Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
TRATAT DE VINIFICAIE
(diametre). nmulirea levurilor se face prin nmugurire, mai rar prin sciziparitate
(diviziunea transversal a celulei).
Denumirea levurilor este dat printr-un dublu nume latin: primul
corespunde genului, iar al doilea, speciei. Exemplu Saccharomyces ellipsoideus:
genul este Saccharomyces (ciuperc ce transform zahrul), iar specia este
ellipsoideus (celulele de form eliptic).
Sistematica levurilor. Levurile din vinificaie, aparin n cea mai mare
parte ciupercilor din clasa Ascomycotina i apoi ciupercilor din clasa
Deuteromycotina (Fungi imperfeci). Cele din clasa Ascomycotina formeaz spori,
pe cnd Fungii imperfeci nu formeaz spori.
Cercetrile au stabilit c levurile implicate n vinificaie, aparin la 36 specii
sporogene i 31 specii asporogene. O clasificare a levurilor implicate n vinificaie
este prezentat n tabelul 5.4. Levurile sporogene sunt cele mai importante i
aparin familiei Saccharomycetaceae, care se subdivide n mai multe genuri:
Saccharomyces, Hansenula, Hanseniaspora, Debaryomices, Nadsonia, Candida.
Levurile asporogene aparin familiei Cryptococcaceae, care se subdivide n
genurile: Cryptococcus, Torulopsis, Brettanomyces, Kloeckera.
Tabelul 5.4.
Clasificarea levurilor din vinificaie
A. LEVURI
SPOROGENE
Ascomycotina
Familia
Saccharomycetaceae
Clasa
Importana
practica
SchizosacMetabolizeaz
SchizosacSchizo. pombe
charomycodae charomyces
Schizo.malidevorans acidul malic din
must
SaccharoAu rolul cel mai
SaccharoS. ellipsoideus
mycodae
myces
S. oviformis sau important n
fermentaia
bayanus
S.
baili
sau zaharurilor din
must (fermentaia
acidifaciens
alcoolica)
S. chevalieri
S, uvarum
S. rosei
Levuri patogene,
Pichia
P. fermentans
P. membranifaciens formeaz pelicule
groase la
vini
suprafaa vinului
Levuri patogene,
Hansenula
H. anomala
care produc
H. subpelliculosa
floarea vinului
Levuri peliculare.
Debaryomices D. hansenii
Nu manifest
D. plafii
nsuiri
fermentative
Levuri patogene,
Candida
C. vini
care produc
C. intermedia
floarea vinului
C. valida
Nadioidae
Nadsonia
N. allongata
HanseniaParticip la
H. uvarum
spora
fermentaie n
H. osmophila
prima parte, apoi
H. valbyensis
sunt eliminate
Levuri patogene.
SaccharoS. ludwigii
Se ntlnesc pe
mycoides
struguri i n must
Subfamilia
Genul
Specia
303
Familia Subfamilia
8
8
o
Q.
Genul
Cryptococcus
Specia
Cr. albidus
Cr. laurenii
Brettanomyces Br. bruxellensis
Br. saenko
Br. inte'rmedius
Torulopsis
T. stellata
T. candida
T. dattila
Kloekera
K. apiculata
K. africana
K. magna
Rhodontorula Rh. glutinis
Rh. mucilaginosa
Importana practic
Se ntlnesc n vinurile
bolnave.
Se ntlnesc cu
predilecie pe strugurii
botritizai
Predomin pe struguri
i la nceputul
fermentaiei alcoolice
Prezent redus pe
struguri
Fiecare specie de levuri este reprezentat prin mai multe sue (tulpini).
Sua fiind descendena pur obinut plecnd de la o singur celul, cu nsuiri
valoroase recunoscute. Ansamblul suelor care aparin aceleiai specii, constituite
rasa sau varietatea de levuri, cu caractere fiziologice comune. Prin ncruciarea a
dou sue din aceeai specie, se obine o linie fertil de levuri. La radul su,
specia, fiind costituit din mai multe sue fertile.
Diferenierea speciilor i suelor de levuri se face dup aptitudinea lor de a
fermenta i asimila diferite zaharuri, la care se adaug galactoza i meliobioza. Un
principiu pur teoretic, deoarece strugurii nu conin galactoza i nici meliobioza.
Exemplu:
Specia de levuri
Galacatoz
Meliobioza
Saccharomyces ellipsoideus
Saccharomyces bayanus
Saccharomyces uvarum
Interpretare
Asimileaz galactoza i nu
asimileaz meliobioza
Nu asimileaz galactoza i nici
meliobioza
Asimileaz att galactoza ct
i meliobioza
TRATAT DE VINIFICAIE
Randamentul
n
alcool
la
fermentare
cel
mai
ridicat:
16,8317,00
g
zahr
pentru
un
grad
alcoolic.
Puterea
alcooligen,
definit
ca
fiind
concentraia
maxim
de
alcool
pe
care
o
poate
realiza
ntr-un
must
bogat
n
zaharuri,
atinge
17%
voi.
alcool.
Activeaz
la
temperaturi
cuprinse
ntre
18
i
25C
i
este
Figura 5.22. - Saccharomyces
rezistent la dioxidul de sulf (250-300
ellipsoideus (Hansen-Dekker)
mg/l S02 total).
Dup intrarea mustului n
fermentaie, levuriie din specia Saccharomyces ellipsoideus pun imediat stpnire
pe mediu, ca la sfritul fermentaiei sau dup o sulfitare puternic numrul de
celule s scad foarte mult. n vinificaie, cele mai multe sue de levuri
selecionate sunt din specia Saccharomyces ellipsoideus.
Saccharomyces oviformis (Osterwalder). Denumit i Saccharomyces
bayanus, muli microbiologi considerd-o ca fiind o su din Saccharomyces
cerevisiae. Forma celulelor este uor oval mai rar rotund, dimensiunile (4-7) x
(5-9) U- Se distinge printr-o putere alcooligen ridicat, depind uneori 18% voi.
alcool. De aceea este denumit i "/evwra de finisare" a fermentaiei alcoolice.
Rezist la doze mari de anhidrid sulfuroas 300 mg/l S0 2 total i 100 mg/l S0 2
liber. Provoac refermentarea vinurilor dulci mbuteliate. Suele de
Saccharomyces oviformis se folosesc la producerea vinurilor spumante
(fermentaia secundar a vinului n butelii sau n acratofoare).
Saccharomyces bailii (Linder). Este cunoscut i sub denumirea de
Saccharomyces acidifaciens. Aceast specie de levuri se ntlnete mai mult pe
strugurii botritizai. Celulele sunt de form oval, dimensiunile 10 x 6 (J.. Puterea
alcooligen mijlocie, njur de 10% voi. alcool. Rezisten foarte mare la dioxidul
de sulf, pn la 400 mg/l S02 total. Poate declana refermentarea vinurilor dulci
mbuteliate.
Saccharomyces chevalieri (Guillermond). Aceast specie de levuri se
ntlnete mai mult la vinurile roii. Se aseamn morfologic i sub raportul
activitii fermentative, cu Saccharomyces ellipsoideus.
Saccharomyces uvarum (Beijerinck). Aceast specie de levuri se afl n proporie
mai redus pe struguri i n must. Are o evoluie lent la fermentare i putere
alcooligen mijlocie. Produce n schimb cantiti mari de feniletanol n vin.
Saccharomyces rosei Se ntlnete cu predilecie pe strugurii botritizai i
prezint celule mici, aproape rotunde (6,5-5,5 u). Are putere alcooligen ridicat,
de pn la 14% voi. alcool. Produce o fermentaie lent a musturilor bogate n
zaharuri.
Speciile de levuri asporogene. Participarea lor n procesul de fermentaie
alcoolic a mustului este slab. Speciile cele mai importante sunt urmtoarele:
305
cs^
<?\
Levurile
apiculate
sunt
cele
care
ncep
fermentaia,
datorit
capacitii
extraordinare
de
nmulire.
Fiind
slab
alcooligene
duc
fermentaia
pn
la
4-5%
voi.
alcool,
dup
care
sunt
eliminate
de
Saccharomyces
ellipsoideus.
Randamentul
de
fermentare
este
cel
mai
slab,
21-22
g
zaharuri
pentru
un
grad
alcoolic.
Sunt
sensibile
la
dioxidul
de
sulf,
nct
dozele
de
10-15
g/hl
de
S0 2
folosite
la
Figura 5.23 - Kloeckera apiculata
limpezirea mustului, contribuie la
(Reess-Janke)
eliminarea lor din procesul de
fermentaie. Torulopsis stellata. Se ntlnete
cu predilecie pe strugurii mucegii. Este o levur cu celule mici i se
caracterizeaz printr-o putere alcooligen mijlocie, de 10-11% voi. alcool.
Succesiunea levurilor n procesul de fermentaie. In mod natural, nceputul
fermentaiei alcoolice a mustului este asigurat de ctre levurile asporogene,
speciile Kloeckera apiculata i Torulopsis stellata, care produc primele cantiti
de alcool (4-6% voi.). Foarte rapid mustul intrat n fermentaie este invadat de
levurile sporogene din genul Saccharomyces, denumite i levuri fundamentale
(Dan Valentina, 1999). La sfritul fermentaiei, specia de levuri dominant este
Saccharomyces oviformis cu putere alcooligen mare (levur de finisare a
vinului).
5.4.1.2. Caracterul Killer la levuri
A fost pus n eviden de ctre Bevan E. A. i Makower M. (1963) i se
refer la capacitatea levurilor de a produce i elibera n mediu proteine toxice
(factorul K), capabile s ucid levurile sensibile. Analizate din acest punct de
vedere, levurile se grupeaz n trei fenotipuri: fenotipul T-Killer (n traducere
levuri ucigae); fenotipul 5-sensibile i fenotipul TV-neutre. Levurile Killer sunt
capabile s omoare levurile sensibile, nct acestea nu pot exista dect n prezena
levurilor Killer. Levurile neutre nu sunt omorte de levurile Killer, dar sunt
inactivate i nu mai pot aciona asupra levurilor sensibile. Determinarea genetic
a caracterului Killer a evideniat existena unor determinani citoplasmatici
alctuii din acizi ribonucleici, similari particulelor virale.
Caracterul Killer a fost pus n eviden la levurile din genurile:
Saccharomyces, Pichia, Candida, Torulopsis i Debaryomices. Testarea
306
___________________________________________________TRATAT DE VINIFICAIE
Cea mai mare parte din energie se pierde sub form de cldur. Alimentaia cu
azot a levurilor se realizeaz prin dezaminarea oxidativ a acizilor aminici din
must pn la cetoacizi, nsoit de decarboxilarea lor:
+ H90
RHCCOOH------+-R- - - -CH2OH + NH3 + C02
NH
2.
Dezaminarea se poate realiza i prin cuplarea a doi aminoacizi diferii
printr-o oxidoreducere:
R - HC-COOH+R-HC-COOH------ R-CO-COOH + R-CH.,-COOH + 2 NH, + H,0
li
2
3 2
NH2
NH2
In cantiti foarte mici, aminoacizii pot fi asimilai i direct de ctre levuri.
5.4.1.4. Factorii care influeneaz activitatea levurilor
Activitatea de fermentare a levurilor este influenat de foarte muli factori
fizici, chimici i biologici. Cei mai importani sunt urmtorii:
Temperatura. Levurile sunt mai rezistente la temperaturile sczute, dect
la temperaturile ridicate. Sub form de spori sau n stare uscat, levurile rezist
pn la-200C; la temperaturi < 10C, levurile sunt incapabile s se nmuleasc.
Rezistena fa de temperaturile ridicate (cldur) este diferit, dup cum
ele se gsesc n stare uscat sau umed. n stare umed, pe msur ce temperatura
se apropie de 20C nmulirea levurilor se accelereaz, maximum fiind atins la
30C; peste 35C, activitatea levurilor scade rapid i exist riscul ca fermentaia s
se opreasc. Pe rezistena slab a levurilor n stare umed la cldur, se bazeaz
pasteurizarea i sterilizarea vinului. n stare uscat, levurile rezist pn la 115120C.
Dependena levurilor fa de temperatur se exprim printr-un minim,
optim i maxim termic, care caracterizeaz fiecare specie i su de levuri. Exist
levuri "calde" sau termofile care fac fermentarea mustului la temperaturi de 3035C i levuri "reci"" sau criofile care fac fermentarea la temperaturi de 7-12C.
Activitatea levurilor crete ca intensitate pe msur ce se mrete temperatura,
optimul fiind situat pn la 35C; peste 40C levurile i nceteaz activitatea.
308
TRATAT DE VINIFICAIE
TRATAT DE VINIFICAIE
TRATAT DE VINIFICAIE
(figura 5.27).
324
TRATAT DE VINIFICAIE
Instalaia este format din 3 recipiente cilindrice din inox sau material
plastic, capacitate 300-350 litri. Recipientul superior A servete la sterilizarea
mustului i este prevzut cu o serpentin prin care se introduce alternativ abur
fierbinte sau ap pentru rcirea mustului sterilizat. La baz, recipientul respectiv
este prevzut cu dou robinete prin care se face legtura cu celelalte recipiente B,
i B2. Recipientele B, i B2 sunt echipate cu plnii de fermentare.
Instalaia se folosete astfel: mustul sulfitat i limpezit se introduce n
recipientul A unde este sterilizat. Dup rcirea sa, se deschide robinetul ctre unul
din cele dou recipiente B, i B2, care se umple cu must sterilizat pn la 3/4 din
capacitatea lui. Mustul este apoi inoculat cu levurile selecionate. Cnd densitatea
mustului intrat n fermentaie a ajuns la 1,030 nseamn c maiaua de levuri
selecionate este gata i poate fi folosit. Concomitent cu folosirea maielei din
primul recipient, se introduce must sterilizat n al doilea recipient i se inoculeaz
cu levurile selecionate. In acest fel, tot timpul campaniei de vinificaie se asigur
maiaua de levuri selecionate necesar.
Pregtirea maielei din levurile locale. n lipsa culturilor de levuri
selecionate, se pregtete maiaua de levuri locale (levurile valoroase din
microbiot epifit a strugurilor). Se procedeaz n felul urmtor:
- Cu cteva zile nainte de nceperea vinificaiei se recolteaz circa 10-15
kg de struguri sntoi i bine maturai de la soiurile care predomin n
podgorie. Strugurii sunt desciorchinai, apoi zdrobii n condiii de
laborator, iar mustuiala rezultat este sulfitat cu o doz mare de S0 2 (30
mg/kg). Mustuiala astfel obinut, va conine rasele de levuri locale i n
special levurile Saccharomycetae rezistente la S02.
Separat, din strugurii aceluiai soi, se realizeaz mustul care urmeaz s fie folosit
ca mediu pentru nmulirea levurilor. Mustul obinut este sulfitat cu 10 mg/l S0 2 i
limpezit. Dup limpezire este introdus ntr-o damigeana curat de sticl, pn la
1/4 din volumul acesteia. Damigeana se astup cu un dop de vat steril i se ine
ntr-un spaiu obscur, bine aerisit, la temperatura de 18-20C. Dup 1-2 zile,
mustul va intra n fermentaie.
- Urmeaz introducerea mustuielii sulfitate care conserv rasele locale de
levuri, n mustul intrat deja n fermentaie, pn cnd nivelul lichidului
din
325
damigeana ajunge la 3/4 din volumul acestuia. Prin adausul treptat de mustuial
sulfitat, se ndeprteaz levurile slbatice (apiculate din biota epifit) i se
favorizeaz rmnerea n must numai a levurilor Saccharomycetae cu nsuiri
valoroase.
Cnd ntreaga mas de mustuial din damigeana se afl n plin
fermentaie, maiaua de levuri locale se consider realizata i poate fi trecut la
nmulire pentru a se putea administra n vasele de fermentare. .
5.4.3.2. Umplerea vaselor de fermentare cu must
Fermentarea mustului se face n budane de stejar, capacitate 2000-10000
litri; cisterne din beton cilindrice, cu suprafa mare de pierdere a cldurii prin
. iradiere, capacitate 10-25 tone; cisterne din inox verticale capacitate 20-25 tone,
cu echipamente de rcire a mustului n timpul fermentaiei; cisterne din polistif
orizontale, capacitate 2-15 tone.
Mustul limpede la care s-au aplicat eventualele corecii de compoziie, este
introdus cu pompa n recipientele de fermentare. Umplerea recipienilor cu must
nu se face complet, lsndu-se la fiecare "golul de fermentare'" n care se adun
spuma rezultat prin degajarea de C0 2. Golul de fermentare reprezint 10-20% din
capacitatea recipientului, socotit dup adausul maielei de levuri selecionate; 10%
la vasele mici de fermentaie, 15-20% la cisterne. Se evit astfel revrsarea
spumei i a mustului din vas, n timpul fermentaiei.
Pentru izolarea mustului din vasele de fermentare de contactul cu aerul,
vasele sunt echipate cu plnii de fermentare (fierbtori sau alte dispozitive
similare) (figura 5.28).
Plniile
de
fermentare
sunt
confecionate
din
lut
ars,
aluminiu,
material
plastic
i
sunt
fixate
n
vrana
vasului
prin
intermediul
unor
manoane
din
cauciuc
sau
din
plut.
Pentru
o
mai
bun
etaneitate,
se
parafineaz
sau
se
lipete
de
jur
mprejurul
vranei
o
past
de
lut
argilos.
n
plnia
de
fermentare
se
introduce
ap,
apoi
se
pune
capacul
plniei,
creindu-se
astfel
o
supap
hidraulic
ce
mpiedic
ptrunderea
aerului
n
Figura 5.28. Fixarea plniei de fermentare recipient i n acelai timp permite
la vase
degajarea C02 care se formeaz la
fermentarea mustului. Prin folosirea
plniilor de fermentare, se menine n interiorul vasului o atmosfer permanent
de C02. Prin aceasta se limiteaz oxidarea acidului sulfuros din masa mustului i
se mpiedic formarea unor cantiti mari de acetaldehid n vin.
326
TRATAT DE VINIFICAIE
de producere a vinurilor de tip oxidativ, cum sunt vinurile de Xeres-Spania, JuraFrana, Sherry-Australia. Sunt levuri facultativ peliculare, capabile s dezvolte la
suprafaa vinului o pelicul format dintr-un amestec de specii de levuri, n care
predomin levurile alcooligene din speciile Saccharomyces cerevisiae i
Saccharomyces bayannus (oviformis). Dup terminarea fermentaiei alcoolice
normale, aceste levuri trec n stare pelicular, cnd pot fixa direct azotul din aer i
desfura o puternic activitate oxidativ. Prin oxidarea alcoolului etilic n
proporie de 0,3-1,2%, rezult cantiti mari de acetaldehid n vin (198-370
mg/l). Alturi de acetaldehid se formeaz i cantiti apreciabile de acetali (16-48
mg/l) i de esteri (250-369 mg/l), care dau vinurilor un gust i miros caracteristic.
In cadrul I.C.V.V. Valea-Clugreasc, au fost selecionate suele de levuri
peliculare autohtone: Gros-gofrat, Subire-gofrat i Saccharomyces oviformis-231
care se folosesc n vinificaie (Lepdatu V. i colab., 1974). Astfel de levuri s-au
333
selecionat i n centrul viticol Ciumbrud, unde s-au obinut primele tipuri de vin
pelicular prin maturirare biologic n localuri nenclzite. (Csvossy Gh., 1993).
Folosirea levurilor care controleaz aciditatea. n timpul fermentaiei
alcoolice se suprapun mai multe procese biochimice: degradarea zahaurilor prin
fermentaia glicero-piruvic la nceputul fermentaiei, dup care metabolizarea
zaharurilor de ctre levuri este orientat fie spre formarea alcoolilor, fie spre
formarea acizilor (ciclul Krebs). Suprapunerea acestor procese, ofer levurilor
aptitudini diferite de degradare a acizilor din must sau de sintez a unor acizi
intermediari, succinic, citramalic).
Suele de levuri Schizosaccharomyces efectueaz fermentarea mustului cu
degradarea acidului malic, reducnd astfel aciditatea vinului; suele de levuri din
genul Saccharomyces au aptitudini de a forma acizi n cantitate de pn la 2 g/l de
vin, mrind astfel aciditatea vinului.
Procedeul tehnologic recomandat. In vederea reducerii excesului de
aciditate, dup deburbarea mustului, acesta se nsmneaz cu levuri din genul
Schizosaccharomyces care n decurs de 3-4 zile reduc aciditatea malic cu pn la
7-8 g/l. Odat eliminat excesul de acid malic, se face nsmnarea cu levuri
Saccharomyces cerevisiae n doze de 20 g/hl pentru a se instala fermentaia
alcoolic normal.
Pentru conservarea aciditii mustului, se recomand centrifugarea acestuia
n vederea eliminrii levurilor Schizosaccharomycetae i instalarea levurilor din
genul Saccharomyces care conserv acidul malic.
Fermentaia "super-quatre" (supra-patru). Acest procedeu de fermentaie
a fost iniiat n Frana de ctre Semichon L. (1926). Const din introducerea n
mustul supus fermentrii, de vin nou, astfel c n mediul de fermentaie s existe
de la nceput o concentraie alcoolic de 4% voi. alcool. n acest fel, levurile
apiculate slab alcooligene sunt eliminate din procesul de fermentaie, iar
transformarea zaharurilor din must se realizeaz numai de ctre levurile
Saccharomycetae, Procedeul de fermentaie "supra-patru" s-a folosit mult vreme
n vunificaie, pn cnd s-au generalizat tehnologiile de fermentare bazate pe
culturile de levuri selecionate.
Maceraia pelicular prefermentativ. Este un procedeu tehnologic nou,
pentru mbuntirea calitii vinurilor albe i roze. Dup ce strugurii sunt zdrobii
i desciorchinai, mustuiala este sulfitat uor cu 3-5 g/hl S0 2 i supus unui
proces scurt de macerare (8-12 ore), nainte de declanarea fermentaiei alcoolice.
Maceraia se face n czi sau cisterne la temperatura mediului ambiant de 1518C. n acest timp mustul extrage din pielie aromele primare, polizaharidele,
vitaminele, taninurile fine, substanele minerale i alte componente. Se obin
vinuri cu mult fructuozitate (arome de soi specifice) i extractive.
Fermentaia prin maceraia carbonic. Procedeul const din fermentarea
strugurilor ntregi (nezdrobii sau parial zdrobii) n cisterne speciale nchise, sub
atmosfer permanent de C02 (Flanzy M., 1935). n aceste condiii lipsite de
oxigen, strugurii sufer o fermentaie intracelular prin aciunea enzimelor
334
TRATAT DE VINIFICAIE
Dup trecerea de faza tumultoas a fermentaiei, se reduce golul de fermentare la vase, deoarece
vinul tnr este deosebit de sensibil la oxidare, datorit bogiei sale n enzime.