PO3H2

CH2

acid D 3 fosfogliceric

CH2

CH2

fosfoglicolat

3 fosfoglicerat

Latemperaturade25Cproporiadintrecele2reaciiestede80%pentrucarboxilareide20% pentruoxigenarenscucretereatemperaturiicreteiproporiadeutilizareaoxigenuluinlocul CO2. Aceastreacieesteceacarestncentrulunuifenomentipicpentrucelulelevegetale,numit fotorespiraie.Fotorespiraiaesteunprocescarearelocnparalelcurespiraiacelularnormal, nsdiferitderespiraiacelularnormal(careutilizeazoxigenuliglucidelepentruaformadioxid decarbon,apienergieliberutilizabilpentruproceselecelulare)procesuldefotorespiraieeste unuldependentdelumin.Acestprocesarelocncelulelecareconincloroplasteiimplicdou tipurisuplimentaredeorganitecelulare:mitocondriileiperoxizomii. nprocesuldefotorespiraieribulozo1,5bisfosfatcarboxilazacatalizeazreaciadintreribulozo1,5 bisfosfatiO2cuformareadeacid3fosfoglicericideacid2fosfoglicolic.Deoarecepentruo moleculderibulozo1,5bisfosfatseformeazosingurmoleculdeacid3fosfogliceric(comparativ cudounciclulCalvin)nuexistunctignetnceeacepriveteformareadenoilegturiCC(sau deglucide).ProcesulacestaestensncompetiiepentrusubstratulutilizatnciclulCalvini ribulozo1,5bisfosfatcarboxilazaesteieautilizatfraproducefixareacarbonului.Presiunea parialcrescutaO2,indisponibilitateaCO2daritemperaturaridicatsuntfactorifavorizanicare ducladesfurareapreponderentareaciilordinfotorespiraiendefavoareacelordinciclulCalvin. Esteiacestaunuldintremotiveleineficieneiribulozo1,5bisfosfatcarboxilazeiianecesitiidea meninemaricantitidinaceastenzimlanivelulcloroplastuluipentruacompensaineficienaei. Chiardacprivimfotorespiraiacapeunprocesdezavantajoscercetrileauartatcfunciaacestuia poatefiiunadeprotecieprinndeprtareaexcesuluideenergiepotenialgeneratdelumina foarteputernic,cazncarecapacitateadecarboxilarenuestenacordcucantitateamaredeATPi NADPH+H+generatedeansamblurilemoleculareimplicatenreaciiledependentedelumin, cantitatecarearputeaafectastabilitateacelulei. Acidul2fosfoglicoliciesedincloroplastivaficonvertitmaidepartenperoxizomiundeeste transformatnglicincare,larndulei,esteconvertitlanivelulmitocondriilor,eventualpnla CO2,H2OiNH3.

31

Etapa de re educere 2. E Etapade ereducereacicluluiCalvincuprinded doureaciicareaulocsub s aciunea aadouenzi ime fosfoglic ceratkinaza(E1),gliceraldehidfosfat tdehidrogen naza(E2). naceast tetapacid dulD3fosfo oglicericsere educecuformareadegli iceraldehid3 fosfatcu + participa areaATPiNADPH+H N co onformsecve eneidereac cii:
HS ATP HO H C C O O OH O PO3H2 E1 H ADP O C C O ENZIMA

~PO H
O

H3PO4 O C H C O

3 2

~S
O

N NADPH + H+ NADP ENZIMA O C H PO O3H2 HS E ENZIMA C H OH H O PO3H2

OH PO3H2 E2

OH

CH2

CH2

CH2

CH2

acid D 3 fosfogliceric f

aci id 1,3 bisfosfogl liceric

acil S enzima intermediar

gliceraldeh hid 3 fosfat

ecatalizatede d enzimeleE1 E iE2repre ezintinvers sareaadouetapeding licoliz(npr rocesul Reaciile + deglicolizconezima aimplicateste e NAD ).E EnzimaE1esterepartizat tntrecloro oplasteicito oplasm iarE2se eafllocaliza atncloroplaste.Obine ereaglicerald dehid3fosfa atuluipermit temaidepar rte sintezag glucidelorda araceastmo oleculrepre ezintpunctpotenialde eplecareia alaltorci metabolice. 3. E Etapa de sin ntez a glucidelor cu 6 atomi de carbon c Desfur rareaulterio oaracicluluiCalvinpres upunepede eopartecon nversiaglicer raldehid3fo osfatului lafructo ozo6fosfat ialtesubsta anecaresun ntbazatutur rorcelorlalte esubstaneo organice,iarpede altpart teconversian ribulozo1,5 1 bisfosfat, ,acceptoruldioxiduluide ecarbon. Conversiagliceraldeh hid3fosfatu uluinfructo ozo6fosfatdecurge d prininversarear reaciilor nztoaredin nglicoliz.Ac cestereaciis suntcataliza atedectretriozofosfatiz t zomeraz,aldolaz a corespun ifructozobisfosfatazdupcum murmeaz:

32

4. Etapa de regenerare a acceptorului dioxid de carbon DesfurareaulterioaracicluluiCalvinpresupuneregenerareaacceptoruluicareestenecesar pentrufixareadioxiduluidecarbon. Reaciilecareduclaregenerarearibulozo1,5bisfosfatuluintromaremsursuntanaloagecu reaciiledinciclulpentozofosforicoxidativ.Problemaconstnsintezauneiglucidecu5atomide carbonpornindusedela2glucide,unacu6atomidecarbonicealaltcu3atomidecarbon. Aceastaserealizeazprinurmtoareasuccesiunedereacii. Maintitranscetolaza(enzimtiaminpirofosfatdependent)transferunfragmentdedoiatomide carbonC1C2,delafructozo6fosfatlagliceraldehid3fosfatsintetizatnetapadereducere rezultndxilulozo5fosfatulieritrozo4fosfatulconformreaciei:
CH2OH C HO H H C C C O H OH OH + H H C C O OH HO H
gliceraldehid-3-fosfat 3C
H NH2 N H3C N CH2 N+ CH3 tiaminpirofosfat CH2 CH2 O S

CH2OH C C C O H OH +

H H H

C C C

O OH OH

CH2OPO3H2

CH2OPO3H2
eritrozo-4-fosfat

CH2OPO3H2
fructozo-6-fosfat 6C

CH2OPO3H2
xilulozo-5-fosfat 5C

4C

O P OO

O P OO-

33

Eritrozo4fosfatulsecondenseazaldoliccudihidroxiacetonfosfatulsubaciuneaaldolazei rezultndsedoheptulozo1,7bisfosfatul.Aldolazaareospecificitateridicatpentrudihidroxiaceton fosfatdareapoateacceptadiversealdozepepostdealdoileasubstrat.Reaciilesunturmtoarele:

CH2OH C O CH2OPO3H2
dihidroxiaceton-fosfat 3C +

CH2OPO3H2 C HO H H H C C C C O H OH OH OH H2O H3PO4 HO H H H

CH2OPO3H2 C C C C C O H OH OH OH

H H H

C C C

O OH OH

CH2OPO3H2
sedoheptulozo-1,7-bisfosfat 7C

CH2OPO3H2
sedoheptulozo-7-fosfat 7C

CH2OPO3H2
eritrozo-4-fosfat 4C

Prindefosforilareasedoheptulozo1,7bisfosfatuluicatalizatdesedoheptulozobisfosfatazse formeazsedoheptulozo7fosfatul. Transformareaulterioarasedoheptulozo7fosfatuluiarelocpecaleainversareaciilorciclului pentozofosforicoxidativ,reaciicatalizatedetranscetolaz,ribozofosfatizomeraz,ribulozofosfat epimeraz. TranscetolazacatalizeaztransferulunuifragmentdedoiatomidecarbonC1C2dela sedoheptulozo7fosfatlagliceraldehid3fosfat,nurmacreiarezultdoipentozofosfai(xilulozo5 fosfatul,ribozo5fosfatul)conformreaciei:

CH2OH C HO H H H C C C C O H OH OH OH + H H C C O OH HO H CH2OH C C C O H OH + H H H H C C C C O OH OH OH

CH2OPO3H2
gliceraldehid-3-fosfat 3C

CH2OPO3H2
xilulozo-5-fosfat 5C

CH2OPO3H2
ribozo-5-fosfat 5C

CH2OPO3H2
sedoheptulozo-7-fosfat 7C

Stoechiometriareaciilorderegenerareaacceptoruluieste:5C33C5. ncontinuarepentozofosfaiisintetizaisuntconvertiilaribulozo5fosfat.Enzimaribulozofosfat3 epimerazaconvertetexilulozo5fosfatulnribulozo5fosfat.Transformarearibozo5fosfatuluin ribulozo5fosfatestecatalizatderibozofosfatizomeraz.Celedoureaciipotfiredate: 34

CH2OH C HO H C C O H OH H H

CH2OH C C C O OH OH

H H H H

C C C C

O OH OH OH H H

CH2OH C C C O OH OH

CH2OPO3H2
xilulozo-5-fosfat

CH2OPO3H2
ribulozo-5-fosfat

CH2OPO3H2
ribozo-5-fosfat

CH2OPO3H2
ribulozo-5-fosfat

ribulozofosfat epimeraza

ribozofosfat izomeraza

Ciclulreaciilorfotosintezeilantunericsencheiecufosforilarearibulozo5fosfatuluinribulozo1,5 bisfosfatuluisubaciuneafosforibulozokinazei.
CH2OH C H H C C O OH OH H H ATP ADP CH2OPO3H2 C C C O OH OH

CH2OPO3H2
ribulozo-5-fosfat

CH2OPO3H2
ribulozo-1,5-bisfosfat

ribulozofosfat kinaza (fosforibulokinaza)

Cuobinerearibulozo1,5bisfosfatseregenereazcombinaiainiialacicluluiCalvin. nesenribulozo1,5bisfosfatulsupuscarboxilriietrecutprintroseriedetransformribiochimice iafostapoiregenerat. Ribulozo1,5bisfosfatulformatnurmareaciilorderegenerarepoateacceptadinnouomoleculde dioxiddecarbonsubinfluenaribulozobisfosfatcarboxilazeiiciclulCalvinserepet.Pentrua nelegecumseformeazglucidelenciclulCalvinestenecesarssestabileascstoechiometria reaciilorcomponente.

12 NADPH + 12ATP 6CO2 + 6ribulozo1,5fosfat 12 acid 3 fosfogliceric 12 NADP + 12 ADP 12 gliceraldehid 3 fosfat
+

3H2O 6 gliceraldehid 3 fosfat 3 fructozo 1,6 bisfosfat

3 Pi 3 fructozo 6 fosfat

2 fructozo 6 fosfat + 2 gliceraldehid 3 fosfat

2 xilulozo 5 fosfat + 2 eritrozo 5 fosfat

2H2O 2 Pi 2 sedoheptulozo 7 fosfat

2 eritrozo 5 fosfat + 2 gliceraldehid 3 fosfat

2 sedoheptulozo 1,7 bisfosfat

2 sedoheptulozo 7 fosfat + 2 gliceraldehid 3 fosfat

2 xilulozo 5 fosfat + 2 ribozo 5 fosfat

4 xilulozo 5 fosfat + 2 ribozo 5 fosfat

6 ribulozo 5 fosfat

35

6ATP 6 ribulozo 5 fosfat

6ADP 6 ribulozo 1,5 bisfosfat

Pentrusintezauneimoleculedehexozsuntnecesare6moleculededioxiddecarbon. Pentruintroducereaa6CO2nciclulCalvinsuntnecesare6ribulozo1,5bisfosfatncalitatede acceptor. nfinal6moleculeCO2setransformn1fructozo6fosfatutiliznd12NADPHi18ATP.Ecuaia sumaracicluluiCalvineste:

6CO2+18ATP+12NADPH+12H++11H2O fructozo6fosfat+18ADP+17H3PO4+12NADP+
Pentruasimilareauneimoleculededioxiddecarbonseconsum3moleculeATPi2moleculede (NADPH+H+).Dincele13reaciialecicluluiCalvinnumaienzimeleribulozobisfosfatcarboxilaza, fosforibulozokinazaisedoheptulozobisfosfatazasuntcaracteristicepentruorganismele fotoautotrofe.CaincazulaltorcimetaboliceuniiproduiintermediariaicicluluiCalvinpotfi atraindiferiteproceseanaboliceicatabolice. Exemplu:gliceraldehid3fosfatulcarepoateficonsideratcaprodusprimaralreaciilorlantuneric, esteutilizatndiversecibiosinteticeattncloroplastctinexteriorullui.Astfelgliceraldehid3 fosfatulpoateficonvertitnfructozo6fosfat,nglucozo1fosfatcareesteprecursorulaltor monoglucide,oligoglucide,poliglucidevegetale.Dingliceraldehid3fosfatsesintetizeazacizigraii aminoacizi. Reglarea ciclului Calvin Controluldiferitelorcimetaboliceserealizeazlanivelulreaciilorenzimaticecaresuntdepartede echilibru.AceastanseamncauvalorimarialeluiG. DintreenzimelecicluluiCalvintreindeplinesccondiii:ribulozobisfosfatcarboxilaza, sedoheptulozobisfosfataza,fructozobisfosfataza. Defapt,eficienacataliticaacestorenzimeseschimbnvivocuniveluliluminrii. Activitatearibulozobisfosfatcarboxilazeirspundelapatrufactoridependenidelumin: 1. semodificcupHulsubinfluenaluminii.pHulcretedela7la8caurmareapomprii protonilordinstromanspaiultilacoidic.RibulozobisfosfatcarboxilazaarepHoptim aproximativegalcu8. 2. estestimulatdeMg2+.InfluxulH+indusdeluminnspaiultilacoidesteasociatcuefluxul ionilordeMg2+nstrom. 3. esteactivatalostericdeNADPHcareestesintetizatdeNADPreductazfolosindelectronii energizaiproveniidelafotosistemulI. 4. eaesteputernicinhibatde2carboxiarabinitol1fosfatcareestesintetizatdeplantenumai lantuneric. Ribulozobisfosfatcarboxilazaesteactivatalostericdefructozo6fosfatiinhibatdefructozo1,6 bisfosfat.nacestmodacumulareafructozo1,6bisfosfatuluiservetecasemnaldestopareareaciei decarboxilarentimpceformareafructozo6fosfatuluinconcentraiiridicateiniiazreaciilela

36

ntuneric.DeaicirezultcfuncionareacicluluiCalvindepindenmoddefinitoriudeactivitatea fructozobisfosfatazei. ncloroplastefructozobisfosfataza,sedoheptulozobisfosfatazadeasemeneasuntactivateprin cretereapH,Mg2+iNADPH.Aciuneaacestorfactoriestecompletatprintrunsistemreglator secundarreprezentatdetioredoxin.Aceastproteinde12Kdaconineolegturdisulfidiccare poatefiuorredusreversibil. Tioredoxinaredusactiveazfructozobisfosfatazaisedoheptulozobisfosfatazaprintroreaciede schimbbisulfidic. ncloroplastetioredoxinaoxidatesteredusdeferedoxinaredussubaciuneaferedoxin tioredoxinreductazeicaredepindedestarearedoxaferedoxineisolubiledinstromaceastavariind cuniveluldeiluminare. Sistemultioredoxineicontroleaziaciuneaaltorenzime. Ci alternative de fixare a dioxidului de carbon PlantelefixeazatomuldecarbonutilizndcaleadescrisdeciclulCalvin.Dar,funciede particularitileanatomofiziologiceifuncionalealediferitelorgrupedeplantedescoperimc premergtorcicluluiCalvinpotexistadiferitemecanismeprincareCO2poatefifcutctmaiuor accesibilenzimeiribulozo1,5bisfosfatcarboxilazasimultancureducereaproporieideO2 disponibil. Putemastfeldifereniatreitipuridiferitedecifotosintetice(privitelamodulcomplet). OprimcaleestecaleaC3(utilizareadoarareaciilorcicluluiCalvin)apoicaleaC4i,cavarianta cailorC4,metabolismuldetipCAM(CrassulaceanAcidMetabolism). Denumirilevinpentruprimeledoudelaformareandecursulreaciilorfotosinteticeaunor intermediaricutrei,respectivcupatruatomidecarboncaprimiintermediaristabili.CAMafost descoperitlaplantedinfamiliaCrassulaceaedeaiciidenumirea. MareamajoritateaplanteloraparingrupuluiC3i,evolutiv,C4iCAMderivdinaceasta, reprezentndpnlaurmmodificrialeacesteici. Calea C4 SimilarciiC3discutatpelargmainainteiplanteleaparinndgrupuluiC4daricelecare utilizeazcaleaCAM,aunevoiedeciclulCalvinpentruformareaglucidelor.CaleaC4areoetap suplimentarprincareCO2atmosfericestecapturatistabilizat. naceastetapsuplimentarCO2estecuplatcuomoleculdefosfoenolpiruvat(PEP)rezultndun acidorganiccupatruatomidecarbon,aciduloxaloacetic(oxalilacetic).Reaciaestecatalizatde fosfoenolpiruvatcarboxilaz. Dinacestmotiv,alformriiacestuiprimcompusstabilcupatruatomidecarbon,estedenumitcalea C4aceastcaledebiosintez.Comparativcuribulozo1,5fosfatcarboxilazaafinitateapentruCO2a fosfoenolpiruvatcarboxilazeiestemultmaimare.Nefiindinfluenatnicidetemperatur,nici neputndfolosiO2,fosfoenolpiruvatcarboxilazaestecapabilsmeninunritmridicatalfixriiCO2 attlatemperaturicrescutectinprezenauneiconcentraiimarideO2. Distingem,funciedeintermediariiobinui,doumarivariantedecaleC4.Pelngacestea,sau derivatedinele,putemregsimaimultesubvariantedatemaialesdetipulcoenzimeiutilizatde reductaze,fieNAD+sauNADP+.

37

 Primulaspectcetreb buieobserva at,dincolode evariantele evolutivelacaresaajun ns,estec funcionareaciiC4estecondiio onatideo separaresp paialalocu urilorundea aulocproces sele biosintet tice.Aceast separaresp paialduce laoizolare maibunaRUBISCOfa adesurseledeO2 carearm mpiedicabunafixareaCO C 2. Laprimu ultipdecaleC4acidulox xaloacetices steconvertitlaacidmalic cprinreduce ere.Acidulmalic m trecedir rect,prininte ermediulpla asmodesmelo or,delacelu ulelemezofiluluilacelea aleteciifasciculare undevafidecarboxilatcuregene erareaCO2c carepoatefiutilizatdectreribulozo o1,5bisfosfa at carboxila azlafelcum marfifostut tilizatCO2de eprovenien directatmosferic.Rez zultdinace east reacie iomolecul deacidpiruviccaresentoarcencelulele c mezo ofiluluiunde e vafirefosfo orilat spreafo ormafosfoen nolpiruvatca apabilsapreiiaonoumo oleculdeCO O2. Enzimac carecatalizeazreacia,piruvat p fosfa atdikinazaprezintactiv vitateenzima aticneobinuit deoareceactiveazogruparefos sfatliberpe eseamahidr rolizeiATPuluilaAMPi pirofosfatacesta a drolizatdectrepirofosf forilazcuformareaadoumolecule edefosfatan norganic. fiindmaidepartehid Energiat totaleliberatestesuficientpentr ruaputeafo ormafosfoenolpiruvatul.
CO2 anhidraza ca arbonica HCO3COOH C CH2 OPO32-

H2O

Pi

COOH C CH2 O

f osf oe enolpiruvat carbox xilaza

COOH

o oxaloacetat

38

COOH HO C CH2 COOH H

NADP+

CO2 NADPH+H+
COOH C O

NADP-malat-enzima
CH3

L-malat
+

piruvat

SeconsumastfelomoleculdeATPiunadeNADPH+H formatepeseamaconversieienergiei luminoase.DartrebuieremarcatcechivalentulreductorsubformaNADPH+H+seregenereazntr unaltloc. AdouavariantdecaleC4implicdeasemeneaformareadeoxaloacetatlafelcalaprimultipde caleC4,darestemaicomplicatdeoareceulteriorimplicconversiaoxaloacetatuluicuajutorul aspartataminotransferazeiiauneimoleculedeacidglutamiclaacidasparticcuformareaunei moleculedecetoglutarat.Acidulasparticestecelcarevatrecedincelulelemezolfiluluin mitocondriilecelulelorteciifasciculareundereaciadetransaminaresevadesfuransensinvers. OxaloacetatulrezultatvafiredusnmitocondriisubaciuneamalatdehidrogenazeiNAD+dependente cuformareaaciduluiLmalic.AcidulLmalicprsetemitocondriaiestedecarboxilatoxidativcu ajutorulNADmalatenzimeiobinnduseacidpiruviciCO2.Acidulpiruvicestetransaminatdectre alaninaminotransferazcuformareaalaninei,peseamauneimoleculedeacidglutamic.Alaninaeste ceacaresentoarcencelulelemezofiluluiundeesteconvertitlapiruvattotsubaciuneaalanin aminotransferazei.
CO2 anhidraza carbonica HCO3COOH C CH2 OPO32-

H2O

Pi

COOH C CH2 O

f osf oenolpiruvat carboxilaza

COOH

oxaloacetat

CaleaC4estedependentideoanatomieaparteafrunzelorplantelorncaresedesfoar. AnatomiatipicaacestorfrunzefacecareaciilespecificepentrufixareaCO2iceleceducconcretla sintezaglucidelorsfieseparatespaial.CO2estecapturatncelulelemezofiluluiaflateimediatsub celealeepidermeiidinimediatavecintateacavitilorsubstomaticeiarncorporareasanglucide estelocalizatnceluleleteciifasciculareaflatemultninteriorulfrunzei.

39

LaplanteleC3concentraiadeO2ninteriorulcloroplastelorestedecirca1000deorimaimaredect concentraiadeCO2faptcareduceautomatlaunritmridicatalfotorespiraiei,acestfaptfiind cuplaticuslabaafinitatearibulozo1,5bisfosfatcarboxilazeipentruCO2.LaplanteleC4ribulozo 1,5bisfosfatcarboxilazaestelocalizatmpreuncucelelalteenzimealecicluluiCalvinncelulele teciifascicularecarenusuntexpusedirectctrecontactulcuatmosfera. ConcentraiadeCO2nceluleleteciifasciculareesteastfelcuunordindemagnitudinemaimare dectncelulelemezofiluluidelaplanteleC3(nambelecazurisediulconcretalcicluluiCalvin). AcestfaptfacecaraportuldintreCO2siO2safiemultmbuntitnfavoareaCO2.nacestfel ribulozo1,5bisfosfatcarboxilazaestehrnitsuplimentarcuCO2ifotorespiraiaesteredus foartemult,spreeliminare,laplantelecareutilizeazoricaredinvarianteleciiC4. Consecineleocoliriilimitrilorintrinsecialeribulozo1,5bisfosfatcarboxilazeisuntenorme.Plantele C4auratemaimarialefotosintezeidectplanteleC3itemperaturaoptimpentrufotosintezmai maredectlaplanteleC3.DeasemeneaplantelecareutilizeazcaleaC3devinmultmairepede limitate(ifotorespiraiapreponderent)cndiluminareanuestenclanivelulmaximum comparativcuplanteleC4careaucapacitateadeamenineunraportmultmaibunntreCO2/O2la nivelulcelulelorundeaulocreaciilecicluluiCalvinipotexploatamaieficientiluminareaintens. PlanteleC4coninmultmaipuinribulozo1,5bisfosfatcarboxilaz(1/3pnla1/6)comparativcu planteleC3,fapttradusprintroeficienmultmaimareautilizriiazotului.Deasemenea,utilizarea mecanismuluidembogirenCO2faccaiutilizareaapeisfiemultmaieficientlaplanteleC4 comparativcuceleC3.Existnsiunreversalacesteieficienesporite:utilizareaunorcantitimai marideATPiNADPH+H+dectsuntnecesareplantelorC3iconsecutivpotenialedezavantaje pentruplantelecareutilizeazcaleaC4maialesdacnusuntndeplinitecondiiileoptimede iluminareidetemperatur. Calea CrassulaceanAcidMetabolism (CAM) PlantelecarefolosesccaleaCAMutilizeaznesenaceeaicaledeapompaiconcentraCO2 precumplantelecareutilizeazcaleaC4doarcrealizeazacestlucruntromanierdiferit.Dacla planteleC4ribulozo1,5bisfosfatcarboxilazaestentlnitdoarnceluleleteciifasciculare,la planteleCAMenzimaesteomniprezentntoatecelulelefotosintetizatoare,analogplantelorC3.n locdesepararespaial(calaC4)avemdeafacecuosepararetemporalacapturriienergiei luminoasedepreluareaCO2. DaclaplanteleC3iC4stomatelesuntdeschiseziuacndarelocicapturareaenergieiluminoasei conversiaCO2nglucide,laplanteleCAMstomatelesuntnchiseziuaideschisenoapteadatorit condiiilordeviacroratrebuieslefacfaplanteleCAM.ntimpulnopii,customatele deschise,pierdereadeapesteredusinacestintervalnocturnarelocsintezaaciduluioxaloacetic suntaciuneafosfoenolpiruvatcarboxilazeiinprezenaCO2intratprinstomateledeschise.Acidul estestocatnvacuolemarincelulelefotosintetizatoare.Petimpulzileistomatelesuntnchisedar reaciilefotosinteticeaulocexactcalacelelalteplantepeseamaCO2eliberatprinscindareaacidului oxaloaceticformatntimpulnopii.AceeaimodalitatedeconcentrareaCO2esteprezentila planteleCAMlafelcumeraprezentlaplanteleC4iprinintermediuleisevorocoliinconvenientele prezentatederibulozo1,5bisfosfatcarboxilaz. DeasemeneaplanteleCAMauesuturifotosintetizatoaregroase,suculente,protejatedecuticul groasiacesteesuturitrebuiesaibcapacitateadeaacumulamaricantitideaciziorganicicu patruatomidecarbonnecesaribuneidesfurriareaciilordesintezaglucidelorpetimpulzilei. Acumulareaestelimitatdoardespaiulavutladispoziiepentruformareadevacuole.Separarea temporalestedeasemeneaunfactorlimitativalrateidedesfurareafotosintezeiceeacefaceca planteleCAMsprezinteoacumulareacarbonuluimairedusidectplanteleC3idectplantele C4.Totuiacesteplanteexceleazlaeficienautilizriiapei,aceastanprimulrnddatoritmodului

40

dedeschidereastomatelorpetimpulnopiicndestemaireceimaiumedinchideriistomatelor petimpulzileicndestecaldiuscat. Deasemenea,uneleplanteCAMpotfolosiimecanismulsimpluC3petimpulzileialturidevarianta CAMcuacumulareaCO2petimpulnopii.AlteplantesuntdoarfacultativCAMatuncicndcondiiile nusuntfavorabile. Conversia fructozei i obinerea celorlalte monoglucide DacprodusulprimaralfotosintezeipoateficonsideratacidulD3fosfoglicericatunciacestaprin transformrisuccesivednaterefructozo6fosfatuluicareesteprecursorulformriituturor celorlaltemonoglucideiaderivailoracestora. nplante(darincelulelecelorlalteorganisme)suntenzimespecificecaretransformfructozo6 fosfatulnglucozo6fosfat,manozo6fosfat,glucozamin6fosfat. Esterii6fosforiciaiglucozeiimanozeiformaidinfructozo6fosfatservescdreptprecursoripentru sintezaaltorglucideiaderivailorlor.
H HO HO H H C C C C C O H H OH OH H HO HO H H C C C C C H OH OH HO H H OH H H C C C C C OH O H OH OH HO H H H C C C C C OH OH H OH OH H H HO H H C C C C C O OH H OH OH

CH2OPO3H2 D-manozo-6-fosfat

CH2OPO3H2 trans endiol manozof osf at izomeraza

CH2OPO3H2 D-fructozo-6-fosfat

CH2OPO3H2 cis endiol

CH2OPO3H2 D-glucozo-6-fosfat

glucozof osf at izomeraza

Oaltcaledebiosintezamonoglucideloriderivailorlorestereprezentatdegluconoegenez. Glucidelelibere,celeceaparlantunericprinscindareaamidonuluilaseminelesupusegerminaiei sauprinhidrolizaoligoglucideloripoliglucideloralimentarelanivelultubuluidigestivpotfi transformatenesteriifosforicicorespunztorisubaciuneakinazelorspecifice.Acestereaciise desfoarcuconsumdeATPsaualtnucleotidtrifosfatiarrestulfosfattransferatajungeaproapen toatecazurilelagrupareaalcoolicprimarconformreaciei(datcucaractergeneral):

ExcepiiledelaacestmecanismsuntLarabinoza,acidulDglucuronic,acidulDgalacturoniccarese transformnesterii1fosforicicorespunztori. Deinmoleculaunorcetopentoze(Dxiluloza)segsesc2gruprialcooliceprimarevafiesterificat grupareaalcoolicdelaatomuldecarboncunumruldeordinecelmaimare(laDxilulozeste atomuldecarbon5). Ceamairspnditkinazestehexokinazaattlaplantectilaanimale.Arespecificitateredus fadesubstratulorganicutilizatpentrufosforilare.Celemaimultekinazesuntnsspecifice substratelorlor.ToatekinazelesuntactivatedeioniideMg2+.

41

Transformrileulterioarelacaresuntsupuseulteriormonoglucideleaulocdemulteoriprin intermediulNucleozidDifosfatMonoglucidelor(NuDPmonoglucide)caresuntformeleactiveale monoglucidelorcuroldeosebitdeimportantcaagenideglicozilare(donorideresturiglucidice). Existmultecombinaiincaresuntunitediferitemonoglucidesauaciziilorcuresturi nucleoziddifosfaturidin,citidin,guanozin,adenozindifosfat. NuDPmonoglucidelesuntsintetizatedinesterii1fosforiciaimonoglucidelorpecaleauneisuccesiuni dereacii.Pirofosfatuleliminatprovinedinresturileterminalealenucleozidtrifosfatului. CaexempluvomanalizacazulUDPglucozeiobinutdinglucozo6fosfatpecaleauneireaciide mutarearestuluifosfatdeatomuldecarbon6laatomuldecarbon1,reaciecatalizatde fosfoglucomutaz,urmatdetransferuluirestuluiuridilildelaUTPlaglucozo1fosfatreacie catalizatdeUTP:glucozo1fosfaturidililtransferaza.Reaciaesteunadeechilibrudaraciunea pirofosfatazeicaredescompunepirofosfatulrezultatfacecaechilibrulsafiedeplasatspreformarea UDPglucozei.DeoarecediferenadeenergieliberlahidrolizaNuDPmonoglucidelorestemaimare dectceadelahidrolizamonoglucid1fosfatului,carelarnduleiestemaimaredectceadela hidrolizamonoglucid6fosfatului,estelimpedecNuDPmonoglucidelesuntdonorieficienide resturifosfatpentrureaciiledinorganismelevii.

OH CH2OH O + OPO3H2 -D-glucozo-1-fosfat

-

N O O P OO O P OO O P OO O N O

UridinTriFosfat

UTP:glucozo-1-f osf at uridilil-transf eraza

PPi

pirof osf orilaza OH

2Pi

CH2OH O

N O O P OO O P OO O N O

UDP-glucoza

3.2. Biosinteza oligoglucidelor

Biosinteza zaharozei i a ,trehalozei Zaharoza(sucroza)estediglucidulcelmairspnditnregnulvegetal.Easesintetizeazntoate planteleverziundeservete,nprincipal,caformdetransportaglucidelorntructdiglucidul creeazopresiuneosmoticmaimicdectaceeaicantitateechivalentdemonoglucide. Plantelerealizeazsintezazaharozeipedouciapropiate.nprimacaleacceptorulglicozidicesteD fructozaiarncealaltDfructozo6fosfatul.

42

FructozaliberseobinenurmahidrolizeiDfructozo6fosfatuluiformatnciclulCalvinsubaciunea fructozofosfatfosfatazei. Primacaledebiosintezazaharozeiestecatalizatdezaharozosintetazcarepoateutilizancalitate dedonorglicozilicUDPglucoza,ADPglucozaiGDPglucoza,conformreaciei:

nceadeadouacaledebiosintezazaharozeiparticipnumaiUDPglucozacadonorglicozidici fructozo6fosfatulcaacceptoreifiindconvertiidezaharozofosfatsintetaznzaharozo6Ffosfati UDP.

CH2OH O + UPD UDP-glucoza -D-fructozo-6-fosfat CH2OPO3H2 zaharozof osf at sintetaz O CH2OPO3H2 CH2OH O UDP CH2OH O CH2OH O

Zaharozo-6F-fosfat

Reaciademaisusareoconstantdeechilibrumaifavorabildectprimavariantdeoareceeste cuplatcuoaltreaciecatalizatdezaharozo6Ffosfatfosfatazcarehidrolizeazzaharozo6F fosfatullazaharozliberceeacefacecaechilibrulreacieisfiedeplasatspreformareazaharozei.

CH2OH O CH2OH H2O O Pi CH2OH O CH2OH O

CH2OPO3H2

zaharozof osf at f osf ataza

O Zaharoza

CH2OH

Zaharozo-6F-fosfat

Celedousintetazeprecumizaharozo6fosfatfosfatazasegsescncloroplaste.Deiexistdate careconfirmbiosintezazaharozeincloroplaste,nprezentadevenitclarczaharozasesintetizeaz ncitoplasmacelulelorfotosintetizantefolosindUDPglucozifructozo6fosfat. nesuturilenefotosintetizante(precumnendospermulseminelorsupusegerminrii)biosinteza zaharozeidinUDPglucozifructozo6fosfatarelocprobabilncitoplasmacelulei.Sepresupunec zaharozosintetazaaravearolulfiziologicprincipaldeacatalizascindareazaharozeinUDPglucoz (ADPglucoz)carepoateservicaprecursornbiosintezaamidonului,,trehalozeiconinedou resturideDglucozopiranozuniteprintrolegtur11glicozidic.Acestdiglucidsentlneten ciuperci,algealbastreverziialgeroii,npteridofiteinplante.Deasemeneaintrncompoziia hemolimfeilainsecte. ,trehalozasesintetizeaznurmadesfurriicombinateaurmtoarelorreaciiacesteafiind catalizatede,trehalozofosfatsintetazirespectivtrehalozofosfatfosfatazconformecuaiilor:

43

Ladiferitespeciideplante,trehalozasubstituiezaharozanfunciadetransportoralcarbonului organicsintetizatialenergiei.

Biosinteza lactozei Unelediglucidesuntsintetizatepentruafiutilizatedreptcombustibilmetabolic.Exemplultipiceste lactoza(di)glucidulmajordinlapteleprodusdemamifere. Biosintezalactozeiserealizeaznglandamamarsubaciunealactozosintetazeiconformreaciein carecadonorglicozilicserveteUDPgalactozaformatprinepimerizareaUDPglucozeiifolosind dreptacceptoromoleculdeglucoz. Lactozosintetazaconinedousubuniti: a)unacataliticgalactoziltransferazaprezentncelemaimulteesuturiundecatalizeazreacia UDPgalactozeicuNacetilglucozaminaconducndlaNacetillactozamincareesteosubunitate importantapriiglucidiceaglicoproteinelor. b)osubunitatemodificatoarelactalbuminaaceastafiindoproteinspecificglandeimamare fiindlipsitdeactivitatecatalitic.Deilipsitdeactivitatecatalitic,lactalbuminamodific specificitateaunitiicataliticepentrucaeaspoatutilizadreptacceptormoleculadeglucozn loculNacetilglucozaminei.

Biosinteza oligoglucidelor din familia rafinozei Rafinozapoateficonsideratreprezentantultriglucidicalfamilieideoligoglucideacrorstructurse obineplecnddelazaharoz,lacareseataeazunu,douresturideDgalactoz. ntructacesteoligoglucidesegsescnseminelemultorplante,seapreciazceleconstituieo formderezervderesturiDgalactozilice,DglucoziliceiDfructozilicenplantelerespective. Rafinozaaparencantitinsemnatensemineledebumbacinsfecladezahr,apoinseminele decereale,nsoiaimultealteleguminoase.Stahiozasadescoperitlamultegenurialefamiliei LeguminosaeiLabiatae.BoabeledeGlycinemaxirizomiideStachyssieboldiisedistingprinbogia nstahioz.Verbascozaesteprezentnsoia,semineledelucern,mzricheetc. BiosintezaoligoglucidelordinfamiliarafinozeipresupunetransferulsuccesivalrestuluiDgalactozilic delagalactinol[ODgalactopiranozid(11)mioinozitol]lagrupahidroxildelaatomuldecarbon 6arestuluiDglucozilicsauDgalactozilicterminalaloligogluciduluiprecedentnsuccesiuneadat. GalactinolulseformeazdinUDPDgalactozimioinozitol.Aceastreacieestecatalizatde UDPDgalactoz:mioinozitolgalactoziltransferaz,acreiactivitateestepotenatdeioniide Mn2+. 44

 Formarearafinozeiarelocprintransferulrestuluigalactozildelagalactinollagrupahidroxildela atomuldecarbon6alrestuluideDglucozdinmoleculazaharozei.Stahiozaiverbascozase sintetizeazpecaleatransferuluisuccesivalrestuluigalactozildelagalactinolrafinoz,respectiv stahioz,urmndacelaimodeldetransfer:

3.3. Biosinteza poliglucidelor

Poliglucidele(polizaharidelesaupoliozidele)suntcombinaiimultimericeobinuteprinlegarea resturilordemonoglucidei/sauderivailoracestora.Unitilemonoglucidiceseunescntreeleprin legturiglicozidicecaresepotaflanformasauisepotstabiliduptipul12,13,14sau 16,rezultndpolimericustructurliniarsauramificat.nfunciedecompoziiamonoglucidic sedeosebeschomopoliglucide(homoglicani)coninndcteunsingurmonoglucidi heteropoliglucide(heteroglicani)cuprinznddoupnlapatrusau,mairar,56monoglucide diferite. Dupprovenien,poliglucidelesempartnfitopoliglucide,poliglucidelemicroorganismelori zoopoliglucide. Poliglucidelesesintetizeaznorganismeleviipecaleareaciilorsuccesivedetransferalresturilor glicozidicelacareparticipunnumrmaredemoleculedonorderesturiglicoziliceiomoleculde acceptor,adeseanumitstartersauprimer.Resturileglicozidice,cedatededonor,seleaglacaptul nereductoralmoleculeideacceptor.Moleculainiialdeacceptorpentrubiosinteza homopolizaharidelorlineareadeseareprezintunoligoglucid,avndstructuridenticsaufoarte apropiatcustructurapoligluciduluisintetizat. CeamaimarensemntatentredonoriideresturiglicoziliceauNuDPmonoglucidelecutoateci unelediglucide(zaharoza)potacionacadonorideresturifructofuranozilicensintezafructanilor. ImportanamareaNuDPmonoglucidelornbiosintezapolizaharidelorestedeterminatnprincipal deconinutullorridicatdeenergieliber. Biosinteza amidonului Amidonulesteprincipalulpolizaharidderezervalplantelor.Elsedepoziteaznsemine,bulbi, tuberculietc.Coninutuldeamidonestede6080%nboabeledeorez,6070%nceledeporumb, 5775%ncariopseledegru,4243%nboabeledefasolei1225%ntuberculiidecartofi.

45

Amidonulesteunhomopoliglucid,monoglucidulconstitutivalamidonuluifiindDglucopiranoza. Amidonulconstituieunamestecdedoupoliglucide.Unulnumitamiloz,reprezintunpolimer linearalctuitdinresturideDglucopiranoz,uniteunulcualtulprinlegturi(14)glicozidice. Moleculaamilozeiestedispusnspaiusubformdespiral,fiecarespircuprinznd6resturide Dglucoz.Aldoileapoliglucidcomponentalamidonuluisenumeteamilopectiniareostructur ramificat.ResturiledeDglucoznamilopectinseunescpredominantprinlegturi(14) glicozidice,iarnpunctelederamificaieexistlegturi(16)glicozidice.Oramificaienmolecula amilopectineisentlnetela,aproximativ,2430resturideDglucoz. Amilozaiamilopectinasedeosebescdupproprietilelorfiziceichimice.Masamolecularmedie aamilozeidincartofestedeaproximativ400.000daltoni,dinporumbiorzntre100.000i 200.000daltoni.Pentruamilopectinsaustabilitmasemolecularemaimaride20.106daltoni. Amilozasecoloreaz,prinformareaunuicompusdeadsorbie,cuiodulnalbastrunchis,iar amilopectinanalbastruviolet.Amilozaprindizolvarenapfierbintedosoluiecoloidal, limpede,nevscoas,iarncazulamilopectineisoluiadevinevscoasisegelific,formndococ saucleiuldeamidon. ngeneral,amidonuldinmajoritateaplanteloresteconstituitdin1525%amilozi7585% amilopectin.Totui,amidonuldinboabeledeporumbcerosconinepracticnumaiamilopectin,n timpcelauniihibrizideporumbamilozasegsetenproporiede5080%. Amidonulareunroldeosebitnalimentaiaomuluiianimalelor.Amidonulestecomponentul principalalfinurilor,pinii,pastelorfinoase,cartofilor,reprezentndglucidulcuceamaimare ponderenalimentaie.nscopuriindustriale,amidonulseextragedincerealeicartofi.Are numeroasentrebuinricaingredientnproduselealimentarecroraleconfercalitisenzoriale maibune.nplusamidonulseutilizeazlafabricareaalcooluluietilic,aciduluilactic,acetonei, butanolului,nindustriatextilpentruapretat,lapreparareacleiuriloretc. Amidonultotdeaunaseformeazisedepoziteazsubformdegruncioarenplastide.nesuturile nefotosintetizanteasemeneaplastidesuntamiloplastele,iarncelefotosintetizantecloroplastele. Gruncioareledeamidonconstituiestructurinaltorganizate,cuformeidimensiunifoartediverse, daradeseacaracteristicepentruospeciedatdeplante. Biosintezaamidonuluiesteunprocesbistadial.Amilozacauncomponentmaisimplualamidonului sesintetizeazprimaiapoiopartedinmoleculeleeisuferorestructurare,conducndla componentulmaicomplexalamidonuluicareesteamilopectina.Astfel,amilozandeplineterolulde precursoralamilopectinei.Aceastafirmaieestesusinutdeobservaiacamilozaplantelorde grutratatecu14CO2sau14Czaharoz,includeatomuldecarbonradioactivmultmaidevremedect amilopectina. Amidonulsesintetizeaznplastidecuparticipareamaimultorenzime.Dintreele,primaenzim studiatafostamidonfosforilazasauglucanfosforilazacarecatalizeazreacia.

46

DeoarecereversibilitateaacesteireaciidepindederaportulPi/Dglucozo1fosfat,amidon fosforilazapoatefiimplicatattnscindareactinsintezaamidonului,cndconcentraiaD glucozo1fosfatuluincelulavegetalatingeunnivelridicat.Enzimapoatessintetizezeamidonde novodinDglucozo1fosfat,folosindcaprimerunoligogluciddinseriamaltozic,ncepndcu maltotrioza. OaltvariantnbiosintezaamidonuluiestecealegatdeutilizareaNuDPglucozeicaprecursorn biosintezaamidonuluiiglicogenului. EnzimacarecatalizeazformareaamidonuluidinNuDPglucozsenumeteamidonsintaz.n esuturilevegetaleexistcelpuindouizoenzimealeamidonsintazei.Primaafostdescoperit izoenzimalegatstrnscugruncioareledeamidonnformare.Adouaizoenzimaamidonsintazei esteoenzimsolubil,prezentnamiloplasteleseminelorncoacere,tuberculilorin cloroplasteleesuturilorfotosintetizante.AmbeleizoenzimecatalizeaztransferulrestuluiD glucopiranozicdelaNuDPglucozlacaptulnereductoral(14)Dglucanuluiacceptorsaual moleculeideprimerifixarealuiprintrolegtur(14)glicozidic.Termenulde(14)D glucansereferlaoligoglucidulsaupoliglucidulalctuitdinresturideDglucopiranoz,uniteprin legturi(14)glicozidice.
CH2OH O + UPD (ADP) OH O O CH2OH O CH2OH O CH2OH O

capat nereducator

amidon sintaza

CH2OH O

CH2OH O

CH2OH O

n+1

Amidonsintaza,strnslegatcugruncioareledeamidon,poateutilizaattUDPglucozactiADP glucozachiardacADPglucozaesteundonorderesturiglicozilicemaieficientpentruaceast enzim.AmidonsintazasolubilpoateacionanumainprezenaADPglucozei.Sepresupunec aceastproprietateaamidonsintazeiestestrnscorelatcumecanismuldereglareabiosintezei amilozeiiamilopectineinmoleculaamidonului.Raportulntreconinutulamilozeiiamilopectinei nmoleculaamidonuluidepindedespeciadeplantiseaflsubcontrolgenetic. UniicercettoriafirmcDglucozadinUDPglucozesteinclusnamiloziamilopectin,iarcea dinADPglucozpredominantnamilopectin.Totuicercetrirelativrecenteaudovedit specificitateamairidicataamidonsintazeipentruADPglucoz.FormareaADPglucozeinplantese poaterealizadinzaharozsubaciuneazaharozosintetazeiidinDglucozo1fosfatcu participareaADPglucozopirofosforilazei.Unelecelulevegetalepotconinezaharozofosforilazcare catalizeazreaciadeobinereaglucozo1fosfatuluidinzaharoz. Ambeleizoenzimealeamidonsintazeisuntcapabilesutilizezeomarediversitatedelanuri (14)glucanicencalitatedeprimer,ncepndcumaltozaiterminndcumoleculeledeamiloz, alctuitedinctevamiideresturideDglucoz.Acceptorpotfideasemeneafragmentelerelativ scurtealecatenelor(14)glucanice,descoperitendextrinele(14):(16)ramificate(sau dextrinelimit)inramurileexterioarealeamilopectinei.Dacacceptorulesteun(14)glucan, amidonsintazacatalizeazformareaamilozei.ntructncalitatedeprimerpotservidextrinele (14):(16)ramificate,amidonsintazapoate,deasemenea,participanbiosinteza amilopectinei.

47

Amilopectina,avndstructurramificat,seformeaznurmaaciuniicomuneaamidonsintazei, carecatalizeazunirearesturilorDglucopiranoziceprinlegturi(14)glicozidiceiaenzimeide ramificarea(14)glucanului(numitiniialQenzim),caretransferunsegmentoligoglucidicde lacaptulnereductorallanuluide(14)glucan(deexemplu,moleculadeamiloz)launrest glicozilicneterminal,aparinnduneizoneinterioarealanului(14)glucanic.Fragmentul transferatsefixeazlarestulglicozilicneterminalprinintermediullegturii(16)glicozidice. Acceptoralfragmentului(14)Dglucanictransferatpoatefialtmoleculdeamilozsauo ramurexterioaramoleculeideamilopectinncretere.Fragmentulcareseadauglamolecula acceptorului,poatesselungeascmaidepartesubaciuneaamidonsintazei.Catenaalungitpoate dinnousseramificesubaciuneaenzimeideramificare.Ramificrileialungirilerepetateconduc nfinallaformareamoleculeideamilopectin.
CH2OH O CH2OH O CH2OH O

O CH2OH O CH2OH O CH2OH O

x
O

O H2C O CH2OH O

CH2OH

OH

enzima de ramif icare

OH

capat nereducator -glucan

capat nereducator -glucan ramificat

n-x

nceprivetespecificitateaenzimeideramificare,eaacioneazasuprasubstratuluidonorcnd acestaareolungimedecelpuin40resturideDglucoz. Amidonulsesintetizeaznstromacloroplastului.Mecanismulcaredeterminraportulntreamiloz iamilopectinnmoleculadeamidonnuestencelucidatdarestedependentdespecie. Biosinteza fructanilor FructaniireprezintpolimeriaiDfructozeicesuntrspndiincirca15%dinspeciiledeplantecu flori.CaexempledefamiliideplantecaresintetizeazfructanisemenioneazLiliaceae,Poaceae, Campanulaceae,Asteraceaeetc.Uneleplantedeculturcagrul,orzul,ceapadeasemenea,conin fructani.norganismelevegetalefructaniindeplinescrolulbiologicderezerveenergeticeiprobabil suntimplicainproteciaplantelormpotrivastresuluicauzatdesecetifrig.Fructaniiprezint interesidinpunctdevederebiotehnologic.Fructaniicuungraddepolimerizaremicposedgust dulceiseutilizeazncalitatedendulcitorinaturalideputerecaloricjoas.Moleculeledefructani cumulteunitidefructozseutilizeazpentrunlocuirealipidelorndietelealimentare. UnelespeciidebacteriicaTolypothrix,Pseudomonas,Xanthomonas,Azotobacter,Erwinia, Streptococcus,Bacillus,Actinomyces,RothiaiArthrobacterposedcapacitateadearealizasinteza fructanilor. Toifructaniiaucaprecursorzaharoza,lacarepotfiataateresturideDfructoz(Fru)ndiferite poziii,conducndlafructanicustructuriiproprietideosebite. DuptipullegturilorglicozidicedintrezaharoziresturiledeDfructozexisttreicompui trizaharidicidelacarepotprovenidiferiifructani.Prinurmarefructaniiprezeninplantei microorganismepotficlasificain(celpuin)treigrupecaresedistingdupnaturalegturilor glicozidiceprincareresturiledeDfructozseunescntreele. nprimagrupintrinulinacareesteunfructanlinearavndcaprecursor1kestoza.Toifructanii descoperiindicotiledonatecainunelemonocotiledonatefacpartedingrupainulinei. 48

Adouagrupcuprindelevanul(fleina)careesteunfructanlinearncareresturiledeDfructozse unescprinlegturi(26)glicozidicecan6kestoz.Fructaniideacesttipsentlnescn monocotiledonateinbacterii. Ceadeatreiagrupincludefructaniidetipmixtcareconinattlegturi(21)cti(26) glicozidicentreresturiledeDfructozcanneokestoz,decimoleculeleloraustructuriramificate. Acetifructanisuntspecificiplantelordinpuni.

CH2OH O

O CH2OH CH2OH O O 6 CH2

CH2OH 6-kestoza

CH2OH

O CH2OH

O 1

CH2OH

O 6 CH2 CH2OH O

CH2

CH2OH

O O CH2OH CH3

neokestoza

1-kestoza

CH2OH

nmoleculelefructanilordinplantepotsintrepnla200resturideDfructoz.Fructaniibacterieni potsconinpnla100.000deresturideDfructoz. nplantefructaniisegsescnvacuole,spredeosebiredeamidoncareestedepozitatnplastide. nbiosintezafructanilordinplanteparticipdouenzimecaredeobiceisegsescnvacuole.Enzima zaharoza:zaharozafructoziltransferazacatalizeaztransferulrestuluideDfructozdelamoleculade zaharozdonoarelarestulfructofuranozicterminalalmoleculeiacceptoaredezaharoz,lacarese uneteprintrolegtur(21)glicozidic:

Faptulcdonorulfructofuranozeiestezaharozaseaflnconcordandeplincupunctuldevedere termodinamic,ntructGpentruhidrolizazaharozeiarevaloareade29,3kJ/mol,iarpentru legareaunuirestglicoziliclacatenapoliglicozilic,secercirca20kJ/mol.nacestmod,Gpentru 49

transferulrestuluifructofuranozicdelazaharozlamoleculaacceptordezaharozsausprelanul fructanicncreterearfideordinula9,3kJ/molceeacevafavorizadeplasareaechilibruluiacestei reaciispresintezafructanului. Recentsaconstatatcaceastenzimpoatescatalizezedeasemeneaformareatetrazaharidului (1,1kestotetrozasaunistoza)ipentazaharidului(1,1,1kestopentoza)corespunztoare. Adouaenzim,fructan:fructan1fructoziltransferazaarecapacitateastransfererestuldeD fructozdela1kestozlaunpolimerfructaniccueliberareauneimoleculedezaharoz:

CH2OH O CH2OH O CH2OH O O CH2 CH2OH O O CH2 CH2OH O 1-kestoza n+1 1 1 CH2OH O

+
CH2OH O f ructan:f ructan-1f ructoziltransf eraza

CH2OH

CH2OH fructan de tip 1-kestoza

+
CH2OH CH2OH O 1 O O CH2OH O CH2OH CH2 OH fructan tip 1-kestoza n fructoza CH2OH O CH2

Aceastenzimpoatesutilizezecaacceptororicefructozopolimer,nclusivzaharozaieste, probabil,rspunztoaredediversitateastructuralafructanilorexisteninnatur. Sinteza6kestozeiesterealizatdefructan:fructan6fructoziltransferaza.Formareaneokestozeiare locsubinfluenafructan:fructan6glucozfructoziltransferazacaretransferunrestdeDfructoz dela1kestozlaC6alrestuluideDglucozdinmoleculadezaharoz. Bacteriileaunechipamentullorenzimaticosingurenzimcapabilsrealizezesinteza trizaharidelorielongaiaulterioarafructanilor.Aceastenzim,numitlevanzaharaz,poates sintetizezelevanul.Levanzaharazaposeddeasemeneaactivitateinvertazic,catalizndhidroliza zaharozeinglucozifructoz. Biosinteza celulozei Celulozaesteceamairspnditsubstanorganicnatural,creialaplanteirevinpeste50%din cantitateadecarbon.Celulozaesteunpoliglucidpredominantvegetal,nseasegseteilaunele bacteriiichiarnevertebrate. HidrolizacompletacelulozeiconducelaobinereacantitativaDglucozei,iarhidrolizaparial ddiglucidulcelobioza.Acestedatecoroboratecualtecercetrichimiceauduslaconcluziac celulozaesteunpolimerlinearalctuitdinresturideDglucopiranoz,uniteprinlegturi(14) glicozidice.NumrulresturilordeDglucoznmoleculacelulozeiestedepeste3.000,ceeace corespundelaomasmoleculardepeste400.000daltoni.Celulozaesteinsolubilnap. Celulozaarerolstructuralesenialnorganismelevegetale.Moleculeledecelulozformeaz microfibrecarempreuncualtepolizaharide(hemiceluloze,substanepectice)ilignin(polimer

50

formatdinalcooliaromatici)intrnstructurapereteluicelularalplantelor,conferinduirezistenla presiuneainterioaraapeiilasusinereauneigreutimari. Deicelulozaseaflntoateplantele,coninutuleivariazputernicladiferitespeciiiorgane vegetale.Astfel,celulozasegsetenfibreledebumbacnproporiede98%,esenelerinoase 60%incelefoioase4050%. Porninddelacelulozseprepardiverischimbtorideioniculargiaplicaiinbiochimieibiologia molecular.Ceamaimarecantitatedecelulozestefolositlafabricareahrtiei. Cutoatimportanaproblemei,detaliileprivindbiosintezacelulozeinusuntncclarificate. BiosintezacelulozeiesteunprocesdepolimerizarearesturilordeDglucopiranozfolosindca sursderesturideglucozUDPglucoza. Laplanteilabacteriicelulozasesintetizeazcuajutorulcelulozosintetazei,oenzimlegatde membranacelular,celulozaacumulndusencitoplasm.LabacteriaAcetobacterxylinumcelulozo sintetazaestedeasemenealegatdemembranacitoplasmaticdarcelulozasintetizatseobine extracelular.LaalgaPleurochrysiscelulozaseformeaznaparatulGolgifiinddepozitatpesuprafaa celulei. Dinpunctdevederechimiccelulozaprodusdediferiteorganismeesteidentic(fiindunpolimer formatdinresturideglucozlegatentreeleprinlegturi(14)glicozidice).Dinpunctdevedere structuralcelulozaesteunconglomeratdelanuriglucanicearanjatedeomanierspecificpentrua formastructuracristalin.Difereneledintrediferiteleformecristalinedecelulozspecificefiecrui organismproductorsuntdatedelungimealanurilorglucaniceidemoduldeasocierealacestora. Deasemenea,sademonstratccelulozaexistnformecristalineinoncristalineceamai rspnditformfiindaceeacunoscutcacelulozI(formcristalinnaltorganizat). Biosintezacelulozeiimpliccelpuindoustadii,primulfiiindcatalizatdecelulozosintetazi reprezentndformarealanurilorglucanice,iaraldoileastadiufiindceldecristalizarencareintervin ialteproteine. ncazulparticularalbacterieiAcetobacterxylinumaceastaproducecelulozpur.Vitezadesintez estefoartemare(pnla200.000deresturideglucozpesecund).Locurilencarearelocsinteza celulozeisuntconstituitedinporiaranjainliniepesuprafaacelulei.Fiecareporconstncelulozo sintetazmpreuncuproteineaccesorii.Fiecarecomplexdesintezproducelanuriglucanicecare formeazosubfibrilcelulozic.Maimulteastfeldesubfibrileprodusedeunitidesintezalturate formeazomicrofibrilcelulozic. Caleadebiosintezestebinecunoscutlaaceastbacterie.Aceastcaleimplicnprimfaz conversiaglucozeilaglucozo6fosfatcuajutorulglucokinazei.Urmtorulpasestedeconversiea glucozo6fosfatuluilaglucozo1fosfatcuajutorulfosfoglucomutazei.Glucozo1fosfatulesteapoi convertitlaUDPglucozcuajutorulenzimeiUDP:glucozopirofosforilazafolosindUTP.Complexul celulozosintetazicesteactivatdenucleotideciclicecumarfidiGMPciclic.Acestactivatoreste sintetizatdeenzimadiguanilatciclazaiconcentraiaacestuiaestereglatdefosfodiesteraze. Genelediguanilatciclazeiifosfodiesterazeloraufostidentificatecaformndunsinguroperonn genomulbacteriei. CelulozosintetazautilizeazUDPglucozcasubstrat.Formeazpolimerulculegturi(14) glicozidiceprininversareaconfiguraieidelaatomuldecarbon1alglucozei.Lanurileglucanicesunt sintetizatentromanierncareenzimaestestrnslegatdeprodusulpolimericncursulelongrii acestuia. 51

CelulozosintetazadelaArtrobacterxylinumesteoproteinmembranarcuctevaregiuni transmembranare.Seconsidercregiunileglobularealeacesteiproteinesuntimplicatensinteza celulozeiicmecanismuldesintezesteunuldetipacidbaz.Similaritinsecvenaaminoacidic suntcuuneleglicoziltransferaze.Celpuintreiresturideacidasparticaufostgsitecafiind conservatelacelulozosintetaz,lachitinsintetazilasintetazaaciduluihialuronic. nurmacercetrilormodeluldefuncionarealacesteienzimepresupunelegareasimultanadou resturideUDPglucozlasitusulcatalitic(resturileorientatela180unulfadecellalt)iformarea simultansausecvenialadoulegturi(14)glicozidice.Decialungirealanuluisefacecudou resturideglucozsimultanideasemeneasademonstratcelongarealanuluisefacedelacaptul nereductor. Lamomentuldefanuexistdovezicaresaratenecesitateaunuiprimer.Seconsiderciniierea sintezeicelulozeisefaceprinformareauneiunitidecelobioznsitusulcataliticalcelulozo sintetazei.
OH CH2OH O

O P OO

O P OO CH2 O N

O CH2OH O

CH2OH O O

UDP-glucoza

+ CH 2OH O

OH 2 UDP unitate de celobioza

O P OO

O P OO CH2 O N

CH2OH O

UDP-glucoza

CH2OH CH2OH O O

CH2OH O O

O + CH2OH

UDP

n molecula de celuloza in f ormare celuloza-sintetaza

UDP

CH2OH O

CH2OH O O

CH2OH O O

CH2OH O O

CH2OH O O

celuloza

52

ncazulplantelorsuperioareabian1996afostidentificatprimagenpentrucelulozosintetaz. AnalizamutantelormaialeslaArabidopsisthalianaieforturilemaripentrusecveniereagenelori genomurilorlamaimulteplanteaconduslaidentificareauneimarifamiliidegenececodeaz glicoziltransferaze.Uneledinacestegenecodeazcelulozosintetazentimpcealtelecodeaz proteinecuactivitatesimilarcelulozosintetazelordarcareproducpolizaharidenecelulozice. Acestestudiicareaudusladescoperirealamaimulteplante(bumbac,porumb,orez,pin,plop,etc.) amaimultorgeneresponsabilepentrusintezacelulozosintetazelorconducctreipotezaexistenei decelulozosintetazespecificepentrudiferiteesuturi. Uniifitohormoniavndfunciireglatoarendezvoltareaplantelor,pot,deasemenea,influenaviteza icalitateasintezeipereilorcelulari.Acidulindolilaceticigiberelinainduccretereaplantelor, procescareestecorelatdirectcusintezaiturnoverulpereilorcelulari.Substaneledetipul colchicineiicumarinei,careafecteazmitozaidepunereamicrofibrelordeceluloznorganismele vegetale,exercitunefectinhibitorasuprabiosintezeicelulozei. Biosinteza hemicelulozelor Alturideceluloznstructurapereteluicelularlaplanteexistpolimerialctuiidinmanozsau manoziglucoz.Desprebiosintezadiferitelortipuridepoliglucide,aparinndhemicelulozelor,se cunoatefoartepuin.Maibinestudiatesuntsistemeleenzimaticececatalizeazsinteza(14) mananuluiporninddelaGDPmanoziformarea(14)glucomanuluiporninddelaUDPmanoz iUDPglucoz:
CH2OH O

CH2OH O O

CH2OH O O

n (1-4)-manan

Biosinteza glicoproteinelor Componenteleoligoglucidicealeglicoproteinelorsepotclasificandoucategorii: 1.OligoglucideNlegatecareseataeazlacatenapolipeptidicprintrolegturNglicozidiccu atomuldeazotamidicalunuirestdeasparagin(Asn)dinsecvenaAsnXSersauAsnXThr,undeX poatefioricareaminoacid,cuexcepiaprolineisauaciduluiaspartic. 2.OligoglucideOlegatecaresefixeazdelanulpolipeptidicprintrolegturOglicozidiccu hidroxilulalcoolicalserinei(Ser)sautreoninei(Thr)saualradicaluluide5hidroxilizin,prezent numaincolagen.

53

 GlicoproteinelecuoligoglucideNlegatesesintetizeaznreticululendoplasmatici,ulteriorsufer procesuldematurarenaparatulGolgi.Biosintezapriioligoglucidiceaacestorglicoproteine cuprindemaimultestadii. Maintiarelocsintezaprecursoruluioligoglucidiclegatcuunderivatlipidic.Componentullipidicn acestprocesestedolicholul,unpoliizoprenolculanlungdeatomidecarbon.Ladiferii reprezentaniailumiivii,structuradolicholuluisemodificndependendenumrultotalal resturilorizopreniceconinute(1721unitiizoprenicenorganismeleanimalei1424nfungii plante).Formaactivadolicholuluiestedolicholfosfatulcareseformeazsubaciuneaenzimei dolicholkinaza,numitsistematicCTP:dolicholOfosfotransferaz(EC2.7.1.108). Precursoruloligoglucidicseleagcudolicholulprintropuntepirofosfatsaufosfat.Att dolicholpirofosfatmonoglucidulctidolicholfosfatmonoglucidulposedaceeaicapacitatede transferalglucidelor,caiNuDPmonoglucidele,deaceeaeipotfuncionacadonorideglucide. DiferenaprincipalntransferulglucidelorcuajutoruldolicholuluiiNuDPmonoglucidelorconstn faptulcderivaiidolicholuluipotacionanmediulhidrofobalmembraneicelulare,ntructconin lanulpoliizoprenichidrocarbonatlung,iarNuDPmonoglucidelenuposedoastfeldecapacitate.

Caleadesintezadolicholpirofosfatoligoglucidelorcuprindectevaetapedeadiieaunitilor monoglucidicelaglicolipidulncreteresubaciuneaglicoziltransferazelorspecificeconducndlao structurmiezcomun.Fiecarerestmonoglucidicesteadugatdeoglicoziltransferazspecific. Dupsintezacompletamiezuluioligoglucidic,roluldolicholpirofosfatuluisemodific,din acceptoreldevinedonoralrestuluiglicozilic,ntructoligoglucidulestetransferatlaazotulamidical unuirestdeasparagindinlanulpolipeptidicalproteineinative. Dolicholpirofosfatuleliberatnurmatransferuluimiezuluioligoglucidiclaproteinesteconvertitn dolicholfosfatsubaciuneauneifosfataze.Aceasthidrolizesteblocatdeantibioticulbacitracin, unpolipeptidciclic.Enzimeleimplicatenreaciiledeglicozilarepotfiinhibatedealtantibiotic interesant,numittunicamicin,careesteunanaloghidrofobicalUDPNacetilDglucozaminei. Tunicamicinulblocheazformareadolicholpirofosfatoligoglucidelorprininhibareasintezei dolicholpirofosfatNacetilDglucozamineidindolicholfosfatiUDPNacetilDglucozamin.Ambele antibioticeaufostdescoperitedatoritabilitiilordeainhibabiosintezapereilorcelulelor bacteriene,procescare,deasemenea,includeparticipareaoligoglucidelorlegatedeunlipid. ntreglicoproteineleNglicozidicesenumrglicoproteinelecunoscutesubnumeledelectine(dela cuvntullatinlegere=aselecta)careaufostevideniatenanimale,planteimicroorganisme. Lectineleposedcapacitateadeafixaideaprecipitastructurileglucidicespecificedepesuprafaa celulelor,ceeacelepermitesseuneasccuantigeneleglicoproteicealecelulelorrespective, determinndastfelaglutinareaacestora.norganismeleanimalelectinelefaciliteazcontactulntre 54

celule.Olectinconinedousaumaimultesitusuridelegarepentrucomponenteleglucidice. Situsuriledelegarealelectinelordepesuprafaauneiceluleinteracioneazcuglucideleetalatepe suprafaaalteicelule.Lectinelepotsaglutinezeeritrocitele,nanumitecazuricuospecificitateaa denalt,nctuneledineleseutilizeazpentrudeterminareagrupelorsanguine.Deosebitde interesantestecapacitatealectinelordeaaglutinapreponderentceluleletumorilorcanceroase. Rolullectinelornplantenuestestabilit,nsacesteglicoproteinepotservicapotenialeinsecticide. Deexemplu,semineledericinsuntdeosebitdebogatenlectinecareprezintomaretoxicitate pentrumajoritateaorganismeloranimale. GlicoproteinelecuoligoglucideOlegate,cumarfimucinasecretatdeglandelesalivaresubmaxilare, serealizeaznaparatulGolgi,prinadiionareaserialaunitilormonoglucidicelacatena polipeptidiccomplet.BiosintezaacestorglicoproteinencepecutransferulNacetilD galactozaminei(GalNAc)delaUDPGalNAclaradicaluldeSersaudeThralpolipeptiduluirespectiv subaciuneaGalNActransferazei.ncontrastcuoligoglucideleNlegate,caresunttransferatelaAsn integratntrosecvenaminoacidicspecific,resturiledeSeriThrOglicozilatenuconstituie prileuneianumitesecvene.GlicozilareacontinucuataareatreptataDgalactozei,acidului sialiciLfucozei,subaciuneaglicoziltransferazelorcorespunztoare. Caexempledeglicoproteinecuresturiglucidicelegateprinintermediuloxigenuluimenionm antigenelegrupelorsanguineABO. Componenteleoligoglucidicealeglicoproteinelorndeplinescroluldemediatoriaiinteraciilorcelul celul. Biosinteza chitinei Chitinaesteunpolizaharidlargrspnditnnaturcareparticiplaformareacarapaceicrustaceelor itegumentelorexterioarealeinsectelor,viermilorimolutelor.Eaintrncompoziiapereilor celulariaifungilor,precumiaimultormicroorganisme.Castructurchimic,chitinaesteunpolimer linear,construitdinresturideNacetilDglucozamin,uniteprinlegturi(14)glicozidice. Chitinasesintetizeazncarapaceanevertebratelor(crabiihomari),ncuticulainsectelor,nfungii unelealge,subaciuneachitinsintetazei,plecnddelaUDPNacetilglucozamin.nafardeacest precursor,chitinsintetazamainecesitunprimersauacceptor. Dupctsepare,mecanismulbiosintezeichitineiesteasemntorcumecanismuldeformarea celulozei.nambelecazuritrebuiesseproductransglicozilareasimultancuinversialegturii glicozidicenlegturaglicozidicapoligluciduluisintetizat.
CH2OH O CH2OH O + UDP
NHCOCH3

CH2OH O O O

CH2OH O

OH
NHCOCH3 NHCOCH3 H3C C O NH

capat nereducator chitinaza Chitinsintetaza

CH2OH O O

CH2OH O O

CH2OH O

OH
NHCOCH3 NHCOCH3 H3C C O NH

n+2

55

Biosinteza acidului hialuronic Acidulhialuronicaparineheteropoliglucidelornumitemucopolizaharidesauglicozaminoglicaniacizi, substaneavndmoleculeleconstituitedinresturideaminoglucidecarealterneazcuresturideacizi uronici.Prinurmare,acidulhialuronicesteunpolimerneomogenncareresturiledeacidD glucuronicalterneazcuradicaliideNacetilDglucozamin.Acidulhialuronicesteconstituentul principalalsubstaneifundamentaleintercelulare,ndeplinindroluldematerialdecimentarea diferitelortipurideesutconjunctiv.Datoritstructuriimacromoleculare,acidulhialuronicformeaz obariercontrainfiltraiilordegermenipatogeniisubstanetoxicenorganismulumanianimal. nbiosintezahialuronatuluiparticipcadonorideresturiglicoziliceUDPglucuronatuliUDPNacetil glucozamina.

Secvenacorespunztoarearesturilormonoglucidiceitipullegturilorntreunitilemonomere suntcontrolateprobabildeproprietileistructuraenzimeihialuronatsintetazacarecatalizeaz acestproces.

56

4. Catabolismul glucidelor
Prinacesttermensenelegtotalitateareaciilorceaulocpentrueliberareaenergieistocateprimar subformdeglucidenurmaprocesuluidefotosintez. Catabolizareaglucidelorareiroluldeafurnizaintermediarinecesaripentruaavealocalteci metabolice. Catabolizareaglucidelorlaorganismeleviipoateavealocattncondiiianaerobectiaerobe.

4.1. Degradarea poliglucidelor

Deoareceavemmaimultecategoriidepoliglucidevomaveasimilarmaimultecategoriideenzimede degradare:enzimecehidrolizeazpoliglucideledetipamidon,cehidrolizeazceluloza,fructaniii enzimecehidrolizeazpoliglucidecomplexe(dinunitiglucidicemodificate). Enzimelecarehidrolizeazlegturile(14)glicozidicedinstructuraamidonului,glicogenuluisaua produilorlorintermediaridescindaresuntreunitesubnumelegenericdeAMILAZE.Suntcunoscute 3tipurideamilaze: 1. amilaze 2. amilaze 3. amilaze amilazelesuntrspnditelabacterii,ciuperci,plantedarilaorganismeleanimale(nsnge, saliv,pancreasichiarnurin).Aciunealoresteunadescindarealegturilor(14)glicozidice dininteriorulmoleculelordeamidoniglicogen.Deaceeaamilazaestecatalogatcafiindo endoamilaz.Hidrolizaacestorlegturiesteunaneordonat.Nucatalizeazniciodatscindareade unititerminaledeglucoz.Fiindohidrolizneordonatsuntevitateramificaiilemoleculelorde amilopectiniglicogen.Produiirezultaisuntnumiidextrine(carepotficatalogatecafiind oligoglucidecugradediferitedepolimerizare). Aciuneaamilazeiasupramoleculeiliniaredeamilozconduceladextrinedetip(14)carevor fihidrolizatesuccesivpncegraduldepolimerizaresereducefoartemult(poatechiarpnla nivelulmaltozei).Aciuneaamilazeiasupraamilopectineiiglicogenuluiconducelaobinereade dextrineliniare(14)darsidedextrineramificate(16). Efectulaciuniiamilazeiasupramoleculelordeamidoniglicogenesteunuldedepolimerizare rapid.nsvitezadereaciescademultcutrecereatimpuluideoareceproporiadelegturi(14) nvecinateculegturi(16)saucucapeteterminalecreteceeacereduceposibilitiledelucru aleacesteienzime.Dinactivitateaacesteienzimerezultmaricantitidemaltozalturidedextrine liniare(14)idextrineramificate(16). Unrolimportantljoacaceastenzimniniiereascindriiamidonuluiaflatnstarenativn semine.Laorganismeleanimaleomjoacunroldeosebitlanivelulsaliveisinintestinulsubire (undereprezintunuldincomponentelesuculuipancreatic)darilanivelsanguin.Laaceste organismeasiguraasimilareaamidonuluiiaglicogenuluiprovenitedinhran. nprivinaactivitiiacesteienzimesetiecactivitateaeiesteinfluenatlaanumitesursede prezenaionilordeCa2+caresuntfactoridestabilizareastructuriienzimei.Deasemeneaprezena ionilordeClesteimportant. pHuldeaciuneesteunfactorimportantianalizareaacestuiparametrurelevomarevarietatede valorioptimepentrudiferitetipurideamilazedupprovenienalor.Laorganismeleanimale valoareaoptimapHuluiestentre6i7ntimpcelabacteriiintervalulestentre5i6.Uncaz

57

interesantestealamilazeisalivarealcreiintervaldepHdeaciuneestefoartelarg,dela3,8pnla 9,4.Valoareaoptimestensde6,9. Foarteinteresantestecdaclaomiprimateamilazasalivarestefoarteactivlaalteanimale aceastaareoimportanfoartereduscumarfisituaiadelaporc,cineipisicdaridela ierbivore. nesuturilevegetaleexistformediferitealeaceleiaienzimealcrorrolestencneprecizat. Seminelenuconinsauconincantitiinfimedeamilazaceastancepndsfiesintetizatdoar dupmbibareacuapincepereagerminaieideoarecealtfelarpunenpericolrezervelede amidon. amilazaesterspnditlaplantelesuperioareinunelebacteriialegenuluiBacillus.Catalizeaz hidrolizapenultimeilegturi(14)delacaptulnereductorallanurilor(14)glucanicecu formareademaltoz.Dinacestmotivesteconsideratcafiindoexoamilaz.
CH2OH O O CH2OH O 1 4 O CH2OH O O H2O -amilaza CH 2OH O O -maltoza CH 2OH O 1 + 4 CH 2OH O O CH2OH O O CH2OH O OH CH 2OH O O CH2OH O OH

capat nereducator

-Glucan liniar cu n resturi

-Glucan liniar cu n-2 resturi

Deoarecepierderearestuluidemaltozducelaformareaunuinoucaptnereductoractivitatea enzimeicontinudemaimulteori,deobiceipnlaodistande23resturidemaltozfade punctulderamificaie.Amilozaestescindatcompletnmaltoz.Resturileramificatede amilopectinasupracroraesteincapabilsintervinamilazasuntnumitedextrinelimit. Scindarealanurilorpoliglucidicedectreamilazproducefoarterepedeglucidereductoarede aceeaenzimamaiestenumitiamilazzaharogendeosebitdeamilaznumitamilaz lichefiant. Prezenanmediuldereacieaunorsubstaneceneutralizeazresturiletiolice(SH)ducela pierderearapidaactivitiienzimaticeatuturoramilazelor.incazulamilazelorsunt cunoscutelacerealeizoenzimedeasemeneacurolincert. amilazaarecaactivitatecataliticscindarealegturilor(14)glicozidicedelacaptul nereductoralmoleculelordeamidon,glicogenidextrinelorrezultatedinacesteacuformareade moleculedeglucoz.Estelargrspnditlamicroorganisme.

58

CH2OH O O

CH2OH O 1 4 O

CH2OH O O

CH2OH O O H2O -amilaza

CH2OH O OH

capat nereducator

-Glucan liniar cu n resturi

CH2OH O + OH Glucoza OH

CH2OH O 1 4 O

CH2OH O O

CH2OH O O

CH2OH O OH

-Glucan liniar cu n-1 resturi

Alturideamilazeladegradareapoliglucidelorcontribuiealte2enzime:amilopectin1,6glucozidaza, oligo1,6glucozidaza. Amilopectin1,6glucozidazaioligo1,6glucozidazaaunesenaceeaiaciune,descindarea legturilor(16)glicozidicedinpunctelederamificarealanurilordelamoleculelede amilopectinideglicogen.

CH2OH O
O

CH2OH O 1 dextrina limita ramificata 6 CH2OH O O H 2O O O

O H 2C O

CH2OH

amilopectin-1,6-glucozidaza / oligo-1,6-glucozidaza

CH2OH O
O

CH2OH O 1 +

CH2OH O O f ragmente liniare de -D-glucan

6 CH2OH O O

CH2OH O

Degradareacelulozeiesterealizatdectrecelulaz. Celulazaesteoaltenzimcuimportandeosebitpentrucircuitulmaterieinnatur.Celulazaeste oenzimcapabilshidrolizezelegturile(14)glicozidiceexistentencelulozcuformareade celobiozicelodextrine(structurioligoglucidiceasemntoarestructuralcelulozei). Celulazaesteoenzimspecificmicroorganismelor,ntlnitnspeciallacelecetriescpemedii bogatenceluloz.Microoganismelesimbiontedintubuldigestivalrumegtoarelorsaualtermitelor suntexempledesintetizatoridecelulaz. Procesuldehidrolizallanurilor(14)glucanicedincelulozesteunullentdatfiindnalta mpachetarealanurilorcuajutorullegturilordehidrogenceeacefacecaaccesibilitateapunctelor dehidrolizctresitusulactivalenzimeisfieredus.

59

Seconsiderccelulazaestedefaptuncomplexenzimaticcucelpuindoucomponente:oenzim C1careacioneazasupracelulozeinativeipecareodescompunenunitimaimiciioenzimCx carehidrolizeazlanurile(14)glucanicecuformareadelanuricelobiozicedediferitelungimi. Inulazahidrolizeazlanurilediferiilorfructani. Degradareachitinei,poliglucidcuimportanmarenlumeavie,esterealizatdectrechitinaz.

CH2OH O

CH2OH O O

CH2OH O O

NHCOCH3 chitina

NHCOCH3 n H2O chitinaza

NHCOCH3

CH2OH O

CH2OH O O

CH2OH O O

CH2OH O +

NHCOCH3

NHCOCH3 n-1

NHCOCH3

NHCOCH3 N-acetilglucozamina

Demareinteresattnaturalctitiinificidediagnosticsuntenzimeleceintervinndegradarea poliglucidelordetipacidhialuronic(careesteunglicozaminoglican)largrspnditnstructura esuturilorconjunctiveinunumai.DinaceastfamiliegenericnumitHIALURONIDAZEfacparte enzimecunoscutesubnumeledecondroitinaz,hialuronidaz,hialuronoglucozidaz.Reacia catalizatdeacesteenzimeesteunadehidrolizaleatoriealegturilor(14)glicozidicedintreN acetilglucozaminiacidulDglucuronicdinmoleculaaciduluihialuronic.Catalizeazdeasemenea ihidrolizalegturilor(14)glicozidicedintreNacetilgalactozaminsauNacetilgalactozamin sulfatiacidulDglucuronicdincondroitinsaucondroitin4(6)sulfatsaudindermatan.

COOH O 1

CH2OH O 3 O

COOH O O 1

CH2OH O 3 O

NHCOCH3 acid hialuronic hialuronidaza H 2O

NHCOCH3

COOH O 1

CH2OH O 3 O

COOH O O 1

CH2OH O 3 O

+ resturi de acid hialuronic

NHCOCH3

NHCOCH3

Lizozimulesteoenzimcuefectbactericiddingranulaiileprimareisecundarealeneutrofilelor. Esteomuramidazcationicmic(14,5kD):atacmureinadinperetelebacterian,prinscindarea legturilorglicozidice(14)dincatenelepolizaharidicealemureinei,dintreresturiledeN acetilglucozaminiacidulNacetilmuramicirezultdizaharidealctuitedinNacetilglucozamini acidNacetilmuramic,lacaresepstreazataatecatenelepeptidice.Dupdistrugereastructuriide 60

rezistenapereteluicelular,celulabacterianaflatntrunmediuneprotejatosmotic,selizeaz. Macrofagelesecretcantitimaridelizozimildepoziteazngranulaiilecitoplasmatice,spre deosebiredecelelaltetipuricarelsecretpemsurcelsintetizeaz. Lizozimulsegsetengranulaiileneutrofilelor,macrofagelor,nceluleleepitelialealeglandelor exocrine.Macrofagelesecretconstitutivlizozimul,darratasintezeicretenmacrofageleactivate. NeutrofileleicelulelePanethdepoziteazlizozimulngranulaiilecitoplasmatice. EfectulliticallizozimuluisaevideniatasuprapereteluicelulardeMicrococcuslysodeikticus,lacare mureinareprezintcirca80%dinconinutulstructuriiparietale.Aciunealizozimuluiestemaipuin eficientasuprapereteluibacteriilorGramnegativeidevineposibilduptratamentulcelulelorcu unamestecgeneratorderadicaliactivi(acidascorbic,H2O2). Lizozimulareiefectbacteriostaticprinperturbareafenomenelordeoxidoreducerebacteriani blocheazproceseledecretereidiviziune.Mediulaciddinvacuoladefagocitozareefect bactericid.ValoareapHscadenctevaminute,datoritproduceriiaciduluilacticprinmetabolizarea anaerobaglucozei.LapHacidseactiveazhidrolazeleacidedingranulaii. Lizozimuldinsecreiilelacrimaleidinaltesecreiialeorganismuluiumanareunrolbactericidmenit sprotejeze. glucuronidazaesteoexoglicozidazcarescindeazresturideacidglucuroniciacididuronicdela capetelenereductoarealetetraglucidelorsaudiferitelorpoliglucidececoninacesteresturicumar fidermatansulfatul,condroitinsulfatul,acidulhialuronic.Estelocalizatnlizozomiicti microzomiicelulelormajoritiimamiferelor. Dacetilhexozaminidazaestetotoexoglicozidazprezentnmulteesuturianimale.Eacliveaz legturiglicozidicedintreNacetilglucozaminiNacetilgalactozamindelacapetele nereductoarealeheteropoliglucidelor.Substrateleacesteienzimeincludgangliozideleicondroitin sulfaii,acidulhialuronicidermatansulfaiiicheratansulfaiiIiII. Degradareaoligogucidelorrezultatecaurmareaaciuniienzimelorenumeratemaisuspnla monoglucideliberesefacecuajutorulaltorenzimedintrecarevomaminti: 1.glucozidaza(maltaza)carescindeazlegtura(14)glicozidicnDglucopiranozide, inclusivmaltoz.Rezultdintromoleculdemaltoz2moleculedeDglucopiranoz.Sentlnete nsemine,salivaiintestinulmamiferelor,plantesuperioareiciuperci,bacterii. 2.galactozidaza(lactaza)carescindeazlegtura(14)galactozidicdinlactozcuformarea uneimoleculedeDgalactopiranoziDglucopiranoz.
CH 2OH O O OH
-lactoza

CH 2OH O lactaza

CH2OH O OH
+

CH 2OH O

OH
-D-galactoza Glucoza

H 2O

3.fructofuranozidaza(zaharazasauinvertaza)carescindeazlegturaglicozidicdintreatomul decarboncunumrul2almoleculeidefructoziatomuldecarboncunumrul1dinmolecula glucozei.Estelargrspnditladrojdii,plantesuperioareinsucuriledigestivelaanimale.

61


CH 2OH O

CH 2OH CH2OH

O CH2OH

zaharaza

CH2OH

+
OH D-fructoza CH2OH glucoza OH

O zaharoza

H2O

4.glucozidaza(celobiazasaugeniobiaza)scindeazlegturile(14)glicozidicedindiferitele dextrinedaridinsubstrateglicozidicecustructurimaicomplicate(cumarfiglicozidele cianogenetice).

62