Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
Metabolism=totalitateatransformrilorchimicelacaresuntsupusesubstanelenorganismul
viu. Maimultcuroldidacticicuscopuluneimaibunesistematizriputemdiscernedoumaridireciide transformareasubstanelornorganismulviu:anabolismulicatabolismul.Deise ntreptrundmereu,fiinddoveditcelementedincilecatabolicepotfioricndutilizatede 1
organismpentrucileanaboliceiinvers,acestedouaspectealemetabolismuluisunt,ngeneral, prezentateistudiateseparat.
Lucrul(mecanic)estedefinitcatransferuldeenergiecarearelocdelauncorplaaltulsaudintr unlocnaltul.
Energiautilizatdeorganismeleviiestereprezentatsubmaimulteforme:lumin,electricitate, cldur.Privitcaformdemanifestareenergiapoatefisimpluclasificatcaenergiecineticsau potenial. Energiacineticesteaceaenergieexistentlaunobiectnmicare:opicturdeapncdere, muchiulncontracie,cromozomiinmicaredealungulfibrelorfusuluidediviziunentimpul mitozei(casdmdoarctevaexemple).Energiacineticexistnmulteforme,inclusivenergia termicsaucldura(micareaaleatorieaparticulelor),energiamecanic(micareacoordonata particulelor),energiaelectromagnetic(deplasareaundeielectromagnetice)ienergiaelectric (deplasareaparticulelorcusarcinelectric).Energiapotenialesteaceaenergiestocat/ depozitat.Unobiectposedenergiepotenialprinprismapoziieisalefadeuncmpdeforede atraciesauderespingere.Energiapotenialmbracieadiferiteforme:energie(potenial) gravitaional(atraciadintredouobiecte),energie(potenial)chimic(atracianoruluielectronic ntrolegturchimic). Dacvomanalizacazulparticularalenergieipotenialepecareodeineunsportivcarefacesrituri napdelatrambulinvomobservacenergiapotenialasaestedatoratatracieigravitaionale exercitatentresportiviPmnt(figura1).Deasemeneavomobservacaceaenergiepoteniala aprutcaurmarealucruluimecanicefectuatdemusculaturasportivuluipentruaurcalanivelulde undesevaefectuasritura(saulucrulmecanicefectuatdeliftulcarelaurcatpesportivla respectivulnivel).nacestfelenergianecesarlucruluimecanicefectuatafosttransferatsubforma uneienergiipotenialectreunaltobiectsaulocaie.Srituraimplicautomatcderea.ntimpul cderiienergiapotenialvaficonvertitnenergiecinetic.Esteunlucruimportantdeobservatc energiaafostconvertitndiferiteforme,darnuafostniciodatcreatsaudistrus. 2
Putemp presupuneau utomatcen nergiadeleg gtur(energ gianecesarruperiiacele eilegturi)esteo msurastabilitiirelativeares spectiveileg gturi.Prinurmareolegturcuoen nergiealegturii t de 799kJ/m molestedecirca c 2orima aistabildec ctolegturcuoenergieelegturiiidedoar391 1kJ/mol. ntroreaciechimicenergialeg gturilorchim micepreexistentelareac ctanitrebuie edepitsp prease elelegturichimiceiapermite p form marealegtur rilorchimicedinproduiiidereacie,proces rupeace cevaave eacarezulta atdegajareadeenergie. Dacvomfa aceodiagram maenergiil orpoteniale ecares nearate emodificrile eenergieichimicepoten ialecareaulocntimpu uluneireaciiichimicevom observacreactaniisuntplasaipediagram mlapoziiile ecorespunztoarestabiliitiirelative ea legturilorchimicedin d compoziialor(figura 2a).
capabiledeacestprocessuntbazatepeabsorbiaenergieiradiaiilorelectromagneticedinspectrul vizibil.Pedealtparteuneleorganismevii(licuriciiciuperciluminescente)eliminenergiarezultat dinunelereaciisubformderadiaieelectromagneticdinspectrulvizibil.Celmaiadeseans clduraesteformapecareontlnimcamodalitatedeeliminareaenergiei. nciudafaptuluicnmodnormalreaciileartrebuissedesfoarensensulobineriidecompui custabilitatemaimare,reaciiexoterme,existfoartemulteexemple(maicuseamnlumeavie) carearatcreaciileaulocinsensulcellalt,alobineriidecompuicuinstabilitatemaimare, reaciiendoterme. Studiiledetermodinamicaratcnudoarenergiadetermindesfurareaspontanaunuiproces (unprocescarevaavealocfrasistencontinudinafar).Oproprietatefizic,entropia,estecea caretrebuieavutnvedere.
Entropia,simbolizatcuS,esteomsuragraduluidedezordine(fienceeacepriveteenergia,
fienceeacepriveteobiectele). Entropiaestedirectproporionalcugraduldedezordine.Unexempludecretereagraduluide dezordinei,implicit,aentropieiestedesfacereaunuipachetdecriilsareaacestuiascadliber jos. ncazulreaciilorchimiceentropiavacreteatuncicndreactaniisolizisetransformnproduide reacielichizisaugazoi,cndreactaniilichizisetransformnproduidereaciegazoi,unnumr micdemoleculedereactantsevortransformantrunnumrmaimaredemoleculeprodusde reacie,moleculecugradmaredecomplexitateprinreaciesevorconvertinmoleculesimple. Universulfavorizeazcretereaentropiei,nsceidoifactori,energiaientropiatrebuieavuin vederempreunatuncicndsediscutdespreposibilitateacaunprocesfizicsauchimicsse desfoarenmodspontan.Astfelreaciileexotermeicareinduccretereaentropieivoravealoc spontandeoareceambiifactoriimplicaisuntfavorabili.nopoziiecuaceastsituaiereaciile endotermeidincarevorrezultaproduidereaciecugradredusdeentropienuvoravealoc spontan.Celelaltedousituaiiposibile,reaciileendotermecucretereaentropieiireaciile exotermecuscdereaentropiei,vordepindedetemperaturalacareauloc(tabelul2). Tabelul2.Modificrispontaneinespontane. Cretereaentropiei (favorizat) Scdereaentropiei (defavorizat) Reacieexoterm (favorizat) Spontanlaorice temperatur Spontanlatemperaturi joase Nespontanlatemperaturi nalte Reacieendoterm(defavorizat) Spontanlatemperaturinalte Nespontanlatemperaturijoase Nespontanindiferentdetemperatur Schimbrilevoravealocdoarcuaportnet deenergie
Energia liber
Relaiadintrediferenadeenergie,modificareaentropieiitemperaturadereacieafost descoperitdectrefizicianulamericanJosiahWillardGibbssprefinalulsecoluluialXIXlea.Relaia aceastanepermitesfacemprediciinceeacepriveteposibilitateauneireaciideaavealoc spontansaunu.Gibbsafcutdistinciadintreenergieienergialiber. 5
Energialiber(sauenergialiberGibbs)esteaceaenergiecarepoatefifolositpentrulucru
(mecanic)util. ModificareaenergieilibereGibbssenoteazcuG=GfinalGiniial.ModificrilesuntspontanedacG estenegativ.OmodificarecaracterizatdeGnegativ(spontan)areunechivalentcusensinvers icuGpozitiv.Deaceea,oreaciecuGnegativicareeste,prinurmare,spontanvaavea reaciainverscuGpozitiviaceastavafinespontan.Realizareaaceleireaciiinversepresupune utilizareadeenergieliberobinutdintroaltschimbarecaresprezinteGnegativ.Maimult, transformareaenergieidintroformnaltaimplicpierderideenergiesubformdecldur. Toatetransformriledinuniverssuntguvernatedeacestmoddedesfurare.Dinacestmotivtoate transformrileducdirectsauindirectlacretereaentropieiuniversului.Aceastaestealdoilea principiualtermodinamicii.
Aldoileaprincipiualtermodinamicii
Entropiadinuniverscretecufiecareschimbarecareareloc. Matematic,S>0. Organismeleviiparanclcaprincipiulaldoileaaltermodinamicii.Proceseleanaboliceaucarezultat formareadestructurimolecularenaltordonate,antientropice,plecndusedelaelementerelativ simple,cuentropiemare.Lanivelindividualsausupraindividualorganismeleviiconstruiescstructuri neviidarcuoorganizarenalt.AcestemodificriimpliccretereaenergieilibereGibbs.Toate acesteschimbrigeneratedeorganismeleviisunt,naparen,ncontradiciecuprincipiulaldoilea altermodinamicii,deoarecerezultatullorarcauzaordonareauniversului,fiedoariunpic. Pedealtpartestudiileauartatcoricemicordonareindusdeorganismelevii,porninddela proceseleanaboliceiterminndcustructurilenevii(naltorganizate)construitedeorganismelevii, aucarezultatocretereimaimareaentropieiprinintermediulproceselorcatabolicecuplatesaual celorgeneratoaredeenergienecesareconstruiriidestructurinaltorganizatediverse.Unexemplu simpluarfiuncopilcareducecumnaspregurunfruct.Micareaaceastanupoateavealoc spontan.Cretereadeenergiepotenial(ridicareanlimiilacaresevagsinfinalfructul)i scdereadeenergieliberGibbs(prinpoziionareafructuluilaunnivelmaiordonat)estecuplatcu maimulteprocesefiziologiceibiochimicegeneratoaredeentropie(consumuldeATPiconversiasa nmoleculemaisimpleplusocantitatedeenergieliberutilizabilpentrugenerareagndului, transmitereaimpulsuluinervos,contraciamuscularetc.).Organismulviuobineaceaenergieliber Gibbsnecesarprinconversiamoleculelornaltorganizatedinfruct(idinoricealtealimente)n moleculecugradredusdestructurare(CO2iH2O)irecuperareauneipriaenergieisubforma legturilormacroergicedinmoleculadeATP.Pertotal,graduldeordineasociatcuridicareafructului estemaimicdectgraduldeentropieindusdeproceselenecesareridicriifructului.Carezultat entropiauniversuluicrete. Oanalizatentamoduluicum,aparent,organismeleviinurespectprincipiulaldoileaal termodinamiciiaratc,defapt,laniveluluniversuluicantreg,ordineadeaiciarecarezultatnalt parteoimaimaredezordine,ocretereaniveluluientropieiuniversului. Termeniiendotermiexotermsuntutilizaipentruadescrieschimbrileenergeticetotalecareauloc ntroreaciechimic.DescriereaschimbrilordeenergieliberGibbscareaulocnaceeaireacie chimicsefaceutilizndtermeniiexergoniciendergonic.Oreacieestecatalogatcaexergonic dacaestespontaniprinurmareacompaniatdeoreducereaenergieilibereGibbs(Geste negativ).nmodopusoreacieestecatalogatcafiindendergonicdacanuestespontaniareloc cucretereaenergieilibereGibbs(Gestepozitiv).ValoareaGoferomsuracantitiide energielibernecesarpentrurealizarearespectiveireacii. 6
DacadiscutmdesprecazulparticularicompletgeneralizatalobineriiglucozeidinCO2iH2Oi reversulacestuia,oxidareaglucozeivomavea:
O O P OO
O P OO-
N
1'
N
2'
O
3'
H2C
4'
P O-
H2O H+ 1
OH
OH
H2O H+ 2
O Adenozina
ADP
O O P O-
O O P OO O-
P O-
O-
Adenozina
AMP
+
O P O-
+
O
O P OOH2O H+
Fosfat Pi
HO
O-
HO
Pirofosfat (PPi)
P OO
pirofosfataza
HO
P O-
Fosfat Pi
AMP + H2O
Adenozina + Pi
13 29
Civafactoricontribuielanivelulridicatalenergieiliberedisponibilizatprinhidrolizalegturilor fosfoanhidridicedinATP: Respingereaelectrostaticlanivelulatomilordeoxigencusarcinnegativdinresturile fosfat(lanivelcelularnscomplexareacuioniideMg2+ducelaoparialneutralizarea acestorsarcinicarearecarezultatoreducereavariaieiGhidroliz) Produiidehidroliz,fiecvorbimdeATPifosfatulanorganicsaudeAMPipirofosfatul,au omultmaibunasolubilitatenmediulapos.Ioniidizolvaisuntautomatmultmaibineizolai ntreei.Scderearespingeriicareaparentregruprilefosfatfavorizeazhidroliza. ProduiidehidrolizauostabilitatemultmaimaredectceaaATP.Electroniidelaatomiide oxigenterminalidinradicaliifosfatsuntmultmaidelocalizaidectceidinatomiideoxigen implicainlegturilefosfoanhidridice.HidrolizaATPcuformareadeADPifosfatanorganic ducelanlocuireaunuiatomdeoxigenaflatntropuntefosfoanhidridiccudoiatomide oxigenterminali.
OH N H2N O CH2 N
O O P
O-
O O P
O-
O O P O-
N O
OH
guanozintrifosfat
OH
Pentrucitidin,citidintrifosfatul
NH2 N O O O P
O-
O O P
O-
O O P OO CH2 O
OH
citidintrifosfat
OH
Pentruuracil,uridintrifosfatul
O HN O O O P
O-
O O P
O-
O O P OO CH2 O
uridintrifosfat
OH
OH
nafaranucleozidtrifosfailornsistemeleviimaiexistialicompuimacroergici:acilfosfai, enolfosfai,fosfoguanidinele,acetilfosfatul.
O H3C C
O O P OO
O- acetilfosfat
O C H C
P
-
Oacid 1,3-bisfosfogliceric
O OH O P
CH2 O
O-
O C C
OH O
CH2
P O-
O-
acid fosfoenolpiruvic
10
H N X
O P OO-
CH3 H2C
HH2C CH2
COO
fosfoarginina (argininfosfat) )
X este R este
CH2
CH NH3+
COOC
Combina aiilemacroe ergicealeaci iduluifosforiicprezintocapacitatepronun p atd detransferal radicalul luifosfatctre t altemolecule.Prezint tinteresfap ptulcfunciedepoten ialuldetransferal 11
restuluifosfatATPareopoziieintermediarnseriamoleculelorfosforilateimportante.Aceast poziieintermediarpermiteATPsfuncionezefoarteeficientcatransportoralradicaluluifosfat. Acestfaptpermitedeasemeneacatransferulradicaluluifosfatssefacspontandelacompuii situaimaisuspescaraenergeticctreADPideasemeneacatransferulsaibloclafeldelaATP ctrecompuiiaflaisubelnscaraenergetic. AsemeneaprecursoriaflaienergeticsubATPsunt:glucoza,fructoza,glicerolul. AstfelATPestedonorulprincipaldeenergieliberutilizatnsistemelebiologice.RezervadeATPa uneiceluleasigurcerineleenergeticepentru12minuteapoifiindnevoiederemprosptareprin intermediulcilorcatabolicecuutilizareasubstanelorsubstratcorespunztoare. RataderemprosptareaATP(turnoverul)estefoarterapiddardepindenmoddeosebitde activitateametabolicacelulei.
13
14
15
Poliglucidelesuntformatedintreisaumaim multeunitimonoglucidi iceunitentr reeleprinlegturi glicozidic cedeacelaifelsaudediferite d tipurii.Oclasificar remaiveche edistingeala anivelulcons siderat astzialpoliglucidelo orcaexistn ndoligoglucid dele(cupnla10unitimonogluciidice)iapoi i uzisecumaimultde10 unitimono oglucidice. poliglucidelepropriu
anumeroasegruprihiidroxilicon nfiguraiamo olecularna ansamblulei permito Prezenanmolecul naltreactivitateaacestor a grupriceeacef facecaglucid delesfieuormodificab bilepringref farea altorgru upefunciona alesau/iaunor u catene laterale.
16
censtructur ramoleculelo ormonogluc cidelorexist atomideca arboncusub bstituenidif ferii Deoarec (atomid decarbonch hirali)imole eculelensin nesuntmoleculechiraleadic a potrot tiplanullum minii polarizat teisepotprezenta p sub formaadoi izomerioptici,DiL. Cazulcelmaisimpluestecelalgliceraldehide eicareareunsinguratomdecarbon nchiralipot texista doardou umodeledeconfiguraieaizomeril orsioptici. .
Lamolec culelecumaimuliatomidecarbona useriaLa asimetrici,apartenenalaseriaDsau monoglu ucideloreste edatdecon nfiguraiaato omuluideca arbonchiralcel c maidep rtatdegruparea carbonilicsauceton nic(atomuldecarbonc cunumrulde d ordinecel maimare).
H C H HO H H C C C C OH H OH OH H HO H H HO H HO O O C C C C C H OH H H H
CH2OH
CH2OH L-glucoza
D-gluco oza
nmodn normalmonoglucidelere egsitenna aturaparin nserieiD. a,neregsit alcomparati Lglucoza nnatur,prezint p conf figuraieopu uslafiecare ecentruchira ivcuD glucozae existentnnatur.
17
3. Biosinteza glucidelor
3.1. Fotosinteza
Consideraii privind radiaiile electromagnetice Soareleemiteenergiesubformderadiaiielectromagnetice.Acesteasepropagprinspaiusub formdualdeundicorpusculioparte(mic)alorajungepePmnt.Cuoarecareaproximaie discutmdespre1.5x1022kJcareajungpeTerrazilnic.Dinaceastcantitateimensdeenergiecirca 1%esteabsorbiticonvertitdectreorganismelefotosintetizatoare. Radiaiileelectromagneticeemisedesoareacopertotspectruldelungimideund.Dinacest spectrularg,doarofereastrdestuldengustestereprezentatdespectrulvizibil(acelelungimide undlacaresuntsensibilesistemeledefotorecepiealeorganismelorvii). Cuctlungimeadeundestemaimiccuattenergiaundeirespectiveestemaimare(valoarea extremradiaiilegamma). Radiaialuminoasprezintdualitateundcorpusculntructuneleproprietisunttipicedeund, altelesunttipicedeelementmaterialdiscret.Interaciunearadiaieiluminoasecumateriaarelocn pachetediscretedeenergienumitefotoni.Energiaunuifotonestedirectproporionalcufrecvena radiaieicreiaiaparine.Conformteorieicuanticeenergiaradiantpoatefiabsorbitsauemis doarncantitispecificenumitecuante.Absorbiauneicuantedeenergiedectreomoleculduce latrecereaeidinstareadeenergieminimlaostareenergeticsuperioar,unorbitalenergeticmai nalt.Pentrucaspoatabsorbienergieestenecesarcaaceacantitatedeenergiesfieexactcea existentntreceledoustrienergeticealemoleculei.Lamoleculelecomplexe(cazulclorofilelori alcarotenilor)existmaimultelungimideund(zonaalbastruvioleticearoie)lacareaceste moleculeabsorbformndspectrulcaracteristicalfiecreimolecule.Toateacelelungimideund neabsorbitedeclorofilformeazculoareapecareoputemnoivedea.Deaceeaaceastaapare verde,culoareapredominantnregnulvegetal. Moleculelecapabilesabsoarbenergiafotonilorsuntcaracterizatedeprezenanstructuralora lanurilorlungideatomidecarbon,adesealegaintreeiprinlegturidubleconjugate,precumi prezenamultiplelorinelealctuiteexclusivdinatomidecarbonsaucareauialtespeciiatomice. Aceaststructurarepermiteouoarmigrareaelectronilordelaniveleleenergeticeinferioarectre celesuperioare. Deasemeneaodatceunelectronafostexcitatrevenirealastareainiialdestabilitatemaximse poatefacepediferiteci: 1. 2. 3. 4. revenireneradiant emitereadefluorescen transferrezonantdeenergie procesedeoxidoreducere
18
ncazult transferuluirezonantdeenergie,ene ergiadeexci itaieestetransferatmo oleculelorad diacente prininte eraciunintreorbitaliimoleculariaia acestora.Omolecul m vec cinuneiaex xcitatepoate eabsorbi fotonule emisdacac cestaestelalungimeade eundcorespunztoare. Procesel ledeoxidoreducere r pre esupuntrans sferulelectro onuluiexcitat tlaomolecu ulnvecinat. Electronulexcitatest tesituatpeun u orbitalele ectronicneo ocupat,cuen nergiemare,ideaceeapoatefi datuneialtemolecule.Moleculele M cu uelectroniex xcitaisuntagen a ireduc torifoarte uorced poatefioalt puternic ci.Revenirealastareainiialseface prinreducer reauneimol lecule(carep t molecul identicsauomolecul convenient tdinmediu ulimediatapropiatalmo oleculeiexcitate). .Transferulrezonant Fotosint tezaestebaz zatpemodeleledetran nsferrezona antideoxid doreducere. r joacun nroldeosebit tnabsorbiaenergieilu uminoasedectrepigmeniiaccesori iitrecereaeictre molecule eledeclorof filntimpce eproceseler redoxsuntim mplicatenfo ormareaoxig genuluii/sa aua + NADPH+ +H . Molecule i structu uri celulare e implicate n procesu ul de fotosin ntez Procesul lfotosintetic csedesfoa arnstructu urinaltspecializatedininteriorulcel ulei.Esteunfapt cunoscutiacceptatclabazaprocesuluide efotosintezstaumolecu ulespecializa atenprelua area energieifotonuluiiconversiaac cesteiaprinr realizareade elegturichimicedetipm macroergicsau s obinere eadeechivalenireductori t cevorfi utilizateapo oidectrece elulpentrus sintezadifer ritelor substane. Molecul lelespecializ zatenprelua areaenergie eifotonilorsu untclorofilel le.Alturide eacesteasegsesci altesubs stanecurolajuttor:ca aroteniifosf sfolipoprotei ine. Clorofile elesuntmagneziuporfiri inederivate biogeneticde d laprotopo orfirinaIX.S Structuracen ntral esteuni ineltetrapiro olic.ncazulclorofilelora aceaststruc cturestepa articularizat prinexisten naunui inelciclo opentanicfuz zionatcunucleulpirolic III.Atomulneionizat n demagneziues stefixatprin2 covalenei2legtu uricoordinati ivedecei4a atomideazo otaicelor4nuclee n pirolic ce.
R1 R2
H3C
I N N
II
R3
Mg
N H3C IV
N III CH3
R4 O CH3 O
O
clorofila - form mula generala
CH CH CH
CH3
CH2
CH H3 CH H3 CH H3
CH CH3
CH2 CH2
19
C2 D BacterioclorofilaA
CH
CH2
CH3
CH
CH2
CH2
CH3 CH3
CH
CH
COOH
X X,GERANIOL
CH
CH3
CH3
O C CH3
CH2
BacterioclorofilaB
O C CH3
CH3
CH2
CH3
ntabeluldemaisusXesterestuldeacidpropionicesterificatcufitol.
nclorofileleA,B,DilabacterioclorofilenucleulpirolicIVesteparialredus. LaclorofilaCavemodubllegturnacelainucleupirolicIV. Grupareacarboxildelanucleulciclopentanicesteesterificatcumetanol.Restuldeacidpropionicde lanucleulpirolicIVesteesterificatcualcooltetraizoprenicsauesteliber.LaclorofileleA,B,Dprecum ilabacterioclorofilaBalcoolulestefitolul,ntimpcelabacterioclorofilaCarputeafifitolulsau geranioluldependentdespeciadebacterii. ClorofileleC1siC2aurestuldeacidpropionicnlocuitcuunrestneesterificatdeacidacrilic. FotoreceptorulprincipalncloroplasteleplantelorverziesteclorofilaAalcreiconinutdepetede 3oripecelalclorofileiB.Ladiatomee,algebrune,aufostdescoperiteclorofileleC. nalgeleroiiesteprezentclorofilaD. BacteriilefotosintetizanteconinbacterioclorofileleAiB. IradiereacloroplastelorproduceofluorescenuormsurabilaclorofileiAntimpcepentru celelalteformedeclorofil,carotenoideialipigmeninuseobservacestfenomen.Deaicise poatededucectoateacestesubstaneservesc,nprincipal,capigmeniauxiliaricareabsorb energialuminoasiotransmiteficientclorofileiA. PelngclorofileleB,C,Dntrepigmeniiauxiliariceimaiimportanisenumrcaroteniidintrecare principalulderivatnmajoritateaplantelorestecarotenul. Bacteriilesulfuroaseverziconincaroten. ncloroplasteleplantelorialgelorverzisentlnescdiferitecarotenoideoxigenatentrecare predominluteina,violaxantina,neoxantina.
20
N H
N H
N ficoeritrobilina
N H
N H
N H
N ficocianobilina
N H
ninteriorulcloroplastelor(sauncromatofori)clorofileleibacterioclorofilelesuntasociatecu proteinespecificerezultndcomplexenumitecromoproteinesaucromoplastine. Bacteriilefotosintetizanteaucasediupentruprocesuldefotosintezcromatoforiceconin bacterioclorofil,maricantitidecaroteniifosfolipoproteine,toatensoitedeenzimelenecesare procesului. Cianofitele(algealbastreverzi)audoipigmenipecarenuimaintlnimlaalteprocariotefiind specificieucariotelorianumeclorofilaAicarotenul. Laeucariote,attlaalgectilaplantelesuperioare,ntlnimorganitecelularespecializatenumite cloroplaste.Datfiindcompoziiaistructuracloroplastuluidariconsideraiileevolutivesepoate lesneobservacncazulcloroplasteloravemdeafacecuorganitecuoautonomieconsiderabil. Cloroplastelesuntdotatecumembranexternasemntoaremembraneicelulare.Straturile acesteimembraneaupermeabilitidiferite,ceaexternfoartepermeabiliceainternvirtual impermeabil.ninteriorgsimstroma.nstromagsimADN,ARNiribozomiimplicainbiosinteza proteinelorpropriicloroplastuluidarienzimelenecesareprocesuluidebiosintezspecific fotosintezei.Stromanconjoarstructurimembranarenumitetilacoideaezatenstivenumite grana.Tilacoidelesuntunitentreeleprinspaiimembranare.Saconstatatcimembranele tilacoidelorsuntdetipdublustrat.Particularestecompoziiaproteicaacestormembrane tilacoidice,existndmulteproteinespecifice.Lipideledinmembranatilacoiduluiauieleo compoziieaparteconinnddoar10%fosfolipidei10%sulfochinovozildiacilgliceroliirestulfiind aproapeexclusivconstituitedindigalactozildiacilgliceroli.Aciziigraidinstructuraacestorlipide complexesuntacizigraicucatenlungdeatomidecarbonicuungraddenesaturarefoartemare ceeaceleconferofluiditatedeosebit,caracteristicceocaptimembraneletilacoidelor.
21
Mecanismul fotosintezei
6CO2 + 6H2O
clorofila
C6H12O6 + 6O2
C6H12O6indicsubstanedingrupulmonoglucidelor. Unele bacterii folosesc alt donor de hidrogen (H2A) pentru reducerea dioxidului de carbon. Acestdonordehidrogenpoatefihidrogenul,hidrogenulsulfurat,tiosulfatul,izopropanolul. ngeneralprocesuldefotosintezpoatefiredatprinecuaia:
lumina
CO2 + 2H2A
clorofila
(CH2O) + 2A + H2O
n 1937 Robert Hill a descoperit c prin iluminarea cloroplastelor n absena total a dioxidului de carbon i n prezena unui acceptor artificial de electroni [Fe(CN)6]3 fericianur ele degaj oxigen concomitent cu reducerea acceptorului la ferocianur [Fe(CN)6]4.PrinacestexperimentHilldemonstreazcadioxiduldecarbonnuparticipdirect nreaciadegenerareaoxigenului. n 1941 S. Rubeni M. Kameh au demonstrat cu izotopul 18O c sursa de oxigen degajat n fotosintezesteapa.
H218O + CO2
lumina clorofila
18O
+ (CH2O)
Experienele menionate i altele asemntoare au condus la concluzia c mecanismul fotosintezei,princareenergiaelectromagneticesteconvertitnenergialegturiichimicea substanelorsintetizate,cuprindedoufazedistincte. 1. reacii dependente de lumin (fotochimice) energia luminoas este utilizat pentru oxidarea apei (sau reductorului H2A) concomitent cu generarea de ATP i NADPH+H+. 2. reacii la ntuneric sau, mai corect, independente de prezena luminii. Utilizeaz ATP i NADPH+H+ pentru a realiza biosinteza glucidelor i ulterior i altor compui biochimicidindioxiddecarboniap.
fotonului de ctre complexul anten captatoare de lumin. Celelalte sunt doar dependente deacestprocesdarnudepinddirectdeexistenaluminii. Pentru c termenii clasici de reacii la lumin i reacii la ntuneric sunt de mult timp ncetenite i utilizate pentru descrierea procesului de fotosintez le vom utiliza i noi n celeceurmeaz.
Reacii dependente de lumin n fotosintez Mecanismul captrii energiei luminoase Pentruastocaenergiaradiaiilorluminoaseprimullucrucaretrebuierealizatestecaptareaacesteia. Captareaesterealizatdectreansamblulmoleculelordepigmenifotosinteticiasociainantena captatoaredelumin.Nutoipigmeniiauroldecaptatoridefotoni.Darmpreun,ansamblul molecularalanteneiareroluldeacolecta,concentraitransferaenergiactrecentruldereaciedin ansambluundeenergiavaficonvertit. Absorbiafotonilor(captareaacestora)creeazostarespecial,excitat,lanivelulansamblului antencaptatoaredelumin.Stareaaceastadeexcitaresevamaterializa,nceledinurm,prin apariiauneisarciniliberelanivelulcentruluidereacie. Estederemarcatfaptulcsistemulantencaptatoaredeluminnuimplicnfuncionareniciunfel deevenimentchimiccidoarevenimentefizicedetransferrezonantcarepresupunmigrareastriide excitaredelaomolecullaalta.Majoritateamoleculelordepigmentsuntlegatedeproteine specificeiformeazasocierisupramolecularenaltspecifice.nantenelecaptatoaredelumin regsimalturideclorofilaimoleculedecaroteniichiarmoleculealepigmenilorculan tetrapirolicdeschis. Sistemulacestadetipantencaptatoaredeenergieareiunaranjamentspaialasemntorunei plniicupigmeniiaflailaextremiticapabilisabsoarbfotonicuenergiemaimaredectsunt capabilipigmeniidinzonacentral.Transferulenergieiabsorbiteestecelcarerealizeaz uniformizareaenergiilorsprevalorimaimiciisimultanarelocconcentrareaenergiilori direcionarealorsprecentrulreactivcareesteplasatnparteainternaplniei. Sistemulanteneicaptatoaredeenergiecreteieficienacaptriienergieisolarecareeste,dealtfel, oformdiluatdeenergie.Pedealtparteconglomeratulmolecularalanteneicaptatoarede energieareiroluldeaasigurareglareaprocesuluiiproteciampotrivachiaraenergieifotonilor careareipotenialdistructiv. Transformareaefectivaenergieipotenialecaracteristicestriideexcitareareloc(aacumam precizatmaidevreme)ncentruldereaciealantenei.Acestaesteuncomplexproteiccompusdin maimultesubunitiisegseteinclusnmembranatilacoidului.Alturideproteineexistasociate iconcurlafuncionalitatemoleculedeclorofildarialicofactoridetransferalelectronilorcum suntchinoneleiclusterelefiersulf,daripolipeptidehidrofobecaretraverseazmembrana tilacoiduluidemaimulteorintrefaastromalicealumenal. Centruldereaciepropriuzisareundimerspecialdeclorofiliacestaestedonorulprimarde electronialcascadeidetransferaelectronilor.Deimonomeriiacestuidimerdeclorofilsuntidentici structuralcumoleculeledeclorofildinantenacaptatoare,moduldempachetarecucelelalte elementealecentruluidereacieleconferproprietispeciale.Pasulfinalaltransferuluienergiei carearelocnantenacaptatoaredeluminestetransferulenergieictreacestdimercuobinerea unuidimerexcitatelectronic.Stareaexcitatdimeruluideclorofildincentruldereacieesteun reductorfoarteputerniccapabilstransfereelectronulexcitatctreunacceptorcorespunztor devenindastfeluncation. 23
Acestprocesdetransferelectronicesteprimareacieafotosintezei.nacestmodarelocconversia energieifotonuluictreenergiachimic(potenialredox)aacceptoruluiredus.Acestaesteiunul dintrecelemaidelicatemomentedeoareceexistposibilitateatransferuluielectronuluinapoictre dimerulcationiastfelnusarctigaenergiecitoataarficonvertitctreemisiidefotonicu energiemaimic(fluorescen)i/sauemisiedecldur.Sistemulevitacestpasnapoiprin cuplareaacesteireaciidetransferelectronic(deladimerulexcitatdeclorofilctreacceptorul primardeelectroni)cualtereaciisecundarefoarterapidecaresuntcompetitivefade recombinareadimeruluicuacceptorul.Acestereaciiduclaseparareaspaialasarciniinegative ctigatefadesarcinapozitivexistentlaniveluldimeruluideclorofilceeacefaceca posibilitateaderecombinaresscadcuctevaordinedemagnitudine. Rezultatulfinalestecntruntimpfoartescurt(maipuindeonanosecund)speciileoxidati redusdevinseparateprintrunspaiuechivalentcugrosimeauneimembranebiologice(circa30). Procesemailenteintervinapoiistabilizeazsuplimentarenergiastocatspreaoputeaconvertin formemultmaiuordeutilizat.Sistemulesteattdefinacordatnctnmajoritateacazurilor ctigulenergeticestedeunulaunu(unfotonabsorbitperunelectronctigat).Chiaricu pierderilederigoare,necesarepentrustabilizareasistemului,randamentulesteunulimpresionant. Principiulacestadeobinereaelectronuluiexcitatidetransferalluiprinreaciisecundaresprea realizaseparareaspaialnecesaresteunulcomuntuturorcentrelordereaciefotosinteticechiar dacdetaliileprocesuluipotvariauordelauncazlaaltul. Ovariantevolutiv,detransferciclicalelectronilor,esteceancareacceptoriisuccesiviconducn finallatransferulelectronuluiextrasnapoiladimeruldeclorofilrmasnstareadecation.nsine procesulnuesteunulcuctignetdeenergie.Dartransferulelectronuluiestecuplatcurealizarea unuiuorgradientprotonicntrefeelemembraneitilacoiduluiiacestfaptvaducelagenerarea uneicantitideATP. Cazulcelmaifamiliarestecelalorganismelorlacaretransferulesteneciclicicarefolosescapaca donoralelectronilornecesarirefaceriidimeruluideclorofildincentruldereacie.Acesteorganisme prezintdoucentredereacieseparateaparinndladousistemedeantencaptatoaredelumin separateicuproprietiuordiferitenceeaceprivetelungimeadeundpreferatpentru absorbiafotonilor.Funcionareaacestuisistemesteunadetipulunuilandetransferalelectronilor ncaresuntimplicateceledoufotosisteme,denumiteIiII,precumiomultitudinedeverigi intermediaredetransfer.ElectroniivorfiacceptainfinaldeNADP+caresevareducelauncompus stabil,utilcelulei,NADPH+H+.Simultan,protoniigeneraideoxidareaapeilaoxigenmolecular mpreuncuceitransferaicontragradientuluideconcentraie,vorfiutilizailagenerareadeATP,al doileacompusutilcelulei. FotosistemeleIiIIconinacelaitipdeclorofil,clorofilaA,difereneledelungimedeundoptim pentruabsorbiefiinddatorateconformaiilorparticularealecentrelordereaciedinaceste fotosisteme.DinacestmotivfotosistemulIestenumitiP700pentrucabsoarbeoptimlalungimea deundde700nmntimpcefotosistemulIIestenumitiP680pentrucabsoarbeoptimla lungimeadeundde680nm. Funcionarea mecanismului de generare a NADPH+H+ i ATP Reaciilelaluminncepcufotoniicarelovescmembranatilacoidului.Parteaacestoravorfiabsorbii decomplexeledetipantencaptatoaredeluminattalefotosistemuluiIctialefotosistemuluiII. Concretputemdistingetreipridistinctencadrulreaciilordependentedeluminalefotosintezei. 1. Fotoexcitareacareconstnabsobiafotonuluiitrecereaclorofileinstareexcitat.
24
2. Transferulelectronuluiexcitatcareesterealizatprinintermediuluneiseriidetransportori electronicicuplaicumembranatilacoidului.Transferulestecuplatcupompareaprotonilor prinmembranatilacoiduluicuformareaunuigradientprotonic. 3. Chemiosmoza,micareaprotonilorprincomplexulATPsintazeiconcomitentcugenerarea ATP. ProcesuldetransferalelectronilorobinuilanivelulfotosistemelorIiIIestenecicilicdeoarece electroniiextraidindimeruldeclorofildelanivelulcentruluidereaciealfotosistemuluiIIsunt nlocuiicuelectroniextraidelaapprinintermediulunuicomplexenzimaticdeoxidareaapei,iarn cazulfotosistemuluiIelectroniieliberaisuntnlocuiicuceifurnizaideplastocianinaredus.. Procesularepatruetape: A. CaptareaelectronilorprinintermediulanteneicaptatoaredeluminafotosistemuluiIIexcit nfinaldimerulP680dincentruldereaciealfotosistemuluiIIiaracestatransferun electronctreunacceptorprimar,feofitina.Electronulestemaiapoitransferatprinreacii redoxcuplatectreuntransportordeelectroniaflatlibernmembranatilacoidului.Acesta, plastochinona,preiadoielectronidelafotosistemulII(2evenimentedecaptarei expulzare)mpreuncu2protonidepesuprafaastromalamembraneitilacoiduluiise reducelaplastochinol. B. nacelaitimp,oproteinZ,asociatcufotosistemulIIisituatpepartealumenala membraneitilacoiduluirupemoleculadeapnelectroni(necesarireveniriicentruluiactival fotosistemuluiIIlastareasafundamentalspreaputeaacceptaenergiafotoniloriarelua ciclul),protoni(carevorcontribuilagradientulprotonictransmembranar)ioxigencareva prsisubformmolecularcloroplastul. ProteinaZsauMSP(ManganeseStabilisingProtein)sauansamblulenzimaticdescindarea apeiconstituentalfotosistemuluiIIconineuncluster(4ionideMn2+legaideproteine). Ioniidemanganformeazuncomplexcataliticactivnumitcomplexuldeeliberarea oxigenului(CEO)careleagdoumoleculedeappentruafacilitagenerareaoxigenului(o molecul)iducelaeliberareaa4electronii4protoni.AcestCEOfuncioneazciclicprin intermediuluneiseriidestrioxidativecareprobabilincluddiferitecombinaiialeMn3+, Mn4+,Mn5+facilitndextraciaelectroniloriprotonilordelaapieliberareafinala oxigenuluininteriorultilacoidului. C. Electroniisiprotoniistocaisubformaplastochinoluluisuntdespriilafaalumenala membraneitilacoidului,protoniifiindeliberainspaiullumenaliarelectroniifiind transferaicomplexuluidecitocromib6f.Citocromiicomplexuluicitocromicb6fformeazun ansamblumembranarcareconineomoleculdecitocromf,doumoleculecitocromb6cuo FeSprotein(2Fe2S)iunadeplastochinol(QBH2)legat. Arelocastfelmrireagradientuluideprotonilanivelulmembraneitilacoidului,fora chemiosmoticcevafiutilizatdectreATPsintazpentrugenerareadeATP.Dela complexuldecitocromib6felectroniisuntmaiapoitransferaictreplastocianin. Plastocianinaesteoproteinmobilde10,5KDacarearencentrulactivredoxaleiionulde CucoordinattetraedalcupatruliganzireprezentaideunrestdecisteinCys84,metionin Met92idoudehistidinHis37,87.Complexareaatomuluidecuprucuceipatru aminoacizidinlanulpolipeptidicmoduleazpotenialulreductoralcentruluiactival plastocianinei,cupruloscilndntrestriledeoxidareCu+Cu2+.Aceastmodificarela atomuldecuprucondiioneazfuncionareaplastocianineideatransformaeficient electroniidelacomplexulcitocromulb6flafotosistemulI.Plastocianinaredusvaceda electroniictrecationulcentruluidereaciedinfotosistemulI,p700+. D. DouevenimentedeexcitarelanivelulcentruluidereaciealfotosistemuluiIducla excitareaacestuiailaexpulzareactreunacceptorconvenabiladoielectroni.Regenerarea centruluidereaciealfotosistemuluiIsevarealizapeseamaplastocianineireduse. 25
Dacserealizeazodiagramaenergiilorelectronilordealungulacestuimecanismseobine imagineademaijos.
26
Ovariantparticular r,ciclic,amecanismulu m uidetransfe eralelectroniloricareu utilizeazdoa ar fotosiste emulIafostdescriscaavnd a locn unelesituaii. i nacestmecanism m cicllicelectronul cedeaz expulzat tdecentrulde d reaciealfotosistemu uluiIestetrecutlaferedo oxincarelc plastoch hinonei.Acea astamaipreiaunelectro ontotdelafe eredoxinaredusi4pro otonidepefa f a stromal amembran neitilacoiduluiiseredu celaplastoc chinol.Acestamigreazla afaalumen nala membra aneitilacoidu uluiundeced deazelectro oniictrecomplexulcitocromicb6fi protoniinspa s iul lumenalaltilacoidului.Electronii itrecdelaco omplexulcitocromicb6flaplastocian ninimaide epartela cationuldincentrulde d reacieal fotosistemu uluiI.naces stmodnuare elocsinteza deNADPH+ +H+dar gradient tuldeproton ni,redus,serealizeaz r as stfelcsepo oaterealizasinteza,redu s,deATP.
27
nacestmodnuvafiposibildes sfurareare eaciilordinciclculCalvin ndeoareceN NADPH+H+es ste nzabildesfur u riiacestorreacii. indispen Studiiled demicroscopieelectroni icaureleva atcceletreicomplexeproteice p alem membranei tilacoidic ceauolocalizarespecific c. FotosistemulIsedescop permaiales snmembran neletilacoide eloraflaten ncontactdire ectcu + s stromaunde eareaccesNADP N . FotosistemulIIestelocalizatexclusiv vaproapenregiunilestiv vuitealeme embranelor t tilacoidelor. C Complexulb6festeunifo ormdistribuit tpretutindeninmembran
Petotal, ,deiproces suldecaptar reaenergiei ifotonilores steunulcom mplex,finalita ateasaeste e conversi iaenergieifo otonilornenergiachimi icalegtur rilormacroe ergicedinAT TPinpoten nialul reducto oralNADPH H+H+. Mecanis smul sintez zei ATP n cl loroplaste SintezaA ATPnclorop plasteesteasociatcudiisipareaunuigradientde eprotoniprin nmembrana a tilacoidu ului.Mecanis smulsintezei iATPncloro oplastestefo oarteasemntorceluid dinmitocond drii. Ansamblulenzimatic ccarecataliz zeazformar reaATPnclo oroplastprez zintungrad ddesimilarit tate foartem marecomparativcuacelaiprocesce sedesfoarnmitocondrii. ATPsint tazacloroplastuluiestenumitCF0 CF1. CF0pro oteinhidrof fobtransme embranarc careconduce eprotoniiprinmembran natilacoidulu ui. CF1pro oteinhidrof filcucompo oziieoligom meric33 .
28
SubunitileiconinsitusuriledelegareicelecataliticepentruATPiADP,precumipentru ionulfosfat.
29
PO3H2
* CO2
H+ HO
CH2 C C
O PO3H2 * COO-
C C
OH OH O PO3H2 H
O OH O PO3H2
CH2
CH2
CH2
trans en diol
acid cetonic
HO
H+
C C
OH OH O PO3H2 HO H
CH2
C C
O OH O PO3H2
intermediar hidratat
CH2
acid D 3 fosfogliceric
Primaetapesteunaputernicexergoniccuodiferendeenergieliberdecirca12Kcalceeace facecaeasfienesenireversibil.Reaciaestecatalizatderibulozo1,5bisfosfatcarboxilaz (RUBISCO)enzimlocalizatpesuprafaastromalamembraneitilacoidice.Ribulozo1,5bisfosfat carboxilazacuprinde15%pnla60%dinproteinelecloroplastuluiiprinurmareesteceamai rspnditproteinnbiosfer. Fiindenzimacheientrecarbonulanorganic(CO2)icarbonulorganiceste,probabil,ceamai importantenzimdepeTerra. Enzimadinplantelesuperioareidinmultemicroorganismefotosintetizanteconstdin8unitimari Lde50KDacodificatedeADNulcloroplastuluii8unitimiciSdecte14KDaspecificatedegenele nucleare.FiecaresubunitateLconineuncentrucataliticiuncentrudereglare,rolulsubunitiiSnu secunoatedarsepresupunecmretevitezadereacieasubunitiiL. Ribulozo1,5bisfosfatcarboxilazadinunelebacteriifotosintetizanteesteundimercudou subunitiidenticecareposedostructurasemntoarecusubunitateaLdelaplante. Enzimaesteconvertitnformacataliticactivnprezendedioxiddecarboniprinlegareaunui ionmetalicdeMg2+.ActivitateaacesteienzimeestereglatdecantitiledeO2,CO2,Mg2+ide valoareapHului. Maiestedenotatcceamaimareparteaazotuluidinfrunzeestelocalizatlanivelulribulozo1,5 bisfosfatcarboxilazei. PlanteleceaucaprimprodusstabilalreaciilorfotosinteticeacidulD3fosfoglicericsenumesc planteC3. 30
CH2
acid D 3 fosfogliceric
CH2
CH2
fosfoglicolat
3 fosfoglicerat
Latemperaturade25Cproporiadintrecele2reaciiestede80%pentrucarboxilareide20% pentruoxigenarenscucretereatemperaturiicreteiproporiadeutilizareaoxigenuluinlocul CO2. Aceastreacieesteceacarestncentrulunuifenomentipicpentrucelulelevegetale,numit fotorespiraie.Fotorespiraiaesteunprocescarearelocnparalelcurespiraiacelularnormal, nsdiferitderespiraiacelularnormal(careutilizeazoxigenuliglucidelepentruaformadioxid decarbon,apienergieliberutilizabilpentruproceselecelulare)procesuldefotorespiraieeste unuldependentdelumin.Acestprocesarelocncelulelecareconincloroplasteiimplicdou tipurisuplimentaredeorganitecelulare:mitocondriileiperoxizomii. nprocesuldefotorespiraieribulozo1,5bisfosfatcarboxilazacatalizeazreaciadintreribulozo1,5 bisfosfatiO2cuformareadeacid3fosfoglicericideacid2fosfoglicolic.Deoarecepentruo moleculderibulozo1,5bisfosfatseformeazosingurmoleculdeacid3fosfogliceric(comparativ cudounciclulCalvin)nuexistunctignetnceeacepriveteformareadenoilegturiCC(sau deglucide).ProcesulacestaestensncompetiiepentrusubstratulutilizatnciclulCalvini ribulozo1,5bisfosfatcarboxilazaesteieautilizatfraproducefixareacarbonului.Presiunea parialcrescutaO2,indisponibilitateaCO2daritemperaturaridicatsuntfactorifavorizanicare ducladesfurareapreponderentareaciilordinfotorespiraiendefavoareacelordinciclulCalvin. Esteiacestaunuldintremotiveleineficieneiribulozo1,5bisfosfatcarboxilazeiianecesitiidea meninemaricantitidinaceastenzimlanivelulcloroplastuluipentruacompensaineficienaei. Chiardacprivimfotorespiraiacapeunprocesdezavantajoscercetrileauartatcfunciaacestuia poatefiiunadeprotecieprinndeprtareaexcesuluideenergiepotenialgeneratdelumina foarteputernic,cazncarecapacitateadecarboxilarenuestenacordcucantitateamaredeATPi NADPH+H+generatedeansamblurilemoleculareimplicatenreaciiledependentedelumin, cantitatecarearputeaafectastabilitateacelulei. Acidul2fosfoglicoliciesedincloroplastivaficonvertitmaidepartenperoxizomiundeeste transformatnglicincare,larndulei,esteconvertitlanivelulmitocondriilor,eventualpnla CO2,H2OiNH3.
31
Etapa de re educere 2. E Etapade ereducereacicluluiCalvincuprinded doureaciicareaulocsub s aciunea aadouenzi ime fosfoglic ceratkinaza(E1),gliceraldehidfosfat tdehidrogen naza(E2). naceast tetapacid dulD3fosfo oglicericsere educecuformareadegli iceraldehid3 fosfatcu + participa areaATPiNADPH+H N co onformsecve eneidereac cii:
HS ATP HO H C C O O OH O PO3H2 E1 H ADP O C C O ENZIMA
~PO H
O
H3PO4 O C H C O
3 2
~S
O
OH PO3H2 E2
OH
CH2
CH2
CH2
CH2
acid D 3 fosfogliceric f
ecatalizatede d enzimeleE1 E iE2repre ezintinvers sareaadouetapeding licoliz(npr rocesul Reaciile + deglicolizconezima aimplicateste e NAD ).E EnzimaE1esterepartizat tntrecloro oplasteicito oplasm iarE2se eafllocaliza atncloroplaste.Obine ereaglicerald dehid3fosfa atuluipermit temaidepar rte sintezag glucidelorda araceastmo oleculrepre ezintpunctpotenialde eplecareia alaltorci metabolice. 3. E Etapa de sin ntez a glucidelor cu 6 atomi de carbon c Desfur rareaulterio oaracicluluiCalvinpres upunepede eopartecon nversiaglicer raldehid3fo osfatului lafructo ozo6fosfat ialtesubsta anecaresun ntbazatutur rorcelorlalte esubstaneo organice,iarpede altpart teconversian ribulozo1,5 1 bisfosfat, ,acceptoruldioxiduluide ecarbon. Conversiagliceraldeh hid3fosfatu uluinfructo ozo6fosfatdecurge d prininversarear reaciilor nztoaredin nglicoliz.Ac cestereaciis suntcataliza atedectretriozofosfatiz t zomeraz,aldolaz a corespun ifructozobisfosfatazdupcum murmeaz:
32
4. Etapa de regenerare a acceptorului dioxid de carbon DesfurareaulterioaracicluluiCalvinpresupuneregenerareaacceptoruluicareestenecesar pentrufixareadioxiduluidecarbon. Reaciilecareduclaregenerarearibulozo1,5bisfosfatuluintromaremsursuntanaloagecu reaciiledinciclulpentozofosforicoxidativ.Problemaconstnsintezauneiglucidecu5atomide carbonpornindusedela2glucide,unacu6atomidecarbonicealaltcu3atomidecarbon. Aceastaserealizeazprinurmtoareasuccesiunedereacii. Maintitranscetolaza(enzimtiaminpirofosfatdependent)transferunfragmentdedoiatomide carbonC1C2,delafructozo6fosfatlagliceraldehid3fosfatsintetizatnetapadereducere rezultndxilulozo5fosfatulieritrozo4fosfatulconformreaciei:
CH2OH C HO H H C C C O H OH OH + H H C C O OH HO H
gliceraldehid-3-fosfat 3C
H NH2 N H3C N CH2 N+ CH3 tiaminpirofosfat CH2 CH2 O S
CH2OH C C C O H OH +
H H H
C C C
O OH OH
CH2OPO3H2
CH2OPO3H2
eritrozo-4-fosfat
CH2OPO3H2
fructozo-6-fosfat 6C
CH2OPO3H2
xilulozo-5-fosfat 5C
4C
O P OO
O P OO-
33
CH2OH C O CH2OPO3H2
dihidroxiaceton-fosfat 3C +
CH2OPO3H2 C C C C C O H OH OH OH
H H H
C C C
O OH OH
CH2OPO3H2
sedoheptulozo-1,7-bisfosfat 7C
CH2OPO3H2
sedoheptulozo-7-fosfat 7C
CH2OPO3H2
eritrozo-4-fosfat 4C
CH2OPO3H2
gliceraldehid-3-fosfat 3C
CH2OPO3H2
xilulozo-5-fosfat 5C
CH2OPO3H2
ribozo-5-fosfat 5C
CH2OPO3H2
sedoheptulozo-7-fosfat 7C
CH2OH C HO H C C O H OH H H
CH2OH C C C O OH OH
H H H H
C C C C
O OH OH OH H H
CH2OH C C C O OH OH
CH2OPO3H2
xilulozo-5-fosfat
CH2OPO3H2
ribulozo-5-fosfat
CH2OPO3H2
ribozo-5-fosfat
CH2OPO3H2
ribulozo-5-fosfat
ribulozofosfat epimeraza
ribozofosfat izomeraza
Ciclulreaciilorfotosintezeilantunericsencheiecufosforilarearibulozo5fosfatuluinribulozo1,5 bisfosfatuluisubaciuneafosforibulozokinazei.
CH2OH C H H C C O OH OH H H ATP ADP CH2OPO3H2 C C C O OH OH
CH2OPO3H2
ribulozo-5-fosfat
CH2OPO3H2
ribulozo-1,5-bisfosfat
3 Pi 3 fructozo 6 fosfat
6 ribulozo 5 fosfat
35
6CO2+18ATP+12NADPH+12H++11H2O fructozo6fosfat+18ADP+17H3PO4+12NADP+
Pentruasimilareauneimoleculededioxiddecarbonseconsum3moleculeATPi2moleculede (NADPH+H+).Dincele13reaciialecicluluiCalvinnumaienzimeleribulozobisfosfatcarboxilaza, fosforibulozokinazaisedoheptulozobisfosfatazasuntcaracteristicepentruorganismele fotoautotrofe.CaincazulaltorcimetaboliceuniiproduiintermediariaicicluluiCalvinpotfi atraindiferiteproceseanaboliceicatabolice. Exemplu:gliceraldehid3fosfatulcarepoateficonsideratcaprodusprimaralreaciilorlantuneric, esteutilizatndiversecibiosinteticeattncloroplastctinexteriorullui.Astfelgliceraldehid3 fosfatulpoateficonvertitnfructozo6fosfat,nglucozo1fosfatcareesteprecursorulaltor monoglucide,oligoglucide,poliglucidevegetale.Dingliceraldehid3fosfatsesintetizeazacizigraii aminoacizi. Reglarea ciclului Calvin Controluldiferitelorcimetaboliceserealizeazlanivelulreaciilorenzimaticecaresuntdepartede echilibru.AceastanseamncauvalorimarialeluiG. DintreenzimelecicluluiCalvintreindeplinesccondiii:ribulozobisfosfatcarboxilaza, sedoheptulozobisfosfataza,fructozobisfosfataza. Defapt,eficienacataliticaacestorenzimeseschimbnvivocuniveluliluminrii. Activitatearibulozobisfosfatcarboxilazeirspundelapatrufactoridependenidelumin: 1. semodificcupHulsubinfluenaluminii.pHulcretedela7la8caurmareapomprii protonilordinstromanspaiultilacoidic.RibulozobisfosfatcarboxilazaarepHoptim aproximativegalcu8. 2. estestimulatdeMg2+.InfluxulH+indusdeluminnspaiultilacoidesteasociatcuefluxul ionilordeMg2+nstrom. 3. esteactivatalostericdeNADPHcareestesintetizatdeNADPreductazfolosindelectronii energizaiproveniidelafotosistemulI. 4. eaesteputernicinhibatde2carboxiarabinitol1fosfatcareestesintetizatdeplantenumai lantuneric. Ribulozobisfosfatcarboxilazaesteactivatalostericdefructozo6fosfatiinhibatdefructozo1,6 bisfosfat.nacestmodacumulareafructozo1,6bisfosfatuluiservetecasemnaldestopareareaciei decarboxilarentimpceformareafructozo6fosfatuluinconcentraiiridicateiniiazreaciilela
36
ntuneric.DeaicirezultcfuncionareacicluluiCalvindepindenmoddefinitoriudeactivitatea fructozobisfosfatazei. ncloroplastefructozobisfosfataza,sedoheptulozobisfosfatazadeasemeneasuntactivateprin cretereapH,Mg2+iNADPH.Aciuneaacestorfactoriestecompletatprintrunsistemreglator secundarreprezentatdetioredoxin.Aceastproteinde12Kdaconineolegturdisulfidiccare poatefiuorredusreversibil. Tioredoxinaredusactiveazfructozobisfosfatazaisedoheptulozobisfosfatazaprintroreaciede schimbbisulfidic. ncloroplastetioredoxinaoxidatesteredusdeferedoxinaredussubaciuneaferedoxin tioredoxinreductazeicaredepindedestarearedoxaferedoxineisolubiledinstromaceastavariind cuniveluldeiluminare. Sistemultioredoxineicontroleaziaciuneaaltorenzime. Ci alternative de fixare a dioxidului de carbon PlantelefixeazatomuldecarbonutilizndcaleadescrisdeciclulCalvin.Dar,funciede particularitileanatomofiziologiceifuncionalealediferitelorgrupedeplantedescoperimc premergtorcicluluiCalvinpotexistadiferitemecanismeprincareCO2poatefifcutctmaiuor accesibilenzimeiribulozo1,5bisfosfatcarboxilazasimultancureducereaproporieideO2 disponibil. Putemastfeldifereniatreitipuridiferitedecifotosintetice(privitelamodulcomplet). OprimcaleestecaleaC3(utilizareadoarareaciilorcicluluiCalvin)apoicaleaC4i,cavarianta cailorC4,metabolismuldetipCAM(CrassulaceanAcidMetabolism). Denumirilevinpentruprimeledoudelaformareandecursulreaciilorfotosinteticeaunor intermediaricutrei,respectivcupatruatomidecarboncaprimiintermediaristabili.CAMafost descoperitlaplantedinfamiliaCrassulaceaedeaiciidenumirea. MareamajoritateaplanteloraparingrupuluiC3i,evolutiv,C4iCAMderivdinaceasta, reprezentndpnlaurmmodificrialeacesteici. Calea C4 SimilarciiC3discutatpelargmainainteiplanteleaparinndgrupuluiC4daricelecare utilizeazcaleaCAM,aunevoiedeciclulCalvinpentruformareaglucidelor.CaleaC4areoetap suplimentarprincareCO2atmosfericestecapturatistabilizat. naceastetapsuplimentarCO2estecuplatcuomoleculdefosfoenolpiruvat(PEP)rezultndun acidorganiccupatruatomidecarbon,aciduloxaloacetic(oxalilacetic).Reaciaestecatalizatde fosfoenolpiruvatcarboxilaz. Dinacestmotiv,alformriiacestuiprimcompusstabilcupatruatomidecarbon,estedenumitcalea C4aceastcaledebiosintez.Comparativcuribulozo1,5fosfatcarboxilazaafinitateapentruCO2a fosfoenolpiruvatcarboxilazeiestemultmaimare.Nefiindinfluenatnicidetemperatur,nici neputndfolosiO2,fosfoenolpiruvatcarboxilazaestecapabilsmeninunritmridicatalfixriiCO2 attlatemperaturicrescutectinprezenauneiconcentraiimarideO2. Distingem,funciedeintermediariiobinui,doumarivariantedecaleC4.Pelngacestea,sau derivatedinele,putemregsimaimultesubvariantedatemaialesdetipulcoenzimeiutilizatde reductaze,fieNAD+sauNADP+.
37
Primulaspectcetreb buieobserva at,dincolode evariantele evolutivelacaresaajun ns,estec funcionareaciiC4estecondiio onatideo separaresp paialalocu urilorundea aulocproces sele biosintet tice.Aceast separaresp paialduce laoizolare maibunaRUBISCOfa adesurseledeO2 carearm mpiedicabunafixareaCO C 2. Laprimu ultipdecaleC4acidulox xaloacetices steconvertitlaacidmalic cprinreduce ere.Acidulmalic m trecedir rect,prininte ermediulpla asmodesmelo or,delacelu ulelemezofiluluilacelea aleteciifasciculare undevafidecarboxilatcuregene erareaCO2c carepoatefiutilizatdectreribulozo o1,5bisfosfa at carboxila azlafelcum marfifostut tilizatCO2de eprovenien directatmosferic.Rez zultdinace east reacie iomolecul deacidpiruviccaresentoarcencelulele c mezo ofiluluiunde e vafirefosfo orilat spreafo ormafosfoen nolpiruvatca apabilsapreiiaonoumo oleculdeCO O2. Enzimac carecatalizeazreacia,piruvat p fosfa atdikinazaprezintactiv vitateenzima aticneobinuit deoareceactiveazogruparefos sfatliberpe eseamahidr rolizeiATPuluilaAMPi pirofosfatacesta a drolizatdectrepirofosf forilazcuformareaadoumolecule edefosfatan norganic. fiindmaidepartehid Energiat totaleliberatestesuficientpentr ruaputeafo ormafosfoenolpiruvatul.
CO2 anhidraza ca arbonica HCO3COOH C CH2 OPO32-
H2O
Pi
COOH C CH2 O
COOH
o oxaloacetat
38
NADP+
CO2 NADPH+H+
COOH C O
NADP-malat-enzima
CH3
L-malat
+
piruvat
SeconsumastfelomoleculdeATPiunadeNADPH+H formatepeseamaconversieienergiei luminoase.DartrebuieremarcatcechivalentulreductorsubformaNADPH+H+seregenereazntr unaltloc. AdouavariantdecaleC4implicdeasemeneaformareadeoxaloacetatlafelcalaprimultipde caleC4,darestemaicomplicatdeoareceulteriorimplicconversiaoxaloacetatuluicuajutorul aspartataminotransferazeiiauneimoleculedeacidglutamiclaacidasparticcuformareaunei moleculedecetoglutarat.Acidulasparticestecelcarevatrecedincelulelemezolfiluluin mitocondriilecelulelorteciifasciculareundereaciadetransaminaresevadesfuransensinvers. OxaloacetatulrezultatvafiredusnmitocondriisubaciuneamalatdehidrogenazeiNAD+dependente cuformareaaciduluiLmalic.AcidulLmalicprsetemitocondriaiestedecarboxilatoxidativcu ajutorulNADmalatenzimeiobinnduseacidpiruviciCO2.Acidulpiruvicestetransaminatdectre alaninaminotransferazcuformareaalaninei,peseamauneimoleculedeacidglutamic.Alaninaeste ceacaresentoarcencelulelemezofiluluiundeesteconvertitlapiruvattotsubaciuneaalanin aminotransferazei.
CO2 anhidraza carbonica HCO3COOH C CH2 OPO32-
H2O
Pi
COOH C CH2 O
COOH
oxaloacetat
39
LaplanteleC3concentraiadeO2ninteriorulcloroplastelorestedecirca1000deorimaimaredect concentraiadeCO2faptcareduceautomatlaunritmridicatalfotorespiraiei,acestfaptfiind cuplaticuslabaafinitatearibulozo1,5bisfosfatcarboxilazeipentruCO2.LaplanteleC4ribulozo 1,5bisfosfatcarboxilazaestelocalizatmpreuncucelelalteenzimealecicluluiCalvinncelulele teciifascicularecarenusuntexpusedirectctrecontactulcuatmosfera. ConcentraiadeCO2nceluleleteciifasciculareesteastfelcuunordindemagnitudinemaimare dectncelulelemezofiluluidelaplanteleC3(nambelecazurisediulconcretalcicluluiCalvin). AcestfaptfacecaraportuldintreCO2siO2safiemultmbuntitnfavoareaCO2.nacestfel ribulozo1,5bisfosfatcarboxilazaestehrnitsuplimentarcuCO2ifotorespiraiaesteredus foartemult,spreeliminare,laplantelecareutilizeazoricaredinvarianteleciiC4. Consecineleocoliriilimitrilorintrinsecialeribulozo1,5bisfosfatcarboxilazeisuntenorme.Plantele C4auratemaimarialefotosintezeidectplanteleC3itemperaturaoptimpentrufotosintezmai maredectlaplanteleC3.DeasemeneaplantelecareutilizeazcaleaC3devinmultmairepede limitate(ifotorespiraiapreponderent)cndiluminareanuestenclanivelulmaximum comparativcuplanteleC4careaucapacitateadeamenineunraportmultmaibunntreCO2/O2la nivelulcelulelorundeaulocreaciilecicluluiCalvinipotexploatamaieficientiluminareaintens. PlanteleC4coninmultmaipuinribulozo1,5bisfosfatcarboxilaz(1/3pnla1/6)comparativcu planteleC3,fapttradusprintroeficienmultmaimareautilizriiazotului.Deasemenea,utilizarea mecanismuluidembogirenCO2faccaiutilizareaapeisfiemultmaieficientlaplanteleC4 comparativcuceleC3.Existnsiunreversalacesteieficienesporite:utilizareaunorcantitimai marideATPiNADPH+H+dectsuntnecesareplantelorC3iconsecutivpotenialedezavantaje pentruplantelecareutilizeazcaleaC4maialesdacnusuntndeplinitecondiiileoptimede iluminareidetemperatur. Calea CrassulaceanAcidMetabolism (CAM) PlantelecarefolosesccaleaCAMutilizeaznesenaceeaicaledeapompaiconcentraCO2 precumplantelecareutilizeazcaleaC4doarcrealizeazacestlucruntromanierdiferit.Dacla planteleC4ribulozo1,5bisfosfatcarboxilazaestentlnitdoarnceluleleteciifasciculare,la planteleCAMenzimaesteomniprezentntoatecelulelefotosintetizatoare,analogplantelorC3.n locdesepararespaial(calaC4)avemdeafacecuosepararetemporalacapturriienergiei luminoasedepreluareaCO2. DaclaplanteleC3iC4stomatelesuntdeschiseziuacndarelocicapturareaenergieiluminoasei conversiaCO2nglucide,laplanteleCAMstomatelesuntnchiseziuaideschisenoapteadatorit condiiilordeviacroratrebuieslefacfaplanteleCAM.ntimpulnopii,customatele deschise,pierdereadeapesteredusinacestintervalnocturnarelocsintezaaciduluioxaloacetic suntaciuneafosfoenolpiruvatcarboxilazeiinprezenaCO2intratprinstomateledeschise.Acidul estestocatnvacuolemarincelulelefotosintetizatoare.Petimpulzileistomatelesuntnchisedar reaciilefotosinteticeaulocexactcalacelelalteplantepeseamaCO2eliberatprinscindareaacidului oxaloaceticformatntimpulnopii.AceeaimodalitatedeconcentrareaCO2esteprezentila planteleCAMlafelcumeraprezentlaplanteleC4iprinintermediuleisevorocoliinconvenientele prezentatederibulozo1,5bisfosfatcarboxilaz. DeasemeneaplanteleCAMauesuturifotosintetizatoaregroase,suculente,protejatedecuticul groasiacesteesuturitrebuiesaibcapacitateadeaacumulamaricantitideaciziorganicicu patruatomidecarbonnecesaribuneidesfurriareaciilordesintezaglucidelorpetimpulzilei. Acumulareaestelimitatdoardespaiulavutladispoziiepentruformareadevacuole.Separarea temporalestedeasemeneaunfactorlimitativalrateidedesfurareafotosintezeiceeacefaceca planteleCAMsprezinteoacumulareacarbonuluimairedusidectplanteleC3idectplantele C4.Totuiacesteplanteexceleazlaeficienautilizriiapei,aceastanprimulrnddatoritmodului
40
dedeschidereastomatelorpetimpulnopiicndestemaireceimaiumedinchideriistomatelor petimpulzileicndestecaldiuscat. Deasemenea,uneleplanteCAMpotfolosiimecanismulsimpluC3petimpulzileialturidevarianta CAMcuacumulareaCO2petimpulnopii.AlteplantesuntdoarfacultativCAMatuncicndcondiiile nusuntfavorabile. Conversia fructozei i obinerea celorlalte monoglucide DacprodusulprimaralfotosintezeipoateficonsideratacidulD3fosfoglicericatunciacestaprin transformrisuccesivednaterefructozo6fosfatuluicareesteprecursorulformriituturor celorlaltemonoglucideiaderivailoracestora. nplante(darincelulelecelorlalteorganisme)suntenzimespecificecaretransformfructozo6 fosfatulnglucozo6fosfat,manozo6fosfat,glucozamin6fosfat. Esterii6fosforiciaiglucozeiimanozeiformaidinfructozo6fosfatservescdreptprecursoripentru sintezaaltorglucideiaderivailorlor.
H HO HO H H C C C C C O H H OH OH H HO HO H H C C C C C H OH OH HO H H OH H H C C C C C OH O H OH OH HO H H H C C C C C OH OH H OH OH H H HO H H C C C C C O OH H OH OH
CH2OPO3H2 D-manozo-6-fosfat
CH2OPO3H2 D-fructozo-6-fosfat
CH2OPO3H2 D-glucozo-6-fosfat
41
Transformrileulterioarelacaresuntsupuseulteriormonoglucideleaulocdemulteoriprin intermediulNucleozidDifosfatMonoglucidelor(NuDPmonoglucide)caresuntformeleactiveale monoglucidelorcuroldeosebitdeimportantcaagenideglicozilare(donorideresturiglucidice). Existmultecombinaiincaresuntunitediferitemonoglucidesauaciziilorcuresturi nucleoziddifosfaturidin,citidin,guanozin,adenozindifosfat. NuDPmonoglucidelesuntsintetizatedinesterii1fosforiciaimonoglucidelorpecaleauneisuccesiuni dereacii.Pirofosfatuleliminatprovinedinresturileterminalealenucleozidtrifosfatului. CaexempluvomanalizacazulUDPglucozeiobinutdinglucozo6fosfatpecaleauneireaciide mutarearestuluifosfatdeatomuldecarbon6laatomuldecarbon1,reaciecatalizatde fosfoglucomutaz,urmatdetransferuluirestuluiuridilildelaUTPlaglucozo1fosfatreacie catalizatdeUTP:glucozo1fosfaturidililtransferaza.Reaciaesteunadeechilibrudaraciunea pirofosfatazeicaredescompunepirofosfatulrezultatfacecaechilibrulsafiedeplasatspreformarea UDPglucozei.DeoarecediferenadeenergieliberlahidrolizaNuDPmonoglucidelorestemaimare dectceadelahidrolizamonoglucid1fosfatului,carelarnduleiestemaimaredectceadela hidrolizamonoglucid6fosfatului,estelimpedecNuDPmonoglucidelesuntdonorieficienide resturifosfatpentrureaciiledinorganismelevii.
N O O P OO O P OO O P OO O N O
UridinTriFosfat
PPi
2Pi
CH2OH O
N O O P OO O P OO O N O
UDP-glucoza
42
Zaharozo-6F-fosfat
CH2OPO3H2
O Zaharoza
CH2OH
Zaharozo-6F-fosfat
Celedousintetazeprecumizaharozo6fosfatfosfatazasegsescncloroplaste.Deiexistdate careconfirmbiosintezazaharozeincloroplaste,nprezentadevenitclarczaharozasesintetizeaz ncitoplasmacelulelorfotosintetizantefolosindUDPglucozifructozo6fosfat. nesuturilenefotosintetizante(precumnendospermulseminelorsupusegerminrii)biosinteza zaharozeidinUDPglucozifructozo6fosfatarelocprobabilncitoplasmacelulei.Sepresupunec zaharozosintetazaaravearolulfiziologicprincipaldeacatalizascindareazaharozeinUDPglucoz (ADPglucoz)carepoateservicaprecursornbiosintezaamidonului,,trehalozeiconinedou resturideDglucozopiranozuniteprintrolegtur11glicozidic.Acestdiglucidsentlneten ciuperci,algealbastreverziialgeroii,npteridofiteinplante.Deasemeneaintrncompoziia hemolimfeilainsecte. ,trehalozasesintetizeaznurmadesfurriicombinateaurmtoarelorreaciiacesteafiind catalizatede,trehalozofosfatsintetazirespectivtrehalozofosfatfosfatazconformecuaiilor:
43
Ladiferitespeciideplante,trehalozasubstituiezaharozanfunciadetransportoralcarbonului organicsintetizatialenergiei.
Biosinteza lactozei Unelediglucidesuntsintetizatepentruafiutilizatedreptcombustibilmetabolic.Exemplultipiceste lactoza(di)glucidulmajordinlapteleprodusdemamifere. Biosintezalactozeiserealizeaznglandamamarsubaciunealactozosintetazeiconformreaciein carecadonorglicozilicserveteUDPgalactozaformatprinepimerizareaUDPglucozeiifolosind dreptacceptoromoleculdeglucoz. Lactozosintetazaconinedousubuniti: a)unacataliticgalactoziltransferazaprezentncelemaimulteesuturiundecatalizeazreacia UDPgalactozeicuNacetilglucozaminaconducndlaNacetillactozamincareesteosubunitate importantapriiglucidiceaglicoproteinelor. b)osubunitatemodificatoarelactalbuminaaceastafiindoproteinspecificglandeimamare fiindlipsitdeactivitatecatalitic.Deilipsitdeactivitatecatalitic,lactalbuminamodific specificitateaunitiicataliticepentrucaeaspoatutilizadreptacceptormoleculadeglucozn loculNacetilglucozaminei.
Biosinteza oligoglucidelor din familia rafinozei Rafinozapoateficonsideratreprezentantultriglucidicalfamilieideoligoglucideacrorstructurse obineplecnddelazaharoz,lacareseataeazunu,douresturideDgalactoz. ntructacesteoligoglucidesegsescnseminelemultorplante,seapreciazceleconstituieo formderezervderesturiDgalactozilice,DglucoziliceiDfructozilicenplantelerespective. Rafinozaaparencantitinsemnatensemineledebumbacinsfecladezahr,apoinseminele decereale,nsoiaimultealteleguminoase.Stahiozasadescoperitlamultegenurialefamiliei LeguminosaeiLabiatae.BoabeledeGlycinemaxirizomiideStachyssieboldiisedistingprinbogia nstahioz.Verbascozaesteprezentnsoia,semineledelucern,mzricheetc. BiosintezaoligoglucidelordinfamiliarafinozeipresupunetransferulsuccesivalrestuluiDgalactozilic delagalactinol[ODgalactopiranozid(11)mioinozitol]lagrupahidroxildelaatomuldecarbon 6arestuluiDglucozilicsauDgalactozilicterminalaloligogluciduluiprecedentnsuccesiuneadat. GalactinolulseformeazdinUDPDgalactozimioinozitol.Aceastreacieestecatalizatde UDPDgalactoz:mioinozitolgalactoziltransferaz,acreiactivitateestepotenatdeioniide Mn2+. 44
45
Amidonulesteunhomopoliglucid,monoglucidulconstitutivalamidonuluifiindDglucopiranoza. Amidonulconstituieunamestecdedoupoliglucide.Unulnumitamiloz,reprezintunpolimer linearalctuitdinresturideDglucopiranoz,uniteunulcualtulprinlegturi(14)glicozidice. Moleculaamilozeiestedispusnspaiusubformdespiral,fiecarespircuprinznd6resturide Dglucoz.Aldoileapoliglucidcomponentalamidonuluisenumeteamilopectiniareostructur ramificat.ResturiledeDglucoznamilopectinseunescpredominantprinlegturi(14) glicozidice,iarnpunctelederamificaieexistlegturi(16)glicozidice.Oramificaienmolecula amilopectineisentlnetela,aproximativ,2430resturideDglucoz. Amilozaiamilopectinasedeosebescdupproprietilelorfiziceichimice.Masamolecularmedie aamilozeidincartofestedeaproximativ400.000daltoni,dinporumbiorzntre100.000i 200.000daltoni.Pentruamilopectinsaustabilitmasemolecularemaimaride20.106daltoni. Amilozasecoloreaz,prinformareaunuicompusdeadsorbie,cuiodulnalbastrunchis,iar amilopectinanalbastruviolet.Amilozaprindizolvarenapfierbintedosoluiecoloidal, limpede,nevscoas,iarncazulamilopectineisoluiadevinevscoasisegelific,formndococ saucleiuldeamidon. ngeneral,amidonuldinmajoritateaplanteloresteconstituitdin1525%amilozi7585% amilopectin.Totui,amidonuldinboabeledeporumbcerosconinepracticnumaiamilopectin,n timpcelauniihibrizideporumbamilozasegsetenproporiede5080%. Amidonulareunroldeosebitnalimentaiaomuluiianimalelor.Amidonulestecomponentul principalalfinurilor,pinii,pastelorfinoase,cartofilor,reprezentndglucidulcuceamaimare ponderenalimentaie.nscopuriindustriale,amidonulseextragedincerealeicartofi.Are numeroasentrebuinricaingredientnproduselealimentarecroraleconfercalitisenzoriale maibune.nplusamidonulseutilizeazlafabricareaalcooluluietilic,aciduluilactic,acetonei, butanolului,nindustriatextilpentruapretat,lapreparareacleiuriloretc. Amidonultotdeaunaseformeazisedepoziteazsubformdegruncioarenplastide.nesuturile nefotosintetizanteasemeneaplastidesuntamiloplastele,iarncelefotosintetizantecloroplastele. Gruncioareledeamidonconstituiestructurinaltorganizate,cuformeidimensiunifoartediverse, daradeseacaracteristicepentruospeciedatdeplante. Biosintezaamidonuluiesteunprocesbistadial.Amilozacauncomponentmaisimplualamidonului sesintetizeazprimaiapoiopartedinmoleculeleeisuferorestructurare,conducndla componentulmaicomplexalamidonuluicareesteamilopectina.Astfel,amilozandeplineterolulde precursoralamilopectinei.Aceastafirmaieestesusinutdeobservaiacamilozaplantelorde grutratatecu14CO2sau14Czaharoz,includeatomuldecarbonradioactivmultmaidevremedect amilopectina. Amidonulsesintetizeaznplastidecuparticipareamaimultorenzime.Dintreele,primaenzim studiatafostamidonfosforilazasauglucanfosforilazacarecatalizeazreacia.
46
DeoarecereversibilitateaacesteireaciidepindederaportulPi/Dglucozo1fosfat,amidon fosforilazapoatefiimplicatattnscindareactinsintezaamidonului,cndconcentraiaD glucozo1fosfatuluincelulavegetalatingeunnivelridicat.Enzimapoatessintetizezeamidonde novodinDglucozo1fosfat,folosindcaprimerunoligogluciddinseriamaltozic,ncepndcu maltotrioza. OaltvariantnbiosintezaamidonuluiestecealegatdeutilizareaNuDPglucozeicaprecursorn biosintezaamidonuluiiglicogenului. EnzimacarecatalizeazformareaamidonuluidinNuDPglucozsenumeteamidonsintaz.n esuturilevegetaleexistcelpuindouizoenzimealeamidonsintazei.Primaafostdescoperit izoenzimalegatstrnscugruncioareledeamidonnformare.Adouaizoenzimaamidonsintazei esteoenzimsolubil,prezentnamiloplasteleseminelorncoacere,tuberculilorin cloroplasteleesuturilorfotosintetizante.AmbeleizoenzimecatalizeaztransferulrestuluiD glucopiranozicdelaNuDPglucozlacaptulnereductoral(14)Dglucanuluiacceptorsaual moleculeideprimerifixarealuiprintrolegtur(14)glicozidic.Termenulde(14)D glucansereferlaoligoglucidulsaupoliglucidulalctuitdinresturideDglucopiranoz,uniteprin legturi(14)glicozidice.
CH2OH O + UPD (ADP) OH O O CH2OH O CH2OH O CH2OH O
capat nereducator
amidon sintaza
CH2OH O
CH2OH O
CH2OH O
n+1
Amidonsintaza,strnslegatcugruncioareledeamidon,poateutilizaattUDPglucozactiADP glucozachiardacADPglucozaesteundonorderesturiglicozilicemaieficientpentruaceast enzim.AmidonsintazasolubilpoateacionanumainprezenaADPglucozei.Sepresupunec aceastproprietateaamidonsintazeiestestrnscorelatcumecanismuldereglareabiosintezei amilozeiiamilopectineinmoleculaamidonului.Raportulntreconinutulamilozeiiamilopectinei nmoleculaamidonuluidepindedespeciadeplantiseaflsubcontrolgenetic. UniicercettoriafirmcDglucozadinUDPglucozesteinclusnamiloziamilopectin,iarcea dinADPglucozpredominantnamilopectin.Totuicercetrirelativrecenteaudovedit specificitateamairidicataamidonsintazeipentruADPglucoz.FormareaADPglucozeinplantese poaterealizadinzaharozsubaciuneazaharozosintetazeiidinDglucozo1fosfatcu participareaADPglucozopirofosforilazei.Unelecelulevegetalepotconinezaharozofosforilazcare catalizeazreaciadeobinereaglucozo1fosfatuluidinzaharoz. Ambeleizoenzimealeamidonsintazeisuntcapabilesutilizezeomarediversitatedelanuri (14)glucanicencalitatedeprimer,ncepndcumaltozaiterminndcumoleculeledeamiloz, alctuitedinctevamiideresturideDglucoz.Acceptorpotfideasemeneafragmentelerelativ scurtealecatenelor(14)glucanice,descoperitendextrinele(14):(16)ramificate(sau dextrinelimit)inramurileexterioarealeamilopectinei.Dacacceptorulesteun(14)glucan, amidonsintazacatalizeazformareaamilozei.ntructncalitatedeprimerpotservidextrinele (14):(16)ramificate,amidonsintazapoate,deasemenea,participanbiosinteza amilopectinei.
47
Amilopectina,avndstructurramificat,seformeaznurmaaciuniicomuneaamidonsintazei, carecatalizeazunirearesturilorDglucopiranoziceprinlegturi(14)glicozidiceiaenzimeide ramificarea(14)glucanului(numitiniialQenzim),caretransferunsegmentoligoglucidicde lacaptulnereductorallanuluide(14)glucan(deexemplu,moleculadeamiloz)launrest glicozilicneterminal,aparinnduneizoneinterioarealanului(14)glucanic.Fragmentul transferatsefixeazlarestulglicozilicneterminalprinintermediullegturii(16)glicozidice. Acceptoralfragmentului(14)Dglucanictransferatpoatefialtmoleculdeamilozsauo ramurexterioaramoleculeideamilopectinncretere.Fragmentulcareseadauglamolecula acceptorului,poatesselungeascmaidepartesubaciuneaamidonsintazei.Catenaalungitpoate dinnousseramificesubaciuneaenzimeideramificare.Ramificrileialungirilerepetateconduc nfinallaformareamoleculeideamilopectin.
CH2OH O CH2OH O CH2OH O
x
O
O H2C O CH2OH O
CH2OH
OH
OH
n-x
nceprivetespecificitateaenzimeideramificare,eaacioneazasuprasubstratuluidonorcnd acestaareolungimedecelpuin40resturideDglucoz. Amidonulsesintetizeaznstromacloroplastului.Mecanismulcaredeterminraportulntreamiloz iamilopectinnmoleculadeamidonnuestencelucidatdarestedependentdespecie. Biosinteza fructanilor FructaniireprezintpolimeriaiDfructozeicesuntrspndiincirca15%dinspeciiledeplantecu flori.CaexempledefamiliideplantecaresintetizeazfructanisemenioneazLiliaceae,Poaceae, Campanulaceae,Asteraceaeetc.Uneleplantedeculturcagrul,orzul,ceapadeasemenea,conin fructani.norganismelevegetalefructaniindeplinescrolulbiologicderezerveenergeticeiprobabil suntimplicainproteciaplantelormpotrivastresuluicauzatdesecetifrig.Fructaniiprezint interesidinpunctdevederebiotehnologic.Fructaniicuungraddepolimerizaremicposedgust dulceiseutilizeazncalitatedendulcitorinaturalideputerecaloricjoas.Moleculeledefructani cumulteunitidefructozseutilizeazpentrunlocuirealipidelorndietelealimentare. UnelespeciidebacteriicaTolypothrix,Pseudomonas,Xanthomonas,Azotobacter,Erwinia, Streptococcus,Bacillus,Actinomyces,RothiaiArthrobacterposedcapacitateadearealizasinteza fructanilor. Toifructaniiaucaprecursorzaharoza,lacarepotfiataateresturideDfructoz(Fru)ndiferite poziii,conducndlafructanicustructuriiproprietideosebite. DuptipullegturilorglicozidicedintrezaharoziresturiledeDfructozexisttreicompui trizaharidicidelacarepotprovenidiferiifructani.Prinurmarefructaniiprezeninplantei microorganismepotficlasificain(celpuin)treigrupecaresedistingdupnaturalegturilor glicozidiceprincareresturiledeDfructozseunescntreele. nprimagrupintrinulinacareesteunfructanlinearavndcaprecursor1kestoza.Toifructanii descoperiindicotiledonatecainunelemonocotiledonatefacpartedingrupainulinei. 48
CH2OH 6-kestoza
CH2OH
O CH2OH
O 1
CH2OH
O 6 CH2 CH2OH O
CH2
CH2OH
O O CH2OH CH3
neokestoza
1-kestoza
CH2OH
+
CH2OH O f ructan:f ructan-1f ructoziltransf eraza
CH2OH
+
CH2OH CH2OH O 1 O O CH2OH O CH2OH CH2 OH fructan tip 1-kestoza n fructoza CH2OH O CH2
Aceastenzimpoatesutilizezecaacceptororicefructozopolimer,nclusivzaharozaieste, probabil,rspunztoaredediversitateastructuralafructanilorexisteninnatur. Sinteza6kestozeiesterealizatdefructan:fructan6fructoziltransferaza.Formareaneokestozeiare locsubinfluenafructan:fructan6glucozfructoziltransferazacaretransferunrestdeDfructoz dela1kestozlaC6alrestuluideDglucozdinmoleculadezaharoz. Bacteriileaunechipamentullorenzimaticosingurenzimcapabilsrealizezesinteza trizaharidelorielongaiaulterioarafructanilor.Aceastenzim,numitlevanzaharaz,poates sintetizezelevanul.Levanzaharazaposeddeasemeneaactivitateinvertazic,catalizndhidroliza zaharozeinglucozifructoz. Biosinteza celulozei Celulozaesteceamairspnditsubstanorganicnatural,creialaplanteirevinpeste50%din cantitateadecarbon.Celulozaesteunpoliglucidpredominantvegetal,nseasegseteilaunele bacteriiichiarnevertebrate. HidrolizacompletacelulozeiconducelaobinereacantitativaDglucozei,iarhidrolizaparial ddiglucidulcelobioza.Acestedatecoroboratecualtecercetrichimiceauduslaconcluziac celulozaesteunpolimerlinearalctuitdinresturideDglucopiranoz,uniteprinlegturi(14) glicozidice.NumrulresturilordeDglucoznmoleculacelulozeiestedepeste3.000,ceeace corespundelaomasmoleculardepeste400.000daltoni.Celulozaesteinsolubilnap. Celulozaarerolstructuralesenialnorganismelevegetale.Moleculeledecelulozformeaz microfibrecarempreuncualtepolizaharide(hemiceluloze,substanepectice)ilignin(polimer
50
formatdinalcooliaromatici)intrnstructurapereteluicelularalplantelor,conferinduirezistenla presiuneainterioaraapeiilasusinereauneigreutimari. Deicelulozaseaflntoateplantele,coninutuleivariazputernicladiferitespeciiiorgane vegetale.Astfel,celulozasegsetenfibreledebumbacnproporiede98%,esenelerinoase 60%incelefoioase4050%. Porninddelacelulozseprepardiverischimbtorideioniculargiaplicaiinbiochimieibiologia molecular.Ceamaimarecantitatedecelulozestefolositlafabricareahrtiei. Cutoatimportanaproblemei,detaliileprivindbiosintezacelulozeinusuntncclarificate. BiosintezacelulozeiesteunprocesdepolimerizarearesturilordeDglucopiranozfolosindca sursderesturideglucozUDPglucoza. Laplanteilabacteriicelulozasesintetizeazcuajutorulcelulozosintetazei,oenzimlegatde membranacelular,celulozaacumulndusencitoplasm.LabacteriaAcetobacterxylinumcelulozo sintetazaestedeasemenealegatdemembranacitoplasmaticdarcelulozasintetizatseobine extracelular.LaalgaPleurochrysiscelulozaseformeaznaparatulGolgifiinddepozitatpesuprafaa celulei. Dinpunctdevederechimiccelulozaprodusdediferiteorganismeesteidentic(fiindunpolimer formatdinresturideglucozlegatentreeleprinlegturi(14)glicozidice).Dinpunctdevedere structuralcelulozaesteunconglomeratdelanuriglucanicearanjatedeomanierspecificpentrua formastructuracristalin.Difereneledintrediferiteleformecristalinedecelulozspecificefiecrui organismproductorsuntdatedelungimealanurilorglucaniceidemoduldeasocierealacestora. Deasemenea,sademonstratccelulozaexistnformecristalineinoncristalineceamai rspnditformfiindaceeacunoscutcacelulozI(formcristalinnaltorganizat). Biosintezacelulozeiimpliccelpuindoustadii,primulfiiindcatalizatdecelulozosintetazi reprezentndformarealanurilorglucanice,iaraldoileastadiufiindceldecristalizarencareintervin ialteproteine. ncazulparticularalbacterieiAcetobacterxylinumaceastaproducecelulozpur.Vitezadesintez estefoartemare(pnla200.000deresturideglucozpesecund).Locurilencarearelocsinteza celulozeisuntconstituitedinporiaranjainliniepesuprafaacelulei.Fiecareporconstncelulozo sintetazmpreuncuproteineaccesorii.Fiecarecomplexdesintezproducelanuriglucanicecare formeazosubfibrilcelulozic.Maimulteastfeldesubfibrileprodusedeunitidesintezalturate formeazomicrofibrilcelulozic. Caleadebiosintezestebinecunoscutlaaceastbacterie.Aceastcaleimplicnprimfaz conversiaglucozeilaglucozo6fosfatcuajutorulglucokinazei.Urmtorulpasestedeconversiea glucozo6fosfatuluilaglucozo1fosfatcuajutorulfosfoglucomutazei.Glucozo1fosfatulesteapoi convertitlaUDPglucozcuajutorulenzimeiUDP:glucozopirofosforilazafolosindUTP.Complexul celulozosintetazicesteactivatdenucleotideciclicecumarfidiGMPciclic.Acestactivatoreste sintetizatdeenzimadiguanilatciclazaiconcentraiaacestuiaestereglatdefosfodiesteraze. Genelediguanilatciclazeiifosfodiesterazeloraufostidentificatecaformndunsinguroperonn genomulbacteriei. CelulozosintetazautilizeazUDPglucozcasubstrat.Formeazpolimerulculegturi(14) glicozidiceprininversareaconfiguraieidelaatomuldecarbon1alglucozei.Lanurileglucanicesunt sintetizatentromanierncareenzimaestestrnslegatdeprodusulpolimericncursulelongrii acestuia. 51
CelulozosintetazadelaArtrobacterxylinumesteoproteinmembranarcuctevaregiuni transmembranare.Seconsidercregiunileglobularealeacesteiproteinesuntimplicatensinteza celulozeiicmecanismuldesintezesteunuldetipacidbaz.Similaritinsecvenaaminoacidic suntcuuneleglicoziltransferaze.Celpuintreiresturideacidasparticaufostgsitecafiind conservatelacelulozosintetaz,lachitinsintetazilasintetazaaciduluihialuronic. nurmacercetrilormodeluldefuncionarealacesteienzimepresupunelegareasimultanadou resturideUDPglucozlasitusulcatalitic(resturileorientatela180unulfadecellalt)iformarea simultansausecvenialadoulegturi(14)glicozidice.Decialungirealanuluisefacecudou resturideglucozsimultanideasemeneasademonstratcelongarealanuluisefacedelacaptul nereductor. Lamomentuldefanuexistdovezicaresaratenecesitateaunuiprimer.Seconsiderciniierea sintezeicelulozeisefaceprinformareauneiunitidecelobioznsitusulcataliticalcelulozo sintetazei.
OH CH2OH O
O P OO
O P OO CH2 O N
O CH2OH O
CH2OH O O
UDP-glucoza
+ CH 2OH O
O P OO
O P OO CH2 O N
CH2OH O
UDP-glucoza
CH2OH CH2OH O O
CH2OH O O
O + CH2OH
UDP
UDP
CH2OH O
CH2OH O O
CH2OH O O
CH2OH O O
CH2OH O O
celuloza
52
ncazulplantelorsuperioareabian1996afostidentificatprimagenpentrucelulozosintetaz. AnalizamutantelormaialeslaArabidopsisthalianaieforturilemaripentrusecveniereagenelori genomurilorlamaimulteplanteaconduslaidentificareauneimarifamiliidegenececodeaz glicoziltransferaze.Uneledinacestegenecodeazcelulozosintetazentimpcealtelecodeaz proteinecuactivitatesimilarcelulozosintetazelordarcareproducpolizaharidenecelulozice. Acestestudiicareaudusladescoperirealamaimulteplante(bumbac,porumb,orez,pin,plop,etc.) amaimultorgeneresponsabilepentrusintezacelulozosintetazelorconducctreipotezaexistenei decelulozosintetazespecificepentrudiferiteesuturi. Uniifitohormoniavndfunciireglatoarendezvoltareaplantelor,pot,deasemenea,influenaviteza icalitateasintezeipereilorcelulari.Acidulindolilaceticigiberelinainduccretereaplantelor, procescareestecorelatdirectcusintezaiturnoverulpereilorcelulari.Substaneledetipul colchicineiicumarinei,careafecteazmitozaidepunereamicrofibrelordeceluloznorganismele vegetale,exercitunefectinhibitorasuprabiosintezeicelulozei. Biosinteza hemicelulozelor Alturideceluloznstructurapereteluicelularlaplanteexistpolimerialctuiidinmanozsau manoziglucoz.Desprebiosintezadiferitelortipuridepoliglucide,aparinndhemicelulozelor,se cunoatefoartepuin.Maibinestudiatesuntsistemeleenzimaticececatalizeazsinteza(14) mananuluiporninddelaGDPmanoziformarea(14)glucomanuluiporninddelaUDPmanoz iUDPglucoz:
CH2OH O
CH2OH O O
CH2OH O O
n (1-4)-manan
53
GlicoproteinelecuoligoglucideNlegatesesintetizeaznreticululendoplasmatici,ulteriorsufer procesuldematurarenaparatulGolgi.Biosintezapriioligoglucidiceaacestorglicoproteine cuprindemaimultestadii. Maintiarelocsintezaprecursoruluioligoglucidiclegatcuunderivatlipidic.Componentullipidicn acestprocesestedolicholul,unpoliizoprenolculanlungdeatomidecarbon.Ladiferii reprezentaniailumiivii,structuradolicholuluisemodificndependendenumrultotalal resturilorizopreniceconinute(1721unitiizoprenicenorganismeleanimalei1424nfungii plante).Formaactivadolicholuluiestedolicholfosfatulcareseformeazsubaciuneaenzimei dolicholkinaza,numitsistematicCTP:dolicholOfosfotransferaz(EC2.7.1.108). Precursoruloligoglucidicseleagcudolicholulprintropuntepirofosfatsaufosfat.Att dolicholpirofosfatmonoglucidulctidolicholfosfatmonoglucidulposedaceeaicapacitatede transferalglucidelor,caiNuDPmonoglucidele,deaceeaeipotfuncionacadonorideglucide. DiferenaprincipalntransferulglucidelorcuajutoruldolicholuluiiNuDPmonoglucidelorconstn faptulcderivaiidolicholuluipotacionanmediulhidrofobalmembraneicelulare,ntructconin lanulpoliizoprenichidrocarbonatlung,iarNuDPmonoglucidelenuposedoastfeldecapacitate.
Caleadesintezadolicholpirofosfatoligoglucidelorcuprindectevaetapedeadiieaunitilor monoglucidicelaglicolipidulncreteresubaciuneaglicoziltransferazelorspecificeconducndlao structurmiezcomun.Fiecarerestmonoglucidicesteadugatdeoglicoziltransferazspecific. Dupsintezacompletamiezuluioligoglucidic,roluldolicholpirofosfatuluisemodific,din acceptoreldevinedonoralrestuluiglicozilic,ntructoligoglucidulestetransferatlaazotulamidical unuirestdeasparagindinlanulpolipeptidicalproteineinative. Dolicholpirofosfatuleliberatnurmatransferuluimiezuluioligoglucidiclaproteinesteconvertitn dolicholfosfatsubaciuneauneifosfataze.Aceasthidrolizesteblocatdeantibioticulbacitracin, unpolipeptidciclic.Enzimeleimplicatenreaciiledeglicozilarepotfiinhibatedealtantibiotic interesant,numittunicamicin,careesteunanaloghidrofobicalUDPNacetilDglucozaminei. Tunicamicinulblocheazformareadolicholpirofosfatoligoglucidelorprininhibareasintezei dolicholpirofosfatNacetilDglucozamineidindolicholfosfatiUDPNacetilDglucozamin.Ambele antibioticeaufostdescoperitedatoritabilitiilordeainhibabiosintezapereilorcelulelor bacteriene,procescare,deasemenea,includeparticipareaoligoglucidelorlegatedeunlipid. ntreglicoproteineleNglicozidicesenumrglicoproteinelecunoscutesubnumeledelectine(dela cuvntullatinlegere=aselecta)careaufostevideniatenanimale,planteimicroorganisme. Lectineleposedcapacitateadeafixaideaprecipitastructurileglucidicespecificedepesuprafaa celulelor,ceeacelepermitesseuneasccuantigeneleglicoproteicealecelulelorrespective, determinndastfelaglutinareaacestora.norganismeleanimalelectinelefaciliteazcontactulntre 54
celule.Olectinconinedousaumaimultesitusuridelegarepentrucomponenteleglucidice. Situsuriledelegarealelectinelordepesuprafaauneiceluleinteracioneazcuglucideleetalatepe suprafaaalteicelule.Lectinelepotsaglutinezeeritrocitele,nanumitecazuricuospecificitateaa denalt,nctuneledineleseutilizeazpentrudeterminareagrupelorsanguine.Deosebitde interesantestecapacitatealectinelordeaaglutinapreponderentceluleletumorilorcanceroase. Rolullectinelornplantenuestestabilit,nsacesteglicoproteinepotservicapotenialeinsecticide. Deexemplu,semineledericinsuntdeosebitdebogatenlectinecareprezintomaretoxicitate pentrumajoritateaorganismeloranimale. GlicoproteinelecuoligoglucideOlegate,cumarfimucinasecretatdeglandelesalivaresubmaxilare, serealizeaznaparatulGolgi,prinadiionareaserialaunitilormonoglucidicelacatena polipeptidiccomplet.BiosintezaacestorglicoproteinencepecutransferulNacetilD galactozaminei(GalNAc)delaUDPGalNAclaradicaluldeSersaudeThralpolipeptiduluirespectiv subaciuneaGalNActransferazei.ncontrastcuoligoglucideleNlegate,caresunttransferatelaAsn integratntrosecvenaminoacidicspecific,resturiledeSeriThrOglicozilatenuconstituie prileuneianumitesecvene.GlicozilareacontinucuataareatreptataDgalactozei,acidului sialiciLfucozei,subaciuneaglicoziltransferazelorcorespunztoare. Caexempledeglicoproteinecuresturiglucidicelegateprinintermediuloxigenuluimenionm antigenelegrupelorsanguineABO. Componenteleoligoglucidicealeglicoproteinelorndeplinescroluldemediatoriaiinteraciilorcelul celul. Biosinteza chitinei Chitinaesteunpolizaharidlargrspnditnnaturcareparticiplaformareacarapaceicrustaceelor itegumentelorexterioarealeinsectelor,viermilorimolutelor.Eaintrncompoziiapereilor celulariaifungilor,precumiaimultormicroorganisme.Castructurchimic,chitinaesteunpolimer linear,construitdinresturideNacetilDglucozamin,uniteprinlegturi(14)glicozidice. Chitinasesintetizeazncarapaceanevertebratelor(crabiihomari),ncuticulainsectelor,nfungii unelealge,subaciuneachitinsintetazei,plecnddelaUDPNacetilglucozamin.nafardeacest precursor,chitinsintetazamainecesitunprimersauacceptor. Dupctsepare,mecanismulbiosintezeichitineiesteasemntorcumecanismuldeformarea celulozei.nambelecazuritrebuiesseproductransglicozilareasimultancuinversialegturii glicozidicenlegturaglicozidicapoligluciduluisintetizat.
CH2OH O CH2OH O + UDP
NHCOCH3
CH2OH O O O
CH2OH O
OH
NHCOCH3 NHCOCH3 H3C C O NH
CH2OH O O
CH2OH O O
CH2OH O
OH
NHCOCH3 NHCOCH3 H3C C O NH
n+2
55
Biosinteza acidului hialuronic Acidulhialuronicaparineheteropoliglucidelornumitemucopolizaharidesauglicozaminoglicaniacizi, substaneavndmoleculeleconstituitedinresturideaminoglucidecarealterneazcuresturideacizi uronici.Prinurmare,acidulhialuronicesteunpolimerneomogenncareresturiledeacidD glucuronicalterneazcuradicaliideNacetilDglucozamin.Acidulhialuronicesteconstituentul principalalsubstaneifundamentaleintercelulare,ndeplinindroluldematerialdecimentarea diferitelortipurideesutconjunctiv.Datoritstructuriimacromoleculare,acidulhialuronicformeaz obariercontrainfiltraiilordegermenipatogeniisubstanetoxicenorganismulumanianimal. nbiosintezahialuronatuluiparticipcadonorideresturiglicoziliceUDPglucuronatuliUDPNacetil glucozamina.
56
4. Catabolismul glucidelor
Prinacesttermensenelegtotalitateareaciilorceaulocpentrueliberareaenergieistocateprimar subformdeglucidenurmaprocesuluidefotosintez. Catabolizareaglucidelorareiroluldeafurnizaintermediarinecesaripentruaavealocalteci metabolice. Catabolizareaglucidelorlaorganismeleviipoateavealocattncondiiianaerobectiaerobe.
57
interesantestealamilazeisalivarealcreiintervaldepHdeaciuneestefoartelarg,dela3,8pnla 9,4.Valoareaoptimestensde6,9. Foarteinteresantestecdaclaomiprimateamilazasalivarestefoarteactivlaalteanimale aceastaareoimportanfoartereduscumarfisituaiadelaporc,cineipisicdaridela ierbivore. nesuturilevegetaleexistformediferitealeaceleiaienzimealcrorrolestencneprecizat. Seminelenuconinsauconincantitiinfimedeamilazaceastancepndsfiesintetizatdoar dupmbibareacuapincepereagerminaieideoarecealtfelarpunenpericolrezervelede amidon. amilazaesterspnditlaplantelesuperioareinunelebacteriialegenuluiBacillus.Catalizeaz hidrolizapenultimeilegturi(14)delacaptulnereductorallanurilor(14)glucanicecu formareademaltoz.Dinacestmotivesteconsideratcafiindoexoamilaz.
CH2OH O O CH2OH O 1 4 O CH2OH O O H2O -amilaza CH 2OH O O -maltoza CH 2OH O 1 + 4 CH 2OH O O CH2OH O O CH2OH O OH CH 2OH O O CH2OH O OH
capat nereducator
Deoarecepierderearestuluidemaltozducelaformareaunuinoucaptnereductoractivitatea enzimeicontinudemaimulteori,deobiceipnlaodistande23resturidemaltozfade punctulderamificaie.Amilozaestescindatcompletnmaltoz.Resturileramificatede amilopectinasupracroraesteincapabilsintervinamilazasuntnumitedextrinelimit. Scindarealanurilorpoliglucidicedectreamilazproducefoarterepedeglucidereductoarede aceeaenzimamaiestenumitiamilazzaharogendeosebitdeamilaznumitamilaz lichefiant. Prezenanmediuldereacieaunorsubstaneceneutralizeazresturiletiolice(SH)ducela pierderearapidaactivitiienzimaticeatuturoramilazelor.incazulamilazelorsunt cunoscutelacerealeizoenzimedeasemeneacurolincert. amilazaarecaactivitatecataliticscindarealegturilor(14)glicozidicedelacaptul nereductoralmoleculelordeamidon,glicogenidextrinelorrezultatedinacesteacuformareade moleculedeglucoz.Estelargrspnditlamicroorganisme.
58
CH2OH O O
CH2OH O 1 4 O
CH2OH O O
CH2OH O OH
capat nereducator
CH2OH O + OH Glucoza OH
CH2OH O 1 4 O
CH2OH O O
CH2OH O O
CH2OH O OH
O H 2C O
CH2OH
amilopectin-1,6-glucozidaza / oligo-1,6-glucozidaza
CH2OH O
O
CH2OH O 1 +
6 CH2OH O O
CH2OH O
Degradareacelulozeiesterealizatdectrecelulaz. Celulazaesteoaltenzimcuimportandeosebitpentrucircuitulmaterieinnatur.Celulazaeste oenzimcapabilshidrolizezelegturile(14)glicozidiceexistentencelulozcuformareade celobiozicelodextrine(structurioligoglucidiceasemntoarestructuralcelulozei). Celulazaesteoenzimspecificmicroorganismelor,ntlnitnspeciallacelecetriescpemedii bogatenceluloz.Microoganismelesimbiontedintubuldigestivalrumegtoarelorsaualtermitelor suntexempledesintetizatoridecelulaz. Procesuldehidrolizallanurilor(14)glucanicedincelulozesteunullentdatfiindnalta mpachetarealanurilorcuajutorullegturilordehidrogenceeacefacecaaccesibilitateapunctelor dehidrolizctresitusulactivalenzimeisfieredus.
59
CH2OH O O
CH2OH O O
NHCOCH3 chitina
NHCOCH3
CH2OH O
CH2OH O O
CH2OH O O
CH2OH O +
NHCOCH3
NHCOCH3 n-1
NHCOCH3
NHCOCH3 N-acetilglucozamina
CH2OH O 3 O
COOH O O 1
CH2OH O 3 O
NHCOCH3
COOH O 1
CH2OH O 3 O
COOH O O 1
CH2OH O 3 O
NHCOCH3
NHCOCH3
rezistenapereteluicelular,celulabacterianaflatntrunmediuneprotejatosmotic,selizeaz. Macrofagelesecretcantitimaridelizozimildepoziteazngranulaiilecitoplasmatice,spre deosebiredecelelaltetipuricarelsecretpemsurcelsintetizeaz. Lizozimulsegsetengranulaiileneutrofilelor,macrofagelor,nceluleleepitelialealeglandelor exocrine.Macrofagelesecretconstitutivlizozimul,darratasintezeicretenmacrofageleactivate. NeutrofileleicelulelePanethdepoziteazlizozimulngranulaiilecitoplasmatice. EfectulliticallizozimuluisaevideniatasuprapereteluicelulardeMicrococcuslysodeikticus,lacare mureinareprezintcirca80%dinconinutulstructuriiparietale.Aciunealizozimuluiestemaipuin eficientasuprapereteluibacteriilorGramnegativeidevineposibilduptratamentulcelulelorcu unamestecgeneratorderadicaliactivi(acidascorbic,H2O2). Lizozimulareiefectbacteriostaticprinperturbareafenomenelordeoxidoreducerebacteriani blocheazproceseledecretereidiviziune.Mediulaciddinvacuoladefagocitozareefect bactericid.ValoareapHscadenctevaminute,datoritproduceriiaciduluilacticprinmetabolizarea anaerobaglucozei.LapHacidseactiveazhidrolazeleacidedingranulaii. Lizozimuldinsecreiilelacrimaleidinaltesecreiialeorganismuluiumanareunrolbactericidmenit sprotejeze. glucuronidazaesteoexoglicozidazcarescindeazresturideacidglucuroniciacididuronicdela capetelenereductoarealetetraglucidelorsaudiferitelorpoliglucidececoninacesteresturicumar fidermatansulfatul,condroitinsulfatul,acidulhialuronic.Estelocalizatnlizozomiicti microzomiicelulelormajoritiimamiferelor. Dacetilhexozaminidazaestetotoexoglicozidazprezentnmulteesuturianimale.Eacliveaz legturiglicozidicedintreNacetilglucozaminiNacetilgalactozamindelacapetele nereductoarealeheteropoliglucidelor.Substrateleacesteienzimeincludgangliozideleicondroitin sulfaii,acidulhialuronicidermatansulfaiiicheratansulfaiiIiII. Degradareaoligogucidelorrezultatecaurmareaaciuniienzimelorenumeratemaisuspnla monoglucideliberesefacecuajutorulaltorenzimedintrecarevomaminti: 1.glucozidaza(maltaza)carescindeazlegtura(14)glicozidicnDglucopiranozide, inclusivmaltoz.Rezultdintromoleculdemaltoz2moleculedeDglucopiranoz.Sentlnete nsemine,salivaiintestinulmamiferelor,plantesuperioareiciuperci,bacterii. 2.galactozidaza(lactaza)carescindeazlegtura(14)galactozidicdinlactozcuformarea uneimoleculedeDgalactopiranoziDglucopiranoz.
CH 2OH O O OH
-lactoza
CH 2OH O lactaza
CH2OH O OH
+
CH 2OH O
OH
-D-galactoza Glucoza
H 2O
61
CH 2OH O
CH 2OH CH2OH
O CH2OH
zaharaza
CH2OH
+
OH D-fructoza CH2OH glucoza OH
O zaharoza
H2O
62