Ghid Toxicologie Industriala PDF

MINISTERUL SNTII
INSTITUTUL NAIONAL DE SNTATE PUBLIC
Dr. Corneliu NEAGU

Dr. Mihaela NEGRU
Bucureti 2013
MINISTERUL SNTII
INSTITUTUL NAIONAL DE SNTATE PUBLIC
ASPECTE GENERALE DE TOXICOLOGIE INDUSTRIALA

METODE DE ANALIZA UTILIZATE IN TOXICOLOGIA INDUSTRIALA
EDIIA 1 - 2013
Autori:
Dr. Corneliu Neagu
Dr. chim. Mihaela Negru
Colaboratori:
Pribu Mihaela, Dragoiu Simona Mihaela, Tacu Mihaela Victoria, Sarb Liliana,
Peter Katica, Mocan Aurel
Redactare computerizat:
Voinoiu Angelica Marilena
Botin Georgeta
Copert
Staicu Ctlin Alexandru
Sub coordonarea Centrului Naional de Monitorizare a Riscurilor din Mediul

Comunitar
Material publicat prin Programul Naional de Monitorizare a Factorilor
Determinani din Mediul de Via i Munc
2013
Ghid privind aspecte generale de Toxicologie Industriala
Institutul National de Sanatate Publica - 2013
CUPRINS
I. INTRODUCERE
II. INVESTIGAREA CONDIIILOR DE MEDIU DE MUNC
II. 1. Documentare
II. 2. Identificarea noxelor la locul de munc
II. 3. Prelevarea probelor de la locul de munc
II. 4. Determinarea analitic a noxelor
II. 5. Exprimarea concentraiilor toxicelor profesionale
II. 6. Interpretarea rezultatelor
III. EVALUAREA BIOTOXICOLOGIC A PERSONALULUI EXPUS
PROFESIONAL LA AGENI CHIMICI
III. 1. Ptrunderea substanelor toxice n organism
III. 2. Fixarea, distribuia i depozitarea toxicelor profesionale
III. 3. Biotransformarea toxicelor profesionale
III. 4. Eliminarea din organism
III. 5. Determinarea substanelor chimice sau a metaboliilor n fluidele
corpului
III. 6. Criterii de selectare a testelor biologice
III. 7. Interpretarea rezultatelor
III. 8. Aspecte analitice i etice
IV. METODE ANALITICE DE DETERMINARE A UNOR AGENI CHIMICI N
AERUL ZONELOR DE MUNC
IV. 1. Determinarea metanolului prin GC
IV. 2. Determinarea aerosolilor alcalini
IV. 3. Determinarea acidului clorhidric
IV. 4. Determinarea acidului sulfuric i a sulfailor solubili
IV. 5. Determinarea hidrocarburilor alifatice N hexan
IV. 6. Determinarea aeroemulsiilor de uleiuri minerale
IV. 7. Determinarea unor metale
IV. 8. Determinarea unor compui organici volatili (hidrocarburi, alcooli,
esteri, cetone) din aerul locurilor de munc, prin GC
4
5
5
5
8
14
14
15
16
17
21
22
28
29
30
32
35
36
36
39
43
46
50
52
56
70
V. DETERMINAREA PULBERILOR N AERUL ZONELOR DE MUNC

V. 1. Aspecte teoretice
V. 2. Determinarea gravimetric a pulberilor inhalabile i respirabile
V. 3. Determinarea gravimetric a pulberilo toracice
VI. METODE ANALITICE DE DETERMINARE A UNOR INDICATORI
BIOTOXICOLOGICI
VI. 1. Determinarea acetonuriei
VI. 2. Determinarea tioeterilor urinari
VI. 3. Dereminarea cromului n urin prin GF-AAS
VI. 4. Determinarea porfirinelor totale urinare
VI. 5. Determinarea acidului delta aminolevulinic (DAL) urinar
VI. 6. Determinarea acidului hipuric i a acidului metilhipuric
VI. 7. Determinarea acidului mandelic
VI. 8. Determinarea fenolilor urinari
VI. 9. Determinarea carboxihemoglobinei n snge
VI. 10. Determinarea acidului glicolic n ser
VII. CONCLUZII
BIBLIOGRAFIE

81
81
88
94
100
100
102
105
109
112
115
117
118
120
123
125
126
I.INTRODUCERE
Lucrarea de fa se dorete a fi un ajutor pentru medici de medicina
muncii, toxicologi industriali, evaluatori de risc, angajatori n vederea
evalurii expunerii profesionale la ageni chimici i pulberi.
Expunerea profesional la astfel de ageni poate fi evaluat prin
msurarea concentraiei agentului toxic n aerul zonelor de munc i prin
msurarea unor parametrii biologici la personalul expus profesional.
n capitolul II se prezint modul de investigare a unui obiectiv
industrial ( cunoaterea procesului tehnologic, alegerea noxelor, prelevarea
probelor, analiza i interpretarea acestora).
n capitolul III se prezint metodologia de evaluare biotoxicologic a
personalului expus profesional la noxe chimice.
n partea final a lucrrii sunt prezentate metode analitice de
determinare a unor ageni chimici n aerul zonelor de munc, a diferitelor
fraciuni de pulberi (inhalabile, toracice i respirabile ), precum i a unor
indicatori biotoxicologici specifici.
Majoritatea acestor metode au fost adaptate i/sau verificate n
cadrul urmtoarelor laboratoare: laboratorul Toxicologie i Medicina
Muncii- CRSP Bucureti, laboratorul Sntate Ocupaional- CRSP Timioara
, laboratorul ncercri Fizice, Chimice i Microbiologice CRSP Trgu Mure
i laboratorul Sntate Ocupaional CRSP Cluj Napoca.
Metodele prezentate pot fi utilizate de laboratoarele care fac
evaluarea condiiilor de munc i a strii de sntate a personalului expus la
noxe chimice i pulberi.
Aceast ghid este rezultatul lucrrii din PN II Noxe profesionale
(chimice i pulberi) cu impact n expunerea profesional din Romnia
Metode de determinare n aerul zonelor de munc, indicatori biologici de
expunere i/sau de efect efectuat n perioada 2011 2012.

II.INVESTIGAREA CONDIIILOR DE MEDIU DE MUNC

n abordarea determinrilor de noxe din aerul zonelor de munc sunt
incluse mai multe etape de studiu.
II.1.Documentare
Aceasta se refer la culegerea unor date asupra obiectivului luat n
studiu i a proceselor tehnologice ce au loc n acea unitate n vederea
alegerii noxelor ce vor fi determinate , a aparaturii i a celor mai adecvate
metode de recoltare si analiz chimic ce urmeaz a fi folosite.
Studiul procesului sau proceselor tehnologice folosite n fiecare
unitate va fi efectuat de toxicologul industrial mpreun cu medicul de
medicina muncii, angrennd i organele tehnice din unitate, (responsabilul
cu probleme de sntate, efii de secie etc.), deoarece investigaia trebuie
s se refere la ntreaga unitate i la ntreaga gam de ageni chimici ce intra
i ies din procesul de fabricaie.
n acest studiu se va completa un dosar de obiectiv cu urmatoarele
date:
- coordonatele unitii;
- profilul i specificul ei (chimic, metalurgic, etc.);
- mrimea unitii, numrul seciilor, atelierelor;
- procesele tehnologice care se desfaoar n cadrul unitaii;
- noxele degajate pe secii i procese tehnologice;
- caracterul procesului tehnologic (continuu sau discontinuu, periodic
n funcie de nevoile pieii, etc.)
II.2.Identificarea noxelor la locul de munc

Pe baza studiului procesului tehnologic, a scopului determinrilor, se
vor fixa noxele ce urmeaz a fi cercetate, deoarece de natura acestora va
depinde i aparatura i metodele de lucru care vor fi folosite.
La alegerea noxelor se va ine seama n principiu de starea lor fizic,
de agresivitatea lor, de nivelul lor de concentraii probabile, existena unei
singure sau a mai multor noxe n aer etc.
n cazul prezentei simultane a mai multor noxe n aer, se va ine
seama de modul lor de aciune i interaciune att din punct de vedere
5
analitic (reacie chimic, interferena n determinarea uneia sau alteia

dintre noxe prin metodele de analiz chimic folosite) ct mai ales a
modului lor de aciune asupra organismului (sinergism prin adiie sau
potenare, antagonism etc.).
n alegerea noxelor ce urmeaz a fi cercetate se va ine seama att de
material prima folosit n fluxul procesului tehnologic, ct i de eventualele
impuriti pe care le-ar putea conine aceasta.
Un exemplu de impuritate care nu trebuie pierdut din vedere n
cazul studierii condiiilor de munc din industriile de metale neferoase, este
arsenal din pirite.
Se vor studia att produii finii rezultai din procesul de producie
ct i produii intermediari, cei care ar putea lua natere n urma reaciilor
chimice (hidrogen sulfurat, oxizi de azot, ozon, acid cianhidric, hidrogen
arseniat, hidrogen stibiat, etc.) deoarece agresivitatea acestor produi
poate fi uneori mult mai mare chiar dect cea a unor produsi finii extremi
de toxici. Alteori, dimpotriv, produii finii pot fi lipsii complet de
toxicitate.
Se vor studia proprietaile fizico-chimice ale acestora: starea de
agregare, (gaze, pulberi, etc.) tensiunea de vapori de fierbere, solubilitatea
n diveri solveni i ndeosebi n ap i grsimi (pentru a putea aprecia
absorbia sau eliminarea lor n cazul ptrunderii n organism pe cale
respiratorie, cutanat, digestive).
Pe de alt parte, se va aprecia i capacitatea laboratorului de a
determina aceste noxe cu metodele i aparatura recomandat n acest
scop.
n concluzie, n funcie de numrul i nivelul concentraiei de noxe
existente la un moment dat n zona de lucru, pot apare mai multe variante
de lucru.
n cazul prezenei unei singure noxe sau a unui numar redus de noxe
n aer, se va alege noxa dominant sau noxa major.
Prin aceasta se nelege substana cu cea mai mare rspndire n aer
(noxa dominant) cu cel mai nalt nivel al concentraiei ei, iar prin noxa
major se nelege i noxa cu cel mai ridicat potenial agresiv asupra
organismului. De cele mai multe ori, acestea au i o reacie specific asupra
organismului.
Literatura de specialitate din ultimul timp susine i ncearc s

demonstreze din ce n ce mai des, c factorii de mediu care afecteaz starea
de sntate a muncitorilor, potentialul nociv al locurilor de munc n care
acetia i duc activitatea zi de zi, este cu mult mai variat i mai complex. De
aceea, mediul nu mai poate fi caracterizat n majoritatea cazurilor i mai
ales n cazul prezenei mai multor noxe simultan n aer, prin determinarea
unei singure noxe (noxa dominant sau noxa major).
Este n consensul general de a considera c n cazul existenei
concomitente n atmosfera industrial a mai multor noxe chimice, apare un
sinergism de adiie sau de potenare.
Pe de alt parte, n cazul n care substanele aflate n amestec, au un
efect asemntor asupra organismului, efectele lor se vor cumula.
Cunoaterea exact a modului lor de aciune asupra organismului, ca
i gradul lor de agresivitate este un lucru foarte important, deoarece de
acestea poate depinde n mare msur i sistemul de recoltare a noxelor
din aer i metoda lor de determinare chimic.
Determinarea mai multor noxe coexistente la un moment dat n aer,
impune i multaneitate n recoltarea probelor de aer, deoarece numai n
aceste condiii se poate face o interpretare corect a datelor de mediu n
vederea tragerii unor concluzii practice n urma crora s se poat face
recomandri valoroase nu numai de ordin medical, dar i etic i economic.
Deci, urmtoarea etap de studiu n vederea determinrii naturii i
concentraiilor substanelor din atmosfera locurilor de munca este
recoltarea probelor de aer.
Principalii factori care impun luarea n studiu a unei metodologii de
cercetare mai complete, n cazul prezenei simultane a mai multor noxe n
aer sunt:
- coexistena mai multor noxe n aerul zonelor de munc n cantitai
suficient de mari ca s-i ateste prezena att prin influenarea direct a
organismului, ct i prin atingerea sensibilitii metodelor curente de
analiz chimic;
- existena mai multor noxe simultan n aer cu grade diferite de toxicitate,
cu multiple posibilitai de interreacie, care pot duce uneori la potenarea
lor, prin formarea unor produi mai toxici, ca i prezena n atmosfera
zonelor de munc a unor concentraii mici de substane toxice uneori sub
sau n jurul concentraiilor maxime admise, valori ce sunt trecute n mod

obinuit cu vederea.
II.3.Prelevarea probelor la locul de munc

Dup alegerea noxei sau a noxelor ce urmeaz a fi determinate n
aer, este necesar s se stabileasc zonele de munc - locul de unde se vor
recolta probele de aer.
Criteriile de alegere a locului de recoltare sunt variate.
Locurile de recoltare a probelor de aer pot fi puncte fixe, cum ar fi o
masa de comanda, lng o baie de decapare, lnga un agregat oarecare etc.
n acest caz determinrile vor reprezenta concentraia noxei sau
eventualele variaii ale noxei n fluctuaii tehnologice, orare, diurne, etc.
n alte cazuri ele vor putea reprezenta poluarea de fond a acelui loc
de munc. De aceea este necesar s se aibe n vedere interveniile care fac
destul de frecvent la unele instalaii i care de asemenea contribuie la
creterea concentraiilor de substane toxice n atmosfer, precum i faptul
c dac muncitorul lucreaz temporar sau permanent n acel loc.
n ceea ce privete alegerea i numrul punctelor de recoltare a
probelor de aer n cazul industriei chimice, n care hala ntreag reprezint
un loc de munc deoarece noxele (n deosebi cele gazoase) se rspndesc
relativ uniform n ntreaga ncpere, este absolut necesar ca ele s fie fixate
n toate locurile n care se gsesc muncitorii n timpul procesului de munc.
Ele pot fi puncte fixe s-au puncte mobile indiferent dac este vorba de
subsol, parter sau alte nivele ale halei cuprinse n zona de munc.
b) Recoltrile de probe de aer prin puncte mobile reprezint
determinri fcute n diferite locuri alese dup anumite criterii. Unul dintre
ele poate fi urmrirea unui muncitor de un anumit profil, n toate locurile n
care-i desfoar activitatea pe perioada celor 6 sau 8 ore de producie.
Interpretarea acestui gen de determinri poate fi foarte diferit n
funcie de scopul care se urmarete. De exemplu acest mod de recoltare
prin puncte ar putea fi unul din mijloacele de urmrire i demonstrare a
expunerii reale la noxe nu numai a operatorului chimist dar i a unui
muncitor de alt profil cum ar fi de exemplu un electrician sau un lctu,
care ia parte indirect n procesul tehnologic justificnd i susinnd o
eventual simptomatologie clinic sau de laborator, suspect.
c) nalimea la care se recolteaz prizele de aer pentru cercetri

tehnologice, este n general nivelul de respiraie al muncitorului (1,5 m)
considernd c acesta ar sta n picioare.
nalimea la care se recolteaz prizele de aer este condiionat i de
ali factori, printre care citm scopul alegerii locului de unde se iau probele
de aer, poziia muncitorului n momentul efecturii unei operaii din cadrul
procesului tehnologic, etc. Astfel, nalimea poate fi de 1 m n cazul n care
muncitorul execut o operaie n poziie eznd sau de 2-3 m i mai mult
atunci cnd muncitorul se afl pe o scar.
Datorita faptul ca majoritatea toxicilor sint absorbiti in organism pe
cale respiratorie, se va tine seama de aceasta cale de patrundere a lor in
organism, astfel recoltarea prizelor de aer facindu-se la acest nivel.
Scopul determinrii poate constitui un alt criteriu care s hotrasc
locul i nalimea punctului de priz.
n cazul n care se urmrete de exemplu controlul eficienei unei
ventilaii, verificarea unor msuri tehnice luate cu scopul de a reduce
nivelul eliminrilor de noxe n aer, sau defeciuni ale unor instalaii,
recoltarea probelor de aer se va face din locurile cele mai indicate de
exemplu: la gura exhaustoarelor, la locurile de mbinare a coturilor, la
robinete etc.
ntotdeauna se va nota n buletinul de analiz i distana la care se
afl aceste puncte de recoltare faa de locul de emisie a noxelor din aer, sau
distana la care se gasete gura de ventilaie fat de locul de munc
cercetat, pentru a se putea face interpretrile corecte ale rezultatelor.
Pentru o apreciere ct mai real i o verificare a modului de recoltare
a prizelor de aer, se recomand prelevarea n paralel a cte dou probe de
aer, simultan din acelai loc i numai dac este posibil recoltarea a dou
probe simultan, ele se vor succeda una dupa alta ntr-un timp foarte scurt,
inndu-se cont de acest lucru la interpretarea rezultatelor.
Se recomand de asemenea, ca recoltrile de aer s se efectueze
simultan cel puin din dou puncte diferite ale aceleai ncperi. Unul din
puncte l va constitui locul propus iniial pentru a fi caracterizat din punct de
vedere toxicologic, n timp ce cellalt va fi ales ceva mai departe n locuri
mai puin poluate, pentru comparative.
Dac sursa eliminrii de noxe este slab i bine localizat n spaiu,
ntre aceste dou puncte de recoltare vor exista diferene mici de
concentraii i diferenele vor fi cu att mai semnificative cu ct sursa de

poluare va fi mai mare.
Dac exist mai multe surse difuze de poluare a aerului n aceeai
ncpere, diferenele dintre punctele de recoltare ale aerului fiind mai mici,
i mai putin semnificative unul faa de cellalt, ele vor reprezenta totui un
nivel oarecare de poluare al aerului de la un punct la altul, sau de la o secie
la alta cu acelai profil al ntreprinderii.
Odat stabilite locurile de expertizare i punctele de priz ale
probelor de aer, adic cercetarea n spaiu, apare necesitatea planificrii n
timp a determinrilor. n vederea acestui scop se va alctui profesiograma
detailat a muncitorilor examinai. Numai pe baza profesiogramei se va
putea aprecia cu aproximaie, numrul de determinri necesare i
desfurarea n timp a recoltrilor pentru o caracterizare corect a
condiiilor de munc.
Profesiograma reprezint fotografierea n timp, cronometrarea minut
cu minut a ntregii actriviti a muncitorului de un anumit profil.
Profesiograma va releva n primul rnd, timpul real de expunere a
muncitorului la noxe n diferite faze ale procesului tehnologic ca i
perioadele de timp n care acesta este antrenat i n alte munci sau
activiti.
O profesiogram bine facut va demonstra n primul rnd caracterul
procesului tehnologic, dac acesta este continuu sau discontinuu. Deci, n
funcie de acest caracter al procesului tehnologic se va alctui i planul de
determinri la locul de munc.
Astfel, dac ne aflm ntr-o industrie cu un proces tehnologic
continuu, determinrile (recoltrile de aer) se vor putea face la prima or
de la intrarea n tur a schimbului de dimineaa, n perioada de mijloc a
acestui schimb i la sfritul lui.
Determinrile se vor repeta dupa aceleai criterii i n celelalte
schimburi de zi sau de noapte. Se procedeaz n acest fel pornindu-se de la
premiza c n condiiile unui proces continuu eventualele modificri de
concentraii ale noxelor n aer s-ar putea datora acumulrii de noxe n timp,
lipsei de ventilaie, schimbrii microclimatului exterior, precum i altor
cauze.
Acesta va fi i orarul recoltrilor probelor de aer obligatoriu, n cazul
determinrilor de noxe n aerul zonelor de munc ntr-o industrie chimic
10
modern, mecanizat i automatizat construit n aer liber, deoarece

modificrile de concentraii ale noxelor vor fi legate n primul rnd de
microclimatul diferitelor ore din zi sau din noapte.
Tot din profesiogram vor apare (ndeosebi n cadrul industriilor
chimice) i alte momente importante din punct de vedere al igienei muncii
i crora trebuie s li se acorde importana. De exemplu, pierderi de noxe
n momentul prelevrii probelor pentru analizele de laborator, necesare
controlului procesului de producie, momente n care au loc deobicei
creteri ale concentraiilor la care vor fi expui muncitorii i explicaia
intoxicaiilor acute profesionale nregistrate adeseori.
n condiiile unui proces tehnologic discontinuu, prelevarea probelor
de aer se va face n mod obligatoriu pe faza de proces tehnologic i loc de
munc, indiferent de timpul scurs de la nceperea lucrului sau de la intrarea
n tur a muncitorilor.
Sunt faze de proces tehnologic care pot ine minute i chiar fraciuni
de minute, momente n care eliminrile de noxe pot s ating concentraii
n aer att de mari nct s depaeasc cu mult expunerea i riscul de
intoxicare a muncitorului, concentraii la care nu ar fi expus muncitorul nici
pe o perioada de 6 sau 8 ore de munc.
Reiese de aici c principalul factor care determin ritmicitatea
recoltrii probelor de aer este procesul tehnologic.
Dar frecvena i recoltarea probelor de aer este condiionat nu
numai de noxe i de nivelul concentraiei lor n aer, de procesul tehnologic
i de sensibilitatea metodelor chimice de analiz, ct i de alti factori legai
de sistemul de recoltare a noxei (pe material filtrant sau n soluie), de
solubilitatea noxei sau reactivitatea ei cu soluia reactiv etc.
Principiul sistemului de recoltare al noxelor este esenial. Dac
metoda de analiz prezint suficiente garanii de sensibilitate, necesitnd
pentru punerea n eviden a noxelor recoltarea unor volume mici de aer,
acestea vor permite recoltarea unui numr mare de probe de aer ntr-o
perioad relativ scurt de timp.
Din cele expuse mai sus, reiese faptul c i numrul probelor de aer
ce trebuie recoltate dintr-un punct care urmeaz a fi caracterizat din punct
de vedere toxicologic nu este i nu poate fi fix sau stabilit cu precizie
dinainte. Numrul minim de probe recoltate dintr-un anumit punct pentru
evalurile de rutin poate fi de 3 pna la 5 pentru fiecare operaie, sau de
11
ordinul a 15-20 de probe adic attea nct s permit o caracterizare

precis i reala a unui proces tehnologic, a unei operaii sau a unui moment
oarecare din cadrul procesului de munc ce urmeaz a fi caracterizat.
n principiu, dac procesul tehnologic este continuu i decurge n
mod normal, dintr-un punct de recoltare se vor lua probe de aer cel puin
n 3 momente ale zilei: la nceputul lucrului sau al unui schimb, la mijlocul i
la sfritul schimbului.
n cazul n care muncitorul efectueaz i unele operaii obligatorii
care determin eliminri de noxe n aer, se vor recolta probe de aer i n
aceste momente. Cu att mai mult n cazul unor avarii sau n cazul verificrii
unor agregate ca i n cazul unor procese tehnologice discontinue, probele
de aer recoltate trebuiesc s fie suficiente pentru a permite o caracterizare
corect a acestui loc de munc, operaie sau proces tehnologic. Fr
ndoial c, cu ct numrul de probe recoltate va fi mai mare, cu att i
valoarea determinrilor va fi mai exacta mai real.
n general fiecare metod de analiz chimic prevede volumul minim
de aer necesar pentru o determinare.
Dar volumul minim de aer al unei probe care s permit dozarea unei
noxe la limita tolerabil (VLE) lucru deosebit de important n cazul
necesitii de a determina o noxa noua din aer, se poate calcula pornind de
la urmtoarea formul:
Vmn= S x 22400 760 273 + t ,
M x VLE
P
273
n care
Vmn= volumul minim de aer necesar determinrii probei exprimat n litri;

S = sensibilitatea metodei analitice, exprimat n mg;
M= greutatea molecular a substanei de cercetat;
VLE (CMA) = valoarea pragului recunoscut n ppm;
P = presiunea barometric exprimat n mm coloan de mercur;
t = temperatura aerului exprimat n grade Celsius.
Dac temperatura i presiunea nu sunt mult diferite de 250C i 760
mm Hg se poate aplica ecuaia simplificat.
Dispozitivele de recoltare pot fi individuale (personale) sau colective
(pentru locul de munc).
12
- metoda de recoltare: aerul de la locul de munc, care conine toxicul

profesional (toxicele profesionale) ce trebuie determinat, este aspirat ntrun mediu absorbent , adsorbant sau filtrant capabil s-l rein.
Mediul absorbent poate fi un lichid (ap, soluie chimic, etc.) mediul
adsorbant poate fi gel de siliciu, aluminiu, carbine, etc. iar ca mediu filtrant
se folosesc diferite filtre. n general mediile absorbente i adsorbante se
folosesc la recoltarea probelor de aer ce conin toxicul profesional sub
forma de gaze sau vapori toxici, iar mediul filtrant la recoltarea pulberilor
toxice.
Absorbitoare de tip macro i micro. Principiul recoltrii probelor de
aer const n trecerea lui printr-un lichid, sub form de bule ct mai mic,
pentru a favoriza reinerea mecanic a substanei n lichid sau pentru a fixa
substana de cercetat printr-o reacie chimic cu soluia absorbanta.
Absorbitoarele sunt de mai multe tipuri i poart denumirea celui
care le-a propus, fie una din caracteristicile lor. Astfel, se cunosc
microabsorbitoarele de tip Petri, Cloez, Drexel sau de tip impingiment a
crui principiu de funcionare este cel de impact. Alte dispozitive sunt
cunoscute sub denumirea de absorbitoare cu placa poroasa, cu lulea, etc.
Capacitatea lor utilizare este de 10-20 ml soluie, iar debitul de aspiraie
este ntre 0,5 i 20 l/minut.
Pentru o concentrare i mai mare a unor noxe aflate n mediul de
munc se folosesc microabsorbitoarele confecionate din sticla bazate pe
acelai principiu cu absorbitoarele de mai sus, dar coninnd volume i mai
mici de soluie absorbant. n acest sens, deosebit de apreciate sunt
microabsorbitoarele n form de U cu capilar, n care se pot introduce
la nevoie i bile de sticl, i a cror capacitate este de 2 5 ml soluie, iar
debitul de aspiraie a aerului sub 0,5 l/minut.
Pentru aerosoli cum ar fi: fum, cea, pulberi de diferite nature
(minerale, animale sau vegetale) se foloseste dispozitivul filtrante. Principiul
lor de funcionare este de a filtra aerul de cercetat printr-un material poros
care poate fi hrtie de filtru, filtru de membrane, fibre de sticl, etc. Porii
acestor filtre fiind mici i eficiena reinerii cantitative a noxelor este cu
mult mai mare ca a celorlalte metode de aspiraie. n plus n acest caz
intervin fortele electrostatice care mresc cu mult eficiena reinerii.
Aparatura de recoltare const din dispozitive de aspiraie a aerului
(aspiratoare), dispozitivul de reinere (absorbitoare, plnii) i dispozitive
13
pentru msurarea debitului sau a volumului de aer (debitmetre,rotametre,

gazometre).
II.4.Determinarea analitic a noxelor

Probele de aer de la locul de munc, recoltate prin una din metodele
amintite, sunt analizate. Pentru analiz se folosesc urmatoarele metode:
- metode spectrometrice: spectrometrie de absorbie atomic,
spectrometrie de absorbie molecular UV/VIS;
- metode cromatografice: cromatografie n faza gazoas sau faza lichid;
alte
metode:
turbidimetrice,
gravimetrice,
electrochimice
(potentiometrice, polarografice) pot fi utilizate n unele cazuri;
- metode de determinare rapide, orientative ( tubuoare indicatoare);
- metode rapide automate - n acest scop sunt folosite analizoare de gaze
sau de compui organici volatili dotate cu senzori electrochimici sau celule
fotoelectrice.
II.5. Exprimarea concentraiilor toxicelor profesionale

Concentraiile de toxic profesional gsite n aerul locului de munca se
exprim n mg/m3 sau n ppm (parti per million) .
De obicei, exprimarea pentru gaze i vapori se face n ppm (parti per
million).
Dar, pentru o interpretare mai uoar de cele mai multe ori,
concentraiile de toxic profesional n aer sunt exprimate n concentraie
masica (nu n volume) = mg/m3.
Conversia de la ppm la mg/m3 i de la mg/m3 la ppm se bazeaz pe
condiii standard i anume:
- presiunea atmosferica : 760 torri;
- temperature 250C (770F);
- volum molar : 24,45 l.
Conversia de la ppm la mg/m3 i de la mg/m3 la ppm se face conform
formulelor:
- mg/m3 = ppm masa moleculara a toxicului profesional
24,45
- ppm = mg/m3 x 24,45
masa moleculara a toxicului profesional

14
II.6. Interpretarea rezultatelor

Rezultatele obinute, exprimate n mg/m3, se compar cu valorile
limit de expunere profesional pentru agenii chimici (HG 1218/2006).
Dac nu se specific astfel valoarea limit de expunere profesional pentru
agenii chimici, reprezint valoarea limit a mediei ponderate cu timpul, pe
o perioad specific (8 ore) i termen scurt (15 minute).
a) Modul de calcul al concentraiei medii ponderat cu timpul
Concentraia medie ponderat cu timpul pe durata unui schimb de
lucru rezult dintr-un numr reprezentativ de determinari la locul de
munc respective, n diferite faze ale procesului tehnologic, crora li se
cunoate durata.
Formula:
(C1 xT1) +(C2 xT2) + (C3 xT3)+..+ (Cn xTn)
Ttotal
C1,C2,C3Cn = concentraiile medii ale diferitelor faze specifice ale procesului
tehnologic, exprimate n mg/m3
T1,T2,T3Tn = durata diferitelor faze specifice ale procesului tehnologic la
care s-au fcut determinrile exprimate n minute.
Ttotal = timpul total de lucru al schimbului de lucru: 480 minute sau 360
minute (8 sau 6 ore pe zi).
b) Cazul n care se gsesc simultan n aerul locului de munc
substane cu toxicitai diferite i pentru care nu exist metode de
determinare separate a acestora, se va lua n considerare substana cu
toxicitatea cea mai mare pentru aprecierea gradului de nocivitate a zonelor
de munc.
c) Cazul n care la locurile de munc se gsesc simultan mai multe
substane toxice avnd un efect sinergic de tip aditiv, i unde aprecierea
riscului i msurilor de protecia muncii necesare se face avnd n vedere
aciunea combinat a acestora.
Se consider c au un efect sinergic de tip aditiv substanele toxice
care au ca int a agresisivitaii lor acelai organ sau sistem al organismului,
15
ori care au acelai mecanism de aciune. n aceste locuri de munc,

aprecierea riscului, respectiv a nivelului noxelor n aer n raport cu
concentraiile admisibile, se va face aplicnd urmatoarea formula:
C1
+ _ C2 __
CMA1
CMA2
+ + __Cn_ = 1
CMAn
C1,C2..Cn = concentraiile gsite n aer pentru fiecare nox

CMA1, CMA2CMAn = concentraiile maxime admise pentru probele
respective
Dac suma este <1 - amestecul de toxice profesionale din aer nu
depete concentraia admisibil.
Dac suma este >1 - amestecul de toxice profesionale din aer
depete concentraia admisibil, chiar dac pentru fiecare toxic
concentraia admisibil nu este depit.
III. EVALUAREA BIOTOXICOLOGIC A PERSONALULUI

EXPUS PROFESIONAL LA AGENI CHIMICI
Sntatea ocupaional necesit o cercetare multidisciplinar pentru
prevenirea afecturii sntaii care poate rezulta n urma unei expuneri
excesive, acute sau cronice la ageni chimici. Detectarea timpurie a
expunerilor duntoare poate scdea semnificativ apariia unor efecte
adverse prin reducerea nivelului de expunere i luarea unor msuri de
prevenie. Monitorizarea expunerii este un procedeu care const n
evaluarea de rutin i interpretarea parametrilor biologici i/sau ambientali
n scopul detectrii riscurilor posibile pentru sntate. Acest mod de
abordare necesit:
a.
definirea nivelelor limit de expunere, nivele care n acord cu
actualele cunotine sunt estimate s nu cauzeze efecte adverse n
timpul vieii muncitorilor;
b.
aprecierea obinuit a posibilelor riscuri pentru sntate
asociate cu expunerea prin compararea expunerii crescute sau
integrate cu aceste limite de expunere permise.
16
Monitorizarea biologic a expunerii este de obicei rezervat pentru

agenii chimici care ptrund n organism i exercit efecte sistemice. Foarte
puine teste biologice au fost propuse pentru identificarea sau
monitorizarea chimicalelor prezente la interfaa dintre mediu si organism
(piele, mucoasa gastrointestinal sau mucoasa tractului respirator).
Exemple de astfel de teste ar fi analiza nichelului n mucoasa nazal sau
numrarea corpilor azbestozici n sput.
Pentru substanele active sistemic, monitorizarea expunerii reprezint
abordarea cea mai eficace pentru evaluarea riscului potenial pentru
sntate deoarece, un indicator biologic este n mod normal mai strns
legat de un efect sistemic dect orice masurtoare de mediu.
Monitorizarea biologica a expunerii integreaz absorbia chimic pe
toate cile (pulmonar, oral, cutanat) i din toate sursele (profesionale,
ambiental, alimentar etc.) lund n consideraie i factorii individuali care
pot influena ingestia sau absorbia substanelor chimice cum ar fi : sexul,
vrsta, activitatea fizic, etc.
Modul de aciune a substanelor toxice exogene asupra organismului uman
are trei faze:
a.
faza de expunere, cnd organismul intr n contact cu toxicul;
b.
faza toxicocinetic, aciunea organismului asupra substanei
toxice. Aceast faz conine: absorbia, ditribuia, depozitarea sau
acumularea, biotransformarea sau metabolizarea i eliminarea
substanei din organism;
c.
faza toxicodinamic, aciunea organismului asupra noxei ce
cuprinde fenomenele care au loc n organism la diferite nivele,
conducnd, n final, la efectul toxic.
III.1.Ptrunderea substanelor toxice n organism

Principalele ci de ptrundere a substanelor toxice n organism sunt:
- calea respiratorie;
- alte ci transmucoase;
- calea cutanat;
- calea digestiv;
- calea placentar;
- calea mamar.
17
Acestea sunt ci de ptrundere indirecte sau mediate. n afara acestor ci

mai sunt i cile de ptrundere directe (imediate sau parenterale) care
asigur ptrunderea substanei n esut printr-un mijloc mecanic, cum ar fi:
calea intravenoas,
- calea subcutanat,
- calea intramuscular,
- calea intradermic,
i sunt utilizate n toxicologia industrial n experimentele pe animale de
laborator.
n mediul industrial principala cale de ptrundere a substanelor toxice n
organism este calea respiratorie (80 90 % din intoxicaiile profesionale se
produc pe aceast cale), apoi transcutanat i gastrointestinal.
Ptrunderea substanelor din mediul exterior n interiorul
organismului presupune traversarea uneia sau mai multor membrane
biologice nainte de a ajunge la centri activi.
Traversarea membranelor este condiionat de mai muli factori:
- natura chimic i organizarea moleculelor din compoziia
membranei;
- proprietai fizico-chimici ale substanei toxice;
- structura fizico-chimic a moleculelor mediului de o parte i
de cealalt a membranei.
Traversarea membranelor se poate face prin difuziune simpl (pasiva) sau
prin transport activ.
Difuziunea simpl este caracteristic substanelor organice nencarcate
electric. Singura barier n traversarea unei membrane o constituie stratul
lipidic membranar. Substanele cu coeficient mare de repartiie lipide/ap
difuzeaz cel mai rapid.
Prin difuziune simpl traverseaz membranele compui gazoi i volatili cu
greutate moleculara mica (halogeni i derivaii lor, HCH, CS2, CO, CO2 , etc),
compui organici volatili (hidrocarburi, alcooli i fenoli, hidrocarburi
alifatice clorurate, glicoli, nitro i aminoderivati, etc.) acizi organici (acid
oxalic, acid salicilic, etc.).
Transportul activ este caracteristic ionilor minerali pentru care
membranele biologice sunt slab permeabile.
Principalele substane care traverseaza prin acest mecanism sunt: As, Sb,
Hg, Pb, Cr, Cd, floruri i fluorosilicai, azotai, etc.) .
18
Att ftul ct i copilul mic nu au sistemul enzimatic bine format astfel

nct sunt foarte vulnerabili la aciunea unor substane chimice din mediul
de munc.
a)
Ptrunderea substanelor pe cale respiratorie
Ptrunderea noxelor profesionale prin arborele traheo-bronic
alveolar are o mare importan deoarece legtura ntre mediul extern i
snge se face direct, iar suprafaa alveolar este foarte mare ceea ce i
confer o mare capacitate de absorbie pentru substane gazoase i lichide
cu tensiune de vapori mare, ca i pentru particulele fine, lichide i solide
aflate n suspensie stabile n aer (aerosoli, aeroemulsii sau ceaa, fumuri,
etc.).
Deosebit de activi sunt aerosoli metalici care n aceast stare sunt ncrcai
electric, nct se menin n aer pna ce ajung la nivel alveolar, sarcinile
electrice i mpiedic s se aglomereze i astfel s fie reinui n cile
aeriene superioare, ceea ce le-ar micora toxicitatea.
Gazele i vaporii ptruni n tractul respirator se comport diferit n funcie
de solubilitatea i reactivitatea lor chimic. Astfel, gazele solubile n ap se
dizolv i acioneaz doar la nivelul cilor respiratorii superioare.
Gazele i vaporii mai putin solubili ajung la nivelul alveolelor pulmonare
unde se manifest aciunea lor toxic.
Gazele i vaporii liposolubili traverseaz bariera alveolo-capilar i
absorbia lor n snge depinde de solubilitatea lor n snge, debitul
sanguin, rata metabolizrii i ventilaiei.
Substanele au solubilitate mic n snge se elimin n procent mare tot
prin respiraie
b)
Ptrunderea substanelor pe cale cutanat
Transcutanat se absorb n special solvenii organici i
pesticidele.Cnd o substana chimic ajunge n contact cu pielea, pot exist
patru aciuni:
pielea i stratul de grsime i transpiraie care o acoper, se pot
comporta ca o barier efectiv prin care substana nu poate ptrunde;
substana poate reaciona cu suprafaa pielii producnd iritaii (acizii,
alcalii, solveni organici);
substana poate ptrunde prin piele i poate cauza sensibilizri
(aldehida formic, nichelul, anhidrida ftalic, etc.);
19
agentul chimic poate ptrunde prin piele i trecnd n snge i

execit aciunea toxic asupra organismului (aniline, parathion, tetraetil de
plumb).
Doar un mic numr de substane sunt absorbite prin piele n cantiti de
risc.
Pentru a ptrunde prin piele, substana trebuie s urmeze unul sau mai
multe din urmatoarele trasee: celulele epidermale, glandele sebacee,
glandele sudoripare, feliculii piloi.
Calea prin celulele epidermale i stratul cornean de dedesubtul
acestora, pna n snge, este probabil calea principal de penetraie
deoarece acest esut constituie cea mai mare parte din suprafaa pielii.
Absobia este mai rapid prin pielea zgriat sau inflamat, de aceea
substanele chimice care n mod normal nu sunt considerate riscuri pot fi
periculoase pentru indivizii suferind de dermatoze inflamatorii active.
c)
Ptrunderea substanelor pe cale gastrointestinal
Calea gastrointestinal este mai puin important n condiiile
expunerii profesionale, deoarece cantitatea de toxic ptruns pe aceast
cale, este n general mic i de asemenea legtura cu circulaia sanguin se
face prin intermediul ficatului care este principalul organ detoxifiant al
organismului.
Aceasta cale de ptrundere a substanelor toxice din mediul de munc este
determinat n principal de o igien individual inadecvat (miini murdare,
alimente contaminate cu substane chimice).
d)
Ptrunderea substanelor pe cale transplacentar i pe cea mamar
Placenta constituie bariera prin care au loc schimburile ntre
circulaiile sanguine materne i fetale.Prin placent pot trece gaze i vapori
volatili (alcooli, chloroform, eter), substane hidro-solubile (Hg, Pb) i unele
substane hidrosolubile ( benzene, eter).
Pe cale mamar prin secreia lactate pot trece i unele substane
chimice la copilul alptat la sn.
Att ftul ct i copilul mic nu au sistemul enzimatic bine format
astfel nct sunt foarte vulnerabili la aciunea unor substane chimice din
mediul de munc.

20
e)
Ptrunderea substanelor pe alte ci indirecte

Alte ci transmucoase prin care pot ptrunde n organism substane
toxice sunt conjunctiva, mucoasa bucala i mucoasa rinofaringian. Aceste
ci sunt rar ntlnite n expunerile profesionale.
III.2.Fixarea, distribuia i depozitarea toxicelor profesionale

Dupa absorbie, adic dup ptrunderea n snge sau n limfa
circulant , substana exogen rmne un timp scurt n aceast faz, fie
sub form liber (dizolvat n lichidul plasmatic), fie fixate pe hematii sau
legate de proteinele plasmatice.
Capacitatea de fixare pe proteinele sanguine variaz cu natura
substanei i cu specia animal. Spre deosebire de receptori, care fixeaz
numai substana cu o anumit structur, proteinele plasmatice sunt
capabile s fixeze molecule mici cu structuri foarte variate, deci fenomenul
nu este specific. Fixarea se realizeaz prin diferite tipuri de fore
intermoleculare, n funcie de distana, caracteristicile situsurilor de fixare
de pe macromolecula proteic.
Astfel, unele metale (de exemplu Pb) se fixeaz, sub form de
pulberi, vapori sau compui anorganici, pe eritrocitele n proporie de 90 %.
Numeroase medicamente i substane toxice se leag de proteinele
plasmatice: benzene, toluene, clorura de etil, barbiturice, unele antibiotice,
etc. ceea ce ntrzie biotransformarea i deci eliminarea acestora din
organism.
Distribuia reprezint transportul sau transferul substanei din snge
n esuturi i organe sau n alte lichide de distribuie.Unele substane
difuzeaz uniform n toate esuturile (de exemplu alcoolul etilic).
Majoritatea se distribuie nsa efectiv n anumite esuturi datorit faptului
c permeabilitatea membranei celulare din diferitele esuturi nu este
aceeai pentru toate substanele. De aici decurge o repartiie neuniform a
aceleiai substane n esuturi diferite: iodul se acumuleaz selectiv n
glanda tiroid, zincul n oase etc.
Depozitarea poate avea loc n:
esut adipos n cazul solvenilor organici, pesticide,
organoclorurate, nitroderivai etc.;
esut osos: Pb, Sc, Ba, Ca, F, P;
21
celulele sistemului reticulo-endotelial joac rol n fagocitoz i

pinocitoz, nglobnd particule mari, ca virusuri, bacterii, particule
coloidale etc.
proteine tisulare se formeaz compleci cu constituienii diferitelor
parenchime, apoi acetia se disociaz lent, ca urmare a metabolismului
proteic.
o
fanere arsen, seleniu
o
piele aur , argint
o
lichidele necirculante normale ( lichid cefalorahidian) i patologice
(lichid pleural sau ascetic) pot depozita unele substane exogene.
III.3. Biotransformarea toxicelor profesionale

Biotransformarea sau metabolizarea substanelor exogene
reprezint conversia enzimatic a acestora n metabolii mai polari, mai
uor excretabili (pentru ca strabtnd mai greu barierele lipoidice,
reabsobia tubular este mai redus) i de obicei mai puin toxici.
Compuii exogeni sunt acei compui care ptruni n organism nu
sunt utilizai pentru producerea de energie sau elaborarea componenilor
tisulari: n general ei sunt strini cilor metabolice normale ale
organismului.
Organismul animal are posibilitatea de a metaboliza majoritatea
structurilor chimice cunoscute. Dintre compusii exogeni, doar dou
categorii de substane nu sufer metabolizare i sunt eliminate ca atare.
Acetia sunt:
compuii puternic polari ( acizii i bazele tari)
unii compui nepolari cum ar fi eterul etilic, dieldrin, etc.
Metabolizarea substanelor toxice are loc de obicei n doua faze.
Dupa Williams aceste transferri s-ar prezenta astfel:
un compus A (biologic active sau inactive) este transformat prin
reacii de oxidare, reducere sau hidroliz ntr-un compus, care fie este
ultractiv B, fie este inactive B.
n faza II, compuii A,B,B pot trece ntr-un compus C, inactive, n
general rezultatul unei sinteze. Exemplificarea acestor transformri este
prezentat n figura urmtoare:
22
Fig. 1. Metabolismul calitativ (dupa Williamas)
Reaciile din faza I de metabolizare sunt reacii de oscilare reducere

sau hidroliz prin care se introduc n molecula grupri reactive, cu
polaritate crescut: -OH; -COOH,-SH, -NH2.
Cea mai des ntlnit reacie din faza I de metabolizare este cea de
oxidare. Totui pot fi ntlnite i celelalte tipuri de reacii deoarece
substanele exogene sufer biotransformri multiple, dintre care una este
calea principal, iar celelalte ci secundare.
Reaciile din faza I sunt prezentate n tabelele de mai jos:
REACII DE OXIDARE
REACIA
hidroxilarea catenei alifatice
hidroxilarea aromatic
N-oxidarea
S-oxidarea
O-dezalchilarea
N-dezalchilarea
S-dezalchilarea
dezaminarea oxidative
EXEMPLE
toluen acid hipuric
benzenul fenoli
Trimetilamina trimetilamino-N-oxid
Clorpromazina
codeine morfina
etilamina aniline acetaldehida
metiltipurina- tiopurina
benzilamina-benzaldehida-amoniac

23
REACIA
Desulfurarea
Epoxidarea
EXEMPLE
parationul-paraoxonul
aldrinul dieldrinul
nicotina-acid gamma(3piridil)-gamma-metiloxidarea cu deschiderea ciclului
aminobutiric
REACII DE REDUCERE
Aldehide alcool primar
Cetone alcool secundar
Saturarea dublei legaturi
Nitroderivat
nitrozoderivathidroxilaminaamina
Azoderivat hidrazoderivat amina
Acid hidroxaminic amida
Disulfura sulfhidrol
As+5 As+3
R-CHO-R-CH2OH
R-CO-R-R-CHOH-R
R-CH=CH-R-R-CH2-CH2-R
R-NO2-R-NO-R-NHOH-R-NH2
R-N=N-R-R-NH-NH-R-R-NH2+RNH2
R-CO-NHOH-R-CO- NH2
R-S-S-R-R-SH+R-SH
R-AsO(OH)2 R-As=O
REACII DE HIDROLIZ
Reacia
Formul general
Exemple
Dezesterificare R-COO-R-R-COOH=R-OH
atropine acid atropic + tropanol
Dezaminare
R-CONH-R-R-COOH+R-NH2 lidocaina-etilenglicocol + xilina
Sediul metabolizrii poate fi, n principal, orice organ sau esut nsa,
sediul principal este ficatul. Sediul metabolizarii nu corespunde
ntotdeauna cu sediul principal al aciunii toxice. Astfel:
metanolul se metabolizeaz n principal n ficat, dar efectul toxic se
manifest la nivelul retinei, SNC sau rinichiului.
naftilamina se hidrolizeaz n ficat, dar efectul cancerigen apare la
nivelul vezicii urinare;
tetraetilul de plumb se metabolizeaz la trietil de plumb n ficat, dar
acest metabolit este n principal toxic pentru SNC.
Reacia de metabolizare a substanelor exogene sunt catalizate de enzime.
Astfel de enzime ce controleaz reaciile din faza I de metabolizare sunt:
24
oxidaze sau hidrolaze (introduce gruparea OH n ciclurile aromatice

sau catene alifatice);
aminooxidaze (dezamineaz oxidative i nlocuiesc gruparea NH2 cu
cetona sau acid);
N-metil sau O-metiltransferaze (favorizeaz ndeprtarea radicalilor);
decarboxilare (elimin CO2 din acizii organici);
reductaze (reduce gruparea nitro);
esteraze (hidrolizeaz esterii).
Efectele metabolizrii din faza I sunt importante din punct de vedere
toxicologic,
deoarece:
metaboliii sunt mai polari, dar nu n mod obligatoriu i mai puin
toxici de aceea termenul de biotransformare nu este sinonim cu
detoxifiere;
apariia unor metabolii mai toxici explic faptul c unele substane
exogene sunt inactive in vitro, dar active in vivo;
apariia metaboliilor cu activitate diferit de a compusului initial;
activarea sau inhibarea enzimelor microsomale sub aciunea
xenobioticelor administrate concomitent sau anterior, d natere la
fenomenul de inducie respectiv inhibiie enzimatic.
La unele substane chimice prin reaciile din faza I , li se reduce toxicitatea.
Astfel,
toxicitatea benzenului pentru mduva hematoformatoare este suprimat
prin hidroxilarea inelului aromatic (fenolul si polifenolii ce se formeaz au
o toxicitate redus pentru mduva hematoformatoare).
Benz(a) pirenul (substana potential cancerigen) este transformat
prin hidroxilarea inelului aromatic 3 hidroxipiren respectiv 6 hidroxipiren
care nu sunt cancerigene.
La alte substane, metaboliii rezultai din faza I de metabolizare sunt
mai toxici dect substanele iniiale.
Pb-tetraetilul nu are aciune asupra SNC, dar metabolitul sau Pbtrietil rezultat prin dezetilare oxidativ, produce encefalopatia toxica. n
cazul compuilor amino i nitro aromatici , aciunea methemoglobinizant
este datorat metaboliilor formai prin oxidarea compuilor amino sau
prin reducerea compuilor nitro, metabolite identici pentru ambele
categorii (cel mai important fiind aminofenolul).
25
n faza a II-a de metabolizare, gruprile reactive preexistente sau

formate n faza I-a se combin cu un compus endogen realizndu-se o
conjugare sau sintez.Reaciile de conjugare sunt prezentate n tabelul
urmator.
Principala reacie de conjugare este glucuronoconjugarea probabil
datorit faptului c agentul de conjugare, nucleotidul i enzimele implicate
sunt prezentate n majoritatea esuturilor i de asemenea din cauza
varietaii grupelor pe care acidul glucuronic le poate transfera.
Sulfoconjugarea are loc de obicei, n paralel cu glucuronoconjugarea.
Gruparea sulfat provine din tioaminoacizi (metionina, cisteina) i numai n
mic masur din sulfat mineral.
Acetilarea este conjugarea specific compuilor cu grupri aminice.
Radicalul acetil poate proveni din oxidarea fiziologic a alcoolilor sau
acizilor alifatici i este activat de coenzima A si tiamina, nainte de
conjugare.
Glicocoloconjugarea are rol de a bloca gruprile COOH legate la un
nucleu aromatic fie direct fie prin intermediul unei catene laterale.
Glucuronoconjugarea este ntlnit numai n cteva cazuri . metilarea
este procesul biologic normal al gruprilor NH2. gruparea metil este dat
de bazele xantinice, betaina, colina, metionina, etc.
n general metabolizarea substanelor exogene are loc n 2 faze aa
cum se ntmpl n cazul benzenului care n prima faz este oxidat la fenoli,
iar n a doua faz acetia sunt conjugai cu acid glucuronic sau un radical
sulfat.
Dac compusul exogen posed una din grupele reactive, poate fi
conjugat direct far transformri prealabile prin reacii care caracterizeaz
faza I de metabolizare. Astfel fenolul este direct conjugat cu radical sulfat
sau cu acid glucuronic, radicalul cian (din acid cianhidric sau cianuri) este
conjugat direct la tiocianat netoxic.
Unii compui chimici pot fi metabolizai n ntregime prin reaciile
fazei I de metabolizare pentru c produi de transformare nu sufer
conjugare din cauza propritailor lor fizico-chimice. Alcoolul etilic este
metabolizat prin reacii ale fazei I la CO2. acidul acetic care se formeaz ca
intermediari n oxidarea alcoolului, posed grupa COOH care ar putea fi
conjugat, dar aceast reacie nu are loc probabil din cauza rapiditaii cu
26
care acidul acetic se metabolizeaz la CO2 prin intermediul acetilcoenzimei

A.

27
III.4. Eliminarea in organism

Eliminarea reprezint ndeprtarea din snge, limf, lichid
interstiial, celule, esuturi, a substanelor toxice i/sau a metaboliilor
polari i ionizai.
Calea, viteza, durata i gradul eliminrii depind de factori fizicochimici i biologici. Oricum, nocivitatea unei substane toxice este cu att
mai mare cu ct eliminarea sa este mai lenta.
Cile principale de eliminare sunt: renal, digestiv, pulmonar,
transcutanat.
Calea renal este principala cale de eliminare a substanelor toxice
i hidrosolubile din organism, eliminndu-se n general, cele cu mas
moleculara pna la 400. Excreia renal se realizeaz prin : filtrare
glomerular, reabsorbie tubular i secreie tubular.
Viteza eliminrii urinare depinde de:
debitul urinar care, la rndul sau, este dependent de parametri
interni i externi;
viteza de fixare pe proteinele plasmatice (cu ct substana toxic
este legata ntr-un procent mai mare, cu ct se elimin mai lent;
pH-ul urinar o parte din substana toxic sau din metabolitul ei
filtrate glomerular, se poate reabsorbi tubular. Compuii cu molecule
puin disociat se elimin n funcie de pH-ul urinei tubulare, astfgel pH-ul
alcalin favorizeaz eliminarea substanelor acide n forma ionizant, iar
pH-ul acid favorizeaz eliminarea substanelor bazice. Electroliii tari se
elimina rapid, indiferent de pH-ul urinar, deoarece ei sunt complet
disociai.
activitatea sau inhibarea enzimatic poate modifica ritmul normal
al eliminarii urinare;
vrsta, integritatea funciei renale, afectarea funciei renale poate
cauza reducerea cantitii eliminate i n consecina devine un factor de
toxicitate.
Calea digestiv (sucurile digestive i bila) este caracteristica pentru
compuii insolubili sau, puin solubili cu mase moleculare de 400 500.
Calea pulmonar este caracteristic pentru gaze i substane
volatile cu presiune mare de vapori la temperatura corporal, care
28
strbat prin membrane alveolocapilare i, ajungnd la alveole, sunt

evacuate prin expiraie.
Eliminarea respiratorie are loc att prin epiteliul alveolar, dar i
prin secreie bronic sau nazal.
Prin tegumente, fanere, glande sudoripare se elimina metale grele,
arsen, halogenuri i unele substane volatile.
III.5. Determinarea substanelor chimice sau a metaboliilor

acestora n fluidele corpului.
Majoritatea testelor accesibile pentru monitorizarea biologic a
expunerii la agenii chimici se bazeaz pe determinarea substanei sau a
metaboliilor si, n mediile biologice. n mod obinuit, materialele
biologice folosite pentru analiz sunt: urina, sngele i aerul alveolar.
Analize n alte materiale biologice cum ar fi : lapte, grsime, fir de
pr, fanere, placent se fac n general n scop de cercetare stiinific, nu
de monitorizare.
Urina este folosit n general pentru substanele anorganice (metale) sau
organice care sunt biotransformate rapid la compui mai hidrosolubili.
Cea mai simpla metod de exprimare a eliminarii unor compui n
urin este masa per unitatea de volum. Totui, concentraia urinei poate
fluctua datorit multor factori externi i interni care nu sunt datorai
expunerii. De aceea este necesar minimalizarea influenei acestor factori
care pot confunda interpretarea expunerii.
Cea mai uzual este raportarea la creatinin. Raportarea la
creatinin este atribuita pentru prima data lui Hill in 1953, care a utilizato n analiza anilinei n urin.
Creatinina poate fi utilizat cu succes la corectarea concentraiei
urinei atunci cnd substana este eliminat n principal prin filtrare renala
,nu se poate utiliza nsa la substanele care implic eliminarea pasiv i
absorbia, procese care sunt dependente de concentraie.
Muncitorilor crora li se recolteaz urina trebuie bine hidratai
cnd efectueaz aceast operaie. Dac debitul urinar scade sub
1ml/min, colectarea urinei trebuie repetat dup ce muncitorul a fost
mai bine hidratat.
29
La recoltarea probelor de urin, cele foarte diluate sau foarte

concentrate nu pot fi utilizate i este necesar o noua recoltare de probe.
Mecanismul eliminrii unor determinai poate fi alterat dac proba de
urin este foarte concentrat (greutate specifica > 1.03 si creatinina > 3
g/l ) sau foarte diluat ( greutate specific < 1.01 i creatinina < 0.5 g/l).
Metoda cea mai folosit pentru determinarea creatininei este
reactia Jaffe modificat (reacia cu acidul picric n mediu alcalin).
Sngele este folosit pentru unele din substanele anorganice i pentru
substanele organice care sufera biotransformare nceata.
Aerul alveolar este folosit pentru determinarea substanelor volatile.
III.6 Criterii de selectare a testelor biologice

Testele de msurare a substanei sau a metaboliilor ei n material
biologic pot fi clasificate n dou categorii:
a.
teste selective
b.
teste neselective
a.
Testele selective include majoritatea testelor folosite n mod
curent n medicina
ocupational. Substana nemodificat este masurat in mediul biologic n
urmatoarele situaii:
cnd substana nu sufer procesul de biotransformare (cazul
majoritaii substanelor anorganice)
cnd substana este puin metabolizat (de exemplu
metilcloroformul sau tetracloretilena);
cnd expunerea este prea mica pentru ca o cantitate semnificativ
de metabolit s fie produs (de exemplu expunerea uoar la benzene);
cnd se cere un grad mai mare de specificitate. Determinarea
substanelor chimice modificate poate avea o mai mare specificitate
dect aceea a unui metabolit care poate fi comun mai multor substane.
Majoritatea substanelor chimice organice sunt metabolizate rapid
la compui mai solubili i care sunt uor extractibili prin bil sau urin.
Msurarea concentraiilor metaboliilor urinari specifici este de obicei
mai uor acceptat de ctre muncitori comparativ cu recoltarea de
snge.
30
b.
Testele neselective sunt utilizate ca indicatori specifici de expunere
la un grup de substane. Astfel de teste neselective sunt prezentate n
continuare:
determinarea metabolitilor diazopozitivi n urin test propus
pentru monitorizarea expunerii la amine aromatice;
determinarea tioeterilor urinari excreia urinar de tioeteri este
crescut n urma expunerii la substane electrofile i de aceea a fost
propus pentru monitorizarea expunerii profesionale la substane
cancerigene sau mutagene. Determinarea tioeterilor poate fi aplicat cu
success n industria cauciucului i a anvelopelor radiale; la obinerea
asfaltului, la gazele de eapament de la motoare Diesel, n expunerea la
compui alchilclorurati, etc.;
determinarea activitaii mutagene a urinii - o activitate mutagen
ridicat a fost observat n urina muncitorilor din industria caucicucului,
cocserii,
muncitorilor expui la epiclorhidrina, anestezice i
medicamente citostatice. Ca i n cazul tioterilor urinari i n cazul
activitaii mutagene a urinii fumatul este un factor important n cresterea
acestei activitai.
Din cauza lipsei de specificitate i existena unei variabiliti
individuale largi, testele
neselective nu sunt deosebit de relevante pentru expunere individual,
totui, cnd se folosete un grup de control adecvat, ele pot fi utile
pentru identificarea grupelor de risc.
n practic numai cteva teste biologice pot fi folosite pentru
monitorizarea expunerii la chimicale industriale. nainte ca programul de
monitorizare biologic s fie implementat, parametrul (parametrii) cei
mai adecvai trebuie selectai prin luarea n consideraie a urmatoarelor
condiii:
specificitatea parametrului;
sensibilitatea parametrului trebuie s fie o corelaie puternic
ntre parametru i expunerea extern;
variabilitatea analitic i biologic a testului;
aplicabilitatea estului incluznd costul i disconfortul pentru
subieci.
Pe baza acestor consideraii, existenta unei valori limit biologic
este un element
31
important care trebuie luat n consideraie cnd se selecteaza testul de

monitorizare biologica a expuilor profesional.
III.7. Interpretarea rezultatelor

Rezultatele testelor de monitorizare biologic pot fi interpretate n mai
multe moduri:
1.
interpretarea pe baza individual; acest mod de interpretare este
posibil numai dac variabilitatea inter individual a parametrilor este
mica i specificitatea lui este mare;
2.
interpretarea pe baza de grup - n situaia n care toate valorile
observate sunt sub valoarea limitei biologice tolerabile, se poate
considera c exista condiii de munc satisfacatoare la locul de munc
investigat. Dac, toate sau majoritatea rezultatelor sunt peste valoarea
limitei, condiiile de expunere general trebuie sa fie corectate.
3.
Cea de a treia situaie este atunci cnd majoritatea personalului
expus poate s aib
valori sub nivelul de limit biologic, dar civa pot avea valori anormal
de mari. n aceast situaie pot fi doua interpretri:
a.
fie subiecii cu valori mari desfaoar activiti care-i expun la
nivele superioare de nox, n care caz se pot identifica categoriile de
meserii pentru care condiiile de munc trebuie mbuntite;
b.
fie muncitorii desfoar acelai tip de activiti cu cei care au
valori mai mici i n acest caz doza lor interna superioar poate rezulta
din deprinderi igienice diferite.
La interpretarea rezultatelor trebuie inut cont c metabolismul
xenobioticelor poate fi influenat de factori endogeni i exogeni. Factorii
endogeni pot fi genetici sau fiziologici cum ar fi vrsta, sexul i starea de
sntate . de exemplu, insuficiena hepatic poate fi asociat cu o
biotransformare sczut a xenobioticelor, n timp ce afeciunile renale
pot tulbura eliminarea acestor substane n urin.
Dintre factorii exogeni, un rol important n biotransformarea
substanelor chimice, o au alcoolul i fumatul.
Consumul de alcool a crescut n proporii considerabile n
numeroase ri, ceea ce a dus la multiplicarea problemelor legate de
acesta ca de exemplu: mortalitatea prin ciroz hepatic dependena de
32
alcool i o multitudine de alte efecte nefaste cum ar fi: accidentele,

criminalitatea, etc.
n ultimii 10 ani acest consum a rmas relativ stabil n cteva ri i
a diminuat n altele. Cu toate aceste variaiuni n tendina naional,
abuzul de alcool ridica probleme enorme sanitare, sociale i juridice n
numeroase ri din Europa i din lumea ntreag.
Alcoolul este o substana psihotrop considerat ca unul dintre cele
mai vechi droguri ale umanitii.Cu toate c este interzis consumarea
buturilor alcoolice la locul de munc, un consum rezonabil de bere sau
buturi cu un coninut sczut de alcool este totui tolerat.
n mod frecvent muncitorii sunt expui simultan la diferii ageni
chimici, biologici i psiho-sociali, la care se adaug n plus terapia
medicamentoas, tabagismul sau consumul de alcool, care pot influena
sensibilitatea individual la expuneri profesionale.
Alcoolul etilic este un agent narcotic, neurotoxic i hepatic care
poate influena toxicitatea unui numar mare de substane
chimice.Combinarea diferiilor factori exogeni, n mediul de munc sau n
afara lui, pot avea un efect diferit de cel provocat de fiecare dintre aceti
factori luati izolat.
n condiiile expunerii muncitorilor la diferite noxe chimice,
interaciunea acestora cu alcoolul consumat depinde de mai muli factori
cum ar fi:
- cantitatea de alcool consumat n relaie cu nivelul concentraiilor
noxelor din aerul zonelor de munc;
- perioada de timp a consmului de alcool n raport cu perioada expunerii
profesionale;
- alte elemente extraprofesionale (consum alimentar, fumat, starea de
sntate general precum i cea a unor organe int comune, sistemul
nervos central, ficat, rinichi, etc.).
Alcoolul etilic (etanolul) este absorbit n tractul gastrointestinal,
prin difuzie simpl. Absorbia alcoolului etilic este mai uoar la bere i
vin dect la buturile distilate.
Difuzia acestui alcool n toate celulele organismului este uoar,
datorit circulaiei sanguine. Astfel etanolul din snge ajunge uor i
rapid n esutul cerebral, ns distribuie mai greu n muchii striai.
Metabolizarea hepatic a etanolului parcurge trei etape:
33
etanolul este oxidat n prezenta alcooldehidrogenazei

sau catalazei la acetaldehida;
2.
acetaldehida este convertit la acetate n mitocondrii;
3.
acetatul produs n ficat este transferat n snge i oxidat n
esuturile periferice la dioxid de carbon, acizi grai i ap.
Consumul pe termen lung de etanol conduce la proliferarea reticulului
endoplasmatic cu
modificarea nivelului citocromului P450 de ctre etanol este asociat cu
modificarea metabolismului (creterea) i n unele cazuri cu toxicitatea
unor compui cum ar fi tetraclorura de carbon, aniline, etc.
n contrast cu aceasta etanolul inhib metabolismul unor
xenobiotice n vitro (stiren, benzen, toluen, benz(a)piren, etc.). Exist
doua posibiliti de explicare a acestui fenomen: competiia direct a
citocromului P450 sau descreterea cofactorului n sistemul
monooxigenaza.
Agenia International pentru cercetarea cancerului (IARC) dedic
n 1988 o monografie a consumului de alcool. Se menioneaz astfel c
pretratarea la animalul de laborator cu alcool etilic modific
metabolismul hepatic al unor ageni chimici ca de exemplu hidrocarburi,
alcooli, cetone, amine aromatice, etc.
Unele studii au evideniat c la persoanele expuse la tricloretilena,
consumul anterior de alcool etilic a dus la inhibarea cu 40 % a
metabolizrii tricloretilenei n acid tricloracetic i tricloretanol, iar
concentraia tricloretilenei n snge a fost de aproximativ 2,5 ori mai
mare dect n cazul n care nu s-a ingerat alcool. Aceast interaciune a
alcoolului n metabolizarea tricloretilenei poate explica intolerana la
alcool printre muncitorii expui profesional.
Consumul de alcool induce o forma de citocrom P450 care este luat
din enzimele microsomale. Aceast enzim P450, este caracterizat prin
marea sa afinitate pentru substanele cu mas molecular mica, inclusiv
solveni organici. Deci, consumul de alcool este unul dintre cei mai
importani factori extraprofesionali care afecteaz toxicitatea solvenilor
organici.
Consumul de alcool etilic stimuleaz i absorbia unor metale grele
(plumb, cadmiu, mangan) precum i depozitarea acestora n organele
34
bogate n grsimi i deci ntrzie eliminarea acestora din organism i

crete riscul de intoxicaie profesional.
n literatura de specialitate se arat c, ntre expunerea
profesional la ageni chimici i consumul de alcool exist trei diferene
majore.
1.
Dupa ngerarea unei cantiti de aproximativ 12 g alcool etilic,
concentraia acestuia n snge este de cca. 1000 de ori mai mare dect
concentraia substanelor chimice inhalate sau absorbite dermal n
timpul expunerii la noxe n limite admisibile.
2.
Etanolul este ingerat, iar chimicalele industriale sunt inhalate sau
ptrund prin piele. n consecin, primul efect asupra ficatului apare la
etanol, deci biodisponibilitatea etanolului pentru metabolismul hepatic
este mai mare dect cea a substanelor chimice.
3.
Metabolismul etanolului este mediat pe trei ci, dou dintre ele
fiind catalizate de enzime citozolice (alcool dehidrogenaza i catalaza) i
una prin enzime microzomale. Aceste enzime ns pot fi implicate i n
metabolismul altor substane chimice.
n concluzie, efectele combinate ale consumului de alcool etilic i
expunerea la noxe
chimice n mediul de munca, reprezint o problem de o importan
deosebit pentru factorii de decizie din unitaile economice.
Fumatul poate influena metabolizarea unor substane exogene
(de exemplu carboxihemoglobina ce se formeaz prin combinarea
oxidului de carbon cu hemoglobina este mult influenat de CO din fumul
de igar) eliminarea de tioeteri urinari este de asemenea crescut n
cazul persoanelor fumatoare.
Ali factori exogeni ce pot influena (modifica) metabolismul
xenobioticelor sunt dieta i medicamentaia.
III.8 Aspecte analitice i etice

n orice program de monitorizare, aspectul analitic este destul de
important. Parametrul selectiv pentru a fi determinat trebuie s fie
suficient de stabil pentru a permite transportul i posibilitatea stocrii
materialului biologic utilizat.
35
n final, trebuie luat n consideraie faptul c n monitorizarea

biologic, oameni sunt folosii ca un integrator de expunere. Aspectele
etice trebuie s primeasc o mare atenie. n particular, procedeul de
investigare trebuie s fie fr riscuri pentru sntate. O informare
corect trebuie fcut subiecilor nainte i dup monitorizare i
rezultatele individuale trebuie s ramn confideniale.
IV.METODE ANALITICE DE DETERMINARE A UNOR AGENI

CHIMICI N AERUL ZONELOR DE MUNC
IV.1. Determinarea metanolului prin GC
1.
Domeniul de aplicare:
Aceast metod se utilizeaz pentru determinarea vaporilor de metanol
prezeni n atmosfera locurilor de munc. Metoda se aplica att n cazul
prelevrii individuale a probelor de aer ct i n cazul determinrilor la
punct fix.
2.
Referine normative:
La elaborarea metodei s-a inut seama de prevederile cuprinse n :
o
NIOSH Manual ofAnalytical Methods, Fourth Edition, 8/15/94.
o
SR EN 1232: 2002 Atmosfera locului de munc Pompe pentru
prelevarea individual a agenilor chimici. Cerine i metode de
ncercare.
o
SR EN 1540: 2012 Atmosfera locului de munc Terminologie.
3.
Principiu: Metanolul se determin prin gazcromatografie.
Reactivi i materiale
o
Ap distilat
o
Metanol
o
Azot purificat
o
Hidrogen purificat
o
Aer fitrat
o
Fiole de sticla 2 mL,
o
Seringi 10 L capabile s citeasc la 0,1 L
o
Sticlarie volumetrica 10 mL.
36
4.
Aparatura
o
Echipament de prelevare
Pomp personal de aspirare, 0,02 la 0,2 L/min, cu un tub flexibil de
conectare.
Tub absorbant pentru recoltarea probelor, tub de sticla, 7 cm lungime, 4
mm diametrul interior coninnd 2 seciuni de 20/40 mesh gel siliciu
separate de o poriune de 2 mm de spum uretanic ( n fa 100 mg,
spate 50 mg). Un dop de vat de sticla sigilat precede partea din faa a
seciunii i un dop de 4 mm spum uretanic urmeaz n spatele
seciunii. (Nota: la umiditate relativa ridicat sau o concentraie ridicat
de metanol se utilizeaz un tub mai larg: 15 cm lungime, 8 mm diametrul
interior, cu trei seciuni de silicagel (700 mg, 150 mg).
o
Aparatura analitic
Gaz cromatograf echipat cu detector cu ionizare n flacara (FID),
integrator i coloana de sticl, 2m x 2 mm ID 60/80 mesh Tenax 6C sau
echivalent.Gaz purtator poate fi azot sau heliu 30 mL/min.
5.
Prelevare
o
Mod de prelevare
Se calibreaz fiecare pomp personal cu un dispozitiv de prelevare (tub
de sticla) n linie. Se rup capetele tubului de absorbie imediat naintea
utilizrii. Se ataeaz tubul de absorbie la pompa personal cu un tub
flexibil. Se recolteaz cu un debir cuprins ntre 0,02 si 0,2 L/min, volumul
minim recoltat fiind de 1 L iar cel maxim de 5L. Se pune capac cu dop de
plastic (nu cauciuc) i se mpacheteaz n sigurana pentru transport.
6.
Mod de lucru
o
Prepararea probei
Se plaseaz cele doua seciuni ale substanei absorbante din tubul de
absorbie din fa i din spate n fiole separate. Se arunc vata de sticl i
dopul de spum. Se adauga 1 mL apa distilat n fiecare fiola. Se acoper
fiecare recipient. Este permis s stea 4h cu agitare ocazional.
o
Calibrare i controlul calitii
Se calibreaz zilnic cu cel puin 6 standarde de lucru la o rat de 0,01 la 6
mg metanol/proba. Se adaug cantiti cunoscute de metanol n apa
distilat n recipiente volumertice de 10 mL i se dilueaz pn la semn.
Se analizeaz mpreun cu probele i blancuri. Se fac 2 pn la 10
blancuri per set. Se pregtete graficul de calibrare. Se determin
37
eficiena desorbiei (DE) cel puin odat pentru fiecare lot de silicagel
utilizat pentru recoltare n etapa de calibrare. Se prepar trei tuburi la
fiecare din cele 5 nivele plus 3 medii ale blancului. Se mut i se descarc
seciunea din spate a dispozitivului de luare a probelor pentru media
blancurilor. Se mut i se descarc seciunea din spate a dispozitivului de
luare a probelor pentru media blancurilor. Se injecteaz cantiti
cunoscute de metanol direct n seciunea din fa a absorbantului cu o
sering microlitic. Se pune capac la tuburi. Se permite s stea peste
noapte. Se desorb i se analizeaz mpreun cu standardele de lucru. Se
pregtete un grafic al DE n funcie de metanolul recuperat. Se
analizeaz 3 probe pentru controlul fondului i trei cu analit pentru a fi
siguri c graficul calibrrii i graficul DE sunt n parametrii.
o
Msurare
Se seteaz gazcromatograful n acord cu recomandrile productorului.
Se injecteaz un alicot al probei manual sau automat. (Nota: daca aria
pic-ului este deasupra domeniului liniar al standardului de lucru, se
dilueaz cu apa distilat, se reanalizeaz i se folosete un factor de
diluie potrivit pentru calcul.) Se masoar aria pic-ului.
o
Mod de calcul
Se determin masa, mg (corectata pentru DE) a metanolului n faa
probei (Wf) i n spatele (Wb) seciunii absorbantului i media blancurilor
(Bf) din faa i spatele (Bb) seciunii absorbantului. (Nota: dac Wb Wf/10
indic un punct de ruptur i sunt posibile pierderi de prob.)
7.
Exprimarea rezultatelor
o
Calcul
Se calculeaz concentraia, C, a metanolului n volumul de aer recoltat ,
V (L):
C=[(Wf + Wb - Bf - Bb) x 103] / V , mg/m3
o
Performante
Precizia metodei este de 0,032
o
Selectivitate
Nu au fost identificate interferene. Uneori pot fi necesare identificri
prin spectrometrie de mas.
o
Intervalul de lucru: este de 25 pn la 900 mg/m3 (19 la 690 ppm)
pentru 5L aer / proba.
38
Pentru concentraii mai mari de metanol sau pentru umiditate relativ

ridicat este cerut un tub de silicagel mai larg 700 mg seciunea frontal.
8.
Raport de analiz
Raportul de analiz trebuie s conin urmtoarele indicaii:
numele i adresa unitii unde s-au efectuat determinrile;
scopul efecturii determinrilor;
locul de munc ( descriere, condiii);
tipul de prelevare (individual sau la punct fix);
metoda de analiz utilizat;
tipul de pomp utilizat pentru prelevare;
caracteristicile metodei de prelevare ( debit, volum i timp);
momentul prelevrii probelor ( pe durata unui schimb de lucru);
rezultatele determinrilor efectuate ( mg analit/m3 aer);
numele analistului;
data recoltrii probelor;
data prelucrrii probelor.
9.
Bibliografie
Documentation of the NIOSH Validation Test, U.S. Department of
Health, Education, and Wefare, publ. (NIOSH) 77-185 (1977).
NIOSH Manual of Analytical Methods, V.2, S59, U.S. Department of
Health, Education, and Welfare, Publ. (NIOSH) 77-157-B (1983).
IV.2. Determinarea aerosolilor alcalini

1.
Domeniul de aplicare:
Aceast metod este folosit la determinarea aerosolilor alcalini din
aerul zonelor de munc. n aceast categorie se includ NaOH, KOH,
NH4OH, CaO, Ca(OH )2 , Na2CO3, K2CO3.Aerosolii alcalini existeni n aer
sunt exprimai n NaOH.
2.
Referine normative
La elaborarea acestei metode s-a inut cont de prevederile cuprinse n:
o
SRISO 5725-1-1997, Exactitatea (justeea i fidelitatea) metodelor
de msurare i a rezultatelor msurrilor.
39
o
Culegere de metode de investigare n domeniul Medicinii Muncii,
1991.
o
ncercare.
o
o
3.
Principiul metodei:
Soluia de acid sulfuric reacioneaz cu aerosolii din aer modificnd pHul. Observarea schimbrii pH-ului se face cu verde de bromcrezol cu
domeniul de viraj la pH=3,8-5,2. La reacia cu aerosolii alcalini, soluia de
acid sulfuric ce conine verde de brom crezol, i schimb culoarea de la
verde la albastru. Prin msurarea fotometric a extinciei soluiei nainte
i dup recoltare se poate determina cantitatea de aerosoli din aer.
4.
Reactivi i materiale:
o
Verde de bromcrezol, soluie 0,1% n alcool etilic 98%.
o
Acid sulfuric 0,1 N.
o
Soluie absorbant.ntr-un balon cotat de 1 litru se introduce ap
distilat lipsit de CO2 proaspat fiarta si racita, apoi 12 ml verde de
bromcrezol.Se aduce la semn, apoi se adauga acid sulfuric cu pictura
pn ce soluia devine galben-verde (pH=4).
Absorbia optic a acestei soluii la lungimea de und =617 nm trebuie
sa fie cuprins ntre 0,13-0,15.
o
Soluie etalon: Hidroxid de sodiu N/200 proaspt preparat ap
distilat fiart i rcit.
o
Sticlrie de laborator ( eprubete, baloane cotate, pipete gradate,
pipete automate reglabile)
i hrtie indicatoare de pH.
5.
Aparatura
o
Pompa de recoltare a probelor din aer (debit de recoltare = 1-5
L/min.Absorbitoare din sticla (pentru recoltarea vaporilor de aerosoli
alcalini se folosesc 10 ml.soluie absorbant ) destinate recoltrii
aerosolilor alcalini se spal nainte de ntrebuinare cu soluie absorbant
pn cnd aceasta nu-i mai modific culoarea (n mod asemntor se
procedeaz i cu dopurile de cauciuc cu care se etaneizeaz
40
absorbitoarele).Cordoane flexibile pentru conectarea absorbitorului la

pompa de recoltare (se folosesc doar cordoane din p.v.c.)
o
Aparatura analitica
Balana analitic
Spectrofotometru UV/VIS
Cuvete de sticl
6.
Prelevare
Pompa de recoltare se calibreaz naintea efecturii unui set de
determinri.Aerul de cercetat se aspir prin absorbitor, care conine 10
ml. soluie absorbant.Debitul de recoltare : 1L/min.
Volumul minim de aer se apreciaz n timpul recoltrii dup modificarea
culorii din verde n albastru.Volumul maxim de aer este de 20 L.Dup
recoltare, soluia absorbant se transvazeaz n eprubeta cu dop
splndu-se coninutul absorbitorului cu nc 1 ml. soluie absorbant.
Eprubetele bine nchise se vor transporta la laborator pentru analiz.
o
Pregtirea echipamentului de prelevare
Se monteaz absorbitorul la pompa de recoltare, prin intermediul
cordonului flexibil.Se fixeaz debitul i se pornete pompa; se verific
dac are loc barbotarea soluiei absorbante n absorbitor. Se las pompa
s funcioneze 1-3 min., pn la stabilizarea debitului. Se schimb
absorbitorul i se efectueaz recoltarea propriu-zis a probelor.
o
Prelevarea propriu-zisa
n cazul prelevrii individuale, se va ataa dispozitivul de prelevare la
nivelul respirabil al muncitorului.n cazul prelevrii la punct fix, se
poziioneaz absorbitorul la locul de munc unde
trebuie efectuat determinarea. Se pornete pompa i se noteaz timpul
de prelevare.
o
Transport
Se recomand ca eprubetele cu probe s fie transportate n poziie
vertical, etichetate i ferite de temperaturi extreme.Probele se vor lucra
n aceeai zi.
7.
Modul de lucru
Se msoar extincia la 617 nm n cuva de 1 cm. n compensaie cu
soluia absorbant.Se aspir din ncperea n care se citesc extinciile,
aceeai cantitate de aer, aceasta constituind proba martor.Valoarea
41
extinciei probei se raporteaz la curba etalon pentru a obine cantitatea

C n g NaOH.
Curba de etalonare se face ntre 4-16 g prin puncte din 4 n 4 g. n 5
cilindrii gradai cu
dop rodat de 25 ml. sau n eprubete gradate cu dop rodat, care se cltesc
cu soluie absorbant nainte de folosire se introduc urmtoarele
cantitai 0,02; 0,04; 0,06; 0,08 ml.soluie etalon. Se completeaz la 10 ml.
cu soluie absorbant i se citete absorbia la 617 nm n cuva de 1cm, n
compensaie cu soluia absorbant.
8.
o
Calcul
Rezultatele se exprim n mg NaOH/m3 aer i se calculeaz dup formula:
mg NaOH/m3 aer = C/V
C=cantitatea de NaOH n g din prob
V=volumul de aer recoltat (litri )
o
Limita de detecie i intervalul de lucru
Limita de detecie analitic este de 0,99g/prob.
Intervalul de lucru : 0-20 g
9.
Raport de analiz
Raportul de analiz trebuie s conin urmtoarele:
locul de munc (descriere, condiii );
tipul de prelevare (individual, la punct fix );
caracteristicile metodei de prelevare (debit, volum, timp );
momentul prelevrii probelor (pe durata unui schimb de lucru )
rezultatele determinrilor efectuate (mg NaOH/ m3 aer) ;
numele analistului;
Verificat n Laboratorul Toxicologie i Medicina Muncii CRSP
BUCURETI
42
IV.3. Determinarea acidului clorhidric

1.
Domeniul de aplicare
Acidul clorhidric se poate ntlni n aer sub form de gaz sau
aerosoli.Aceast metod se utilizeaz la determinarea acidului clorhidric
i a clorurilor din aerul zonelor de munc.
2.
Referine normative
La elaborarea metodei s-a inut seama de prevederile cuprinse n:
o
SRISO 5725-1-1997, Exactitatea ( justeea i fidelitatea) metodelor
de msurare i a rezultatelor msurrilor;
o
Caiet metodologic Metode de investigare n domeniul Medicinii
Muncii, 1987.
o
ncercare.
o
3.
Principiul metodei:
Ionul clor (Cl-) deplaseaz ionul SCN- din sulfocianura de mercur formnd
complexul slab
disociat ( HgCl )2-. Sulfocianul eliberat reacioneaz cu fierul trivalent
formnd sulfocianura feric de culoare roie, colorimetrabil. Reacia
este interferat de fluoruri i fosfai. n cazul prezenei acestora n aer,
naintea absorbitorului se monteaz un filtru pentru reinere.
4.
o
Hidroxid de sodiu soluie 0,01N;
o
Sulfocianura mercuric, soluie 0,3% n alcool metilic;
o
Alaun feriamoniacal - NH4Fe(SO4 )2 12 H2O - soluie 6% n acid
azotic 5N.
o
Soluie etalon. Se dizolv ntr-un balon cotat de 50 ml. 0,2046 g KCl
sau 0,1603 g NaCl
n ap distilat. 1ml din aceasta corespunde la 2 mg. HCl. Pentru lucru se
iau 2,5 ml. din aceast soluie i se dilueaz la 100 ml. cu ap distilat
(1ml. solutie = 50 g HCl ).
o
Sticlrie de laborator ( eprubete, baloane cotate, pahare Berzelius,
pipete gradate, sticle ceas, pahare Erlenmeyer, pipete automate ).
43
5.
Aparatura
o
Pompa de recoltare aprobelor de aer cu debit de recoltare de la 15L/min.
Absorbitoare din sticl
Cordoane flexibile pentru conectarea absorbitorului la pompa de
recoltare
o
Aparatura analitic
Balana analitic
Cuvete din sticl
6.
Prelevare
o
Mod de prelevare
determinri.Se aspir aerul de analizat cu un debit de 1L/min. printr-un
absorbitor ce conine 10 ml. soluie absorbant, volumul minim de aer
necesar este de 1 litru. Dup recoltare, soluia absorbant se
transvazeaz n eprubeta cu dop. Eprubetele bine nchise se vor
transporta la laborator pentru analiz.
o
Pregatirea echipamentului de prelevare
s funcioneze 1-3 minute, pn la stabilizarea debitului. Se schimb
o
Prelevarea propriu-zisa
poziioneaz absorbitorul la locul de munc unde trebuie efectuat
determinarea. Se pornete pompa i se noteaz timpul de prelevare,
pentru fiecare prob. Se verific periodic stabilitatea debitului.Pe lng
absorbitorul destinat recoltrii de probe se vor prevedea nc dou
absorbitoare cu soluie absorbant care se vor transporta n teren, fr a
se aspira aer prin ele i care vor constitui martorul de referin.
o
Transport
44

n aceeai zi.
7.
Modul de lucru
Coninutul absorbitorului se transvazeaz cantitativ intr-o eprubet
gradat de 20 ml. i se aduce la semn la 10 ml. cu soluie absorbant. Se
adaug 2,5 ml. soluie de sulfocianur mercuric,
2,5 ml soluie alaun
feriamoniacal, agitnd eprubeta dup adugarea fiecrui reactiv.Se
determin absorbia soluiei dupa 10min. la lungimea de und =470nm.
i o grosime de strat de 1 cm. prin comparare cu un martor.Calculul
concentraiei de HCl se face utiliznd curba de etalonare.
Curba de etalonare se ntocmete ntre 0-50 g. Lund n lucru
urmtoarele cantiti din soluia etalon de lucru 0,2 ; 0,4 ; 0,6 ; 0,8 ; 1ml.
Se completeaz volumul la 10 ml. cu NaOH soluie 0,01N , dup care se
procedeaz conform tehnicii indicate mai sus.
8.
o
Calcul
Concentraia de HCl n aer, C(mgHCl/m3aer) se calculeaz astfel:
mgHCl/m3= C/V
unde,
C= cantitatea de HCl din proba exprimat n g
V= volumul de aer recoltat exprimat n litri
o
Sensibilitatea metodei este de 1g/ml.
o
Selectivitate
o
Reacia este interferata de fluoruri i fosfati.
o
Limita de detecie : 2.67g/proba
Intervalul de lucru: 0-100 g HCl
9.
Raport de analiz
45

momentul prelevrii probelor (pe durata unui schimb de lucru );
rezultatele determinrilor efectuate (mg NaOH/ m3 aer ;
numele analistului;
data prelucrrii probelor
BUCURETI
IV.4. Determinarea acidului sulfuric i a sulfailor solubili

1.
Aceast metod se refer la determinarea acidului sulfuric i a sulfailor
solubili din aerul zonelor de munc.Acidul sulfuric i sulfaii solubili se pot
ntlni n aer sub form de aerosoli.
2.
Referine normative
o
SRISO 5725-1-1997, Exactitatea ( justeea i fidelitatea ) metodelor
de msurare i a rezultatelor msurrilor;
o
Caiet metodologic- Metode de investigare n domeniul Medicinii
Muncii, 1987.
o
ncercare.
o
3.
Principiul metodei
Ionul sulfat formeaz cu azotatul de plumb un precipitat fin de PbSO4
nefelometrabil.
4.
o
Hidroxid de sodiu, soluie 0,01N sau ap distilat
46
o
Acid azotic soluie 1N
o
Alcool etilic 96%
o
Soluie etalon stoc : se cntresc la balana analitic 1,4800 g sulfat
de sodium anhidru
(sau 1,815 g sulfat de potasiu anhidru ) i se dizolv n ap completnd cu
ap distilat pn la 1000ml. 1 ml. soluie conine 1mg. ioni sulfat i
corespunde la 1,021 mg. acid sulfuric.
Soluia etalon de lucru : 10ml. din soluia etalon stoc se dilueaz la
100ml. cu ap distilat. 1ml. din aceast soluie conine 100g ioni sulfat
i corespunde la 102,1g acid sulfuric.
o
Azotat de plumb, soluie 10%.
o
Sticlrie de laborator ( eprubete, baloane cotate, pahare Berzelius,
pipete gradate, sticle ceas, pahare Erlenmeyer, pipete automate ).
5.
Aparatura
o
Pompa de recoltare a probelor de aer ( D=1-5L/min.);
Absorbitoare din sticla ( pentru recoltarea aerosolilor de H2SO4 se
folosesc 10 ml. soluie NaOH 0,01N
Cordoane flexibile pentru conectarea absorbitorului la pompa de
recoltare.
o
Aparatura analitic
Balana analitic
Cuvete de sticl
6.
Prelevare
o
Mod de prelevare
determinri. Probele de aer se vor preleva cu un debit de 2L/min. printrun absorbitor ce conine 10 ml. soluie NaOH 0,01N . Volumul de aer
necesar recoltrii pentru o prob este de minim 40 litri.Dup recoltare,
soluia absorbant se transvazeaz n eprubeta cu dop, splndu-se
coninutul absorbitorilui cu nca 1ml. soluie absorbant.Eprubetele bine
nchise se vor transporta la laborator pentru analiz.
o
47

s funcioneze 1-3 minute, pn la stabilizarea debitului. Se schimb
o
Prelevarea propriu-zis
poziioneaz absorbitorul la locul de munc unde trebuie efectuat
determinarea. Se pornete pompa i se noteaz timpul de prelevare,
pentru fiecare prob. Se verific periodic stabilitatea debitului.
Pe lng absorbitoarele destinate recoltrii de probe se vor prevedea
nc dou absorbitoare cu NaOH care se vor transporta n teren fr a se
aspira aer prin ele i care vor constitui martorul de referin.
o
Transport
n aceeai zi.
7.
Modul de lucru
Din absorbitor se iau 5 ml. soluie (1/2 din proba ) ntr-o eprubet. Se
adaug apoi cate 0,1 ml. HNO3 1N , cte 0,1ml. azotat de plumb 10% i
dup ce se agit bine coninutul eprubetei, cte 1ml.alcool etilic 96% .
Eprubetele se agit din nou.n mod asemntor se vor prelucra i probele
martor.
Dup 10min. probele pot fi citite la lungimea de unda =420nm, n cuva
de 1cm., sau se compar turbiditatea probelor cu scara de standarde pe
un fond negru.
Atentie: nainte de citire fiecare prob se va amesteca prin rsturnare de
3 ori.
Curba de standarde se face ntre 20-100g.H2SO4 prin puncte din 20 n
20g , n condiiile descrise mai sus.Se obine astfel cantitatea C n g
SO42- n proba dozat.
8.
o
Calcul
Exprimarea rezultatelor se face n mg/m3 aer.

48
mg SO42- /m3 aer=C/V

unde,
V= volumul de aer recoltat n litri
C= cantitatea de SO42- din proba, exprimata n g.
Deoarece pentru dozare s-a luat un alicot de 1/2 din prob, rezultatul se
va nmuli cu 2.Pentru exprimare n mg H2SO4 se nmulete rezultatul cu
1,021, unde:
1,021= factorul de transformare al SO42- n H2SO4.

o
Selectivitate
Metoda este specific ionului sulfat (SO42- ).Sensibilitatea metodei este
de 1g/ml.
o
Intervalul de lucru
Intervalul de lucru: 20-200 g H2SO4 /proba.
9.
Raport de analiz
momentul prelevrii probelor (pe durata unui schimb de lucru );
rezultatele determinrilor efectuate (mg NaOH/ m3 aer) ;
numele analistului;
BUCURETI

49
IV.5. Determinarea hidrocarburilor alifatice N hexan

1.
Domeniul de aplicare.
Metoda se utilizeaz pentru determinarea vaporilor de n-hexan
prezeni n atmosfera zonelor de munc.
2.
Referine normative
o
NIOSH Manualul de metode analitice
o
SR EN 1232: 2002 Atmosfera locului de munc Pompe
pentru prelevarea individual a agenilor chimici. Cerine i metode
de ncercare.
o
SR EN 1540: 2012 Atmosfera locului de munc
Terminologie.
3.
Principiu
N-hexan reinut pe carbune activ este desorbit n sulfura de carbon
dup care este determinat cromatografic.
4.
Reactivi.
o
eluent: sulfura de carbon de calitate cromatografic (sulfura
de carbon este toxic i foarte inflamabil, de aceea probele i
standardele se prepar n locuri bine ventilate)
o
reactiv grad analitic
o
azot sau heliu, purificat
o
hidrogen, prepurificat
o
aer filtrat
5.
Aparatura analitic i echipament de prelevare
o
gaz cromatograf cu detector de ionizare n flacar
o
tuburi de recoltare cu carbune activ (dou legate n serie)
o
pompa de recoltare personal cu debit ntre 0,01 i 0,2 l/min
o
sticlrie de laborator
6.
Mod de lucru
o
Calibrarea fiecrei pompe personale de recoltare
Spargerea capetelor tubului de recoltare chiar nainte de
recoltare; ataarea tubului respectiv la pompa personala de
recoltare cu un tub flexibil
Recoltarea probelor cu un debit de la 0,01 la 0,2 l/min
50
chiderea tuburilor i ambalarea lor asigurndu-se sigurana

transportului
o
Pregatirea probelor
Se plaseaz seciunile de absorbie din primul i cel de-al 2lea tub de recoltare flacoane separate
Se adaug 1,0 ml eluent n fiecare flacon
Se las minim 30 min. agitnd ocazional
o
Calibrarea i controlul calitii
Se calibreaz zilnic minim 6 standarde de lucru
a.
se adaug cantiti cunoscute de reactiv n eluent n baloane
de 10 ml i se dilueaz la semn
b.
se analizeaz probele i blancurile (paii 6.10, 6.11, 6.12)
c.
se realizeaz graficul de calibrare (aria peak-ului reactivului
vs. mg reactiv/ prob)
Se determin eficiena desorbiei ( DE ) cel puin odat
pentru fiecare crbune utilizat la recoltare ( 6.8 ). Se prepar 3
tuburi la fiecare din cele cinci nivele i 3 blancuri medii
a.
se ndeprteaz seciunea de absorbie din al 2-lea tub
b.
se injecteaz o cantitate cunoscut de reactiv direct n
seciunea de absorbie din primul tub
c.
se nchide tubul. Se las s stea peste noapte.
d.
desorbie ( 6.5 si 6.7 ) i analizare mpreun cu standardele
de lucru ( 6.10, 6.11 i 6.12)
o
Citire la gaz cromatograf
Timp de retenie aproximativ:
5,1 min. la temperatura coloanei de 40 0C
2,2 min. la temperatura coloanei de 70 0C
3,5 la temperatura programata a coloanei
Injectarea manuala a alicotului prob
Msurarea ariei peak
7.
Determinarea masei, n mg (corectat pentru DE), a substanei din
seciunile de absorbie din primul tub (Wf) i al 2-lea tub (Wb) i
media blancurilor seciunilor de absorbie din primul tub (Bf ) i al
doilea tub (Bb)
o
Calcularea concentraiei C:
51
C=(Wf + Wb Bf Bb) x 10 / V, mg/m

unde,
V este volumul de aer recoltat (l)
8.
Performana metodei
Interval de msurare : 3 - 16 mg cu o precizie de 0,014
9.
Bibliografie
NIOSH, Manual of Analytical Methods, 4. Ed. , V.3., S 311

,S343, S 378, S 379, U.S. Dept. of Health , Education and Welfare,
Publ. (NIOSH) 77-157-C (1994)
Code of Federal Regulations; Title 29 (Labor), Parts 1900 to

1910; U.s.Government Printing Office, Washington, (1989); 29 CFR
1910.1000
NIOSH Recommendation for Occupational Safety and Health,

US Department of Health and Human Services, DHHS (NIOSH)
Publication No. 92-100 (1982)
Threshold Limit Values for Chemical Substances and Physical

Agents and Biological Exposure Indices. ACGIH, Cincinnati, OH
(2001)
IV.6.Determinarea aeroemulsiilor de uleiuri minerale

1.
Aceast metod se utilizeaz pentru determinarea ceei ( aeroemulsiilor)
de ulei mineral
prezent n atmosfera zonelor de munc. Metoda se aplic att n cazul
prelevrii individuale a probei de aer ct i n cazul determinrilor la punct
fix.
2.
Referine normative
La elaborarea metodei s-a inut seama de prevederile cuprinse n :
o
STAS nr.2720/1988 Uleiuri minerale neaditivate pentru tratamente
termice;
o
STAS nr.11257/1979 - Uleiuri minerale hidraulice.
52
o
prelevarea individual a agenilor chimici. Cerine i metode de ncercare.
o
3.
Principii
Ceaa de ulei recoltat pe filtru din fibra de sticla, tip Whatman GF/A
urmat de desorbie n cloroform sau prelevare n 3ml de cloroform,
prezint un maxim de absorbie n UV la lungimea de und de 265nm.
4.
o
Cloroform p.a.
o
Soluie etalon stoc: se prepar o soluie de ulei mineral (trebuie
folosit exact uleiul cu care se lucreaz la locul de munc) cu o concentraie
de 1mg/ml, n cloroform.
o
Soluie etalon de lucru: pentru lucru se dilueaz cu cloroform soluia
stoc de 10 ori, pentru a obine un etalon cu o concentraie de 100g/ml.
o
Eprubete gradate (min 5,oo ml)
5.
Aparatura
o
Echipament de prelevare:
o
Pompa de recoltare a probelor de aer (debit 2-4 litri/min);
o
Cordoane flexibile pentru conectarea portfiltrelor la pompa de
recoltare.
o
Portfiltre speciale pentru recoltarea ceurilor de ulei
mineral,coninnd filtre din fibr de sticl,care se schimb la fiecare prob
de aer recoltat.
o
Aparatura analitic:
o
Balana analitic;
o
Spectrofotometru UV(maxim absorbie la 265nm).
o
Cuvete de sticl
6.
Prelevare
o
Mod de prelevare
determinri.
Se aspir aerul de cercetat cu un debit de 2litri/min,printr-un filtru de fibr
de sticl.Volumul minim de aer necesar este de 20 litri.
Cnd concentraia de ulei mineral n aerul zonei de munc analizate este
mare, atunci se folosesc absorbitoarele, pentru reinerea ceei .Se aspir
53
aerul de cercetat cu un debit de 0,2 litri/min, printr-un absorbitor ce

conine 3 ml cloroform.Volumul minim de aer necesar pentru o prob este
de 2 litri.
Dup recoltare, filtrele din fibra de sticl, pe care s-a absorbit uleiul
mineral,se introduc n cutiue de plastic, etane, unice pentru fiecare
prob.
o
Se monteaz portfiltrul la pompa de recoltare, prin intermediul cordonului
flexibil.Se fixeaz debitul i se pornete pompa; se verific funcionarea
acesteia i meninerea constant a debitului.
Se las pompa s funcioneze 1-3 minute, pn la stabilizarea debitului.
o
n cazul prelevrii individuale,se va ataa dispozitivul de prelevare la
centura sau buzunarul persoanei monitorizate.
n caul prelevrii la punct fix, se poziioneaz portfiltrul la locul de munc
unde se vor efectua determinrile.
Se pornete pompa i se noteaz timpul de prelevare, pentru fiecare
prob.Se verific periodic stabilitatea debitului.
n paralel, pe durata recoltrilor, se menin dou probe martor, fr a fi
conectate la pompa de recoltare.
o
Transport
Probele se transport etichetate.
7.
Mod de lucru
Se spal filtrul din fibra de sticla, cu cloroform, de 2-3 ori i cantitatea de
cloroform folosit se colecteaz ntr-o eprubet gradat ,aducndu-se la
5,oo ml cu cloroform.
De asemenea, se transvazeaz coninutul absorbitorului, ntr-o eprubet
gradat i se aduce la 5,ooml, n cazul recoltrii probelor de la locurile de
munc, unde exist concentraii mari de ulei mieral. Msurarea extinciei
probei se face utiliznd cloroformul ca blanc, la un spectrofotometru n UV,
la lungimea de und de 265 nm.n acelai mod se citesc i probele martor.
Calculul concentraiei se face utiliznd curba de etalonare.
Curba de etalonare se face ntre 100-500g ulei mineral, prin puncte din
100 n 100 g.Att n cazul soluiilor standard de lucru, ct i pentru blanc,
se va ine cont de volumul soluiei absorbante,respectiv 5,ooml.
Soluiile standard de lucru i blancul se prelucreaz la fel ca i probele.
54
8.
o
Calcul
Valorile extinciilor obinute, pentru probe se raporteaz la curba de
etalonare, spre a obine cantitateaC, n g ulei mineral, din proba dozat.
Concentraia de ulei mineral din proba dozat, se calculeaz,utiliznd
formula:
C= c / V
unde,
c = g ulei mineral din proba dozat;
V= volumul de aer recoltat,n litri.
Exprimarea rezultatelor se face n mg/mc aer.
o
Performane
Sensibilitatea metodei este de 20g/ml.
9.
Raport de analiz
Raportul de analiz trebuie s conin urmtoarelele indicaii:
numele i adresa unde s-au efectuat determinrile;
locul de munc (descriere,condiii);
tipul de prelevare (individual sau la punct fix);
caracteristicile metodei de prelevare (debit,volum,timp);
rezultatele determinrilor efectuate (mg/mc aer).
numele analistului;
data problelor.
10. Bibliografie
1.Detection precoce de laction aigue et on chronique des

nephrotoxiques industriele.Cahiers de medicine du Travail,vol.25,143153.(1988).
2.Guidelines for the Control of Exposure to Metalworking

Fluids,Publication Nr.78-165,NIOSH(1976).
Adaptat i verificat n Laboratorul Toxicologie i Medicina Muncii
CRSP BUCURETI

55
IV.7. Determinarea unor metale

1.
Prezenta procedur se aplic pentru efectuarea determinrii coninutului
total de metale a particulelor n suspensie fracia inhalabil, din
atmosfera locului de munc, prin spectrometrie de absorbie atomic (cu
atomizare n flacr sau n cuptor de grafit). Prelevarea se face prin
aspirarea unui volum cunoscut de aer printr-un substrat adecvat, de ex. un
filtru. Metoda nu se aplic pentru metale prezente ca gaze i vapori (de ex.
mercur, arsen). Este aplicabil procedurilor de msurare n care prelevarea
i analiza sunt realizate n etape separate. Procedura se aplic pentru
probe prelevate din zona de respiraie a lucrtorului cu pompe de
prelevare mobile, fixate de lucrtor, pentru msurtori periodice, pentru
compararea cu valorile limit pe termen lung i scurt. Prezenta procedur
descrie metoda de determinare pentru Cd, Cr, Fe, Mn, Ni i Pb. Metoda
poate fi validat n mod asemntor i pentru alte metale, innd cont de
datele specifice necesare pentru determinri cu spectrometrie de
absorbie atomic.
2.
Referine normative
o
SR EN ISO/CEI 17025: 2005 Cerine generale pentru competena
laboratoarelor de ncercri i etalonri
o
SR EN 481: 2003 Atmosfera locului de munc. Definiiile fraciilor
dimensionale pentru msurarea particulelor n suspensie din aer
o
SR EN 482: 2012 Atmosfera locului de munc Cerine generale
pentru performana procedurilor de msurare a agenilor chimici
o
o
o
SR EN 13890: 2010 Expunerea la locul de munc. Proceduri de
msurare a metalelor i metaloizilor din particule n suspensie. Cerine i
metode de ncercare
o
SR EN ISO 10882-1: 2012 Sntate i securitate n sudare i procese
conexe; Prelevarea particulelor din aer i a gazelor din zona respiratorie a
operatorului; Partea 1: Prelevarea particulelor din aer
o
HG 1218/2006 privind stabilirea cerinelor minime de securitate i
sntate n munc pentru asigurarea proteciei lucrtorilor mpotriva
56
riscurilor legate de prezena agenilor chimici cu modificrile i

completrile ulterioare
3.
Termeni i definiii
Pentru termenii i definiiile utilizate n aceast procedur se aplic cele
date n SR EN 482:2012 i respectiv SR EN 1540: 2012.
4.
Principiul metodei
Un volum cunoscut de aer este aspirat cu debit controlat intr-o anumit
perioad de timp. Particulele n suspensie sunt reinute pe un filtru. Filtrul
cu particulele depuse pe aceasta se mineralizeaz cu acizi concentrai.
Soluia rezultat se analizeaz prin spectrometrie de absorbie atomic cu
atomizare n cuptor de grafit sau n flacr.
5.
Reactivi si materiale
Reactivi:
o
Ap deionizat conform cu SR ISO 3696:1995/A99:2002
o
HNO3 69,5% pentru analize de spectrometrie de absorbie atomic
o
HCl 37% pentru analize de spectrometrie de absorbie atomic
o
Soluii etalon pentru metalele de interes cu un coninut de metal de
1000 mg/L
o
Soluie MRC pentru controlul de calitate ce conine metalele de
interes n concentraii certificate.
o
Acetilen dizolvat n aceton de puritate 2.6
o
Argon de puritate 4.8
Materiale de laborator
o
Pipete digitale de 10 mL
o
Pipete gradate din sticl borosilicat clasa A de 1 mL, gradaia de 0,01
mL
o
mL
o
mL
o
Baloane cotate din plastic (PP, PMP, PFA sau PTFE) de 25, 50, 100 i
1000 mL, clasa A
o
Cilindru gradat de 500 mL
o
Eprubete gradate cu dop (lif NS 19/26), de 25 mL, gradaia de 0,2
mL
57
o
Tuburi refrigerente de lungime de aprox.40 cm cu lif NS 19/26
pentru eprubetele gradate descrise la punctul 5.
o
Seringi de unic folosin de 10 mL.
o
Filtre din nylon pentru seringi de unic folosin de prozitate 0,45
microni i diametru
13 mm precum i echipament de laborator de uz
general.
Toate vasele de laborator utilizate, dup splarea obinuit, trebuie
imersate in acid azotic 10% cel puin pentru 6 ore, dup care se cltesc
temeinic cu ap deionizat. Aceast operaie trebuie efectuat inclusiv
pentru materialele de unic folosin (vrfuri de pipete, cuve pentru
autosampler)!
6.
Aparatura
o
Pomp de prelevare cu debit reglabil ntre 500-5000 mL, conform cu
cerinele specificate n SR EN 1232:2002
o
tuburi de legtur flexibile (de ex. Tygon) de diametru corespunztor
pentru a asigura legarea etan a prelevatorului la pomp, de lungime de
aproximativ 80 cm.
o
prelevator pentru pulberi inhalabile (de ex. prelevator conic, IOM,
caset cu fa nchis)
o
casete de filtru corespunztoare prelevatorului de ex. 37 mm
pentru prelevatorul conic i 25 mm pentru prelevatorul IOM);
o
filtre de membran din esteri celulozoici de porozitate 0,8 mm, i
diametru corespunztor casetei (de ex. 37 mm sau 25 mm).
o
calibrator de debit portabil (de ex. rotametru, calibrator cu piston
uscat).
o
Termometru, cu domeniul 0-50 C, cu diviziuni de 1 C sau mai mic.
o
Barometru
o
adaptor pentru legarea orificiului de intrare a prelevatorului la
calibratorul de debit.
o
centur pentru fixarea echipamentului de prelevare pe lucrtor
Aparatura analitica
o
Bloc de nclzire termostatat din aluminiu cu locauri de dimensiuni
corespunztoare dimensiunii eprubetelor gradate de la punctul o
paragraful , cu temperatur reglabil la 125C5C
58
o
n loc de bloc de nclzire, se poate utiliza baie de nisip cu termostat,
reglabil la 125C5C
o
Baie ultrasonic
o
Spectrometru de absorbie atomic echipat corespunztor: atomizor
cu flacra sau cuptor de grafit, cu surse de radiaii monocromatic specific
metalelor de interes (de exemplu lampa cu catod cavitar) i sistem de
corectarea fondului (de ex, cu lamp de deuteriu sau cu efect Zeeman),
autosampler pentru tehnica de atomizare n cuptor, precum i consumabile
specifice aparatului (tuburi de grafit, fiole de autosampler).
7.
Prelevare
Strategia de prelevare se stabilete n funcie de scopul prelevrii n
conformitate cu cele prevzute n SR EN 689: 2003. n general pentru
verificarea conformitii cu valorile limit obligatorii de expunere
profesional pt. 8h, condiiile de prelevare sunt urmtoarele:
Prelevare personal din zona de respiraie a angajatului, cu pompa
fixat de angajat
Durata prelevrii: 2 h
Debit: corespunztor prelevrii fraciei inhalabile pentru prelevatorul
utilizat (de ex. 3,5L/min pentru prelevatorul conic, 2L/min pentru
prelevatorul IOM i caseta cu fa nchis)
Pregtire echipament de prelevare

nainte de deplasarea pe teren:
o
se verific ca bateriile pompei s fie ncrcate, nct s fie capabile s
funcioneze corespunztor pe durata prelevrii;
o
se regleaz debitul dorit:
se asambleaz echipamentul de prelevare, n prelevator se introduce o
caset de filtru cu un filtru identic cu cel folosit pentru prelevarea propriu
zis (pe ct posibil din acelai lot). Cu ajutorul adaptorului orificiul de
intrare al prelevatorului se leag la orificiul de ieire al calibratorului, i se
regleaz debitul de prelevare corespunztor prelevatorului utilizat, in
conformitate cu instruciunile de utilizare al pompei. Este preferabil, ca
nainte de reglarea debitului pompa s funcioneze aproximativ 20 de
minute.
La locul prelevrii:

59
o
se asambleaz echipamentul de prelevare: prelevatorul n care n
prealabil s-a montat caseta cu filtru se leag cu ajutorul tubului flexibil de
orificiul de aspirare al pompei;
o
nainte de prelevare se verific debitul de prelevare reglat cu ajutorul
calibratorului de debit n acelai mod cum s-a efectuat reglajul n laborator.
La nevoie se mai ajusteaz reglajul. Se noteaz valoarea exact a debitului;
o
se ndeprteaz caseta de filtru cu filtrul folosit la reglarea debitului,
i se monteaz caseta de filtru cu filtrul utilizat pentru prelevare;
o
echipamentul de prelevare asamblat se fixeaz pe lucrtor, avnd
grij ca prelevatorul s fie fixat n zona de respiraie a lucrtorului.
Prelevare propriu-zisa
o
Se pornete pompa de prelevare, i se noteaz ora de ncepere a
prelevrii.
o
n timpul prelevrii se observ modul de lucru al lucrtorului i se
noteaz toate evenimentele relevante, care ar putea influena rezultatul,
precum i sursele de noxe.
o
La expirarea duratei de prelevare propus, se oprete pompa, i se
noteaz ora terminrii.
o
Se calculeaz durata prelevrii n minute.
o
Dup terminarea prelevrii, se repet verificarea debitului, i se
noteaz valoarea citit. Pentru calcule se folosete valoarea medie a
debitelor citite nainte i dup prelevare.
Transport
Transportul probelor prelevate se face cu grij deosebit, pentru a se
asigura ca materialul depus pe filtru s nu se scuture n timpul
transportului. n acest scop transportul se efectueaz n casete nchise, cu
faa prelevat orientat n sus.
8.
Mod de lucru
o
Pregtirea reactivilor
Din reactivii menionai la punctul se prepar urmtoarele soluii.
o
Soluia de digestie: 2:1 HNO3 65% : HCl 25% (270 mL acid azotic
69,5% + 100mL acid clorhidric 37% 80 mL ap DI)
o
Soluia de diluie pentru standarde 0,1% HNO3: 1 mL de HNO3 69,5%
la un balon cotat de 1000 mL, adus la semn cu ap DI.
o
Modificatori: Pd 1,6 g/L+ acid ascorbic 1 %
o
Soluii etalon:
60
Pentru tehnica flacr:

Din soluiile etalon cu concentraia de 1000 mg/L se prepar urmtoarele
soluii stoc intermediare:
Cr: c= 100 mg/L; 2,5 ml de soluie etalon de 1000 mgCr/L ntr-un balon
cotat de 25 mL adus la semn cu soluia de diluie 0,1% HNO3
Fe: c=350 mg/L; 17,5 ml de soluie etalon de 1000 mgFe/L ntr-un balon
Pb: c= 50 mg/L: 2,5 ml de soluie etalon de 1000 mgPb/L ntr-un balon
Aceste soluii se pot pstra la temperatura de +4 C timp de 6 luni.
Etaloane de lucru pentru flacr se prepar n baloane cotate de 25
respectiv 50 mL, se completeaz cu soluie de diluie 0,1% HNO3, i se pot
pstra la temperatura +4 C timp de 7 zile.
Cr (balon cotat Fe (balon cotat Pb (balon cotat
25 mL)
25 mL)
50 mL)
Nr.
std.
c
V stoc
c
V stoc
C
V stoc
(mg/L)
(ml)
(mg/L)
(ml)
(mg/L)
(ml)
1
0,8
0,2
7,0
0,5
0,5
0,5
2
2,4
0,6
14,0
1,0
1,0
1,0
3
4,4
1,1
28,0
2,0
2,0
2,0
4
6,4
1,6
49,0
3,5
3,5
3,5
5
8,0
2,0
70,0
5,0
5,0
5,0
Pentru tehnica flacr:
Etalon stoc pentru cuptor:
Din soluia etalon de 1000 mg/L (Cd, Ni, Mn) se prepar urmtoarele
concentraii de soluii stoc ntr-un balon cotat de 100 mL adus la semn cu
soluia de diluie 0,1% HNO3, Soluia aceasta se poate pstra la
temperatura de +4 C timp de 6 luni.
Cd
c
(mg/L)
10
Ni
Vetalon
(ml)
1
c
(mg/L)
5
Mn
Vetalon
(ml)
0,5
c
(mg/L)
10

Vetalon
(ml)
1
61
Pentru Cd se efectueaz nc o diluie de 1/100 n urma creia rezult un

stoc intermediar de 0,1 mg/L din care se prepar etaloanele de lucru.
Etaloane de lucru pentru cuptor:
Cd
Mn
Ni
Nr.
c
Vstoc
c
Vstoc
c
Vstoc
std.
(mg/L)
(ml)
(mg/L) (ml) (mg/L) (ml))
1
0,20
100
6
30
5
50
2
0,40
200
12
60
10
100
3
0,80
400
24
120
20
200
4
1,40
700
42
210
35
350
5
2,00
1000
60
300
50
500
Etaloanele de lucru pentru SAA-CG se prepar n baloane cotate de 50 mL
i se completeaz cu soluie de diluie 0,1% HNO3; se pot pstra la
temperatura +4 C timp de 7 zile.
Pregtirea probelor
Digestia probelor se face in eprubete gradate (vezi specificaiile de la ).
Filtrul prelevat se pune n eprubet i se adaug 10 mL din soluia de
digestie menionat la punctul o. Pentru fiecare serie se prepar un filtru
neutilizat din aceeai lot, care va fi proba martor. La eprubet se ataeaz
refrigerentul i se introduce n locaul blocului termostat (sau n baia de
nisip). Probele se fierb cu reflux la temperatura de 125 5 C timp de 2h.
Dup rcire, probele se completeaz cu ap deionizat pn la 20 mL. Este
posibil ca digestia s nu fie complet, s rmn sediment. Pentru analiz
se folosete supernatantul. Dac sedimentarea nu este complet, nainte
de analiz se filtreaz o parte a soluiei de ex. folosind un filtru de unic
folosin. Pentru analiz proba astfel pregtita n funcie de concentraia
estimat se poate dilua, n general este suficient un raport 1/2 pn la 1/5.
De raportul de diluie se ine cont la calculul rezultatelor.
o Condiii de analiz la spectrometrul de absorbie
atomic

62
- Atomizare n flacr:
Element
Cr
357,9
Lungime de und (nm)
Fant (nm)
0,2
Corecie D2
Nu
Oxidant
Aer
Tip flacr
Reductor
Optimizare c(mg/L) pt. 0,2 2
abs
Domeniu de lucru: mg/L
0,8-8
- Atomizare n cuptor de grafit:
Element
Cd
228,8
Lungime de und (nm)
Fant (nm)
0,5R
Corecie D2
Da
Temperatur de calcinare:
350
Temperatur de atomizare.
2000
10
Modificator
Pd + VitC
Optimizare c(g/L) pt. 0,2 abs 1,1
0,2-2
Fe
372,0
0,2
Nu
Aer
Oxidant
25
Pb
283,3
0,5
Da
Aer
Oxidant
10
7-70
0,5 - 5
Mn
403.1
0,2R
Nu
700
2400
20
fr
36
6- 60
Ni
232,0
0,2R
Da
1650
2500
10
Pd + VitC
25
5-50
Aceste valori sunt informative, trebuie inut cont de recomandrile

productorului instrumentului.
9.
Rezultatele se exprim n unitile n care sunt exprimate valorile limit n
HG 1218/2006 cu modificrile ulterioare adic mg/m3. Dac pentru
valoarea limit este specificat c se refer la condiii standard de
referin, (20 C i presiunea p=101,3 kPa), se face conversia volumului de
aer din condiiile actuale la condiia standard.
o Calcule
- Debitul mediu de prelevare (L/min) :
63
qv
qv1 qv 2
;
2
qv1, qv2 debitele iniiale i finale de prelevare (L/min)

-
Volumul de aer prelevat (L):

V qv * t ;
t durata prelevrii (minute);

-
Volumul prelevat corectat pentru condiii de

referin:
Vcor V *
p1 T0
* ;
p0 T1
p1 presiunea atmosferic medie n timpul prelevrii (kPa);

p0 presiunea atmosferic de referin (101,3 kPa);
T1 temperatura ambiant medie n timpul prelevrii (K);
T0 temperatura de referin (293 K);
Masa analitului pe filtru:
m c1 *V1 * DF c0 *V 0 ;
-
c1 concentraia medie de analit n soluia de analizat (mg/L)

c0 concentraia medie de analit n soluia martor (mg/L)
V1 volumul soluiei de analizat (L)
V0 volumul soluiei martor (L)
DF factorul de diluie utilizat (n absena diluiei DF=1)
-
Concentraia masic n proba de aer (mg/m3):
m
Vcor

64
Pentru a putea compara concentraia msurat cu valorile

limit, trebuie calculat concentraia medie ponderat cu timpul (MPT), n
funcie de durata de expunere:
MPT
c * te
8
te durata de expunere
n cazul n care expunerea se ntinde pe toat durata unui schimb de lucru
de 8 ore, MPT=c.
Dac valoarea limit care se aplic, se refer la oxizi (de ex. oxid feric sau
oxid de cadmiu), rezultatul trebuie nmulit cu factorul de conversie
corespunztor.

65

66
10. Raport de analiz

Raportul de analiz trebuie s conin cel puin urmtoarele:
o
Date de identificare beneficiar (denumire, adresa, nr.reg., CUI)
o
Date despre prelevare:
Numele celui care a efectuat prelevarea
Reprezentantul beneficiarului care a participat la prelevare
Identificarea lucrtorului a crui expunere a fost determinat
(inclusiv numele, postul de munca, secia)
Scopul prelevrii
Condiiile de lucru, date despre ventilaie i echipament individual de
protecie purtat
Sursele de emisie a noxelor
Descrierea procesului de lucru
Durata de expunere
Data prelevrii
Ora nceperii i ora terminrii prelevrii (ora, minute)
Durata prelevrii (minute)
o
Identificarea probei:
Tipul i seria pompei de prelevare;
Tipul i seria calibratorului de debit
Tipul prelevatorului
Tipul i marcajul filtrului de prelevare
Debitul msurat nainte i dup prelevare (litri/min)
Volumul de aer prelevat (litri)
o
Date despre microclimat: temperatur, umiditate relativ, presiune
atmosferic, viteza curenilor de aer
o
Orice observaie relevant care ar putea influena rezultatul
o
Date despre modul de prelucrare a probei
o
Data efecturii analizei
o
Identificarea instrumentului de analiz (tip, nr. serie)
o
Numele persoanei care a efectuat analiza
o
Rezultatul i incertitudinea
o
Media ponderat cu timpul

67
11. Bibliografie
1.
Bernard Welz, Michael Sperling: Atomic Absorption Spectrometry,
3rd Completely Revised Edition, 1999 WILEY-VCH Verlag GmbH & Co KgaA,
Weinheim, ISBN: 9783527285716
2.
Ralph Hebisch, Hajo-Henning Fricke, Jens-Uwe Hahn, Majlinda
Lahaniatis, Claus-Peter Mashmeier, Markus Mattenklott: Sampling and
determining aerosols and their chemical components - The MAK-Collection
Part III. Air monitoring methods, Vol.9. DFG, Deutsche
Forschungsgemeinschaft Copyright 2005 WILEY-VCH Verlag GmbH & Co
KgaA, Weinheim, ISBN: 3-527-31138-6
3.
http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/3527600418.amsampaer
oe0009/pdf
4.
Method for the determination of cadmium The MAK-Collection
Part
III.
Air
monitoring
methods
Vol.4.
DFG,
Deutsche
Forschungsgemeinschaft Copyright 2005 WILEY-VCH Verlag GmbH & Co
KgaA, Weinheim, ISBN: 3-527-31138-6
http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/3527600418.am744043vere00
04/pdf
5.
Method for the determination of nickel The MAK-Collection Part III.
Air monitoring methods Vol.7. DFG, Deutsche Forschungsgemeinschaft
Copyright 2005 WILEY-VCH Verlag GmbH & Co KgaA, Weinheim, ISBN: 3527-31138-6
6.
http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/3527600418.am744002v
ere0007/pdf
7.
Institut National de Recherche et de Scurit (INRS) Mtaux
Mtallodes (Fiche 003), in Mtrologie des Polluants valuation de
lxposition Professionnelle Mthodes de Prlvement et dAnalyse de
lAir, INRS, Paris http://www.inrs.fr/accueil/produits/bdd/metropol.html
8.
Health and Safety Executive: MDHS6/3 Lead and inorganic
compounds of lead in air Laboratory method using flame or electrothermal
atomic absorption spectrometry in Occupational Medicine and Hygiene
Laboratory: Methods for the Determination of Hazardous Substances
(MDHS) guidance http://www.hse.gov.uk/pubns/mdhs/pdfs/mdhs6-3.pdf
9.
Health and Safety Executive: MDHS10/2 Cadmium and inorganic
compounds of cadmium in air Laboratory method using flame atomic
absorption spectrometry or electrothermal atomic absorption
68
spectrometry in Occupational Medicine and Hygiene Laboratory: Methods

for the Determination of Hazardous Substances (MDHS) guidance
http://www.hse.gov.uk/pubns/mdhs/pdfs/mdhs10-2.pdf
10. Health and Safety Executive: MDHS12/2 Chromium and inorganic
compounds of chromium in air Laboratory method using flame atomic
absorption spectrometry in Occupational Medicine and Hygiene
11. Health and Safety Executive: MDHS42/2 Nickel and inorganic
compounds of nickel in air (except nickel carbonyl) Laboratory method
using flame atomic absorption spectrometry or electrothermal atomic
absorption spectrometry in Occupational Medicine and Hygiene
12. OSHA: Metal & Metalloid Particulates In Workplace Atmospheres
(Atomic Absorption) ID 121 in OSHA - Sampling and Analytical Methods
electronic
version
http://www.osha.gov/dts/sltc/methods/inorganic/id121/id121.pdf
13. OSHA: Cadmium In Workplace Atmospheres ID 189 in OSHA Sampling
and
Analytical
Methods
electronic
version
http://www.osha.gov/dts/sltc/methods/inorganic/id189/id189.pdf
14. INSHT - MTA/MA-025/A92 - Determinacin de metales y sus
compuestos inicos en aire - Mtodo de filtro de membrana
/espectrofotometra de absorcin atmica in Mtodos toma de muestras y
anlisis
http://www.insht.es/InshtWeb/Contenidos/Documentacion/FichasTecnica
s/MetodosAnalisis/Ficheros/MA/MA_025_A92.pdf
Adaptata i verificat n Laboratorul ncercari Fizice, Chimice i

Microbiologice Toxicologie Industriala - CRSP TRGU - MURE

69
IV.8. Determinarea unor compui organici volatili din

aerul locurilor de munc , prin GC
1.
Scop
Prezenta metodologie are drept scop prezentarea modului de
prelevare a probelor i de execuie a analizelor, prin cromatografie n
faz gazoas, pentru determinarea concentraiei unor compui organici
volatili din aerul locurilor de munc. Sunt prezentate de asemenea
echipamentele i materialele utilizate, operaiunile prealabile i
activitile finale .
2.
Procedura se aplic pentru concentraii n aer ale compuilor organici
volatili situate aproximativ n domeniul cuprins ntre 0,2 mg/m3 pn la
2000 mg/m3 pentru un volum de prelevare de 5 l. Metoda permite
determinarea concentraiilor din aer a urmtorilor compui: aceton,
acetat de etil, acetat de n-butil, n-butanol, ciclohexan, etanol, metil-etilceton, n-hexan,
benzen, toluen, xilen. Metoda descris n
procedur se aplic i la msurarea concentraiilor din aer ale compuilor
organici volatili prezeni n amestec. Metoda se poate aplica i pentru
determinarea altor compui organici volatili din aer, dar validitatea ei
trebuie verificat.
Modul de lucru este compatibil cu aparatura de prelevare a probelor
individuale sau n punct fix i se poate utiliza pentru calcularea
concentraiei medii ponderate n funcie de timp, a vaporilor de compui
organici volatili din aer.
Compuii organici
care au timp de retenie identici sau apropiai
cu substanele analizate pot s interfere.Interferenele pot fi minimizate
prin alegerea corect a coloanelor cromatografice i a condiiilor de
separare, respectiv prin consultarea fielor de securitate de la locurile de
munc.
Determinrile descrise n prezenta procedur specific se efectueaz la
solicitare sau n cadrul unor Programe Naionale i Internaionale ale
Ministerului Sntii i au drept scop evaluarea expunerii ocupaionale
la ageni chimici, datorat utilizrii compuilor organici volatili ca
solveni organici.
70
3.
Documente de referin
o
Manualul Calitii laboratorului
o
Culegere de metode de investigaie n domeniul medicinii muncii.
Determinarea gaz cromatografic a unor solveni organici, Ministerul
Sntii, Academia de tiine Medicale, Institutul de Igien i Sntate
Publica Bucureti, 1991
o
SR ISO 9487-2001 Aerul locurilor de munc - Determinarea
vaporilor de hidrocarburi aromatice. Metoda de analiz prin tuburi cu
crbune activ / desorbia solventului / cromatografie n faz gazoas.
o
SR EN 482 /2012 Expunere la locul de munca. Cerine generale
pentru performana procedurilor de msurare a agenilor chimici.
o
SR EN 689 -2003 Atmosfera locurilor de munc. Ghid pentru
evaluarea expunerii la ageni chimici pentru compararea cu valori limit
i strategia de msurare.
o
SR EN 1076 / 2002 - Atmosfera locului de munc. Tuburi de
adsorbie cu pompare pentru determinarea gazelor i vaporilor. Cerine
i metode de ncercare.
o
SR EN 13649 / 2002 - Emisii de la surse fixe. Determinarea
concentraiei masice a compuilor organici gazoi individuali. Metoda
prin carbon activ i desorbia solvenilor.
o
SR EN 14662-2/2007 Calitatea aerului nconjurtor. Metoda
standardizat pentru msurarea concentraiei de benzen. Partea 2:
Prelevarea prin pompare urmat de desorbia termic i cromatografie
n faz gazoas
o
SE EN 1540 /2003 Atmosfera locului de munc Terminologie.
o
NIOSH Manual of Analytical Methods ( NMAM), Fourth
Edition, 5/15/96
Volatile Organic Compounds
o
NIOSH Manual of Analytical Methods ( NMAM), Method 1500,
Hydrocarbons,
36-126 0C BP
o
NIOSH Manual of Analytical Methods ( NMAM), Method 1501,
Hydrocarbons, aromatic.
o
OSHA Sampling and Analytical Methods, 3/19/04, Method 07Organic Vapors
71
o
OSHA Sampling and Analytical Methods, 3/19/04, Method PV
2028, Gasoline
o
SR ENV 13005-2003 Ghid pentru exprimarea incertitudinii de
msurare
o
SR ISO 5725-1/1997 Exactitatea ( justeea i fidelitatea) metodelor
de msurare i a rezultatelor msurtorilor. Partea 1 Principii generale i
definiii.
o
de msurare i a rezultatelor msurtorilor. Partea 2 Metoda de baz
pentru determinarea repetabilitii i reproductibilitii unei metode de
msurare standardizate.
o
de msurare i a rezultatelor msurtorilor. Partea 3 Msurri
intermediare ale fidelitii unei metode de msurare standardizate.
o
de msurare i a rezultatelor msurtorilor. Partea 4 Metode de baz
pentru determinarea justeei unei metode de msurare standardizate.
o
de msurare i a rezultatelor msurtorilor. Partea 5 Metode alternative
pentru determinarea fidelitii unei metode de msurare standardizate.
o
de msurare i a rezultatelor msurtorilor. Partea 6 Utilizarea n practic
a valorilor exactitii
o
Gh. Toace, Ana Maria Toace Incertitudinea i validare, Ed.
Medical, Buc.2008
o
Gabriela Manca Validarea i incertitudinea: cerine pentru
asigurarea calitii metodelor analitice, Ed. Tehnic tiinific i Didactic
Iai, 2003
4. Definiii
o
Compui organici volatili(COV):substane organice care au
punctul de fierbere mic, respectiv volatilitatea crescut la temperatura
ambiant.
o
Solvent organic: orice compus organic volatil folosit separat sau n
combinaie cu alte substane ori preparate pentru a dizolva materii
prime, produse sau deeuri ori utilizat ca agent de curare, dizolvant,
mediu de dispersie, regulator de vscozitate etc.
72
o
Cromatografie n faza gazoas: metod instrumental de
analiz de nalt performan care permite determinarea individual a
compuilor organici prezeni n amestecuri complexe. Are la baz
separarea acestora pe o coloan, deplasai fiind de un gaz purttor,
urmat de detecia, realizat, cel mai adesea, cu un detector cu
ionizare n flacr (FID) sau cu un spectrometru de mas (MS).
o
Validare proces de evaluare a caracteristicilor de performan ale
unei metode de analiz i de verificare c este adecvat scopului n care
va fi utilizat.
o
Exactitate (acuratee) : caracteristic de performan a unei
metode de analiz care exprim gradul de apropiere (concordana) ntre
rezultatul unei msurri i valoarea convenional adevrat. Se exprim
prin bias (deplasare).
o
Bias : diferena ntre media rezultatelor obinute n condiii de
repetabilitate i valoarea convenional adevrat. Se exprim ca valoare
absolut sau procentual(relativ).
o
Precizie (fidelitate) : caracteristica de performan a unei metode
de analiz care exprim gradul de apropiere (concordan) ntre
rezultatele individuale ale unei serii de msurtori efectuate n condiii
prevzute.
o
Repetabilitate: precizia unui set de msurri efectuate cu aceeai
metod pe elemente de testare identice, cu acelai echipament, acelai
lot de reactivi, acelai analist ntr-o perioad de timp scurt. Se exprim
prin deviaia standard relativ ( coeficient de variaie)
o
Incertitudine : parametru asociat rezultatului unei msurri
care caracterizeaz
dispersia valorilor ce, n mod rezonabil, pot fi atribuite masurndului.
o
Etalonarea : ansamblu de operaii care stabilesc n condiii
specificate, relaia dintre valorile unei mrimi indicate de un aparat ori
un sistem de msurare i concentraia unui etalon.
o
Limit minim de detecie: cea mai mic valoare (cantitate,
concentraie) care poate fi detectat i distinct fa de blanc.
o
Limit minim de msurare ( cuantificare ): cea mai mic valoare
(cantitate, concentraie) care poate fi determinat cantitativ cu un
nivel acceptabil al repetabilitii i exactitii.
73
o
Domeniu de msurare: intervalul ntre nivelul inferior i cel
superior de concentraie de analit n care se demonstreaz liniaritatea
curbei de etalonare.
o
Interferent: orice compus nafara
celor ce urmeaz a fi
determinai, care afecteaz
rezultatul (msurrii) determinrii.
o
Loc de munc: zon sau zone definite n care se desfoar o
activitate.
5.
Descrierea metodei
o
Principiul metodei
Un volum cunoscut de aer posibil contaminat (proba) este aspirat printrun tubuor de sticl sau metal ce conine crbune activ. Vaporii organici
sunt adsorbii de crbunele activ. Aceti compui organici sunt apoi
desorbii ntr-un solvent adecvat iar soluia rezultat este analizat cu un
gaz cromatograf echipat cu detector cu ionizare n flacr.
o
Echipamente i ustensile de ncercri / msurri
o
Gaz cromatograf, Model 4890 D, firma productoare Hewlet
Packard,
echipat cu detector cu ionizare in flacara (FID) i coloan capilara de
separare cromatografic.
o
Pompa de prelevare prin aspirare model Apex Casella, debit 55000 ml / min;
o
Incrctor pentru acumulatorul pompei;
o
Cap de aspirare (cu clema) pentru tubuoare;
o
Debitmetru cu pelicula de spun;
o
Rotametru;
o
Tubuoare adsorbante din sticla (lungime 7 cm, diametru interior 4
mm ) umplute cu crbune activ de granulaie 20-40 mesh dispus in doua
zone: zona adsorbant (100 mg) i zona de rezerva (50mg). Zonele sunt
separate, iar crbunele este fixat la capetele tubului, cu vat de sticl sau
alt material inert.
o
Capace de polietilena pentru nchiderea tubuoarelor cu crbune;
o
Pipete gradate de 1ml ( 0.007ml ), 2 ml ( 0.01 ml), 5 ml ( 0.003
ml)
clasa AS.
74
Pipete automate mecanice 1-5 ml ( eroare - 0,25%, imprecizie 0,13%) ,

de 0,1-1 ml i de 10-100 l.
o
Seringi cu volum de 5 l i de 10l , gradate n diviziuni de 0,1 l .
o
Baloane cotate de 10 ml, 25 ml i 50 ml
o
Flacoane pentru pstrarea soluiilor etalon: capacitatea de 10 ml,
prevzute cu capac cu filet i garnitur de cauciuc siliconic teflonat
o
Flacoane de sticl prevzute cu capac cu filet i garnitur
de
cauciuc siliconic teflonat, cu volum de 2 i 5 ml
o
Reactivi i materiale consumabile
Se utilizeaz numai reactivi de calitate analitic recunoscut.
o
disulfura de carbon de calitate cromatografic, verificat n
prealabil, prin analiz gaz cromatografic, pentru a evidenia posibilele
interferene.
o
etaloane de: benzen, toluen, xilen, etanol, aceton, metil-etilcetona, acetat de etil, acetat de n-butil, de cea mai inalta
puritate.Pentru trasarea curbei de etalonare se prepar, prin diluii
succesive plecnd de la o soluie stoc preparat volumetric, soluii etalon
cu coninut variind ntre 5 g/ml i 1000 g/ml.n condiii de refrigerare
(3 5 oC) si pastrate in flacoane inchise ermetic , soluiile etalon sunt
stabile cel puin un an. Dac se observ o deteriorare evident a lor, se
refac.Domeniul de concentraii ale acestora trebuie s acopere
domeniul de concentraii al probelor desorbite.
o
soluie etalon stoc de 50 000 g/ml : se introduc volumetric (tinind
cont de densitati) cu exactitate cte 500 mg din fiecare etalon pur, n
balon cotat de 10 ml, se aduce la semn cu disulfur de carbon i se
omogenizeaz.
o
soluie etalon de 1000 g/ml : se introduc cu ajutorul unei pipete
0,5 ml solutie etalon stoc (3) intr-un balon cotat de 25 ml, se aduce la
semn cu disulfura de carbon si se omogenizeaza
o
soluie etalon de 500 g/ml : se introduc cu ajutorul unei pipete 5
ml soluie etalon de 1000 g/ml (4) ntr-un balon cotat de 10 ml, se
aduce la semn cu disulfur de carbon i se omogenizeaz.
o
ml de soluie etalon de 500 g/ml (5) ntr-un balon cotat de 10 ml., se
aduce la semn cu disulfur de carbon i se omogenizeaz.
75
o
ml soluie etalon de 250 g/ml (6) ntr-un balon cotat de 10 ml se aduce
la semn cu disulfur de carbon i se omogenizeaz.
o
ml soluie etalon de 100 g/ml (7) ntr-un balon cotat de 10 ml se aduce
la semn cu disulfur de carbon i se omogenizeaz.
o
soluie etalon de 5 g/ml : se introduc cu ajutorul unei pipete 1 ml
soluie etalon de 50 g/ml (8) ntr-un balon cotat de 10 ml se aduce la
semn cu disulfur de carbon i se omogenizeaz.
Pentru verificarea curbei de etalonare se prepar urmtoarele soluii
etalon de control:
o
soluie etalon de control de 5 mg/ml : se introduc cu exactitate
cate 50 mg din fiecare component pur ntr-un balon cotat de 10 ml, se
aduce la semn la disulfur de carbon i se omogenizeaz.
o
soluie etalon de control de 1 mg/ml : se introduc cu exactitate
cte 50 mg din fiecare component ntr-un balon cotat de 50 ml se aduce
la semn cu disulfur de carbon i se omogenizeaz. Soluiile etalon
astfel preparate se pstreaz n flacoane speciale dedicate acestui lucru.
o
azot comprimat, puritate 99,999%
o
hidrogen electrolitic comprimat
o
aer comprimat
o
vrfuri pentru pipete automate
o
Prelevarea compuilor organici volatili
naintea efecturii prelevrilor, tubuoarele adsorbante se eticheteaz i
li se d un numr .Dac se folosesc tubuoare preparate n laborator,
carbunele se activeaz suplimentar prin nclzire la 3000 C timp de dou
ore, iar apoi tubusoarele se pstreaz cu capetele nchise ermetic pn n
momentul recoltrii.
Se verific gradul de ncrcare al acumulatorului pompei, iar la nevoie se
ncrc.
Pentru recoltarea compuilor organici volatili se regleaz debitul de
aspirare al pompei, la 0,25 l /minut cu ajutorul unui debitmetru cu
pelicul cu spun, pompa aspirnd aer n timpul acestei operaii, printruun tubuor identic cu cele ce urmeaz a fi utilizate.
Se utilizeaz pentru prelevri pompele Apex Casella .
76
Se asambleaz echipamentul de prelevare ( pompa de aspirare , tubul de

plastic i capul de aspirare). Se instaleaz acest echipament la punctual
de prelevare ales ( prelevare personal sau prelevare n punct fix).
Se deschid capetele tubuorului adsorbant, iar acesta se fixeaz n capul
de aspirare, n poziie vertical, respectnd sensul de curgere al aerului
indicat pe tub. Se pornete pompa avnd grij ca de fiecare dat timpul
indicat s fie zero. Dup terminarea intervalului de timp setat pentru
aspirare pompa se oprete ( se poate opri i manual). Tubuorul cu
crbune activ se scoate din capul de prelevare i se renchid ermetic
capetele sale cu capacele de polietilen.
Volumul de aer aspirat se stabilete prin debitul de aspirare al pompei i
prin setarea (alegerea ) timpului de prelevare.
Se prepar probe martor prin utilizare unor tubuoare identice cu cele
folosite pentru prelevri, exceptnd operaia de aspirare a aerului prin
ele.
o
Execuia analizei
o
Analiza gaz cromatografic
Gaz cromatograful se pune n funcie conform instruciunilor de utilizare
ale aparatului. Analiza se efectueaz n urmtoarele condiii:
Detector cu ionizare n flacar
Coloana de separare capilar BP-5 (L = 30m, d int = 0,32 mm)
Regim de temperatur a coloanei; T init = 50 0 C, t init = 2 min, rata
de cretere
r = 7 0 C / min, T final = 1250 C, t final = 0 min.
Temperatura evaporatorului : 2500 C,
Temperatura detectorului : 250 0 C,
Gaz purttor: azot
Gaze auxiliare: aer comprimat ; hidrogen electrolitic
Volum de prob / soluie etalon injectat : 1 pn la 5 l
In condiiile folosirii unei coloane de separare cu alte caracteristici (alta
faza stationara, alte
dimensiuni etc) regimul de temperatura al coloanei se va stabili astfel
incit sa se asigure o separare cit mai buna intr-un timp optim.
o
Etalonare
77
Se analizeaz gaz cromatografic, de trei ori, fiecare soluie etalon, n

condiiile descrise mai sus. n acest scop se injecteaz n gaz cromatograf,
n mod reproductibil, un volum cunoscut (1 5l) din solutia etalon.
n cazul suprancrcrii sistemului cromatografic se injecteaz volume
mai mici.
Se traseaz curba de etalonare reprezentnd grafic suprafaa
picurilor corespunztoare substanelor analizate corectate cu valoarea
probei martor (disulfur de carbon) n funcie de cantitatea injectata
(exprimata in micrograme) sau de concentraiile soluiilor etalon ale
substanelor analizate, exprimate n micrograme / mililitru. Curbele de
etalonare impreuna cu coeficientii lor de regresie (corelare), trasate
pentru COV care fac obiectul acestei metodologii, sint atasate.
Curba de etalonare se traseaz o data pe an precum i dup orice
modificare a parametrilor de analiz (coloan se separare, regimul de
temperatur al coloanei, debitele gazului purttor i al gazelor auxiliare )
sau dup interveniile de service i de mentenan.
Se verific curba de etalonare prin analizarea soluiilor etalon de control.
Dac diferena este mai mare de 5% se efectueaz o nou etalonare.
Pentru
calcularea concentraiilor de COV din probe i din
soluiile etalon martor, se utilizeaz curba de etalonare.
Curbele de etalonare i rezultatele se pstreaz pe suport magnetic i pe
hrtie .
o
Pregtirea soluiilor de probe prin desorbie n disulfur de
carbon.
Pentru trecerea n soluie a vaporilor organici reinui pe crbunele activ
din tubuoarele recoltoare se efectueaz desorbia lor n disulfur de
carbon. Se introduce cu ajutorul unei pipete 1 ml de disulfur de carbon
ntr-un flacon de 2 ml prevzut cu capac cu filet i garnitur de cauciuc
siliconic teflonat, se nchide imediat. Se scot capacele de plastic cu care
sint inchise capetele tubuorului i se ndeprteaz dopurile cu care este
fixat crbunele activ. Se transfer crbunele din prima zon a tubuorului
( cantitatea mai mare) n flaconul cu disulfur de carbon i se nchide
etan. Se agit flaconul din cnd n cnd, timp de 30 min., la
temperatura camerei, pentru a se asigura o desorbie maxim. Se repet
aceste operaii pentru a doua zon cu crbune a tubuorului, zona de
rezerv, cu un alt flacon cu disulfura de carbon.
78
Cnd se utilizeaz tubuoare recoltoare ce conin mai mult crbune dect

100 + 50 mg, se utilizeaz pentru desorbie flacoane mai mari i un
volum de disulfur de carbon mai mare ( de ex. 400 mg crbune se
desorb cu 4 ml de disulfur de carbon )
o
Determinarea propriu-zis
n gaz cromatograful aflat n regimul de lucru menionat se injecteaz
pentru analiz, acelai volum din soluia rezultat la desorbie ca i
volumul injectat pentru trasarea curbei de etalonare.
Se determin, din cromatograma, suprafaa picului substanei de
determinat iar din curba de etalonare se stabilete concentraia
masic n micrograme / ml, a substanei analizate din proba injectat.
Dac zona de rezerv conine mai mult de 10% substana analizat prin
raportare la prima zon, se consider ca proba nu este corespunztoare
i se distruge.
n maniera descris se analizeaz i tubuorul martor, iar la fiecare
set de probe se analizeaz o soluie etalon ( calibrare n dou puncte).
Sint anexate cromatograma obtinuta prin analiza unui amestec etalon,
respectiv a doua probe prelevate din aerul locurilor de munca.
o
Identificarea componentilor
Identificarea compusilor separati din proba analizata si reprezentati in
cromatograma
prin picuri se face pe baza timpului de retentie, comparind
cromatograma probei cu cromatograma unei solutii etalon. Valorile
acestui parametru calitativ, pentru COV care fac obiectul acestei metode,
determinat in conditiile de separare descrise mai sus, sint prezentate in
tabel.Trebuie mentionat faptul ca, in conditiile de separare mentionate,
pot aparea si anumite interferente. Astfel, n-hexanul se poate suprapune
in cromatograma peste acetatul de etil, ciclohexanul peste benzen iar
ciclohexanona si stirenul peste unul din izomerii xilenului. Pentru
identificarea cu siguranta, in astfel de cazuri, se impune consultarea
fiselor de securitate de la locul de munca sau identificarea compusilor
prin spectrometrie de masa . De fapt sint foarte rare cazurile in care sa
fie prezenta in aerul locurilor de munca toata gama de COV.
o
Calcul i exprimare rezultate
Concentraia masic a substanei analizate din proba de aer C, exprimat
n mg compus/m3
79
C=
n care: C1 concentraia n g compus /ml a soluiei analizate
corespunztoare primei zone de crbune a tubuorului,
C2 - concentraia corespunztoare zonei de rezerv a tubuorului, n
g/ml
C3 concentraia n g compus /ml a soluiei obinute prin desorbia
mpreun a ambelor zone de crbune ale tubuorului martor
V volumul de aer recoltat, n litri
Vd volum de disulfur de carbon utilizat pentru desorbie, n ml
A fost determinata si repetabilitatea analizelor de COV, analizind in acest
scop o solutie etalon de concentratie 50g/ml. Rezultatele, exprimate
prin deviatia standard relativa, sint prezentate in tabel.
o
Erori care pot afecta determinarea si modalitati de evitare a lor
Principalele erori care pot afecta rezultatele determinrilor
efectuate conform prezentei proceduri pot fi cauzate de urmtorii
factori:
o modificarea sensibilitii detectorului FID ca urmare e eventualelor
depuneri de compui pe unele componente ale sale sau n urma
modificrii raportului dintre debitele gazelor auxiliare.
o inexactitate n etalonarea multi - punct i neliniaritate
o interferena / contaminarea probelor
o erori de blanc sau de matrice
o msurarea volumelor de reactivi, respectiv a aerului aspirat prin
tubusoare
o efecte ale analistului
Evitarea i diminuarea erorilor de analiz se realizeaz prin:
o utilizarea de etaloane sau materiale de referin
o analiza unui martor la fiecare set de probe
o analiza unei soluii etalon la fiecare set de probe
o reetalonarea atunci cnd la verificarea cu soluii etalon de control
apar diferene mai mari de 5%
o verificarea i curarea anual sau la nevoie a detectorului FID
Adaptat i verificat n Laboratorul Sntate Ocupaional CRSP
CLUJ NAPOCA
80
V.DETERMINAREA PULBERILOR N AERUL ZONELOR DE

MUNC
V.1. Aspecte teoretice
Pulberile existente n aerul locurilor de munc reprezint sisteme
disperse cu faza de dispersie solid i mediul de dispersie gazos. Acest tip
de sisteme disperse se mpart la rndul lor n aerosoli i aero-emulsii, n
funcie de dimensiunile fazei de dispersie.
Pulberile din aerul locurilor de munc fac parte, n general, din categoria
aerosolilor, ai cror particule au diametre care variaz ntre 0,001 i 100m
i o contribuie de mas variind intre 10-9 i 10g/m3 de gaz.
Avnd n vedere aceste considerente, pulberile din mediul de munc
pot fi definite ca sisteme disperse (de tip aerosol) de particule solide
heterogene aflate ntr-un gaz (aer), particule a cror distribuie pe mrime
este predominant aceea a unui coloid.
Exist o distincie clar ntre pulberi, fumuri (care fac parte din
categoria aerosolilor) i ceuri. Ceurile sunt sisteme disperse cu faz
dispers lichid i mediul de dispersie gaz i se numesc aero-emulsii.
Pulberile, fumurile i ceurile se deosebesc ntre ele i prin modul de
formare i dimensiuni. Astfel, pulberile se formeaz n general prin
procesul de dezintegrare, un exemplu tipic n acest sens reprezentnd
mineritul, iar dimensiunile particulelor pot varia de la valori submicronice
la 1m. Fumurile sunt de dou tipuri: cele rezultate din reacii chimice
(fumes),,de exemplu: oxidri sau sublimri, ori distilri urmate de
procese de condensare i cele rezultate din arderea combustibililor fosili,
lemnului sau materialelor asfaltice (smokes). Dimensiunile particulelor
variaz ntre 0,001 i 1m. Ceurile rezult din procesele de atomizare sau
81
condensare, ca de exemplu operaiile de tiere, mcinare, sprayare, iar

dimensiunile sunt cuprinse ntre civa m i 10m.
n conformitate cu Comitetul European de Standardizare (CEN 481/1993) i
ACGIH
(American Conference of Governmental Industrial Hygienists), pulberile au
fost definite astfel:
o fraciunea inhalabil este fraciunea masic din totalul de particule n
suspensie din aer care este inhalat pe gur, particule cu diamentrul
aerodinamic ntre 1 i 100m
o fraciunea toracic este fraciunea masic a particulelor inhalate care
ptrunde dup laringe, particule cu diametrul ntre 0,1 i 35m
o fraciunea respirabil este fraciunea masic a particulelor inhalate
care ptrunde pn la cile neciliate, particule ntre 0,1 i 15 m.
Nu exist o metod unic de prelevare a pulberilor din aer, care s
fie potrivit oricrei situaii de expunere. S-au pus la punct diferite metode
de recoltare a aerului i s-au construit aparate de recoltare n limitele
tehnologice existente, care s poat fi utilizate n diferite circumstane de
expunere.Pulberile care ptrund n organism au loc pe cale inhalatorie.
Deoarece pulberile se depun n diferite zone ale tractului respirator, n
funcie de mrimea lor, pentru evaluarea expunerii profesionale la pulberi,
se impune prelevarea pulberilor din aer pe fraciuni de mrime, adic este
necesar s se msoare fraciunile: inhalabile toracic, respirabil.(fig 1)

82
Fig.1 Regiunile aparatului respirator i fraciunile de praf reinute
Depunerea pulberilor n diferite zone ale aparatului respirator

depinde de o serie de factori fizici i chimici ai acestora (distribuia de
mrime a particulelor, forma acestora, solubilitatea n ap i lipide,
reactivitatea chimic, sarcina electric datorat adsorbiei ionilor din
atmosfer sau frecrii n procesul de formare a pulberilor, proprietile
adsorbtive fa de gaze care au importan n diferite reacii chimice n
organism), de condiiile de expunere (concentraia pulberilor n aer,
temperatur, umiditate relativ, viteza curenilor de aer), precum i de
caracteristicile individuale ale expuilor (sex, vrst, greutate, stare de
santate, fumat).
Echipamentele de prelevare a pulberilor sunt n concordan cu
directivele Comitetul European de Standardizare (CEN 481/1993) i ACGIH
(American Conference of Governmental Industrial Hygienists), care au
definit eficiena de reinere a unui dispozitiv de prelevare i curbele de
reinere pe filtre pentru cele trei fraciuni de praf: inhalabil, toracic i
respirabil (termenul inhalabil nlocuiete termenul total deoarece
acesta se refer la concentraia tuturor particulelor existente n aer).
Eficiena de prelevare a unui dispozitiv a fost definit ca fiind
fraciunea de particule reinute pe filtru, indiferent de orientarea filtrului
fa de direcia curenilor de aer i este dat pentru fraciunea inhalabil
de relaia:
83
Ei = 50 (1 + e-0.06Da ) 10
(1)
(1)
unde:
Ei = eficiena de colectare (%) pentru fraciunea inhalabil
Da = diametrul aerodinamic al particulelor (m) (definit ca fiind diametrul
unei sfere cu densitatea egal cu unitatea, avnd aceeai vitez limit de
cdere liber in cmp gravitaional ca i particula studiat).
Pentru fraciunea toracic eficiena de prelevare, Et, este dat de
relaia:
Et = Ei [1 F(x)]
(2)
(2)
unde F(x) = funcia de probabilitate cumulat a variabilei normale
standardizate x
ln (Da/D)
x=
(3)
ln s
cu D = 11,64 m si s = 1,5
Pentru fraciunea alveolar eficiena de prelevare, Ea, este dat de
relaia:
Ea = Ei [ 1 F(x)]
(4)
(4)
unde F(x) i x au aceeai semnificaie ca in cazul fractiunii toracice, iar D =
4,25 m si s = 1,5.
Curbele teoretice de reinere pe filtre recomandate de
ACGIH/ISO/CEN sunt caracterizate de o eficien de reinere de 50% la
diametrul aerodinamic de 10 1 m pentru fraciunea toracic i de 4
1m pentru fraciunea respirabil; eficiena de reinere a prafului respirabil
este zero la valoarea de peste 10 m a diametrului aerodinamic (tabelul 1).

84
Tabel 1. Curbele teoretice de retinere pe filtre pentru cele trei

fractiuni de praf: respirabila, toracica si inhalabila
Diametrul
aerodinamic
Praf
al
Inhalabil (%)
particulelor
(m)
0
1
2
5
10
20
30
40
50
100
100
97
94
87
77
95
58
54.5
52.5
50
Diametrul
aerodinamic
al
particulelor
(m)
Diametrul
aerodinamic
Praf respirabil
Praf toracic (%)
al
(%)
particulelor
(m)
0
2
4
6
8
10
14
16
18
25
100
94
89
80.5
67
50
23
15
9.5
2
0
1
2
3
4
5
6
7
8
10
100
97
91
74
50
30
17
9
5
1
Organismele internaionale de profil au stabilit criterii pentru

aprecierea performanelor aparatelor de prelevare selective n funcie de
dimensiunea particulelor.
n acest sens, parametrul ce caracterizeaz eficiena de prelevare a
acestor tipuri de aparate l reprezint mrimea de particule recoltate cu o
eficien de 50%, notat d50. n conformitate cu criteriile ACGIH/ISO/CEN,
d50 are o valoare de 4m pentru dispozitivele de prelevare a fraciunii
respirabile de praf i de 10m pentru dispozitivele de prelevare a fraciunii
toracice; pentru fraciunea inhalabil, d50 are valoarea de 100 m.
Cu alte cuvinte, aa cum reiese i din tabelul 1, eficiena de prelevare
a fraciunii respirabile este de 50 % pentru particulele avnd diametrul
aerodinamic de 4 m; cnd particulele au mrimea sub 4 m, eficiena de
prelevare crete atunci cand Da scade iar pentru particule mai mari de 4
m, eficiena de prelevare scade cu creterea Da. Similar, n cazul fraciunii
toracice, eficiena de prelevare este de 50% atunci cnd particulele au
mrimea de 10m; pentru particule mai mici de 10m, eficiena de
prelevare crete cu descreterea Da, iar pentru particule mai mari de 10m
eficiena de prelevare scade cu creterea Da. n cazul fraciunii inhalabile,
85
eficiena de prelevare are o valoare de 50% la dimensiunea de 100m;

cnd particulele au mrimi sub 100 m, eficiena de prelevare crete cu
scderea Da, iar pentru particulele cu mrimi peste 100 m eficiena de
prelevare scade cu creterea Da.
Eficienele de prelevare (exprimate ca fraciuni de particule), n
concordan cu criteriile ACGIH/ISO/CEN, ale unui aparat de prelevare
selectiv pe dimensiuni sunt artate n fig.2
Efectele asupra strii de sntate.

Cele mai multe pulberi industriale conin o gam mare de particule
de diferite dimensiuni. Comportamentul, depozitarea i soarta particulelor
de la intrare n sistemul respirator precum i efectul acestora depinde de
mrimea particulelor. Este important s se ia n considerare concentraiile
de praf prezente n fraciuni de diferite dimensiuni.
Clasificare principalelor pulberi existente n aerul locurilor de munc,
n funcie de efectele lor asupra strii de sntate:
- pulberi de dioxid de siliciu i amestecuri ce conin dioxid de siliciu
unde principala mbolnvire profesional este silicoza, antracosilicoza i
alte pneumoconioze mixte;
- pulberi de azbest i amestecuri ce conin azbest pot provoca
azbestoz, plci pleurale, mezoteliom, cancer bronho-pulmonar, cancerul
cilor respiratorii superioare, cancerul altor organe.
- Pulberi minerale artificiale pot provoca cancer pulmonar,boli
pleurale benigne, efecte iritative ale aparatului respirator etc
86
- Pulberi metalice i compui metalici . n funcie de metalul la care

este expus personalul muncitor pot provoca aluminoz (expunere la
aluminiu), traheobronsit, pneumonie, afectare renal, ulceraii i perforri
ale septului nazal, astm bronic, cancer pulmonar, sideroz etc
- Pulberi organice vegetale i animale pot conduce la rinit alergic,
astm bronic,bisinoz, pneumoconioz necolagen etc
Aprecierea expunerii profesionale la pulberi se face utiliznd
parametrul de ncrcare extern, iar n unele cazuri se utilizeaz
parametrul de ncrcare intern, care se refer la doza de agent nociv
absorbit.
Parametrul de ncrcare extern reprezint cantitatea de agent nociv
la care este expus organismul pe unitatea de timp (numrul de ore lucrate
sptmnal). n cazul pulberilor, acest parametru se bazeaz pe
determinarea concentraiei medii ponderate cu timpul. Parametrul de
ncrcare extern se compar cu limita de expunere.
Evaluarea expunerii profesionale la pulberi ntr-un mod reprezentativ
este necesar pentru obinerea de informaii privind concentraia i
proprietile pulberilor existente n aerul unui loc de munc dat, ntr-o
perioad de timp determinat, n vederea lurii de msuri adecvate pentru
reducerea riscului de mbolnvire al muncitorilor.
Evaluarea expunerii profesionale este dificil de realizat dat fiind
variabilitatea mare a proceselor tehnologice generatoare de pulberi i a
tipurilor de pulberi care rezult din aceste procese tehnologice.
Rezult, astfel c variabilitatea condiiilor de expunere este foarte
mare. n acest context
complex, strategia de prelevare a pulberilor din aerul locurilor de munc
este responsabil
pentru reprezentativitatea rezultatelor. De aceea, amplasamentul,
momentul i durata prelevrii unei probe precum i echipamentul de
prelevare sunt elemente decisive pentru a garanta calitatea evalurii.

87
V.2. Determinarea gravimetrica a pulberilor inhalabile i

respirabile
1.
Prezenta metod se refer la determinarea gravimetric a pulberilor
fraciune inhalabil i respirabil din atmosfera locurilor de munc. Metoda
se aplic att n cazul prelevrii individuale a probelor de aer ct i n cazul
prelevrii la punct fix.
Domeniul de aplicare a metodei poate fi extins la toate particulele specifice
de pulberi (metalice, fum, praf de siliciu liber, etc), pentru a cror analiz
este necesar determinarea gravimetric.
2.
Referine normative
o
SR ISO 5725 - 1 - 1997, Exactitatea (justeea i fidelitatea) metodelor
de msurare a rezultatelor masurarilor
o
SR EN 481: 2003 Atmosfera Locului de munc Definirea
fraciunilor dimensionale pentru msurarea particulelor n suspensie din
aer
o
SR EN 482: 2010 Atmosfera Locului de munc Cerine generale
pentru performana instruciunilor de msurare a agenilor chimici
o
SR EN 1232: 2002 Atmosfera Locului de munc Pompe pentru
o
SR ISO 7708: 2000 Calitatea Aerului Definiiile fraciunilor
dimensionale ale particulelor pentru prelevarea legat de sntate
o
SR EN 689: 2003 Atmosfera Locului de munc Ghid pentru
evaluarea expunerii la ageni chimici pentru compararea cu valori limit i
strategia de msurare
o
SR EN 13205:2001 - ATMOSFERA LOCULUI DE MUNC- Evaluarea
performanei instrumentelor pentru msurarea concentraiei de particule
din aer
o
Metode determinare a poluanilor din aer -1984
3.
Principiul metodei
Aspirarea unui volum cunoscut de aer printr-un filtru. Prin cntrirea
filtrului nainte i dup filtrarea unui volum de aer se poate calcula
cantitatea de pulberi aflate n suspensie n volumul de aer filtrat.
4.
o
Ap bidistilat
88
o
Filtre de membran din esteri ai celulozei (MCE) de porozitate 0,8m
i cu diametrul 25mm
o
Filtre din fibr de sticl cu diametrul 25mm
5.
Aparatura
Echipamente de prelevare
o
Pomp portabil de prelevare, conform cu cerinele formulate n SR
EN 1232: 2002 debitul trebuie meninut cu o exactitate de 5 %
o
Rotametru debitmetru extern
o
Prelevator tip IOM pentru prelevare pulberi- fraciune nhalabil
o
Prelevator tip ciclon Al i tip ciclon Higgins-Dewell din plactic (HD)
pentru prelevri de pulberi-fraciune respirabil
o
Casete port-filtru
o
Tub de legtur din plastic cu diametru potrivit, pentru a se realiza
conexiunile ntre
prelevator , pompa i centura pentru ataarea pompei de corpul
angajatului.
o
Penset din material conductiv, cu vrf plat.
o
Echipamente analiz
o
Balan analitic cu un minim de sensibilitate de 0,01mg
o
Exsicator
o
Termometru
o
Higrometru
6.
Prelevare

o Se cur prelevatoarelor nainte de utilizare. Se demonteaz prile
care vin n contact cu praful, se nmoaie in soluie de detergent, se cltesc
bine cu ap bidistilat i se las s se usuce nainte de reasamblare.
o Calibrarea se face pentru ntreg ansamblul de prelevare i nu numai
pentru pomp. Prin ansamblu de prelevare se nelege succesiunea de
dispozitive legate n serie: caseta de prelevare prevzut cu filtru, tub de
legtur i pompa de aspiraie.
Procedura este urmtoarea:
a.
se alctuiete ansamblul de prelevare;
b.
se racordeaz prelevatorul la un debitmetru extern ( rotametru).
Racordul de la prelevator la debitmetru va fi ct mai scurt pentru a nu
introduce cderi de presiune ce pot afecta acurateea msurtorii.
89
c.
se pornete pompa i se stabilete valoarea debitului prin ajustarea
butonului de reglaj al pompei i citire pe debitmetrul extern;
d.
se detaeaz ansamblul de prelevare, se nlocuiete recoltorul cu
unul identic i se efectueaz prelevarea;
e.
dup prelevare, se nlocuiete recoltorul utilizat la prelevare cu cel
utilizat la calibrare i se citete din nou valoarea debitului (debit postprelevare). Valoarea sa nu trebuie s difere cu mai mult de 5% fa de cea
stabilit iniial. Dac se constat acest lucru, pompa trebuie verificat i se
reface prelevarea.
Not: unele pompe sunt prevzute cu rotametru. Acesta are rol de
apreciere calitativ a functionrii pompei i nu se utilizeaz la calibrarea
debitului de prelevare.
o
Debitul de prelevare al probelor depinde de prelevatorul utilizat
pentru fiecare fraciune n parte. Pentru colectarea pulberi inhalabile se va
folosi un prelevator tip IOM cu debitul de recoltare de 2 l/min, iar pentru
recoltarea pulberilor respirabile se vor folosi: prelevator tip ciclon AL cu
un debit de 2,5 l/min i prelevator ciclon tip Higgins-Dewell cu un debit de
2,2 l/min.
o
Timpul de prelevare variaz in funcie de puterea de poluare a sursei,
pentru a se evita supraincrcarea filtrului cu praf (este recomandabil a nu
se realiza o ncrcare peste 2 mg praf total/filtru).
o
Se vor preleva un numr de probe/schimb de lucru astfel nct s se
acopere ntreaga durat a schimbului de lucru.
o
Volumul de aer care este recomandat pentru o prob de pulberi
inhalabile este de minim 100 litri aer i pentru pulberi respirabile de 200
litri.
o
n vederea prelevrii probelor de aer, caseta cu filtru se monteaz n
prelevator, ntr-un spaiu foarte curat, pentru a evita impurificarea i se vor
lua msuri n timpul transportului n scopul evitrii impurificrii.
o Pentru prelevarea corect a probelor, pompa se aeaz n spatele
lucrtorului n dreptul taliei prin fixare de o curea, astfel nct prelevatorul
s fie n dreptul zonei de respiraie, la aproximativ 30cm (la nivelul
reverului).
o n cazul prelevrii la punct fix, se poziioneaz prelevatorul la locul de
munc unde se dorete a se efectua prelevarea.
90
o Se pornete pompa i se ncepe colectarea probei. Se urmrete

periodic, dac pompa funcioneaz corect n timpul de prelevare a
probelor. n cazul n care sunt unele anomalii se recalibreaz pomp i se
anuleaz proba.
o n timpul prelevrii se verific periodic gradul de ncrcare al filtrului
pentru evitarea colmatrii sau supraincrcrii acestuia. Dac se constat
colmatarea sau supraincrcarea filtrului se oprete prelevarea i se
monteaz un alt filtru, dup care se continu prelevarea.
o Pentru a determina dac s-a produs o contaminare a probelor n
timpul prelevrii sau manevrrii filtrelor, pentru fiecare serie de 1-10 probe
se vor prepara doua filtre martor: acestea vor fi montate n casete de filtru,
vor fi transportate n teren, dar nu se va aspira aer prin ele. Cnd se
preleveaz peste 20 de probe, numrul de filtre martor trebuie s
reprezinte 10% din numrul probelor.
o Se oprete pompa de prelevare dup timpul (prestabilit), se scoate
caseta cu filtru, se pune capacul de protecie i se codific.
Transport i depozitare
Este recomandat ca transportul filtrelor s se fac n caseta n care acestea
au fost prelevate, avnd grij ca faa pe care s-au reinut particulele s fie
orientat n sus. Cnd acest lucru nu este posibil, filtrele se vor extrage cu
grij din caseta n care au fost prelevate, cu ajutorul unei pensete i se vor
pune ntr-o alta caset de transport codificat.
7.
Mod de lucru
o
nainte de recoltarea probelor, filtrele se condiioneaz timp de 24
de ore ntr-un exsicator.
o Dup cntrirea iniial filtrele se pun n casetele port-filtru, care se
nchid cu capace de protecie pentru prevenirea contaminrii accidentale i
se codific. n cazul folosirii prelevatorului IOM, filtrul se cntrete cu tot
cu caseta, nainte i dup recoltare.
o Filtrele se cntresc la balana analitic cu o precizie de 0,01mg.
o Dup prelevare, filtrele recoltate se transport n laborator unde se
pun n exsicator timp de 24 ore, dup care se cntresc la aceeai balan
la care s-a efectuat cntrirea iniial.
o nainte de fiecare cntrire se asigur c balana este la zero i se
face reglarea ei dac este necesar.
o Balana se calibreaz cu o greutate etalon- clasa M.
91
o n camera unde se efectueaz cntrirea la balana analitic,

temperatura i umiditatea relativ trebuie monitorizat, i meninute
constante la valorile 20 1C i 50 5 %.
Not: Este necesar ca ambele cntriri ale filtrului s fie realizate pe
aceeai balan, de ctre aceeai persoan i n aceleai condiii de mediu.
8.
o
Calcul concentraiei
Concentraia de pulberi se calculeaz cu urmtoarea formul:
c(mg / m 3 )
(m2 m1 ) (b2 b1 ) 1000

q t
(1)
unde:
m1
m2
b1
b2
q
t
masa filtrului nainte de prelevare, n mg

masa filtrului dup prelevare,n mg
masa filtrului martor nainte de prelevare, n mg
masa filtrului martor dup prelevare, n mg
debitul pompei in L/minut
durata prelevrii, n minute
Dac s-au efectuat mai multe prelevri pentru aceeai post

de munc se calculeaz concentraia medie ponderat cu
timpul din mai multe rezultate pariale cu urmtoarea
formul:
c(mg / m 3 )
c1 t1 c2 t 2 ... cn t n
t1 t 2 ... t n
(2)
unde:
c1, c2, ..., cn sunt rezultatele pariale
t1, t2, ..., tn sunt duratele de expunere corespunztoare concentraiilor c1,
c2, ..., cn
o
Performantele metodei
Sensibilitatea metodei de 0,01 mg.
92
Limit de detecie depinde de balana analitic si poate fi estimat la

0,2 mg praf.
Domeniul de lucru pentru pulberi inhalabile este de la 1 - 20mg/mc
pentru 100 litri aer, iar pentru pulberi respirabile intre 0,5 - 10mg/mc
pentru 200 l aer.
9.
Raport de analiz
Raportul de analiza trebuie sa conin urmtoarele indicaii:
numele si adresa unitii unde s-au efectuat msurtorile;
scopul procedurii de msurare;
locul de munc;
tipul de prelevare (individuala sau la punct fix) si identitatea
persoanei din a crei zone respiratorie a fost prelevat aerul (pentru o
prelevare individuala) sau amplasarea punctului de prelevare (pentru o
prelevare la punct fix);
metoda de analiza utilizata;
tipul pompei utilizate pentru prelevare si identificarea acesteia
(seria);
momentul prelevrii: ora de ncepere, terminare si durata de
prelevare;
debitul utilizat, exprimat n litri/minut;
volumul de aer prelevat la temperatura mediului ambiant, n litri;
orice interferenta cunoscuta si/sau evenimentele sau factorii
susceptibili a influenta apreciabil rezultatele;
- descrierea conditiilor de munca, inclusiv conditiile de lucru din timpul
masuratorilor;
- concentratiile expunerii profesionale (concentratii medii ponderate
n functie de timp, exprimate n mg/m3 de aer);
- rezultatul compararii concentratiilor masurate cu valoarea limita;
- numele analistului;
- data analizei
10. Bibliografie
o NIOSH. Nuisance dust, total. Manual of Analytical methods 3rd Ed. ,
Vol. 1, Method 0500 (1984).
o NIOSH. Nuisance dust, respirable. Manual of Analytical Methods. 3rd
Ed. Vol. 1, Method 0600 (1984).
93
o Health and Safety Executive General methods for sampling and

gravimetric analysis of respirable and total inhalable dust MDHS 14/2 HSE
Books 1977 ISBN 0 7176 1295 3
o Health and Safety Executive Methods for the Determination of
Hazardous Substances MDHS Series HSE Books
o NF X 43-259 Qualit de lair - Air des lieux de travail - Prlvement
individuel ou poste fixe de la fraction alvolaire de la pollution
particulaire - Mthode de sparation par cyclone. (1)
o MDHS 14/3General methods for sampling and gravimetric analysis of
respirable and inhalable dust, february 2000
o Evaluarea expunerii profesionale la pulberi- ghid practic Rodica
Stnescu Dumitru, Ruxandra Carmen Artenie, Mircea Tat, 2002
o Determination of respirable and total inhalable dust in airgravimetric method, MTA/MA-014/R88
o Echantillonnage des aerosols Generalites- fiche HI , 15/03/2001
o Concentration ponderale dùn aerosol, fiche 002/V01/02,
18/05/2009
Verificat n Laboratorul Sntate Ocupaional CRSP TIMIOARA
V.3. Determinarea gravimetrica a pulberilor toracice

(Cadrul legislativ n Romnia nu prevede nc valoarea limit pentru
expunerea la pulberi- fraciunea toracic).
1.
Prezenta metod se refer la determinarea gravimetric a pulberilor
fraciune toracic din atmosfera locului de munc.
2.
Referinte normative
o
SR ISO 5725 - 1 - 1997, Exactitatea (justetea si fidelitatea) metodelor
de masurare si
a rezultatelor masurarilor
o
SR EN 481: 2003 Atmosfera Locului de munc Definirea
fraciunilor dimensionale pentru msurarea particulelor n suspensie din
aer
94
o
SR EN 482: 2010 Atmosfera Locului de munc Cerine generale
pentru performana instruciunilor de msurare a agenilor chimici
o
SR EN 1232: 2002 Atmosfera Locului de munc Pompe pentru
o
SR ISO 7708: 2000 Calitatea Aerului Definiiile fraciunilor
dimensionale ale particulelor pentru prelevarea legat de sntate
o
SR EN 689: 2003 Atmosfera Locului de munc Ghid pentru
evaluarea expunerii la ageni chimici pentru compararea cu valori limit i
strategia de msurare
o
SR EN 13205:2001 - ATMOSFERA LOCULUI DE MUNC- Evaluarea
performanei instrumentelor pentru msurarea concentraiei de particule
din aer
o
Metode determinare a poluanilor din aer -1984
3.
Principiul metodei
Aspirarea unui volum cunoscut de aer printr-un filtru. Prin cntrirea
filtrului nainte i dup filtrarea unui volum de aer se poate calcula
cantitatea de pulberi aflate n suspensie in volumul de aer filtrat.
4.
o
Ap bidistilat
o
Filtre de membran din esteri ai celulozei (MCE) de porozitate 0,8m
si cu diametrul 25mm i 37mm
o
Filtre din fibr de sticl cu diametrul 25mm i37mm
5.
Aparatura
Echipamente de prelevare
o
Pomp portabil de prelevare, conform cu cerinele formulate n SR
EN 1232: 2002 debitul trebuie meninut cu o exactitate de 5 %
o
Rotametru debitmetru extern
o
Prelevator tip GK2.69 care include ca preselector un ciclon
o
Prelevator tip CIP10-T care include ca preselector un ciclon
o
Casete port-filtru
o
Tub de legtur din plastic cu diametru potrivit, pentru a se realiza
conexiunile intre
prelevator, pompa i centura pentru ataarea pompei de corpul
angajatului.
Penset din material conductiv, cu vrf plat.
95

Echipamente analiz
o
Balan analitic cu un minim de sensibilitate de 0,01mg
o
Exsicator
o
Termometru
o
Higrometru
6.
Prelevare

o
Se cur prelevatoarelor nainte de utilizare. Se demonteaz prile
care vin n contact cu praful, se nmoaie in soluie de detergent, se cltesc
bine cu ap bidistilat i se las s se usuce nainte de reasamblare.
o
Calibrarea se face pentru ntreg ansamblul de prelevare si nu numai
pentru pompa. Prin ansamblu de prelevare se nelege succesiunea de
dispozitive legate n serie: caseta de prelevare prevzut cu filtru, tub de
legtura si pompa de aspiraie.
Procedura este urmtoarea:
a.
se alctuiete ansamblul de prelevare;
b.
se racordeaz prelevatorul la un debitmetru extern ( rotametru).
Racordul de la prelevator la debitmetru va fi cat mai scurt pentru a nu
introduce cderi de presiune ce pot afecta acurateea msurtorii.
c.
se pornete pompa si se stabilete valoarea debitului prin ajustarea
butonului de reglaj al pompei i citire pe debitmetrul extern;
d.
se detaeaz ansamblul de prelevare, se nlocuiete recoltorul cu
unul identic si se efectueaz prelevarea;
e.
dupa prelevare, se nlocuiete recoltorul utilizat la prelevare cu cel
utilizat la calibrare i se citeste din nou valoarea debitului (debit postprelevare). Valoarea sa nu trebuie sa difere cu mai mult de 5% fa de cea
stabilita iniial. Dac se constat acest lucru, pompa trebuie verificata si se
reface prelevarea.
Not:unele pompe sunt prevzute cu rotametru. Acesta are rol de
apreciere calitativ a functionrii pompei i nu se utilizeaz la calibrarea
debitului de prelevare.
o
Debitul de prelevare al probelor depinde de prelevatorul utiliza..
Pentru colectarea pulberi fraciune toracica se va folosi un prelevator tip
GK2.69 cu debitul de recoltare de 1,6 L/min si un prelevator tip CIP10-T cu
un debit de 7 L/min
96
o Timpul de prelevare variaz in funcie de puterea de poluare a sursei,

pentru a se evita supraincarcarea filtrului cu praf (este recomandabil a nu
se realiza o incrcare peste 2 mg praf total/filtru).
o Se vor preleva un numr de probe/schimb de lucru astfel inct sa se
acopere intreaga durata a schimbului de lucru.
o In vederea prelevrii probelor de aer, caseta cu filtru se monteaz in
prelevator, intr-un spaiu foarte curat, pentru a evita impurificarea i se vor
lua masuri in timpul transportului in scopul evitrii impurificrii.
o Pentru prelevarea corect a probelor, pompa se aeaz n spatele
lucrtorului n dreptul taliei prin fixare de o curea, astfel nct prelevatorul
s fie n dreptul zonei de respiraie, la aproximativ 30cm (la nivelul
reverului).
o Se pornete pompa i se ncepe colectarea probei. Se urmrete
periodic, dac pompa funcioneaz corect n timpul de prelevare a
probelor. In cazul in care sunt unele anomalii se recalibreaz pomp i se
anuleaz proba.
o In timpul prelevrii se verific periodic gradul de ncrcare al filtrului
pentru evitarea colmatrii sau supraincrcrii acestuia. Dac se constat
colmatarea sau supraincrcarea filtrului se oprete prelevarea i se
monteaz un alt filtru, dup care se continu prelevarea.
o Pentru a determina daca s-a produs o contaminare a probelor in
timpul prelevrii sau manevrrii filtrelor, pentru fiecare serie de 1-10 probe
se vor prepara doua filtre martor: acestea vor fi montate in casete de filtru,
vor fi transportate in teren, dar nu se va aspira aer prin ele. Cnd se
preleveaza peste 20 de probe, numarul de filtre martor trebuie sa
reprezinte 10% din numarul probelor.
o Se oprete pompa de prelevare dup timpul (prestabilit), se scoate
caseta cu filtru, se pune capacul de protecie i se codific.
Transport i depozitare
Este recomandat ca transportul filtrelor sa se fac in caseta in care acestea
au fost prelevate, avnd grij ca faa pe care s-au reinut particulele sa fie
orientat in sus. Cnd acest lucru nu este posibil, filtrele se vor extrage cu
grij din caseta in care au fost prelevate, cu ajutorul unei pensete si se vor
pune intr-o alta caseta de transport codificat.

97
7.
Mod de lucru
o nainte de recoltarea probelor, filtrele se condiioneaz timp de 24
de ore intr-un exsicator.
o Dup cntrirea iniial filtrele se pun n casetele port-filtru , care se
nchid cu capace de protecie pentru prevenirea contaminrii accidentale i
se codific.
o Filtrele se cntresc la balana analitic cu o precizie de 0,01mg.
o Dup prelevare, filtrele recoltate se transport n laborator unde se
pun n exsicator timp de 24 ore, dup care se cntresc la aceeai balan
la care s-a efectuat cntrirea iniial.
o nainte de fiecare cntrire se asigur c balana este la zero i se
face reglarea ei dac este necesar.
o Balana se calibreaz cu o greutate etalon- clasa M.
o n camera unde se efectueaz cntrirea la balana analitic,
temperatura i umiditatea relativ trebuie monitorizat, i meninute
constante la valorile 20 1C i 50 5 %.
Not: Este necesar ca ambele cntriri ale filtrului s fie realizate pe
aceeai balan, de ctre aceeai persoan i n aceleai condiii de mediu.
8.
o
Calcul concentraiei
Concentraia de pulberi se calculeaz cu urmtoarea formul:
c(mg / m 3 )
(m2 m1 ) (b2 b1 ) 1000

q t
(1)
unde:
m1
masa filtrului nainte de prelevare, n mg
m2
masa filtrului dup prelevare,n mg
b1
masa filtrului martor nainte de prelevare, n mg
b2
masa filtrului martor dup prelevare, n mg
q
debitul pompei in L/minut
t
durata prelevrii, n minute
Dac s-au efectuat mai multe prelevri pentru aceeai post
de munc se calculeaz concentraia medie ponderat cu
98
timpul din mai multe rezultate pariale cu urmtoarea

formul:
c(mg / m3 )
c1 t1 c2 t 2 ... cn t n
t1 t 2 ... t n
(2)
unde:
c1, c2, ..., cn sunt rezultatele pariale
t1, t2, ..., tn sunt duratele de expunere corespunztoare concentraiilor c1,
c2, ..., cn
o
Performantele metodei
Sensibilitatea metodei de 0,01 mg.
9.
Raport de analiz
Raportul de analiza trebuie sa conin urmtoarele indicaii:
numele si adresa unitii unde s-au efectuat msurtorile;
scopul procedurii de msurare;
locul de munc;
tipul de prelevare (individuala sau la punct fix) si identitatea
persoanei din a crei zone respiratorie a fost prelevat aerul (pentru o
prelevare individuala) sau amplasarea punctului de prelevare (pentru o
prelevare la punct fix);
metoda de analiza utilizata;
tipul pompei utilizate pentru prelevare si identificarea acesteia
(seria);
momentul prelevrii: ora de ncepere, terminare si durata de
prelevare;
debitul utilizat, exprimat n litri/minut;
volumul de aer prelevat la temperatura mediului ambiant, n litri;
orice interferenta cunoscuta si/sau evenimentele sau factorii
susceptibili a influenta apreciabil rezultatele;
descrierea conditiilor de munca, inclusiv conditiile de lucru din timpul
masuratorilor;
concentratiile expunerii profesionale (concentratii medii ponderate
n functie de timp, exprimate n mg/m3 de aer);
99
rezultatul compararii concentratiilor masurate cu valoarea limita;

numele analistului;
data analizei
10. Bibliografie
o
Health and Safety Executive Methods for the Determination of
Hazardous Substances MDHS Series HSE Books
o
NF X 43-259 Qualit de lair - Air des lieux de travail - Prlvement
individuel ou poste fixe de la fraction alvolaire de la pollution
particulaire - Mthode de sparation par cyclone. (1)
o
Echantillonnage individuel dùn aerosol par làppareil CIP 10, fiche H4
25,10/2002
o
Evaluarea expunerii profesionale la pulberi- ghid practic Rodica
Stnescu Dumitru, Ruxandra Carmen Artenie, Mircea Tat, 2002
o
Echantillonnage des aerosols Generalites- fiche HI , 15/03/2001
VI.METODE ANALITICE DE DETERMINARE A UNOR

INDICATORI BIOTOXICOLOGICI
VI.1. Determinarea acetonuriei

1.
Aceast metod se utilizeaz pentru determinarea acetonei n urina
muncitorilor expui profesional la aceton.
2.
Referine normative
La elaborarea metodei s-a inut seama de prevederile cuprinse n Metode
de investigare n domeniul medicinii muncii M.S. 1978.
3.
Principiu
Acetona da cu aldehida salicilic, n mediu alcalin, un produs de
condensare galben portocaliu colorimetrabil.
4.
o
Bisulfit de sodiu, solutie 0,5% (se prepara la ntrebuinare);
o
Hidroxid de potasiu, soluie 64%;
o
Aldehida salicilica, soluie 10% n alcool etilic 96% (se prepar la
ntrebuinare);
100
o
Acid sulfuric d=1,84, diluat 1:10 (in volume);
o
Standard stoc: se face prin cntrire o soluie de aceton n bisulfit
de sodiu, de ordinul a 1 mg aceton pe mililitru (sunt suficiente 2 3
picturi de aceton). Standard de lucru: se dilueaz cu apa standardul stoc
pentru a se obine o soluie cu 10 g aceton/mL.
o
Celule de difuzie;
o
Baloane cotate;
o
Eprubete gradate;
o
Pipete gradate;
o
Pipete automate reglabile.
5.
Aparatura
o
Recipiente pentru recoltarea urinii.
Aparatura analitica
o
Balana analitic;
o
Spectrofotometru UV/VIS;
o
Cuvete de sticl;
o
Baie de ap;
o
Etuva;
6.
Prelevare
Mod de prelevare
Determinarea se efectueaz pe urina, recoltat n timpul lucrului sau la
scurt timp dup expunere.
Transport i conservare
Probele se transport n cel mai scurt timp la laborator, pe perioada
transportului probele trebuie s fie nchise etan, pot fi conservate pentru
o perioad scurta de timp la 2-8C, se evit procesul de congelare
decongelare a probei.
7.
Mod de lucru
Difuziunea este realizat n celule de difuzie. n compartimentul central al
celulei se pune 1 mL soluie de bisulfit de sodiu (4.1.) iar n cel periferic se
pipeteaz succesiv: 1 mL urina, 5 mL ap i 1 mL acid sulfuric (4.4.). Se in
celulele 60 minute la etuva la 60C.
ntr-o eprubet gradat se reia cantitativ coninutul compartimentului
central splnd cu poriuni mici de soluie de bisulfit de sodiu. Se aduce
volumul la 6 mL.
101
Se pipeteaz ntr-o eprubeta 3 mL (corespunzator prob) se adaug 2 mL

hidroxid de potasiu (4.2.) i 1 mL aldehida salicilica (4.3.). Se amestec i se
ine 20 minute n baie de apa la 50C. Se rcete i se msoar extincia la
455 nm n cuveta de 1 cm, n compensaie avnd un blanc al reactivilor fr
coninut de aceton.
o
Calculul concentratiei
Se face utiliznd curba de etalonare.Se prepar cel puin cinci soluii
standard de lucru, utiliznd soluia standard stoc de aceton de 10 g/mL.
Acestea trebuie s acopere domeniul de concentraie cuprins ntre 5 25
g.
Soluiile standard de lucru i blancul se prelucreaz urmrind aceleai
etape, ca i probele (pct.7).
8.
o
Calcul
Concentraia acetonei n urin se calculeaz pe baza curbei de etalonare.
o
Selectivitate
La aceeai lungime de und pot interfera alte cetone.
o
Limita de deteie i intervalul de lucru
Limita de detecie analitic este de aprox. 0.3 g/ prob.
Intervalul de lucru: 1 150 g aceton / prob.
9.
Bibliografie
o
Metode de investigare n domeniul medicinii muncii 1978.
o
Elkins H. The Chemistry of Industrial Toxicology, New York, 1959
Metoda verificata n cadrul Laboratorului de Toxicopatologie i Medicina
Muncii CRSP Bucuresti
VI.2. Determinarea tioeterilor urinari

1.
Aceast metod se utilizeaz pentru determinarea tioeterilor n urina
muncitorilor expui profesional la substane electrofile.
2.
Referine normative

102
La elaborarea metodei s-a inut seama de prevederile cuprinse n The

applicability of the measurement of urinary thioethers Aringer L., Lof A.,
Elinder C.G. 1991
3.
Principiu
Tioeterii urinari sunt hidrolizai la gruparile SH care reacionez cu
Reactivul Ellman rezultnd un compus slab glbui spectrofotometrabil.
4.
o
N-acetil-L-cisteina sol. 1mM;
o
Tompon fosfat 0,6M, pH 7,1. Se prepar prin adugarea de 110ml
acid fosforic 0,6M la 890ml fosfat disodic 0,6M, sub control pH-metric;
o
Citrat de sodiu 1%;
o
Acetat de etil;
o
Reactiv Ellman: 5,5ditiobis-(2-nitrobenzoic acid), DTNB. Se prepar
prin dizolvarea a 0,4g de DTNB ntr-un litru de citrat de sodiu 1%. (Reactivul
este stabil o sptmn pstrat la ntuneric);
o
Acid clorhidric 4M;
o
Acid clorhidric 4M n tampon fosfat 0,4M pH 7,1 (preparat prin
adaugare de HCl la tampon fosfat 0,6M) ;
o
Ac id ascorbic 2mM;
o
Hidroxid de sodiu 4M;
o
Pipete automate reglabile, baloane cotate, eprubete gradate, sticlue
brune de 5ml, plnii de separare.
5.
Aparatura
o
Aparatura analitic
o
Balana analitic;
o
Spectrofotometru UV/VIS;
o
Cuvete de sticl;
o
Baie de ap;
o
Etuva;
o
Butelie de azot.
6.
Prelevare
Mod de prelevare
Determinarea se efectueaz pe urin, recoltat la sfritul schimbului de
lucru.
103

o perioad scurt de timp la -20C, se evit procesul de congelare
7.
Mod de lucru
Urina decongelat se centrifugheaz la 3000 x g timp de 10 minute. Se ia n
lucru un alicot de 5ml de supernatant de urin care se pipeteaz ntr-o
plnie de separare, se ajusteaz pH-ul la
1,6 1,9 cu HCl 4M i se
adaug 8 ml acetat de etil. Plniile se agit puternic timp de 10 min.Dup
separarea stratului organic ntr-o capsul, se repet procedeul de extracie
a stratului apos cu nc 8 ml de acetat de etil. Extractele de acetat se
evapor la sec folosind un evaporator rotativ sau pe baie de ap. Reziduul
rezultat este dizolvat n 2ml acid abscorbic 2mM.
Pentru hidroliz se ia 1 ml soluie de extract care se transfer n sticlue de
culoare nchis i se amestec cu 0,5ml NaOH 4M. Aerul din sticlu este
nlocuit cu azot prin trecerea unui curent din acest gaz. Sticluele bine
nchise sunt inute la 1000C timp de 60min. Ulterior probele sunt rcite
timp de 15 min i sunt neutralizate cu 0,5ml acid clorhidric 4M n tampon
fosfat. Un alicot de 0,5ml din soluia rezultat este transferat ntr-o alt
sticlu n care se introduc 0,3ml reactiv Ellman i 2ml tampon fosfat 0,6M.
Probele rezultate sunt inute la ntuneric timp de 30min i se citesc
absorbantele la spectrofotometru la 412nm.
8.
o
Calcul
Concentraia de tioeteri n urin se calculeaz pe baza curbei de etalonare.
Curba de etalonare se realizeaz cu N-acetil-L-cisteina de concentraii
cuprinse ntre 0,1 0,5mM.
Pentru fiecare prob de urin se determin i creatinina prin reacia Jaffe.
Concentraiile de tioeteri se exprim n mmol/mol creatinin.
o
Selectivitate
Metoda nu este specific, rezultatele pot fi influenate de ali factori
exogeni cum ar fi: fumatul, unele alimente ce conin sulf sau unele
medicamente.
o
Reproductibilitatea metodei, intervalul de lucru, limita de detecie
104
Coeficientul de variabilitate ntre determinrile efectuate n zile diferite

este de 10,53% iar, pentru cele din aceeai zi de 3,59%.
Intervalul de lucru: 0,1 0,5mM N-acetil-L-cistein.
Limita de detecie: 0,029mM N-acetil-L-cistein.
9.
Bibliografie
o
Aringer L., Lof A., Elinder C.G The applicability of the measurement of
urinary thioethers Int. Arch. Occup. Environ Health 1991,63: 341 - 346
o
Burgaz S., Bayhan A., Karakaya A.E. Thioether excretion of workers
exposed to bitumen fumes. - Int. Arch. Occup. Environ Health 1988, 60: 347
349
o
Antero A. M.D. Biological monitoring today and tomorow. Scand.
J. Work Environ. Health 1994, 20 special issue: 46 58
Metod adaptat n cadrul Laboratorului de Toxicopatologie i

Medicina Muncii CRSP Bucuresti
VI.3. Determinarea cromului n urin prin GF- AAS
1.
Cromul este ntre primele douzeci dintre cele mai abundente elemente n
scoara terestr i este larg rspndit n mediul nconjurtor. Niciodat nu
se gsete n stare metalic i foarte rar n stare hexavalent, cel mai larg
rspndit fiind n stare trivalent ca oxid n combinaie cu oxizii altor
metale. Apa i aerul conin n mod frecvent urme de crom. Media cantitii
de crom ingerate zilnic de aduli a fost determinat i este de aproximativ
25g.
Indicatorii propui pentru monitorizarea biologic a muncitorilor expui la
crom(VI) sunt: concentraia de crom n urin(cea mai important) i
eritrocite(se poate determina i cromul n firele de pr, dar rezultatele sunt
dificil de interpretat).
Ionii de crom trivaleni sunt rapid eliminai din snge. Ionii de crom
hexavaleni sunt reinui mai mult timp datorit ptrunderii n celulele roii
ale sngelui. Urmeaz eliminarea din snge, cromul fiind excretat n
principal n urin.
105
2.
Referine normative
WHO Guidelines -Biological monitoring of chemical exposure in the
workplace- volumul I, 1996
3.
Principiul metodei
Cromul n urin este determinat prin spectrometrie de absorbie atomic
cu cuptor de grafit
(GF-AAS) cu corectarea fundalului. Probele pot fi
analizate folosind metoda cu standard extern sau metoda ce utilizeaz
standard intern.
Pascal i Baily considera c efectul matriceal nu este destul de semnificativ
astfel nct s influeneze rezultatul final i prefera calibrarea folosind
standarde apoase. Probele de urin se dilueaz cu HNO3 conc. (la 10ml de
urin se adaug 0.1 ml de acid), iar msurarea absorbantei se face cu
ajutorul efectului Zeeman.
Proba de urin diluat este analizat direct, fr un tratament suplimentar.
Interferena cu matricea biologic poate fi uor eliminat prin folosirea
coreciei backgroundului(cu lampa de cuart cu halogen sau compensarea
Zeeman) i procedeul cu standard extern.
4.
Reactivi i aparatura
Trebuie folosii doar reactivi cu grad mare de puritate:
o
HNO3, conc.; HNO3 1% (v/v)
o
standard calibrare: 1g/l;
o
sol de lucru 20g/l
o
Mg(NO3) x 6 H2O sol. 0.1% n apa - modificator chimic
o
Sticlrie de laborator uzual.
Aparatele necesare sunt:
o
Spectrometru de absorbie atomic cu corectarea fundalului (efect
Zeeman sau lampa de cuart cu halogen);
o
cuptor de grafit;
o
lampa catodica specifica pentru crom;
o
tub de grafit;
o
nveli pirolitic.
5.
Prelevarea probelor
Probele de urin trebuie recoltate la sfritul schimbului de lucru, iar
subiectul trebuie s fie expus cel puin 2 ore pentru ca rezultatul s fie
semnifivativ pentru un schimb ntreg. Probele trebuie s fie recoltate dup
ce muncitorii i-au schimbat hainele, pentru a diminua contaminarea
106
probelor. Urina trebuie s fie recoltat n recipiente din polietilen i

polipropilen n soluii diluate de acid(se spal o data cu HNO3 1mol/L i
apoi cu ap ultrapur de dou ori, dup care se usuc).
6.
Conservare, transport i depozitare
Probele de urin ar trebui analizate ct mai curnd posibil dup colectare.
Este recomandat acidularea probelor cu HNO3 sau CH3COOH.
Conservanilor folosii pentru stabilizarea urinii trebuie s li se verifice
coninutul de crom nainte de utilizare. n cazul n care se supun analizei n
timp de 14 zile, probele pot fi refrigerate, altfel ele trebuie congelate.
Odata decongelate probele trebuie lucrate deoarece o noua congelare
presupune modificarea proprietilor probei.
7.
Procedeul de lucru
Probele de urin se aciduleaza ( la 10ml urin se adaug 0.1 ml acid azotic
conc. )
Se prepar soluia standard de lucru de conc. 20g/l .
Se pun n locurile corespunztoare blancul (HNO3 1%), soluia standard ,
modificatorul chimic i probele de urin.
Spectrometru de absorbie atomic:
Lungimea de und - 357,9nm
Corectarea fundalului - compensarea Zeeman sau lampa de cuart cu
halogen
Determinarea analitic - determinarea nlimii picului
Cuptor de grafit
Gaz inert - argon
Volumul injectat - 20L
Programul temperatur- timp n cazul cuptorului de grafit depinde de tipul
aparatului i sunt n meniul acestuia
Etapa
Uscare
Uscare
Piroliza
Atomizare
Curatire
Racire
Temperatura 0 C
90
120
1500
2500
2600
20
Timp rampa (s )
5
10
5
0
1
3

Timp retinere (s )
10
10
20
5
3
5
107
8.
Criterii analitice de baza
Limita de detecie este de aproximativ 0,1g/L (2 nmol/L);
Capacitatea de recuperare a metodei este de 96%;
9.
Surse de posibile erori
O atenie deosebit trebuie acordate pericolului contaminrii cu factori
exogeni.Din acest motiv se recomand curarea foarte strict a tuturor
recipientelor, eprubetelor i a sticlriei folosite.
Substanele chimice folosite trebuie s fie de nalt puritate; blancurile
reactivilor trebuie s fie msurate pentru fiecare set de probe.Blancurile
probelor din apa pur trebuie s fie stocate n containere speciale.
10. Alte metode analitice
Alte metode pentru determinarea cromului n materiale biologice sunt:
o
chemiluminescenta
o
spectrometrie de absorbie atomic combinat cu plasma cuplat
inductiv.
11. Interferene neanalitice
Solubilitate, valena i forma fizic (fum, praf, ceata) a cromului determin
absoria, distribuia, i eliminarea cromului din corp. Deci, muncitorii ce
lucreaz ntr-o larg varietate de domenii pot fi expui la concentraii
asemntoare de compui cu crom, dar, datorit factorilor de mai sus vor
excreta diferit cromul. Distribuia i eliminarea cinetic a cromului
acumulat sunt afectate de durata expunerii ntr-o zi de lucru la fel ca i de
perioada ct au fost expusi.
Determinarea concentraiei de crom n urin la sfritul zilei de munc pare
s fie un bun indicator de expunere la compuii solubili cu crom(VI); totui,
ionii de crom(III) contribuie probabil cel puin n aceeai msur la nivelul
cromului n urin.
12. Bibliografie
o
WHO Guidelines -Biological monitoring of chemical exposure in the
workplace- volumul I, 1996
o
Paschal DC, Bailey GG. Determination of chromium in urine with
graphite furnance atomic absorbtion spectroscopy using Zeeman
correction. Atomic Spectroscopy 1991;12:151-4.
o
Burguera J.L., Burguera M., Rondon C., Rodriguez L., Carrero P., Determination of chromium in urine by electrothermal atomic absorption
108
spectrometry using different chemical modifiers, J. Anal. Atomic

Spectrometry, 14, 821-825, 1999
Metod adaptat i verificat n cadrul Laboratorului de Toxicopatologie
i Medicina Muncii CRSP Bucureti
VI.4. Determinarea porfirinelor totale urinare

1.
Metoda se utilizeaz ca indicator de expunere n intoxicaiile cu plumb.
2.
Referine normative
La elaborarea metodei s-a utilizat ca material de referin metoda
Determinarea cromatografic-spectrofotometric a porfirinelor totale,
corespunzator tehnicii firmei FAR (Italia).
3.
Principiul metodei
Porfirinele se absorb pe raina anionic coninut n dou coloane
cromatografice.
Uro- i copro-porfirinele sunt luate mpreun din prima coloan i dup
splarea cu tampon acetat se separ uro-porfirinele din a doua coloan.
Porfirinele se determin cantitativ prin aplicarea formulei lui Allen.
4.
o
Acid hidrocloric, 3mol/l (Reactiv 1)
o
Tampon acetate, 5mol/l (Reactiv 2)
o
Carbonat de sodiu ,p.a
o
Acid acetic glacial.
5.
Aparatura
o
Spectrofotometru cu selectarea exacta a lungimilor de und
necesare msurrii absorbantei porfirinelor (380nm, 400 407nm,
430nm).
o
Baie de ap.
6.
Prelevarea probelor
Se colecteaz urina din 24 ore i se pstreaz n spaiu ferit de lumina(pn
la analiz). Se recomand efectuarea analizei din urina proaspt recoltat
sau cel mult pn la trei zile, dac este condiionat la pH 6 9.

109
7.
Modul de lucru
o
Determinarea porfirinelor totale prin metoda cromatograficspectrofotometric.
Se msoar volumul de urin colectat n 24ore.
Se face o soluie de carbonat de sodiu 1% (n urin).
Se pstreaz proba, astfel pregtit la temperatura camerei, la lumin, 24
ore, nainte de analiza propriu-zis.
Proba astfel pregtit este stabil o sptmn.
Se corecteaz pH-ul urinar la pH = 5 cu acetid acetic i se fierbe, 30 minute,
pe baie de ap.
o
Analiza cromatografic
Se rup capetele coloanelor cromatografice.Se las s se scurg total lichidul
coninut.
Pentru fiecare prob de urin sunt necesare dou coloane cromatografice.
Separarea consta n pipetarea n dou coloane dup modelul:
Urina
Reactiv 2
Apa distilata
Coloana 1
(copro+uro)
2,0 ml
10,0 ml
Coloana 2
2,0 ml
20,0 ml
2,0 ml
Se ndeprteaz eluatul
Fiecare coloan se aeaz deasupra unor eprubete. Se pipeteaz n fiecare

coloan cte 5,0ml Reactiv 1. Eluatul se colecteaz n eprubet.Se
pipeteaz nc cte 5,0ml Reactiv 1 i se colecteaz eluatul. Eluatul final,
corespunztor fiecarei coloane cromatografice trebuie s fie de 10,0ml.
Se agit eprubetele nainte de msurarea spectrofotometric.
Se citete densitatea optic a eluatelor (10ml) la 380nm i maxime de
absorbie ntre
400 407nm i la 430nm, fa de Reactivul 1
(corecia Allen).
Observaii:
Datorit prezenei reactivilor 1 i 2, carbonatul de sodiu cu care s-a tratat
urina poate produce CO2, care apare sub forma unor bule de gaz n
interiorul coloanei. Acestea se pot elimina nclinnd uor coloana
cromatografic.
110
8.
Calculul i exprimarea rezultatelor
o
Calculul i exprimarea rezultatelor pentru metoda cromatograficspectrofotometric.
Se calculeaz diferena ntre valorile absorbantei (DA) msurate, aplicnd
formula:
DA = 2A(400 407nm) [A(380nm) + A(430nm)]
unde
A==valoarea absorbantei.
Coloana 1
Porfirine totale (g/l) = DA x 3857
g porfirine totale/l x Volumul urinar/24h = g porfirine totale/24h
Coloana 2
Uroporfirine (g/l) = DA x 4266
g uroporfirine/l x Volumul urinar/24h = g uroporfirine /24h
coproporfirine (g/l) = porfirine totale (g/l) uroporfirine (g/l)
g coproporfirine/l x Volumul urinar/24h=g coproporfirine/24h.
o
Valori de referin
porfirine totale < 220 g/24ore
coproporfirine 35 150 g/24ore
uroporfirine 15 50 g/24ore
o
Msurarea
Calculul i exprimarea rezultatelor prin aplicarea metodei florimetrice.
o
Sensibilitatea metodei
Spectrofotometric: 150 g/l
o
Linearitatea metodei : pn la 13 mg/l.
9.
Observaii
n unele cazuri,eliminarea coproporfirinelor nu se poate face n totalitate,
datorit caracteristicilor structurale, astfel nct o parte din acestea vor fi
eluate mpreun cu uroporfirinele.
Metoda verificata in cadrul Laboratorului de Toxicopatologie i Medicina
Muncii CRSP Bucureti

111
VI.5. Determinarea acidului delta aminolevulinic (DAL) urinar

1.
Metoda se utilizeaz ca indicator de expunere n intoxicaiile cu plumb.
n testele screening utilizate pentru evidenierea intoxicaiei cu plumb, la
muncitorii expui profesional, se recomand asocierea determinrii
acidului delta-aminolevulinic (DAL) cu porfobilinogenul (PBG) urinar.
2.
Referinte normative
La elaborarea metodei s-a utilizat ca material de referina metoda
Determinarea acidului delta aminolevulinic urinar corespunztoare
tehnicii firmei FAR (Italia).
3.
Principiul metodei
Plumbul inhib activitatea DAL, n biosinteza hemoglobinei, cataliznd
condensarea a dou molecule de DAL cu formarea unei molecule de
porhobilinogen (PBG).
La sinteza hemoglobinei particip o mic cantitate de DAL, restul fiind
eliminat urinar, creterea acesteia peste nivelul normal fiind un indicativ de
expunere la plumb.
Determinarea DAL-ului, eliminnd interferenele date de PBG se face prin
trecerea probei de urin printr-o coloan cromatografic cu rasina
schimbtoare de ioni, anionic; eluatul obinut se dozeaz cantitativ printro reacie Ehrlich.
4.
4.1. Acetat de sodiu (Reactiv 1)
4.2. Acetilacetona (Reactiv 2)
4.3/A DMAB (predozat_ - (flacon)
4.3/B acid acetic
4.3/C acid percloric
4.4. Standard de acid delta aminolevulinic (0,2g/l)
4.5. Microcoloane cromatografice
5.
Aparatura
o
Baie de ap (pentru 1000C)
o
Spectrofotometru sau filtru fotometric de 553nm (52o 570nm).
6.
Prelevare
Se colecteaz urina din 24 ore ,peste care se adaug acid clorhidric
concentrat i se corecteaz pH-ul urinii la 6.
112
Se agit bine, se msoar volumul de urin i se pstreaz la temperaturi

cuprinse ntre 2-80C.
Acidul delta-aminolevulinic este stabil cel mult o lun, n urina colectat, cu
condiia de a fi pstrat la t=2-80C i pH-urinar <6.
Pregtirea reactivilor
o
Reactivul 3 (3/A + 3/B)
Se dizolv coninutul flaconului de reactiv 3/A ntr-un flacon de reactiv 3/B
i se amestec bine pnp la solubilizarea complet. Reactivul obinut este
stabil 6 luni, pstrat la temperaturi cuprinse ntre 2-80C.
o
Reactivul Ehrlich (3 + 3?C)
Se adaug 1,9ml de reactiv 3/C la 10ml Reactiv 3 i se amestec bine, pn
la obinerea unei soluii omogene. Soluia obinut este suficient pentru 5
determinri. Dac este necesar, se va prepara o cantitate mai mare.
Fiecare microcoloan cromatografic necesit 2ml de reactiv. Stabilitate: 6
ore la temperatura camerei.
7.
Mod de lucru
o
Analiza cromatografic
Se desface microcoloana i se rupe manual captul prin care se elimin
eluatul. Se las s se scurg tot lichidul din interiorul coloanei.
Se pipeteaz n coloan urmatoarele:
Apa distilat
Urina
Apa distilat
10,0ml
1,0ml
20,0ml
Se elimin coninutul
Se elimin coninutul
Se elimin coninutul
Se aeaz microcoloana peste o eprubet goal i se pipeteaz:

Reactivul 1
10,0ml
Se colecteaz eluatul DAL
o
Analiza colorimetric
Se amestec bine eluatul colectat n eprubet i se aleg eprubete pentru:
R/B blancul reactivilor
S proba
ST standard

113
Eluat DAL
Reactiv 4
Reactiv 1
Reactiv 2
B reactiv
2,0ml
0,04ml
Proba
2,0ml
0,04ml
Standard
0,02ml
1,98ml
0,04ml
Se agit eprubetele i se incubeaza 10 minute n ap, la fierbere.

Se rcesc sub jet de ap rece, se agit bine i se continu analiza prin
pipetarea n trei noi eprubete, asfel:
Solutie preincubata
Reactiv Ehrlich
B reactiv
1,0ml
1,0ml
Proba
1,0ml
1,0ml
Standard
1,0ml
1,0ml
Se amestec i se incubeaz la temperatura camerei pentru 15 minute.

Probele se citesc n intervalul de 5 10 minute, prin citirea absorbiei
probei i standardelor faa de blancul reactivului.
Reacia colorimetric este total n maxim 15 minute i stabil pentru 15
minute, la lungimea de unda = 553(520 570nm).
8.
Acidul delta-aminolevulinic (DAL) se calculeaz astfel:
mg/100ml = proba/ standard x 2
mg DAL/100ml x 10 x Vurinar = mgDAL/24h.
= extinctia (valoarea absorbtiei spectrofotometrice)
Vurina = volum urinar in 24ore.
o
Valori de referin
Acid delta aminolevulinic pn la 0,60mg/100ml
o
Grade de intoxicaie cu plumb, exprimate prin dozarea DAL urinar.
DAL (mg/100ml)
Gradul de intoxicaie
Pn la 0,6
Absent
0,6 1,5
Moderat
1,5 3,00
Mare
3,00 6,00
Foarte mare
mai mult decat 6,00
Critic
114
o
o
Sensibilitatea metodei este de 0,1mg/100ml.

Fidelitatea metodei este stabilit pn la 6mg/100ml.
Metoda verificat n cadrul Laboratorului de Toxicopatologie i Medicina

VI.6. Determinarea acidului hipuric i acidului metilhipuric

1.
Aceast metod se utilizeaz pentru determinarea nivelului de acid hipuric
i acid metilhipuric la persoanele expuse profesional la toluen i respectiv
xileni.
2.
Referine normative
Determinarea cantitativ a acidului hipuric i a acidului metilhipuric n
urin - FAR S. r. l Italia
3.
Principiu
Acidul hipuric, acidul meta i para- metilhipuric formeaz cu clorura de
benzensulfonil n piridina un complex colorat care poate fi determinat
colorimetric.
4.
o
Reactiv 1: piridina
o
Reactiv 2: clorura de benzensulfonil
o
Reactiv 3: acid hipuric standard 500 mg/l
o
Alcool etilic 95%
o
Cloroform
o
Sticlrie de laborator
Nota: reactivii a, b si c se pstreaz nchii ermetic la temperaturi ntre
2 i 80C.
5.
Aparatura
o
Centrifuga
o
Spectrofotometru VIS
6.
Prelevare
Se colecteaz urina din 24 ore ntr-un recipient care conine 45 ml
cloroform.
115
7.
Mod de lucru
Se centrifugheaz 2-3 ml urin la 3000 rot/min timp de 5 min.
Probele sunt stabile cel puin o sptmn la 2-80C.
Pentru fiecare prob se pipeteaz n cte o eprubeta:
o
0,25 ml proba
o
0,25 ml reactiv 1
o
0,10 ml reactiv 2
Pentru standard se pipeteaz ntr-o eprubet:
o
0,25 reactiv 3
o
0,25 reactiv 1
o
0,10 reactiv 2
Se amestec i se las 30 min.
Se adaug 5,0 ml etanol 95% att n probe ct i n standard.
Se amestec, apoi se centrifugheaz 5 min. la 2500 3000 rot/min..
Se citete densitatea optic a probelor i a standardului faa de etanol 95%
la o lungime de und cuprins ntre 400 i 440 nm, de preferint la 410 nm.
8.
Mod de calcul
Acid hipuric ( mg/l ) = ( Aproba / Astandard ) x 500
9.
o
o
o
10.
o
o
11.
o
Performane
Liniaritate metoda este liniar pn la 4 g/l
Sensibilitatea metodei: 0,1 g/l
Coeficient de variabilitate: 3,7%
Limite biologice tolerabile
Acid hipuric 2 g/l
Acid metilhipuric 3 g/l
Bibliografie
K. Tomokuni si M. Ogata, Clin. Chem. 18, 349 ( 1972 )
Metoda verificata n cadrul Laboratorului de Toxicopatologie i Medicina


116
VI.7. Determinarea acidului mandelic

1.
Domeniu de aplicare
Aceast metod se utilizeaz pentru determinarea nivelului de acid
mandelic la persoanele expuse la stiren.
2.
Referine normative
Metode de investigare n domeniul Medicinii Muncii, 1978
3.
Principiu
Acidul mandelic, extras din urina cu eter, reacioneaz cu un amestec de
formaldehid i acid sulfuric formnd un complex galben brun, care
poate fi determinat colorimetric.
4.
Reactivi si materiale
o
Eter etilic
o
Acid clorhidric, soluie 1N
o
Reactiv de culoare se adaug, amestecnd, un volum formaldehid
soluie 40% n 100 volume acid sulfuric d 1,84 ( se face numai cantitatea
necesar pentru ziua curent deoarece nu se conserv)
o
Standard stoc. Se dizolva 100 mg acid mandelic n 100 ml ap.
o
Standard de lucru: se dizolv standardul stoc 1/10 cu apa; conine
100 mg acid
mandelic/litru.
o
Sticlrie de laborator
5.
Aparatura
Spctrofotometru VIS
6.
Prelevare
Se recolteaz urina din 24 ore, sau nainte i dup expunerea probabil la
stiren; probele se pstreaz la frigider.
7.
Mod de lucru
o
Extracia
ntr-o plnie de separare se pipeteaz 1 ml urin, 2 picturi acid clorhidric
1N i 5 ml eter etilic; se scutur 5 min i se las s se separe; se scurge faza
apoas n a doua plnie de separare n care se adaug 2 ml eter i se
scutur 30 sec.; se elimin faza apoas.Extrasele eterice din cele 2 plnii se
reunesc ntr-o eprubet; se evapor eterul innd eprubeta ntr-o baie de
ap nclzit la maxim 550C.
o
Reacia de culoare
117
n eprubeta cu reziduul uscat se adaug 4 ml reactiv de culoare, lsnd s

se scurg ncet reactivul pe pereii eprubetei pentru a se relua tot
reziduul.La fiecare serie se face i un standard cu 1 ml standard de lucru,
tratat la fel ca probele de urin.Se amestec prin rotire i dupa 30 min. se
msoar extincia probelor ( EP ) i a standardului ( ES ) faa de un blanc cu
reactiv de culoare, la 440 nm.
8.
Mod de calcul
Avnd standardul de lucru cu 100 mg/l,
mg acid mandelic / litru urina = 100 EP / ES
Nota: - dac se gsesc concentraii mai mari de 400 mg/l se repet
determinarea cu proba de 0,5 ml urin.
9.
Performane
Limita de detecie este de 0,3 mg/l
10. Limite biologice tolerabile:
La sfritul schimbului de lucru 800 mg/g creatinin
La nceputul schimbului urmtor 300 mg/g creatinin
11. Bibliografie
o
H. Ohtsuhi, M. Ikeda Amer. Industr. Ass. J. Med. 27 150, 1970
Muncii CRSP Bucuresti
VI.8. Determinarea fenolilor urinari

1.
Aceast metod se utilizeaz ca test screening pentru monitorizarea
biologic a expunerii la benz i compui fenolici. Determinarea fenolilor n
urin este i un mijloc de diagnostigare n hipertiroidism, diabet zaharat
cauzat de hipertiroidism i a tumorilor produse de catecholamine.
2.
Referine normative
La elaborarea metodei s-a inut seama de prevederile cuprinse n metoda
de determinare cantitativ colorimetric a compuilor fenolici din urina
elaborat de FAR S.R.L.
3.
Principiu
118
Compuii fenolici condenseaz cu 4-aminoantipirina i oxideaz cu

fericianura alcalin rezultnd un complex rou care se poate msura
fotometric.
4.
o
4 - aminoantipirina
o
fericianura
o
soluie de extracie
o
Standard fenol 500 mg/L (Standardul se dilueaz n raport 1:10 cu
apa distilat obinndu-se un standard cu concentraia de 50 mg/L;
stabilitatea acestei soluii este de o lun la 2 8 C.)
Aceti reactivi sunt stabili pn la data specificat pe etichet i se
pstreaz n recipiente bine nchise la 2 8 C.
o
Sticlrie de laborator ( eprubete, pahare Berzelius, pipete automate,
pahare Erlenmeyer, pipete gradate.)
5.
Aparatura
Aparatura analitica
o
Centrifuga
o
Spectrofotometru UV/VIS ( = 450 500 nm)
6.
Prelevare
o
Mod de prelevare
Determinarea se efectueaz pe urina, recoltat n timpul lucrului sau la
scurt timp dup expunere.
o
o perioad scurt de timp la 2-8C, se evita procesul de congelare
7.
Mod de lucru
Se pipeteaz n trei eprubete de centrifug astfel:
Blancul reactivilor
Proba
Standard
Apa distilat
0.2 mL
Proba
0.2 mL
Reactiv 4.4 diluat
0.2 mL
Reactiv 4.1.
1.5 mL
1.5 mL
1.5 mL
119
Se agit energic i apoi se adaug:

Reactiv 4.2.
1.5 mL
1.5 mL
1.5 mL
Se agit i se las n repaus 3 minute, dup care se adaug:
Reactiv 4.3.
3.5 mL
3.5 mL
3.5 mL
Se agit energic i apoi se centrifugheaz la 2500 3000 rotatii/minut timp
de 5 minute. Se citete densitatea optic a supernatantului fa de blancul
reactivilor.
8.
o
Calcul
Concentraia de fenoli n urin (n mg/L) se calculeaz astfel:
Fenoli (in mg/L) = (A proba/ Astandard) x 50
unde,
Aproba = densitatea optica a probei
Astandard = densitatea optica a standardului
50 este concentraia reactivului 4.4 diluat
Limita biologic tolerabil este 50 mg/L.
o
Limita de detecie analitic este de aprox. 0.1 mg/ L.
Metoda este liniar pn la 200 mg/L
9.
Bibliografie
o
Y. Yamaguchi et C. Hayashi, Clin. Chem., 23/11, 2151 2154 (1977)
VI.9. Determinarea carboxihemoglobinei n snge

1.
Aceast metod se utilizeaz pentru determinarea carboxihemoglobinei n
snge ( metabolitul oxidului de carbon).
2.
Referine normative
La elaborarea metodei s-a inut seama de prevederile cuprinse n metoda
de determinare cantitativ colorimetric a carboxihemoglobinei elaborat
de FAR S.R.L.
120
3.
Principiu
Proba de snge este incubat cu ditionit de sodiu care reduce
oxihemoglobina i methemoglobina, dar nu carboxihemoglobina. Pe
acast cale se elimin interferena acestor componente. COHb% se
determin spectrofotometric folosind calculul tip Rodkey simplificat, care
este obinut prin soluia unui sistem cu dou ecuaii ce reprezint absorbia
molar a Hb i COHb aplicnd legea Lambert-Beer.
4.
o
Tampon fosfat pH=6,85
o
Ditionit de sodiu
o
Tampon fosfat 0,1 molar. Se transvazeaz reactivul 4.3. n sticlua cu
reactiv 4.2., se amestec i este gata de lucru.
o
Sticlarie de laborator ( eprubete, pahare Berzelius, pipete automate,
pahare Erlenmeyer, pipete gradate.)
5.
Aparatura
o
Eprubete cu anticoagulant
Aparatura analitica
o
Spectrofotometru UV/VIS ( = 350 500 nm)
6.
Prelevare
o
Mod de prelevare
Determinarea se efectueaz pe snge total, recoltat spre sfritul
schimbului de lucru. Recoltarea se face n zona locului de munc.
o
o perioad scurt de timp la 2-8C, se evita procesul de congelare
7.
Mod de lucru
Se pipeteaz ntr-o eprubet:
Reactiv 4.1.
3000l
Proba
25L
Se amestec prin rsturnare de doua trei ori. Se las aproximativ 5 minute
pentru liza celular complet.
Determinarea de % COHb:
121
Se pipeteaz ntr-o eprubeta urmatoarele:

Reactiv 4.2. preparat
1150L
Proba hemolizata
100L
Se amestec cu atenie prin rsturnare i se incubeaz la temperatura
camerei timp de 10 minute. Se citete absorbanta la doua lungimi de und
respectiv 420nm i 432nm fa de reactivul 4.2. preparat.
8.
o
Calcul
Se calculeaz raportul Ar =A420/A432
Valoarea obinut se introduce n urmatoarea ecuaie:
%COHb=[1-(ArxF1)]x100%/[Arx(F2-F1)-F3+1]
unde,
F1=raportul absorbiilor molare Hb432/Hb420
F2= raportul absorbiilor molare COHb432/Hb420
F3= raportul absorbiilor molare COHb420/Hb420
Dac spectrofotometru este calibrat putem s lum n consideraie
urmtoarele valori ale absorbiilor molare publicate de Rodkey pentru
hemoglobina uman:
Lungimea de und
420nm
432nm
AHb
0,988
1,317
ACOHb
1,970
0,473
F1=1,3330
F2=0,4787
F3=1,9939
9.
Bibliografie:
o
E. Beutler et C. West, Clin. Chem., 30(6), 871-874(1984)
o
G. Heinemann, K. Loschenkohl et H. Schivelbein, J. Clin. Chem. Clin.
Biochem., 17(10), 647-651(1979).
122
VI.10. Determinarea acidului glicolic n ser

1.
Aceast metod se utilizeaz pentru determinarea nivelului de acid glicolic
la persoanele expuse profesional la etilenglicol .
2.
Referine normative
La elaborarea metodei s-a inut seama de prevederile cuprinse n
Colorimetric and gas chromatographic procedures for glycolic acid in
serum : the major toxic metabolite of ethylene glycol Fraser A.D., MacNeil
W.- Clinical Toxicology, 31(3), 397-405, 1993.
3.
Principiu
Acidul glicolic reacioneaz cu acidul cromotropic, n prezena acidului
sulfuric, formnd un complex rou-violet colorimetrabil.
4.
o
Standard acid glicolic 25mmol/l . Se dizolv 200 mg acid glicolic n 10
ml ap distilat. 5ml din aceast soluie se dizolva n 50 ml ap distilat (25
mmol/l).
o
Acid cromotropic
o
Acid sulfuric concentrat - 100 mg acid cromotropic se dizolv n 50 ml
acid sulfuric concentrat.
o
Acid tricloracetic 5%
o
Sticlrie de laborator (eprubete, pahare Berzelius, pipete automate,
pahare Erlenmeyer, pipete gradate).
5.
Aparatura
o
Centrifuga
o
Baie de ap
o
Spectrofotometru VIS
6.
Prelevare
Determinarea se efectueaz pe ser nehemolizat . Sngele recoltat prin
puncie venoas este centrifugat la 3000 rot/min timp de 10 min i se
separ serul.
7.
Mod de lucru
Se pun cte 0.5 ml de ser, standard i ap distilat (pentru blanc) n
eprubete. n fiecare eprubet se adaug 0.5 ml acid tricloracetic 5%, se
amestec i se centrifugheaz la 3000 rot/min.
123
Se transfer cte 0.1 ml din supernatant n alte eprubete i se adaug cte

1.0 ml de acid cromotropic. Se amestec i se introduc eprubetele n baie
de ap la fierbere pentru 10 min. Dup rcire se adaug 9.0 ml ap distilat
, se agit i se citete extincia la 580 nm.
Curba de etalonare se fcea vnd concentraii ntre 1 i 20 mmol/l
8.
Mod de calcul
Concentraia acidului glicolic n ser se calculeaz pe baza curbei de
etalonare.
9.
Performante
Liniaritate metoda este liniar n domeniul 0 25 mmol/l
Limita de detecie: 0.09 mmol/l;
Limita de cuantificare: 0.185 mmol/l
Exactitate sau acuratee: recuperare ntre 88% - 94%.
10. Limite biologice tolerabile
Conform literaturii de specialitate [3]: concentraie acid glicolic n ser < 1.0
mmol/l nici un efect advers asupra sntii.
Laboratorul a efectuat determinri de acid glicolic seric la 57 de persoane
sntoase clinic i a obinut urmtoarele:
o
concentraia medie 0.26 mmol/l ;
o
11 probe ( 19.2%) au avut concentraii sub limita de cuantificare;
o
celelalte concentraii au variat ntre 0.19 i 0.55 mmol/l.
11. Bibliografie
o
Fraser A.D., MacNeil W -Colorimetric and gas chromatographic
procedures for glycolic acid in serum : the major toxic metabolite of
ethylene glycol Clinical Toxicology, 31(3), 397-405, 1993.
o
Carstens J., Csanady G.A., Faller T.H., Filsen J., G. - Human inhalation
exposure to ethlene glycol. Archi. Toxicol., 77(8), 425-432, 2003.
o
Porter W. H., Rutter P. W., Bush B. A., Pappas A.A., Dunnington J.E.
Ethylene glycol toxicity: the role of serum glycolic acid in hemodialysis. J.
Toxicol. Clin. Toxicol. 39(6), 607-615, 2001.
o
Hess R., Bartels M. J., Pottenger L. H. - Ethylene glycol: an estimate
of tolerable levels of exposure based on a review of animal and human
data - Archi. Toxicol., 78(12), 671-680 2004.
Metoda adaptat i verificat n cadrul Laboratorului deToxicopatologie i
Medicina Muncii CRSP Bucureti
124
VII.CONCLUZII
n aceast lucrare sunt prezentate datele necesare investigrii din

punct de vedere toxicologic a expunerilor profesionale la noxe.
Evaluarea expunerii profesionale la noxe chimice presupune att
investigare a condiiilor de mediu de munc (cunoaterea proceselor
tehnologice, alegerea noxelor, prelevarea probelor de aer, tipurile de
metode analitice utilizate n toxicologie, interpretarea rezultatelor, etc.) ct
i evaluarea biologic a expunerilor la substane chimice, respectiv
comportarea toxicelor n organism, principiile monitorizrii biologice a
expunerii la substane chimice care cuprind criteriile de selectare a testelor
biologice, modul de interpretare a rezultatelor, influena unor factori
extraprofesionali cum ar fi alcoolul i fumatul asupra toxicitii
substanelor chimice etc.
Pentru realizarea dezideratelor de mai sus, n lucrare sunt prezentate
metodele analitice de determinare a unor ageni chimici i a pulberilor n
aerul zonelor de munc ct i a unor indicatori biotoxicologici.
n concluzie, considerm c aceast lucrare poate fi utilizat ca un
ghid cu informaii necesare evalurii expunerilor profesionale la noxe.

125
BIBLIOGRAFIE
1.
Antero A . - Biological monitoring today and Tomorow - Scand . J . Work
Environ. Health 20, 1994 .
2.
Baselt R. C. - Biological monitoring methods for industrial chemicalsBiomedical Publication Davis , California 1980 .
3.
Bernard A. , Lauwerys R. - Biological monitoring of exposure to
industrial chemicals , Arch. Med. Prof. 50 ( 1 ) , 1989 .
4.
Bernstein J.A., Alexis N., Barnes C., Bernstein L., Nel A., Peden D., Health effects of air pollution, J. Allergy Clin Immunol, 114, 2004.
5.
Boeniger M. F. , Lowry L. K . , Rosenberg J . - Interpretation of urine
results used to assess chemical exposure with Emphasis on Creatinine
Adjustments : A Review - Am . Ind . Hyg. Assoc . J . 54 ( 10 ) , 1993 .
6.
Cotrau M. si colab. - Toxicologie , Ed. Didactica si Pedagogica Bucuresti ,
1991 .
7.
Jakubowski M., Trzcinka Ochocka M., - Biological Monitoring of
Exposure: Trends and Key Development, J. Occup. Health, 47, 22-48, 2005.
8.
Lauwerys R. - Industrial Chemical Exposure : Guidelines for Biological
Monitoring - Biomedical Publication , Davis , California , 1993.
9.
Leman A.,M., Omar A. R.,Yusof M. Z. M.,- Monitoring of Welding Work
Environment in Small and Medium Industries , IJRRAS, 5(1), 18-26,2010.
10. Mogos G. , Sitcai N . - Toxicologie clinica , vol. l , Ed. Medicala , Bucuresti
, 1988
11. Niculescu T., - Caiet de Medicina Muncii , vol. l ,ll, lll Ed. Medmun , Buc.
2003.
12. Niculescu T., - Manual de Patologie Profesionala , vol. 1 si ll , Ed.
Medicala , Bucuresti , 1985 .
13. NIOSH - Manual of Analyrical Methods , 4th Edition , 1998 .
14. Omae K., Takebayashi T., Sakurai H.,- Occupational exposure limits
based on biological monitoring: the Japan Society for Occupational Health,
Intern. Arch. Occup. Environ. Health 72(4), 271- 273, 1999.
15. OMS - Biological Monitoring of Chemical Exposure in the Workplace ,
vol. 1 si 2 , 1996
16. Tat M. - Medicina Muncii - orientare, patologie si practica , Ed. Viata
Medicala Romaneasca , 1999.
17. Voicu V. - Toxicologia clinca , Ed. Albatros , Bucuresti , 1997 .
18. xxx Ministerul Sanatatii , Institutul de Igiena si Sanatate
Publica,Bucuresti -Caiet metodologic nr.2, 1987.
126

Ghid Toxicologie Industriala PDF

Încărcat de

Informații document

Titlu original

Drepturi de autor

Formate disponibile

Partajați acest document

Partajați sau inserați document

Opțiuni de partajare

Vi se pare util acest document?

Este necorespunzător acest conținut?

Drepturi de autor:

Formate disponibile

Ghid Toxicologie Industriala PDF

Încărcat de

Drepturi de autor:

Formate disponibile

MINISTERUL SNTII

INSTITUTUL NAIONAL DE SNTATE PUBLIC

Dr. Corneliu NEAGU

ASPECTE GENERALE DE TOXICOLOGIE INDUSTRIALA

Sub coordonarea Centrului Naional de Monitorizare a Riscurilor din Mediul

V. DETERMINAREA PULBERILOR N AERUL ZONELOR DE MUNC

Ghid privind aspecte generale de Toxicologie Industriala

Ghid privind aspecte generale de Toxicologie Industriala

II.INVESTIGAREA CONDIIILOR DE MEDIU DE MUNC

II.2.Identificarea noxelor la locul de munc

analitic (reacie chimic, interferena n determinarea uneia sau alteia

Literatura de specialitate din ultimul timp susine i ncearc s

sau n jurul concentraiilor maxime admise, valori ce sunt trecute n mod

II.3.Prelevarea probelor la locul de munc

c) nalimea la care se recolteaz prizele de aer pentru cercetri

concentraii i diferenele vor fi cu att mai semnificative cu ct sursa de

modern, mecanizat i automatizat construit n aer liber, deoarece

ordinul a 15-20 de probe adic attea nct s permit o caracterizare

Vmn= volumul minim de aer necesar determinrii probei exprimat n litri;

- metoda de recoltare: aerul de la locul de munc, care conine toxicul

pentru msurarea debitului sau a volumului de aer (debitmetre,rotametre,

II.4.Determinarea analitic a noxelor

II.5. Exprimarea concentraiilor toxicelor profesionale

masa moleculara a toxicului profesional

II.6. Interpretarea rezultatelor

ori care au acelai mecanism de aciune. n aceste locuri de munc,

C1,C2..Cn = concentraiile gsite n aer pentru fiecare nox

III. EVALUAREA BIOTOXICOLOGIC A PERSONALULUI

Monitorizarea biologic a expunerii este de obicei rezervat pentru

III.1.Ptrunderea substanelor toxice n organism

Acestea sunt ci de ptrundere indirecte sau mediate. n afara acestor ci

Att ftul ct i copilul mic nu au sistemul enzimatic bine format astfel

agentul chimic poate ptrunde prin piele i trecnd n snge i

Ghid privind aspecte generale de Toxicologie Industriala

Ptrunderea substanelor pe alte ci indirecte

III.2.Fixarea, distribuia i depozitarea toxicelor profesionale

celulele sistemului reticulo-endotelial joac rol n fagocitoz i

III.3. Biotransformarea toxicelor profesionale

Fig. 1. Metabolismul calitativ (dupa Williamas)

Reaciile din faza I de metabolizare sunt reacii de oscilare reducere

Ghid privind aspecte generale de Toxicologie Industriala

oxidaze sau hidrolaze (introduce gruparea OH n ciclurile aromatice

n faza a II-a de metabolizare, gruprile reactive preexistente sau

care acidul acetic se metabolizeaz la CO2 prin intermediul acetilcoenzimei

Ghid privind aspecte generale de Toxicologie Industriala

III.4. Eliminarea in organism

strbat prin membrane alveolocapilare i, ajungnd la alveole, sunt

III.5. Determinarea substanelor chimice sau a metaboliilor

La recoltarea probelor de urin, cele foarte diluate sau foarte

III.6 Criterii de selectare a testelor biologice

important care trebuie luat n consideraie cnd se selecteaza testul de

III.7. Interpretarea rezultatelor

alcool i o multitudine de alte efecte nefaste cum ar fi: accidentele,

etanolul este oxidat n prezenta alcooldehidrogenazei

bogate n grsimi i deci ntrzie eliminarea acestora din organism i

III.8 Aspecte analitice i etice

n final, trebuie luat n consideraie faptul c n monitorizarea

IV.METODE ANALITICE DE DETERMINARE A UNOR AGENI

Pentru concentraii mai mari de metanol sau pentru umiditate relativ

IV.2. Determinarea aerosolilor alcalini

absorbitoarele).Cordoane flexibile pentru conectarea absorbitorului la

extinciei probei se raporteaz la curba etalon pentru a obine cantitatea

IV.3. Determinarea acidului clorhidric