Studiul falsificrii uleiului de msline cu ulei de alune prin cuplarea cromatografiei lichide de nalta performan cu gaz cromatografia, folosind

Filbertonul ca si marker(compus de analizat)

Komporaly Gellert

Introducere
Falsificarea uleiului de masline cu ulei da alune respectiv determinarea falsurilor ridica mari probleme economice insa compozitia acestora fiind foarte apropiata este foarte greu a se determina autenticitatea lor. Chiralitatea este un aspect important n domeniul tiinei alimentare datorit faptului c multe dintre compu i care apar n produsele alimentare sunt caracterizate printr-o distributie enantiomeric specifica.Separarea enatniomerilor prezente la niveluri mici are mare interes cand se cere identificarea produselor alimentare inclusiv a uleiurilor.

 Totusi din cauza complexitatii metodei rareori se aplica in analiza alimentelor. Pentru uleiuri, acest fapt este i mai evident ca multe din componentele lor sunt solubile in grasimi, care poate reduce considerabil eficiena procedurii de izolare. Totusi dezvoltarea unor noi tehnici mai complexe si mai precise permite depasirea dificultatilor asociata cu natura lipofila a principalilor compusi, si la randul lor sunt capabile sa izoleze eficient enantiomeri din uleiuri. Acesti enantiomeri in functie de prezenta sau absenta lor pot face diferenta dintre uleiul pur si cel falsificat. O diferenta maiora intre uleiul de masline si cel de alune este prezenta unui compus(filberton) prezent in cantitai reduse in uleiul de alune dar in cantitati neperceptibile in uleiul de masline.

 Datorita rafinarii uleiului de alune, proces prin care inpreuna cu substantele volatile se pierd parti semnificative din filbertone, identificarea lor devine imposibila prin metode conventionale.

Descrierea metodei
Metoda propusa spre analiza se bazeaza pe identificarea unor cantitati infirme de filbertone chiar si din uleiul de alune rafinat prin cuplarea LC-GS. Initial sa incercat cuplarea LC cu un GS echipat cu un injenctor PVT pozitionat orizontal. Insa rezultatele neconcludente au aratat spre modificarea pozitiei injectorului in pozitia verticala. Acest lucru permite cresterea performantei sistemului datorita eliminarii mai eficienta a eluentului provenit din LC.

Analiza propriu zisa consta din trei pasi.

Presepararea in cromatograful de lichide sitemul HPLC a fost prevazut cu o supapa de injectie manuala care are un detector UV operat la 205 nm Transferul LC-GC Transferul fraciunii care conine markerul filbertone a fost efectuat prin utilizarea unui ventil multiport plasat imediat dup detector UV a sistemului de LC. Pentru a creste eliminarea solventului, n timpul transferului a fost aplicat un flux de heliu, care a fost meninut pe durata transferului pentru o epurare suplimentara.

 Analiza fraciunilor transferate din LC in CG

Fraciunea transferata de la separarea LC a fost analizata folosind o coloan de siliciu topit si acoperit cu un strat de de Chirasil-b-Dex, o flacr detector de ionizare si heliu ca gaz purtator la temperatura de 250

C . Desorbia compuilor reinute anterior i transferul lor la capilar a

fost realizat prin creterea temperaturii injectorului la 320 C. Temperatura finala in injectorul PTV a fost meninut timp de 10 min.

 Probele utilizate la analiza apartin mai multor furnizori.Ele au fost preluate in doua seturi care au inclus 12 si 9 probe de diferite soiuri si de diferite origini geografice. Falsurile s-au obtinut prin amestecarea in diferite procente ale uleiului de masline si alune.

Rezultate si discutii
In prima faza s-a incercat si s-a demonstrat prezenta enantiomerului in uleiul de alune nerafinat si rafinat. De asemenea s-a demonstrat absenta aceleasi substante in uleiul de maslina. Metoda s a aratat a fi destul de concludenta prin utilizarea LG GC cu injector PVT pozitionat orizontal, insa doar la uleiurile pure sau cele fasificate cu cantitati mari de ulei de alune. Metoda a permis sa se stabileasca prezenta ambilor izomeri in acele amestecuri de ulei care contineau peste 14 % ulei virgin sau rafinat de alune. Rezultatele primului set de analiza pot fi observate in tabelul urmator 1

 Totusi este de mentionat ca falsurile cu un continut procentual sub 13 nu au putut fi detectate. Nu s-a putut arata prezenta nici unuia din cei doi izomeri. Evaporarea incompleta a eluentului si suprafata materialului adsorbant pot fi considerate doua neajunsuri in acest caz. De aceea s-a incercat modifacarea unor parametri pentru eliminarea acestor neajunsuri, si anume: s-a modificat pozitia injectorului de pe orizontala pe verticala ceea ce a dus inplicit la evaporarea completa a eluentului respectiv cresterea suprafetei adsorbante.

 De asemenea s-au automatizat unele componente ale aparaturii.Evaluarea noii configuratii a sistemului s-a efectuat folosind solutii standard care contineau filbertone in concentratii cuprinse intre 1,550 mg/l. S-a determinat sensibilitatea aparatului la diferite volume de de transfer,si la diferite temperaturi.Rezultatele obtinute au aratat spre succes,aparatul devenind mult mai sensibil.prezenta enantiomerilor a devenit mult mai concludenta.

S-a demonstrat ca temperatura,fluxul de solvent,durata circulatiei solutiei prin cromatograf sunt strins legate de rezultatele obtinute.De exemplu,volume mari de solvent pot elimina filbertonele de pe suprafata adsorbanta.Deci prin modificarile aduse aparatelor,a urmat o inbunatatire semnificativa a performantei acestora.S-a demonstrat din nou absenta filbertonului in cazul uleiului de masline extra virgin.

 Referitor la uleiul de alune,graficul de mai jos indica prezenta filbertonului atit in uleiul rafinat cit si cel nerafinat.Noua aparatura indica prezenta uleiului de alune in concentratii reduse de 5%(ulei virgin),respectiv 12%(ulei rafinat).Spectrul este mult mai clar,cei doi izomeri putind fi clar identificati.

 Concluzie:In urma modificarilor aduse parametrilor aparaturii,a fost posibila confirmarea fiabila a prezentei sau absentei filbertonului in diferite probe de ulei.Si nu in cele din urma s-a demonstrat selectivitatea si sensibilitatea aparaturii in cazul utilizarii injectorului in pozitie verticala.