Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
FACULTATEA DE HORTICULTURĂ
SPECIALIZAREA HORTICULTURĂ
TEHNOLOGIA VINULUI I
CURS
CAPITOLUL I
STRUGURII - MATERIA PRIMĂ PENTRU
VINIFICAȚIE
1.1.1 CIORCHINII
Ciorchinii îndeplinesc rolul de schelet al strugurilor şi asigură legătura între coarda
butucului – prin intermediul lăstarului – şi boabe.
La strugurii pentru vin prezintă interes compoziţia, masa şi volumul ciorchinilor,
elemente cu incidenţă asupra nivelului calitativ al viitorului produs finit, a randamentului la
vinificaţia primară şi a tehnologiei de elaborare a diferitelor tipuri de vin.
Morfologic, ciorchinele este alcătuit din peduncul, axul principal (rahis, care se găseşte
în continuarea pedunculului), ramificaţii de ordinul I, II, III şi pedicele, pe care sunt prinse
boabele. Pedicelul este ultima și cea mai scurtă ramificație, la capătul căreia se găsește bobul,
fixat pe o porțiune lățită, numită burelet. Proporţiile de ciorchini la maturitatea tehnologică a
strugurilor se situează între 3 şi 5% din masa strugurelui.
1.1.2 BOABELE
Bobul, fructul propriu-zis al viţei de vie, din punct de vedere botanic este o bacă. La un
strugure, mărimea, numărul, forma, modul de aşezare, desimea şi culoarea boabelor diferă în
funcţie de soi, podgorie, condiţiile naturale, agrotehnica aplicată, gradul de maturare ş.a.
Boabele de struguri se compun din trei mari părţi (unele cu subdiviziuni) şi anume:
pieliţă, miez sau pulpă şi seminţe (figura 1.2). Proporţiile acestora variază în limite foarte largi,
în funcţie de soi, condiţiile ecologice şi agrotehnica viticolă aplicată. Astfel, valorile
procentuale se prezintă astfel: pieliţe 8–20 %; miez 75–85 %; seminţe 2–5 %.
Fig. 1.2 – Alcătuirea bobului bobului de
strugure (după Conde C. ș.a.,2007)
1.1.2.1 Pieliţa sau epicarpul reprezintă învelișul extern al bobului și este constituită din
două diviziuni anatomice distincte: epiderma şi hipoderma.
Epiderma este constituită dintr-un strat de celule aplatizate, cu pereţii externi
îngroşaţi, cu dimensiuni de 9–12 μm lungime și 7–10 μm grosime. În perioada de dezvoltare a
boabelor, aceste celule cunosc o creştere tangenţială, adică paralelă cu suprafaţa, ajungând la
unele soiuri de struguri până la 30 μm (Blanke M., 1990). La suprafaţa epidermei se află un
strat protector – cuticula.
Cuticula protejează bobul de leziuni mecanice şi de o transpiraţie excesivă și reține
celulele de microorganisme aduse de vânt sau de insecte, care ajung în contact cu mustul după
zdrobirea strugurilor. Grosimea cuticulei variază în funcţie de soi şi de condiţiile naturale, între
1,5 şi 4,0 μm, astfel încât rezistența la agenți patogeni variază și ea. În cuticulă sunt înfipte
înclinat formaţiuni columnare care, la rândul lor, constituie pruina
Pruina – stratul ceros de pe suprafaţa cuticulei – conferă boabelor de struguri un aspect
atrăgător, brumat care este, în acelaşi timp, şi un criteriu de calitate al fructului viţei de vie.
Hipoderma are în componenţa ei 9–11 straturi de celule, situate sub epidermă,
aplatizate, cu pereți îngroșați. În timpul coacerii, grosimea celulelor hipodermei rămâne
aproape constantă (8–11 μm), iar printr-o creştere tangenţială lungimea lor ajunge până la 33–
45 μm (Engel M., 1980). Când sunt tinere, celulele hipodermei sunt fotosintetice dar după
intrarea în pârgă plastidele își pierd clorofila și amidonul și încep să acumuleze picături
uleioase. Aceste plastide modificate sunt situri de sinteză și stocare a compușilor terpenici și
norizoprenoizi. Majoritatea vacuolelor celulelor hipodermice acumulează și fenoli flavonoizi,
în special antociani, în straturile cele mai îndepărtate, la soiurile cu struguri negri (Jackson
R.S., 2008).
2.1.2.2 Miezul, cunoscut și sub numele de pulpă, reprezintă partea cărnoasă a bobului
și cea mai importantă sub aspect tehnologic și este alcătuit din mezocarp şi endocarp.
Mezocarpul deţine 75–78 % din greutatea bobului. Celulele acestuia au pereţii subţiri şi în
timpul maturării cresc atât tangenţial cât şi radial, la unele soiuri ajungând până la 180–200 μm
grosime şi 140–180 μm lungime.
Mezocarpul este format din 11–16 straturi de celule pline, aproape în totalitate, cu suc
vacuolar, din care rezultă mustul. Acest suc vacuolar conţine, în proporţii însemnate, zaharuri,
acizi organici, substanţe minerale, substanţe azotoase, vitamine, enzime ş.a. În figura 1.3 se
prezintă structura celulelor mezocarpului.
Endocarpul este un strat fin de celule care delimitează lojele în care se găsesc semințele.
1 – pereţi celulari;
2 – citoplasmă;
3 – vacuolă;
4 – nucleu.
1.1.2.3 Seminţele la soiurile pentru vin reprezintă 2,5–6 % din greutatea boabelor.
Numărul şi mărimea lor depind de soi şi condiţiile naturale în care se află plantaţia viticolă.
Boabele de struguri pentru vin conțin, de regulă, 2–3 semințe (în cazuri foarte rare, 1 sau 4)
semințe, influențând mărimea bobului (tab. 1.1). Existența unei relații puternice între conținutul
de semințe și dimensiunea boabelor sugerează ipoteza că dezvoltarea semințelor, mediată de
regulatorii de creștere ai plantelor, conduce dezvoltarea inițială și, prin urmare, dimensiunea
finală a boabelor (Friend A.P. ș.a., 2009).
Pe baza proporţiilor şi a raporturilor dintre diferitele părţi ale strugurelui şi ale bobului
de strugure se stabilesc, prin calcul, următorii indici tehnologici:
greutatea boabelor
I.s. – Indicele de structură =
greutatea ciorchinilor
I.b. – Indicele bobului = numărul de boabe la 100 g struguri
greutatea miezului
I.c.b. – Indicele de compoziţie al bobului = greutatea tes cov inei
greutatea mustului
I.r. – Indicele de randament = greutatea tes cov inei
1.2 IMPORTANȚA OENOLOGICĂ A PĂRŢILOR
DIN CARE SE COMPUN STRUGURII
Acizii organici (tartric, malic, citric ş.a.) se găsesc mai mult sub formă liberă. O mică
parte se găsesc însă şi sub formă semilegată sau salificată.
Substanţele azotate sunt reprezentate atât de azotul mineral cât şi de azotul organic.
Azotul mineral se găseşte, mai cu seamă, sub formă de săruri de amoniu cum sunt: sulfatul de
amoniu şi fosfatul de amoniu, constituenţi uşor asimilabili de către levuri în timpul fermentaţiei.
Substanţele minerale sunt reprezentate de cationi şi anioni. Dintre cationi potasiu
deţine primul loc, fiind urmat de calciu şi magneziu. Dintre anioni cel fosforic se află în
conţinuturi importante.
Vitaminele şi enzimele, cu rol de biocatalizatori, sunt biosintetizate de către celulele
mezocarpului.
2.1.1 CRAMA-PIVNIŢĂ
Este construcţia vinicolă tradiţională amplasată, de obicei, în pantă sau într-un bot de
deal, care are principalele secţii sunt suprapuse (etajate), pentru a asigura astfel un flux
tehnologic gravitaţional. Cele trei nivele suprapuse sunt: secţia de prelucrare a strugurilor (sus),
secţia de fermentare şi păstrare temporară a produselor (mijloc) şi pivniţa propriu-zisă sau secţia
de maturare şi învechire a vinurilor (jos) (fig. 2.1).
Secția de prelucrarea strugurilor se află la suprafața solului, fermentarea se realizează
într-o sală semiîngropată (2/3 sub nivelul solului), iar maturarea şi învechirea se realizează într-
un spațiu total subteran. Astfel de construcţii prezintă o serie de avantaje: economie de teren,
uşurinţă în prelucrarea strugurilor şi manipularea produselor prin gravitație, realizarea în spaţiul
de fermentare a unor temperaturi favorabile desfăşurării procesului de transformare a mustului
în vin, iar în sala de maturare şi învechire a unor temperaturi constante, de 10 0C până la 120C
(optime pentru derularea corespunzătoare a fazelor respective).
În schimb, acest tip de construcție implică cheltuieli mai mari de construcție, izolații,
găsirea unui teren adecvat. Deși investiția inițială este mult mai mare în cazul unei astfel de
construcții, ea permite economii importante de energie în timpul exploatării.
2.1.3 HRUBELE
Aceste spaţii, numite încă şi beciuri, sunt construite în pământ, sub formă de galerii
boltite, de diferite lungimi (uneori de ordinul kilometrilor) şi late de 3–5–6 m. Ele au fost şi
sunt destinate, în special, pentru maturarea vinurilor în vase de lemn sau pentru învechire la
sticle. La adâncimea de 18–22 m, temperatura rămâne constantă, pe tot parcursul anului, fiind
egală cu temperatura medie anuală din zona respectivă, care în România este de aproximativ
100C (Cotea D.V. ş.a., 1982).
Constructiv, hrubele se realizează în două moduri: prin săparea galeriilor sistem tunel
sau minerit (Panciu, Drăgăşani, Odobeşti) şi prin decopertare (Valea Călugărească, Banu
Mărăcine-Craiova, Cotnari). Cele vechi sunt unităţi de sine stătătoare, iar cele recent construite
se ataşează la construcţiile de tip combinat vinicol.
Fig. 2.2 – Părţile componente ale unui vas din lemn (după Gheorghiță M. ș.a., 2006)
1 – mantaua butoiului; 2 – fundul butoiului; 3 – vrană; 4 – dop;
5 – portiţă; 6 – cerc de capăt; 7 – cercuri de gât; 8 – cerc de mijloc
Budanele sunt vase de lemn a căror capacitate se situează între 20 şi 300–400 hL. Ele
prezintă, în general, aceleaşi părţi componente ca şi butoaiele, dar fundurile pot fi atât rotunde,
cât şi ovale. În plus, în doaga centrală a unuia din cele două funduri se află o deschidere închisă
(în timpul folosirii), prin intermediul unui dispozitiv, cu o uşiţă sau clapă. Prin uşiţă se
efectuează evacuarea drojdiei şi curăţirea recipientului. În una din doagele laterale care se
încheie cu cea a uşiţei, exact la mijloc, se găseşte o deschidere rotundă, pe unde se introduce şi
se scoate vinul, numită vrană. Vrana şi orificiul din uşiţă se închid cu dopuri din lemn tare
(strunjite paralel cu fibrele lemnoase), de formă tronconică. Cele de vrană au lungimea de 16–
18 cm, din care 8–10 cm rămân în afara vasului şi 2–4 cm trebuie să intre în vin.
În cramă şi pivniţă, budanele se aşează pe podvale confecţionate din lemn moale şi fixate
cu pene tot din lemn. Budanele sunt folosite în cele mai importante etape ale procesului de
elaborare a vinurilor de calitate superioară şi anume: fermentare, stocare, maturare şi chiar
învechire.
Butoaiele și budanele au dezavantajul că folosesc numai 25–30 % din spaţiul de
construit, atunci când sunt dispuse pe un singur rând, însă indicele de folosire a spaţiului poate
fi îmbunătăţit prin suprapunere. De asemenea, sunt scumpe și durata lor de viață nu este lungă.
În plus, deoarece butoiul se învechește, ar putea fi contaminat cu microorganisme nedorite, cum
ar fi bacteriile acetice sau levurile Brettanomyces, care pot produce concentrații semnificative
de fenoli volatili cu mirosuri neplăcute (Suarez R. ș.a., 2007).
Butoaiele de stejar au fost mult timp folosite în maturarea vinurilor, dar și a altor băuturi
alcoolice, datorită capacității lor remarcabile de ameliorare a calității, stabilității și însușirilor
organoleptice ale băuturilor păstrate în aceste recipiente. Maturarea în vase lemn este o etapă
fundamentală în producerea vinurilor de calitate, ameliorând considerabil aspectele fizice
(culoare, stabilitate) și însușirile senzoriale (aromă, gust).
Unii dintre acești compuși aromatici sunt în lemnul proaspăt, în timp ce alții sunt
generați de tratamentul termic al lemnului în timpul încălzirii de îndoire și de ardere. Această
încălzire determină o piroliză limitată a fracțiunilor hemicelulozice și ligninice ale lemnului.
Compușii produși prin piroliză și alții sunt extrași din lemn și aduc complexitate la vinuri și
băuturi spirtoase (Young O. ș.a., 2012).
Până în prezent au fost identificați 200 de compuși extractibili din lemn sunt, în vinurile
și băuturile spirtoase învechite în butoi. Molecula whisky-lactonă cu doi izomeri săi (cis și
trans), este recunoscută ca fiind una dintre cele mai importante molecule. Acești compuși
contribuie la senzațiile de "lemnos", "vanilie", "nucă de cocos" (Wilkinson K. ș.a., 2013).
Căzile sunt vase de lemn cu formă tronconică şi capacitate de 2000–5000 L. Ele sunt
folosite pentru macerare-fermentare în tehnologiile de obţinere a vinurilor aromate şi roşii.
Vasele tronconice cu deschiderea mai mare decât fundul sunt cunoscute sub numele de tocitori.
Ele s-au folosit şi se mai folosesc încă pentru limpezirea şi deburbarea mustului şi păstrarea
tescovinei.
Benele sunt recipiente de lemn cu formă tronconică a căror deschidere este mai mare
decât fundul. Ele au capacitate 500–600 L şi servesc la transportul strugurilor.
Materialul lemnos din care se confecţionează recipientele menţionate mai sus trebuie să
îndeplinească unele condiţii, stabilite atât prin practica vinicolă îndelungată, cât şi prin cercetări
oenologice sistematice.
Lemnul de stejar este utilizat în dogărie datorită proprietăților sale mecanice (duritate,
flexibilitate), compușii săi extractibili și porozității sale la aer, favorizând oxidările (Puech J.L.
ș.a., 1994). Pentru confecționarea butoaielor folosite în industria vinicolă se folosesc diferite
specii de stejar:
- stejarul alb american (Querqus alba),
- stejarul pedunculat (Querqus robur = Querqus pedunculata),
- gorunul (Querqus sessiliflora),
- stejarul spaniol (Querqus pyrenaica).
Aceste specii de stejar sunt folosite pentru fabricarea doagelor de butoaie, care sunt
uscate în aer. În timpul sejurului în aer liber, condițiile meteorologice (ploaie, soare) produc
modificări importante asupra proprietăților fizice (densitate, contracție), mecanice
(compresiune, încovoiere) și biochimice asupra constituenților lemnului. Uneori este folosită
uscarea artificială într-un cuptor, care nu este însă recomandabilă. Din contră, o uscare naturală,
urmată de uscarea într-un cuptor are mai multe avantaje. Doagele care servesc construcției de
butoaie. În Europa, îndoirea se face peste un foc de lemne, în Statele Unite, cu abur. Diferențe
profunde există, de asemenea, în pregătirea finală a butoaielor. În Europa, după etapa de îndoire,
dogarii procedează la operații de încălzire. Trei încălziri diferite pot fi aplicate pentru butoaie:
prăjire prăjită ușoară, medie și puternică. Încălzirea puternică este oprită la începutul reacțiilor
exotermice, adică spre 270–280°C, pentru că la temperaturi mai mari există pericolul de
inflamare a butoaielor (Puech J.L. și Maga J., 1994).
Recipientele din beton se numesc, de obicei, cisterne şi au capacităţi cuprinse între 100
şi 3000 hL (uneori chiar de 8000–10000 hL). Ele se pot clasifica în funcţie de formă (cubice,
paralelipipedice, cilindrice), mărime (mici, mijlocii, mari şi foarte mari), amplasare faţă de
nivelul solului (supraterestre – în spaţiu închis sau în aer liber şi subterane), mod de realizare
(monolit sau prin asamblare de prefabricate), sistem constructiv (ca unităţi separate sau bloc de
celule), după destinaţie (deburbare, fermentare, păstrare, cupajare, egalizare, omogenizare ş.a)
(Cotea D.V., 1985).
În interiorul construcţiei vinicole, sunt preferate recipientele de formă cubică şi
paralelipipedică, întrucât acestea prezintă cel mai bun indice de folosire a spaţiului (până la 70–
75 %).
Cisternele de beton corespund destul de bine vinificaţiei de tip industrial, mai puţin
pentru fermentaţie. În timpul procesului de metabolizare a glucidelor, datorită cantităţilor mari
de must şi slabei radiaţii a căldurii prin peretele de beton, temperatura de fermentaţie poate
atinge niveluri deosebit de periculoase.
Pentru evitarea unor influenţe negative asupra compoziţiei vinului şi a însuşirilor
organoleptice, se aplică o serie de tratamente și operații (Gheorghiță M. ș.a., 2006):
- Căptuşirea (acoperirea) suprafeţelor interioare ale cisternelor de beton, pentru a evita pierdea
acidității vinului prin salificarea, mai ales a acidului tartric, cu calciul din beton. În urma acestei
reacţii, vinul se tulbură, iar gustul devine fad şi cu nuanţe leşioase. Totodată, conţinuturile în
fier şi alte elemente cresc, atingând valori în măsură să determine şi altfel de transformări
nedorite. Căptuşirea pereţilor interni ai cisternelor poate fi realizată prin: acidifiere, acoperirea
cu plăci de sticlă, aplicarea unor materiale bituminoase, parafinare, folosirea maselor plastice.
- Acidifierea, prin aplicarea pe pereţii de beton a unei soluţii de acid tartric cu o concentraţie de
10–25 %, în trei reprize, cu un timp de uscare după fiecare intervenţie. Prin reacţia dintre acidul
tartric şi calciu se formează un strat protector de tartrat de calciu, cu proprietăţi izolatoare şi
rezistenţă satisfăcătoare. În acest scop se poate folosi şi acidul sulfuric, ca soluţie cu
concentraţia de 5–10 %, care în contact cu pereţii formează sulfat de calciu (CaSO4), sare
insolubilă cu un bun rol protector.
- Izolarea cu parafină, se foloseşte mai rar, datorită slabei rezistenţe a stratului la acţiunea unor
constituenţi ai vinului şi a temperaturii ridicate. La adaptarea acestui procedeu de căptuşire se
vor folosi: parafină cu punctul de topire cuprins între 58 şi 60 0C şi ulei de parafină (în proporţii
de 2/3 şi respectiv 1/3), obţinându-se un produs cu un punct de fuziune coborât.
Recent, a apărut un nou vas de beton, de tip "ou". Forma de ou ar induce crearea de
mișcări browniene în lichid numite mișcări "vortex", și menține în mod constant drojdiile în
suspensie, ca "batonajul natural". Betonul "respiră", microporozitatea sa ar permite elaborarea
de vinuri care beneficiază de virtuțile unei oxigenări blânde similară cu aceea a butoaielor de
stejar fără nota lemnoasă. Cele mai multe molecule odorante căutate au un indice mai mare de
percepție în vinul maturat în oul din beton, în special cele asociate cu un descriptor de fructe ca
butanoatul și hexanoat de etil dar, de asemenea, și citronelolul (Uscida Nathalie, 2012).
Vinificaţia modernă presupune şi o gamă largă de maşini, utilaje şi ustensile. Ele diferă
în funcţie de scopul propus, materialele din care sunt construite, capacitatea de producţie ş.a. În
secţiile complexului de vinificaţie, diferitele maşini şi utilaje se amplasează de aşa manieră
încât, pe lângă respectarea cu rigurozitate a fluxului tehnologic, să se creeze şi o armonizare
între diferitele faze şi verigi ale procesului de producţie, formând așa-numitele linii
tehnologice.
Maşinile şi utilajele vinicole trebuie să îndeplinească următoarele condiţii:
- Cele care compun o linie tehnologică să prezinte capacitate de producţie egală între
ele, pentru a fi asigurat un flux armonios, continuu, fără ştrangulări;
- Să fie de tip mobil, pentru a fi uşor de adaptat, de înlocuit şi transferat;
- Cele de vinificaţie primară să prezinte o productivitate ridicată, pentru a face posibilă
scurtarea duratei de vinificare şi încadrarea lui în momentele optime de recoltare pentru fiecare
soi şi direcţie de producţie;
- Să prezinte un grad înalt de mecanizare şi automatizare şi să nu producă risipă de
energie în procesul de lucru;
- Materialele din care sunt construite să fie rezistente atât la şocuri mecanice, cât şi la
acţiunea corosivă a unor constituenţi ai mustului şi vinului;
- Să nu influenţeze negativ compoziţia şi însuşirile organoleptice ale produselor
vinicole.
În industria vinicolă există linii tehnologice pentru vinificarea în alb, vinificarea în roşu
şi aromat condiţionare, îmbutelierea etc.
CAPITOLUL III
CULESUL, TRANSPORTUL ŞI PRELUCRAREA
STRUGURILOR ÎN VEDEREA OBŢINERII MUSTULUI
Pentru obţinerea mustului, din care prin fermentaţie rezultă vinul, strugurii trebuie să
fie mai întâi prelucraţi, folosind în acest scop mijloace tehnice adecvate. Principalele trăsături
ce caracterizează tehnica modernă de prelucrare a strugurilor, sunt rapiditatea, randamentul
sporit în must, calitatea mai bună a acestuia, diminuarea pierderilor şi micşorarea cheltuielilor
de producţie în condiţiile unei ridicate productivităţi.
În unităţile vinicole de tip industrial prelucrarea strugurilor se realizează cu maşini şi
instalaţii moderne care acţionează în flux armonizat, alcătuind ceea ce numim, în mod curent,
linii tehnologice de vinificare primară. În funcţie de felul strugurilor şi categoriile de vinuri ce
urmează a se obţine, în sectorul vinicol se întâlnesc, de obicei, două tipuri de linii: linii pentru
vinificarea în alb şi linii pentru vinificarea în roşu şi aromat.
Industria vinicolă modernă acordă o mare atenție perfecționării caracteristicilor tehnice
și performanțelor utilajelor destinate prelucrării strugurilor, astfel încât pe piață există o mare
diversitate de utilaje. De aceea, la proiectarea unei linii tehnologice de vinificare, trebuie
cunoscute bine caracteristicile utilajelor, echipamentelor și instalațiilor care o compun și să fie
adecvate în raport de volumul recoltei de prelucrat. Fiecare utilaj trebuie să aibă o capacitate de
lucru corelată cu a celor dinainte sau din urma sa, astfel încât să se evite atât situațiile când
unele utilaje nu fac față fluxului de recoltă, cât și cele în care unele utilaje sunt
supradimensionate și lucrează mult în gol.
Liniile tehnologice de vinificare în alb trebuie să permită realizarea următoarelor verigi:
recepţia cantitativă a producţiei de struguri; deversarea strugurilor şi stocarea temporară a lor
în buncăre; zdrobirea şi desciorchinarea strugurilor, cu obţinerea mustuielii; pomparea
mustuielii în instalaţiile de scurgere şi evacuarea ciorchinilor; separarea cât mai rapidă a
mustului ravac; transportarea boştinei eliberată de ravac şi introducerea ei în instalaţiile de
presare; presarea boştinei pentru separarea restului de must şi evacuarea tescovinei; prelucrarea
mustului pe fracţiuni s-au asamblat; pomparea mustului prelucrat (limpezit, deburbat, corectat)
în recipientele de fermentare.
Liniile tehnologice pentru prelucrarea strugurilor negri şi aromaţi (vinificarea în roşu şi
aromat) sunt separate de cele pentru vinificarea în alb. Utilajele şi instalaţiile din componenţa
acestora şi dispunerea lor în flux trebuie să permită extragerea antocianilor şi a aromelor din
fracţia solidă a mustuielii prin macerare sau macerare-fermentare. Din acest punct de vedere, la
vinificarea în roşu se întâlnesc: metode şi procedee prin macerare-fermentare pe boştină;
maceraţia la cald sau termovinificarea; procedeul prin maceraţie carbonică.
Zdrobirea strugurilor are drept scop deteriorarea menajată a pieliţelor boabelor în
vederea eliberării mustului din miez sau pulpă, dar fără sfărâmarea seminţelor sau a altor resturi
vegetale (ciorchini, frunze etc) a căror rupere ar putea să elibereze sau să difuzeze substanțe
nedorite pentru calitatea vinului (mai ales, procianidinele galoilate pot crește în mod
semnificativ gustul amar al vinului finit) (Arnaud C. ș.a., 2012). Atât eliberarea mustului din
boabe, cât şi randamentul în aceasta sunt în raport direct cu gradul de deteriorare a pieliţelor şi
a protoplasmei celulare şi cu sporirea permeabilităţii membranelor celulelor miezului.
Zdrobirea se realizează cu ajutorul unor valţuri canelate de diferite forme şi tipuri,
construite din oţel inoxidabil de cea mai bună calitate (fig. 3.1). Ei se află montaţi la partea
inferioară a coşului zdrobitorului sau a utilajului complex, cunoscut sub numele de zdrobitor-
desciorchinător cu pompă sau egrafulopompă. Cilindrii sau valţurile canelate se rotesc în sens
invers către interior și prind strugurii pe care îi zdrobesc. Distanţa dintre ei se reglează de aşa
manieră încât să nu producă sfărâmarea seminţelor şi mărunţirea excesivă a pieliţelor.
În cazul strugurilor avariaţi (de mucegaiuri, molii, brume ş.a.) zdrobirea este
nerecomandată deoarece poate atrage intensificarea fenomenelor de casare oxidazică şi
eliberarea de glucani din pielițe, care îngreunează limpezirea ulterioară a vinului. Zdrobirea nu
se practică nici la obţinerea mustului în tehnologia preparării spumantelor, pentru a elimina
posibilităţile de oxidare şi de îmbogăţire a acestuia în compuşi cu influenţă negativă.
La vinificația în roșu, zdrobirea trebuie să fie atât menajată, pentru a nu distruge
fracțiunile solide ale strugurelui, cât și completă, pentru eliberarea rapidă și totală a mustului.
Dacă zdrobirea este imperfectă, eliberarea zaharurilor din pulpă este foarte lentă și vinul de
presă conține zaharuri reziduale, care cresc riscurile de alterări bacteriene. În general, se
folosesc zdrobitoare cu roți canelate, cu ecartament reglabil (Blouin J. și Peynaud E., 2006).
4.1.1 GLUCIDELE
Glucidele, cunoscute și sub numele de zaharuri sau hidrați de carbon, reprezintă
principala clasă de substanțe organice care se acumulează în struguri. În același timp, zaharurile
reprezintă sursa de formare a principalului constituent chimic al vinului – alcoolul etilic – dar
și a unui mare număr de alte substanțe, produși secundari ai fermentației alcoolice, care joacă
un rol esențial pentru aroma și gustul vinului.
În figura 4.1 se prezintă grupajul glucidelor din struguri şi din mustul de struguri (Cotea
D.V. ș.a., 1982).
În mustul scurs din boabele de struguri se găsesc două importante grupe de glucide,
cunoscute sub numele de oze şi ozide. Ozele sunt dominante în mustul de struguri faţă de ozide,
care se află în cantităţi mult mai mici sau chiar nesemnificative.
4.1.1.1 Ozele sunt cunoscute şi sub numele de monoglucide sau zaharuri simple. Sunt
glucide nehidrolizabile în compunerea cărora, alături de funcțiile hidroxilate, se găsesc la C 1
sau C2 funcţii carbonil de tip aldehidă şi cetonă, motiv pentru care sunt încadrate, din punct de
vedere chimic, la polihidroxialdehide sau polihidroxicetone.
Fig. 4.1 – Categoriile de glucide din struguri şi mustul de struguri
(după Cotea D.V. ș.a., 1982)
Ozele din mustul de struguri se împart în funcție de numărul atomilor de carbon din
moleculă. Cele mai importante, din punct de vedere cantitativ și tehnologic, sunt hexozele şi
pentozele, inegale sub raport cantitativ. Hexozele, reprezentate de glucoză şi fructoză,
constituie peste 95 % din totalul conţinutului în glucide şi peste 99 % din cele cu caracter
reducător. Pentozele, reprezentate de arabinoză, xiloză, riboză şi ramnoză, se găsesc în cantităţi
globale mici (de cele mai multe ori sub 1 g/L), iar heptozele şi octozele se găsesc în proporţii
extrem de mici sau chiar sub formă de urme. Hexozele având în moleculă un multiplu de 3
carboni sunt şi fermentescibile (potrivit postulatului precizat de biochimistul Fischer E.), pe
când pentozele nu îndeplinesc această proprietate. De aceea, conţinuturile de pentoze existente
în struguri se regăsesc, aproape în totalitate, în vin. Din acest motiv, pentozele sunt considerate
substanţe test pentru stabilirea naturaleţei vinului. Acestea, regăsindu-se în vin, oferă garanţia
provenienţei produsului din struguri (Teodorescu Şt., 1970).
Ozele, ca și alte zaharuri, pot fi reducătoare și nereducătoare. Ozele reducătoare sunt
acelea în molecula cărora grupa carbonilică este neangajată în alte legături. Acestea au
proprietatea de a reduce ionul cupric (Cu2+) la ionul cupros (Cu+). Această reacție stă la baza
dozării pe cale chimică a zaharurilor reducătoare din must și vin cu ajutorul soluției Fehling.
Zaharurile nereducătoare, având gruparea carbonilică angajată, nu reacționează cu soluția
Fehling (Cotea D.V. ș.a., 2009). Aşadar, hexozele (glucoza şi fructoza) din mustul de struguri
sunt reducătoare şi fermentescibile, iar pentozele sunt reducătoare dar nefermentescibile.
Musturile obţinute din podgoriile noastre prezintă conţinuturi în glucide cuprinse între
150 şi 250 g/L. Când musturile conţin sub 145 g/l, sunt considerate ca necorespunzătoare pentru
obținerea vinurilor destinate consumului, din categoria "stricto-sensu" și sunt dirijate spre
obţinerea altor produse, cum sunt: sucurile de struguri, mistelul, distilatele din vin, oţetul ş.a.
4.1.1.1.1 Glucoza este o aldohexoză numită şi dextroză, întrucât, în soluţie apoasă,
determină o rotaţie polarimetrică spre dreapta cu +52,50.
De obicei, formula chimică a glucozei se prezintă sub formă lineară, în felul următor:
Fructoza
Ca şi glucoza, fructoza se află în must tot sub formă ciclică, în care caz poartă
denumirea, riguros ştiinţifică, de β-D(-)fructofuranoză.
Puterea îndulcitoare a fructozei este, evident, mai ridicată în comparaţie cu aceea a
zaharozei şi glucozei. Considerând gradul de dulceaţă al zaharozei 1 şi cel al glucozei 0,74, la
fructoză acesta are valoarea 1,73, reieşind că aceasta din urmă este cu mult mai dulce, pentru
aceeaşi unitate de măsură, decât glucoza, cu care formează, în măsură hotărâtoare, "zestrea"
glucidică a mustului de struguri.
Fructoza este mai greu combustionată pe cale respiratorie şi mai puţin fermentescibilă
decât glucoza. De aceea ea prezintă proporţii superioare faţă de glucoză, atât în strugurii
supramaturaţi, cât şi în vinurile demidulci şi dulci naturale (cum sunt cele de Cotnari şi
Sauternes), cărora le imprimă o dulceaţă cu nuanţe de miere de albine.
În comparaţie cu glucoza, fructoza combină proporţii mai mici de SO2, iar prin încălzire,
în prezenţa unor acizi tari, se transformă în hidroximetilfurfurol, constituent cu influenţă
semnificativă asupra însuşirilor organoleptice ale produsului vinicol în care se formează.
Fenomenul are loc în vinurile cu zahăr rezidual supuse tratamentelor cu căldură (pasteurizare,
termolizare) şi în musturile concentrate, obţinute sub acţiunea temperaturilor ridicate.
4.1.1.1.3 Pentozele sunt, după cum arată denumirea, oze cu 5 carboni, reducătoare, dar
nefermentescibile. Prezintă în must conţinuturi modeste, în comparaţie cu hexozele. În vinurile
albe conţinuturile de pentoze se situează între 0,3 şi 0,5 g/L, iar la cele roşii pot ajunge – în
funcţie de tehnica presării – până la 2 g/L (Cotea D.V., 1985). Pentozele din struguri şi must
se găsesc, în principal, sub formă combinată. În urma unor procese de hidroliză pentozele sunt
însă eliberate, astfel că în vinuri sunt prezente ca atare (arabinoză, xiloză, riboză şi ramnoză).
Structurile lor chimice arată astfel:
4.1.1.2 Ozidele sunt glucide hidrolizabile rezultate din asocierea mai multor molecule
de oze, eventual și cu alte substanțe numite agliconi (Taillandier Patricia și Bonnet J., 2005).
Ozidele se formează în urma unor reacții de eterificare. Dacă la reacţiile de eterificare participă
numai molecule de oze se formează holozide. Când procesul de eterificare se petrece între
moleculele de oze şi alte substanţe rezultă heterozide (vezi figura 4.1).
Holozidele formate prin asocierea a două până la 10 molecule de oze sunt oligozide,
iar cele care cuprind un număr mare de oze și care formează cu lichidele pseudo-soluții sau
soluții coloidale sunt denumite poliozide sau polizaharide (Taillandier Patricia și Bonnet J.,
2005).
Zaharoza, aparţinătoare grupului oligozide nereducătoare, este constituită dintr-o
moleculă de α D (+) glucopiranoză şi una de β D (–) fructo-furanoză. Ea are următoarea
structură:
În musturile provenite din soiuri nobile (aparţinând speciei Vitis vinifera), conţinuturile
de zaharoză nu depăşesc 3 g/L. La musturile de hibrizi producători direct, proporţiile de
zaharoză sunt mai mari, atingând valori de până la 6–8 g/L, în timp ce la alte specii ale genului
Vitis (rotundifolia sau labrusca, de exemplu) poate să ajungă la valori mult mai mari. Zaharoza
nu este direct fermentescibilă. Când este adaugată în must, sub acţiunea invertazei şi a acizilor,
este scindată în glucoză şi fructoză, monoglucide fermentescibile.
În anii viticoli mai puţin favorabili producţiei viticole, când în struguri nu se
acumulează proporţiile minim acceptate de legislaţie (145 g/l), cu aprobările de rigoare,
zaharoza (cu grad ridicat de puritate) se poate adiţiona în must, dar până la maximum 30 g/L.
Supusă la temperaturi situate între 190 şi 200 0C, zaharoza se transformă, prin pierdere
de apă, în caramel, de culoare brună închisă, care este un amestec de produşi necristalizabili.
Zaharoza obţinută din sfeclă sau trestie de zahăr – dublu sau triplu rafinată – constituie
una dintre componentele de bază ale licorilor (de tiraj şi expediţie), implicate în tehnologia de
obţinere a vinurilor spumante de tip şampanie.
4.1.1.3 Poliozidele sunt substanţe complexe, constituite dintr-un număr considerabil de
monoglucide. În mustul de struguri se găsesc poliozide omogene (formate din oze de acelaşi
tip) şi poliozide neomogene (când ozele componente sunt diferite).
În struguri, poliozidele omogene sunt reprezentate de: xilani şi arabani (polimeri ai
pentozelor) şi glucani şi fructani (polimeri ai hexozelor), iar poliozidele neomogene (numite
şi poliuronide) de substanţele pectice, gumele şi mucilagiile.
Dextranul este un glucan, fiind polimer al glucozei, cu masa moleculară situată în jur
de un milion. Se găseşte în proporţii mai ridicate (până la 1 g/L) în musturile obţinute din
strugurii afectaţi de putregaiul cenuşiu sau cel nobil, fiind secretat de Botryotinia fukeliana
(Dubourdieu D. ş.a., 1981).
Dextranul are caracteristici de coloid protector, însuşiri care se amplifică sub acţiunea
temperaturilor ridicate, opunându-se precipitării unor constituenţi, prin izolarea, mai ales, a
particulelor coloidale liofobe, pe care le împiedică să se aglomereze şi să sedimenteze. De
aceea, limpezirea şi stabilizarea produselor vinicole se desfăşoară greoi, chiar şi când se
intervine cu substanţe cleitoare. Dificultăţi determinate de dextran apar şi la filtrarea pe
principiul cernerii, prin plăci de celuloză sau membrane. Suprafaţa filtrantă, pe partea de unde
se face afluxul de vin, este rapid colmatată, debitul de filtrare scăzând brusc. Dextranul prezintă
însă şi unele efecte pozitive sub raport organoleptic, sporind catifelarea şi onctuozitatea
produselor, chiar în proporții mici.
Poliozidele neomogene sunt reprezentate în must de substanţele pectice, gume şi
mucilagii. În compoziţia lor intră acizii uronici (glucuronic, galacturonic şi manuronic), de
aceea ele se mai numesc şi poliuronide.
Substanţele pectice sunt prezente în must sub formă de acid pectic, pectină şi
protopectină.
Acidul pectic este rezultatul înlănţuirii unui număr considerabil de molecule ale acidului
poligalacturonic, constituit la rândul lui din resturi de acid α D-galacturonic, având masa
moleculară între 25000 şi 100000.
Pectina este o combinaţie complexă formată din acid pectic, galactani, arabani, xilani,
ramnani. Funcţiile carboxilice (–COOH) existente în complex sunt, într-o mare măsură,
esterificate cu grupări metilice (–CH3). Prin hidroliza pectinei în timpul fermentării-macerării,
la vinificaţia în roşu, sporec proporţiile de alcool metilic, ajungând până la 40–50 mg/L în
vinurile nobile şi până la 350–400 mg/L în cele de hibrizi producători direct.
Protopectina (pectoza) reprezintă o asociere între pectină cu celuloza şi hemiceluloza.
Ea conferă caracterul de tare al boabelor verzi de struguri.
Pereţii celulelor din pieliţele boabelor de struguri au natură pectocelulozică. Poliozidele
din peretele celular sunt împărţite în trei grupe: polizaharide neutre 30–35 % (celuloză,
xiloglucani, arabino-galactani, xilani, manani); acid pectic 20 %; substanţe metilen esterificate
62 % (Lecas M. şi Brillouet J.M., 1994).
Substanţele pectice sunt localizate în lamela mijlocie şi peretele primar al celulelor
boabelor de struguri şi împreună cu hemiceluloza determină funcţia cimentantă a fibrelor
celulozice. Atât timp cât se menţine această structură a pereţilor celulari, evacuarea mustului
este greoaie. Prin degradarea pectinelor din cele două straturi, procesul de extracţie a sucului,
împreună cu polifenolii şi alţi constituenţi, cunoaşte îmbunătăţiri evidente. Degradarea
pectinelor este realizată la maturarea strugurilor de către enzimele pectolitice din struguri sau
de cele adiţionate pe căi tehnologice (Celotti E. ș.a., 1997).
Gumele vegetale sunt poliuronide în componenţa cărora intră substanţe asemănătoare
pectinelor, acid glucuronic, pentoze (arabinoză şi ramnoză) şi hexoze (galactoză şi manoză).
Ele au o structură ramificată şi foarte complexă (Cotea D.V., 1985). Au caracter de coloizi
protectori, împiedicând aglomerarea şi precipitarea particulelor coloidale liofobe, motiv pentru
care limpezirea nu se realizează în bune condiţiuni.
Substanţele mucilaginoase sunt poliuronide, structural asemănătoare cu pectinele şi
gumele vegetale. Nu se găsesc în musturile provenite din struguri sănătoşi. Se află însă în
proporţii semnificative în musturile obţinute din struguri atacaţi de putregaiul cenuşiu. Prezenţa
în proporţii mai mari a acestor substanţe în vinuri determină ca limpezirea pe cale naturală să
fie greoaie şi de lungă durată. Ele diminuează evident filtrabilitatea normală a vinului,
colmatând în scurt timp straturile filtrante care acţionează pe principiul sitei (Peri C., 1986).
4.1.2 ACIZII
Sunt substanţe cu gust acru, a căror denumire provine de la cuvântul latinesc acidus. În
mustul de struguri există un număr important de acizi, împărţiţi în două categorii: acizi minerali
şi acizi organici.
4.1.2.1 Acizii minerali (în conţinuturi globale, de cele mai multe ori sub 1 g/L) sunt, în
general, substanţe tari, cu constantă de disocire ridicată, motiv pentru care aceştia se găsesc în
totalitate neutralizaţi (sub formă de săruri neutre ionizate). Aceste săruri pot fi: sulfaţi, cloruri,
fosfaţi de potasiu, calciu, magneziu.
4.1.2.2 Acizii organici sunt combinaţiile în care se află grupe funcţionale tip carboxil
(–COOH). În mustul de struguri, acizii organici se împart în: monobazici (monocarboxilici) şi
polibazici (policarboxilici). Dintre cei monocarboxilici, se meţionează acizii: galacturonic,
glucuronic, glicolic, gluconic, shikimic, chinic, ceto-2-gluconic, diceto-2,5-gluconic. Unii
dintre ei prezintă conţinuturi între urme şi 1000 mg/L și pot exista în stare liberă, când grupa
funcţională carboxil se află ca atare (–COOH) sau total "legaţi", când în grupa funcţională
carboxil H este înlocuită cu un alt element (ex. –COOK).
Acizii polibazici sau policarboxilici sunt reprezentanţi în mustul de struguri de acizii:
tartric, malic, citric, oxalic, fumaric, mucic. Acești acizii se găsesc în must în trei stări: liberă
(când toate grupele funcţionale carboxil coexistă ca atare); semilegată (când o parte din
funcţiile carboxil sunt salificate); total legată (când toate funcţiile carboxil sunt salificate).
Altfel spus, acizii polibazici pot exista în must sub formă liberă, ca săruri acide şi ca săruri
neutre.
Dintre numeroşii acizi organici din must cea mai mare importanţă o prezintă acizii
tartric, malic şi citric. Împreună, cei trei acizi reprezintă peste 90–95 % din cantitatea de acizi
organici existenţi în mustul de struguri.
4.1.2.2.1 Acidul tartric. În molecula de acid tartric se găsesc atât funcţii carboxilice, cât
şi funcţii hidroxilice, ceea ce înseamnă că este un hidroxiacid.
COOH COOH COOH
│ │ │
CHOH CH2 CH2
│ │ │
CHOH CHOH HO – C – COOH
│ │ │
COOH COOH CH2
│
COOH
Acidul tartric Acidul malic Acidul citric
În comparaţie cu ceilalţi acizi din must, acidul tartric prezintă cel mai ridicat grad de
disociere, ceea ce înseamnă că valorile acidităţii ionice sau pH-ul depind, în măsură hotărâtoare,
de conţinuturile acestuia. Gradul de disociere dar şi alte însuşiri ale acidului tartric îl situează
în fruntea tuturor celorlalţi acizi din must sub raportul tăriei chimice şi biologice.
Existenţa în moleculă a două grupe acide carboxil (–COOH) îi conferă proprietatea de
a forma atât săruri acide, cât şi săruri neutre. Astfel, cu potasiul formează sarea acidă, cunoscută
sub numele de tartratul acid de potasiu (bitartratul de potasiu), iar cu calciul formează tartratul
neutru de calciu. Prima sare conferă acidului tartric forma semilegată, iar cea de a doua forma
total legată sau integral salificată.
Cele trei stări ale acidului tartric au următoarele structuri:
În prezenţa alcoolului etilic şi a frigului, anumite proporţii din tartratul acid de potasiu
şi tartratul neutru de calciu ies din soluţie şi se depun pe pereţii recipientelor formând crema de
tartru, cunoscută şi sub numele de tirighie sau "piatră" de tartru. În urma acestor precipitări
aciditatea scade cu 40–50 %.
Tăria biologică se explică prin aceea că doar în puţine cazuri este atacat şi descompus
de unele bacterii lactice (Bacterium tartarophtorum), producând în produs boala numită
fermentaţia propionică (cu două faze: "pousse" şi "tourne").
4.1.2.2.2 Acidul malic, COOH–CH2–CHOH–COOH, este numit şi acidul
hidroxisuccinic întrucât în moleculă conţine un atom de carbon asimetric. În struguri, must şi
vin se întâlneşte forma L(–)malic. Ca importanţă oenologică, acesta se situează imediat după
acidul tartric.
Ca şi ceilalţi acizi organici ai strugurilor, acidul malic se formează în procesul de
combustionare respiratorie a glucidelor, pentru ca viţa de vie să-şi procure o parte din energia
necesară şi tot prin acest proces se descompune până la produşii finali.
În general, în podgoriile din țara noastră, conţinuturile de acid malic din musturile de
struguri se situează între 2 şi 4 g/L. Aceste conţinuturi însă pot depăşi 4–5 g/L în strugurii
podgoriilor nordice, unde climatul este mai răcoros şi cu precipitaţii mai mari în timpul creşterii
şi maturării boabelor. Proporţiile sporite de acid malic conferă mustului şi vinului gust de verde
sau de crud.
La prelucrarea strugurilor, acidul malic trece integral în must, atât cel existent în stare
liberă cât şi sărurile lui, acestea din urmă fiind solubile.
În comparaţie cu acidul tartric, acidul malic este mai slab din punct de vedere biologic
şi chimic. Astfel, în timpul fermentaţiei alcoolice, levurile obişnuite din genul Saccharomyces
pot transforma 10–15 % din acidul malic în alcool şi CO2, procesul fiind cunoscut sub numele
de fermentaţie maloetilică. Unele specii din genul Schizosaccharomyces pot transforma însă
până la 70–80 % din acidul malic în alcool etilic şi CO2. Sunt cunoscute în acest sens speciile
Schizosaccharomyces pombe şi Schizosaccharomyces acidodevoratus.
După fermentaţia alcoolică, în condiţii bine determinate, unele bacterii lactice îl
transformă în totalitate în acid lactic şi CO2, procesul fiind cunoscut sub numele de fermentaţie
malolactică.
Această transformare a acidului malic, sub acţiunea unor bacterii lactice, prezintă interes
sub raportul asigurării unei bune evoluţii a vinurilor roşii şi al îmbunătăţirii gustului celor albe,
provenite din musturi cu aciditate excesivă. Din punct de vedere igieno-alimentar, problema
prezintă o altă dimensiune, deoarece acidul malic are un rol important în dezintoxicarea
amoniacală a organismului (Gheorghiță M. ș.a., 2006).
4.1.2.2.3 Acidul citric (hidroxitricarboxilic), este monohidroxiacid tricarboxilic,
C6H8O7. Din punct de vedere chimic şi biologic este mai slab comparativ cu acidul tartric dar
mai tare comparativ cu acidul malic. De aceea, în timpul maturării strugurilor conţinuturile
formate în procesul respirator al glucidelor suferă variaţii nesemnificative, de cele mai multe
ori fiind nule (Cotea D.V., 1985).
În timpul prelucrării strugurilor trece aproape în totalitate în must, conţinuturile în cazul
recoltelor normale situându-se între 0,025 şi 0,5 g/L, în funcție de soi, fiind mai mari la soiurile
albe față de cele pentru vinuri roșii.
Acidul citric are și un rol de stabilizator faţă de casările ferice, mai important pentru cel
provenit din struguri decât cel adiţionat. În musturile obţinute din struguri botritizaţi proporţiile
pot ajunge până la 0,70–0,75 g/L sau chiar mai mult. În timpul fermentaţiei malolactice poate
fi transformat, sub acţiunea bacteriilor lactice, în acid acetic, acid lactic şi în alte substanţe cu
influenţă negativă asupra calităţii produsului.
Degradarea unui mol de acid citric duce la formarea unei cantități de acid acetic cuprinsă
între 1,2 și 1,5 moli și acest fenomen are loc în paralel cu fermentația malolactică (Taillandier
Patricia și Bonnet J., 2005).
Acidul citric formează împreună cu fierul feric (Fe 3+) un complex solubil, de aceea, în
proporţii de aproximativ 0,5 g/L se poate folosi împotriva casărilor ferice. Acidul citric provenit
din struguri are un rol stabilizator faţă de casările ferice mai important decât cel adiţionat.
Eventualele corecţii de aciditate în vinuri se vor efectua tot cu acid citric (în doze de până la 0,5
g/L) dar adiţionarea se va face numai după ce în vin a avut loc fermentaţia malolactică, deoarece
acidul citric este metabolizat de către bacteriile lactice, ducând la creșterea acidității volatile în
vinuri.
Alături de cei trei principali acizi menţionaţi mai sus, în mustul de struguri se mai află,
în proporţii mult mai scăzute şi acizii: oxalic, ascorbic, galacturonic, glucuronic, gluconic,
mucic, ceto-2-gluconic şi diceto-2,5-gluconic, glicolic, fumaric, shichimic, chinic.
4.1.2.2.4 Acidul oxalic se găseşte în must sub formă de oxalaţi solubili, între care
oxalatul de potasiu este reprezentativ. Proporţiile existente în vin se situează în jur de 50 mg/L.
Una din căile de provenienţă se consideră a fi oxidarea acidului tartric. Împreună cu fierul feric
(Fe3+) formează un complex solubil, ceea ce înseamnă că se constituie (ca şi acidul citric) într-
un factor de prevenire a casărilor ferice.
4.1.2.2.5 Acidul ascorbic, ajunge la proporţii de până la 100 mg/L. Este consumat, în
totalitate de către levuri în timpul fermentaţiei, astfel că în vin nu mai este prezent. În unele
ţări viticole este folosit, în doze de 90–100 mg/L, ca antioxidant.
4.1.2.2.6 Acidul galacturonic are drept cale de provenienţă hidroliza substanţelor
pectice. Proporţiile în vin sunt cuprinse între 100 şi 1000 mg/L.
4.1.2.2.7 Acidul glucuronic se formează din glucoză printr-un proces de oxidare
enzimatică. În această situaţie gruparea –CH2OH a glucozei de la C6 (forma lineară) se
transformă în funcţia acidă carboxil (–COOH). Conţinuturile în vinurile obţinute din recolte
sănătoase ajung până la 500–600 mg/l. În vinurile obţinute din struguri atacaţi de Botrytis
cinerea sau de molii, proporţiile de acid glucuronic depăşesc frecvent 1 g/L.
4.1.2.2.8 Acidul gluconic se formează tot prin oxidarea enzimatică a glucozei, când
funcţia carbonil (aldehidică) de la C1 se transformă în grupare carboxil (–COOH). Conţinuturile
normale din vinuri ajung până la 0,10–0,12 g/l. Conţinuturi mai mari, cuprinse între 0,3 şi 0,8
g/L există în vinurile obţinute din struguri cu început de botritizare şi până la peste 2 g/L în cele
obținute din struguri cu grad înaintat de supracoacere, existenţa lui în vin constituind dovada
provenienţei produsului din struguri pe care s-a instalat şi a acţionat putregaiul nobil.
4.1.2.2.9 Acidul mucic, numit şi acid D-galactozaharic, provine prin oxidarea
enzimatică a acidului galacturonic. În vinurile obişnuite nu depăşeşte 0,5 g/L. Proporţii care
ajung până la 2 g/L se găsesc în vinurile rezultate din struguri afectaţi de putregaiul nobil.
Acizii glicolic, shikimic, chinic, ceto-2-gluconic şi diceto-2,5-gluconic prezintă în
musturi şi vinuri conţinuturi extrem de mici. De cele mai multe ori, există sub formă de urme.
Totalitatea funcţiilor acide carboxilice (–COOH) de la acizii liberi şi parţial legaţi constituie
aciditatea mustului. Alături de glucide, aciditatea reprezintă un parametru de compoziţie cu
importanţă deosebită pentru definirea calităţii mustului. În medie, aciditatea musturilor din
podgoriile româneşti se situează între 3 şi 6 g/L când exprimarea se face în acid sulfuric şi între
4,5 şi 9 g/L când exprimarea se face în acid tartric, în funcție de soi, podgorie, condiţiile de
climă şi sol, gradul de coacere a strugurilor. În condiţii de secetă şi temperaturi foarte ridicate,
înregistrate în arealele sudice, combustia respiratorie a acizilor este intensă, ceea ce explică
nivelurile scăzute ale acidităţii musturilor.
Printre cauzele care pot determina scăderea acidităţii se poate număra şi salificarea
funcţiilor carboxilice cu potasiu, în cazul fertilizărilor excesive cu acest element (Aerny J.,
1985).
Unii aminoacizi din must se găsesc în proporţii extrem de mici (chiar sub 1 mg/L), alţii
prezintă în must conţinuturi mult mai mari: prolina 1062 mg/L, arginina 279 mg/L, alanina 72
mg/L, acidul aspartic 57 mg/L.
Importanţa aminoacizilor din must, sub raport oenologic, este considerabilă, deoarece,
după epuizarea azotului amoniacal, levurile recurg la unii aminoacizi pentru nutriţia lor azotată.
Aminoacizii, alături de azotul amoniacal reprezintă azotul asimilabil de către levuri, care este
este un nutrient esențial pentru creșterea și metabolismul levurilor, cu o influență majoră asupra
multiplicării și activității lor fermentative. În plus, unii aminoacizi au un rol considerabil în
ameliorarea însușirilor organoleptice ale unor vinuri, cum sunt cele spumante, de exemplu.
Azotul asimilabil de către levuri reprezintă 25 la 40 % din azotul total din mustul de
struguri. Conținutul său natural depinde de nutriția azotată a viței de vie și variază în funcție de
condițiile de terroir (sol, climă etc.), precum și de unele tehnici viticole: combinația soi-
portaltoi, întreținerea solului, fertilizare și joacă un rol esențial în derularea fermentației
alcoolice și dezvoltarea de arome, în special pentru vinurile albe și roze (Reynard J.S. ș.a.,
2011). Concentrația sa influențează în mod direct cinetica de fermentare, acționând asupra
cantității de levuri produse și, de asemenea, asupra capacității lor de supraviețuire. Azotul este
nu necesar numai pentru buna funcționare a fermentației, fiind implicat și în procesul de
formare a diferiților compuși aromatici. În cantitate și de o calitate suficientă, el participă la
formarea aromelor pozitive, limitând în același timp formarea compușilor cu miros neplăcut, în
special unii compuși cu sulf (Jiranek V. ș.a., 1995). Se estimează că un conținut de azot direct
asimilabil de minim 200 mg/L în must asigură o bună cinetică de fermentare (Bell S.J. și
Henschke P. A., 2005). Practicile viticole preventive care asigură viței de vie cu o nutriție
echilibrată cu azot dă rezultate mult mai bune decât corectarea eventualelor deficite de azot ale
musturilor, cu resursele disponibile în prezent în cramă (Lorenzini F. și Vuichard F., 2012).
Pentru prevenirea deficienței de azot direct asimilabil de către levuri, cele mai bune
rezultate le dă o fertilizare a viței de vie cu azot sub formă de uree foliară, printr-o aplicare în
faza de pârgă, care duce la creșterea semnificativă a conținutului de azot asimilabil (aminoacizi
liberi și amoniu), în boabele de struguri (Verdenal T. ș.a., 2015). Ureea aplicată foliar la primul
vârf de absorbție a azotului (înflorire/fructificare), s-a dovedit de două ori mai puțin eficace
pentru creșterea conținutului de azot asimilabil al mustului decât atunci când este aplicată la al
doilea vârf, în jurul pârguirii (Spring J.L. ș.a., 2015).
4.1.3.3 Amidele sunt reprezentate de: asparagină, glutamină, citrulină şi acetamidă. În
musturile cu compoziţie normală conţinuturile globale ale acestora se situează sub 8 mg/l,
uneori fiind la nivel de 1 mg/L. Ele pot contribui la constituirea aromei vinului, într-un sens sau
altul. Se cunoaşte că acetamida (CH3–CO–NH2) imprimă mirosul respingător cunoscut sub
numele de "iz de şoareci", prezent în vinurile atinse de boala cu acelaşi nume.
4.1.3.4 Peptidele şi polipeptidele sunt constituenţi azotaţi rezultaţi prin reacţii de
polimerizare a aminoacizilor, care se leagă între ei prin punţi polipeptidice sau legături amidice.
Ele reprezintă în medie 60–75% din azotul total al mustului. Masa moleculară a acestora se
situează sub 10000. Principalii reprezentanţi sunt albumozele şi peptonele.
Când în must lipsesc sărurile de amoniu şi aminoacizii asimilabili, levurile, prin
sistemele lor enzimatice, produc scindarea acestora în aminoacizi pe care îi folosesc pentru
nutriţia azotată. Polipeptidele cu masă moleculară mare şi în conţinuturi ridicate pot produce
tulburări în produsele vinicole.
4.1.3.5 Proteinele sau proteidele se găsesc în must sub formă de holoproteide şi
heteroproteide, ele reprezentând 3–10% din azotul total. În prezenţa taninului suferă un proces de
insolubilizare şi de coagulare, depunându-se. În conţinuturi mai ridicate, proteinele, alături de
polipeptidele cu moleculă mare, sunt implicate în producerea tulburării cunoscută sub numele
de casarea proteică.
Biocatalizatorii mustului sunt factori activi, cu structură complexă, provenind din struguri sau
prin secreţii ale microorganismelor specifice industriei vinicole fiind implicaţi în toate procesele
biochimice care au loc la transformarea mustului în vin. Indiferent de origine, biocatalizatorii mustului
formează două grupe: vitamine şi enzime.
4.2.1. VITAMINELE
Vitaminele sunt constituenţi cu structuri chimice diferite şi cu rol de catalizatori în
procesele biochimice. Există o mare diversitate de vitamine, din punct de vedere al structurii
chimice cât și al funcțiilor îndeplinite dar, în funcție de solubilitatea lor în grăsimi se împart în:
liposolubile şi hidrosolubile.
În struguri se găsesc numai vitaminele hidrosolubile, cu o singură excepție, vitamina A.
Conținuturile de vitamine din struguri sunt, în general, suficiente pentru nevoile
microorganismelor dar fermentația alcoolică determină schimbări importante în conținutul de
vitamine, deoarece unele scad foarte mult, altele cresc.
Din categoria vitaminelor liposolubile fac parte vitaminele A sau retinolii, iar în
categoria vitaminelor hidrosolubile sunt încadrate vitaminele din grupa B (B 1, B2, B6, B12),
acidul pantotenic, mezoinozitolul, vitamina H (biotina), vitamina PP (nicotinamida), acidul
folic, colina, vitamina C (acidul ascorbic).
Vitaminele din grupa A (retinolii) provin din carotenii stocaţi în pieliţa boabelor de
struguri. Spre deosebire de celelalte vitamine, retinolii sunt rezistenţi la temperaturi ridicate, de
aceea ei nu sunt afectaţi de eventualele tratamente termice aplicate mustuielii sau mustului.
Vitamina B1 (tiamina sau aneurina) se află, în must, în conţinuturi cuprinse între 120 şi
650 μg/L (cu o medie de 300 μg/L) dar conținuturile sunt mult mai mici în musturile provenite
din struguri mucegăiți, fiind necesar un adaos la începutul fermentației. Tiamina este un factor
de creștere pentru levuri, care o asimilează în proporție de până la 90 %. În schimb, este foarte
sensibilă la SO2, care taie molecula sa la nivelul punții metalice. Vitamina B 1 ar putea reduce
alcoolemia după ingestia de alcool (Taillandier Patricia și Bonnet J., 2005).
Sub formă de ester pirofosforic îndeplineşte rol de cocarboxilază. Enzima carboxilaza,
din care face parte, produce decarboxilarea acidului piruvic, rezultând primul produs principal
al fermentaţiei (CO2).
Vitamina B2 (riboflavina) se găseşte în must în proporţii de 10–100 μg/L (în medie 20
μg/L). În vinuri, conţinuturile sporesc până la aproximativ 50 μg/L în vinurile albe şi până
aproape de 200 μg/L, în medie, în cele roşii, ea fiind sintetizată de levuri la începutul
fermentației alcoolice. Prezenţa antocianilor o protejează de acţiunea distructivă a luminii.
Tratamentele vinurilor cu adjuvanţi – bentonită, cărbune – determină diminuarea conţinuturilor
de vitamină B2.
Transportator de hidrogen indispensabil metabolismului unor microorganisme,
riboflavina intră în constituția a numeroase enzime. Riboflavina nu este factor de creștere pentru
levuri dar este necesară dezvoltării bacteriilor lactice, motiv pentru care mai este numită și
lactoflavină (Taillandier Patricia și Bonnet J., 2005).
Vitamina B3 (nicotinamida, niacina sau vitamina PP) îndeplineşte rol de coenzimă de
oxido-reducere. Conținutul în must este jur de 3 μg/L. În timpul fermentației alcoolice este
consumată și apoi regenerată de către levuri. În timpul evoluței vinului, conținutul de vitamina
B3 nu se mai modifică, fiind stabilă chimic.
Vitamina B5 (Bios III sau acidul pantotenic) constituie un factor de creștere pentru
numeroase bacterii și levuri.
În timpul fermentației alcoolice, această vitamină, factor de creștere indispensabil
pentru levuri, intervenind în sinteza lipidelor, poate fi sintetizată de către acestea și eliminată
în mediu prin fenomenul de exorbție (Taillandier Patricia și Bonnet J., 2005). Carența acestei
vitamine poate perturba fermentația alcoolică, în sensul măririi conținutului de etanal în vin
(Cotea D.V. ș.a., 2009) și formării de H2S în musturile cu carență în azot (Wang X.D. ș.a.,
2003).
Vitamina B6 (piridoxina) din mustul de struguri prezintă conţinuturi care se situează în
jur de 0,5 mg/L. Cleirile cu materiale minerale şi organice atrag diminuarea acestor conţinuturi.
Vitamina B8 (biotina sau vitamina H) este unul dintre principalii factori de creștere
pentru levuri și joacă un rol important de coenzimă în unele reacții enzimatice de sinteză
azotată, de decarboxilare și dezaminare (Taillandier Patricia și Bonnet J., 2005). Se găsește
în struguri în cantități mici, de ordinul a 2–4 μg/L dar de 10 ori mai mari în vin, fiind sintetizată
de levuri și bacterii în timpul fermentațiilor și apoi eliberată.
Vitamina B12 (cobalamina) se găseşte în conţinuturi foarte mici, sub 0,1 μg/L. Este
sintetizată de unele microorganisme, în special de bacteriile din genul Lactobacillus și mai puțin
de levuri.
Mezoinozitolul (Bios I) este un factor de creștere pentru levuri dar, mai ales, pentru
bacterii. În must, se găsește în conținuturi mari, până la 600-800 μg/L, care se mențin aproape
neschimbate în vinurile albe, însă în cele roșii acestea sunt mult mai mici, fiind consumat de
bacteriile lactice.
Vitamina C (acidul ascorbic) este prezentă în must în doze de aproximativ 50 mg/L, iar
în vinuri se găsește se găsește în conținuturi foarte mult mai mici (1-10 mg/L) sau chiar lipseşte,
fiind consumată în timpul fermentaţiei alcoolice.
4.2.2 ENZIMELE
Enzimele sunt factori activi care biocatalizează toate procesele biochimice ale
transformării mustului în vin şi pe cele care au loc pe parcursul păstrării vinurilor în relaţie
cu microorganismele. Astfel, unele sunt implicate în "demolarea" unor constituenţi
complecşi (cum sunt taninurile şi proteinele), altele participă la transformări ce duc la
îmbolnăviri grave ale vinului.
După tipul de reacții pe care le catalizează, enzimele se împart în 6 clase: 1.
Oxidoreductaze, 2. Transferaze, 3. Hidrolaze, 4. Liaze, 5. Izomeraze, 6. Ligaze. Enzimele care
se întâlnesc în struguri și must aparțin claselor Oxidoreductaze, Hidrolaze și Liaze.
Clasa I. Oxidoreductaze. Enzimele din clasa oxidoreductazelor catalizează reacții de
oxidoreducere biologică prin fixarea oxigenului molecular pe compușii fenolici din must și vin.
Principalele tipuri de oxidoreductaze întâlnite în struguri sunt: tirozinaza, polifenoloxidaza, și
lacaza.
Tirozinaza (polifenoloxidaza) provine din struguri şi provoacă oxidarea constituenţilor
monofenolici în ortodifenoli. Conținutul său în struguri este variabil, în funcție de soi și gradul
de maturare a strugurilor. Enzima este sensibilă la taninuri și, mai ales, la SO2, fiind ușor de
inhibat chiar cu doze moderate aplicate pe mustuială.
Activitatea tirozinazei este maximă la 300C, pentru ca peste 550C să dispară relativ
repede (în 30 minute). Faptul poate fi exploatat pentru protecția mustului față de oxidarea
tirozinazică cu condiția ca încălzirea la de la 30 la 50 0C (adică intervalul de maximă activitate
a tirozinazei) să fie făcută foarte repede – în câteva secunde (Cotea D.V. ș.a., 2009).
Polifenoxidaza (PFO) oxidează di- și trifenolii și are o specificitate foarte mare față de
ortodifenoli pe care îi transformă în ortochinone care au o reactivitate chimică mare și formează
în must sau vin polimeri de culoare brună, producând casarea brună a mustului sau vinului
(Țârdea C. ș.a., 2000).
Lacaza are structură cuproproteidică, fiind elaborată şi secretată în must de către
putregaiul cenuşiu (Botritys cinerea). Are un spectru de acțiune mult mai larg față de celelalte
enzime oxidoreductaze și biocatalizează oxidarea orto-meta-para-difenolilor cu transformare în
chinone care, la rândul lor, produc casarea oxidazică sau casarea brună. Este stabilă la pH-ul
mustului și vinului, puțin sensibilă la SO2 dar este foarte sensibilă la căldură, putând fi inactivată
prin încălzirea mustului la peste 450C.
Peroxidazele sunt enzime cu structură heteroproteidică. Ele catalizează reacţiile de
oxidare prin peroxizi (–O–O–). În must şi vin se găsesc substanţe (R) capabile să se oxideze
spontan, astfel :
Combinaţia RO2 este, de fapt, un oxidant intermediar care dispune de o putere oxidantă
mult superioară oxigenului molecular.
Alte substanţe (M) sunt oxidate de oxidantul intermediar, sub acţiunea peroxidazei:
Clasa II. Transferaze. Enzimele din această clasă catalizează transferul unor fragmente
de moleculă, ce pot fi radicali sau funcții chimice, scindându-le din molecula donatorului și
fixându-le în cea a acceptorului (Cotea D.V. ș.a., 2009). Cei mai importanţi reprezentanţi sunt:
glucokinaza, fructokinaza, piruvatkinaza. Toate au roluri importante în desfăşurarea procesului
de fermentaţie alcoolică.
Clasa III. Hidrolaze. Enzimele din această clasă prezintă acţiune de scindare a unor
constituenţi complecşi din must şi vin. Din această clasă fac parte: enzimele pectolitice
saponifiante, tanaza, proteazele.
Enzimele pectolitice saponifiante sunt reprezentate de: polimetilgalacturonaza
(P.M.G.); poligalacturonaza (P.G.). Acestea scindează substanţele pectice, rezultând printre
formaţiunile chimice cu molecule mai mici şi alcoolul metilic.
Tanaza – intervine în desfacerea taninurilor hidrolizabile, rezultând o glucidă şi acidul
galic sau acidul elagic.
Proteazele rup lanţurile polipeptidice ale substanţelor proteice, rezultând în final
aminoacizii componenţi.
Clasa IV. Liaze. În această clasă sunt cuprinse enzime cu rol hotărâtor în desfăşurarea
unor etape cheie ale fermentaţiei alcoolice. Una dintre ele este piruvatdecarboxilaza a cărei
coenzimă este vitamina B1 (tiamina). Ea biocatalizează decarboxilarea acidului piruvic, în etapa
a IV-a a fermentaţiei alcoolice.
O altă enzimă cu activitate hotărâtoare în fermentaţia malolactică este
malatdecarboxilaza. Ea determină transformarea acidului malic de către bacteriile lactice, proces
absolut necesar la vinurile roşii de înaltă calitate, care trebuie să parcurgă perioade mai lungi de
maturare şi învechire. Din această clasă mai fac parte : pectintranseliminazele,
acidpectintranseliminazele, enolaza ş.a.
Clasa V. Izomeraze. Cele mai importante izomeraze sunt: glucozofosfatizomeraza şi
triozofosfatizomeraza.
Glucozofosfatizomeraza catalizează izomerizarea unor esteri fosforici ai glucozei în
faza pregătitoare a fermentaţiei alcoolice sau faza de activare a zaharurilor.
Triozofosfatizomeraza catalizează izomerizarea celor 2 trioze (aldehida fosfoglicerică
şi fosfidihidroxiacetona), rezultate prin scindarea esterului Harden-Young (în ultima fază a
activării glucidelor).
Clasa VI. Ligaze. Din ligaze, în vinificaţie poate acţiona enzima sulfurilază, capabilă
să reducă sulfaţii, rezultând în vin SO2. Astfel, se explică prezenţa SO2 în vinurile nesulfitate
dar, în care activează levuri ce posedă, în echipamentul lor enzimatic, sulfurilaza.
CAPITOLUL V
MICROFLORA SPECIFICĂ INDUSTRIEI VINICOLE
Bacteriile lactice sunt microorganisme Gram pozitive, capabile să producă acid lactic,
prin degradarea diverselor substraturi:
- hexoze: bacteriile care degradează 95 % din glucoză în acid lactic sunt denumite
homolactice; cele care degradează mai puţin şi formează produşi secundari sunt denumite
heterolactice;
- acidul malic: transformarea acidului malic în acid lactic, cunoscută sub numele de
fermentaţie malolactică este un proces cu mari implicaţii compoziţionale şi organoleptice;
- alte substraturi: pentoze, acid tartric, acid citric, glicerol.
Bacteriile din vin au fost descrise pentru prima dată de către Pasteur, care în "Studii
asupra vinului" din 1866, a concluzionat că ele erau responsabile pentru numeroase alterări,
cum ar fi fermentarea acetică, înăcrirea lactică, tourne, băloșirea sau amăreala. Cu toate că
această descriere a fost corectă, era incompletă, deoarece a prezentat bacteriile ca fiind în mod
exclusiv microorganisme dăunătoare pentru vin. Această imagine negativă a persistat timp de
aproape 70 de ani, chiar și după ce s-a constatat că unele dintre ele, bacteriile producătoare de
acid lactic, au fost capabile să transforme acidul malic în acid lactic în timpul fermentației
malolactice. Abia în 1920–1930 s-a demonstrat că fermentația malolactică îmbunătățește
semnificativ calitatea majorității vinurilor. Speciile de bacterii lactice sunt numeroase pe
struguri și în must dar această diversitate scade în timpul fermentației alcoolice și adesea se
detectează doar o singură specie în timpul fermentației malolactice. În 1967, această specie a
fost numită Leuconostoc oenos, mai târziu redenumită Oenococcus oeni. Deși bacteriile din
specia O. oeni sunt cele mai apte să se dezvolte în vin și să realizeze FML, există o mare
varietate de tulpini ale căror proprietăți tehnologice sunt mai mult sau mai puțin interesante.
Unele tulpini sunt extrem de eficiente, adică capabile să realizeze fermentația malolactică rapid
și fără nici o alterare. Altele, însă, sunt dăunătoare, deoarece acestea sunt foarte lente pentru a
se pune în activitate și/sau produc alterări (amine biogene, amăreală, acid acetic...) (Favier M.
ș.a., 2011).
5.3 LEVURILE
În spaţiul periplasmatic se găsesc mai multe enzime asociate peretelui celular, dintre
care cea mai importantă dintre ele este invertaza, care catalizează hidroliza zaharozei în glucoză
şi fructoză. Activitatea acestor enzime este maximă în timpul fazei de creştere exponenţială a
populaţiilor şi se diminuează ulterior, fiind implicate în refacerea peretelui celular. Activităţi de
tip β-glucanază se întâlnesc şi la celulele în fază staţionară şi chiar la cele moarte, din drojdie,
timp de mai multe luni de la încheierea fermentaţiei (Ribereau-Gayon P ş.a., 1998).
Membrana plasmică. Membrana plasmică este un organit esenţial pentru viaţa celulei
levuriene, jucând rolul unei bariere cu mare putere selectivă între celula vie şi mediul său
exterior. Ea controlează toate schimburile celulei, vizând nutrienţii indispensabili creşterii şi
funcţionării normale a celulei sau metaboliţii secretaţi în mediul de cultură (Charpentier C.,
1993).
Membrana plasmică este constituită din lipide şi proteine. De exemplu, la
Saccharomyces cerevisiae, membrana plasmică a celulei conţine 50 % proteine, 40 % lipide,
10 % glucani şi manani. Lipidele membranare sunt reprezentate de fosfolipide şi steroli,
molecule care posedă o parte hidrofilă şi o parte hidrofobă. Membrana plasmică are trei funcţii
importante. Funcţia principală este aceea de a constitui o barieră hidrofilă stabilă între
citoplasmă şi mediul înconjurător al celulei. A doua funcţie este aceea de a genera glucanul şi
chitina care intră în constituţia peretelui celular. A treia funcţie este bazată pe proprietatea unor
proteine membranare de a acţiona ca receptori celulari specifici, permiţând levurii să
reacţioneze la diferiţi stimuli externi, cum ar fi hormonii sexuali sau schimbările de concentraţie
ale nutrienţilor externi (Ribereau-Gayon P ş.a., 1998).
5.3.1.2 Citoplasma şi organitele celulare
Citoplasma este structura celulară delimitată de membrana plasmică şi membrana
nucleară, fiind constituită din citosol şi organitele celulare.
Citosolul. Substanţa citoplasmatică de bază, care se prezintă ca o soluţie tamponată, cu
pH = 5−6, este bogată în ribozomi. Aceştia se prezintă sub forma unor mici granulaţii constituite
din acid ribonucleic şi proteine, unde are loc sinteza proteică. Tot în citosol se găseşte şi
glicogenul, principala substanţă de rezervă glucidică a celulei levuriene, care se acumulează în
timpul fazei staţionare, sub formă de granule sferice, cu diametrul de aproximativ 40 nm.
Organitele celulare. Organitele celulare ale celulei levuriene, asemănătoare tuturor
celulelor vegetale, sunt reticulul endoplasmatic, aparatul Golgi, vacuola şi mitocondriile.
5.3.1.3 Nucleul
La celulele neproliferante nucleul este situat în apropierea vacuolei principale. Este
sferic, cu diametrul de 1−2 μm, înconjurat de o membrană dublă, prezentând doi poli efemeri,
cu localizare schimbătoare, care permit schimburile de proteine cu moleculă mai mică între
nucleu şi citoplasmă. Nucleul celulei levuriene conţine fondul genetic.
Acidul acetic. Acidul acetic influenţează negativ înmulţirea levurilor fermentative din
genul Saccharomyces, atât în condiţii de aerare, cât mai ales de neaerare, toxicitatea lui crescând
o dată cu temperatura. Dozele de 1 g/L provoacă încetinirea vizibilă a fermentaţiei; când doza
atinge 2 g/ L, gradul de fermentare scade simţitor; la 3,2 g/ L, levurile fermentează doar 1/4−1/3
din zaharurile fermentescibile. Comportamentul levurilor faţă de acidul acetic este diferit, în
funcţie de specie. Astfel, cele din genul Pichia suportă până la 8 g/ L; Candida mycoderma
până la 20 g/ L; Saccharomyces ludwigii fermentează încă energic la 22 g/l (Schanderl H.,
1958).
Polifenolii. Taninurile şi substanţele colorante, în doze ridicate, în unele vinuri roşii,
pot provoca dificultăţi de fermentaţie şi chiar oprirea acesteia, fixându-se pe pereţii celulari şi
îngreunînd astfel schimburile cu mediul. De altfel, dificultăţile de fermentaţie sunt mai
frecvente în anii când taninurile şi substanţele colorante sunt abundente în struguri.
Glicerolul. În afara efectelor legate de cantitatea de glicerol format în mustul care
fermentează, concentraţia intracelulară de glicerol este de mare importanţă pentru ansamblul
activităţilor fiziologice ale levurilor. Conţinutul în glicerol intracelular al levurilor este corelat
cu capacitatea lor de a fermenta la temperaturi scăzute (Grossmann M.K. şi Pretorius I.S.,
1999). Producţia de glicerol permite levurilor să facă faţă stresului osmotic, în special în
musturile foarte bogate în zahăr. În condiţii de stres hiperosmotic, concentraţia de glicerol
intracelular creşte (Mager W.H. şi Varela J.C.S., 1993).
Elementele minerale. Substanţele minerale au rol plastic, rol fiziologic, rol de
catalizatori şi de activatori.
Fosforul este elementul esenţial în mecanismul fermentaţiei alcoolice. Se găseşte în
compuşii macroergici ADP şi ATP.
Sulful este folosit pentru sinteza aminoacizilor care conţin acest element: cistina,
cisteina, glutationul.
Potasiul este, după fosfor, cel mai important din punct de vedere cantitativ şi reglează
absorbţia zahărului din mediul înconjurător.
Magneziul joacă rol esenţial în procesul de fosforilare a zaharurilor, ca şi în procesul de
activare a cocarboxilazei, enzima care carboxilează acidul piruvic.
Fierul intră în constituţia unor enzime, dar când se găseşte în exces, devine inhibitor.
Efectul inhibitor al fierului se explică prin modificarea potenţialului de oxido-reducere, dar şi
prin faptul că fierul poate să se fixeze în protoplasma celulei, provocând otrăvirea acesteia.
Manganul, Cuprul, Zincul, în doze mici, stimulează activitatea levurilor, iar în doze
mari o jenează.
De regulă, mustul de struguri conţine cantităţi suficiente din aceste elemente, pentru ca
fermentaţia să se desfăşoare în bune condiţii.
5.3.2.3 Factorii de creştere şi de supravieţuire
Pentru ca levurile să-şi poată desfăşura în condiţii optime activitatea în must, este
necesară prezenţa unor substanţe stimulatoare. În funcţie de natura lor, de momentul intervenţiei
şi modul de acţiune, aceste substanţe se constituie în factori de creştere sau de supravieţuire.
Factorii de creştere sunt substanţe care joacă rol esenţial pentru creşterea şi dezvoltarea
levurilor. Ribereau-Gayon J. şi Peynaud E. (1964) au dat următoarea definiţie factorilor de
creştere: "substanţe organice active în doze foarte mici, care nu participă la edificarea masei
citoplasmei şi pe care microorganismele, în funcţie de specie, nu le pot sintetiza sau le
sintetizează cu perturbarea funcţionării lor şi, în consecinţă, trebuie să le găsească în mediu
pentru a se putea dezvolta".
Factorii de creştere sunt pentru levuri ceea ce sunt vitaminele pentru organismele
superioare. Ei sunt constituenţi esenţiali ai coenzimelor şi pe această bază intervin în reacţiile
metabolismului. Din acest motiv, Renouil Y. (1987) le denumeşte "factori vitaminici sau
enzimovitamine".
Factorii de supravieţuire sunt substanţe care prelungesc viabilitatea şi activitatea
fermentativă a levurilor neproliferante. Importanţa tehnologică specială a factorilor de
supravieţuire rezultă din faptul că o mare parte a zaharurilor, mai ales în cazul musturilor
provenite din recolte supramaturate, este fermentată de populaţiile neproliferante de levuri, ceea
ce le îngreunează mult activitatea.
Factorii de supravieţuire ai levurilor sunt: unii steroli (ergosterolul, colesterolul,
lanosterolul), acidul oleanolic şi ocitocina (Larue F., 1978). Sterolii sunt constituenţi
importanţi ai membranelor şi controlează schimburile celulei cu mediul. Giudici P. şi
Guerzoni M. (1982) au propus chiar utilizarea conţinutului în steroli ca un criteriu de selecţie
a levurilor de interes oenologic.
În general, la nivelul metabolismului fermentativ, acţiunea sterolilor atrage o producţie
crescută de alcool şi glicerol, precum şi unele modificări ale conţinuturilor în esteri ai acizilor
graşi superiori. Acţiunea factorilor de supravieţuire conduce la fermentarea suplimentară a
15−25 g/L zaharuri, dar este foarte important de menţionat faptul că este vorba despre ultimele
grame de zahăr, care ar rămâne nefermentate dacă factorii de supravieţuire n-ar prelungi
viabilitatea levurilor în faza de declin (Lafon-Lafourcade S., 1980). Acest lucru este deosebit
de important când se doreşte obţinerea de vinuri seci.
5.3.2.4 Fenomenul Killer a fost pus în evidenţă de Beevan E.A. şi Makover M. (1963).
Din punct de vedere al fenotipului Killer, levurile se clasifică în 3 fenotipuri: K− levuri "Killer", N
− neutre şi S − sensibile. Levurile din prima grupă le ucid pe cele sensibile. Cele neutre nu le ucid
pe cele din grupa S dar nici nu sunt sensibile la acţiunea celor din prima grupă (Barre P., 1982,
1984).
Mecanismul Killer este larg răspîndit la toate genurile de levuri. La levurile de interes
vinicol, mecanismul a fost evidenţiat mai întâi de Naumov G.I. ş.a. (1973). S-a stabilit că
factorul killer este prezent nu doar în suşele de colecţie ci şi în blastomicetele izolate din
musturi, vinuri şi localurile de vinificaţie (Palpacelli P. ş.a., 1991). Hidalgo P. şi Flores M.
(1994) studiind fenotipul Killer al unor levuri izolate din unele zone viticole spaniole au
descoperit că în timpul procesului de vinificare procentul suşelor ce prezintă caracterul Killer
variază: 18,8 % în must, 56 % la mijlocul fermentaţiei şi 58,8 % la sfârşitul fermentaţiei.
Levurile care posedă factorul Killer sunt capabile să secrete o toxină ucigaşă pentru
levurile sensibile. Toxinele ucigaşe sunt produse de nişte particule prezente în citoplasma
celulei. Aceste particule asemănătoare cu virusurile sunt constituite din două tipuri de acid
ribonucleic, fiecare din ele fiind acoperit cu un strat de proteină identică. Toxinele produse sunt
glicoproteine, constituite din 10 % proteine şi 90 % polizaharide (Bevan E.A. şi Makover M.,
1963).
Pentru manifestarea caracterului Killer al levurilor, acestea trebuie să întâlnească în
mediu anumite condiţii. În funcţie de aceste condiţii, caracterul killer se poate manifesta sau
nu, ori se pot înregistra modificări ale fenotipului, cu toate consecinţele care decurg de aici
pentru buna derulare a fermentaţiei.
Remanenţa toxinei killer prezintă o importanţă tehnologică semnificativă atunci când se
procedează la două fermentaţii alcoolice decalate în timp, aşa cum este cazul îmbogăţirii mustului
în zahăr, reluării fermentaţiei după o oprire prematură sau cazul fermentaţiei secundare la
producerea vinurilor spumante. A doua fermentaţie ar putea fi grav perturbată de natura killer a
suşei ce a realizat prima fermentaţie. Aceste efecte sunt mult atenuate când fermentaţia principală
se realizează în prezenţa bentonitei şi dacă temperatura a ajuns la 280C. Situaţia este valabilă şi la
vinificaţia în roşu (Barre P., 1984).
Consecinţele tehnologice ale caracterului killer al levurilor sunt deosebit de importante,
de aceea printre criteriile de selecţie a levurilor de interes oenologic este inclusă şi cunoaşterea
acestui caracter. Dacă o suşă indigenă killer slab rezistentă la alcool îşi exprimă acţiunea faţă
de o populaţie sensibilă, aceasta poate antrena grave incidente fermentative (Van Wuuren
H.J.J. şi Wingfield B.D., 1986).
5.3.3.3 Evoluţia unei populaţii de levuri
Dacă se însămânţează o cultură de levuri în must sau în alt mediu nutritiv şi se determină
periodic numărul de celule se constată că evoluţia populaţiei urmează o curbă de creştere, pe
parcursul căreia se disting mai multe faze (figura 5.5).
Faza de latenţă (numită şi faza de lag, de la engl. to lag = a întârzia, a rămâne în urmă),
se manifestă după însămânţarea levurilor în must şi reprezintă o perioadă în care numărul
acestora rămâne neschimbat sau cunoaşte chiar o anumită scădere, aceasta fiind perioada când
levurile se adaptează la noul mediu. Această perioadă de latenţă este perioada în care are loc
inducţia enzimelor corespunzătoare noului mediu şi durata ei depinde de o serie de factori, în
principal de starea culturii de levuri şi de favorabilitatea mediului în care acestea au fost
însămânţate.
Faza de creştere exponenţială (logaritmică) se caracterizează printr-o creştere
exponenţială a numărului de levuri şi a cantităţii de biomasă formată. După adaptarea la noul
mediu, levurile încep să se multiplice, mai întâi cu o viteză mai mică, în continuare într-un ritm
foarte rapid, iar spre sfârşitul fazei se înregistrează o diminuare a ritmului de creştere. În timpul
fazei exponenţiale de creştere, durata de formare a unei noi generaţii este minimă (deşi este mai
mare decât la bacterii, nu depăşeşte câteva ore). În această fază, creşterea se menţine constantă
chiar dacă mediul cunoaşte schimbări ale compoziţiei (scăderea conţinutului în zahăr şi în azot),
deoarece reacţiile de bază sunt enzimatice şi cât timp substanţele din substrat sunt prezente în
cantităţi care asigură saturarea enzimelor, metabolismul şi creşterea continuă cu aceeaşi viteză.
Dintr-un gram de acid malic se obţin, pe această cale 343 mg alcool etilic şi 656 mg
CO2, sau altfel spus, din 2,33 g acid malic rezultă 0,8 g alcool etilic, adică 0,1 % vol. (Leveque
D. ş.a., 1986).
Interesul pentru acest tip de metabolizare a acidului malic apare cu atât mai justificat cu
cât musturile cu exces de aciditate au conţinuturi mici de zahăr, în care cazuri s-ar putea
ameliora puţin şi gradul alcoolic al vinurilor. Totuşi, capacitatea suşelor de Saccharomyces
cerevisiae de a metaboliza acidul malic rămâne scăzută.
5.4 MUCEGAIURILE
Mucegaiurile sunt ciuperci filamentoase care afectează strugurii, mustul sau vinul, iar
în alte cazuri recipientele, spaţiile de vinificare şi stocare a produselor, dopurile de plută ş.a.
Ciuperci inferioare, obişnuit aerobe, mucegaiurile sunt foarte răspândite în natură: în aer, în
apă, în sol (ca saprofiţi pe substanţa organică în descompunere şi ca paraziţi la plante şi
animale), datorită numărului mare de spori pe care îi formează, uşurinţei cu care aceştia pot fi
transportaţi dintr-un loc în altul, rezistenţei mari la condiţiile neprielnice de viaţă etc. Foarte
des întâlnite în vii, pe frunze, boabe, în sol, pe utilajele şi pereţii din pivniţe, la suprafaţa
mustului, mucegaiurile nu cresc totuşi în vin datorită efectului inhibitor al alcoolului (Popa A.
şi Teodorescu Şt. – 1990).
Nutriţia mucegaiurilor este de tip heterotrof. Principala sursă de carbon şi energie este
reprezentată de glucide. Cel mai uşor este asimilată glucoza dar şi alte glucide, în special
zaharoza şi maltoza sunt preferate. Unele specii pot utiliza şi poliglucide, ca de exemplu amidon
şi celuloză.
Toate speciile sunt capabile să utilizeze azotul organic; există însă şi unele care pot
folosi şi sărurile de amoniu sau nitraţi. Pentru o bună dezvoltare, mucegaiurile au nevoie, pe
lângă elementele minerale obişnuite şi de numeroase oligoelemente ca: Fe, K, Zn, Cu, Mn, Mo
precum şi de diferiţi factori de creştere.
Din punct de vedere taxonomic, mucegaiurile se încadrează în clasele: Phycomycetae,
cu genurile Mucor şi Rhizopus; Ascomycetae, familia Aspergillaceae, cu genurile Aspergillus
şi Penicillium; Basidiomycetae, familia Meruliaceae, cu genul Merulius; Deuteromycetae
(fungi imperfecţi).
Însuşirile dezinfectante ale gazului degajat prin arderea sulfului (SO 2) erau cunoscute
din timpuri străvechi. În practica vinificaţiei, gazul rezultat prin arderea sulfului a fost folosit
mai întâi la tratarea butoaielor de lemn, imediat după "inventarea" acestora, la începutul erei
noastre şi la întreţinerea galeriilor în care se păstrau vinurile. Rezultatele mulţumitoare
constatate la folosirea gazului, pentru tratarea vaselor din lemn şi a spaţiilor în care se păstrau
vinurile au condus la ideea că acesta ar putea avea un efect pozitiv şi în privinţa menţinerii unei
corecte ţinute a vinurilor. Această intuiţie a fost pe deplin confirmată de-a lungul timpului
(Schopfer J.F. şi Aerny J., 1985).
Treptat, SO2 a fost implicat în toate etapele de elaborare, păstrare şi condiţionare a
vinurilor, îndeplinind un rol esenţial la realizarea unor produse de înaltă calitate, cu o
compoziţie chimică normală şi însuşiri organoleptice agreate chiar şi de către consumatori cu
gusturi bine conturate în materie.
Proprietăţi fizice: gaz incolor, cu miros sufocant; masa moleculară 64,06; temperatura
de lichefiere -100C (la presiune normală); masa specifică sub formă lichefiată 1,46 kg/L; masa
specifică sub formă gazoasă 2,927 g/L (în condiţii normale).
Proprietăţi fizico-chimice: substanţă relativ solubilă în apă. În procente, solubilitatea
substanţei se prezintă astfel: 22,83 la 00C; 19,31 la 50C; 16,21 la 100C; 13,54 la 150C; 11,28 la
200C; 7,80 la 300C; 5,41 la 400C. Se constată că solubilitatea anhidridei sulfuroase în apă
descreşte pe măsură ce temperatura creşte. În condiţii de temperatură normală, se prepară soluţii
apoase de 5–6 %, a căror tensiune de vapori este destul de mare, SO2 eliberându-se cu uşurinţă.
În must şi vin, acidul sulfuros poate exista ca atare (nedisociat, H 2SO3 molecular) sau
sub formă disociată (anion bisulfit HSO3- şi anion sulfit SO32-). În condiţii speciale pot să apară
şi ioni pirosulfit (S2O52-). La pH-ul vinului (cuprins, în general, între 2,8 şi 3,5) cea mai mare
parte a acidului sulfuros se găseşte sub formă de anion bisulfit.
Odată cu creşterea valorii pH, sporesc şi proporţiile de anioni bisulfit şi anion sulfit şi
scad conţinuturile în acid sulfuros în stare moleculară (nedisociat). Dioxidul de sulf solvit fizic
(SO2), acidul sulfuros molecular (H2SO3) şi anionii: bisulfit (HSO3-), sulfit (SO32-) şi pirosulfit
(S2O52-) constituie SO2 liber. Anionul bisulfit reacţionând cu diferiţi componenţi ai vinului
formează SO2 combinat sau legat. Acidul sulfuros liber împreună cu cel combinat formează
H2SO3 total.
6.1.1.1 Acidul sulfuros liber reprezintă proporţii cuprinse între 15 şi 30 % din cel total.
Este fracţiunea care se titrează direct cu o soluţie de iod de o anumită normalitate. În cadrul SO2
liber, cel solvit fizic (0,5–1,5 %) şi H2SO3 molecular, nedisociat (0,5–9,5 %) constituie
fracţiunea cunoscută sub numele de acid sulfuros activ, reprezentând 2–10 %. Acidul sulfuros
activ este cel care imprimă vinului mirosul înecăcios, sulfuros, fiind singura fracţiune care
exercită acţiune asupra microorganismelor.
6.1.1.2 Acidul sulfuros combinat reprezintă 70–85 % din cel total. Principalii
constituenţi în măsură să combine proporţii importante de ioni bisulfit sau acid sulfuros sunt
cei care conţin funcţii carbonilice (aldehidică şi cetonică). Constituenţii principali ai mustului
şi vinului în măsură să formeze combinaţii cu SO 2 provin, mai cu seamă, din metabolismul
levurilor. Acestea sunt aldehidele (în special aldehida acetică), acidul piruvic, acidul α-
cetoglutaric ş.a. Anhidrida sulfuroasă se combină însă şi cu unele substanţe a căror origine se
află în struguri (glucide, acizii uronici, polifenoli ş.a). O situaţie mai completă a constituenţilor
mustului şi vinului, proveniţi din strugurii sănătoşi, în stare să formeze combinaţii cu anhidrida
sulfuroasă, proporţiile şi conţinuturile combinaţiilor, precum şi tipul reacţiilor dintre parametrii
de combinare se prezintă în tabelul 6.1.
Dioxidul de sulf combinat nu exercită acţiune antioxidantă (reducătoare), iar
proprietatea antiseptică se manifestă, în măsură limitată, numai asupra bacteriilor fermentaţiei
malolactice. Această activitate slabă asupra bacteriilor lactice este atribuită, de fapt, tot SO 2
liber, rezultat prin descompunerea unor forme labile ale anhidridei sulfuroase combinate. Unele
dintre combinaţiile SO2 sunt stabile menţinându-se ca atare (în special cele cu aldehidele, acidul
piruvic, acizii uronici), altele sunt puţin stabile sau parţial reversibile (cele cu: acidul α-
cetoglutaric, glucidele, polifenolii, produşii de oxidare ai glucidelor). Acestea din urmă, în
anumite condiţii (temperaturi ridicate, pH scăzut), printr-un proces de disociere pot elibera o
parte din anhidrida sulfuroasă.
6.1.1.3 Combinaţiile SO2 în must şi vin
Numeroasele studii şi cercetări pe tema rolului SO2 în vinificaţie au demonstrat că
eficacitatea anhidridei sulfuroase în must şi vin nu depinde numai de doza administrată, ci şi de
natura şi proporţiile constituenţilor în măsură să formeze cu ea combinaţii stabile, nedisociabile.
Combinaţia acidului sulfuros cu aldehida acetică este cea mai importantă, ea
reprezentând 50–80 % din acidul sulfuros combinat. Aldehida acetică este primul constituent
al vinului care se combină cu SO2 şi numai după aceea au loc combinările celorlalţi constituenţi,
menţionaţi în tabelul 6.1. Acidul aldehidosulfuros se constituie în fracţiunea stabilă a SO 2 (ea
fiind o combinaţie foarte puternică), fără nici o acţiune dintre cele atribuite anhidridei sulfuroase
active.
Conţinuturile de aldehidă acetică în vinuri, în funcţie de mai mulţi factori (tehnologici
şi biologici) se situează între limite foarte largi (20–150 mg/L). Proporţiile normale sunt
cuprinse, însă, între 25 şi 40 mg/L (Ţârdea C. ş.a., 2000). Acetaldehida este responsabilă de
legarea a mai mult de jumătate din SO2 în vinurile roșii și 75 % în vinurile albe. Acest compus
se poate forma prin contactul vinului cu oxigenul din atmosferă după fermentația alcoolică.
Etanolul este oxidat în acetaldehidă de speciile reactive de oxigen, cum ar fi peroxidul apei,
formate prin contactul vinului cu oxigenul în prezența metalelor de tranziție (fier, cupru) și
substanțe fenolice (Danilewicz J. C., 2003). Administrarea SO2 în must, înainte de fermentaţie,
″stimulează″ levurile să producă substanţe în măsură să-l combine pentru a se apăra împotriva
acţiunii antiseptice a substanţei. În astfel de situaţii, practic, întreaga cantitate de anhidridă
sulfuroasă adiţionată în must înainte de fermentaţie este combinată şi inactivată de către unii
metaboliţi ai levurilor (aldehida acetică, acidul piruvic, acidul α-cetoglutaric ş.a.).
Tabelul 6.1
Combinaţiile SO2 cu substanţele din must şi vin
Acid glucozonic
5. Compuşi 0,5–1 0–1,8 Acizi fenolici (substanţe colorante) 2/3 combinaţii stabile
fenolici
H OH
CH3 C + SO2 + H2O CH3 C H
O SO3H
44 64 18 126
În prezent există mai multe produse care pot îndeplini unilateral, fie acţiune antiseptică,
fie acţiune antioxidantă. Sunt bine definite la ora actuală trei produse chimice: acidul sorbic
(cu efect antifungic), acidul ascorbic (cu efect antioxidant), lizozima (cu efect antibacterian).
Dozele de SO2 pot fi considerabil reduse şi prin implicarea în producţia vinicolă a unor
procedee cu grad ridicat de tehnicitate. Printre acestea pot fi luate în considerare: procedeele
fizico-mecanice moderne (microfiltrarea, ultrafiltrarea, centrifugarea de înaltă performanţă) şi
unele procedee termofizice (pasteurizarea, termolizarea, actinizarea).
Acidul sorbic este un acid gras, monocarboxilic nesaturat (cu 6 atomi de carbon):
CH3–CH=CH–CH=CH–COOH
La folosirea acidului sorbic (sub formă de sorbaţi) este necesar să se ţină seama că
spectrul antimicrobian al său este limitat, având acţiune numai asupra fungilor. Bacteriile
specifice industriei vinicole nu sunt în nici un fel afectate. Însuşirile antifungice remarcabile ale
acidului sorbic se manifestă prin inhibarea dezvoltării miceliului şi a germinării sporilor la
mucegaiurile care se întâlnesc în sectorul de vinificaţie, iar levurile nu se mai pot înmulţi.
Dozele de acid sorbic capabile să împiedice înmulţirea şi activitatea levurilor sunt, în funcţie
de specie, compoziţia mustului şi gradul alcoolic al vinului, între 100–200 mg/L (Ribereau-
Gayon J. ş.a., 1977).
pH-ul vinului prezintă o importanţă semnificativă privind eficacitatea acidului sorbic:
cu cât este mai coborât, cu atât efectul antilevurian al substanţei creşte şi invers. Reiese deci că,
la vinuri cu pH-uri scăzute (2,9–3,0) dozele de inhibare vor fi mai mici.
Acidul sorbic, în dozele amintite (100–200 mg/L), nu influenţează negativ aroma şi
gustul vinurilor, nici după încorporare şi nici după mai mulţi ani de învechire. Nuanţe străine la
degustare apar însă în cazul folosirii unor doze de peste 300 mg/L, iar la peste 450–500 mg/L
vinurile devin respingătoare.
Acidul ascorbic, cunoscut, mai ales, şi sub numele de vitamina C, în struguri şi apoi în
must se găseşte în conţinuturi situate între 50 şi 90 mg/L. În timpul fermentaţiei alcoolice este
metabolizat în întregime de către levuri, astfel că în vin nu se mai află.
Datorită proprietăţii lui puternic reducătoare, acidul ascorbic îşi poate găsi
aplicabilitatea şi în scopul preîntâmpinării sau tratării unor defecte de natură biochimică sau
fizico-chimică (casarea brună şi casarea ferică). Deşi acidul ascorbic nu inhibă direct activitatea
polifenoloxidazei, casarea brună este evitată datorită puterii de a reduce chinonele (substanţe
de culoare galben-brună) rezultate din grupările orto-difenolice ale polifenolilor, sub acţiunea
enzimei şi în prezenţa aerului.
Lizozima cunoaşte, în ultima vreme extindere în industria vinicolă. Este o enzimă
extrasă din albuşul de ou, având acţiune litică asupra peretelui celulelor bacteriilor lactice. Spre
deosebire de SO2, eficacitatea lizozimei creşte o dată cu pH-ul, iar incidenţa organoleptică este
nulă. Lizozima poate fi folosită pentru inhibarea fermentaţiei malolactice la vinurile albe (în
doze cuprinse între 250-500 mg/L), pentru evitarea înăcririi lactice, în cazul finalurilor de
fermentaţie dificile şi pentru stabilizarea vinurilor roşii după fermentaţia malolactică (în doză
de 125-250 mg/L) (Gerbaux V. ş.a., 1999).
CAPITOLUL VII
FENOMENE BIOCHIMICE ŞI BIOFIZICE CARE AU LOC LA
TRANSFORMAREA MUSTULUI ÎN VIN
Fermentaţia alcoolică este faza în care vinul "se naşte" şi este cu atât mai importantă cu
cât eventualele defecte de compoziţie sau organoleptice, apărute ca urmare a derulării
fermentaţiei în condiţii necorespunzătoare, se remediază foarte greu sau deloc în cursul fazelor
ulterioare de evoluţie, influenţând negativ calitatea şi stabilitatea vinului finit.
Etapa a II-a. În această etapă are loc oxidarea, prin dehidrogenare, a glicerinaldehid-3-
fosfatului în acid-3-fosfogliceric. Iniţial, prin participarea unei molecule de ATP, rezultă acidul-
1,3-difosfogliceric. Reacţia este catalizată de enzima triozofosfatdehidrogenaza.
Etapa a III-a. În această etapă are loc transformarea acidului 3-fosfogliceric în acid
piruvic, în urma unei suite de reacţii. Mai întâi, acidul-3-fosfogliceric este transformat în acid-
2-fosfogliceric, sub acţiunea enzimei fosfogliceratmutaza:
În urma unei reacţii considerate spontană, acidul enolpiruvic trece în acid piruvic:
Prin această reacţie se încheie procesul de glicoliză. Acidul piruvic format în urma
aceastei reacţii este primul metabolit intermediar nefosforilat din procesul de glicoliză.
Etapa a IV-a. În această etapă are loc decarboxilarea acidului piruvic, ceea ce conduce
la formarea primului produs principal al fermentaţiei – CO2, care se degajă. Puterea reducătoare
produsă prin glicoliză, sub formă de NADH.H+ trebuie să fie transferată unui acceptor de
electroni pentru a regenera NAD+-ul. În fermentaţia alcoolică nu acidul piruvic, ci produsul său
de decarboxilare, aldehida acetică, serveşte drept acceptor final de electroni. Reacţia de
decarboxilare este catalizată de enzima piruvat decarboxilaza, al cărei cofactor este
tiaminfosfatul (Ribereau-Gayon P. ş.a., 1998).
Etapa a V-a. Aceasta este ultima etapă a procesului de fermentaţie alcoolică, în care se
formează şi cel de-al doilea produs principal al fermentaţiei – alcoolul etilic – prin reducerea
aldehidei acetice, reacţie catalizată de enzima alcooldehidrogenaza, al cărei site activ conţine
ionul Zn2+:
Bilanţul energetic al glicolizei şi al fermentaţiei alcoolice, stabilit pe baza diferenţei
dintre numărul moleculelor de ATP consumate şi al celor formate în cursul diferitelor reacţii,
arată că se consumă 2 molecule de ATP la fosforilarea hexozelor şi se produc 4 molecule de
ATP (câte două pentru fiecare trioză), ceea ce înseamnă un câştig net pentru levură de 2
molecule de ATP, pentru o moleculă de hexoză degradată, echivalentul a 14,6 kcal biologic
utilizabile pentru un mol de glucoză fermentată. Or, din punct de vedere termodinamic, variaţia
de energie liberă în cursul degradării unui mol de glucoză în etanol şi CO 2 este de 40 kcal;
diferenţa, adică 25,4 kcal, este disipată sub formă de căldură (Ribereau-Gayon P. ş.a., 1998).
7.1.1.2 Formarea produşilor secundari ai fermentaţiei alcoolice
În timpul fermentaţiei alcoolice, alături de produşii principali – etanol şi CO2 – se
formează numeroşi compuşi cunoscuţi sub numele de produşi secundari. Chiar dacă se
formează în cantităţi mici – cei mai mulţi de ordinul mg/L – unii dintre aceşti constituenţi au
rol important în definirea însuşirilor olfacto-gustative ale vinului.
Cel mai important produs secundar al fermentaţiei alcoolice este glicerolul, care în unele
vinuri poate să ajungă la cantităţi de peste 10 g/L. Glicerolul se formează printr-o fermentaţie
foarte importantă pentru continuarea procesului de glicoliză, fermentaţia glicero-piruvică,
prezentată separat.
Fermentaţia glicero-piruvică. După cum s-a menţionat mai sus, la sfârşitul primei
etape a fermentaţiei, respectiv glicolizei, molecula de fructoză-1,6-difosfat se scindează în cele
două molecule de trioze: dihidroxiaceton-1-fosfat şi glicerinaldehid-3-fosfat. Dintre aceste
două trioze numai glicerinaldehid-3-fosfatul continuă seria de reacţii prin care se ajunge la
formarea alcoolului etilic, prima reacţie din această serie fiind chiar oxidarea prin
dehidrogenare a glicerinaldehid-3-fosfatului. Pentru ca această reacţie să poată avea loc, în
mediul de fermentare trebuie să existe acceptorul care să preia hidrogenul eliberat, numai că
acest acceptor – aldehida acetică – nu s-a format încă, pentru că fermentaţia n-a ajuns în stadiul
respectiv. Cu alte cuvinte, se creează o situaţie paradoxală, un cerc vicios, deoarece pentru
formarea acetaldehidei, din care va rezulta alcoolul etilic, este nevoie de acetaldehidă pentru
continuarea procesului de fermentaţie.
Situaţia este deblocată prin intervenţia unei căi metabolice alternative, care constă în
preluarea hidrogenului eliberat prin oxidarea glicerinaldehid-3-fosfatului de către cealaltă
trioză, dihidroxiaceton-1-fosfatul, care se transformă în glicerol conform următoarelor reacţii:
Formarea glicerolului conform acestor reacţii se desfăşoară în paralel cu formarea
acidului piruvic, astfel încât prin degradarea unei molecule de hexoză rezultă o moleculă de
glicerol şi o moleculă de acid piruvic:
C6H12O6 CH2OH–CHOH–CH2OH + CH3–CO–COOH
De aceea, procesul este denumit fermentaţie glicero-piruvică Neuberg şi este considerat
"a doua formă a fermentaţiei", opusă faţă de "prima formă a fermentaţiei", stabilită de Gay
Lussac. Aceasta înseamnă că levurile metabolizează zaharurile după mecanisme simultane:
fermentaţia alcoolică şi fermentaţia glicero-piruvică.
Aceste două fermentaţii − Gay-Lussac şi Neuberg − se desfăşoară simultan: la început
domină fermentaţia glicero-piruvică, atunci când în mediu nu se află, în măsură suficientă,
aldehida acetică (acceptorul de hidrogen pentru formarea alcoolului etilic) şi apoi domină
fermentaţia alcoolică, ambele soldându-se cu eliberare de energie.
Cele mai importante cantităţi de glicerol se formează în timpul fermentării primelor 100
g zahăr. În continuare, producţia de glicerol este mai lentă dar niciodată nulă, ceea ce înseamnă
că fermentaţia glicero-piruvică nu este numai una de inducţie. Producerea de glicerol serveşte
levurii pentru echilibrarea potenţialului său de oxido-reducere endocelular, adică balanţei
NAD+/NADH.H+. Acest sistem de securitate îi permite eliminarea NADH excedentar care
apare la terminarea sintezei aminoacizilor, proteinelor şi oxidărilor generatoare de produşi
secundari (Ribereau-Gayon P. ş.a., 1998).
Formarea acidului acetic. Acidul acetic este principalul acid volatil al vinului şi este
produs, mai ales, de bacteriile acetice, responsabil de oţetirea vinului. Este produs, în anumite
cantităţi, şi de levuri în timpul fermentaţiei alcoolice. De altfel, capacitatea levurilor de a
produce acid acetic este unul dintre criteriile de selecţie a celor de interes oenologic.
Acidul acetic prezent în vinuri are diferite origini. Acțiunea Saccharomyces cerevisiae
conduce în mod normal la formarea în vin din 0,2 până la 0,4 g/L acid acetic. Producerea de
acid acetic depinde de tulpina S. cerevisiae utilizată. Pentru fermentarea vinurilor seci, se
consideră utilizarea tulpinilor comerciale ca o modalitate eficientă de a lupta împotriva formării
de acid acetic de levuri. Vinurile dulci tind să fie mai bogate în aciditate volatilă decât vinurile
seci. Botrytis cinerea are un impact asupra producției de acid acetic de către levuri (Rodriguez
A. și Smith C.R., 1999).
Formarea unor cantităţi mari de acid acetic de către levuri este legată de compoziţia
mustului şi de practicile de vinificare.
Cel mai important factor care influenţează formarea acidului acetic de către levuri este,
ca şi în cazul glicerolului, conţinutul iniţial al mustului în zahăr. Cu cât acest conţinut este mai
ridicat, cu atât levurile formează proporţii mai mari de acid acetic în cursul fermentaţiei. Aşa
se explică, în parte, aciditatea volatilă mai ridicată a vinurilor licoroase obţinute din struguri
supramaturaţi. În cazul particular al vinurilor obţinute din struguri concentraţi sub acţiunea
putregaiului nobil, producţiile de acid acetic şi de glicerol cresc datorită prezenţei unor
substanţe inhibitoare ale creşterii levurilor, denumite "botriticine". În must, aceşti compuşi
provoacă o creştere a fermentaţiei gliceropiruvice şi o excreţie mai importantă a acidului acetic
în finalul fermentaţiei. Modul de acţiune al acestor glicoproteine asupra levurilor n-a fost
precizat, dar se pare că starea fiziologică a levurilor în momentul inoculării joacă un rol esenţial
asupra derulării fermentaţiei în musturile obţinute din struguri botritizaţi. S-a constatat că
preparatele industriale de levuri uscate sunt mult mai sensibile la inhibitorii fermentaţiei
alcoolice decât maielele obţinute prin precultură pe un must de struguri sănătoşi (Ribereau-
Gayon P. ş.a., 1998).
Formarea aldehidei acetice. Aldehida acetică este cea mai importantă aldehidă din vin
şi se formează, aşa cum s-a arătat, prin decarboxilarea acidului piruvic, fiind apoi redusă, în
ultima fază a fermentaţiei, în alcool etilic. Acetaldehida poate fi formată chimic (în principal,
după fermentarea alcoolică, atunci când vinurile sunt expuse la oxidarea atmosferică) și
biologic (de către levuri la începutul fermentației). În timpul elaborării de vinuri albe în mod
normal neaerate, cea mai mare parte din acetaldehidă este produsă de levuri în timpul
fermentației alcoolice (Cléroux M. ș.a., 2015).
Macerarea aduce vinurilor roşii cele patru caracteristici specifice: culoare, taninuri,
constituenţi ai extractului, aromă. Tot ceea ce diferenţiază, vizual şi gustativ, vinul roşu de vinul
alb este consecinţa fenomenelor de maceraţie (Peynaud E., 1984).
8.2.1 ALCOOLII
Sunt produşi ai fermentaţiei alcoolice, rezultaţi prin metabolizarea de către levuri a
hexozelor, ei dând vinului caracter de soluţie hidroalcoolică. În vin se găsesc numeroşi alcooli
de origine levuriană, încadraţi în funcţie de numărul grupărilor hidroxil (–OH) din moleculă în
monohidroxilici şi polihidroxilici.
8.2.1.1 Alcoolii monohidroxilici sunt cei care conţin în moleculă o singură grupare
funcţională hidroxil. În această clasă sunt cuprinşi: alcoolul metilic, alcoolul etilic, alcoolii
superiori şi alcoolii aromatici.
Alcoolul metilic (H–CH2OH) este cunoscut şi sub numele de metanol, carbinol şi spirt
de lemn. Provine în exclusivitate din hidroliza enzimatică a grupelor metoxil ale pectinelor din
timpul fermentării-macerării, existente în proporţii mai mari în părţile solide ale strugurilor.
Astfel se explică nivelul mai ridicat de alcool metilic în vinurile realizate prin fermentare-
macerare în comparaţie cu cele vinificate în alb, chiar dacă în ambele cazuri s-a folosit aceeaşi
materie primă. Hidroliza pectinelor cu desprinderea grupărilor metoxilice se prezintă astfel:
–OCH3 + H2O → –OH + CH3OH
Scindarea pectinelor cu formare de alcool metilic are loc sub acţiunea enzimelor
pectolitice specifice strugurilor. Adiţionările de enzime pectolitice, obţinute pe cale industrială
din Aspergillus niger, pot atrage anumite creşteri ale conţinuturilor în alcool metilic (Villetaz
J.C., 1984, 1996).
Alcoolul metilic are următoarele proprietăţi: masa moleculară 32,04; densitatea d 420=
0,7915; punct de topire –970C; punct de fierbere 64,70C; miscibil cu apa în orice proporţie și
este ușor inflamabil.
Conţinuturile de alcool metilic din vinuri diferă în funcţie de natura genetică a soiurilor
din care provin şi de procedeul tehnologic al vinificării strugurilor. Astfel, în vinurile obţinute
din soiuri aparţinând speciei Vitis vinifera, conţinuturile în alcool metilic se situează între 35 şi
100 mg/L la cele albe, iar la cele roşii ajung până la 200 mg/L (Pomohaci N. ş.a., 1990).
Conţinuturile mai mari de alcool metilic în vinurile de HPD se explică prin proporţiile de
pectine din pulpa strugurilor, mult superioare celor din strugurii soiurilor nobile. Oricum, vinul
este băutura fermentată cu cel mai mic conținut de alcool metilc, deoarece strugurii conțin mult
mai puțină substanță pectică în comparație cu celelalte fructe.
Alcoolul metilic prezintă un grad ridicat de toxicitate, acţiune care se manifestă chiar şi
în proporţii foarte mici. Se menţionează că doza toxică pentru un om adult este 5–10 mL (3,96–
7,91 g), iar doza letală 30–60 mL (23,74–47,49 g). Toxicitatea alcoolului metilic se datoreşte
metaboliţilor săi – aldehida formică şi, mai ales, acidul formic. Acesta din urmă blochează
enzimele ferice cu rol în simţul văzului. De aceea, în unele zone, unde se consumă în cantităţi
importante vinuri de HPD, apar cazuri de slăbire a vederii (Gheorghiță M. ș.a., 2006).
Toxicitatea este amplificată și de faptul că se metabolizează foarte încet, mult mai încet decât
etanolul. De aceea, antidotul intoxicației metilice îl constituie alcoolul etilic (Cotea D.V. ș.a.,
2009). Legislația viti-vinicolă din țara noastră (HG 512/2016) limitează conținutul de alcool
metilic la 250 mg/L în vinurile albe și 400 mg/L pentru vinurile roşii.
Având punct de fierbere mai scăzut față de cel al alcoolului etilic, la distilarea vinului,
pentru obţinerea băuturilor de tip Cognac, alcoolul metilic se separă şi trece în prima fracţiune
de distilat numită "frunte". Această fracţiune nu se foloseşte la obţinerea produsului destinat
consumului, având caracter toxic.
Alcoolul etilic (CH3–CH2OH), cunoscut şi sub numele de etanol, rezultă în urma
procesului de metabolizare a hexozelor de către levuri, ca principal produs al fermentaţiei
alcoolice. Sub raport cantitativ, alcoolul etilic ocupă, în vin, locul secund după apă. Sub raport
compoziţional, alcoolul etilic este primul constituent, el fiind cel care conferă vinului caracterul
de băutură alcoolică. Tot alcoolul etilic este primul component care se ia în considerare la
stabilirea categoriilor şi tipurilor de vinuri. În general, conţinuturile de alcool etilic în vinurile
naturale se situează între 9 şi 14 % vol., ajungând în cazuri excepţionale până la 16–17 % vol.
În stare pură se prezintă ca un lichid incolor, cu gust arzător şi miros caracteristic.
Densitatea alcoolului etilic pur d420 este 0,7893; punctul de topire -114,10C, punctul de fierbere
78,320C.
La amestecarea vinului cu apa se observă o mică contracție de volum însoțită de o ușoară
încălzire a soluței hidroalcoolice. Cea mai mare contracție de volum are loc atunci când, la
200C, din 53,9 ml alcool și 49,8 ml apă rezultă 100 ml în loc de 103,7 ml, cât ar trebui să se
obțină. Contracția se datorează formării legăturilor de hidrogen între moleculele de alcool și de
apă (Cotea D.V. ș.a., 2009).
Alcoolul etilic este un puternic deshidratant și de aceea are un rol important în flocularea
coloizilor hidrofili, proteinelor și polizaharidelor și, de asemenea, are proprietăți dezinfectante.
Combinația dintre etanol și aciditate face posibilă conservarea vinului pentru o lungă perioadă
de timp, fără nici o alterare notabilă. Cu toate acestea, etanolul este toxic pentru oameni, care
afecteaza celulele nervoase si ficatul. Doza letală (DL50) prin consumul oral este de 1400
mg/kg greutate corporală (Ribéreau-Gayon P. ș.a., 2006).
Într-un vin natural, gradul alcoolic depinde de conţinutul relativ de glucide al mustului
din care provine pe calea fermentaţiei alcoolice:
C6H12O6 → 2 CH3–CH2OH + 2 CO2
180 92 88
Luându-se în calcul masele moleculare ale substanţelor care intră în reacţie rezultă că
din 100 g hexoze, în mod teoretic, rezultă 51,11 g alcool şi 48,89 g CO2. În realitate, conţinutul
de alcool care rezultă prin metabolizarea hexozelor de către levuri este mai mic decât cel reieşit
din calcul. Cauze: aproximativ 10 % din hexoze sunt folosite de levuri pentru formarea
produşilor secundari ai fermentaţiei (glicerol, acizi, aldehide, esteri ş.a.); o mică parte din
alcooli este antrenată de CO2 şi se pierde în atmosferă; o parte din glucide se consumă pentru
formarea biomasei celulare (Gheorghiță M. ș.a., 2006).
În vin, alcoolul etilic este produsul principal al fermentației alcoolice, sub acțiunea
levurilor, randamentul teoretic de fermentare fiind de 17 grame de zahăr pentru 1 % vol. alcool
etilic. Cu toate acestea, în funcție de tipul levurilor care realizează fermentația, temperatura de
fermentație, natura vaselor înc are are loc fermentația și mărimea lor, operațiunile
prefermentative etc, pot exista mici variații ale acestui randament.
Ca parametru de compoziţie a vinului, alcoolul este singurul care se exprimă în % vol.,
pe când în situaţia tuturor celorlalţi consituenţi principali, rezultatele analizelor sunt redate în
unităţi de greutate (µg, mg, g la litru).
În legislaţia vinicolă din ţara noastră, aliniată la reglementările internaţionale, privind
prezenţa alcoolului în vin, sunt menţionate următoarele noţiuni: tăria alcoolică dobândită sau
efectivă, tăria alcoolică potenţială, tăria alcoolică totală, tăria alcoolică naturală.
Tăria alcoolică dobândită sau efectivă (cunoscută şi sub numele de grad alcoolic)
reprezintă "numărul de ml de alcool etilic existent în 100 mL vin".
Tăria alcoolică potenţială reprezintă "numărul de volume de alcool (ml) realizat prin
fermentaţia totală a glucidelor existente în 100 vol. (mL) din produsul considerat".
Tăria alcoolică totală este dată de "suma tăriei alcoolice efective şi potenţiale".
Tăria alcoolică naturală exprimă "tăria alcoolică totală a produsului considerat,
înaintea oricărei îmbogăţiri" cu fortifianţi (zahăr, alcool).
Alcoolii superiori sunt monohidroxilici dar cu mai mult de doi carboni în moleculă,
având origine fermentativă (tabelul 8.1). În vinuri, conţinuturile globale ale alcoolilor superiori
dozabili variază în limite destul de largi, între 150 şi 550 mg/L. Vinurile fermentate cu levuri
indigene au conținuturi de 2-3 ori mai mari față de cele fermentate cu levuri slecționate.
Tabelul 8.1
Principalii alcooli superiori din vin (după Ribereau-Gayon P. ş.a., 1998)
Formula chimică Denumirea Punct Conţinut Observaţii
de g/L
fierbere
(0C)
CH3–CH2–CH2OH Propanol-1 97 0,03 Alcool propilic normal
CH3–CHOH–CH3 Propanol-2 82 urme Alcool izopropilic
CH3–CH2–CH2–CH2OH Butanol-1 117 urme Alcool butilic normal
CH3 Metil-2- 107 0,1 Alcool izobutilic
| propanol-1
CH3–CH–CH2OH
CH3 Metil-2- 82 ?
| propanol-2
CH3–COH–CH3
CH3–CH2–CHOH–CH3 Butanol-2 99 urme
CH3–CH2–CH2–CH2–CH2OH Pentanol-1 137 urme
CH3–CH2–CH2–CHOH–CH3 Pentanol-2 119 urme
CH3–CH2–CHOH–CH2–CH3 Pentanol-3 115 ?
CH3 Metil-3- 131 0,2 Alcool izoamilic
| butanol-1
CH3–CH–CH2–CH2OH
CH3 Metil-2- 129 0,05 Alcool amilic activ
| butanol-1
CH3–CH2–CH–CH2OH
CH3 Metil-3- 112 ?
| butanol-2
CH3–CH–CHOH–CH3
CH3–(CH2)4–CH2OH Hexanol-1 158 0,01
CH3–(CH2)3–CHOH–CH3 Hexanol-2 138 ?
CH3–(CH2)5–CH2OH Heptanol-1 177 urme
CH3–(CH2)4–CHOH–CH3 Heptanol-2 160 ?
Dintre alcoolii superiori menţionaţi în tabelul 8.1, cel mai mare conţinut îl prezintă
alcoolul izoamilic (200 mg/L), urmat în ordine descrescătoare de: alcoolul izobutilic (100
mg/L), alcoolul amilic activ (50 mg/L), alcoolul propilic normal (30 mg/L), hexanol-1 (10
mg/L). Ceilalţi sunt prezenţi în vin sub formă de urme.
Alcoolii superiori și esterii lor joacă un rol important în aroma secundară a vinului, de
tip fermentativ. În concentrații scăzute, până la 300 mg/L, măresc complexitatea aromei dar la
concentrații mai mari, mirosul lor puternic acoperă finețea aromatică și vinurile devin grosiere,
lipsite de agrement olfactiv.
Alcoolii superiori au două căi de formare: din glucide, prin fermentaţia alcoolică; din
aminoacizi, printr-un proces simultan de decarboxilare şi desaminare, mecanism cunoscut sub
numele de reacţia Ehrlich. Sub raport cantitativ, alcoolul izobutilic reprezintă 30–50 % din
cantitatea totală a acestor constituenţi, el provenind din valină; alcoolul izoamilic, în unele
situaţii depăşind mult 50 % din totalul acestor constituenţi, provine din degradarea enzimatică
a leucinei.
Alcoolii superiori prezintă câteva proprietăţi interesante şi anume: la cantităţi egale, au
putere narcotică mai mare decât cea a alcoolului etilic; contribuie la formarea unor esteri, în
faza de învechire a vinurilor, substanţe care amplifică buchetul; având puncte de fierbere mai
mari decât cel al alcoolului etilic, la distilarea vinului se regăsesc în fracţiunea de "coadă"
(uleiul de fuzel).
Alcoolii aromatici sunt monohidroxilici, dar în structura lor gruparea funcţională –OH
este legată la catena saturată a unei hidrocarburi aromatice. Din această categorie fac parte
alcoolii cunoscuţi sub numele de: fenil-2-etilic şi tirozol.
Fiind constituent fix, se regăseşte în compoziţia extractului vinului. Este considerat una
dintre substanţele test pentru stabilirea provenienţei vinului prin fermentaţie alcoolică, el
formându-se numai pe această cale. Are gust dulce-amărui şi nu este degradat de bacteriile
lactice. Lipsa lui într-o anumită băutură înseamnă că aceasta nu este vin, ci mistel (amestec de
spirt cu must de struguri).
Eritritolul (CH2OH(CHOH)2–CH2OH), constituent cu 4 C şi patru funcţii alcoolice.
Conţinuturile acestui polialcool în vinuri se situează între 30 şi 200 mg/L.
Arabitolul (CH2OH(CHOH)3–CH2OH), polialcool cu 5 C şi cinci funcţii alcoolice,
reprezentând o derivaţie de la arabinoză. În vinuri se află în proporţii cuprinse între 25 şi 350
mg/L.
Manitolul, Sorbitolul şi Mezoinozitolul sunt polialcooli cu 6 C şi şase funcţii
alcoolice. Manitolul şi sorbitolul au structuri lineare, iar mezoinozitolul este ciclic:
8.2.2 ALDEHIDELE
Sunt compuşi în molecula cărora se găsesc funcţii aldehidice (–CHO). Numele aldehidei
se formează în două moduri: într-un singur cuvânt, prin adăugarea sufixului -al la numele
hidrocarburii cu același număr de atomi de carbon (exemplu: etanal); în două cuvinte, respectiv
aldehidă urmat de numele acidului corespunzător, la forma feminină (exemplu: aldehidă
acetică).
După numărul grupelor –CHO, se disting mono-, di- și polialdehide. În funcţie de
structura lor chimică, se împart în două categorii: aldehide alifatice şi aldehide aromatice. În
raport de numărul atomilor de carbon, aldehidele se prezintă sub formă gazoază (formaldehida),
lichidă (C2–C11) sau solidă (C12 și peste). Temperaturile de fierbere sunt mai scăzute față de
cele ale alcoolilor corespunzători datorită absenței legăturilor de hidrogen. Aldehidele C 1–C3
sunt miscibile cu apa, solubilitatea lor scade progresiv, pentru ca de la C 6 să fie practic
insolubile în apă (Cotea D.V. ș.a., 2009).
Din grupa aldehidelor alifatice fac parte: aldehida formică (metanal), aldehida acetică
(etanal) şi aldehidele superioare (în moleculele cărora se află 7 până la 12 carboni). Din grupa
aldehidelor aromatice fac parte unii constituenţi cu nucleu benzenic şi derivaţii furanici.
Principala aldehidă din vin este aldehida acetică, celelalte se găsesc în proporții foarte
mici dar unele dintre ele prezintă interes datorită importanței lor senzoriale.
Aldehida formică (H–CHO). În mod normal, nu se formează în vinuri. Apare însă
accidental, sub formă de urme, ca o consecinţă a folosirii acesteia la desinfectarea dopurilor şi
a altor materiale necesare la îmbutelierea vinurilor.
Aldehida acetică sau etanalul (CH3–CHO). În vinuri, conţinuturile normale de aldehică
acetică se situează între 20 şi 120 mg/L.
Aldehida acetică prezintă câteva proprietăţi cu importante implicaţii de ordin chimic,
organoleptic şi tehnologic (Gheorghiță M. ș.a., 2006):
- Funcţia carbonil (–CHO), prin afinitatea chimică înaltă pe care o posedă, reacţionează
energic cu acidul sulfuros rezultând acidul aldehidosulfuros, combinaţie foarte stabilă faţă de
acţiunile unor factori fizici sau chimici. Sulfitarea strugurilor şi musturilor cu doze ridicate de
anhidridă sulfuroasă poate atrage formarea unor conţinuturi importante de acetaldehidă, ca
mijloc de apărare a levurilor împotriva efectului antiseptic al SO2;
Aceste aldehide pot influenţa, într-un sens sau altul, însuşirile aromatice ale vinului.
Astfel, aldehida benzoică ar putea fi responsabilă pentru producerea mirosului neagreabil de
migdale amare în unele vinuri îmbuteliate (Delfini C. şi Di Stefano R., 1984). Vanilina, din
contră este în măsură să imprime nuanţe plăcute.
Derivaţii furanici sunt substanţe din clasa aldehidelor, formați prin transformarea
pentozelor şi respectiv a hexozelor sub acţiunea unor acizi. Furfuralul se găseşte, mai cu seamă,
în fracţiunea de "coadă" a distilatelor din vin, ceea ce înseamnă că se formează în timpul
distilării, sub acţiunea temperaturilor ridicate.
Hidroximetilfurfuralul se găseşte în cantităţi dozabile în vinurile supuse tratamentelor
fizico-termice cu căldură (pasteurizare, lamporizare) şi la cele în care a fost adiţionat must
concentrat, tot sub acţiunea căldurii. În vinurile normale, conţinuturile de HMF sunt cuprinse
între "nedetectabile" şi 4,2 mg/L, cu o medie de 1,4 mg/L.
Acidul succinic se mai formează în proporţii mici, prin activitatea levurilor, şi din acidul
glutamic. Proporţiile normale de acid succinic din vinuri se situează între 0,5 şi 1,5 g/L.
Conţinuturi mai mari se înregistrează în vinurile provenite prin fermentaţii în care au acţionat
levuri succinogene. Nu este atacat de bacterii şi, de aceea, conţinuturile formate în timpul
fermentaţiei rămân intacte. Are un gust intens amar-sărat, provoacă salivare și accentuează
caracterul vinos, plăcut al vinului.
Acidul lactic (CH3–CHOH–COOH), constituent monohidroxilic şi monocarboxilic, cu
punctul de fierbere la 1220C, este specific vinului, format prin procese fermentative. În stare
pură este un lichid cu gust acru, lipsit de miros, situându-se la limita dintre aciditatea fixă şi cea
volatilă, considerat însă ca acid fix. Acidul lactic din vinuri poate avea trei căi de provenienţă:
din glucide, prin fermentaţia alcoolică produsă de levuri; din acidul malic prin fermentaţia
malolactică produsă de bacteriile lactice; din hexoze prin procese homo- şi heterofermentative
produse de bacteriile lactice (soldate frecvent cu îmbolnăviri grave).
În timpul fermentaţiei alcoolice, levurile formează conţinuturi de acid lactic cuprinse
între 0,2 şi 0,5 g/L, iar prin fermentaţia malolactică şi transformările homo- şi
heterofermentative, bacteriile lactice pot produce proporţii de acid lactic de până la 3 g/L
(Ribereau-Gayon J. ş.a., 1976). Ca şi acidul succinic, acidul lactic nu este atacat de bacterii,
fiind deci stabil sub raport biologic.
Acizii citromalic (α-metilmalic) şi dimetil gliceric se formează prin fermentaţie
alcoolică, în proporţii de 100–250 mg/L şi respectiv 100–500 mg/L.
Acidul formic (H–COOH) este un acid foarte puternic, provenind prin descompunerea
leucinei. Conţinuturile în vinuri ajung până la 50 mg/L. Proporţii mai mari se află în produsele
în care a avut loc boala numită Fermentaţia propionică.
Acidul acetic (CH3–COOH) este cel mai important component al acidităţii volatile. În
stare pură este un lichid acru, cu miros particular pătrunzător. Se disociază într-o mică măsură,
motiv pentru care nu formează tulburări în vinuri. Acidul acetic existent în vin are trei căi de
provenienţă:
- Se formează de către levuri în timpul fermentaţiei alcoolice, ca produs secundar al
acestui proces;
- Se formează din alcoolul etilic sub acţiunea bacteriilor acetice;
- Se formează din hexoze sub acţiunea unor specii de bacterii lactice, în procese
heterofermentative, când vinurile se îmbolnăvesc grav (înăcrirea lactică) şi chiar din acidul
tartric în cazul altei boli (aşa cum este fermentaţia propionică).
În cazul musturilor cu conţinuturi în glucide de 200–220 g/L, rezultate din struguri
sănătoşi, în timpul fermentaţiei, levurile din genul Saccharomyces formează cantităţi mici de
acid acetic, situate sub 0,25 g/L. Proporţii mai mari se formează însă în vinurile provenite din
struguri ajunşi în stadiu de stafidire, unde fermentaţia se prelungeşte pe mai multe săptămâni.
Bacteriile acetice, în schimb, sunt mari producătoare de acid acetic, prin transformarea
alcoolului etilic în aerobioză. Conţinuturile normale de acid acetic în vinuri sunt cuprinse între
0,2 şi 0,55 g/L.
Acidul propionic (CH3–CH2–COOH), în stare pură este un lichid cu miros caracteristic,
în general neplăcut. În vinurile cu compoziţie chimică normală, se găseşte sub formă de urme.
Proporţii destul de mari, care pot ajunge până la 30 % din aciditatea volatilă, se află în vinurile
în care a avut loc fermentaţia propionică ("tourne").
Prin degradarea acidului tartric de către unele bacterii lactice rezultă în principal acid
propionic:
3C4H6O6 → CH3–CH2–COOH + 2 CH3–COOH + 5 CO2 + 2 H2O
Acid tartric Acid propionic Acid acetic
Acidul butiric normal ( CH3–(CH2)2–COOH ) se găseşte sub formă de urme în vinurile
corect realizate. Cantităţi mai mari se găsesc în vinurile bolnave de Amăreală, în care caz din
glicerol rezultă, alături de acroleină, şi acid butiric. Ceilalţi acizi volatili (cu: 5, 6, 7, 8, 9, 10
carboni) prezentaţi în tabelul 8.2 se găsesc, în vinurile normale, sub formă de urme. Ei pot
participa la formarea unor esteri cu miros plăcut, care amplifică buchetul vinului.
În general, la vinurile cu constituţie chimică normală aciditatea volatilă se situează sub
0,6–0,65 g/L (în H2SO4). La 1,0 g/L vinul este suspect, iar la peste 2 g/L produsul este eliminat
de la consum, ca atare, având un pronunţat caracter de oţetire. De aceea, aciditatea volatilă este
considerată ca mărime analitică deosebit de importantă pentru aprecierea stării de sănătate a
vinului şi a calităţii lui. Nivelul acidităţii volatile exprimă, în mod elocvent, condiţiile de igienă
vinicolă şi celelalte rigori privind materia primă şi tehnologiile de obţinere, păstrare şi
condiţionare aplicate, şi nu în ultimul rând priceperea tehnologului.
8.2.3.3 Aciditatea reală sau pH-ul, parametru oenologic cunoscut şi sub numele de
aciditate actuală sau aciditate ionică, rezultă prin disocierea funcţiilor carboxilice de la acizii
liberi sau semilegaţi (–COOH → COO- + H+). În vin, funcţiile acide disociate sau ionizate care
eliberează ioni de hidrogen (H+) reprezintă aproximativ 1% din totalul lor. Aşadar, pH-ul este
dat de ionii liberi de H (H+) şi se exprimă prin valoarea logaritmică a acestora luată cu semn
schimbat. La vinuri, pH-ul prezintă valori situate între 2,8 şi 3,5.
Însemnătatea acizilor este considerabilă:
- ei imprimă gust caracteristic vinurilor, conferindu-le expresivitate, vinozitate şi
prospeţime, mai cu seamă la cele albe şi roze;
- prin disocierea unor funcţii acide libere determină pH-ul, care, la rândul lui, constituie
un factor important pentru stabilitatea biologică şi fizico-chimică a vinurilor;
- stau la baza formării esterilor, constituenţi cu influenţă asupra însuşirilor gusto-
olfactive;
- acidul malic s-a dovedit un excelent factor de prevenire a afecţiunilor hepatice,
determinând dezintoxicarea amoniacală (Nègre E., 1962).
8.2.4 ACETALII
Acetalii sunt compuşi organici rezultaţi prin reacţia dintre aldehide şi alcooli. Dintre
aldehide, acetaldehida are cel mai important rol în acest sens. Combinaţia are loc în două trepte:
Vinurile roşii vechi conţin 20–40 mg/L acetali, iar vinurile de tip oxidativ 150–180
mg/L. Acetalii imprimă miros plăcut de flori şi fructe, amplificând deosebit de favorabil
buchetul de maturare şi învechire. Condiţiile reducătoare din vinurile îmbuteliate favorizează
formarea acetalilor.
În distilatele din vin, acetalii se găsesc în proporţii de 25–190 mg/L, ei formându-se în
timpul distilării.
8.2.5 ESTERII
Din punct de vedere chimic esterii sunt derivaţi funcţionali ai acizilor. Ei se formează
din combinarea acizilor organici cu alcoolii, prin eliminarea unei molecule de apă. Reacţia
globală se prezintă astfel:
Reacţia este reversibilă, având loc şi hidroliza esterilor, sub acţiunea diferiţilor factori.
Esterii din vin au trei căi de provenienţă:
- provin din struguri (acei esteri care conferă vinului aromă de soi);
- se formează în procesele biologice, determinate de microorganisme (esterificarea
biologică);
- se formează prin reacţii şi procese chimice, în fazele de maturare şi învechire
(esterificarea chimică).
Esterificarea biologică are loc în cursul diferitelor transformări biologice
(fermentaţiile: alcoolică, malolactică, acetică, manitică ş.a.). Reacţia se desfăşoară cu o mare
viteză, fiind biocatalizată de esteraze (enzime specifice). Prin esterificarea biologică se
formează esterii acizilor: acetic, lactic, succinic, adică cei care, la rândul lor, se formează tot în
timpul diferitelor fermentaţii. Cel mai important ester format pe cale biologică este acetatul de
etil.
- Succinatul acid de etil se formează prin reacţia dintre acidul succinic şi alcoolul etilic:
Acizii fenolici stau la originea unor defecte grave ale vinurilor. Astfel, esterii tartrici ai
acizilor hidroxinamici (în principal, acidul p-cumariltartric și acidul cafeiltartric), foarte ușor
oxidabili, sunt pricipalii compuși responsabili de brunificarea musturilor și vinurilor albe. De
asemenea, acidul p-cumaric și acidul ferulic sunt precursori ai fenolilor volatili, formați sub
acțiunea unor levuri de contaminare, cum sunt cele din genul Brettanomyces.
8.2.6.1.2 Fenolii volatili o reprezintă grupă de compuși care se formează pe parcursul
transformării mustului în vin sau pe parcursul maturării vinului, sub acţiunea unor levuri de
contaminare sau chiar aparţinând genului Saccharomyces. Aceşti constituenţi care înrăutăţesc
însuşirile organoleptice ale vinurilor sunt grupaţi în etil-fenoli şi vinil-fenoli.
Fenolii volatili din vin sunt: vinil-4-fenol, vinil-4-guaiacol, etil-4-fenol și etil-4-
guaiacol. Vinurile albe conțin cantități variabile de vinil-fenoli, dar nu conțin etil-fenoli.
Dimpotrivă, vinurile roșii conțin doar cantități mici de vinil-fenoli și au concentrații variabile
de etil-fenoli. Compoziția de fenoli volatili a vinurilor roze este între cele ale vinurilor roșii și
albe (Chatonnet P. ș.a., 1992). În prezența fenolilor volatili scade percepția aromelor varietale
și fructate în vinuri (San-Juan Ferreira V. ș.a., 2011).
Cele mai neplăcut mirosuri le au vinil-4-fenolul (produse farmaceutice, vopsea,
cerneală, plastic ars) și etil-4-fenolul (miros de grajd, piele, transpirație de cal). Vinil-4-
guaiacolul și etil-4-guaiacolul au mirosuri mai puțin neplăcute (garoafe, fum, arome
condimentate) dar ei sunt întotdeauna asociați cu vinil-4-fenolul și, respectiv etil-4-fenolul, ale
căror mirosuri sunt dominante.
Principalul responsabil pentru apariția defectului fenolic sunt levurile de contaminare
Brettanomyces bruxellensis. Aceste levuri pot fi detectate pe suprafața strugurilor.
Brettanomyces este o levură puțin exigentă în mediu nutritiv, care se poate adapta la vinuri
bogate în alcool și pH scăzut. Aceste caracteristici îi permit să se adapteze rapid la condițiile
din cramă, să se implanteze la niveluri diferite și să se dezvolte în vinuri în timpul fermentației
alcoolice și alte etape ulterioare. Levurile Brettanomyces produc fenoli volatili, molecule relativ
stabile, foarte odorante și perceptibile la praguri foarte mici, care modifică profund profilurile
aromatice și agrementul gustativ.
Moleculele responsabile de formarea fenolilor volatili (acizi fenolici sau acizi
hidroxicinnamici și esterii tartrici corespunzători) sunt prezente în struguri. Se acumulează în
pulpă și pieliță din prima fază de creștere a bobului și sunt hidrolizați de enzimele unor ciuperci,
cum ar fi Botrytis sau prin preparatele comerciale de pectinază produse din tulpinile selectate
de Aspergillus niger. Astfel, sub acțiunea unei activități enzimatice contaminante a
pectinazelor, concentrația precursorilor de fenoli volatili crește în mod sistematic în must.
Acidul cafeic se consumă rapid în reacțiile de oxidare și este responsabil de brunificarea
oxidativă. Acidul cumaric și acidul ferulic sunt responsabili pentru formarea fenolilor volatili
de către levurile indigene sau levurile uscate active, respectiv vinil-4-fenol și vinil-4-guaiacol
în timpul fermentării. Acești compuși volatili nu sunt eliberați de Saccharomyces cerevisiae în
vinurile roșii. Cu toate acestea, în cazul dezvoltării necontrolate a levurilor Brettanomyces,
acestea formează vinil-fenolii, care sunt reduși în fenolii etilici corespunzători în timpul
învechirii. De asemenea, este posibil ca printr-o adaptare naturală, unele tulpini de
Saccharomyces cerevisiae să fie, de asemenea, capabile să producă vinil-fenoli în vinificația în
roșu. Concentrația acizilor hidroxicinamici și esterii corespunzători variază în funcție de tipul
de struguri și condiții de maturare. Soiurile aromatice sunt în general mai bogate în acizi
hidroxicinamici. În zonele calde, conținutul acestor compuși este mai mare, iar riscul de oxidare
și de a deviații aromatice mai important. Utilizarea pectinazelor extra-purificate limitează
conținutul de acizi fenolici liberi în must și, prin urmare, formarea de fenoli volatili. De altfel,
o bună igienă și controlul asupra microflorei sunt garanții pentru dezvoltarea vinurilor fructate
(Canal-Llaubères Rose-Marie, 2013).
Până nu demult, originea etil-fenolilor din vinul nu era foarte bine cunoscută și a fost
chiar destul de controversată. Concentrațiile de etil fenol pot ajunge, în unele cazuri, la câteva
mg/L, dând vinului un miros puternic neplăcut. Chiar și la concentrații mai mici, 600-700 μg/L,
etil-fenolii modifică aroma. Mirosul poate fi mai puțin neplăcut dar el maschează fructuozitatea
și buchetul vinului, privându-l de personalitate. Etil-fenolii sunt rareori formați în timpul
fermentației alcoolice, provocând alterarea drastică însoțită de producerea rapidă a unor
cantități mari de acid acetic. Cauzele acestui tip de probleme nu sunt foarte bine cunoscute. Din
fericire, este extrem de rar. Sulfitarea insuficientă a strugurilor și o lipsă de igienă în cramă
oferă condiții ideale pentru ca acest tip de alterări să apară. Apariția de etil-fenoli în timpul
învechirii este mult mai frecventă, în special în butoaie uzate, cu toate că mirosuri non-fenolice
se pot dezvolta, de asemenea, în vinurile roșii cu învechire în butoaie noi, sau chiar în cisterne
(Ribéreau-Gayon P. ș.a., 2006).
8.2.6.1.2 Stilbenele sunt compuși fenolici cu greutate moleculară mică ce acționează ca
și compuși antifungici, permițând plantei să reziste la un atac patogen. Stilbenele viței de vie
includ mulți compuși, cum ar fi trans și cis-resveratrolul, glicozidele lor (piceid sau polidatin),
viniferine, pterostilben, astringin, piceatanolul (astringinin) și alți trimeri și tetrameri
resveratrol. Aceste substanțe sunt prezente în țesuturile moi, sub formă de compuși induși
(fitoalexine), și în țesuturi lemnoase, ca și cele constitutive (Bavaresco L. și Fregoni C., 2001).
Principala stilbenă sintetizată de vița de vie este resveratrolul (3,5,4-trihidroxistilbena), ca
răspuns la atacul unor ciuperci patogene (în special, Botrytis cinerea). Concentrația de
resveratrol în struguri variază între 20–40 mg/kg, în funcție de soi și condițiile climatice. În
ciuda proporțiilor foarte scăzute care se găsesc în vin, în ultimele două decenii resveratrolul se
bucură de o atenție deosebit de mare, datorită acțiunilor benefice pentru sănătate, în special în
ceea ce privește rolul său protector față de unele dintre cele mai grave boli, care constituie
primele două cauze de mortalitate pe plan mondial – bolile cardiovasculare și cancerul.
HO
3
4'
CH CH OH
5
HO
Resveratrolul
A B
În struguri, must și vin se găsesc două antocianidine care se deosebesc între ele prin prin
numărul grupelor −OH de la nucleul benzenic lateral (Cotea D.V. ș.a., 2009): (cianidina, cu 5
funcții fenol, de culoare roșu-brună și delfinidina, cu 6 funcții fenol, de culoare violetă închisă)
și trei derivați ai lor: poenidina, derivat metoxilat al cianidinei, de culoare brună; petunidina,
derivat al delfinidinei, la care una dintre cele 6 funcții fenolice este eterificată cu metanol;
malvidina, tot un derivat al delfinidinei dar cu două grupe −OH metoxilate, de culoare brun
închisă. Este antocianidina cea mai rezistentă la oxidările din timpul maturării dar și cea mai
sensibilă la degradarea termică.
În struguri, antocianidinele se găsesc sub formă de glicozide (antociani) prin legarea
componentei flavonoide (aglicon) cu o moleculă de glucoză (în poziția 3) sau cu două molecule
(în pozițiile 3 și 5). Legăturile glicozidice cresc atât stabilitatea chimică cât și solubilitatea
antocianilor. Fiecare antocian poate fi complexat suplimentar (acilat) printr-o legare a porțiunii
de zahăr, de obicei, la C6, fie cu acid acetic, acid cumaric, sau acid cafeic (Jackson R.S., 2008).
În strugurii speciei Vitis vinifera antocianii derivați din cele 5 antocianidine sunt
prezenți în stare monoglucozidică și numai malvidina se prezintă sub ambele forme: mono- și
diglucozid. Forma diglucozidică a malvidinei se găsește în proporții scăzute în soiurile nobile
dar în proporţii importante în strugurii de HPD. De altfel, în vinurile roșii, conținutul
diglicozidului malvidinei este limitat la 15 mg/L. Când conţinutul depășește acest prag apare
suspiciunea că vinul este de HPD sau amestec de vin nobil cu vin de HPD.
Caracterul diglucozid se transmite în conformitate cu legile geneticii, ca o caracteristică
dominantă. Acest lucru înseamnă că o încrucișare între un soi de Vitis vinifera și o specie
americană (V. riparia sau V. rupestris) populația produsă în prima generație hibridă are numai
diglucozizi. Pe de altă parte, rezultatele obținute după o nouă încrucișare între prima generație
hibridă și V. vinifera arată că o caracteristică recesivă "absența diglucozidului" poate fi
exprimată într-un hibrid din a doua generație. Aceste constatări au dus la dezvoltarea metodei
de diferențiere a vinurilor prin analiza cromatografică a materiei lor colorante (Ribéreau-
Gayon P. ș.a., 2006).
Culoarea pigmenților antocianici depinde de condițiile de mediu (pH, SO 2), precum și
de structura moleculară și a mediului. Pe de o parte, substituția ciclului lateral conduce la o
deplasare a lungimii de undă de absorbție maximă (spre violet). Pe de altă parte, fixarea
glucozei și acilarea schimbă culoarea în direcția opusă, adică spre portocaliu (Jackson R.S.,
2008).
Moleculele de antociani sunt sintetizate în struguri începând de la pârgă. Structura lor
chimică ar fi rezultatul dezaminării unui aminoacid, fenilalanina, pentru formarea nucleului B,
în timp ce nucleul B ar avea ca origine polimerizarea a 3 molecule de acid acetic. Conținutul
maxim de antociani, ca și cel de arome, de altfel, este atins înainte de atingerea conținutului
optim în zaharuri. Această regulă nu este formală, deoarece viteza de formare și cantitatea de
antociani sintetizată este sensibilă al condițiile climatice, la randamentule recoltei ca și la natura
soiului (Taillandier Patricia și Bonnet J., 2005).
Antocianii sunt localizaţi, aproape în totalitate, în pieliţele strugurilor şi numai în cazul
soiurilor tinctoriale (ex.: Alicante Bouschet), aceştia sunt prezenţi şi în pulpă. Antocianii sunt
localizaţi în vacuolele celulelor pieliţei; pe parcursul maturării strugurilor, ei ocupă din ce în ce
mai mult spaţiu, în detrimentul citoplasmei. Celulele mai apropiate de pulpă sunt mai bogate în
antociani decât celulele care sunt mai aproape de epidermă (Amrani Joutei K. şi Glories Y.,
1995).
În mod obişnuit, antocianii sunt situaţi în straturile de celule 4−6 de sub epiderma
pieliţei. În anii cu coloraţie puternică se găsesc şi în straturile 3 şi 7. Ei se acumulează în nişte
corpuscule denumite organoplaste sau cromoplastide ce sunt situate în vacuola celulei. În
timpul primelor faze ale maturării, antocianii sunt legaţi de membrana vacuolară dar sunt
eliberaţi pe măsura avansării gradului de maturare (Parodi G., 1999). La maturitate, există un
fenomen de degradare parietală care influenţează coeziunea pereţilor acestor celule, permiţând
astfel migrarea conţinutului vacuolar (eliberarea antocianilor). Acest fenomen este datorat, în
parte, atacării acestor pereţi vacuolari de către enzime, ceea ce provoacă migrarea calciului
parietal şi eliberarea conţinutului vacuolar. Or, pereţii acestor celule sunt, din punct de vedere
genetic, caracteristici soiului şi vor avea aptitudini mai mici sau mai mari de a răspunde acestor
atacuri enzimatice. În felul acesta, extracţia antocianilor se datorează cantităţii acestor molecule
biosintetizate în celulele pieliţelor (ca urmare a condiţiilor climatice şi deci, de areal), dar, mai
ales, stării de degradare a acestor celule la maturitate (caracteristica soiului) (Saint-Cricq De
Gaulejac Nathalie ş.a., 1998).
8.2.6.2.3 Substanţele tanante, taninurile sau materiile tanoide se constituie într-o
grupă cu importanţă considerabilă sub raport oenologic. Această grupă nu realizează o clasă
unitară din punct de vedere chimic. Taninurile au totuşi o serie de proprietăţi comune, exprimate
prin: solubilitate în apă, formare de compuşi coloranţi, capacitate de a precipita proteinele,
imprimare a senzaţiei de astringenţă − aceasta fiind urmarea precipitării substanţelor proteice
din salivă (care îi conferă proprietăţi lubrifiante).
În funcţie de structură și comportarea la agenţii hidrolizanţi, taninurile din struguri şi
vin se împart în: taninuri hidrolizabile şi taninuri nehidrolizabile.
Taninurile hidrolizabile, numite și pirogalolice, cuprind galotaninuri şi elagotaninuri.
Sub acţiunea acizilor tari şi a enzimelor hidrolizante se descompun într-o monoglucidă (de
obicei, glucoză) şi acid galic, digalic sau elagic. De cele mai multe ori rezultă acid galic.
Taninurile hidrolizabile nu se găsesc, în mod natural, în struguri, ele sunt specifice unor
specii lemnoase (castan comestibil, stejar ş.a.) și sunt principalii constituenți ai taninurilor
comerciale, utilizate în vinificație ca aditivi. Conţinuturile de taninuri hidrolizabile din vin
provin, în cea mai mare măsură, din doagele vaselor din lemn de stejar şi din adaosul de taninuri
comerciale, o practică autorizată în vinificație.
Taninurile nehidrolizabile (catechinice sau condensate) sunt derivaţi hidroxilaţi ai
flavanului, motiv pentru care se cunosc şi sub numele de flavanoli, nu se scindează nici sub
acţiunea acizilor şi nici a enzimelor hidrolizante. Aceşti compuşi au în comun scheletul de tip
fenil-2-benzopiran, în componenţa căruia intră un nucleu cromanic (1) şi un nucleu benzenic
(2), fiind de fapt flavanul. Nucleul cromanic se numeşte şi benzopiran, întrucât nucleul benzenic
este condensat cu nucleul piranic.
Taninurile condensate din struguri și vin sunt polimeri mai mult sau mai puțin complecși
ai 3-flavanolilor sau catechinelor. Unitățile structurale de bază sunt (+)-catechină și (-)-
epicatechina. Sub formă monomeră, aceste molecule nu sunt taninuri ci, mai curând, precursori
ai taninurilor condensate. În vinurile tinere, taninurile se găsesc sub formă de molecule ce
conțin, în medie, 2–3 unități de 3-flavanoli, în timp ce în vinurile vechi, în urma numeroaselor
condensări, gradul de polimerizare poate ajunge la 10 unități.
În struguri, polimerizarea catechinelor (3-flavanoli) produce o clasă de polimeri numită
procianidine (taninuri condensate). Procianidinele pot fi clasificate în funcție de natura
monomerilor lor flavonoizi, unire, esterificarea altor compuși sau proprietăți funcționale. De
exemplu, procianidinele pot fi subdivizate în proantocianidine sau prodelfinidine, în funcție de
scindarea în condiții acide, eliberând fie cianidină, fie delfinidină. Cea mai comună clasă
structurală a procianidinelor conține numai o singură legătură carbon covalentă între subunități
flavonoide adiacente. Subunitățile catechinele tipice (3-flavanol) din strugurii sunt: (+)-
catechină, (-)-epicatechina, (-)-epicatechingalatul și, mai puțin frecvent, (-)-epigalocatechina.
(-)-Catechina și (-)-epicatechina diferă numai în stereochimia lor. (-)-Catechina posedă grupul
său hidroxil C3 într-un plan opus nucleului B, în timp ce (-)-epicatechina posedă ambele grupuri
C3 hidroxil în planul nucleului. (-)-Epigalocatechina diferă de epicatechină prin posesia unei a
treia grupe hidroxil în nucleul ei B, în timp ce (-)-epicatechingalatul are acid galic esterificat la
C3 (Jackson R.S., 2008).
Din punct de vedere chimic, taninurile sunt molecule fenolice relativ voluminoase,
produse prin polimerizarea moleculelor elementare cu funcțiuni fenolice. Configurația lor le
afectează reactivitatea. Ele trebuie să fie suficient de voluminoase pentru a produce combinații
stabile cu proteinele dar, în cazul în care acestea sunt prea voluminoase, ele sunt susceptibile
de a fi prea departe de site-urile active ale proteinelor. Masele moleculare ale taninuri active
variază aproximativ între 600 și 3500 (Ribéreau-Gayon P. ș.a, 2006). La mase moleculare
peste 3000, taninurile nu se pot apropia de centrii activi ai proteinelor, fiind prea voluminoase.
Taninurile reprezintă principala grupă de compuși fenolici din struguri și vin și se găsesc
în toate organele viței de vie, inclusiv în toate părțile constitutive ale strugurilor. Spre deosebire
de antociani, care sunt localizați numai în pielițe, taninurile se găsesc atât în pielițe cât și în
semințe. Taninurile condensate sunt situate în ciorchine, pieliță și semințe (Cadot Y. și Tcaciuc
E., 2015).
În funcție de gradul de polimerizare crescător, taninurile sunt caracterizate ca
monomeri, dimeri, trimeri, oligomeri și taninuri condensate.
În semințe, taninurile sunt prezente în învelișurile exterioare sub celulele epidermice, în
timp ce în pielițe, taninurile se găsesc sub formă liberă în vacuole dar, de asemenea, legate de
proteine și polizaharidele din membranele vacuolare și pereții celulari (Amrani Joutei K. ș.a.,
1994). Taninurile joacă un rol important în calitatea vinului roșu, deoarece acestea sunt
responsabile pentru proprietățile gustative de astringență și amăreală. În semințe se găsesc în
epidermă, tegumentul exterior și tegumentul interior (Cadot Y. ș.a., 2006).
Concentrații mai mari de antociani și taninuri din pielițe în boabe, cuplate cu o
concentrație mai mică de taninuri din semințe au fost asociate cu o calitate mai mare a vinului.
Raportul antociani x taninuri din pielițe / taninuri din semințe se propune ca un indicator al
compoziției flavonoide a vinului, culorii și calității vinului (Ristic R. ș.a., 2010).
Semințele conțin cantități de taninuri mai importante față de pielițele cu un grad de
polimerizare maxim mai slab (în jur de 20 pentru semințe și 30 pentru pielițe) (Souquet J. M.
ș.a., 1996). Cu toate acestea, corelația dintre gradul mediu de polimerizare și astringență ar
putea fi modulată prin prezența epigalocatechinei, astfel încât proantocianidinele din pielițe
oferă o senzație mai moale decât proantocianidinele din semințe (Chira K ș.a., 2009). Aceste
caracteristici sunt responsabile pentru proprietățile organoleptice ale pieliței, deoarece
astringența și amăreala proantocianidinelor sunt cunoscute ca fiind invers corelate cu gradul de
polimerizare (Braidot E. ș.a., 2008).