Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
Biotehnologia Obtinerii Acidului Acetic
Biotehnologia Obtinerii Acidului Acetic
Profesor coordonator:
Sorin Chiru
Student:
Anul universitar 2011-2012
Cuprins
Definiţie…………………………………………………………………………….…………3
Istoric………………………………………………………………………………....………3
Utilizarea in alimentaţie……………………………………………………………..……..4
Oţetul de mere………………………………………………………………….……………7
Procesul de fermentaţie……………………………………………………..………..…...8
Instalaţii utilizate la fabricarea oţetului…………………………………………….……11
Tehnologii de producere a oţetului prin fermentaţie…………....…………..………..18
Material si metodă………………………………………………………………...…….…..19
Sortimente de oţet…………………………………………………………………………..20
Materii prime folosite în industria oţetului................................................................22
Nutrimente folosite la fabricarea oţetului..................................................................22
Fermentaţii aerobe…………………………………………………………………………..23
Bacterii acetice – caractere morfofiziologice............................................................27
Biochimismul fermentaţiei acetice.............................................................................30
Factorii care influenţează fermentaţia acetică...........................................................31
Procedee de obţinere a oţetului..................................................................................31
Factorii care influenţează calitatea oţetului...............................................................34
Tipuri de oţet de fermentaţie şi caracteristici compoziţionale.................................35
Randamentele de fabricaţie………………………………………………………………...35
Bilanţ de materiale……………………………………………...……………………………37
Bibliografie……………………………………………………………………………...……..40
Biotehnologia obţinerii oţetului din vin
Definiţie
Oţetul (lat. acetis) este acid acetic diluat în apă (3–5%), cu gust acru, produs prin
fermentarea naturală acetică a vinului sau a sucului de mere cu ajutorul bacteriei Mycoderma
aceti.Oţetul produs pe cale tradițională conține și alte substanțe precum acidul citric sau acidul
tartric.Este un acid alimentar, care în alimentaţie este folosit în concentraţii de 3 – 12% acid
acetic.
Istoric
Sub formă de oţet, soluţiile de acid acetic (de regulă, având 5 % până la
18 % acid acetic, cu procentajul calculat de obicei în masă) sunt folosite ca atare
fie pentru condimentare, fie pentru conservarea ca murături a legumelor şi a altor
produse alimentare. Oţetul de masă tinde să fie mai diluat (5 %-8 % acid acetic),
în timp ce murăturile comercializate folosesc în general soluţii mai concentrate.
Cantitatea de acid acetic consumată ca oţet la scară mondială nu este mare, dar
cronologic este de departe cea mai veche şi cea mai cunoscută întrebuinţare.
Acidul acetic glacial este un excelent solvent protic polar. Frecvent
este folosit ca solvent de recristalizare pentru purificarea compuşilor organici.
Acidul acetic pur lichid se foloseşte ca solvent în fabricarea acidului tereftalic
(TPA), care este materia primă pentru politereftalatului de etilenă (PET). Deşi
reprezintă circa 5 %–10 % din cantitatea de acid acetic folosită în întreaga lume,
se preconizează că această întrebuinţare aparte se va extinde semnificativ în
următorul deceniu, pe măsură ce va creşte producţia de ambalaje fabricate din
PET.
Acidul acetic este utilizat adesea ca solvent pentru reacţii ce implică
carbocationi, ca în alchilarea Friedel Crafts. De exemplu, una din etapele de
producere manufacturieră a camforului sintetic implică o rearanjare Wagner-
Meerwein a camfenei la acetat de izobornil; în acest caz acidul acetic joacă atât
rolul de solvent, cât şi de nucleofil pentru a fixa carbocationul rearanjat. Acidul
acetic este solvent de elecţie în reducerea unui grup aril nitrat până la anilină,
folosind paladiu pe suport de cărbune activat.
Acidul acetic glacial se întrebuinţează în chimia analitică ca mediu de
reacţie, de exemplu pentru determinarea caracterului bazic al substanţelor slab
alcaline cum sunt amidele organice. Acidul acetic glacial este o bază mult mai
slabă decât apa, astfel încât în acest mediu amida se comportă ca o bază
puternică. Ea poate fi atunci titrată în soluţia de acid acetic glacial cu un acid
foarte puternic, cum ar fi acidul percloric.
Soluţiile diluate de acid acetic sunt folosite şi pentru aciditatea lor slabă.
Exemple de utilizare în mediul casnic:
Este folosit ca agent de stopare (baia de stopare) din timpul developării
filmelor fotografice.
Este inclus în produse pentru îndepărtarea tartrului de pe robinete sau
chiuvete.
Aciditatea sa este utilă şi pentru tratarea rănilor provocate de meduze prin
inhibarea celulelor urzicătoare ale acestora, preîntâmpinând în cazul unei
aplicări imediate leziunile grave sau chiar moartea.
În tratamentul infecţiilor urechii externe, intrând în compoziţia unor
preparate medicamentoase (Vosol).
De asemenea, acidul acetic este folosit ca spray conservant pentru
furajele animalelor, pentru a împiedica creşterea bacteriilor şi a fungilor.
Acidul acetic glacial este folosit şi pentru îndepărtarea negilor şi a
verucilor.
Oţetul de mere
Oțetul de mere este unul din cele mai vechi medicamente cunoscute de
umanitate, menționat pentru prima oară din tratate de medicină egiptene, scrise
în urmă cu mai bine de trei milenii în urmă. Medicii Greciei antice îl foloseau pe
scara largă, acesta regăsindu-se și în scrierile lui Hipocrate. Este folosit și în
medicina populară românească. Romanii din zonele de deal și de munte
preparau oțetul de mere în fiecare toamnă, folosindu-l apoi pe timpul ierni contra
diferitelor boli ori, pur și simplu, pentru menținerea sănătății. Nu este un
panaceu.
Procesul de fermentaţie
Oțetul poate fi obținut din vin,din tescovină și din drojdie.Cel mai bun oțet este otetul din
vin.
Pentru obținerea produselor necesare fabricației oțetului din tescovină și din
drojdie,acestea sunt spălate cu apă.Soluțiile de apă și alcool,care sunt obținute în acest
caz,conțin,de obicei,5-6% alcool.Tăria lor depinde de conținutul în alcool al tescovinei și al drojdiei
și de cantitatea de apă întrebuințată pentru spălarea lor.Vinul pentru obținerea oțetului se diluează
de obicei cu apă.
După calculele teoretice,46 g alcool trebuie să producă 60 g acid acetic,adică un vin care
are 80 g alcool la 1 L(10% in vol) va produce un oțet care conține 104 g acid acetic la 1 L.În
practica fabricării oțetului,datorită pierderilor și transformării incomplete a alcoolului în
oțet,randamentul cantitativ al acidului acetic corespunde,aproximativ,cu greutatea inițială a
alcoolului din produsul luat pentru fabricarea oțetului.Astfel,dintr-un vin care are 10% alcool,în
vol,se va obține un oțet cu un conținut în acid acetic de 8%.
Într-un oțet de vin nu se apreciază tăria,ci aroma și calitățile lui de gust.Pe lângă acid acetic
și alte produse ale fermentației acetice,el conține,de asemenea,toate substanțele fixe în
fermentație ale vinului,ceea ce deosebeste oțetul din vin de cel fabricat din soluții de apă și
alcool.Oțetul obținut dintr-un vin care conține 12% alcool,în vol.,are un gust foarte tăios(puternic)
și nu este propriu pentru consumație fără o diluare prealabilă.Oțetul cu calitățile cele mai bune
este obținut dintr-un vin care conține 7-9% alcool,în vol.
Pentru fabricarea oțetului în cantități mici se folosește asa numitul procedeu “Orleans”.
Instalaţii utilizate la fabricarea oţetului
Într-un butoi cu capacitatea de 20-30 dal se face,în ambele funduri,câte un orificiu de 4-5
cm.;într-unul dintre funduri,orificiul se face la o distanță de 5 cm de la centru,iar în celălalt
fund,orificiul se face mult mai sus.Ambele orificii sunt necesare pentru pătrunderea aerului.Se
pune butoiul într-un local cu temperatura de 20-25 0C.În orificiul vranei se introduce o țeavă de
sticlă,cu diametrul de 15-20 mm.,care se fixează în orificiul vranei cu ajutorul unui dop de plută.Se
toarnă în butoi,prin pâlnia de la capătul superior al țevii,5-10 L oțet bun,iar în orificiile de la funduri
se astupă cu tifon pentru a împiedica pătrunderea musculițelor otețului.
După câteva zile se toarnă în butoi,până la nivelul orificiului inferior,produsul din care
urmează să se obțină oțet.
De obicei,după câteva zile se dezvoltă în butoi o peliculă a oțetirii,care acoperă cu un strat
subțire toată suprafața lichidului aflat in butoi.Dacă formarea peliculei nu are loc,se recurge la o
peliculare artificială,cu ajutorul bacteriilor acetice obținute în laborator.După câteva luni de la
apariția peliculei,printr-o cană de lemn,introdusă în partea inferioară a fundului butoiului,se scot
aproximativ 2-3 dal oțet finit.
Productivitatea obținută prin acest procedeu poate fi mărită mult,dacă lichidul din butoi este
aerisit periodic(la fiecare 4-5 zile).Fără a se distruge integritatea peliculei,aerisirea poate fi făcută
luându-se anumite porțiuni de lichid prin canaua inferioară și introducându-le înapoi în butoi prin
pâlnia și țeava de sticlă.
Acest procedeu produce un otet de calitate superioară,dar el nu este potrivit pentru o
producție mare din cauza micii sale productivităti.De aceea,este mai răspândit un alt procedeu.
Cadă pentru fabricarea oţetului
Oțetul obținut din cadă este foarte tulbure.Pentru tratarea lui se folosesc aceleași procedee ca
și pentru vin,adică filtrarea,cleirea,pasteurizarea.
Oțetul se filtrează cu ajutorul unor filtre poroase de ceramică (fig.194).Se toarnă oțetul limpede
în sticle și se expediază pentru vânzare.Păstrarea oțetului în sticle dă rezultate foarte bune:capătă
un gust armonios si dezvoltă o aroma plăcută.
Câteva exemple ale compoziției medii a oţetului de vin:
MATERIAL ŞI METODĂ
Oţet din mere,50 aciditate Produs obţinut din suc de mere sau concentrate de măr,
3 aromat, având o savoare uşor picantă, cu un conţinut
ridicat
de aminoacizi şi fier. Se utilizează la prepararea
mâncărurilor, a salatelor şi a sosurilor.
Oţet balsamic de Seini, 60 aciditate Este un oţet de fermentaţie utilizat în bucătărie pentru a da
4 savoare şi parfum preparatelor din carne, peşte, sosuri şi la
prepararea salatelor de legume şi fructe. Este un oţet
obţinut din vin alb, cu adaos de ingrediente specifice şi cu
durată îndelungată de macerare. Este ambalat în sticle
brune
Oţet din mere şi mierede albine, 50 aciditate Produs obţinut din vin de mere, cu adaos de miere de
5 albine naturală. Acest oţet, în amestec cu uleiul de măsline,
formează un sos tonic aromat, picant. Este utilizat şi ca
produs dietetic.
Fermentaţii aerobe
Fermentaţia acetică
Oţet Condiment
Conservant
Antiseptic
Fermentaţia citrică
CH2-COOCH
HO – C – COOH
CH2-COOH
COOH
COOH
Acetobacter suboxydans
Acetobacter aceti
În mediu acid, în timp, pot să apară forme de involuţie, ramificate, care îşi
pierd capacitatea de reproducere.
Majoritatea au formă de bastonaşe drepte sau curbate. Cele din vin
prezintă o uşoară gâtuire. Unele specii au posibilitatea de a forma zooglee
(Acetobacter xylinum, Acetobacter xylinoides).
În medii lichide (în cultură staţionară) se dezvoltă sub forma unui voal
fragil, care pe măsura creşterii în dimensiuni se ridică pe pereţii vasului
(Acetobacter ascendens, Acetobacter aceti). S-a observat că puterea de
acidifiere a bacteriilor este cu atât mai mică, cu cât voalul este mai gros şi mai
afundat în lichid.
Alte specii, cum sunt Acetobacter xylinum şi Acetobacter xylinoides,
formează un strat gelatinos de natură β - glucanică (în vinul oţeţit sau în oţet),
care blochează circuitul normal al aerului în cazul fermentatoarelor cu talaş cu
consecinţe nedorite.
Pe medii de cultură solide, bacteriile acetice formează (în funcţie de
natura lor) colonii cu aspect diferit, netede sau cutate, umede sau uscate, de
culoare albă, alb-roz, brune.
Bacteriile acetice sunt mezofile (temperatura optimă de dezvoltare este de
22-33oC, în funcţie de specie) şi produc fermentaţia acetică într-un domeniu larg
de temperatură (10-40oC). Temperatura minimă de dezvoltare pentru majoritatea
bacteriilor acetice este de 10oC, însă sunt şi specii care se pot dezvolta la 6-7 oC.
Temperatura maximă de dezvoltare pentru cele mai multe bacterii acetice este în
jur de 40oC, cu menţiunea că sunt şi cazuri de excepţie. Spre exemplu,
Acetobacter xylinum se dezvoltă şi la 50oC, iar Acetobacter industrium se
dezvoltă numai până la temperatura de 28 oC. Bacteriile acetice au o
termorezistenţă scăzută în mediu lichid, cu pH acid, inactivarea lor având loc într-
un minut la 60oC ; în timp ce bacteriile reţinute pe suporturi solide (doage de
lemn) sunt inactivate la temperaturi mai ridicate (100 oC).
Bacteriile acetice sunt tolerante la acid şi concentraţii de până la 2 o
acetice activează creşterea celulară. Rezistenţa la acid acetic se poate explica
prin aceea că membrana acestor bacterii are un conţinut ridicat în acizi graşi
saturaţi, motiv pentru care este relativ impermeabilă la acidul acetic, care se
găseşte sub formă nedisociată în mediile fermentate industrial. Valoarea optimă
de pH pentru creşterea bacteriilor acetice este de 5,5; iar pH-ul limită se situează
la nivel de 2,5.
Bacteriile acetice au un echipament enzimatic complex, în care sunt
prezente dehidrogenaze foarte active, localizate în sistemele membranare
cuplate cu lanţul citocromic, enzime ale ciclului Krebs, care le permite oxidarea a
circa 80 de produşi (alcooli, glucide, acizi organici), printre care şi acidul acetic.
La oxidarea acidului acetic participă unele specii de bacterii din genul
Acetobacter, producătoare de acid acetic (Acetobacter aceti, Acetobacter
liquefaciens, Acetobacter pasteurianum, Acetobacter hansenii). Aceste bacterii
posedă toate enzimele care participă la ciclul acizilor tricarboxilici. Acidul acetic
inhibă oxidarea sa de către bacteriile acetice la concentraţii mai mari de 8 o acid
acetic şi la pH = 3,0.
Dintre sursele de carbon utilizate preferenţial, alcoolul etilic este oxidat la
acid acetic, iar glucoza la acid gluconic şi acid 5-cetogluconic. Bacteriile din
genul Gluconobacter utilizează ca principale surse de carbon: glucoza şi
etanolul. Bacteriile din genul Acetobacter folosesc ca surse de carbon: etanolul,
lactatul, hexozele şi glicerolul. Bacteriile din genul Acetobacter pot să oxideze şi
acetalii la CO2 şi H2O, când alcoolul etilic a fost consumat din mediu, pentru că
alcoolul etilic inhibă activitatea enzimelor de oxidare a acetalului.
Ca sursă de azot bacteriile acetice pot să folosească sărurile de amoniu,
aminoacizii (valină, alanină, izoleucină, cisteină, histidină, prolină), peptonele şi
alte surse de azot organic, cum sunt extractul de drojdie, de carne sau de
porumb.
Nevoia faţă de factori de creştere variază de la o tulpină la alta, astfel
bacteriile acetice sunt auxotrofe faţă de vitaminele: acid para-aminobenzoic,
niacină, tiamină, acid pantotenic şi faţă de alte vitamine din grupului B.
Bacteriile sunt răspândite, în natură, pe produsele vegetale (fructe, frunze,
flori) si transportul lor este favorizat de insecte (musculiţa de oţet: Drosophilla) şi
nematode (Anquillula aceti). Aceste bacterii posedă toate enzimele care participă
la ciclul acizilor tricarboxilici.Acidul acetic inhibă oxidarea sa de către bacteriile
acetice la concentraţii mai mari de 8 o acid acetic şi la pH = 3,0. Dintre sursele de
carbon utilizate preferenţial, alcoolul etilic este oxidat la acid acetic, iar glucoza la
acid gluconic şi acid 5-cetogluconic. Bacteriile din genul Gluconobacter utilizează
ca principale surse de carbon: glucoza şi etanolul. Bacteriile din genul
Acetobacter folosesc ca surse de carbon: etanolul, lactatul, hexozele şi glicerolul.
Bacteriile din genul Acetobacter pot să oxideze şi acetalii la CO2 şi H2O, când
alcoolul etilic a fost consumat din mediu, pentru că alcoolul etilic inhibă
activitatea enzimelor de oxidare a acetalului. . Ca sursă de azot bacteriile acetice
pot să folosească sărurile de amoniu, aminoacizii (valină, alanină, izoleucină,
cisteină, histidină, prolină), peptonele şi alte surse de azot organic, cum sunt
extractul de drojdie, de carne sau de porumb.
Nevoia faţă de factori de creştere variază de la o tulpină la alta, astfel
bacteriile acetice sunt auxotrofe faţă de vitaminele: acid para-aminobenzoic,
niacină, tiamină, acid pantotenic şi faţă de alte vitamine din grupului B.
Bacteriile sunt răspândite, în natură, pe produsele vegetale (fructe, frunze,
flori) si transportul lor este favorizat de insecte (musculiţa de oţet: Drosophilla) şi
nematode (Anquillula aceti).
Fermentaţie alcoolică
Saccharomyces cerevisiae
C6H12O6 2 C2H5OH + 2 CO2
Conditii aerobe
Alcool etilic
Acetificare
C2H5OH + O2 CH3 COOH + H2O
Bacterii acetice
Oţet
Vin alb
Aerare puternică pentru desulfitare
(în cazul vinului sulfitat)
Acetificare la 28...32oC
până la un conţinut rezidual de 0,2% alcool etilic
Oţet brut
Filtrare
Filtrare
Îmbuteliere
Depozitare
Glucoză Apă Oţet de 7o Alcool etilic (96o) Nutrimente Inocul dintr-o şarjă
anterioară 20%
Acidifiere soluţie
Fermentare la 30oC
până la un nivel rezidual
de 0,2 % alcool etilic
în acetator pregătit în prealabil
Îmbuteliere
Depozitare
- maturarea;
- clarificarea;
- pasteurizarea.
ηf = 76,3/100⋅130 = 99,2%
Bilanţul de materiale
Unitatea de procesare a vinului alb are la dispoziţie 460 kg alcool/zi.
Vin alb
Oţet brut
Filtrare(1)
Filtrare P4=1%
Maturare
Maturare P5= 2,1%
Filtrare(2) P6= 1%
Filtrare
mbuteliere
ÎÎmbuteliere P7= 0,7%
Depozitare
Depozitare P8=1,4%
Livrare
Livrare P9=0,5%
Aerare:
1,5
Vx= 460 x = 6,9(pierderile)
100
V1= 460-6,9= 453,1
Introducere vin:
2,5
Vx=453,1 x = 11,32
100
V2=453,1-11,32= 441,78
Acetificare:
0,3
Vx=441,78 x = 1,32
100
V3=441,78-1,32= 440,46
Filtrare(1):
1
Vx=440,46 x =4,4
100
V4=440,46-4,4= 436,06
Maturare:
2,1
Vx=436,06 x = 9,15
100
V5=436,06-9,15= 426,91
Filtrare(2):
1
Vx=426,91 x =4,26
100
V6=426,91-4,26=421,75
Îmbuteliere:
0,7
Vx=421,75 x = 2,95
100
V7=421,75-2,95= 418,8
Depozitare:
1,4
Vx=418,8 x = 5,86
100
V8=418,8-5,86=412,94
Livrare:
0,5
Vx=412,94 x =2,06
100
V9=412,94-2,06= 410,88
Bibliografie
M.A.Gherasimov,1954,”Tehnologia Vinului”,Editura Tehnica,Bucuresti
http://www.lib.ugal.ro/arthra/bitstream/123456789/103/1/Rezumat_teza-Tarhon
%20Maria.pdf
http://facultate.regielive.ro/cursuri/chimie-generala/biotehnologia-obtinerii-acidului-
acetic-96112.html
http://www.referat.ro/referate/download/Microorganisme_utile_in_obtinerea_de_produse
_alimentare_44212.html
http://www.revagrois.ro/PDF/2007s_281.pdf
http://facultate.regielive.ro/referate/industria-alimentara/biotehnologii-utilizate-la-
prelucrarea-otetului-si-a-acidului-acetic-29568.html
http://www.referat.ro/referate/Fermentatii_aerobe-acetica_citrica_7850.html