5.

IMUNOGLOBULINELE
Imunoglobulinele sunt glicoproteine specializate n recunoaterea moleculelor non-self. Se
gsesc sub dou forme, circulant i de membran:
Forma circulant este reprezentat de moleculele de anticorpi, care se gsesc n snge, lichidul
interstiial i secreii. Anticorpii sunt sintetizai de plasmocite, celule care provin din LB activate
n urma contactului cu antigenul.
Forma membranar este reprezentat de monomeri de imunoglobuline, fixai pe suprafaa LB.
Aceste molecule intr n alctuirea receptorilor pentru antigen ai limfocitelor B (B-cell receptors BCR). Au rol de de activare a LB.
Imunoglobulinele solubile sunt proteine care migreaz pe electroforez n principal n
fraciunea gamaglobulinelor. Imunoglobulinele nu migreaz exclusiv n fraciunea . Exist clase
importante de imunoglobuline care se regsesc n fraciunile i ale electroforezei.
Cele mai multe antigene cu care organismul vine n contact au o structur complex. n
general, pentru un anumit antigen, sistemul imun va genera mai multe tipuri de anticorpi, care vor
recunoate diferii epitopi. Fiecare anticorp recunoate specific un anumit epitop, de care se leag cu
o poriune care are structur complementar cu a epitopului. Aceast poriune se numete paratop,
situs de legare sau situs combinativ.
Structura anticorpilor
Similar altor molecule proteice, imunoglobulinele au o organizare spaial complex,
caracterizat prin structur primar, secundar, teriar i cuaternar. Toate imunoglobulinele au o
structur asemntoare, reprezentat de o unitate tetracatenar. Planul de organizare al domeniilor
imunoglobulinelor se regsete n multe alte proteine, de exemplu la unii receptori de suprafa.
Proteinele care conin cel puin un domeniu imunoglobulinic constituie superfamilia
imunoglobulinelor.
Toate tipurile de anticorpi au structur comun, fiind alctuii din 4 lanuri peptidice: dou
lanuri identice uoare (L) i dou lanuri identice grele (H).
Lanurile uoare au o greutate molecular de aproximativ 25 000 de daltoni iar lanurile grele
de aproximativ 50 000 de daltoni.
Fiecare lan uor este legat de un lan greu printr-o punte disulfidic i prin diferite alte
legturi noncovalente.Astfel se formeaz un heterodimer H - L. Heterodimerii sunt legai ntre ei de
asemenea prin puni disulfidice i legturi noncovalente.
Numrul de legturi disulfidice i aezarea acestora difer n funcie de familia de
imunoglobuline.
Structura imunoglobulinelor este strns legat de funciile pe care acestea trebuie s le
ndeplineasc. Pe de o parte, anticorpii se leag n mod specific de antigene, iar pe de alt parte pot
forma legturi cu o varietate de molecule efectoare i celule.
Papaina este o enzim care scindeaz molecula de imunoglobulin n trei fragmente:
1

dou fragmente identice care au capacitatea de a lega antigene. Acestea au fost denumite Fab antigen binding. Aceste fragmente sunt alctuite dintr-un lan uor L i captul N - terminal al
unui lan greu H, legate prin puni disulfurice. Fragmentele Fab conin regiunea variabil V.
Existena a dou situsuri de legare permite anticorpului s lege dou molecule de antigen.
un fragment Fc - fragment cristalizabil, care nu prezint capacitatea de legare a antigenelor. Acest
fragment este alctuit din resturile lanurilor H. Fragmentul Fc este diferit n funcie de familia de
imunoglobuline.

Exist dou tipuri de lanuri uoare L: i . Nu exist diferene funcionale ntre anticorpii
care au lanuri fa de cei cu lanuri , iar motivul pentru care exist aceast variaie nu este
cunoscut. Aceste dou tipuri de lanuri intr n alctuirea tuturor claselor majore de imunoglobuline.
La oameni, raportul cantitativ ntre lanurile i este de 2 la 1.
n schimb, diferenele structurale existente ntre lanurile grele H sunt definitorii pentru
ncadrarea imunoglobulinelor n anumite clase i influeneaz semnificativ funcia acestora.
Exist 5 izotipuri majore de lanuri grele H: , , , , . Pe baza deosebirilor existente n
structura lanurilor grele H au fost descrise 5 clase de imunoglobuline: IgG, IgM, IgA, IgD, IgE.
Situsul combinativ
Primii 100 de aminoacizi ale capetelor N - terminale ale lanurilor H i L prezint o
variabilitate marcat ntre anticorpi cu specificitate diferit. Aceste segmente sunt denumite regiunile
V: VL pentru lanurile uoare i VH pentru lanurile grele.
Specificitatea diferit a anticorpilor este datorat acestei regiuni variabile. Asocierea dintre
VH i VL creaz o zon hipervariabil, care este locul de legare a antigenelor. Aceasta fost denumit
situs combinativ sau situs de legare a antigenului. n interiorul regiunii variabile, exist anumite
poziii care sunt relativ constante de la molecul molecul i zone care foarte rar sunt ocupate de
acelai aminoacid. Aceste poziii numite hipervariabile constituie locul de legare cu antigenul i au
fost denumite regiuni determinante ale complementaritii (CDR - Complementary Determining
Regions). Sistemul imun este capabil s produc anticorpi mpotriva unei repertoriu vast de antigene
prin generarea de imunoglobuline care prezint CDR specifice pentru fiecare antigen.
Situsul combinativ pentru antigen este o cavitate mic format prin plicaturarea domeniilor
VH i VL. Antigenul intr n aceast cavitate i angajeaz legturi cu domeniile V prin
complementaritate, pe principiul cheie-broasc.
Secvenele de aminoacizi care nu stabilesc legturi cu antigenul formeaz regiunea suport
FR (framework region).
CDR
n lungimea fiecrui lan polipeptidic a domeniilor VH i VL sunt cte trei mici segmente
formate din 5-10 aminoacizi, care formeaz CDR.
CDR sunt aezate la distane mari una fa de alta pe parcursul secvenei primare de
aminoacizi a domeniilor VH i VL, dar ele sunt aduse una lng alta prin plicaturare. Structura
spaial a situsului combinativ este foarte important. Dac se separ lanurile H i L, fiecare dintre
domeniile VH i VL pierde capacitatea de recunoatere a antigenului. Structura spaial a CDR este
meninut de regiunea FR a situsului combinativ.

CDR realizeaz contactele cu epitopii. Aceste contacte sunt punctiforme. CDR sunt aezate n
vrful unor plicaturi care intr n interiorul situsului combinativ. Secvenele de aminoacizi din CDR
sunt complementare cu structura epitopilor.
Totalitatea celor ase segmente CDR formeaz paratopul sau situsul de legare pentru antigen.
El recunoate epitopul.
FR
Regiunea suport sau schelet, denumit FR (framework region) cuprinde restul secvenelor de
aminoacizi din domeniile VH i VL care nu se leag cu antigenul, dar care formeaz pereii situsului
combinativ. FR nu particip la contactul cu antigenul, dar aeaz optim n spaiu CDR prin
plicaturarea buclelor VH i VL. Plicaturarea VH i VL contribuie la specificitatea situsului
combinativ.
n organism se sintetizeaz o varietate extrem de mare de molecule de imunoglobuline,
estimat la circa 106 variante posibile. Variabilitatea structural se realizeaz printr-un proces de
recombinare a genelor care codific lanurile de imunoglobuline, n special regiunile variabile. n
cursul diferenierii limfocitelor B acioneaz o enzim specific numit recombinaza, care reunete
aciunile de endonucleaz i ligaz. Recombinaza elimin unele fragmente din genele V, V i VH i
aduce n proximitate dou fragmente de gen, care se asociaz aleator. Dup pierderea de material
genetic sunt alturate dou segmente de gen care erau iniial situate la distan. n final se alipesc
segmentul genic V de segmentul C i rezult o gen funcional pentru un tip de imunoglobulin.
Fiecare LB care va genera o clon are cte o gen funcional care codific lanuri H i L diferite de
ale altor clone. Prin asocierea ntmpltoare a unui lan uor cu un lan greu apare o diversitate foarte
mare de combinaii posibile a domeniilor V, deci a situsurilor combinative pentru antigen.
Cu excepia regiunilor variabile, structura imunoglobulinelor este relativ constant pentru
moleculele din aceast clas.
Funciile anticorpilor
Anticorpii au un rol esenial n ndeprtarea antigenelor solubile i n distrugerea antigenelor
corpusculate. Nu toate clasele de anticorpi prezint aceleai proprieti funcionale.
n cele mai multe cazuri, simpla legare a anticorpilor de antigene nu determin distrugerea
bacteriilor sau ndeprtarea antigenelor moleculare. Legarea anticorpului de antigen se realizeaz prin
intermediul fragmentului Fab, n timp ce fragmentul Fc este responsabil de funciile biologice. Acest
fragment are capacitatea de a activa molecule efectoare ale sistemului imun i de a fi recunoscut de
ctre celule imunocompetente.
-

Funciile principale ale anticorpilor sunt:

opsonizarea - favorizeaz fagocitoza antigenelor de ctre macrofage i polimorfonucleare
neutrofile. Aceste celule prezint pe suprafaa receptori pentru fragmentul Fc, numii FcR. Aceti
receptori permit legarea complexelor antigen / anticorp pe suprafaa macrofagelor i neutrofilelor.
Legarea mai multor complexe imune pe suprafaa fagocitelor determin iniierea unui semnal de
transducie intracelular care are drept rezultat fagocitoza acestora. Fagocitoza este un proces
complex, prin care agentul patogen este internalizat i devine inta unor mecanisme de distrugere
care determin liza patogenului.

activarea complementului - este o proprietate pe care o posed moleculele de IgM i cele mai
multe subclase de IgG.
citotoxicitatea mediat celular dependent de anticorpi (ADCC) - permite distrugerea celulelor
proprii ale organismului care au fost infectate viral sau cu bacterii intracelulare. Celulele infectate
viral produc proteine virale care servesc replicrii virusului. Unele dintre aceste molecule sunt
expuse pe suprafaa celulei respective. Moleculele virale sunt recunoscute ca nonself, se va
declana un rspuns imun umoral, cu producerea de anticorpi care se fixeaz pe aceste molecule
de suprafa. Celulele natural killer (NK), care au un rol important n rspunsul imun celular,
prezint receptori pentru fragmentul Fc. Astfel, anticorpii direcioneaz celulele natural killer
ctre celulele infectate viral, cu liza acestora din urm.

Colaborarea ntre anticorpi i complement duce la ndeprtarea sau distrugerea antigenelor

prin intermediul a trei mecanisme principale:
anticorpii se fixeaz pe membrana bacteriilor i determin activarea complementului. Sistemul
complement este un sistem enzimatic care se activeaz n cascad i care determin liza osmotic a
antigenelor corpusculate prin perforarea membranei.
activarea local a sistemului complement de ctre anticorpi determin apariia unor cantiti
crescute de molecule de C3b. Acestea au la rndul lor capacitatea de opsoniza antigene i
promoveaz fagocitoza.
eritrocitele prezint receptori pentru C3b. Molecule de C3b au capacitatea de a se ataa de
complexele imune. Complexele imune care nu pot fi fagocitate local sunt transportate de ctre
eritrocite la ficat sau splin, unde macrofagele locale fagociteaz complexele imune fr distruge
eritrocitele care au avut rol de transport.
CLASELE MAJORE DE IMUNOGLOBULINE
n tabelul I sunt prezentate caracteristicile claselor de imunoglobuline.
Tabelul I. Caracterele claselor de imunoglobuline
Clasa Greutatea
molecular
IgG 150 000 Da

IgA

Concentraia
seric
8-16 mg/ml

320 000 Da
1,4-4 mg/ml
(forma dimeric)
IgM 900 000 Da
0,5-2 mg/ml
IgD
IgE

185 000 Da
200 000 Da

% din
Ig serice
80%

13%
5- 10%

sub 0,04 mg/ml sub 1%

17-450 ng/ml 0,002%

Funciile
majore
Aprarea antiviral,
antibacterian i
contra toxinelor
bacteriene n snge i
interstiiu
Aprarea mucoaselor

Activarea complementului
++

Ac aglutinani i
lizani contra bacteriilor
Funcie de BCR
Aprarea antiparazitar
Rol n anafilaxie

+++

Imunoglobulinele G
Imunoglobulinele G (IgG) reprezint aproximativ 80% din totalul imunoglobulinelor
plasmatice (8-16 g/l). Sunt distribuite egal n sectorul intravascular i interstiial.
Moleculele de IgG sunt formate din dou lanuri grele i dou lanuri uoare sau . Exist
4 subclase de IgG, pe baza diferenelor existente la nivelul lanurilor : IgG1, IgG2, IgG3 i IgG4.
Moleculele de IgG au greutatea molecular de circa 150 kDa. Au n general o durat de via
lung, de circa 3-4 sptmni. Excepie fac moleculele din subclasa IgG3, care triesc mai puin de o
sptmn (5-7 zile).
Toate subtipurile de IgG sunt caracteristice pentru rspunsul imun umoral secundar, care
apare la al 2,3,.. n contact cu antigenul. Sinteza lor este indus de IL-4, produs de LTH2.
Principalele caracteristici funcionale ale subclaselor de IgG sunt:
IgG3 activeaz cel mai eficient complementul.
IgG4 nu are capacitatea de a activa complementul,
toate subclasele, cu excepia IgG2, au capacitatea de a trece prin placent i au un rol important n
protejarea ftului,
IgG1 i IgG3 au rol important n opsonizare, pentru c prezint afinitate crescut pentru receptorii
Fc de pe suprafaa celulelor fagocitare. IgG2 are o afinitate foarte sczut pentru FcR.
Imunoglobulinele M
Imunoglobulinele M (IgM) reprezint ntre 5 i 10% din totalul imunoglobulinelor serice.
Forma monomeric de IgM se afl pe suprafaa limfocitelor B i intr n structura BCR.
Plasmocitele secret IgM circulant ca pentameri. Monomerii sunt aranjai astfel nct
fragmentele Fc se afl n centru iar cele 10 situsuri de legare al antigenului se afl la periferia
moleculei. Fiecare pentamer este format prin legarea monomerilor prin legturi disulfurice, legturi
care se constituie ntre anumite zone ale lanurilor grele, situate nspre captul C - terminal. n plus,
molecula de IgM conine un lan suplimentar polipeptidic numit lanul J (joining), care este necesar
pentru polimerizarea monomerilor.
Cele mai importante caracteristici funcionale sunt:
IgM sunt mai eficiente dect IgG n activarea complementului.
IgM sunt mai eficiente dect IgG n neutralizarea toxinelor i particulelor virale.
IgM are capacitatea de aglutinare a hematiilor i a particulelor virale.
IgM prezint 10 situsuri de legare pentru antigen. O molecul de IgM poate lega n mod teoretic 10
molecule de antigen, cu condiia ca acestea s fie de dimensiuni reduse. De obicei o molecul de IgM
are capacitatea s lege 5 molecule de antigen.
IgM este clasa de imunoglobulin care este produs n rspunsul imun primar.
IgM nu trec prin placent.
din cauza moleculei mari, IgM se gsete n concentraii reduse n lichidul interstiial, pentru c
difuzeaz cu greutate. n schimb, prezena lanului J permite moleculei de IgM s traverseze
structurile epiteliale prin transport activ. IgM se gsete n secreii i pe suprafaa mucoaselor, unde
are un rol accesor important pe lng IgA.

Imunoglobulinele A (IgA)
IgA este clasa de imunoglobuline predominant n secreii: lapte matern, saliv, lacrimi,
mucusul tracturilor digestiv, bronic i genitourinar. n ser, IgA reprezint 10-15% din totalul Ig.
n snge, IgA circul n principal sub forma de monomeri. n secreiile mucoase, IgA exista
aproape exclusiv sub form de dimeri (IgAs).
Moleculele de IgAs conin un lan polipeptidic J i o component secretorie, de asemenea de
natur peptidic. Lanul polipeptidic J este identic cu cel care se gsete n pentamerii de
imunoglobulin M. Componenta secretorie este sintetizat de celulele epiteliale.
-

Mecanismele de protecie ale IgAs la nivelul mucoasei:

mpiedica colonizarea bacterian, care se realizeaz prin mai multe mecanisme:
o IgAs sunt molecule hidrofile cu sarcin electric negativ. Fixarea anticorpilor pe
suprafaa bacteriilor determin acoperirea acestora cu un nveli hidrofilic care mpiedic
ataarea la suprafaa mucoasei.
o IgAs au capacitatea de a aglutina bacteriile.
o bacteriile acoperite de IgAs sunt oprite de stratul de mucus, datorit interaciunilor
componentei secretorii a IgAs cu moleculele de mucin.
neutralizarea particulelor virale.
neutralizarea enzimelor i toxinelor.
aciune sinergic cu factori ai sistemului de aprare nnscut: lactoferina, peroxidaz, lizozim.
IgAs au un rol important n meninerea relaiei simbiotice cu bacteriile comensale din cavitatea
oral. Exist un repertoriu larg de IgAs care conine anticorpi pentru antigenele exprimate de
bacteriile comensale i care mpiedic trecerea acestora prin mucoas.
Componenta secretorie are urmtoarele roluri:
stabilizeaz imunoglobulinele mpotriva clivajului proteolitic.
interacioneaz cu moleculele de mucin i determin meninerea IgAs n stratul de mucus.
efect antibacterian i antitoxic direct redus.
Imunoglobulinele E (IgE)

IgE este o clas de imunoglobuline cu efecte biologice importante, cu toate c se gsete n

cantiti reduse n plasm - 0, 3 micrograme / ml.
Lanul greu epsilon este format din cinci domenii, unul variabil i patru constante. Molecula
de IgE nu are o zon balama i din aceast cauz este foarte rigid.
Au rol n aprarea antiparazitar i intervin n reacia de hipersensibilitate de tip 1, care este
responsabil pentru o varietate de afeciuni alergice, de la rinit alergic, urticarie, astm bronic, pn
la oc anafilactic.
IgE sunt anticorpi citofili, adic dup ce sunt sintetizai nu rmn n lichidul extracelular, ci se
ataeaz prin receptori specifici pe suprafaa mastocitelor i bazofilelor. Mastocitele i bazofilele
posed un bogat echipament enzimatic i de mediatori ai inflamaiei, care se afl n granulaiile
citoplasmatice. Legarea antigenului de imunoglobulinele E care se afl pe suprafaa acestor celule
declaneaz degranularea i eliberarea mediatorilor inflamaiei n esuturi, cu apariia manifestrilor
alergice.