GENETICA VIRUSURILOR

• Genomul viral (ADN sau ARN) este depozitarul

informatiei privind caracterele specifice virale.

• Genotip – totalitatea genelor care alcătuiesc genomul

• Fenotipul viral reprezinta totalitatea caracterelor

care sunt codificate de gene corespondente.

• Caractere fenotipice: spectru de gazde, tropism tisular,

caractere de cultivabilitate (efect citopatic, plaje),
patogenitate (om, animale), morfologie 1
Variatia genetica

 Modificări în structura genomului:

I. mutatia (fara aport de material exogen)

II. recombinarea (cu material exogen)

2
 Mutatia
Mutatia = alterarea stabila transmisa la
descendenti (mutanti) a unei sau
mai multor gene
a. Mod de producere:
1. substituire: inlocuirea unei baze cu alta prin
1. tranziție (purină cu purină, pirimidină cu pirimidină)
2. transversie = intercalarea unei alte secvente
nucleotidice (purină cu pirimidină și invers)

2. inserție: intercalarea în șirul nucleotidic a unei

alte secvențe nucleotidice

3. deletie = pierderea unei secvente nucleotidice

4. inversie = schimbarea orientarii unei secvente

3
 Mutatia
b. Mecanisme:

1. erori în replicarea acizilor nucleici

– din cauza funcționării defectuoase a polimerazelor ARN sau ADN, sinteza
catenelor este incorectă
– frecvența de erori la ARN polimeraze: 1 la 104
– frecvența de erori la ADN polimeraze: 1 la 109

2. erori de transcriere sau de translatie:

– mutatii ”missens” (din gresala): codificare defectuoasa a a.a.
– mutatii ”nonsens”: codoni non sens care opresc translatia si apar
polipeptide cu a.a. lipsa

3. procese reparatorii cu defecte

4
c. Clasificare: Mutatia
I. mod de aparitie:

- spontana: la v. ARN (orthomyxovirus, lentivirus) la care polimerazele ARN

dependente nu elimină secventele gresite

- indusa : cu agenți mutageni (rata = 2x10 5/gena)

1. agenti fizici:
• radiatii: UV (dimeri la timine); Rx (radicali liberi cu oxidari); radiatii
ionizante
• temperatura: multiplicare la temperaturi diferite de parentali
2. agenti chimici:
• determină modificări ce duc la apariția de baze nucleotidice anormale
– ac. nitros: converteste bazele prin dezaminare (adenina in hipoxantina)
• prin încorporare în acizii nucleici, în timpul replicării, de analogi ai bazelor
nucleotidice
– 2 - aminopurina: analog al bazelor purine incorporare in ADN
• prin deleții sau inserții de baze azotate, datorită unor agenți intercalanți
– coloranti acridinici (proflavina): deletia si insertia de baze azotate
5
II. Numar de secvente implicate :
• mutatii punctiforme: modificarea unei perechi de baze (missens)
• mutatii multisitus: pe mai multe perechi de baze

III. Caracterele genetice pe care le modifica

- modificarile genetice se exprima in caractere fenotipice (markeri) deosebite de cele parentale
- mutatiile la gene esentiale sunt letale
- tipuri de mutanti:
1. Mutanti termosensibili (ts): v. cu proteine modificate, imunogene, dar cu virulenta
atenuata. Majoritatea vaccinurilor vii atenuate au tulpini ts.
2. Mutanti dependenti de gazde - multiplicare in celule nepermisive: v.adeno in celule de
origine umana
3. Mutanti morfologici:
in culturi celulare: modificarea sau disparitia e.c.p., modificarea plajelor
pe ou embrionat: pock-suri diferite pe m.c.a.
4. Mutanti rezistenti: la inhibitori multiplicare: guanidina (v.polio); amantadina (v. gripal);
activitate neutralizanta a anticorpilor
5. Mutanti cu patogenitate atenuata: act. combinata: cultivare la temperaturi suboptimale si pe
specii departate (30-50 pasaje la v.polio, rujeolos si rubeolos); tehnologii de inginerie genetica:
deletie (SV40 si v.polio)
6. Reversia mutatiilor (revertanti)
in situsul de origine = adevarata
apare prin suprimare determinata de alta mutatie :
- intragenica (apropiata)
- intergenica (la distanta)

6
 II. RECOMBINAREA
Recombinarea = modificarea structurii acidului nucleic prin aport de material
genetic si schimburi de segmente genomice omologe intre
virusurile diferite
1. Mecanisme de recombinare:
• recombinarea intramoleculara:
-v . ADN (adenov., herpesv., poxv.),
-intre perechi de mutanti ts .
-ruperi si reasocieri in catenele de ac. nucleici parentali prin incrucisare reciproca
(crossing-over). Intervin enzime celulare .
-v. ARN cu genom nesegmentat (v.polio , coronav.) recombinat.
-se face prin copieri alternative
• reasocierea genomica :
-v. cu genom segmentat (myxov., reov.). Recombinantii au genom cu
segmente combinate intâmplator (v.gripal au o frecv. de recomb. 50%)

7
a. alăturare de secvenţe omoloage;
b. rupere de secvenţe omoloage;
c. reunirea secvenţelor omoloage de pe catene omoloage;
d. recombinanţi rezultaţi;
a. sinteză de catene noi;
b-c. Răsucire şi copiere de pe cealaltă catenă;
d. recombinanţi rezultaţi

8
REASORTARE GENOMICĂ

9
2. Modalitati de recombinare:

• infectia mixta determina:

- reactivare multipla: infectarea simultana cu
tulpini inactivate (UV) determina progeni
infectanti (v.gripale, poxv.)

- reactivare incrucisata: recombinare intre

doua virusuri (unul inactivat). Progenii au si
caractere de la cel inactivat.
10
 III. COMPLEMENTAREA
• apare când doua virusuri cu genom incomplet sunt
cultivate simultan și își completeaza produsele
codificate de genele lipsa
• este o interactiune fenotipica
• alternative:
- virusuri defective in regiuni diferite (trans): genele
nemutante sintetizeaza proteine
- virusuri defective in aceiasi regiune (cis) nu se
multiplica

11
 Complementarea

1. Coinfectie cu mutanti
defectivi in pozitie trans

2. Coinfectie cu mutanti in
pozitie cis

12
 RELATII INTERVIRALE NEGENETICE

• apar prin infectie mixta

• se exprima doar fenotipic
• nu sunt stabile
• tipuri:
- mixaj fenotipic: intre v.inrudite; progenii au caractere fenotipice
comune
- transcapsidarea: la virusuri nude, progenii se matureaza defectuos prin
asamblarea inversa a capsidelor parentalilor (picornavirusuri)
- formarea pseudotipurilor: la virusuri cu înveliș
- poliploidia: la virusuri cu înveliș (myxovirus, paramyxovirus), mai
multe nucleocapside au acelasi invelis
13
INGINERIA GENETICA

Manipularea genetica = modificarea structurii

acizilor nucleici in vitro.

14
15