Metabolismul aminoacizilor i proteinelor

implicarea atomului de azot

nu exist o form de depozitare a aminoacizilor analog
glucozei (glicogenul) i acizilor grai (trigliceridele)

fond comun dinamic de aminoacizi

Proteine endogene
Proteoliz Proteosintez

Proteine Absorbtie exogene intestinal

Uree Fond comun de aminoacizi

Catabolismul aminoacizilor

CO2 H2O

Porfirine

Biosinteza unor compusi specializati

Nucleotide

Hormoni si neurotransmitatori Creatin Poliamine

Carnitin

Digestia proteinelor
aminopeptidaz
+

endopeptidaz HN CH CO R4

carboxipeptidaz

H3 N CH CO NH CH CO NH CH CO R1 R2 R3

NH CH CO R5

NH CH COO R6

Stomac: HCl, pepsin

Pepsin NH CH CO R2 NH CH CO R3 R3 = fenilalanin, tirozin metionin, leucin

In intestin
Tripsinogen Chimotripsinogen

Enteropeptidaz

Chimotripsin

Procarboxipeptidaza A Tripsin Carboxipeptidaza A

Procarboxipeptidaza B

Carboxipeptidaza B

Absorbia intestinal

proteine transportoare specifice (translocaze de grup) Transportul aa prin epiteliul intestinal necesit energie (este deci transport activ) i ioni de sodiu n mediul extern.

In celule conc. aa este de 10 ori > dect conc. n spaiul extracelular

Degradarea intracelular a proteinelor T1/2 difer de la o protein la alta proteinele musculare i conjunctive - cca 21 zile proteinele hepatice totale - de 5-6 zile Hemoglobina - 120 zile proteine structurale (ex. colagenul) au timpul de njumtire prea lung pentru a putea fi msurat. proteine hepatice, n special enzime au T1/2 de ordinul orelor sau chiar al minutelor

Degradarea proteinelor este un proces reglat

Degradarea lizozomalATP-independent proteaze numite catepsine

n

faz nutriional este nespecific n foame turnoverul este specificat de secvena aa Lys-Phe-Glu-Arg-Gln

ex: pierderi musculare determinate de neutilizare (regresia uterului dup natere de la 9 kg la 50g n 9 zile), sau afeciuni traumatice.
artrita reumatoid implic eliberarea extracelular a enzimelor lizozomale, care degradeaz esuturile din jur.

Calea Ubichitinei U = protein cu 76 aa Cale ATP dependent degradare funcie de:

conformaia i - structura primar a proteinei
-

T1/2

2-3 minute pentru proteine cu N-terminal:

Asp-Arg-Leu-Lys-Phe

> 20 ore pentru proteine cu N-terminal:

Ala-Gly-Met-Ser-Val

Ubichitin -- C

+ E1-SH ATP AMP + PPi

1
O

Ubichitin -- C
2
O

E1

E2-SH E1-SH

Ubichitin -- C

E2

3 E3
O

Proteina condamnat E2-SH

Ubichitin -- C

NH

Lys

Protein condamnat

Secvene PEST recunoscute i degradate rapid Calpaine - proteaze Ca2+ dependente

Apoptoza, moartea programat a celulelor, se produce dup activarea caspazelor.

Proteazomul Mediaz degradarea proteinelor ubichitinate, ATP-dependent - proteazom 20S (cavitate cilindric cu activitate proteolitic) - 19S (complexe proteice la ambele capete) Capetele au rol n recunoaterea, despturirea i transportul polipeptidelor n interiorul cilindrului, printr-un mecanism ATP-dependent.

Catabolismul aminoacizilor

Proteinele furnizeaz 14% din energia necesar organismului uman

organismul uman nu depoziteaz aa aflai n exces ci i transform:
glucoz glicogen aa diverse lipide.
aa

Etape n degradare comune tuturor aa :

ndeprtarea gruprii amino din poziia alfa (dezaminarea oxidativ, transaminarea); transportul ionului de amoniu; ncorporarea amoniacului n uree n vederea excreiei din organism; conversia scheletului de atomi de carbon al aminoacizilor la intermediari metabolici comuni.

Dezaminarea aminoacizilor

transaminare
COOH R1 C O COOH + R2 CH COOH NH2 NH2 O

R1 CH COOH + R2 C

dezaminare oxidativ a acidului glutamic.

COOH CH 2 CH 2 HC NH2 NADH + H+ NAD+ COOH CH 2 CH 2 C NH H2O NH3 COOH CH 2 CH 2 C O

COOH

COOH

COOH

Acid glutamic

Acid iminoglutaric (instabil)

Acid-cetoglutaric

Aminoacid
Transaminare

-cetoacid

Acid-cetoglutaric Dezaminare oxidativ

Acid glutamic

NH3 CO2 Ciclul ureogenetic Uree

Cale minor de dezaminare

L-aa oxidaze n ficat i rinichi

Metabolismul amoniacului

Amoniacul implicat n sinteza i degradarea aa

O molecul de amoniac trece de mai multe ori prin forma de azot proteic nainte de a fi

eliminat din organism.

Forma de excreie a amoniacului este -ureea (sintetizat n ficat i eliminat renal) -srurile de amoniu (se elimin renal)

Transportul amoniacului

Forma de transport a amoniacului n organism este glutamina.

Sinteza glutaminei este catalizat de glutaminsintetaz (ligaz) enzim prezent n toate esuturile.
COOH CH 2 NH3 + CH 2 HC NH2 ATP ADP+Pi Glutaminsintetaz O C CH 2 CH 2 HC NH2 NH 2

COOH

Acid glutamic

COOH

Glutamin

Hidroliza glutaminei este catalizat de glutaminaz (hidrolaz), enzim prezent n ficat i rinichi.
C NH2 CH2 CH2 CH COOH + H2O NH2 Glutamin Glutaminaz HOOC CH2 CH2 CH COOH + NH3 NH2 Acid glutamic

Biosinteza ureei
ciclul ureogenetic sau ciclul Krebs-Hensleit

Relaii ntre ciclul ureogenetic i ciclul acizilor tricarboxilici

NH3 + CO2

Acid -cetoglutaric Citrulin

CICLUL UREOGENETIC Acid arginin-

Carbamil fosfat

Acid aspartic

Transaminare

acid glutamic Acid oxaloacetic Ciclul acizilor tricarboxilici Uree Arginin Acid fumaric Ornitin

succinic

Acid aspartic Transaminare Piruvat Decarboxilare Gluconeogenez

Acid oxaloacetic
Citrat

Glucoz

+ Acetil~SCoA

Hiperamonemia

Excesul de amoniac ???

NH3 NH3

Acid -cetoglutaric
Glutamat dehidrogenaz

Acid glutamic
Glutamin sintetaz

Glutamin

Consecine ? Intensitatea ciclului Krebs i producerea de ATP scade n special la nivelul creierului.

Ameliorare prin: regim alimentar srac n proteine i prin adaosul n hran a unor a-cetoacizi.

Conversia scheletului de atomi de carbon al aminoacizilor la intermediari metabolici comuni

Alanin Glicin Cistein Serin Treonin Triptofan Piruvat Glucoz

Triptofan Izoleucin Leucin

Leucin Lizin Fenilalanin Triptofan Tirozin Acetoacetil-CoA

Acetil-CoA Fosfoenolpiruvat

Corpi cetonici Asparagin Aspartat Oxaloacetat

Aspartat Tirozin Fenilalanin Metionin Treonin Valin Izoleucin

CICLUL KREBS Fumarat

Citrat

Succinil-CoA

-cetoglutarat

Glutamat Glutamin Arginin Histidin Prolin

Glucogenici
Alanin Arginin

Cetogenici
Lizin Leucin

GlucogeniciCetogenici
Izoleucin Fenilalanin

Aspartat
Asparagin Cistein Glutamat Glutamin Glicin Histidin

Triptofan
Tirozin

Metionin
Prolin Serin Treonin

Valin

Boli cauzate de defecte n utilizarea scheletului de carbon al aminoacizilor

Catabolismul aminoacizilor aromatici (Phe, Tyr)

fenilcetonuria clasic (defect enzim)

fenilcetonuria atipic (defect coenzim)

NADP+
H H 2N N H O N H CH CH CH3 OH OH N N

NADPH + H+

H H 2N N H OH N OH OH N N

CH CH CH3

Tetrahidrobiopterina O2
H2C CH COO NH 3
+ -

Dihidrobiopterina H2O
H2C CH COONH 3+

L-Fenilalanin

HO L-Tirozin

Acumulare metabolii

oligofrenie fenilpiruvic
(leziuni

la nivel sistem nervos)

Intoleran la:

aspartam (ndulcitor)
COO CH 2 H3 N CH CO
+ -

CH 2 NH CH CO OCH 3

L-aspartil-L-fenilalanin-1-metil ester

L-Dopa Dopamin (neurotransmittor) Norepinefrin (neurotransmittor) Epinefrin (hormon)

Tirozin

L-Dopa

Dopachinon Tiroxin (hormon) Melanine (pigmenti)

Alcaptonuria este o tulburare metabolic datorat

unui defect n biosinteza homogentizatoxidazei

alcapton, numele iniial al acidului homogentizic

Catabolismul aminoacizilor ramificai (Val, Leu, Ile)

Urina cu miros de arar (Maple syrup disease) este o maladie datorat activitii sczute a complexului multienzimatic al a-cetoaciddehidrogenazei

Toxicitatea acestor compui este resimit mai ales de creier (ntrzierea dezvoltrii mintale). Frecvena bolii este de 1la 200.000 nateri.

Aminoacizii sunt precursori ai unor compui

cu funcii specializate

Compui rezultai prin decarboxilarea

aminoacizilor

1.Histamina se formeaz prin decarboxilarea

histidinei n prezena L-aminoacid-decarboxilazei

N N H

CH2 CH COOH NH2 Histidina

L-aminoacid-decarboxilaza

N N

CH2 CH2 NH2

CO2

Histamina

Histamina este implicat n reaciile alergice

ca i n stimularea secreiilor acide n stomac.

Serotonina rezult din triptofan care mai nti se hidroxileaz i

apoi se decarboxileaz n prezena L-aminoacid-decarboxilazei

se sintetizeaz n creier, celulele cromafine din tractul gastrointestinal, plachete sanguine.

Are aciune vasoconstrictoare, stimuleaz contracia

musculaturii netede.

CH 2 CH COOH N H HO CH 2 COOH
N

HO Triptofanhidroxilaza N CO2 HO CH 2 CH 2 NH2 Degradare N H CH 2 CH COOH NH2

NH2

Triptofan

H L-aminoacid-decarboxilaza

H Acid 5-hidroxiindolacetic H3 CO

Serotonina
CH 2 CH 2 NH CO CH 3 N H Melatonin

Serotonina = hormonul sociabilitii

Insuficiena determin stri depresive

Acidul g-aminobutiric (GABA), rezult numai la nivelul sistemului nervos, prin decarboxilarea acidului glutamic.
Glutamat decarboxilaza
CO2

O OC CH2 CH2 CH COO NH2

O OC CH 2 CH2 CH2 NH2

Sinteza creatinei i a fosfocreatinei

Glicina, arginina i S-adenozilmetionina sunt sursele de carbon i azot pentru sinteza creatinei

Metionina reacioneaz cu ATP formnd Sadenozilmetionina, metionin activ, principala surs

de grupri metil din organism

H2 N

NH 2

NH (CH2)3 HC NH2

Ciclul ureogenetic

COOH Arginin H2N CH 2 COOH Glicin Arginin-glicin transamidinaza (Rinichi) Ornitin NH CO HN C

N CH 2

NH2 HN C
NH CH 2 COOH

Acid guanido acetic S-Adenozilmetionin Guanidoacetat metil-transferaz (Ficat) S-Adenozilhomocistein Creatin kinaza (Muschi) COOH ATP ADP

CH3 Creatinin Neenzimatic (Muschi) NH~PO3H2 HN C

N CH 2 COOH

H2O + Pi

NH2 HN C
N CH 2

CH3 Creatin (Acid N-metil guanidoacetic)

CH3 Creatin fosfat

Biosinteza glutationului

Glutationul (g-glutamil-cisteinil-glicin) se
sintetizeaz direct din cei trei aminoacizi,

pentru fiecare dintre legturile peptidice

care se formeaz consumndu-se cte o

molecul de ATP

COOH H2N CH COOH CH 2 CH 2 HC +

CO NH CH COOH

CO NH CH CO

NH2

COOH Acid glutamic

CH 2 CH 2 g-glutamil-cistein- CH 2 CH 2 NH CH 2 + H2N CH2 COOH sintetaz CH 2 CH 2 SH SH CH 2 SH Cistein GlutationHC NH2 HC NH2 COOH sintetaz ADP ATP ATP ADP+Pi COOH COOH +Pi Glutation g-glutamil-cistein

g-glutamil-transpeptidaza (g-GTcrete n snge n afeciuni hepatice i hepatobiliare.

Biosinteza aminoacizilor neeseniali

nutriional 11 aminoacizi sunt neeseniali 9 aminoacizi sunt aminoacizi eseniali sau nutriional indispensabili se procur din alimente.

arginina este semiesenial

Trsturi generale comune n sinteza lor:

-proveniena ionului de amoniu i

-a scheletului de atomi de carbon:

Proveniena scheletului de atomi de carbon

Ciclul acizilor tricarboxilici (Krebs)

Glicoliz

-cetoglutarat Glutamat Glutamin Prolin Arginin

Oxaloacetat Aspartat Lizin Asparagin Treonin Izoleucin

3-Fosfoglicerat Serin Cistein Glicin

Piruvat Leucin Valin

Alanin

Familia piruvatului

Familia glutamatului

Metionin

Familia serinei

Familia aspartatului

Glicoliz Calea pentozo fosfatilor Fosfoenolpiruvat Eritrozo 4-fosfat Fenilalanin Tirozin Triptofan Ribozo 5-fosfat Histidin

Familia aminoacizilor aromatici

Sursa de azot i modul de ncorporare a

acestuia

Ionul de amoniu asimilat n structura

aminoacizilor pe calea glutamatului i glutaminei.

COO CH2 CH2 HC COO

COO

COO CH2 H2O NH3 CH2 C COO

Glutamatdehidrogenaz

CH2 CH2

NH2
-

NAD+ (NADP+)

NADH+H (NADPH+H+)

C COO

NH
-

O
-

Glutamat
COO CH2 CH2 HC COO NH2
-

Iminoglutarat
CONH 2

-cetoglutarat

+ NH3 + ATP

Glutaminsintetaz

CH2 CH2 HC COO + ADP + Pi NH2

-

Glutamat

Glutamin

 Metabolismul

hemului

Hemul este un derivat substituit i complexat cu fier al

heterociclului numit porfin
1
N
H

8
HN

I
N
H

1 8 7 6

N
H

NH

I IV III
5

IV
7

N
H

II
4

II

Pirol Porfinogen

III
6 5 Porfin

Porfirinele sunt derivai ai porfinei Dintre acestea: protoporfirinele au cte 4 substitueni metil, 2 substitueni vinil i cte 2 resturi de acid propionic; uroporfirinele au cte 4 resturi de acid acetic i cte 4 resturi de acid propionic; coproporfirinele au cte 4 substitueni metil i cte 4 resturi de acid propionic.

A P A P

P A P A A P

P P A A P

P A P P A

P P A

II

III

IV

Dintre izomerii protoporfirinelor, notai de H.

Fischer cu cifre romane, protoporfirina IX,

care mpreun cu Fe2+constituie hemul b din

Hb i Mb are aezarea substituenilor

H3C

CH CH 2

I
H3C
N

CH 3
N

IV
CH2 O OC
-

Fe2+
N

II
CH CH 2

CH2 CH2 O OC
-

III
CH 3 CH2

Biosinteza hemului cu intensitate mai mare se desfoar n celulele sistemului eritroformator din mduv, ficat i splin. Unele enzime implicate n biosintez sunt localizate n mitocondrie altele n citosol.

n organismele vii, precursorii procesului

de biosintez sunt:
glicocolul

succinil~CoA.

Etapele biosintezei:

sinteza acidului -aminolevulinic;

formarea porfobilinogenului;

formarea protoporfirinei IX;

unirea protoporfirinei IX cu Fe2+.

Sinteza acidului -aminolevulinic are loc n mitocondrii

COOH COOH H2C NH2 CH2 -aminolevulinat + sintaza CH2 CO-SCoA succinil-CoA CoA-SH CH2 CH2 C HC -aminolevulinat O sintaza NH2 CO2 COOH CH2 CH2 C O

COOH glicocol

COOH acid -amino-ceto-adipic

H2C NH2 -aminolevulinic (ALA)

Formarea porfobilinogenului
(n citosol)

derivat trisubstituit al pirolului

COOH COOH CH2 CH2 C O + O CH2 CH2 -aminolevulinat C dehidrataza CH2 H2N 2 H2O H2N COOH COOH CH2 CH2 C C CH2 N CH 2 C CH2 H2N COOH CH2 CH2 C C CH2 N H CH 2 C CH

COOH

CH2

H2N

porfobilinogen

Formarea protoporfirinei IX
A P

A C C

P
P

H2C N H NH A H N H2C HN

CH2 A

C CH2 N H

CH

Porfobilinogen dezaminaz 4 NH3

P CH2

H 2N

porfobilinogen
P A

uroporfirinogen I

A C C

Porfobilinogen dezaminaz + Uroporfirinogen III cosintetaz

H2C A NH P H N H2C N H HN

CH2 A

C CH2 N H

CH
P CH2

H 2N

porfobilinogen

4 NH3

uroporfirinogen III

P M P

H2C A NH P H2C H N N H HN

CH2 A H2C CH2 N H NH P H N H2C CH2 HN P M

Uroporfirinogen decarboxilaz
P CH2

4 CO2
P A

uroporfirinogen III

coproporfirinogen III O2 Coproporfirinogenoxidaz 2 CO2 2 H2O

V

HC M N P HC H N N H N

CH M M

H2C

CH2 N H NH HN H N V CH2 M

Protoporfirinogenoxidaz
V CH P H2C

6H
P M

Protoporfirin IX

Protoporfirinogen IX

Coproporfirinogenul III trece n mitocondrie

unde se desfoar toate reaciile urmtoare

care asigur formarea hemului

Unirea protoporfirinei IX cu Fe2+

M V M V

HC M N P HC H N N H N

CH M M

HC N N P HC

CH M N V CH

+ Fe2+
V CH

Ferochelataz

Fe2+
N

Protoporfirin IX

Hem

Reglarea biosintezei hemului

Mitocondrie
Succinil~SCoA Glicin

Citosol

Uroporfirinogen I 4 NH3

-ALAS
CO2

Acid -aminolevulinic (ALA) H2O

4 Porfobilinogen

Aporepresor

4 NH3 Uroporfirinogen III

HEM Protoporfirin IX

4 CO2 Protoporfirinogrn IX 2 CO2 O2 Coproporfirinogen III

Reglarea prin inducie i represie

Concentraia hemului este semnalul att pentru inducie ct i pentru represie. concentraiei hemului induce sinteza d-ALAS
concentraiei hemului peste limitele normale determin represia enzimei. Sinteza d-ALAS hepatice este indus de o serie de compui exogeni sau endogeni: barbiturice, insecticide, sulfamide, hormoni estrogeni.

Anomalii ale metabolismului porfirinelor (Porfiriile)

8 Glicin + 8 Succinil~SCoA -ALAS 8 CoA-SH + 8 CO2 8 Acid -aminolevulinic 8 H2O

ALA dehidrataz

8 Porfobilinogen Porfiria acut intermitent Porfiria eritropoetic congenital Porfiria cutanat tardiv Uroporfirinogen I sintaz

4 NH3

Uroporfirinogen I Uroporfirinogen III sintaz Uroporfirinogen III Uroporfirinogen decarboxilaz

Acumulare de acid -aminolevulinic si porfobilinogen care se elimin prin urin. Simptome clinice: dureri abdominale, tulburri la nivelul sistemului nervos periferic. Acumulare si excretie de uroporfirinogen I. Simptome clinice: fotosensibilitate, leziuni ale pielii, anemie hemolitic. Acumulare si excretie de uroporfirinogen I si III. Simptome clinice: sensibilitate cutanat, tulburr abdominale si neurologice.

4 CO2

Coproporfirinogen III Coproporfiria ereditar Coproporfirinogen oxidaz

Eliminare renal a unor cantitti excesive 2 CO2+4 H de coproporfirinogen III. Simptome clinice: fotosensibilitate cutanat, dureri abdominale si afectiuni ale sistemului Protoporfirinogen IX nervos. 6H Protoporfirinogen oxidaz Protoporfirina IX Fe2+ Ferochelataz 2H Hem

Protoporfiria

Eritrocitele, plasma si fecalele contin cantitti mari de protoporfirin IX. Simptomele clinice: producerea de urticarii la expunerea la lumin.

Catabolismul hemului

SRO NADP+ Biliverdin reductaz NADPH

M V O N
H

CH

N
H

CH 2

N
H

CH

N
H

Bilirubin
M P

N
H

CH

CH

N
H

CH

N
H

Biliverdin
M V

GMPc NADP+
CH

HC M N P HC N

NADPH
M

CO Fe3+ Hemoxigenaza Fe-ATP-az

GC GTP

Fe2+
N

N V CH

NADPH Citocrom P450 reductaza Reticul endoplasmic

Hem