Metabolismul amoniacului

1. Ci de formare a amoniacului n celul i n organism

2. Mecanisme de eliminare a NH3

- Rolul acidului glutamic n metabolismul aminoacizilor i al NH3

- Metabolismul glutaminei
- Ciclul ureei
- Metabolismul creatinei i creatininei

NH2

dezaminarea aminoacizilor

N
H

dezaminarea nucleotidelor
purinice

Adenina

DEZAMINAREA
unor compusi
biologic activi

HN
H2 N

N
H

N
Guanina

NH2
N

dezaminarea nucleotidelor
pirimidinice

N
H

Citozina
(2-oxi-4-amino-pirimidina)

glutamin

Formarea
amoniacului
din amide

NH3

asparagin

0,29 mg% n
sngele circulant

din proteine alimentare

Produs
de bacteriile
intestinale
din ureea care ajunge
n tractul gastro-intestinal

=> NH3 + CO2

Mecanisme de eliminare a NH3

1. NH3 se poate elimina prin intermediul unor produi netoxici,
cum este cazul srurilor de amoniu
- petii vieuitoare amoniotelice
- psrile vieuitoare uricotelice (acid uric)
- omul ureotelice (uree)

2. NH3 se poate fixa pe diferii aminoacizi => compui netoxici:

- acid glutamic => glutamin
- acid aspartic => asparagin
- arginin

- alanin

3. NH3 se poate depozita sub forma creatinei i a creatininei

(o alt schem)

Creatina
Creatinina
4

ROLUL CENTRAL AL ACIDULUI GLUTAMIC N

METABOLISMUL AMINOACIZILOR

Este colector (acceptor) universal al gruprilor AMINO

Poate prelua direct i indirect gruparea amino de la majoritatea

aminoacizilor

Poate regenera prin dezaminare oxidativ acidul -ceto-glutaric

care devine apt s accepte gruparea amino

AMINOACID
TRANSAMINAZE

CETOACID

-CETO-GLUTARIC

NADH2

NH3

GLUTAMAT-DEHIDROGENAZA

ACID GLUTAMIC

NAD+ +

H2O

NH3
GLUTAMINA

n esuturi: aminare direct

COOH

COOH

CH2
CH2

NH3

CH2

(NADH + H+) Glutamat-DH

+
NADPH + H

FICAT

HC NH2

COOH

COOH
Acid glutamic

Acid cetoglutaric
O

COOH
CH2

CH2
H2N

NH3

ATP

CH

Glutamin- C NH
2
sintetaza CH
2

CH2
H2N

COOH

ADP

Pi

CH
Glutamina

O
C NH
2
CH2
CH2
H2N

COOH

Acid glutamic

n FICAT:

CH2

(NAD +)
NADP+ + H2O

CH
COOH
Glutamina

COOH

H2O

CH2

GLUTAMINAZA

CH2
H2N

CH

NH3

Ciclul
ureei

COOH
Acid glutamic

METABOLISMUL GLUTAMINEI
TESUTURI
NH3

Acid glutamic
+ATP Glutamin sintetaza

Singe

Singe

ADP + Pi
RINICHI
Glutamina + H2O

Acid glutamic

NH3
NH3 urinar

Acest circuit NU are loc i n

esutul muscular!

FICAT

Glutamina

Glutamina

NH3

H2O

Acid glutamic

FICAT

UREE

Ciclul ureei

Urina

METABOLISMUL GLUTAMINEI
-

Glutamina se formeaz n:

ficat
mucoasa intestinal
rinichi
creier

nu se formeaz n muchi !!

Reacia are loc prin fixarea direct a

amoniacului sub aciunea
glutaminsintetazei din mitocondrie
i cu aport de ATP

Glutamina reprezint transportorul esenial de grupri NH2 de

la esuturile periferice (cu excepia muchiului) la FICAT;

METABOLISMUL GLUTAMINEI
-

Glutamina ndeplinete roluri diverse, n funcie de esut:

La

ficat

glutamina

acioneaz

ca

tampon

pentru

meninerea unor concentraii mici NH3 ; are rol de a menine o

concentraie constant a amoniacului, n perioadele dintre

dezaminri i formarea ureei. Deci are rol de detoxifiant i de
modulator al concentraiei de amoniac liber. Glutamina

sintetizat n ficat este transportat pe cale venoas la alte

esuturi unde va intra n diferite ci metabolice.
-

amoniacul rezultat prin hidroliza glutaminei este eliminat ca

uree la nivel hepatic, i ca sruri de amoniu la nivel renal;
9

METABOLISMUL GLUTAMINEI
-

n mucoasa intestinal glutamina este folosit ca surs de

energie deoarece membranele celulare sunt mai permeabile
pentru glutamin dect pentru acidul glutamic;

La nivel renal glutamina este surs de amoniac, acesta

fiind implicat n reglarea echilibrului acido-bazic; ionii de
amoniu pot substitui Na+ i K+, ce se elimin renal ca sruri,

economisind astfel fondul ionic al organismului;

-

Amoniacul

produs

celulele

tubulare

renale

prin

dezaminarea glutaminei (sau a asparaginei) reprezint

aproximativ 60% din NH3 eliminat la nivel urinar/zi;

-

Deci originea NH3 urinar nu este sangvin, deoarece sngele

conine cantiti foarte mici de NH4+ (maxim 0,3 mg% fr efecte toxice)

10

Ciclul ureei

11

Ciclul ureei (ciclul Krebs Henseleit, 1932) =

principala cale de eliminare a azotului aminic (NH3)
Etapa I Formarea carbamoil-fosfatului
(activarea acidului carbonic)
-

enzima este carbamoilfosfat sintetaza

activatori: Mg2+, acidul N-acetil glutamic

se consum 2 ATP

are loc n mitocondrii esut hepatic

se formeaz din compui anorganici

NAcGlu

COOH
CH2
CH2
NH

HC

CH3

COOH

Reglator allosteric, fr de care

carbamoilfosfat-sintetaza nu este
activ

(NH4+ i HCO3-)
Reacia global este:

NH4++ HCO3- + 2 ATP

O
O

O - + 2ADP + Pi

H2N
O-

Carbamoil fosfat

12

Subetapele sunt:
- Activarea acidului carbonic
O

a)

+ ATP

OH

Activatorii
Enzima
Mg2+

O
C
O

O-

O - + ADP

O-

O-

Fosfocarbonat

-Transferul gruprii NH2

b)

NH4+ + Fosfocarbonat

Pi

O-

H2N

Carbamat

- Activarea carbamatului
O

O
O

c)

C
H2N

+
O-

ATP

C
H2N

O - + ADP

O-

Carbamoil fosfat
13

Etapa II: Formarea citrulinei

Enzimele ciclului ureei
sunt strns reglate,
activitatea lor
crescnd cnd crete
aportul de amoniac
sau aminoacizi la nivel
hepatic (dieta
hiperproteic).

enzima este ornitintranscarbamoilaza (OTC)

(transferaz)

are loc n mitocondrie

enzim reglatoare a procesului

NH2

O
(CH2)3

O
C
H2N

P
O-

Carbamoil fosfat

O-

+ HC

NH3

OTC

C
H2N

Pi

(CH2)3

COO-

Ornitin

NH

Citrulin

HC

NH3

COO-

Citrulina prsete
mitocondria iar restul etapelor
au loc n citoplasm
14

n CITOSOL

Etapa III: Formarea acidului arginin succinic

reacie de condensare
consum de ATP
enzima: arginin succinat sintetaza
O

COOH
COOH

C
H2N

NH
(CH2)3
HC

NH2

H2N

arginin succinat sintetaza

CH

Acid L-aspartic

CH

C
CH2

NH

COOH
AMP + Pi
AMP + PPi

(CH2)3
H2O

COOH
Citrulin

H2N

+ ATP

CH2
COOH

HC

NH2

COOH
Acid arginin succinic

15

Etapa IV: Formarea argininei

Ciclul
KREBS

enzima este arginin succinat liaza

are loc n CITOSOL

COOH

COOH

CH
N
H2N

CH

C
CH2

NH

arginin succinat liaza

HC
COOH

Acid fumaric

COOH
(CH2)3
HC

NH2

COOH
Acid arginin succinic

H2N

NH

NH
(CH2)3
HC

NH2

COOH
Arginin

16

Reintr n ciclul ureei

Etapa V: Formarea ureei
enzima este arginaza

Matrix mitocondrial

are loc n CITOSOL

NH2
H2N

(CH2)3

NH

HC

NH

arginaza

COOH

(CH2)3
HC

NH2
Ornitin

+ H2O

NH2

NH2

COOH

C
NH2

Arginin

NH2

NH3

NH2

Acid aspartic

Uree

n ser: 20 40 mg%
n urin: 20-30 g/ 24 ore

Uree
17

Importana procesului de ureogenez

COMENTARII
- Procesul de ureogenez este o etap de degradare a proteinelor,
ureea fiind considerat produs de catabolism proteic;
- Ureogeneza poate fi considerat i proces anabolic, deoarece n
urma acestui proces rezult anumite biomoleculearginina, ureea,
acidul fumaric

- Este un proces puternic endergonic (consumator de energie), spre

deosebire de celelalte procese catabolice (ale glucidelor i lipidelor)
care sunt generatoare de energie curele de slbire sunt bazate pe

diete proteice;
- n realitate este un proces amfibolic;
- Este un proces ciclic (ornitina reintr n ciclu);

Reacia global:
H2N

2 NH4+ + HCO3- + 3 ATP + H2O

C
H2N

O + 2 ADP + 2 Pi + AMP + PPi

18

Importana procesului de ureogenez

COMENTARII
-Este legat de ciclul Krebs prin intermediul acidului fumaric;

-Dac transformarea NH3 uree, nu este suficient de rapid, acesta va

bloca transformarea acidul -cetoglutaric din ciclul Krebs => blocarea
proceselor

oxidative

(respiraia

tisular)

=>

oxigenare

cerebral

insuficient se explic toxicitatea amoniacului (encefalopatie hepatic);

- n snge: 20 40 mg/dL uree, iar prin urin se elimin 20 30 g uree/24h;
-Cantitatea de uree format depinde de activitatea enzimelor:
carbamoilsintetaza, ornitintranscarbamoilaza (OTC), arginaza.
INSUFICIENA HEPATIC = incapacitatea ficatului de a produce ureea =>

NH3 se acumuleaz n snge;

INSUFICIENA RENAL = incapacitatea rinichiului de a excreta ureea.
19

METABOLISMUL
CREATINEI I CREATININEI

20

Ciclul
ureei
Etapa I: TRANSAMIDINARE
enzima este arginin glicin transamidinaza
are loc n RINICHI
COOH
HC
COOH
H2C

COOH

HC

NH2

arginin glicin
transamidinaza

NH2

(CH2)3
NH

Ornitina

(CH2)3

NH2

NH

Glicocol

C
HN

NH2

Arginin

H2C

COOH

HN

NH2
C
HN

Acid guanidil acetic

21

Etapa II: METILARE

enzima este o metiltransferaz dependent de SAM i FH4
are loc n FICAT
H2C

COOH

metil transferaza
+

NH2

HN
C
NH

Acid guanidil acetic

CH3
(SAM + FH4)

H3C

H2C

COOH

NH2
C
NH

Acid N-metil guanidil acetic

CREATIN

snge

MUCHI
22

Etapa III: FOSFORILARE

enzima este creatin fosfokinaza (CPK)
are loc n MUCHI
ADP + Pi

H3C

H2C

COOH

NH2

H2C

ATP
Creatin fosfokinaz
(CPK)

H3C

NH

~P

NH

OH

OH

NH

Acid N-metil guanidil acetic

CREATIN

FOSFOCREATIN

COOH

FOSFOCREATIN
(rezervor de fosfat macroergic)

ADP

CREATIN

ATP

Activitatea CPK seric crete n infarctul de miocard

Izoenzimele CPK (ex: CPK-MB) au rol diagnostic
Reacia este reversibil !!
CPK mitocondrial e implicat n formarea fosfocreatinei din ATP mitocondrial
CPK citosolic regenereaz ATP din ADP, utiliznd fosfocreatina

23

Etapa IV: Formarea creatininei

are loc n MUCHI

O
H2C

H2C

COOH
deshidratare intramolecular

H3C

H3C

NH2

CREATIN

NH

N
C

C
NH

H2O

NH
CREATININ

(anhidrid)

PLASMA sangvin:
Creatin: 0,2 0,4 mg%
Creatinin: 0,6 1,5 mg%

URIN:
Creatin: 0,06 0,12 g%
Creatinin: 1 2 g%
24

Creatina, fosfocreatina i creatinina

- COMENTARII Sistemul creatin fosfocreatin joac un rol esenial n
metabolismul energetic normal al esutului muscular,
funcionnd ca un sistem reglator pentru concentraia de ATP
CPK

ATP

creatin

fosfocreatin

ADP + Pi

Fosfocreatina este singurul compus cu legturi macroergice pe

care organismul l depoziteaz numai n esutul muscular

Fosfocreatina constituie n muchi o surs indirect de energie

necesar pentru contracia muscular; reprezint forma de

depozitare a energiei, pe seama creia se reface ATP consumat n
cursul efortului muscular

25

Creatina, fosfocreatina i creatinina

- COMENTARII n cursul efortului fizic creatinfosfatul regenereaz ATP printr-o

reacie catalizat de creatinfosfokinaz (CPK = regenerator de ATP

in situ)

Regenerarea ATP pe seama CPK este mai rapid dect formarea

sa n lanul respirator sau din degradarea glucozei

70% din rezervele energetice disponibile n cursul efortului

muscular sunt reprezentate de creatinfosfat

Creatina este convertit neenzimatic n creatinin; creatinina nu

mai poate fi reconvertit la creatinin, fiind excreatat la nivel renal

n condiii fiziologice, creatinina se elimin n mod constant prin

urin (aproximativ 2 g/zi)

26

Creatina, fosfocreatina i creatinina

- COMENTARII Fiind produs aproape exclusiv n muchi, cantitatea de

creatinin format este proporional cu masa muscular

Creatinina este constant n urin, fiind un parametru la care ne
raportm i pentru alte substane eliminate prin urin

Clearence-ul renal reprezint eficiena cu care rinichiul

epureaz plasma

Determinarea clearence-ului de creatinin reprezint o

metod simpl de evaluare a funciei renale i musculare =

msura n care creatininemia este corelat cu debitul de filtrare

glomerular

Adaptarea posologiei la bolnavii cu insuficien renal se

realizeaz n funcie de clearence-ul de creatinin.

27