În alimentația omului, pe lângă alte surse, se folosesc și tipuri
de alimente care furnizează organismului necesarul de lipide.
O gamă largă de produse conțin o cantitate mai mare sau mai
mică grăsimi, multe dintre acestea fiind ”mascate”, în sensul că nu dau aparența unei încărcături mari de triglyceride. Dintre alimentele cu un conținut lipidic apreciabil pot fi considerate grăsimile pure sau aproape pure acelea care nu conțin cantități reduse sau deloc de nutrienți de alt gen (glucide, proteine, minerale). În această categorie intră grăsimile și uleiurile alimentare, considerate a fi surse de lipide concentrate.
Tabel 5.21. Valoarea nutritivă a plantelor alimentare și tehnice
Sursele lipidice concentrate de hrană se pot împărți în funcție de consistența fizică în două mari categorii: grăsimi lichide și grăsimi solide. Grăsimile sunt amestecuri complexe naturale formate în principal din esteri ai glicerinei cu acizii grași, numiți gliceride. Se mai găsesc în afară de gliceride și ceruri, vitamine, fosfatide etc. În natură, există atât grăsimi lichide nesaturate (uleiuri) cât și grăsimi solide saturate (grăsimi). Grăsimile lichide sunt de origine vegetală iar cele solide saturate sunt de origine animală (cu toate că sunt și excepții, vezi uleiul de pește care e lichid sau untul de cocos care e solid deși este de natură vegetală). Uleiurile se obțin prin presarea semințelor sau a fructelor, așa cum este cazul uleiului de floarea-soarelui sau a celui de măsline. Se mai pot obține prin extracție cu solvenți selectivi. Grăsimile solide se obțin de regulă de la animale sub influența directă a temperaturii asupra țesutului adipos (topire). Se mai pot obține și prin centrifugare (untul). Grăsimile pot fi solide, lichide sau semisolide (untul). Toate acestea sunt insolubile în apa cu care emulsionează, dar sunt solubile în solvenți organici. Nu au puncte fixe de fierbere și de topire pentru că sunt amestecuri, fierb și se topesc în diferite intervale de temperatură. Întrucât sunt amestecuri de gliceride, adică sunt esteri, grăsimile vor avea și proprietăți chimice similare esterilor. Tabel 5.22. Compoziția chimică a materiilor prime din care se extrage ulei (%)
Utilizarea enzimelor în procesele industriale de obținere a uleiurilor și a
grăsimilor este limitată la câteva etape și se rezumă la aspecte referitoare la ușurarea extracției și la rafinarea uleiului. EXTRACȚIA ULEIULUI
Deoarece în denumirea uleiurilor, de multe ori, se produce o confuzie întrucât sunt folosiți termeni diferiți “ulei esențial”, “ulei volatil”, “ulei eteric”, trebuie precizat faptul că toate denumirile se referă la același lucru, adică la substanța lichidă (de cele mai multe ori) conținută de anumite celule ale plantelor și care are proprietăți curative iar în procesul de extracție se utilizează procedee specifice. Indiferent de tehnologia aplicată procesul de extracție se bazează pe distrugerea pereților celulari cu ajutorul preparatelor enzimatice celulozice, hemicelulozice, pectinazice, proteazice și amilazice. Avantajele create de utilizarea preparatelor enzimatice în extracția uleiului sunt diverse și se referă la aspecte de calitate, respectiv la: - îmbunătățirea calității uleiului (crește conținutul de tocoferol, se îmbunătățește aroma și elimină aflatoxinele și hidrocarburile policiclice condensate și cu un conținut ridicat în caroten); - crește economicitatea productivă deoarece costurile de producție scad; - se diminuează efectul de poluare asupra mediului și se reduce riscul legat de utilizare a solvenților (hexan, benzine, etc). Utilizarea procedeului de macerare a pereților celulari, prin folosirea enzimelor, este indicată în cazul în care materia primă prezintă celulele oleifere incluse în trame bogate în hemiceluloză și în substanțe pectice (nuca de cocos).
În acest caz, durata de macerare crește la aproximativ 2 ore și se desfășoară la
temperaturi de 30-50°C, la pH de 5 și cu agitare mecanică. Comparativ cu alte procedee tot acest flux contribuie la creșterea cu cca 20% a cantității de ulei extrasă. RAFINAREA ULEIULUI
În prezent, uleiurile destinate consumului uman aflate la comercializare pe piață sunt reprezentate de cele rafinate. Metoda producerii uleiurilor alimentare a suferit o modificare importantă după anul 1940 când s-a trecut, pe scară largă, de la presarea la rece la cea la cald și mai apoi la utilizarea solvenților chimici. Schimbare radicală a tehnicii de extracție s-a bazat pe aspecte economice și a putut fi aplicată datorită progreselor tehnologice realizate. Avantajele economice sunt evidente deoarece prin metoda tradițională bazată pe presarea la rece randamentul de extracție era de la 30% până la 50%, iar prin metoda presării la cald, combinată cu utilizarea solvenților chimici, procentul de extracție este de 100%, de aici și prețul mai mic pe unitatea de produs. Rafinarea este o operație ce cuprinde un complex de etape necesare pentru asigurarea calității și aspectului comercial al uleiului. În procedeele clasice de rafinare a uleiului etapele parcurse se referă la: - desmucilaginarea sau degumarea; - neutralizarea care constă în eliminarea acizilor grași liberi prin utilizarea de NaOH); - decolorare cu cărbune animal sau vegetal; - dezodorizarea prin antrenare cu vapori de apă sub presiune redusă (1-3 mmHg) și la 200-250°C. În fiecare din aceste etape se pot implementa și utiliza anumite bioprocedee, respectiv: - în cazul desmucilaginării se poate realiza hidroliza enzimatică a fosfolipidelor cu ajutorul unei fosolipaze; - la neutralizare se reesterifică mono și digliceridele cu acizii grași liberi prin intermediul unei lipaze care acționează în mediul gras sau cu un conținut redus de apă; - la decolorare - clorofila se poate hidoliza cu ajutorul unei clorofilaze care eliberează un clorofid colorat, hidrosolubil. Pentru grupa de uleiuri laurice sărace în fosfolipide și libere în pigmenți, se face și o dezacidifiere enzimatică în cazul în care aciditatea este ridicată și la un conținut mai mare de 5% acizi grași liberi. După spălare, în uleiurile neutralizate cu alcali, rămâne un conținut de 0,5% apă care trebuie îndepărtată. Procedeele de uscare a uleiului pot fi realizate discontinuu sau în flux continuu, sub vid ori cu agitare mecanică. Decolorarea uleiului este un fenomen complex și se realizează cu ajutorul pământurilor decolorante activate cu acizi minerali la care se adaugă, uneori, cărbune decolorant. În urma acestei operații uleiul de floarea-soarelui capătă un aspect strălucitor și limpede. INTERESTERIFICAREA ULEIULUI
Interesterificarea reprezintă totalitatea procedeelor tehnologice utilizate în vederea modificării proprietăților reologice ale grăsimilor (tartinabile la rece, moliciune, plasticitate). Produsele obținute sunt utilizate preponderent în panificație, patiserie, la producerea înghețatei și a margarinei. Procesul de interesterificare durează cca 30 minute și se derulează la temperaturi de 100°C și în prezența unui catalizator bazic (metilat de sodiu). Calitatea produselor obținute prin interesterificare depinde de gradul de rafinare al grăsimilor utilizate. Principiul acestui procedeu se bazează pe redistribuirea acizilor grași în molecula de trigliceride, aspect care are loc la întâmplare (hazard). Interesterificarea se poate face și regioselectiv prin intermediul unei lipaze regioselective 1-3 care limitează distribuția la întâmplare a acizilor grași în poziția 1 și 3 a trigliceridelor fără a afecta însă poziția 2. Cu alte cuvinte, interesterificarea presupune rearanjarea acizilor grași de-a lungul moleculei de glicerol pentru a da un alt gust produsului, aranjare care nu afectează structura acizilor grași și nu conduce la formarea de acizi grași trans care pot induce o creștere a nivelului colesterolului rău din sânge. Schema tehnologică de obținere a uleiului de presă Folosirea bioprocedeelor în obținerea uleiurilor prezintă diferite avantaje, dintre care cele mai importante sunt: - acidul gras din poziția 2 rămâne nemodificat și este de regulă un acid mono sau polinesaturat; - interesterificarea cu lipaze regioselectivă limitează formarea de gliceride cu punct de topire ridicat; - întrucât reacțiile enzimatice sunt mai lente sunt și mai ușor de controlat; - din punct de vedere cinetic reacția se poate opri în orice moment și se pot obține grăsimi cu proprietăți total diferite; - întrucât interesterificarea enzimatică nu necesită realizarea unor temperaturi ridicate crește calitatea substanțelor grase obținute; - întreg procesul de interesterificare este unul economic comparativ cu alte procedee. UTILIZAREA MICROORGANISMELOR ÎN INDUSTRIA ULEIURILOR ȘI A GRĂSIMILOR
Principalele microorganisme producătoare de lipide microbiene sunt cele de tip eucariot (alge, drojdii și fungi) dar au fost identificate și câteva bacterii cu un conținut mai ridicat de lipide. Bacteriile acumulează în special ceruri și poliesteri. Deși conținutul de grăsimi, raportat la substanța uscată, atinge 70% pentru unele drojdii, fiind chiar mai mare pentru unele ciuperci, unul din factorii cheie ai realizării unui bioproces atractiv economic îl constituie randamentul de transformare a substratului în lipide. În această privință drojdiile sunt superioare fungilor. În industria uleiurilor microorganismele pot fi utilizate în scopuri diferite, îndeosebi pentru producția de biomasă cu un conținut bogat în lipide și, în mod deosebit, pentru drojdii și mucegaiuri care pot înmagazina peste 45% lipide. Cele mai importante drojdii care pot fi utilizate în producerea grăsimilor și a uleiurilor sunt: Candida curvata (58%), Endomycopsis vernalis (65%), Lipomyces starkey (63%); Rhondosporidium toruloides (66%), Trichosporum cutaneum (45%); Lipomyces tetrasporus (64%), Rhodontorula glutinis (71%), Trichosporum pullulans (65). Mucegaiurile importante care pot fi utilizate în producerea uleiurilor și a grăsimilor sunt: Entomophtora cornata (45%), Cunigghameiia elegans (56%), Mucor albo ater (45%), Mucor spinosus (47%), Aspergillus nidulans (51%), Aspergillius tereus (57%) și altele. Uleiul obținut prin utilizarea drojdiilor are o compoziție și proprietăți similare cu cele ale oleonului de palm, care de fapt este o fracțiune a uleiului de palmier, cu un punct de topire mai scăzut. Uleiul obținut din drojdii poate fi fracționat în vederea producerii grăsimilor nehidrogenate, nonlaurice. Atât uleiul obținut din drojdii cât și cel din mucegaiuri are un conținut în trigliceride destul de ridicat cuprins între 80 și 90%. Candida curvata produce trigliceride care au punctul de topire apropiat de cel specific untului de cacaoa, iar acizii grași predominanți sunt cei olieici, palmitici, linoleici, searici și palitoleici. Modificarea grăsimilor și a uleiurilor se poate produce prin acțiunea desfășurată de Candida lipolytica cultivată pe medii de grăsimi și ulei care reprezintă surse de carbon. Cercetări desfășurate în acest sens, confirmate apoi prin aplicații practice, sot în evidență faptul că Candida lipolytica cultivată pe substrat de ulei de porumb și pe ulei de cocos, sintetizează un ulei în care acidul linoleic și palmitic se află în cantități mai reduse. Dezemulsionarea/emulsionarea uleiului este posibilă datorită faptului că celulele microbiene posedă proprietăți emulgatoare. Microorganismele cu astfel de proprietăți sunt Zymomonas mobilis, Bacillius subtilis și Corynebacterium fascinas. De asemenea, microorganismele respective au și calitatea de a produce bioemulgatori care se concentrează la interfața ulei/apă, conferind stabilitatea emulsiei. Bacteriile care secretă substanțe active de tipul acid poli-β-hidroxibutiric au și calitatea de a induce dezemulsionarea substanțelor grase. Oxidarea hidrocarburilor parafinice (metan, kerosen) este efectuată prin oxidare la nivel de acizi, alcooli, cetone, acizi dibazici, aldehide, esteri ai cerurilor și gliceride. Hidrocarburile aromatice sunt oxidate la 1,2 dioli, acizi dibazici, fenoli, acizi, alcooli, aldehide și hidroxiacizi. 5.8. BIOTEHNOLOGII APLICATE ÎN INDUSTRIA ZAHĂRULUI ȘI A PRODUSELOR ZAHAROASE
5.8.1. IMPORTANȚA ZAHĂRULUI ÎN ALIMENTAȚIE
Zahărul face parte din grupa alimentelor fiind apreciat tocmai datorită calităților pe care le posedă și anume: gust dulce, valoare energetică și calități bacteriostatice. Este asimilat complet și repede de organismul uman (maxim 15 minute) producând căldură și energie musculară. Acest produs prin ardere degajă 4000 kcal/kg față de carnea de taurine care furnizează cca 1500 kcal/kg, față de pâinea neagră 2250 kcal/kg și față de lapte care furnizează doar 635 kcal/kg. Este consumat fie înglobat în alimentele aflate sub formă solidă (cozonac, plăcinte, gogoși), fie sub formă lichidă (produse de cofetărie, ceai, lichioruri, conserve de fructe, produse zaharoase) cărora le dă un gust dulce, plăcut. Este foarte greu de măsurat gradul de dulceață al substanțelor, singurul mijloc fiind simțul gustului care variază de la individ la individ. Zahărul ascuns sau înglobat în alimente este cel pe care îl consumăm fără să fim conștienți. Se folosește din plin ca excipient în industria alimentară și în cea farmaceutică. Din aceste considerente, pe măsură ce consumul direct a scăzut de la an la an consumul indirect este în plină expansiune. Astfel, dacă în 1977 consumul de zahăr ascuns conținut în băuturi, dulciuri, conserve, medicamente era de 58 % în 1985 ajunge la 65 %, iar în 1989 se depășește 70%. Această practică industrială care constă în adăugarea sistematică a zahărului în produsele alimentare are mai multe motive. Practic, în industria alimentară îndulcirea produselor se face din trei motive. Mai întâi, pentru a ascunde amărăciunea, apoi pentru a ascunde acreala și a îmbunătăți conservarea dar, mai ales, pentru a stimula gustul clientului. În industria farmaceutică zahărul se folosește, în primul rând, ca să ”te facă să înghiți pilula” deoarece foarte multe substanțe aflate în compoziție au un gust dezagreabil. De asemenea, foarte multe dintre produsele alimentare sunt conservate cu ajutorul zahărului. Acest aspect se datorează faptului că zahărul are calități bacteriostatice, chiar și fără adăugarea unui alt antiseptic (dulceața, fructe zaharate, lapte condensat, etc). În prezent consumul de zahăr la nivel mondial este de aproximativ 50 de milioane tone pe an reprezentând aproximativ 16 kg de zahăr pe fiecare locuitor. Consumul mediu înregistrează însă oscilații de la țară la țară și depinde de foarte multe aspecte. Astfel, în țările scandinave cum ar fi Suedia, consumul total anual se ridică la 50 kg pe locuitor, iar în țările meridionale (Italia, Spania) anual se consumă doar 10 kg pe fiecare locuitor. Zahărul ca aliment ar putea fi înlocuit și cu glucoza rezultată din hidroliza amidonului extras din cereale sau cartofi. Însă, datorită faptului că zaharul este de două ori mai dulce comparativ cu glucoza și se obține mai ușor, și la un preț de cost mai redus, are un grad mai mare de utilizare. În vremea antică romanii utilizau pentru îndulcirea alimentelor mierea de albine, lucru mai greu realizabil în prezent datorită cantităților reduse ale acestui produs apicol. Materii prime utilizate pentru obținerea zahărului. Principalele materii prime din care se extrage zahărul sunt: sfecla de zahăr și trestia de zahăr. Alte plante producătoare de zahăr sunt: - porumbul zaharat (Sorghum saccharatum) conține la nivelul tulpinei un suc dulce care are 11-12 % zaharoză; - arțarul zaharat (Acer saccharum) produce o sevă în care zaharoza reprezintă 2- 3,5 %; - mesteacănul (Betula alva) are în seva proprie un conținut de 1 % zahar. Cu toate acestea, sfecla de zahăr și trestia de zahăr sunt cele două plante care produc 96% din cantitatea totală de zahăr. Trestia de zahăr se cultivă în zone calde (America de Sud, Egipt, India) iar sfecla de zahăr este cultivată în Europa și America de Nord, dar și în alte zone în care clima este temperată. 5.8.2. UTILIZAREA ENZIMELOR ÎN INDUSTRIA ZAHĂRULUI
Industria zahărului este un utilizator relativ minor de enzime, dar oferă unele exemple semnificativ istorice și instructive de utilizare a enzimei de hidroliză sau "inversarea" de zaharoză complet sau parțial în glucoză și fructoză. Siropul de Aur este cel mai cunoscut produs de hidroliză acidă specifice unuia dintre fluxurile pure din rafinare a zahărului obținut din trestie, dar poate fi obținut și din alte tipuri de sirop produse prin invertază cu drojdie de bere (Saccharomyces cerevisiae). Cu toate acestea, enzima respectivă suferă de inhibare la substrat cu un nivel ridicat al zaharozei (> 20), însă acest lucru nu împiedică utilizarea comercială la concentrații mai mari. Invertaza este o enzimă produsă de drojdia de bere și de mucoasa intestinală și servește la transformarea zahărului în glucoză și fructoză. În mod natural, sunt mai răspândite enzimele care catalizează hidroliza legăturilor glicozidice, ologoglucide și poliglucide. Toate acestea sunt denumite în mod generic carbohidraze. De asemenea, sunt și enzime care hidrolizează numai poliglucidele (poliazele) dar și enzime care hidrolizează doar oligoglucidele (glicozidaze). Enzima β-fructofuranozidaza se referă la carbohidraze (glicozidaze) și catalizează inversia, sau hidroliza zaharozei și de aceea se numește și invertază sau zaharază. Zaharoza este o dizaharidă fiind cea mai răspândită dintre toate oligozaharidele. Este prezentă în aproape toate plantele dar în cantități mai mari se găsește în sucul florilor alături de monozaharide, apoi în sfeclă, în trestia de zahăr și în cocenii de porumb tineri. Sub influența acizilor sau a invertazei zaharoza se hidrolizează formând un amestec de monoglucide (D-glucoza și D-fructoza). Zaharoza, ca substrat al invertazei are proprietăți optic active, este dextrogiră (rotația specifică + 66,5o). La finalul hidrolizei soluția rezultată devine levogiră [α]D20 = -20o, întrucât fructoza devine pronunțat levogiră [α]D20= -93o în comparație cu glucoza care este dextrogiră [α]D20 = +52,5o. Această hidroliză poartă denumirea de inversie sau invertire ori inversiune, iar amestecul echimolar de glucoză și fructoză poartă denumirea de „zahăr invertit” (mierea de albine). Invertaza este mai mult prezentă în plante, în drojdii, ciuperci și bacterii dar și în struguri, suc și vin. Împreună cu o altă enzimă, denumită maltaza (care se află în drojdia de bere), invertaza are o mare importanță pentru industria alimentară. Ambele enzime sunt utilizate în industria panificației și în mai multe procese de fermentație și au rolul de a cataliza și hidroliza zaharoza și maltoza și prin aceasta pregătesc materia primă de fermentație. Cu toate că invertaza manifestă o rezistență mărită la acțiunea SO 2 și devine sensibilă la etanol, activitatea acesteia variază foarte mult în raport cu temperatura. De aceea tratarea mustului și a vinului cu bentonita, deși fixează proteinele, diminuează activitatea invertazei. În activitatea de procesare a strugurilor numai o treime din invertază trece în must, cea mai mare parte rămâne fixată pe componentele solide ale boștinei și în burbă. Strugurii au potențial invertazic ridicat: 1 cm3 must nedeburbat cu pH 3,5 la temperatura 30°C are în mediu 200 unități. Datorită potențialului invertazic ridicat al mustului zaharoza adăugată în el (șaptalizarea) este complet hidrolizată în câteva ore. Drojdiile cu o activitate mică de inversie nu pot fi utilizate în industria panificației și a fermentației. De aceea studierea activității acestor enzime are în primul rând o însemnătate practică. Activitatea invertazei sau a zaharazei (Az) se exprimă în „unități de activitate enzimatică” într-un dm3 de vin sau suc. În cazul industrializării sfeclei de zahăr problema principală care trebuie monitorizată se referă la nivelul colorației zemii de difuzie dar și a gradului vâscozității acesteia în situația infectării cu Leuconostoc mezenteroides. Produșii de oxidare enzimatică sau neenzimatică sunt adsorbiți pe CaCO3 (carbonat de calciu) rezultat la finalul primei carbonatări, doar în cazul în care se respectă următoarele cerințe: - pentru ca adsorbția carbonatului de Ca să fie bună este necesar ca nivelul de CaO să depășească 0,09%; în cazul în care materia primă (sfecla de zahăr) înregistrează defecte se creează dificultăți la filtrare, fapt care îl obligă pe procesator să carbonateze mai puțin zeama rezultată, situație în care compușii fenolici vor facilita creșterea gradului de colorație a zemii de difuzie; - asigurarea nivelului optim de oxigen; întrucât în mediul neoxidat pe CaCO 3 nu se realizează adsorbția, zeama rezultată va avea un grad ridicat al colorației; - prezența ionilor de Cu2+ în cazul tirozinei și Fe3+ în situația polifenoloxidazelor, contribuie la intensificarea culorii zemii, aspect nedorit în procesare. Evitarea creșterii intensității colorației zemii, indusă de prezența în etapa primară a polifenoloxidazelor, se poate realiza îndeplinind cerințele următoare: - decoletarea corectă a sfeclei și aceasta să nu conțină resturi de frunze sau alte ierburi; - dacă s-a format deja colorarea, corecția se poate realiza prin carbonatarea zemii la un prag ridicat de alcalinitate și se impune o aerare intensa. Luând în considerare toate aceste aspecte putem preciza faptul că nivelul colorației zemii poate fi optim în următoarele condiții: utilizarea SO 2 la difuzie; carbonatarea să se efectueze în medii cu alcalinitate crescută; respectarea timpilor de lucru. 5.8.3. UTILIZAREA PREPARATELOR ENZIMATICE COMPLEXE LA CONFIEREA FRUCTELOR
Fructele confiate sunt alimente bogate în fibre, caracteristică care contribuie și la reglarea digestiei și ajută la instalarea senzației de sațietate, previne consumul de alimente în exces și diminuează senzația de foame. Beneficiile consumului de fructe confiate sunt nenumărate, adesea sunt utilizate și în loc de gustări. Obținerea fructelor confiate se bazează pe utilizarea mai multor tehnologii. Anticipat fructele sunt supuse acțiunii unui preparat enzimatic complex de origine fungică (pectinaze, hemicelulaze, proteaze). Pentru obținerea cireșelor confiate acesta sunt conservate prin sulfitare și apoi după îndepărtarea sulfitului sunt întărite cu CaCl2. În continuare fructele sunt imersate timp de 24 ore într-o soluție în care se adaugă un preparat enzimatic, apoi sunt transferate într-un vas în care se află o altă soluție apoasă de eritrozimă unde se lasă timp de 40 minute și la o temperatură de 80°C. Se adaugă cantități reduse de acid tartic și se menține întreaga masă încă 40 minute și la același nivel al temperaturii. Practic, confierea se bazează pe imersia succesivă a fructelor în siropuri de zaharoză cu concentrații cuprinse între 40-60% și respectiv 70-80% timp de 24 ore pentru fiecare nivel al concentrației. Procesul se încheie cu deshidratarea convențională a fructelor. În cazul pulpelor de fructe utilizate pentru confitare (confiere), cum este cazul cireșelor, se pune un accent deosebit pe mărimea, fermitatea si uniformitatea fructelor, pe lipsa de defecte și prevenirea crăpării. În acest caz, conținutul redus în glucide nu constituie un criteriu de neacceptare, recomandându-se chiar recoltarea acestora în pârgă [Fermierul, iulie 2011].