Informaţii generale
Progresul tehnologic a furnizat laboratoarelor instrumente noi de cuantificare a anticorpilor IgE alergen-specifici
atât în ser cât şi pe suprafaţa bazofilelor.
Alături de determinarea în ser de IgE alergen-specifice prin metode automate standardizate au fost dezvoltate şi
teste funcţionale care mimează in vitrocontactul dintre alergeni şi celulele responsabile de apariţia simptomelor
alergice şi care pun astfel în evidenţa sensibilizarea de tip imediat. Printre acestea se numără şi testul de
degranulare a bazofilelor (BDT) cu măsurarea sulfidoleucotrienelor eliberate.
Până nu demult s-a considerat ca bazofilele, care reprezintă doar un procent de 0.5% din totalul leucocitelor din
sângele periferic, sunt doar forme circulante ale mastocitelor cu semnificaţie minoră. Date recente indică însă
faptul că bazofilele sunt clinic relevante şi deţin alături de mastocite un rol esenţial în răspunsul alergic de tip
imediat. Prima orientare către studii funcţionale ale bazofilelor a fost testul de eliberare a histaminei, însă
beneficiul său clinic a fost controversat datorită sensibilităţii şi specificităţii reduse.
Testul efectuat în laboratorul nostru are o sensibilitate ridicată şi, spre deosebire de măsurarea IgE specifice în
ser, determină şi anticorpii IgE specifici legaţi de bazofile.
Mai mult, ca test clasic de “provocare”, BDT reprezintă singurul instrument diagnostic in vitro pentru studierea
unui număr mare de reacţii adverse la aditivi alimentari şi medicamente (anestezice, antiiflamatoare
nesteroidiene, antibiotice) care nu sunt IgE mediate (aşa-zisele pseudo-alergii în care se produce cel mai adesea
o degranulare celulară directă).
Avantajul este ca la BDT nu intervin mediatori preformaţi ca în cazul testului de eliberare a histaminei; în cazul
existenţei unei sensibilizări, leucotrienele sunt sintetizate abia după contactul cu alergenul. De asemenea testul
nu este alterat printr-o eliberare toxică a mediatorilor preformaţi3;4;5.
Reacţii adverse la aditivi alimentari
Aditivii sunt substanţe adăugate alimentelor sau preparatelor farmaceutice în scopuri multiple, vizând:
Numeroşi aditivi au fost incriminaţi în producerea unei palete largi de reacţii adverse, de la letargie până la astm
sever şi anafilaxie. Următoarele substanţe au fost în mod extensiv analizate: coloranţi sintetici, sulfiţi,
monosodium glutamat (MSG), aspartam şi benzoaţi. Astfel, un studiu recent efectuat în Germania a estimat o
prevalenţă a reacţiilor adverse la aditivi alimentari de 0.18%.
Unii aditivi alimentari sau farmaceutici au fost implicaţi în producerea astmului profesional, urticariei cronice sau
dermatitei atopice. Cu toate acestea, multe din aceste reacţii nu au fost confirmate prin proceduri diagnostice
adecvate. Acest lucru se datorează faptului că aditivii sunt în general molecule mici care determină manifestări
clinice similare alergiei de tip imediat însă prin mecanisme non-IgE, cum ar activarea sistemului complementului
şi eliberarea directă a histaminei şi leucotrienelor din leucocite (vezi figura).
BDT reprezintă un instrument preţios pentru diagnosticul pseudo-alergiilor la aditivi alimentari.
https://www.synevo.ro/alergeni-testul-de-degranulare-a-bazofilelor-bdt/ 1/9
16.12.2018 Alergeni–testul de degranulare a bazofilelor (BDT) | Synevo
https://www.synevo.ro/alergeni-testul-de-degranulare-a-bazofilelor-bdt/ 2/9
16.12.2018 Alergeni–testul de degranulare a bazofilelor (BDT) | Synevo
https://www.synevo.ro/alergeni-testul-de-degranulare-a-bazofilelor-bdt/ 4/9
16.12.2018 Alergeni–testul de degranulare a bazofilelor (BDT) | Synevo
Multe dintre reacţiile adverse atribuite substanţelor de contrast se datorează hipertonicităţii acestora care
facilitează eliberarea de histamină din mastocite şi bazofile. Substanţele mai noi, care nu conţin iod, au un
potenţial mai redus de pseudo-alergii, dar pot asocia şi acestea reacţii severe, uneori mediate IgE.
Aspirina şi celelalte AINS înrudite pot fi implicate în două sindroame de hipersensibilitate non-alergică:
astmul indus de aspirină: rinosinuzita eozinofilică cronică cu polipoză nazală şi astm persistent;
urticarie/angioedem declanşate de aspirină.
Aceste reacţii acute non-alergice sunt iniţiate ca urmare a inhibiţiei ciclooxigenazei-1 de către AINS. Ambele
sindroame se caracterizează la nivel biochimic prin alterări profunde ale biosintezei eicosanoizilor, predominant
prin producţia excesivă de cisteinil-leucotriene şi trebuie să fie net diferenţiate de alte reacţii adverse la AINS prin
mecanism alergic. Reacţiile alergice se produc de obicei la un singur medicament antiinflamator sau la cateva
medicamente cu structură chimică similară.
Reacţiile pseudo-alergice la anestezice locale sunt întâlnite mai ales în practica stomatologică. Cele mai
alarmante sunt episoadele de sincopă vaso-vagala care pot mima anafilaxia. Paresteziile şi ameţelile pot fi
explicate pe baza toxicităţii farmacologice a preparatelor, iar simptomele sunt mai frecvente la pacienţii cu
intoleranţă la medicamente1.
Având în vedere mecanismele menţionate, testul BDT poate avea un rol important în depistarea reacţiilor
pseudo-alergice la medicamente. In laborator este disponibilă o paletă de alergeni standard care poate fi pusă în
contact cu bazofilele pacientului:
Antibiotice Analgezice
Amoxicilina Aspirina/Acid acetilsalicilic
Ampicilina Diclofenac
Cefazolim Ibuprofen
Cefuroxim Acid mefenamic
Ciprofloxacin Metamizol
Claritromicina Paracetamol
Penicilina G Fenilbutazona
Penicilina V Propifenazon
Rifampicina
Sulmetoxazol
Trimetropim
Tetraciclina
La acestea se adaugă posibilitatea de a trimite o tabletă sau o fiolă dint-un medicament pentru a fi testat3.
https://www.synevo.ro/alergeni-testul-de-degranulare-a-bazofilelor-bdt/ 5/9
16.12.2018 Alergeni–testul de degranulare a bazofilelor (BDT) | Synevo
imposibilitatea efectuării unui test cutanat datorită pericolului unei reacţii anafilactice;
în cazul suspiciunii clinice de alergie de tip imediat, deşi Ig E specifice şi testul cutanat sunt negative.
– pe lângă alergenii standard pot fi testate şi preparate native (tablete sau fiole trimise de medici/pacienţi)3
Avantajele testului BDT
https://www.synevo.ro/alergeni-testul-de-degranulare-a-bazofilelor-bdt/ 7/9
16.12.2018 Alergeni–testul de degranulare a bazofilelor (BDT) | Synevo
Menţiune: performanţa testului este similară cu cea a testului de activare a bazofilelor cu determinarea prin
citrometrie în flux a markerului de degranulare CD633.
Pregătire pacient – se va evita administrarea de inhibitori ai degranulării mastocitare cât şi corticoterapia cu 2-3
săptămâni înaintea recoltării probei3.
anticorpi monoclonali anti-IgE umane (controlul pozitiv) care leagă anticorpii IgE de pe suprafaţa
bazofilelor şi activează eliberarea de mediatori;
o soluţie tampon (controlul negativ) pentru estimarea eliberării bazale spontane de mediatori.
După incubare celulele sunt centrifugate, iar leucotrienele eliberate în urma stimulării bazofilelor se cuantifică
printr-o tehnică ELISA în supernatantul rezultat. Nivelul net de mediatori eliberaţi este calculat apoi prin scăderea
cantităţii de leucotriene eliberate spontan din nivelul de mediatori indus de alergeni sau de controlul pozitiv.
Rezultatul se exprimă în pg/mL3;5.
Interpretarea rezultatelor
1. Rezultat negativ
< 200 pg/mL leucotriene după stimulare cu alergeni = nu există sensibilizare de tip imediat faţă de
preparatele testate.
2. Rezultat pozitiv
>200 pg/mL leucotriene după stimulare cu alergeni = sensibilizare de tip I sau pseudo-alergie.
3. Rezultat neconcludent
Apare în situaţia în care nu s-au obţinut criteriile de validare fie a controlului pozitiv (răspuns inadecvat <200
pg/mL leucotriene după stimulare cu anti-IgE), fie ale controlului negativ (nivel bazal crescut al eliberării de
mediatori). In condiţiile în care recoltarea şi transportul probei s-au efectuat în condiţii adecvate, lipsa de validare
a testului se poate datora:
– tratamentului cu stabilizatori ai membranelor mastocitelor şi bazofilelor;
– unui nivel crescut al eliberării spontane de mediatori ca urmare a unui proces alergic activ;
– pacientul este un “non-releaser” (bazofilele nu răspund la stimulare – 10-15% dintre subiecţi)3;5.
https://www.synevo.ro/alergeni-testul-de-degranulare-a-bazofilelor-bdt/ 8/9
16.12.2018 Alergeni–testul de degranulare a bazofilelor (BDT) | Synevo
https://www.synevo.ro/alergeni-testul-de-degranulare-a-bazofilelor-bdt/ 9/9