BIOELECTRICITATE

BIOELECTRICITATE

1. Potenialul de repaus al celulelor

2. Potenialul de aciune celular

3. Propagarea potenialelor de aciune

4. Determinarea experimental a PR i PA

5. Sinapsele neuronale

6. Noiuni de bioexcitabilitate
Potenial de
repaus (PR)
diferen de potenial
electric ntre faa
extern i cea intern a
membranei celulare n
repaus

( 50 mV) (100) mV
 c 1 > c2
Potenialul de
PK+ >PCl- difuzie
JK+ > JCl-
[K+] crete n (2) care devine
pozitiv n raport cu (1)

diferen de potenial: potenial
de difuzie

accelerarea Cl- , frnarea K+
PCl PK RT c1
E = E1 E2 = ln
stare staionar PCl + PK zF c 2
ecuaia Planck-Henderson
 PCl- = 0
Difuzeaz doar ionii de K+
La echilibru: ntre cele dou compartimente o
diferen de potenial dat de relaia lui Nernst:

E =
RT K + 1
ln +
[ ]
zF K 2 [ ] apa

Compartimentul 2 devine ncrcat pozitiv n

raport cu compartimentul 1

Diferena de potenial rmne constant dup

instalarea echilibrului pentru K+
Diferena de concentraie a celor dou specii
ionice

dezechilibru osmotic

flux de ap nspre compartimentul 1

 Echilibrul Donnan

Iniial, n (2) ap distilat

Membran selectiv permeabil

pentru A-Z

ntre cele dou compartimente

se stabileste echilibrul Donnan:
[K ] = [Cl ]
+
1

2
=r
[K ] [Cl ]
+
2

1

RT [K ] +
RT [Cl ]
E = 1
= 1
1 > 2
F
ln
[K ] +
2 F
ln
[Cl ]

2
 (1)KCl, A-z anioni proteici nedifuzibili
(2)NaCl, Na+ nedifuzibil

fibra muscular

[K ]
+
=
[Cl ]

= 30 > 1
[K ] [Cl ]
in ex
+

RT [K ]
ex in

[Na +
] = 14,5 E = ln
+
ex

[Na ] [K ]
ex
+
+ F in
in
 PR al celulei se poate calcula teoretic
Goldman-Hodgkin-Katz

P [C ] + P [A ]
Ci
+
i ex Ai

i in
RT
E =
P [C ] + P [A ]
ln i
+
i

F Ci i in Ai i ex
i i
PK = PCl = 1 i PNa = 0,02

E =
RT
ln
[
PK K +] + PNa Na [ ]
+
+ PCl Cl [ ]

= 84mV
P [K ] [Na ] [Cl ]
ex ex in
+ +
F K in
+ PNa in
+ PCl ex
Circuitul electric echivalent pentru descrierea PR

Bistrat lipidic izolator

Abistrat ~200 Acanale-ionice
Capacitatea electric a membranei
celulare reflect proprietatea membranei
de a menine o ncrcare electric de
semne contrare pe cele dou fee ale ei
CM ~ 1 F/cm2
EK, ENa, ECl, potenialele de echilibru
electrochimic ale diferiilor ioni (Nernst)
RK, RNa, RCl, rezistenele canalelor specifice n
serie cu E
baterie de trei elemente legate n paralel

E K E Na ECl
+ +
RK R Na RCl g K E K + g Na E Na + g Cl ECl
Em = =
1 1 1 g K + g Na + g Cl
+ +
RK R Na RCl
 Potenialul de aciune celular
PA - o depolarizare trectoare a membranei celulare prin care
interiorul celulei devine mai puin negativ dect n stare de repaus

scderea diferenei de potenial de-o parte i de alta a membranei
celulare
Exist i PA hiperpolarizante (celulele receptoare retiniene)

PA este produs de un stimul sau poate fi rezultatul unei activiti

celulare spontane

Propagarea PA = impulsul nervos

Potenialele de aciune pot fi

locale PA-l

de tip tot-sau-nimic PA-tn

 Poteniale de aciune locale
(PA-l)
Apar n urma aciunii stimulilor subliminari

Constau ntr-o depolarizare redus a membranei,

membranei
proporional cu amplitudinea stimulului

Propagare decremental, pe distane scurte

Amplitudinea PA-l se face exponenial cu distana

 Potenialele de aciune de
tip tot-sau-nimic (PA-tn)
Apar n urma aciunii unui stimul de prag

Interiorul celulei devine pozitiv

Are amplitudine constant

Se propag pe distane MARI,

MARI nedecremental,
nedecremental cu
viteze mari

Amplitudinea potenialului de vrf,

vrf pragul i
viteza de propagare sunt caracteristici ale celulei
Fazele potenialului
de aciune
1. prepotenialul (c)
2. potenialul de vrf
faza ascendent (d)
faza descendent (e)

3. postpotenialele
pozitiv (f)
negativ (g)

Din punct de vedere funcional se disting

dou perioade refractare:
1. perioada refractar absolut, celula nu
poate fi excitat, n faza ascendent i
parial n faza descendent
2. perioada refractar relativ, excitabilitatea
este redus
 Acomodarea la stimul
Aciunea unui stimul de durat acomodarea

manifestat prin creterea pragului de excitabilitate

Acomodarea poate fi

rapid (fibrele din nervii motori)

lent (unele fibre senzitive)

Pentru depolarizare local superioar pragului de

excitabilitate fibra prezint un rspuns repetitiv

realizarea codificrii n frecven a amplitudinii stimulilor

 Mecanismul de producere a unui potenial de aciune
local (PA-l)
n membrana celular exist canale de scurgere (leak) pentru Na+ i K+
N canale K > > N canale Na
n stare de repaus, porile externe ale canalelor de Na+ sunt nchise, iar cele interne deschise
Stimulii de intensitate mic determin deschiderea portilor externe a unui numr mic de canale de Na+

Cand potentialul ajunge la 60 mV se deschid porile canalelor de K+ sensibile la voltaj.
Ionii de K+ ies din celul, se restabilete valoarea potenialului de repaus.
 La depirea pragului de detonare ptrunderea n avalan a ionilor
de Na accentuarea depolarizrii membranei deschiderea mai
multe pori externe ale canalului de Na (feed-back pozitiv).
Valoarea potenialului celular = zero interiorul atinge + 30 mV
PA-tn
Distrugerea celulei este mpiedicat de dou evenimente:
inactivarea canalului de Na.
deschiderea porilor canalelor de K
 Etapele care duc la apariia PA-tn
Ptrunderea n avalan a ionilor de Na+ interiorul celulei se pozitivizeaz

La o anumit valoare a potenialului celular (+30 mV) se produce inactivarea

canalelor de Na+ i deschiderea porilor canalelor de K

Deschiderea porilor canalelor de K+ dependende de voltaj - proces mai lent

Ionii de K+ prsesc celula n sensul gradientului revenire la PR

Faza ascendent a PA-tn:

intrarea n avalan a ionilor
de Na+

Faza descendent: ieirea

ionilor de K+ din celul
 PA-tn sunt produse numai de celulele
nervoase, musculare i glandulare

Capacitatea tuturor celulelor vii de a

rspunde prin PA-l: iritabilitate

Proprietatea de a rspunde prin PA-tn:

excitabilitate.
Metode electrofiziologice

Msurarea
potenialelor celulare
i a curenilor
transmembranari cu
ajutorul
microelectrozilor
 Msurarea PR
direct
cu ajutorul microelectrozilor de sticl

pipete obinute prin tragere la cald, cu

vrfuri mai mici de 0,5 m

umpluti cu o soluie de electrolit (KCl 3M)

Se msoar diferena de potenial ntre

microelectrodul introdus n celul i un
electrod de referin, nepolarizabil (de
calomel).

indirect
prin utilizarea unor substane fluorescente
ionizate (tiocianatul)
 Msurarea PA

tehnica
potenialului fixat
(voltage-clamp)

tehnica patch-
clamp
Tehnica voltage-clamp
 Tehnica patch-clamp

William J. Crumb and Icilio Cavero, PatchClamp Studies of Human Cardiac Ion Channels in the Evaluation of
Cardiac Electrophysiological Effects of Compounds

Current Protocols in Pharmacology, 2003
 Propagarea PA

PA curenii locali Hermann

Pentru apariia unui nou PA trebuie ca intensitatea curenilor n zonele marginale s
depeasc pragul de detonare
Distana la care amplitudinea PA se reduce la jumtate prin cderile de tensiune pe
rezistene este:

Rm
d
Ri
Rm - rezistena electric transmembranar pe unitate de lungime a membranei
Ri rezistena pe unitatea de lungime a lichidului intracelular.
Rezistena lichidului extracelular este neglijabil.
 n funcie de tipul fibrelor,
propagarea se face n mod diferit

prin fibrele nemielinizate are loc propagarea

recurent (din aproape n aproape) prin cureni

locali ce traverseaz ntreaga suprafa a membranei

axonale i se nchid prin axoplasm i lichid interstiial

(spre centru n exterior i invers n interior)

 Prin fibrele
mielinizate,
propagarea are loc
prin conducerea
saltatorie.

Mielina izolator

Prin nodurile
Ranvier se face
contact electric
intre mediul
extracelular i cel
intracelular
 Viteza de propagare a impulsului
nervos poate crete
Rm
prin micorarea rezistenei lichidului d
Ri
intracelular
n fibrele nervoase i musculare gigante (1,5 mmm
diametru: calmar - axon gigant) l
R=
S
prin mrirea rezistenei transmembranare
prin mielinizare tecile de mielin sunt electric
izolatoare i astfel crete rezistena transmembranar
 Sinapsele neuronale
Realizeaz contactul ntre doi neuroni sau
dintre un neuron i o celul muscular sau
glandular

Sinapsele pot fi:

chimice

electrice
 Spaii: presinaptic, sinaptic (20-50 nm
lime), postsinaptic (contine receptori i
Sinapsa chimic
canale ionice)

Sosirea unui PA-l (depolarizare)

fuzionarea cu membrana presinaptic a

membranelor unor vezicule

coninutul este expulzat prin exocitoz n

spaiul sinaptic

semnalul electric PA este tradus n

semnal chimic

Sinapsa chimic introduce o ntrziere de

minimum 0,3 ms, uneori chiar i 5 ms.

Transmisia informaiei este

unidirecional
Sinapsa electric Funcioneaz fr
mediatori chimici
Spaiu sinaptic: 2 - 4 nm
Variaia de potenial la
nivelul membranei
presinaptice induce o
variaie similar n
membrana postsinaptic
Transmiterea este direct
Foarte rapid
Nu se poate face o gradare
n intensitate
Transmiterea poate fi
bidirecional
 Clasificarea sinapselor din punctul de
vedere al efectului pe care l produc
excitatorii
determin depolarizarea
celulei, producnd n
membrana postsinaptic un
potenial excitator postsinaptic
(EPSP)
ex: jonciunea
neuromuscular, mediator
acetilcolina

inhibitorii
determin hiperpolarizarea
celulei, producnd un potenial
inhibitor postsinaptic (IPSP)
ex.: legarea GABA de
receptorii GABAA duce la
deschiderea canalelor de clor
operate de ligand
hiperpolarizarea celulei
 Bioexcitabilitatea
Excitantul

Excitarea

Excitaia celular

Excitabilitate

Reobaza

Cronaxia

Relaia lui Weiss

i = a/t + b