Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
1. Noţiuni generale
2. Principiul I al termodinamicii
3. Principiul al II-lea al termodinamicii
4. Potenţiale termodinamice
5. Fluxuri termodinamice şi forţe termodinamice
6. Aplicaţii ale principiului I în biologie
7. Aplicaţii ale principiului II în biologie
1. Noţiuni generale
Termodinamica este o ramură a fizicii care studiază transformările reciproce ale
diverselor forme de energie în sisteme macroscopice bine definite, sistemele termodinamice.
Sistemele termodinamice sunt constituite dintr-un număr foarte mare de atomi şi
molecule, care interacţionează în special prin forţe cu rază mică de acţiune, de exemplu forţele
interatomice şi intermoleculare de natură electrostatică. Pentru a defini un anumit sistem
termodinamic, trebuie precizate limitele de separare între sistemul respectiv şi mediul exterior
sistemului. Proprietăţile acestor limite determină relaţiile sistemului cu mediul prin schimburi de
materie şi energie.
Clasificarea sistemelor termodinamice:
- deschise - schimbă cu exteriorul atât energie cât şi substanţă
- închise - schimbă cu exteriorul numai energie
- izolate - nu au nici un fel de schimburi cu exteriorul, de care sunt separate prin pereţi
adiabatici (nu permit schimbul de căldură între sistem şi mediul exterior).
Un perete adiabatic reprezintă un element ideal care separă două sisteme şi permite celor
două sisteme să evolueze independent (parametrii de stare ai celor două sisteme variază în mod
independent).
Starea termodinamică a unui sistem este descrisă de parametrii de stare, care sunt
mărimi macroscopice măsurabile asociate sistemului şi care depind de starea sistemului, dar nu
şi de modul în care sistemul a ajuns în acea stare. Parametrii de stare pot fi intensivi sau
extensivi.
Parametrii extensivi depind de dimensiunile sistemului şi de cantitatea de substanţă
existentă în sistem (de exemplu, volumul, masa, numărul de moli).
Parametrii intensivi au valori care nu depind de dimensiunile sistemului (de exemplu,
presiunea, densitatea, temperatura).
Pentru a descrie starea de echilibru sau mişcare a sistemelor mecanice sunt necesare trei
mărimi fizice fundamentale: lungime, masă, timp. Pentru descrierea fenomenelor termice este
necesară o a patra mărime fundamentală, temperatura (T). Să luăm de exemplu cazul a două
sisteme termodinamice cu temperaturi diferite, puse în contact. Datorită diferenţei de
temperatură, între cele două sisteme se va produce un schimb de energie sub formă de căldură,
până la egalizarea temperaturilor în cele două sisteme, când se atinge echilibrul termic.
Principiul zero al termodinamicii afirmă că două sisteme aflate fiecare în echilibru
termic cu un al treilea sistem sunt în echilibru termic între ele.
Temperatura este deci proprietatea care determină dacă sistemul va fi sau nu în echilibru
termic cu alte sisteme şi spunem că dacă două sau mai multe sisteme sunt în echilibru termic,
atunci ele au aceeaşi temperatură. Temperatura unui sistem este direct legată de energia
moleculelor sistemului; ea nu are sens decât pentru sisteme cu număr mare de molecule.
Schimbul de căldură între două sisteme poate fi astfel înţeles ca fiind transferul de
energie datorat exclusiv diferenţei de temperatură dintre cele două sisteme (parametrii extensivi
nu se modifică, nu se efectuează lucru mecanic).
2
Dacă există forţe care determină deplasarea macroscopică a unor părţi componente ale
sistemului, spunem că se efectuează lucru mecanic. Există mai multe forme de lucru mecanic:
lucru mecanic de comprimare/dilatare, lucru mecanic de deplasare în câmp electric sau
magnetic, lucru mecanic de creştere a suprafeţei libere împotriva forţelor de tensiune
superficiale etc. În discuţiile din cursul de faţă se va considera că sistemul termodinamic
efectuează numai lucru mecanic de comprimare/dilatare.
Lucrul mecanic dL efectuat de sau asupra unui sistem la presiunea p, într-o transformare
infinitezimală în care volumul sistemului variază cu dV este
dL = p dV
Atunci când parametrii de stare ai sistemului variază în timp, sistemul suferă o
transformare termodinamică; aceasta reprezintă o schimbare a stării termodinamice şi în acest
caz spunem că are loc un proces termodinamic.
Starea de echilibru termodinamic este atinsă atunci când toate modificările parametrilor
de stare încetează, ceea ce înseamnă că starea termodinamică nu se mai modifică în timp. Pentru
a fi în stare de echilibru termodinamic, diferitele părţi componente ale sistemul trebuie să
îndeplinească simultan condiţiile de:
- echilibru termic (să aibă aceeaşi temperatură)
- echilibru mecanic (presiunea să fie aceeaşi în tot sistemul)
- echilibru electrochimic (potenţialul electrochimic să fie acelaşi în tot sistemul, vezi definiţia în
cursul despre sisteme disperse)
- echilibru radiativ (schimburile de energie prin emisie de radiaţie între oricare dintre subsisteme
sunt egale)
Procesele termodinamice pot fi:
- de echilibru sau cvasistatice: sistemul pleacă dintr-o stare de echilibru şi ajunge într-o altă stare
de echilibru prin varierea infinit de lentă a parametrilor termodinamici, astfel încât sistemul se
află în orice moment într-o stare de echilibru.
- de neechilibru: unul sau mai mulţi parametri de stare variază în timp sau spaţiu, astfel încât
stările prin care trece sistemul nu sunt stări de echilibru.
O altă clasificare a proceselor termodinamice:
- procese reversibile: atunci când condiţiile externe se modifică într-un anumit sens, sistemul
trece printr-o succesiune de stări termodinamice. La inversarea sensului de variaţie a condiţiilor
externe, sistemul trece prin aceleaşi stări termodinamice în ordine inversă.
- procese ireversibile: sistemul nu mai revine la starea iniţială prin inversarea sensului de
variaţie a condiţiilor externe.
Toate procesele mecanice fără frecare sunt procese reversibile, în timp ce toate procesele
însoţite de frecare sunt ireversibile. De asemenea, toate procesele de neechilibru sunt procese
ireversibile (de exemplu: vâscozitatea, difuzia). Orice proces reversibil este cvasistatic, dar
reciproca nu este întotdeauna adevărată. De exemplu, destinderea liberă a unui gaz în volume
succesive infinitezimale este un proces cvasistatic dar ireversibil.
O stare de echilibru termodinamic se realizează atunci când:
a) parametrii de stare sunt constanţi în timp, şi
b) nu există fluxuri de masă sau energie în interiorul sistemului sau între sistem şi exterior.
Dacă parametrii de stare sunt constanţi în timp dar există fluxuri de masă sau energie,
sistemul se află într-o stare staţionară de neechilibru.
Stările de echilibru termodinamic sunt caracterizate de următoarele proprietăţi:
- parametrii de stare sunt constanţi în timp;
- parametrii intensivi sunt constanţi în spaţiu (omogenizare);
- dezordinea este maximă (entropia termodinamică este maximă, vezi definiţia mai jos);
CURS DE BIOFIZICĂ 3
2. Principiul I al termodinamicii
Acest principiu este o lege generală a conservării energiei şi postulează că energia unui
sistem izolat se conservă.
Această lege explică de ce este imposibil să se construiască un perpetuum mobile de
speţa I, adică o maşină care să efectueze lucru mecanic fără consum de combustibil sau altă
formă de energie.
Formularea matematică a principiului I se scrie sub forma:
∆U = Q – L
adică variaţia energiei interne (∆U) a unui sistem într-o transformare termodinamică este
egală cu diferenţa dintre căldura schimbată de sistem cu exteriorul (Q) şi lucrul mecanic (L)
efectuat în acel proces.
Prin convenţie:
Q > 0 dacă sistemul primeşte căldură din exterior,
L > 0 dacă sistemul cedează energie mediului prin efectuare de lucru mecanic (volumul
sistemului creşte).
Energia internă (U) reprezintă energia totală a unui sistem. Ea este egală cu suma
energiilor cinetice (asociate mişcărilor de translaţie + rotaţie + vibraţie) şi energiilor potenţiale
determinate de forţele de interacţiune dintre particule sau dintre particule şi câmpurile de forţe
exterioare, precum şi a energiilor intramoleculare (ale legăturilor chimice) şi intraatomice ale
particulelor care alcătuiesc sistemul. Energia internă nu include energia cinetică şi potenţială a
sistemului, luat ca întreg, în raport cu exteriorul.
Energia internă este o funcţie de stare – valoarea sa depinde de numai de starea
sistemului şi este independentă de modul în care s-a ajuns în acea stare. Orice modificare a unuia
sau a mai multor parametri de stare implică o modificare a energiei interne. Energia internă este
o proprietate extensivă.
O altă formulare echivalentă a principiului I este următoarea:
Lucrul mecanic necesar pentru a trece un sistem dintr-o anumită stare în alta printr-
un proces adiabatic (fără schimb de căldură) este acelaşi, indiferent de modul în care se
efectuează lucrul mecanic.
Principiul I afirmă echivalenţa cantitativă dintre lucrul mecanic şi căldură. Astfel,
căldura şi lucrul mecanic sunt căi echivalente pentru variaţia energiei interne a unui sistem.
Totuşi, din punct de vedere calitativ cele două forme variaţie a energiei nu sunt echivalente.
Sub aspect molecular, căldura reprezintă transferul de energie datorat mişcării
dezordonate a moleculelor. Mişcarea haotică a moleculelor se numeşte agitaţie termică. De
4
exemplu, agitaţia termică a moleculelor dintr-un mediu cald determină moleculele din sistemul
mai rece să se mişte mai repede (prin ciocniri moleculare), astfel încât energia sistemului creşte
(sistemul primeşte căldură). Dimpotrivă, când un sistem încălzeşte mediul, moleculele
sistemului determină o intensificare a agitaţiei termice a moleculelor din mediu cărora le
cedează energie prin ciocniri (sistemul cedează căldură).
Spre deosebire de căldură, lucrul mecanic este transferul de energie datorat mişcării
ordonate. De exemplu, atunci când un sistem efectuează lucru mecanic, el determină ca
particulele din mediu să se deplaseze în mod ordonat. Se poate efectua lucru mecanic, de
exemplu, printr-o variaţie de volum contra unei presiuni exterioare, prin variaţii de suprafaţă
contra unei tensiuni superficiale sau prin transport de sarcini electrice într-o diferenţă de
potenţial etc. Deoarece prin frecări creşte dezordinea mişcărilor moleculare, lucrul mecanic se
poate transforma integral în căldură, în timp ce căldura nu se poate transforma decât parţial în
lucru mecanic, întrucât ordonarea spontană a mişcărilor moleculare este un proces practic
imposibil.
Generalizarea constatării practice a acestei imposibilităţi a condus la formularea
principiului al II-lea al termodinamicii. Dacă principiul I identifică procesele posibile (permise)
ale unui sistem, şi anume procesele în care energia internă se conservă, principiul al II-lea
identifică procesele spontane dintre aceste procese posibile.
Pentru a afirma acest lucru ne putem gândi că ansamblul sistemelor care iau parte la
proces poate fi văzut ca un sistem global izolat, pentru care suma entropiilor subsistemelor din
componenţa sa nu poate să scadă.
Ca urmare, toate procesele naturale care au loc în sistemele izolate evoluează în sensul
creşterii entropiei.
Există şi o altă formă de definire a entropiei, formularea statistică a lui Boltzmann:
S = k lnW
unde k = 1,38 10-23 J/K este constanta lui Boltzmann, iar W reprezintă ponderea statistică a
stării. Într-o anumită stare macroscopică a sistemului (numită macrostare), W este numărul de
aranjamente posibile ale particulelor sistemului (deci W ≥ 1). Un astfel de aranjament se
numeşte stare microscopică sau microstare. Cu cât este mai mare numărul de aranjamente
(microstări) posibile asociate cu o macrostare, cu atât probabilitatea de a găsi sistemul în acea
stare este mai mare.
Starea de entropie minimă este acea stare macroscopică cu care este asociată o singură
stare microscopică, deci W = 1 şi S = 0. O astfel de stare trebuie să fie o stare de ordine totală,
deci sistemul trebuie să se afle în starea de cristal ideal, singura stare în care ordinea este
perfectă.
Într-un sistem foarte ordonat sunt posibile foarte puţine aranjamente ale particulelor,
deci S va avea o valoare foarte mică.
Într-un sistem total dezordonat există o distribuţie haotică a particulelor, numărul de
aranjamente posibile este maxim şi S va avea o valoare maximă.
Entropia unui sistem care primeşte căldură creşte, deoarece agitaţia termică se
intensifică, deci creşte dezordinea moleculară. Reciproc, entropia unui sistem care cedează
căldură scade.
6
Într-un sistem neizolat, entropia variază atât datorită proceselor care au loc în interiorul
sistemului, cât şi datorită schimburilor de căldură cu exteriorul. Există deci posibilitatea ca într-
un sistem neizolat entropia să scadă (∆S < 0) pe baza creşterii entropiei în mediul extern
(∆Sm > 0), astfel încât variaţia entropiei totale a sistemului şi mediului, Stot = S + Sm, rămâne
pozitivă:
∆Stot = ∆S + ∆Sm > 0
cu ∆S < 0 şi ∆Sm = ∆Stot + |∆S| > 0
Toate organismele vii sunt sisteme deschise deoarece schimbă permanent energie şi
substanţă cu mediul. Sensul de evoluţie a organismelor spre creşterea complexităţii structurale şi
a diversificării funcţiilor este un sens al scăderii entropiei sistemului viu, prin tendinţa spre stări
cu grad din ce în ce mai înalt de ordonare. Toate aceste procese de funcţionare şi evoluţie a
materiei vii sunt posibile numai prin asocierea cu procese de disipare a entropiei în mediul
înconjurător.
Conform principiului al II-lea, se poate afirma că într-un sistem arbitrar procesele
spontane interne (care nu se datorează schimburilor cu exteriorul, ci se desfăşoară de la sine)
se produc în sensul creşterii nete a entropiei sistemului. Entropia poate să scadă local (într-un
anumit subsistem), dar numai simultan cu o creştere compensatoare a entropiei într-un alt
subsistem.
4. Potenţiale termodinamice
Combinaţiile liniare ale unor funcţii termodinamice de stare, cum ar fi energia internă U
sau entropia S, sunt, de asemenea, funcţii de stare; ele se numesc potenţiale termodinamice.
Uneori aceste combinaţii sunt mai adecvate determinărilor experimentale.
a. Entalpia
Pentru procesele care au loc în atmosferă liberă, aşa cum sunt cele din sistemele
biologice, presiunea este constantă (condiţii izobare). În acest caz, în locul energiei interne U se
foloseşte entalpia, H, care este definită ca:
H = U + pV
Dacă scriem expresia principiului I sub forma:
U = Q - L = Q - pV
cantitatea de căldură Q va fi:
Q = U + pV = (U + pV) = H
Rezultă că variaţia entalpiei este egală cu căldura schimbată de sistem în condiţii izobare.
Entalpia este tot o funcţie de stare; ea este foarte utilă în studiul termodinamic al
reacţiilor chimice. Variaţia de entalpie ∆H se mai numeşte căldură de reacţie.
În procese izobare:
- dacă H > 0 sistemul primeşte căldură (reacţii endoterme)
- dacă H < 0 sistemul cedează căldură (reacţii exoterme).
b. Energia liberă
Se defineşte energia liberă mărimea F (free energy) conform relaţiei:
F = U – TS
Deci, din energia internă U a unui sistem aflat în condiţii izoterme (la temperatură
constantă), numai o parte poate fi convertită în lucru mecanic, deoarece:
U = ∆(F + TS) = F + TS
CURS DE BIOFIZICĂ 7
U = Q – L
– F = L + TS - Q
În procesele reversibile T∆S = Q, deci sistemul efectuează lucrul mecanic maxim
posibil:
– F = Lmax
În procese ireversibile, o parte din energia liberă se degradează în mod ireversibil în
căldură, deci sistemul efectuează un lucru mecanic mai mic (TS > Q, deci L < - F).
În sistemele izolate, în care U = 0 şi L = 0, avem F ≤ 0 deoarece S 0.
Ca urmare a principiilor I şi II, toate procesele care au loc în sisteme izolate decurg în
sensul creşterii entropiei şi al scăderii energiei libere (al scăderii capacităţii de a efectua lucru
mecanic).
La echilibru termodinamic, entropia atinge un maxim iar energia liberă un minim.
d. Entalpia liberă
Se defineşte entalpia liberă (sau energie liberă Gibbs), G:
G = U – TS + pV
= H – TS
= F + pV
Entalpia liberă este utilizată în studiul proceselor biologice şi biochimice care au loc nu
numai la temperatură constantă dar şi la presiune constantă. Ea caracterizează capacitatea unui
sistem de a efectua lucru mecanic util în condiţii izobare şi izoterme:
∆G = ∆H – T∆S = ∆F + p∆V
întrucât pentru procese reversibile:
– ∆G = Lmax – p∆V = Lutil
unde Lutil reprezintă suma lucrurilor mecanice diferite de cele efectuate prin comprimarea sau
dilatarea sistemului. Lutil a fost denumit de Gibbs lucru mecanic util.
Scăderea entalpiei libere Gibbs reprezintă deci cantitatea maximă de lucru mecanic util
care poate fi obţinut într-un proces care are loc la temperatură şi presiune constante.
Se demonstrează că sensul proceselor spontane izobare şi izoterme este cel pentru care
entalpia liberă a sistemului scade (∆G < 0).
La echilibru ∆G = 0, iar entalpia liberă este minimă.
dat mai multe forţe, în el se vor produce fluxurile corespunzătoare până când toate forţele devin nule.
Aceasta este starea de echilibru termodinamic în care, încetând toate procesele din sistem (toate fluxurile
sunt nule), încetează şi producerea de entropie, iar valoarea entropiei devine şi se menţine maximă. De
exemplu, dacă între două compartimente separate de o membrană permeabilă se creează un gradient de
concentraţie al unei substanţe (Xc - forţa termodinamică) va apărea un flux Js de particule (difuzie) care
tinde să uniformizeze concentraţia.
Xc = dc/dx Js = dm/(Adt)
În final se ajunge la echilibrul termodinamic:
Xc = 0 → concentraţie uniformă
Js = 0 → nu mai există deplasări macroscopice de substanţă în sistem
S = maximă → entropia atinge valoarea maximă compatibilă cu condiţiile externe, producerea de
entropie în sistem încetează
b. Starea staţionară
Dacă însă sistemul nu este izolat iar constrângerile externe sunt permanente şi invariabile, starea de
echilibru nu mai poate fi atinsă. De exemplu, dacă un sistem deschis este alimentat permanent cu substanţă,
sistemul nu mai poate ajunge în starea de echilibru. În aceste cazuri, sistemul evoluează spre o stare care,
deşi nu este de echilibru, este totuşi stabilă – starea staţionară de neechilibru, numită uneori şi starea de
echilibru dinamic. Într-o astfel de stare, toate mărimile caracteristice sistemului (parametrii şi funcţiile de
stare, fluxurile şi forţele termodinamice) nu mai variază, ci rămân constante în timp.
Deoarece fluxurile şi forţele termodinamice nu se pot anula, în starea staţionară vor exista deci
procese spontane în interiorul sistemului, care produc entropie (diS > 0). Dar:
S = ct. dS/dt = 0 dS/dt = deS/dt
+ diS/dt
de unde rezultă că rata de variaţie a entropiei prin schimburi cu exteriorul este:
deS/dt = - diS/dt < 0
Această relaţie exprimă faptul că un sistem aflat în stare staţionară elimină în exterior toată entropia
care se produce prin procesele spontane interne, entropia sa rămânând astfel constantă.
Starea staţionară, de mare stabilitate, se realizează în organism prin mecanisme homeostatice. Prin
aceste mecanisme, organismul îşi menţine constanţi, cu consum de energie metabolică, parametrii mediului
său interior.
Apa este cea mai importantă substanţă necesară vieţii. Datorită structurii şi
interacţiunilor sale moleculare, apa prezintă proprietăţi unice, de care organismele vii depind
într-un mod complex şi ireversibil. Organismele vii conţin apă în proporţie de cel puţin 50%. În
mediul extracelular, factorii nutritivi sunt dizolvaţi în apă, fapt ce le permite să traverseze
membranele celulare, iar în interiorul celulelor, mediile în care se desfăşoară numeroase reacţii
chimice sunt medii apoase, care permit, de asemenea, apariţia unor fluxuri de substanţă în
interiorul celulei. La temperatura normală a organismului, apa se află în stare lichidă, ceea ce îi
conferă caracterul de complexitate şi dinamism, spre deosebire de starea solidă, în care libertatea
mişcărilor moleculare este extrem de limitată, sau faţă de starea gazoasă, în care gradul de
complexitate este redus, datorită dezordinii moleculare specifice acestei stări.
- dipol instantaneu: atunci când densitatea de electroni ai unei molecule este temporar mai
mare într-o regiune spaţială decât în alta;
- dipol indus: atunci când distribuţia de sarcină electrică a moleculei devine asimetrică sub
influenţa unei atracţii electrostatice (sub acţiunea unui câmp electric extern sau în apropierea
unui ion sau a unei molecule polare).
Caracterul permanent asimetric al distribuţiei spaţiale a sarcinilor electrice dintr-o
moleculă defineşte caracterul polar al moleculei. Molecula de apă este o moleculă polară. In
schimb, moleculele care au o distribuţie spaţială simetrică de sarcină electrică se numesc
molecule nepolare (de exemplu, etanul, O2, CO2). Moleculele care prezintă atât porţiuni polare
cât şi porţiuni nepolare se numesc molecule amfifile (de exemplu, lipidele).
Moleculele polare reprezintă dipoli permanenţi. Moleculele perfect simetrice (care sunt
nepolare) pot prezenta un dipol instantaneu pe timpi foarte scurţi (dipol indus), dar, prin mediere
în timp, momentul lor de dipol este zero. O moleculă cu dipol indus reprezintă o moleculă
polarizată.
2. Forţe intermoleculare
Forţele intermoleculare iau naştere între molecule diferite sau între regiuni ale aceleiaşi
macromolecule. Ele sunt rezultatul atracţiilor şi repulsiilor electrostatice dintre sarcinile parţiale
ale moleculelor, precum şi al excluderii electronilor din regiuni ale spaţiului care acoperă orbitali
moleculari deja completaţi. Forţele Van der Waals sunt interacţii între molecule care au
învelişul electronic complet (sunt neutre din punct de vedere electric), fără a produce legături
chimice (moleculele se atrag prin interacţii electrostatice între diferite regiuni ale norilor
electronici, fără a exista o suprapunere a acestora). O interacţie intermoleculară specială este
legătura de hidrogen, în care anumite molecule cu înveliş electron complet suprapun parţial
orbitali moleculari. Alte forţe intermoleculare sunt interacţii de tipul ion-ion sau ion-dipol.
Cele mai tari interacţii intermoleculare sunt cele ionice, care se produc numai între ioni.
Interacţiile ion-dipol şi legăturile de hidrogen sunt mult mai slabe. Interacţiile Van der Waals
sunt cele mai slabe interacţii intermoleculare.
În ordinea scăderii tăriei lor, forţele Van der Waals apar prin:
- interacţii dipol permanent – dipol permanent (între molecule polare);
- interacţii dipol indus – dipol indus (forţe Van der Waals de dispersie sau forţe London) (între
molecule polarizate);
- interacţii dipol permanent – dipol indus (între o moleculă polară şi o moleculă polarizată).
Legătura de hidrogen este o interacţie atractivă între două specii moleculare cu înveliş
complet, care provine dintr-o legătură de forma A-H···B, unde A şi B sunt elemente puternic
electronegative care aparţin la două molecule diferite, iar B posedă o pereche de electroni
neparticipanţi (legătura de hidrogen este reprezentată prin simbolul ···). În general, legătura de
hidrogen se întâlneşte la moleculele în care A şi B sunt N, O sau F (cele mai electronegative
elemente), dar dacă B este o specie anionică (de exemplu Cl -) atunci şi el poate participa la
legătura de hidrogen, dar N, O şi F participă cel mai eficient. Legătura de hidrogen apare prin
apropierea spaţială dintre o sarcină parţială pozitivă a lui H şi o sarcină parţială negativă a lui B,
ceea ce duce la formarea unui orbital molecular comun celor trei atomi A, H, B. Deoarece
legătura depinde de acoperirea orbitalilor, ea este de fapt o interacţie de contact, care apare
atunci când AH este foarte aproape de B şi dispare când AH se depărtează de B.
Legătura de hidrogen prezintă similitudini atât cu interacţiile dipol-dipol cât şi cu
legăturile covalente. În cazul dimerului de apă (format printr-o legătură de hidrogen între două
molecule H2O), hidrogenul (parţial pozitiv) implicat în legătură este transferat parţial celeilalte
molecule H2O, fiind atras de sarcina parţial negativă a oxigenului acesteia (Fig. 2). Se formează
astfel un compus de tipul H2O+–H(-O)–H. Procesul este oarecum similar formării unei legături
covalente coordinative prin transferul nucleului H acceptor la atomul O donor, cu deosebirea că
CURS DE BIOFIZICĂ 13
sarcinile puse în comun sunt parţiale, nu întregi ca în cazul legăturii covalente coordinative. Ca
urmare, legătura de hidrogen este mai puternică decât o interacţie dipol-dipol, dar mult mai slabă
decât o legătură covalentă.
δ+ δ+ H
H /
\
O · · · H -
/ δ-
O H δ+ δ-
δ+
Fig. 2 Un atom de hidrogen (parţial pozitiv), aparţinând unei molecule de apă, implicat în legătură este transferat
parţial moleculei vecine cu formarea unui compus de tipul H2O+–H(-O)–H
(http://www.columbia.edu/cu/biology/courses/c2005/lectures/lec2_10.html)
3. Structura apei
Molecula de apă poate lega alte 1-4 molecule de apă prin legături de hidrogen. În stare
solidă (gheaţa), legăturile de hidrogen sunt permanente, în timp ce în stare lichidă aceste legături
au un timp de viaţă foarte scurt (de ordinul 10-12 – 10-9 s), fiind rupte prin mişcările de agitaţie
termică ale moleculelor. Totuşi, numărul foarte mare de legături de hidrogen care se formează
continuu în apa lichidă determină apariţia tranzitorie a unor grupări multimoleculare ordonate.
Gruparea cea mai stabilă este cea dimerică; aceasta poate fi întâlnită chiar şi în faza gazoasă. În
cazul în care o moleculă de apă formează legături de hidrogen cu alte 4 molecule, acestea se
dispun în vârfurile unui tetraedru aproape regulat, centrat pe molecula coordonatoare. În anii
1950 a fost propusă ipoteza grupărilor temporare („flickering clusters”, Fig. 3a) de dimensiuni
variabile (formate prin legături de hidrogen între un număr variabil de molecule de apă), dar apoi
s-a realizat că această ipoteză nu poate explica proprietăţile apei lichide.
flickering cluster
clusters icosaedric
(a) (b)
Fig. 3 Modele ale apei în stare lichidă (a) Modelul grupărilor temporare („flickering clusters”); (b) Modelul
clusterului icosaedric (adaptat după http://www1.lsbu.ac.uk/water/polyoxomolybdate_nanodrop.html)
În modelul care este acceptat în mod curent, se consideră că pe timpi foarte scurţi (~10 -
9
s) apa se comportă ca un gel format dintr-un singur cluster de mari dimensiuni, în care pot
exista discontinuităţi locale, a căror dimensiune şi influenţă depind de temperatură şi presiune.
Prin ruperea şi refacerea legăturilor de hidrogen, clusterul îşi schimbă configuraţia, dar este
posibil ca în spaţii restrânse să se formeze clusteri polimerici (H2O)n a căror stabilitate să
CURS DE BIOFIZICĂ 14
crească. Diferite studii teoretice au arătat că dimensiunea unui astfel de cluster este în medie de
90 de molecule H2O la 0ºC şi de cel mult 25 molecule la 70ºC. Recent a fost de asemenea
prezisă existenţa unui cluster icosaedric, care cuprinde 280 de molecule de apă (Fig. 3b). Acest
model este în concordanţă cu datele experimentale de difracţie cu raze X şi poate explica toate
proprietăţile neobişnuite ale apei. Totuşi, în prezent nu există un consens cu privire la structura
apei lichide; experimental nu a putut fi detectată nici o astfel de grupare a moleculelor de apă,
datorită instabilităţii unor astfel de aranjamente moleculare.
Lichidele care prezintă legături de hidrogen între molecule se numesc lichide complexe
(sau lichide asociate). Lichidele simple sunt formate din molecule care interacţionează numai
prin forţe Van der Waals (heliu, alcool etc.). De exemplu, în cazul gazelor rare (atomii gazelor
rare sunt foarte stabili şi tind să nu interacţioneze) singurele interacţii care pot să apară între
atomi sunt forţe Van der Waals de dispersie. Fără existenţa acestora, gazele rare nu s-ar putea
lichefia.
În faza solidă a apei, energia legăturilor de hidrogen devine mult mai mare decât energia
de agitaţie termică, astfel încât se formează structuri ordonate (reţele cristaline) stabile în care se
formează numărul maxim posibil de legături de hidrogen (fiecare moleculă de apă leagă alte 4
molecule H2O). Un astfel de aranjament este gheaţa cubică, în care moleculele de apă se dispun
în structuri de tip diamant. În Fig. 4 este prezentată structura cristalină fundamentală a gheţii
cubice; aceasta se repetă pe distanţe mari în spaţiul tridimensional. Gheaţa cubică este stabilă
numai la temperaturi mai mici de -80ºC.
legături de hidrogen
legături de
hidrogen
datorită agitaţiei termice, moleculele libere devin din ce în ce mai numeroase odată cu creşterea
temperaturii şi au energie suficientă pentru a se deplasa pe distanţe mai mari; volumul apei
creşte, iar densitatea scade. Aceasta este comportarea normală a lichidelor în procesul de
încălzire.
Temperatura (ºC)
4. Proprietăţile apei
În intervalul termic specific organismelor homeoterme (35ºC – 41ºC), cca. 50% din
legăturile de hidrogen ale apei sunt rupte; apa este mai puţin vâscoasă, structura microcristalină
dispare, proporţia de dimeri este cea mai mare şi apa devine mai reactivă din punct de vedere
chimic.
La temperaturi mai mari de 100ºC, apa se află în stare gazoasă, sub formă de vapori.
Aproape toate legăturile de hidrogen se rup, datorită agitaţiei termice foarte intense. Majoritatea
moleculelor de apă sunt libere, dar mai pot persista unii dimeri. În absenţa legăturilor de
hidrogen, punctul de fierbere al apei a fost estimat la cca. -90ºC, ceea ce constituie o altă
proprietate anomală a apei.
Structura moleculară a apei şi capacitatea sa de a forma legături de hidrogen determină o
serie de proprietăţi deosebite ale apei, cum ar fi:
- coeziune puternică;
- tensiune superficială mare;
- căldură specifică mare;
- căldură de evaporare mare;
- apa este în stare lichidă la temperatura camerei;
- conductibilitate termică mare;
- apa este un foarte bun solvent polar;
- repulsia hidrofobă.
Legăturile de hidrogen dintre moleculele de apă determină coeziunea puternică
specifică apei (coeziune = atracţie între moleculele aceleiaşi substanţe). Între cele două pleure
care căptuşesc cavitatea toracică există o peliculă subţire de lichid seros. Pleura pulmonară aderă
la plămân, iar pleura parietală aderă la peretele toracic. În timpul inspiraţiei volumul cavităţii
toracice creşte, iar plămânii urmează mişcările peretelui toracic datorită coeziunii moleculare
puternice în lichidul pleural, care determină deplasarea simultană a ambelor pleure.
Apa are coeficientul de tensiune superficială cel mai mare dintre toate lichidele (cu
excepţia mercurului), datorită faptului că legăturile de hidrogen dintre moleculele de apă aflate
în stratul superficial sunt mult mai puternice decât interacţiile cu moleculele de aer, astfel încât
CURS DE BIOFIZICĂ 16
stratul superficial de apă se comportă ca o membrană elastică sub tensiune mecanică, ce tinde să
minimizeze aria suprafeţei de contact aer-apă.
Comparativ cu multe alte substanţe, apa are căldură specifică mare, adică absoarbe
multă căldură pentru a-şi creşte temperatura. Intr-adevăr, o creştere a temperaturii înseamnă
intensificarea mişcărilor de agitaţie termică ale moleculelor, ceea ce necesită mai întâi ruperea
unor legături de hidrogen dintre molecule, deci o mare parte din căldura absorbită de apă este
utilizată pentru ruperea unor legături de H. De asemenea, în procesul de răcire, apa reţine mai
multă căldură decât alte substanţe, deoarece încetinirea moleculelor permite formarea de noi
legături de hidrogen, proces în care se degajă energie. De aceea, apa este mai rezistentă la răcire
decât multe alte substanţe. Faptul că apa are căldură specifică mare are un rol foarte important în
termoreglarea organismelor, prin stabilizarea temperaturii în procese cu variaţii de energie
relativ mari.
Tot datorită legăturilor de hidrogen, apa are cădură de vaporizare mare, necesitând
multă căldură pentru a rupe aproape toate legăturile de hidrogen şi a se evapora. Acesta este şi
motivul pentru care apa se află în stare lichidă la temperatura camerei.
Conductibilitatea termică a apei este de câteva ori mai mare decât cea a majorităţii
lichidelor. Putem vorbi despre un “amortizor termic” al apei în organism, deoarece variaţiile de
temperatură ale mediului înconjurător sunt amortizate prin inerţia termică mare a apei din
organism, inerţie conferită atât de masa mare de apă, cât şi de căldura specifică ridicată a
acesteia. De asemenea, hipertermiile locale produse prin procese catabolice exoterme sunt
evitate datorită difuziei rapide a căldurii, fluxul de căldură fiind favorizat de conductibilitatea
termică mare a apei. La nivelul tegumentelor, sângele pierde o mare cantitate de căldură tot
datorită conductibilităţii termice a apei, care asigură astfel un flux de căldură substanţial între
organism şi mediu.
Apa poate dizolva uşor substanţe cu care poate forma legături de hidrogen sau ale
căror molecule sunt polare. Mai mult, moleculele solvitului trebuie să interacţioneze mai uşor cu
apa decât între ele pentru a părăsi structura solidă şi a se dispersa în soluţia apoasă.
Apa mai poate forma legături de hidrogen cu molecule care prezintă regiuni expuse de
tip –OH sau –NH2; de exemplu molecule simple precum alcoolii, moleculele suprafeţelor de
sticlă, sau macromolecule precum proteinele. Activitatea biologică a proteinelor depinde esenţial
nu numai de compoziţia lor, ci şi de configuraţia spaţială, iar aceasta este determinată de
legăturile de hidrogen formate între proteină şi moleculele de apă din vecinătatea ei sau între
diferite părţi ale proteinei. Distrugerea acestor legături de H denaturează ireversibil proteina şi îi
compromite activitatea (acest lucru se întâmplă de exemplu prin coagulare). De notat de
asemenea faptul că între cele două catene ale ADN-ului se stabilesc legături de hidrogen de tip
H–N···H, care menţin stabilitatea dublului helix.
Apa interacţionează puternic cu ionii (atomi sau molecule încărcaţi electric), prin
interacţii de tip ion-dipol. Datorită caracterului lor puternic polar, moleculele de apă aflate în
imediata apropiere a unui ion sunt puternic atrase de acesta, formând învelişul interior (primar)
de hidratare, care prezintă un aranjament ordonat al moleculelor în jurul ionului. Aceste
molecule leagă alte molecule de apă din exterior (prin legături de hidrogen), formând învelişul
exterior (secundar) de hidratare, cu o structură mai puţin ordonată (Fig. 6).
Electroliţii se disociază la dizolvarea în apă în ioni negativi şi pozitivi, fenomen favorizat
de constanta dielectrică mare a apei. Electroliţii tari sunt disociaţi complet. Ionii astfel formaţi
atrag dipolii apei, astfel că un ion pozitiv atrage polul negativ şi invers. În general moleculele de
apă formează legături covalente coordinative cu ionii pozitivi, în timp ce cu ionii negativi
formează legături de hidrogen. Apar structuri radiale (cu simetrie sferică) - apa devenind apă de
hidratare. Procesul se numeşte solvatarea (hidratarea) ionilor. Acest tip de apă are proprietăţi
diferite de cele ale apei obişnuite: densitatea apei creşte, se modifică temperaturile de
solidificare şi fierbere etc.
CURS DE BIOFIZICĂ 17
Fig. 6 Învelişurile primar şi secundar de hidratare din jurul unui cation (adaptat după
http://www.chem1.com/acad/sci/aboutwater.html)
Moleculele care pot forma legături de hidrogen, precum şi cele cu moment dipolar
permanent, se integrează cu uşurinţă în reţeaua apei fără a produce modificări structurale
semnificative.
Moleculele fără moment dipolar permanent interacţionează cu moleculele de apă prin
legături Van der Waals slabe de tip dipol permanent - dipol instantaneu. Moleculele de acest tip
sunt numite molecule hidrofobe. Sistemul apă-solvit, în acest caz, tinde spre minimizarea
energiei sale libere - deci spre realizarea unui număr maxim de legături între componente.
Moleculele hidrofobe nu pot realiza legături cu moleculele de apă şi, de aceea, un mod de a
realiza cât mai multe legături este mărirea numărului de legături de H între moleculele de apă din
jurul moleculelor hidrofobe. Se formează astfel structuri cristaline (12 feţe pentagonale -
dodecaedre, 16 - hexacaidecaedre) numite clatraţi, în centrul cărora se află câte o moleculă
hidrofobă. Apa capătă o structură asemănătoare gheţii - apă de clatrare. Un alt mod de mărire a
numărului de legături se realizează prin apropierea moleculelor hidrofobe una de alta. Din punct
de vedere energetic, moleculele de apă preferă să realizeze legături cu alte molecule de apă în
defavoarea legăturilor cu alte molecule mai puţin polare. De aceea, în prezenţa apei, moleculele
hidrofobe tind să formeze conglomerate nemiscibile cu apa, pentru a reduce suprafaţa de
interacţie cu apa; în acest fel este minimizat numărul de legături distruse dintre moleculele de
apă. Acesta este procesul de excludere (repulsie) hidrofobă.
Moleculele amfifile (cum sunt proteinele şi acizii nucleici) conţin atât grupări polare
(hidrofile) cât şi nepolare (hidrofobe). Grupările hidrofile pot forma cu uşurinţă legături cu alte
grupări sau molecule polare prin atracţii electrostatice, iar cele hidrofobe se apropie unele de
celelalte, ca urmare a excluderii hidrofobe, şi interacţionează între ele prin forţe Van der Waals
de dispersie. În felul acesta macromoleculele îşi organizează atât propria structură, cât şi pe cea a
moleculelor de apă din jur (se formează apa de hidratare şi apa de clatrare). Aceasta apă de
structură se numeşte apă legată.
Cele mai importante proprietăţi ale apei în sistemele biologice sunt solvabilitatea polară
şi excluderea hidrofobă. De exemplu, formarea membranelor lipidice se datorează excluderii
hidrofobe. Într-un mediu apos, proteinele globulare îşi aranjează în mod spontan conformaţia
pentru a-şi expune regiunile hidrofile spre apă şi a evita interacţia regiunilor hidrofobe cu apa.
Organismul uman conţine apă în proporţie de 65-70%. O mare parte a apei din organism
este apă legată, cu proprietăţi fizice deosebite: se evaporă foarte greu, îngheaţă la temperaturi
mult sub 0°C, nu dizolvă cristaloizii, nu participă la osmoză. Problema apei în structurile vii nu
este complet elucidată. Existenţa apei legate se explică prin prezenţa unui mare număr de specii
moleculare, macromoleculare şi ionice, care structurează apa din jur. O mare parte a apei
intracelulare prezintă un grad superior de ordonare. Această ordonare are un rol important în
desfăşurarea proceselor celulare (excitaţie, contracţie, diviziune, secreţie etc.). O serie de studii
CURS DE BIOFIZICĂ 18
au arătat ca apa este “compartimentalizată”: există apă liberă, apă parţial legată şi apă legată,
fiecare din aceste compartimente având proprietăţi specifice.
5. Disocierea apei
Moleculele de apă se pot disocia în ioni: H+ (ionul de hidrogen, care este un proton) şi
OH (ionul hidroxil). Fiecare din ionii H+ / OH- se poate recombina cu un alt ion OH- / H+,
-
Lichid
Fig. 7 Forţele de interacţie dintre moleculele din stratul superficial şi cele din interiorul lichidului (adaptat după
http://www.chem1.com/acad/sci/aboutwater.html)
Ca urmare, cantităţi mici de lichid aflate într-un gaz iau formă sferică (forma geometrică
pentru care suprafaţa este minimă la un volum dat).
O mărime caracteristică este coeficientul de tensiune superficială :
= dF/dl
(forţa pe unitatea de contur)
sau:
= dL/dS
(lucrul mecanic necesar pentru a mări suprafaţa stratului superficial cu o unitate).
CURS DE BIOFIZICĂ 19
Alveolă
Venulă pulmonară
O soluţie ideală este o soluţie care are entalpia de dizolvare (la presiune constantă) egală
cu zero. La soluţiile ideale, deci, în procesul de dizolvare nu se degajă căldură, ceea ce înseamnă
că interacţiile solvit-solvit, solvit-solvent şi solvent-solvent au aceeaşi tărie (aceeaşi energie de
legătură). Proprietăţile unei soluţii ideale pot fi prevăzute teoretic prin combinaţii liniare ale
proprietăţilor solviţilor. Cu cât o soluţie este mai concentrată, cu atât comportamentul ei se
îndepărtează mai mult de cel al soluţiei ideale. Dacă solvitul depăşeşte o anumită concentraţie,
moleculele de solvit în exces nu mai pot forma legături cu moleculele de solvent – solvitul
precipită, iar soluţia devine saturată. Solubilitatea este o proprietate fizică a unui solvit, care
caracterizează capacitatea de dizolvare a acestuia într-un anumit solvent. Solubilitatea este
determinată cantitativ prin concentraţia limită a soluţiei saturate şi depinde de natura solventului
şi solvitului, de temperatură, presiune şi gradul de contaminare a soluţiei cu alte elemente.
CURS DE BIOFIZICĂ 21
Potenţialul chimic (µ) al unei specii moleculare dintr-un sistem este o mărime
termodinamică importantă, care este conjugată cu numărul de particule din acea specie aflate în
sistem. Potenţialul chimic al unei specii reprezintă variaţia în energia internă a sistemului
atunci când în sistem se mai introduce o particulă de acelaşi tip, fără a modifica volumul şi
entropia sistemului.
Aceste informaţiisunt suplimentare.
Energia liberă Gibbs a unui amestec de substanţe neelectrolitice (în care nu există purtători de sarcini
electrice) este
G = Σ νi µi
unde νi este numărul de moli ai speciei „i”; µi este potenţialul chimic al speciei „i”.
În sens general, potenţialul chimic este lucrul mecanic necesar pentru a aduce 1 mol de substanţă din
stare pură (în condiţii standard) la o anumită concentraţie şi anumită temperatură, fără a varia potenţialul electric
al sistemului.
În general, expresia potenţialului chimic al unei specii se scrie:
µ = µ0 + RT ln a
unde µ0 este potenţialul chimic standard al speciei respective, atunci când aceasta se află în stare pură, în aceeaşi
stare de agregare ca şi solventul, la temperatura de 25ºC şi presiunea de 1 bar; R = constanta gazelor ideale, T =
temperatura absolută. Unitatea de măsură pentru µ este J/mol.
În soluţii ideale diluate, se poate arăta că un solvit aflat în concentraţie molară c are:
µ = µ0 + RT ln(c/c0)
unde µ0 este potenţialul chimic standard al solvitului (prin convenţie, acesta este potenţialul
chimic al solvitului într-o soluţie ideală de concentraţie 1 M, la temperatura de 25ºC şi presiunea
de 1 bar), iar c0 = 1 M este concentraţia unitate.
Dacă solvitul este un electrolit disociat, la energia chimică a ionilor se adaugă energia
electrică. Dacă sistemul este adus de la un potenţial electric zero la un potenţial electric V,
trebuie efectuat un lucru mecanic suplimentar, egal cu νzFV (ν = numărul de moli, z = valenţa
ionilor, F = constanta lui Faraday). Energia liberă Gibbs este egală cu energia potenţială totală:
G = ν (µ + zFV)
Se defineşte atunci potenţialul electrochimic:
W = µ + zFV = µ0 + RT ln(c/c0) + zFV
Tăria ionică (I) a unei soluţii în care există mai multe specii ionice se referă la
ansamblul ionilor prezenţi şi depinde de concentraţiile şi sarcinile acestora:
I = 1/2 Σ ci zi2
unde ci = concentraţia ionilor de tip „i”; zi = valenţa acestora.
Într-o soluţie în care se produc reacţii chimice, constantele de reacţie depind de tăria
ionică a soluţiei. Se poate determina constanta unei reacţii în soluţii cu compoziţii diferite dacă
soluţiile au aceeaşi tărie ionică.
Ecuaţia Nernst
Dacă o anumită specie ionică se află în concentraţii diferite (c 1, c2) în două soluţii aflate
în compartimente diferite, fiecare soluţie fiind menţinută la un anumit potenţial electric (V 1, V2),
diferenţa de potenţial electrochimic al ionilor în cele două compartimente va fi:
24
DIFUZIA
Difuzia simplă
Dacă într-o soluţie neelectrolitică există un gradient de concentraţie, apare un flux de
substanţă (flux de difuzie) dinspre regiunile cu concentraţie mare spre cele cu concentraţie mică.
Acest flux ia naştere datorită tendinţei moleculelor de a se dispersa în mod spontan, prin mişcări
aleatoare, de agitaţie termică. Difuzia este deci un proces spontan, care se desfăşoară în sensul
creşterii entropiei şi scăderii energiei libere Gibbs a sistemului, conform pricipiului al II-lea al
termodinamicii. Variaţia concentraţiei în timp şi spaţiu în procesul de difuzie este descrisă
cantitativ de legile lui Fick.
Legea I a lui Fick:
Fluxul de difuzie (J) este direct proporţional cu gradientul de concentraţie (dc/dx):
dc
J D
dx
J = ∆ν/(A∆t) este dat de cantitatea de substanţă (numărul de moli ∆ν) care traversează o
suprafaţă de arie A în timpul ∆t. Se măsoară în mol/m 2s. D - coeficient de difuzie; depinde de
mobilitatea particulelor, de vâscozitatea soluţiei, de temperatură. Se măsoară în m 2/s.
c - concentraţia exprimată în mol/m 3. Semnul minus din ecuaţie arată că sensul fluxului de
difuzie este dinspre concentraţie mare spre concentraţie mică. Pentru particule sferice, D este dat
cu bună aproximaţie de relaţia Stokes-Einstein:
D = kT/6r
unde r este raza particulei, k - constanta lui Boltzmann, - coeficientul de vâscozitate al
mediului şi T - temperatura.
Legea I a lui Fick se foloseşte în general în cazurile în care difuzia este staţionară, adică
atunci când distribuţia de concentraţie nu se modifică în timp (gradientul de concentraţie este
menţinut constant în timp). De exemplu, dacă într-o celulă musculară, într-un anumit interval de
CURS DE BIOFIZICĂ 25
timp, se produce un influx constant de ioni de calciu dinspre mediul extracelular, se ajunge în
timp scurt la o stare staţionară în care gradientul de Ca 2+ în citosol devine şi rămâne constant; se
poate aplica atunci legea I a lui Fick pentru a calcula influxul de Ca2+.
Aceste informaţii sunt suplimentare.
Legea a II-a a lui Fick:
Dacă fluxurile de intrare/ieşire sunt variabile în timp sau nu există fluxuri care să menţină distribuţia staţionară de
concentraţie, difuzia este nestaţionară – distribuţia de concentraţie variază în timp. În cazurile în care difuzia este
nestaţionară se utilizează legea a II-a a lui Fick, care mai este numită ecuaţia difuziei:
Variaţia în timp a concentraţiei într-o regiune dată a soluţiei este proporţională cu variaţia în spaţiu a gradientului
de concentraţie, factorul de proporţionalitate fiind tot D:
c 2
c 2
D x
t
Legea a II-a a lui Fick se obţine din legea I a lui Fick şi din ecuaţia de conservare a masei de substanţă care
difuzează, aşa numita ecuaţie de continuitate, conform căreia variaţia concentraţiei particulelor într-o regiune a
sistemului este rezultatul fluxurilor de substanţă în interiorul sistemului şi între sistem şi mediul exterior; se
consideră că nu există procese în care să se producă sau să se distrugă substanţă în sistem (nu există reacţii
chimice). Dacă există reacţii chimice se adaugă în partea dreaptă a ecuaţiei termenul de reacţie care dă viteza netă
de producere a speciei respective.
În general, legea I a lui Fick este folosită în cazurile de transport prin membrane, când fie se cunoaşte fluxul de
particule printr-o membrană (de exemplu, prin curenţi ionici) şi se determină diferenţa de concentraţie pe feţele
membranei, fie invers, cunoscând diferenţa de concentraţie se determină fluxul de particule prin membrană. În
schimb, legea a II-a a lui Fick este folosită în general pentru a calcula cum variază concentraţia în interiorul unui
sistem (de exemplu într-un recipient, într-un compartiment celular etc.) atunci când se cunosc diferitele fluxuri
din sistem.
Concentraţiile speciei la cele două interfeţe membrană/mediu apos vor fi deci c1 şi respectiv
βc2. Gradientul de concentraţie la nivelul membranei este egal cu (βc2 – βc1)/ şi rămâne
constant în timp.
Fig. 1 Difuzia prin membrane. = grosimea membranei; β = coeficientul de partiţie. Preluat după Octavian
Călinescu, Curs de Biofizică Medicală (în pregătire).
Pentru a afla cum variază concentraţia în interiorul membranei se aplică legea a II-a a lui
Fick, obţinându-se o scădere liniară a concentraţiei cu distanţa între cele două interfeţe, ca în
Fig. 1. Pentru a afla fluxul prin membrană se aplică legea I a lui Fick:
/(At) = -D(c)/x = -(D/)(c2 - c) = -(D)c
unde D este coeficientul de difuzie în membrană; c = c2 – c1 este diferenţa de concentraţie între
cele două medii apoase.
Se defineşte P = Dβ/ - coeficientul de permeabilitate a membranei pentru solvit.
Atunci fluxul de difuzie al unei specii neelectrolitice prin membrană devine:
J t) = - Pc
În membranele celulare există atât fluxuri de difuzie cât şi fluxuri datorate unor procese de
transport activ mediate de anumite proteine membranare precum pompele. Ecuaţiile de mai sus
sunt valabile numai pentru fluxurile de difuzie (fluxuri pasive).
Difuzia electroliţilor prin membrane permeabile
Dacă, pe lângă gradientul de concentraţie, între cele două compartimente separate de o
membrană permeabilă există şi o diferenţă de potenţial electric E = V, apare un transport de
ioni, dirijat înspre stabilirea echilibrului electric. În acest caz, fluxul total prin membrană pentru
un anumit tip de ioni este suma dintre fluxul de difuzie şi fluxul de conducţie electrică:
J = -D dc/dx + σ dV/dx
unde σ = conductivitatea electrică a membranei; aceasta depinde de natura şi sarcina ionilor,
precum şi de vâscozitatea membranei; dV/dx = E/δ gradientul de potenţial electric la nivelul
membranei.
Rezultă că la staţionaritate fluxul de ioni prin membrană este:
/(At) = - Pc + σE/δ
Sensul fluxului ionic net este dat de sensul gradientului de potenţial electrochimic al
ionilor respectivi. S-a arătat anterior că diferenţa de potenţial electrochimic între cele două
compartimente este:
W = RT ln(c2/c1) + zF(V2 – V1)
CURS DE BIOFIZICĂ 27
Ionii se vor deplasa deci dinspre compartimentul 2 spre 1 dacă W > 0 (adică ), şi invers,
fluxul va avea sensul 1 → 2 dacă . Dacă un astfel de sistem este menţinut la o diferenţă de
potenţial E constantă şi lăsat să evolueze liber, în final se va atinge echilibrul electrochimic, în
care fluxul ionic net va fi zero, iar W = 0. Concentraţiile ionilor din cele două compartimente
vor fi diferite, conform ecuaţiei Nernst.
OSMOZA
Osmoza este un caz particular de difuzie.
Osmoza reprezintă trecerea spontană a solventului dintr-o soluţie mai diluată într-o
soluţie mai concentrată, soluţiile fiind separate printr-o membrană semipermeabilă.
Prin mişcări de agitaţie termică, particulele solventului difuzează (Fig. 2) dinspre soluţia
care are densitate mai mică de particule de solvent (soluţia 1, mai diluată) spre soluţia cu
densitate mai mare de solvent (soluţia 2, mai concentrată). Particulele de solvent ciocnesc
ambele feţe ale membranei, apar două fluxuri prin membrană (J 12, J21), care dau un flux net (J =
J12 – J21). Numărul particulelor de solvent provenite din soluţia mai diluată şi care permează
membrana este mai mare decât numărul de particule de solvent care ciocnesc membrana dinspre
soluţia mai concentrată. Ca urmare, J12 > J21, iar presiunea exercitată de moleculele solventului
va fi mai mare la interfaţa dintre membrană şi soluţia diluată. Ca urmare, dacă aplicăm din
exterior o anumită presiune asupra soluţiei mai concentrate, putem să creştem fluxul J 21 astfel
încât fluxul net de solvent J să devină zero.
Fig. 2 Osmoza. Două compartimente separate de o membrană semipermeabilă con< in solvit în concentraţii diferite
(c1 < c2). Deşi există o diferenţă de concentra< ie, membrana nu permite trecerea solvitului. Apare, în schimb, un
flux de solvent (apă în acest caz) dinspre compartimentul care conţine cea mai multă apă (unde concentraţia
solvitului este mai mică) spre compartimentul ce conţine mai puţină apă (unde concentraţia solvitului este mai
mare). Preluat după Octavian Călinescu, Curs de Biofizică Medicală (în pregătire).
Presiunea osmotică se defineşte ca fiind presiunea care trebuie aplicată unei soluţii
pentru a opri fluxul net de solvent printr-o membrană semipermeabilă ce separă soluţia de un alt
compartiment în care se află solventul pur.
1. Pentru soluţii moleculare diluate şi neelectrolitice este valabilă legea van’t Hoff:
πV = RT
sau π = RTc
unde π = presiunea osmotică a soluţiei; V = volumul soluţiei; ν = numărul de moli de solvit din
soluţie; c = concentraţia molară a solvitului.
Această lege rezultă din condiţia ca la echilibru potenţialul chimic al solventului să fie
acelaşi în ambele compartimente.
Pentru două soluţii în care solvitul se află în concentraţii diferite (∆c = c2 – c1), fluxul
osmotic este determinat de diferenţa presiunilor osmotice ale soluţiilor:
∆π = RT ∆c
Pentru soluţii cu mai mulţi solviţi având ∆ci = c2i – c1i, se obţine:
∆π = RT Σ(∆ci) = RT ∆(Σci) = RT ∆ctot
28
În general:
Japă = -Papă (p – RT Σ i ci)
Dacă o membrană este total permeabilă faţă de un anumit solvit, acesta nu va contribui la
osmoză, deci i = 0. Dacă membrana este perfect semipermeabilă, i = 1.
Dacă p > π are loc ultrafiltrarea (sub acţiunea presiunii mecanice apa trece în celălalt
compartiment).
Dacă p < π predomină transportul de fluid prin osmoză.
La nivelul capilarelor sanguine, cele două cazuri antrenează procese de ultrafiltrare şi
respectiv reabsorbţie. De exemplu, în porţiunea arterială a vaselor capilare diferenţele de
presiune hidrostatică (p = psânge – pţesut) şi respectiv osmotică (π = πplasmă – πţesut) între lumenul
capilar şi lichidul interstiţial sunt p = 29 Torr, π = 22 Torr (1 Torr = 1 mm Hg). Ca urmare,
are loc un transport de lichid dinspre spaţiul vascular spre interstiţiu, prin ultrafiltrare. În
porţiunea venoasă, p = 7 Torr, π = 22 Torr, deci se produce un transport de lichid dinspre
interstiţiu spre lumenul capilar; procesul se numeşte reabsorbţie. Presiunea hidrostatică a
sângelui (psânge) este determinată de contracţia inimii şi de tensiunile mecanice din pereţii vaselor
de sânge; ea variază de-a lungul sistemului vascular. La nivelul capilarelor arteriale psânge este în
medie de cca. 3 ori mai mare decât la nivelul capilarelor venoase.
Plasma sanguină este o soluţie apoasă de molecule electrolitice (NaCl, KCl) sau
neelectrolitice (glucoză, uree) şi dispersie coloidală de macromolecule proteice (albumine,
globuline, fibrinogen).
Presiunea osmotică a plasmei sanguine este suma: presiunea osmotică a moleculelor
electrolitice + presiunea osmotică a moleculelor neelectrolitice + presiunea oncotică:
π plasmă = π electroliţi + π neelectroliţi + π macromolecule
La 37ºC, πplasmă = 7,6 atm (5776 Torr), din care presiunea oncotică este de doar 28 Torr.
La presiunea oncotică a plasmei, albuminele contribuie practic în proporţie de 65%, iar
globulinele cu 35%. Modificările concentraţiei totale de proteine plasmatice, precum şi
modificarea ponderii albumine/globuline alterează presiunea oncotică. Presiunea coloid-
osmotică are un rol important în schimburile de apă la nivelul capilarelor sanguine. Ionii şi
moleculele nedisociate pot difuza liber prin endoteliul capilar, deci nu au nici o contribuţie la
diferenţa de presiune osmotică între lumenul capilar şi lichidul interstiţial. În condiţii normale,
concentraţia proteinelor este mai mare în plasma sanguină decât în lichidul interstiţial, deci
π = πplasmă – πţesut > 0, iar sensul fluxului de apă prin osmoză este dinspre ţesut spre lumenul
capilar. Dacă albuminele ajung la o concentraţie < 2,5% şi proteinele totale < 5,5% în plasmă,
π devine < 0, iar apa trece spre ţesut.
Prin dezechilibre ale proceselor de ultrafiltrare şi reabsorbţie capilară se produc edeme,
care se datorează creşterii fluxului de apă spre ţesut, prin exacerbarea proceselor de ultrafiltrare
sau reducerea reabsorbţiei. Edemele pot să apară în diferite situaţii, cum ar fi: a) scăderea
concentraţiei proteinelor din plasma sanguină (ex., în nefrită) – presiunea oncotică a plasmei
scade şi π scade, deci se reduce reabsorbţia în capilarele venoase şi este favorizată ultrafiltrarea
la nivelul capilarelor arteriale; b) permeabilizarea membranei vasculare a capilarelor (ex., prin
arsuri, intoxicaţii) – proteinele plasmatice pot trece în ţesut, presiunea oncotică a plasmei
sanguine scade, presiunea oncotică interstiţială creşte, π scade; c) insuficienţă cardiacă sau
obstrucţia venelor mari – fluxul de sânge dinspre vene spre inimă scade, p sânge creşte, p creşte,
deci scade reabsorbţia.
În capsula lui Bowmann din rinichi (Fig. 3), presiunea efectivă în cavitate (urina primară)
este 5 Torr, iar în capilarul sanguin = 75 Torr: p = 75 - 5 = 70 Torr.
Dar = 28 Torr < p - la nivelul capsulei are loc ultrafiltrarea (depinzând de presiunea
arterială) - sub o presiune : p - = 42 Torr
30
Filtrarea glomerulară este urmată de reabsorbţia tubulară, respectiv trecerea din urina
primară în sânge (în capilarele peritubulare) a unei părţi din apă şi substanţe ca aminoacizi,
glucoză, Na+, Cl- prin difuzie şi transport activ (Fig. 4). Membranele celulare permit trecerea
cristaloizilor, dar nu şi pe cea a coloizilor. Separarea cristaloizilor de coloizi cu ajutorul
membranelor semipermeabile se numeşte dializă. Prin dializă renală se realizează depurarea
sângelui de uree.
Două soluţii diferite (în acelaşi solvent) care la aceeaşi temperatură au acelaşi conţinut de
solvent (aceeaşi presiune osmotică) se numesc soluţii izotone (sau izotonice). Dacă una din cele
două soluţii are presiunea osmotică mai mare (densitate mai mică de solvent, soluţia este mai
CURS DE BIOFIZICĂ 21
CURS DE BIOFIZICĂ 31
concentrată), soluţia se numeşte hipertonă sau hipertonică. Dacă una din soluţii are presiunea
osmotică mai mică (densitate mai mare de solvent, soluţia este mai diluată), soluţia se numeşte
hipotonă sau hipotonică. Efectele plasării celulelor în medii de tonicitate diferită sunt prezentate
în Fig. 5.
Fig. 5 Efectul plasării eritrocitelor în medii de tonicitate diferită. Figură adaptată după Wikimedia Commons
(https://commons.wikimedia.org/wiki/File:Osmotic_pressure_on_blood_cells _diagram.svg).
Dacă o celulă este plasată într-o soluţie izotonă cu citosolul, schimbul net de apă între
celulă şi mediu este zero, iar celula îşi menţine forma iniţială.
Dacă soluţia este hipotonă faţă de citosol, se produce turgescenţa (umflarea) celulei, care
poate duce la citoliză. Dacă soluţia este hipertonă faţă de citosol, celula pierde apă – se produce
ratatinarea (zbârcirea) celulei.
Pentru celulele organismului uman ca soluţie izotonă este folosit serul fiziologic, care
conţine 9‰ NaCl (9 g de NaCl dizolvate în 1000 ml de apă).
mod similar fosfolipidelor, dar difuzia lor este mult mai lentă.
Marea majoritate a lipidelor conţinute de diverse membrane celulare sunt gliceride; ele
derivă din molecula de glicerol, care prezintă trei grupări hidroxil (OH). În cazul celulelor
eucariote, două dintre aceste grupări OH sunt legate fiecare la câte un lanţ de acizi graşi (lanţ
hidrocarburic), printr-o reacţie de condensare care duce la formarea unei legături esterice între
glicerol şi acidul gras respectiv. La fosfogliceride, al treilea hidroxil al glicerolului se leagă la o
grupare fosfat (PO4¯) în urma unei reacţii de condensare între glicerol şi acidul fosforic (H 3PO4).
Gruparea fosfat se poate lega în continuare fie la una din următoarele patru grupări polare:
colina, etanolamina, serina sau inositol, fie la un atom de hidrogen, rezultând cele cinci tipuri de
fosfogliceride: fosfatidilcolina (lecitina) (Fig. 1), fosfatidiletanolamina, fosfatidilserina,
fosfatidilinositol şi acidul fosfatidic. Toate aceste modificări determină structura specifică
fosfolipidelor, care au un capăt polar, hidrofil şi două lanţuri hidrocarburice nepolare, hidrofobe.
Fosfolipidele sunt, de aceea, molecule amfifile (prezintă atât caracter hidrofil cât şi caracter
hidrofob). Capătul polar al fosfolipidelor are o sarcină electrică netă negativă.
hidrofile spre exterior, într-un aranjament care în acest fel minimizează energia liberă a
sistemului apă-lipide. Lipidele care au lanţuri hidrocarburice scurte, conţinând 2 până la 4 atomi
de carbon, sunt solubile în apă. Pe măsură ce lanţurile hidrofobe devin mai lungi, lipidele încep
să se autoorganizeze spontan în micele. Atunci când lipidele au în jur de 10 atomi de carbon în
lanţurile hidrocarburice, ele formează bistraturi semi-stabile, în care pot rămâne capturate
molecule de apă. Stabilitatea bistratului lipidic creşte odată cu lungimea lanţurilor
hidrocarburice, în timp ce permeabilitatea bistratului scade. În general, lanţurile lipidelor aflate
în componenţa membranelor celulare conţin 16-20 atomi de carbon.
Fig. 2 Structuri formate de lipide în soluţie. A, bistrat. B, micelă. Adaptată după Wikimedia Commons
(https://commons.wikimedia.org/wiki/File:Lipid_bilayer_and_micelle.svg).
Odată format, bistratul lipidic este stabilizat prin acţiunea unor forţe de slabă intensitate.
Astfel, forţe de tip van der Waals apar în urma apropierii spaţiale a lanţurilor de acizi graşi,
determinată de împachetarea compactă a lipidelor din bistrat. De asemenea, apar legături de
hidrogen şi atracţii electrostatice (legături ionice) între grupările hidrofile ale fosfolipidelor şi
moleculele soluţiei apoase. Spunem că repulsia hidrofobă determină formarea bistratului lipidic,
iar celelalte forţe slabe îl stabilizează. Structura bistratului se schimbă odată cu modificarea
temperaturii (Fig. 3). La temperaturi scăzute, lanţurile hidrocarburice ale lipidelor sunt strâns
împachetate şi membrana devine rigidă (se solidifică). Odată cu creşterea temperaturii, lanţurile
lipidice devin din ce în ce mai dezordonate, fluiditatea creşte, iar membrana începe să se
topească.
Fig. 3 Membrană rigidă (A) şi fluidă (B). Adaptată după Wikimedia Commons
(https://commons.wikimedia.org/wiki/File:Lipid_bilayer_and_micelle.svg).
Dacă o moleculă lipidică este plasată într-o soluţie apoasă, moleculele de apă din jur nu
vor putea forma legături de hidrogen cu lipidul. De aceea, pentru a minimiza energia liberă a
sistemului, moleculele de apă vor tinde să formeze cât mai multe legături între ele şi vor avea
mai puţină libertate de mişcare, ceea ce duce la ordonarea moleculelor de apă într-o structură de
tip cristalin, numită clatrat. Un clatrat are în general forma unui poliedru cu 12 sau 16 feţe
pentagonale, în centrul căruia se află molecula hidrofobă. În schimb, în cazul în care lipidele
sunt suficient de numeroase pentru a se produce separarea celor două faze (apă/lipide) prin
formarea unor structuri lipidice compacte (micele, bistraturi), realizarea clatraţilor nu va mai fi
posibilă şi moleculele de apă vor deveni mai dezordonate.
CURS DE BIOFIZICĂ 21
electronic au arătat că membranele celulare sunt bistraturi lipidice în care sunt încorporate
integral sau parţial proteine, glicoproteine şi lipoproteine.
Studii recente indică existenţa în membrană a unor microdomenii (raft-uri sau plute
lipidice) bogate în colesterol, fosfosfingolipide, glicolipide şi anumite proteine membranare.
Aceste microdomenii, care prezintă un grad ridicat de ordonare şi compactare comparativ cu
restul membranei, plutesc liber în bistratul membranar, sunt foarte stabile şi joacă un rol
important în derularea unor procese metabolice şi în organizarea unor structuri specializate ale
membranei, cum ar fi caveolele.
diverselor molecule prin membrana celulară se poate realiza fie fără consum de energie
metabolică (transport pasiv), fie cu consum de energie celulară metabolică (transport activ).
Transportul pasiv
În procesele de transport pasiv moleculele transportate se deplasează prin mişcări de
agitaţie termică precum şi prin mişcări determinate de forţele de atracţie sau respingere
electrostatică între moleculele respective şi moleculele membranei sau ale mediilor apoase; ca
urmare, moleculele transportate se deplasează în sensul gradientului potenţialului lor
electrochimic (dacă potenţialul electric este acelaşi pe ambele feţe ale membranei, moleculele se
vor deplasa în sensul gradientului de concentraţie). Prin transport pasiv sistemul are tendinţa de a
ajunge la echilibru termodinamic. Pentru transportul unei specii ionice, dacă în expresia
diferenţei de potenţial electrochimic notăm c1 = cin, c2 = cex, V1 = Vin, V2 = Vex obţinem:
W = Win - Wex = RT ln cin/cex + zF (Vin - Vex)
Dacă W > 0 – ionii au tendinţa de a părăsi celula.
Dacă W < 0 – ionii au tendinţa de a pătrunde în celulă, dacă membrana este permeabilă
pentru aceştia.
Transportul unei specii ionice încetează la echilibru, când W = 0. În acest caz
potenţialul de membrană, E, satisface ecuaţia Nernst:
E = Vin - Vex = (RT/zF) ln cex/cin
Există trei mecanisme distincte de transport pasiv:
- difuzie simplă prin dizolvare în bistratul lipidic;
- difuzie facilitată - este mediată de proteine membranare, fie constitutive, fie inserate;
- difuzie prin pori formaţi prin extracţia unor componente membranare.
Fig. 5 Difuzia simplă a unei molecule prin bistratul lipidic. Adaptată după Wikimedia Commons
(https://commons.wikimedia.org/wiki/File:Lipid_bilayer_and_micelle.svg).
CURS DE BIOFIZICĂ 21
Difuzia facilitată reprezintă transportul prin membrană al unor molecule care sunt
insolubile în bistratul lipidic, realizat prin intermediul unor proteine, care pot fi proteine aflate în
constituenţa membranei sau pot fi proteine endogene sau exogene care se inserează în bistratul
lipidic. În procesul de difuzie facilitată nu se consumă energie; deplasarea moleculei transportate
se face în sensul gradientului său electrochimic.
Difuzia facilitată se poate realiza în două moduri:
1. prin proteine formatoare de canale (proteine-canal sau canale membranare) sau de pori;
2. prin proteine transportoare.
La rândul lor, proteinele transportoare sunt de două tipuri:
a) transportori intrinseci care trec molecula hidrofilă de pe o parte pe alta a membranei printr-un
mecanism de tip ping-pong ce implică o modificare în propria conformaţie a proteinei uniport;
b) transportori mobili în bistratul lipidic (transportori difuzibili).
1. Difuzia facilitată prin canale permite un transport extrem de rapid prin membrană.
Canalele membranare joacă de aceea un rol extrem de important în procesele de semnalizare
celulară, în care viteza de transmitere a informaţiei este un element critic. Un canal membranar
este o proteină integrală complexă care formează o cale de trecere pentru ioni sau molecule mici,
insolubile în matricea lipidică a membranei. Canalele pot fi ionice (transportă ioni) sau
moleculare (transportă molecule mici, precum apa). În general, canalele membranare sunt
selective: ele prezintă o mare specificitate pentru anumiţi ioni sau molecule, nepermiţând altor
tipuri de ioni sau molecule să le traverseze. Aminoacizii hidrofobi ai unei proteine-canal se
orientează spre regiunea lipidică hidrofobă a membranei, în timp ce aminoacizii hidrofili ai
proteinei se orientează spre interiorul canalului, pentru a putea interacţiona cu molecula hidrofilă
care traversează membrana prin canal. Există deci în structura canalului o anumită regiune,
numită filtru, care determină proprietăţile selective ale canalului.
Canalele membranare pot fi cu poartă (se deschid intermitent) sau fără poartă (sunt
deschise permanent).
De exemplu, membrana neuronală conţine canale ionice de K+ fără poartă, care au rol în
menţinerea potenţialului de repaus. De asemenea, numeroşi ionofori sunt proteine formatoare de
canale fără poartă (ionoforii sunt specii moleculare care leagă ioni în mod reversibil). Un
exemplu este antibioticul gramicidina, care formează canale ce transportă ioni Na+, pentru care
prezintă două situsuri de legare.
Canalul acvaporin (Fig. 6), care este un canal cu poartă, este foarte selectiv pentru
moleculele de apă, acestea orientându-se în câmpul electric produs de atomii aflaţi în peretele
interior al canalului. În schimb, ionii pozitivi (cum ar fi H3O+, Na+) sunt respinşi de sarcinile
pozitive aflate în regiunea centrală internă a proteinei-canal (în filtru). Canalul se închide în
condiţii de anoxie indusă de excesul de apă, precum şi în cazul în care conţinutul intracelular de
apă este deficitar, având un rol esenţial în menţinerea echilibrului osmotic.
Activitatea unui canal cu poartă este discontinuă: perioadele în care canalul este deschis
alternează cu perioade de inactivitate, în care canalul este închis. Deschiderea şi închiderea
CURS DE BIOFIZICĂ 21
canalului au loc în urma unei modificări conformaţionale care este comandată printr-un
mecanism specific, sensibil la un stimul ce poate fi de tip:
- electric, respectiv prin modificarea potenţialului membranar (de exemplu, canalele de
Na , K operate electric din membrana axonală);
+ +
- chimic - canalul este operat de ligand (de exemplu, receptorul nicotinic de acetilcolină
ori canalele de Na+, Ca2+ controlate de c-GMP în membrana celulelor fotoreceptoare) sau suferă
modificări chimice ale unor resturi de aminoacizi (cum este cazul canalului acvaporin);
- mecanic (de exemplu, canalul de K+ de la polul apical al stereocililor celulelor ciliate
din organul lui Corti este activat prin presiune);
- termic (deschiderea canalului este stimulată de căldură sau de frig);
- electromagnetic (lumina) - canalul se deschide în urma absorbţiei unui foton, cum este
cazul unor rodopsine care funcţionează ca şi canale ionice (canalorodopsinele).
În structura unui canal ionic cu poartă (Fig. 7) se disting câteva domenii caracteristice:
filtrul ionic, vestibulul, poarta şi senzorul. În vestibul ajung numai ionii selectaţi în filtru; filtrul
nu permite trecerea moleculelor mari, cum ar fi de exemplu glucoza. Poarta se închide sau se
deschide în funcţie de reacţia senzorului la diferitele semnale recepţionate. Senzorul poate fi o
regiune distală a proteinei-canal, aflată în contact cu mediul apos de pe una din feţele
membranei, sau o regiune internă a proteinei. Semnalele la care este sensibil senzorul pot fi
chimice, electrice, mecanice, termice sau electromagnetice.
Fig. 7 Structura unui canal ionic activat chimic. Filtrul de selectivitate (F) nu permite ionilor de dimensiuni mari
(cercuri goale) să treacă, dar permite trecerea altor ioni (cercuri pline). Odată trecuţi de filtru, ionii ajung în vestibul
(V) şi pot trece de cealaltă parte a membranei doar dacă poarta (P) este deschisă. Poarta este controlată de legarea
ligandului (L) de senzor (S). Preluat după Octavian Călinescu, Curs de Biofizică Medicală (în pregătire).
Canalele ionice pot fi inhibate cu blocanţi specifici cum ar fi diverse toxine (în cazul
canalului de Na+ blocantul specific este tetrodotoxina). Asemenea experimente de inhibiţie
permit studierea proprietăţilor canalelor.
Difuzia facilitată mediată de proteine formatoare de pori: anumite virusuri produc
holine şi viroporine, proteine care se inserează în plasmalemă ca proteine transmembranare
(integrale) ce formează pori în membranele celulelor eucariote, favorizând astfel infecţia celulei
gazdă. Porii sunt structuri pasive neselective, ceea ce contează este diametrul speciilor
transportate. Transportul prin pori nu implică modificări conformaţionale în structura porului, nu
prezintă mecanisme de reglare. Există de asemenea toxine formatoare de pori (-hemolizina,
antrax), al căror efect cito-letal se datorează efluxului de ioni, aminoacizi, nucleotide şi alte
molecule de mici dimensiuni, precum şi influxului de apă, care induc dezechilibre osmotice şi
dereglează sinteza proteică şi diverse procese de semnalizare celulară.
În difuzia facilitată mediată de transportori intrinseci cu două stări conformaţionale
T1 şi T2 (uniporteri sau transportori uniport), molecula transportată (substratul S) se leagă la
CURS DE BIOFIZICĂ 21
proteină pe una din feţele membranei (Fig. 8A). Se produce în urma legării o modificare
conformaţională în configuraţia T2 şi situsul de legare este expus părţii opuse cu scăderea
afinităţii pentru specia respectivă şi eliberarea acesteia. În numeroase tipuri celulare, mecanismul
principal prin care se realizează influxul de glucoză este difuzia facilitată mediată de
transportorii pentru glucoză din familia GLUT.
Difuzia facilitată mediată de transportori difuzibili implică proteine transportoare mai
mici, liposolubile, care pot circula fără dificultate în bistratul lipidic (Fig. 8B). Acestea prezintă
un situs de legare specific pentru specia transportată (S). Atunci când situsul este expus pe una
din feţele membranei, o moleculă S se leagă la transportor şi este inclavată în interiorul hidrofil
al transportorului. Proteina îşi expune regiunile hidrofobe spre exterior şi traversează bistratul
lipidic, eliberând molecula S pe cealaltă faţă a membranei. Transportorii difuzibili transportă în
general ioni, de aceea se mai numesc ionofori transportori. Un exemplu este antibioticul
valinomicină, care la fiecare ciclu transportă un ion K+, atingând o viteză de transport prin
membrană de 104 ioni K+/s pentru fiecare moleculă de valinomicină.
A. B.
S S Transportor
T1 T2
Transportor
Fig. 8 Difuzia facilitată mediată de transportori intrinseci cu două stări conformaţionale T1 şi T2 (A) şi de
transportori difuzibili (B). Adaptată după
https://d2gne97vdumgn3.cloudfront.net/api/file/Fdd09cxMT02TIUM7zpiq şi
https://en.wikipedia.org/wiki/Ionophore#/media/File:Jonofory.png).
de creştere a entropiei care să ducă la anularea acestor gradienţi. Astfel de proteine se numesc
pompe membranare. Transportul activ primar este posibil numai prin cuplarea sa energetică cu
reacţii care furnizează energie liberă (reacţii exergonice); este de aceea un proces endergonic
(consumator de energie). Reacţiile exergonice care furnizează energia necesară funcţionării
pompelor membranare sunt în general reacţii metabolice; există însă şi pompe care utilizează
energia luminii. Astfel, se poate face o primă clasificare în: 1) pompe ionice activate de lumină
(proteine retinale cum ar fi bacteriorodopsina BR sau halorodopsina, proteine Fotoredox) şi 2)
ATP-aze. La rândul lor, ATP-azele sunt grupate în mai multe familii: familia FoF1 (F-ATP-aze-
care activează sinteza ori hidroliza ATP în funcţiile de condiţiile mediului şi V-ATPaze – care
controlează acidifierea conţinutului diferitelor vezicule - acestea se găsesc în sistemul vacuolar
al eucariotelor), familia ATP-azelor de tip P conţinând proteine care produc diverşi gradienţi
transmembranari şi familia transportorilor ABC unii dintre aceştia fiind în acelaşi timp şi canale.
Din categoria pompelor ionice activate de lumină, cea mai cunoscută este
bacteriorodopsina aflată în membranele unor bacterii şi aparţinând familiei proteinelor retinale
care au drept cromofor retinalul. Sub acţiunea luminii, care induce o reacţie de fotoizomerizare a
retinalului, bacteriorodopsina suferă o modificare conformaţională în urma căreia este translocat
un proton din citoplasmă în exteriorul celulei.
Majoritatea pompelor ionice funcţionează pe principiul utilizării energiei moleculei de
ATP pentru a transporta anumiţi ioni împotriva gradientului electrochimic între cele două feţe
ale membranei; molecula de ATP se leagă la molecula pompei ionice şi este hidrolizată la ADP
(Fig. 9), proces în care este eliberată o parte din energia chimică a ATP-ului.
Proteina care constituie pompa ionică absoarbe parţial energia furnizată prin hidroliza
ATP şi îşi schimbă conformaţia. Prin această modificare conformaţională, pompa efectuează
trecerea moleculei hidrofile de pe o parte pe alta a membranei. Energia absorbită de proteină este
în final cedată prin relaxarea structurii pompei, care revine la conformaţia iniţială şi ciclul poate
fi reluat. Energia care nu este absorbită de pompă este disipată prin încălzirea locală a mediului
apos în care se produce hidroliza ATP.
Procesul de transport activ primar este mecanismul principal prin care sunt menţinute
diferenţele de concentraţii ionice între diferitele compartimente celulare, precum şi între citosol
şi mediul extracelular. În organism, cel mai important rol în menţinerea potenţialului de repaus
la valoare constantă îl au pompele de Na+-K+ (Fig. 10, 11) care extrag trei ioni de sodiu din
celulă şi introduc doi ioni de potasiu din mediul extracelular în celulă pentru fiecare moleculă de
ATP hidrolizată.
Modul de funcţionare este descris de schema Albers-Post (Fig. 10). În conformaţia de
repaus (E1), pompa prezintă pe partea intracelulară o afinitate foarte mare pentru ionii Na + şi
foarte mică pentru ionii K+. Ca urmare, ionii Na+ ajunşi prin difuzie din mediul intracelular la
situsurile de legare ale pompei se leagă la acestea, stimulând hidroliza moleculei de ATP (în
prezenţa Mg2+) care este legată de pompă (E1P). Ca urmare, complexul fosforilat suferă o
tranziţie conformaţională E1 - E2. În noua conformaţie (E2P), situsurile de legare ale sodiului sunt
expuse mediului extracelular, iar accesul ionilor Na+ dinspre regiunea intracelulară este
CURS DE BIOFIZICĂ 21
blocat. Tot în noua conformaţie, afinitatea pompei pentru Na+ este foarte mică, astfel încât ionii
Na+ se desprind de situsurile pompei şi difuzează în mediul apos extracelular.
În schimb, în această conformaţie afinitatea proteinei faţă de ionii K + este foarte mare,
ceea ce favorizează legarea rapidă a ionilor de potasiu la situsurile pompei. Prin ataşarea K + are
loc o defosforilare (E2). Gruparea fosfat părăseşte proteina, permiţând legarea unei alte molecule
ATP în locul său. Ionii K + legaţi la proteină sunt acum expuşi mediului intracelular. Deoarece
afinitatea faţă de K+ este din nou redusă, ionii K+ se desprind şi difuzează în mediul intracelular
iar enzima se relaxează la conformaţia iniţială E1.
O singură moleculă de Na+-K+-ATP-ază scindează în jur de 100 molecule de ATP pe
secundă, iar la fiecare ciclu de funcţionare transferă o sarcină electrică netă pozitivă spre
exterior, ceea ce contribuie la polarizarea electrică a membranei. Această proprietate defineşte
caracterul electrogenic al pompei. Pompa de Na+-K+ se găseşte în plasmalema tuturor celulelor
de origine animală. În repaus, cca. 30% din energia ATP-ului celular este consumată pentru
funcţionarea acestei pompe. În celulele nervoase, în faza de repolarizare acest consum ajunge la
70% din consumul energetic celular.
În membranele celulare există şi alte tipuri de pompe ionice. Un rol foarte important îl
are Ca -ATP-aza, care menţine o concentraţie foarte redusă de Ca2+ în citosol, de ordinul ~100
2+
nM. Pentru fiecare moleculă de ATP hidrolizată, Ca 2+-ATP-aza pompează câte doi ioni de calciu
din citosol. Datorită pompelor de calciu din plasmalemă şi din membrana reticulului
endo/sarcoplasmic, gradientul ionilor de calciu este menţinut la o valoare foarte mare (2-3 ordine
CURS DE BIOFIZICĂ 21
de mărime) atât între citosol şi mediul extracelular, cât şi între citosol şi interiorul reticulului
endo- sau sarcoplasmic (în condiţii normale, concentraţia Ca2+ atât în reticul cât şi mediul
extracelular este în jur de 1 mM). Dacă funcţionarea Ca2+-ATP-azei este deficitară, celula va
avea un nivel toxic de calciu citosolic, care va declanşa apoptoza (moartea celulară programată).
O altă pompă ionică este H+-K+-ATP-aza care se găseşte în membranele plasmatice ale celulelor
mucoasei gastrice şi rinichilor, fiind implicată în secreţia gastrică şi duodenală. Aceasta
transportă 1 H+ spre exteriorul celulei contra a 1 K+ spre interiorul celulei.
În general, pompele membranare sunt reversibile. În cazul în care concentraţiile de sodiu
extracelular şi de potasiu intracelular sunt excesiv de mari, iar concentraţiile de ADP şi fosfat
intracelular (Pi) sunt suficient de mari, ciclul pompei de Na+-K+ poate funcţiona în sens invers,
iar aceasta începe să sintetizeze ATP. Un exemplu remarcabil este ATP-sintetaza, care se află în
membrana mitocondriilor, cloroplastelor sau ale bacteriilor aerobe sau fotosintetice. Această
enzimă complexă fie sintetizează ATP folosind gradientul existent de H+, fie funcţionează ca H+-
ATP-ază, producând un gradient de protoni. În cele două cazuri, deplasarea protonilor are loc în
sensuri opuse.
Cea mai largă şi diversificată familie de transportori este cea a transportorilor ABC (ATP
Binding Casette). Aceştia se găsesc în toate organismele. Pot avea ca substrat ioni anorganici,
zaharuri, aminoacizi, polizaharide complexe, peptide si chiar proteine. Unii dintre aceştia pot să
fie în acelaşi timp canale. Exemple de astfel de transportori sunt CFTR (cystic fibrosis
transmembrane conductance regulator - regulatorul conductanţei transmembranare în fibroza
chistică) şi MDR1 şi MDR2 (multiple drug resistance proteins - proteinele care determină
rezistenţa la multiple substanţe toxice). CFTR permite ionilor Cl - să iasă din celulă pe baza
gradientului lor electrochimic. Deschiderea canalului este comandată de hidroliza ATP. NaCl la
polul apical al celulelor pulmonare creează o presiune osmotică datorită căreia apa din celule
este extrasă prin canalele pentru apă – acvaporinele. Speciile ionice sunt din nou transportate în
celule prin pompa de Na+-K+, respectiv transportorul Na+, K+, 2Cl- şi circuitul se reia. În acest fel
se păstrează un echilibru hidric ce permite curăţarea de bacterii şi secreţii a lumenului
bronhiolelor. În lipsa Cl-, prin mutaţii la nivelul CFTR (nu se exprimă o fenilalanină) plămânul
este uscat şi se acumulează secreţii, mucus, prin activitatea bacteriilor. Apar infecţii şi nu se mai
pot face corect schimburile de gaze. Boala se numeşte fibroză chistică sau mucoviscidoză şi este
în prezent incurabilă, reducând considerabil speranţa de viaţă a celor afectaţi. În anumite situaţii,
celulele pot, de asemenea, să sintetizeze proteine care să formeze pompe membranare, pentru a
elimina anumite substanţe toxice sau medicamente. Prin acest mecanism, de exemplu, în
chimioterapia cancerului apare rezistenţa la medicamentele administrate. Asemenea proteine
sunt MDR1 şi MDR2. Acestea pot transporta o multitudine de molecule hidrofobe, molecule
care pot intra în celulă prin bistratul lipidic şi care pot fi toxice pentru aceasta. MDR elimină din
celulă aceste molecule. Dar asemenea molecule pot fi şi medicamentele utilizate în
chimioterapie. Celulele canceroase pot să supraexprime asemenea transportori reducând
eficienţa chimioterapiei.
În procesele de transport activ secundar sunt implicaţi transportori complecşi, care
cuplează doi gradienţi electrochimici diferiţi, astfel încât energia eliberată prin mişcarea unor
molecule de un anumit tip în sensul gradientului lor electrochimic este folosită pentru a
transporta molecule de alt tip împotriva gradientului lor electrochimic. Astfel de transportori se
numesc cotransportori, iar procesul se numeşte cotransport sau transport cuplat. Transportul
cuplat este de două feluri: simport, în care ambele tipuri de molecule sunt transportate în acelaşi
sens, şi antiport, prin care cele două tipuri de molecule sunt transportate în sensuri opuse.
Simportul este implicat, de exemplu, în transferul glucozei din intestin în sânge prin
celulele epiteliului intestinal (Fig. 12). În membrana bazală (dinspre interstiţiu) a celulelor
epiteliale se găsesc pompe de Na+-K+, care menţin o concentraţie scăzută de ioni Na+ în interior
(10-15 mM faţă de 144 mM în exterior şi 144 mM în lumenul intestinului). În membrana apicală
(dinspre lumen) se găsesc cotransportori care transferă simultan (prin simport) câte un ion Na+ şi
CURS DE BIOFIZICĂ 21
Fig. 12 Absorbţia glucozei în intestin este realizată pe baza gradientului de concentraţie al ionilor de Na+ prin
intermediul cotransportorului de Na+ şi glucoză (SGLT – sodium glucose transporter). Adaptată după Wikimedia
Commons (https://commons.wikimedia.org/wiki/File:Na-Glucose-Symport.svg).
3. Mecanisme de macrotransport
În procesele de macrotransport substanţele intră sau ies din celulă sub forma unor
aglomerări multimoleculare. În procesele de transport membranar discutate mai sus moleculele
sau ionii erau transportaţi individual prin membrană; de aceea transportul membranar se mai
numeşte microtransport. Deşi în procesele de macrotransport diverse substanţe sunt introduse
sau scoase din celulă, aceasta nu se realizează prin traversarea propriu-zisă a membranei
plasmatice, ci prin formare de vezicule membranare care sunt înglobate sau eliminate din celulă.
Există trei tipuri de macrotransport: endocitoză, exocitoză şi transcitoză.
În procesul de endocitoză materialul extracelular este introdus în interiorul celulei, fără a
fi însă dispersat în citoplasmă (rămâne în continuare ca material extra-citoplasmatic). Cele trei
modalităţi de macrotransport prin endocitoză sunt: fagocitoza, pinocitoza şi endocitoza mediată
de receptori (Fig. 14).
1. Receptorii ionotropi
Receptorii asociaţi cu canale ionice au o zonă receptoare de care se leagă mesagerul prim
şi o zonă efectoare prin care comunică senzorului canalului comanda de deschidere sau închidere
a porţii; în urma activării afectează direct activitatea celulei prin deschiderea nemijlocită a unor
canale ionice. Un exemplu de receptor ionotrop este receptorul nicotinic de acetilcolină fomat
din 5 subunităţi (Fig. 15). Prin legarea ACh de subunităţile ale receptorului, are loc o
modificare conformaţională în urma căreia canalul interior format de cele 5 subunităţi se
deschide şi permite trecerea nestingherită a ionilor.
Proteina G, alcătuită din 3 subunităţi notate , şi , care în stare liberă leagă GDP,
suferă la rândul ei o modificare conformaţională în urma căreia eliberează GDP şi leagă GTP la
subunitatea . Subunitatea se separă de subunităţile şi şi difuzează pâna când întâlneşte un
efector (zona efectoare), adenilat ciclaza. Prin legare de efector acesta se activează şi catalizează
transformarea ATP din celulă în c-AMP (mesager secund); c-AMP declanşează o serie de reacţii
enzimatice prin care este activată enzima fosforilază şi aceasta din urmă determină
transformarea glicogenului în glucoză ce este eliberată din celulă (răspunsul celular). După
activarea efectorului, subunitatea a proteinei G, prin hidroliza GTP devine inactivă şi se
recombină cu subunităţile şi , refăcând proteina G. Procesul se poate relua. Mesagerul secund
c-AMP poate activa o serie de protein kinaze care, la rândul lor, determină în ultimă instanţă
eliberarea de hormoni, neurotransmiţători etc.
Un alt exemplu este reprezentat de ciclul biochimic al rodopsinei în excitaţia vizuală.
Receptorul pentru lumină, rodopsina, leagă în urma fotoactivării traductina (proteină G) şi, în
mod analog, traductina activează o proteină efectoare (PDE). PDE converteşte c-GMP (mesager
secund) în GMP. Prin această conversie se închid canalele de Na + şi Ca2+. Celula se
hiperpolarizează şi informaţia este transmisă creierului pe căile nervoase.
Fig. 17 Funcţionarea receptorului de insulină. Legarea insulinei de receptor (1) provoacă mai multe efecte,
printre care translocarea transportorului GLUT4 spre membrană (2), urmată de un influx crescut de glucoză în celulă
(3), sinteza de glicogen (4), glicoliza (5) şi sinteza de acizi graşi (6). Figură adaptată după Wikimedia Commons
(https://commons.wikimedia.org/wiki/File:Insulin_glucose_metabolism.jp
CURS DE BIOFIZICĂ 23
FENOMENE BIOELECTRICE
1. Potenţialul de repaus al celulelor
2. Potenţialul de acţiune celular
3. Propagarea potenţialelor de acţiune
4. Sinapsele neuronale
5. Bioexcitabilitatea
Fig. 1 Distribuţia diferită intra- şi extracelulară a speciilor ionice. Prin acţiunea ATP-azei de Na +/K+ concentraţiile
de Na+ şi K+ sunt menţinute în aşa fel încât [Na+]ex > [Na+]in (de aproximativ 10 ori) şi [K+]in > [K+]ex (de
aproximativ 20 ori). De asemenea, concentraţiile de Cl- şi Ca2+ sunt menţinute mai ridicate în exteriorul celulei faţă
de citoplasmă. Imagine adaptată după Wikimedia Commons
(https://commons.wikimedia.org/wiki/File:Basis_of_Membrane_Potential2.png)
Cazul 1. În cele două compartimente ale sistemului (Fig. 2) se găseşte KCl în concentraţii
diferite (c1 > c2) şi aceste compartimente sunt separate printr-o membrană impermeabilă.
Fig. 2 Cazul 1, două compartimente (1 şi 2) conţinând concentraţii diferite de KCl (c 1>c2) sunt separate de o
membrană impermeabilă. Preluat după Octavian Călinescu, Curs de Biofizică Medicală (în pregătire).
Deşi între cele două compartimente există o diferenţă de concentraţie, difuzia nu poate
avea loc, deoarece membrana este impermeabilă. Având în vedere că în fiecare compartiment
numărul de sarcini pozitive este egal cu numărul de negative, ([K +]1 = [Cl-]1 şi ([K+]2 = [Cl-]2),
diferenţa de potenţial dintre cele două compartimente este 0.
Fig. 3 Cazul 2, două compartimente (1 şi 2) conţinând concentraţii diferite de KCl (c 1>c2) sunt separate de o
membrană inegal permeabilă pentru K+ şi Cl-. Preluat după Octavian Călinescu, Curs de Biofizică Medicală
(în pregătire).
E E E RT c1
PCl PK ln
1 2
PCl PK zF c2
Fig 4 Cazul 3, două compartimente (1 şi 2) conţinând concentraţii diferite de KCl (c1>c2) sunt separate de o
membrană permeabilă numai pentru K+. Preluat după Octavian Călinescu, Curs de Biofizică Medicală (în
pregătire).
zF K
1
ln
2
Fig. 5 Cazul 4, două compartimente (1 şi 2) sunt separate de o membrană selectiv permeabilă numai pentru K + şi Cl-
Preluat după Octavian Călinescu, Curs de Biofizică Medicală (în pregătire).
Deoarece, prin prezenţa macroionilor proteici, numărul de particule va fi mai mare în primul
compartiment, deci 1 2, apare un flux osmotic dinspre compartimentul (2) spre
compartimentul (1). Pe de altă parte, datorită AZ-, în compartimentul (1) se află mult mai multe
sarcini negative, astfel încât sunt atraşi ionii de K+ din compartimentul (2) şi respinşi ionii de Cl-
din compartimentul (1).
[K+]1 > [K+]2, [Cl-]1 < [Cl-]2
CURS DE BIOFIZICĂ 23
RT ln c1/c2 + zFE = 0
Sistemul este în echilibru când Welectrochimic este acelaşi pentru ambele tipuri de ioni, astfel încât se
stabileşte o diferenţă de potenţial numită potenţial Donnan:
E
RT K RT Cl
1
1
l ln
nK Cl
F 2 F 2
Astfel, repartiţia inegală a ionilor difuzibili determină apariţia unui echilibru numit echilibru
Donnan caracterizat prin următoarele:
K Cl
1
1) Cl r 2
K
1
2
2) r 1
3) 1 2
Cazul 5. Se consideră un montaj (Fig. 6) analog cu cel din cazul anterior, dar care conţine
în compartimentul al doilea un ion considerat nedifuzibil prin membrană, de exemplu Na+.
Fig. 6 Cazul 5, două compartimente (1 şi 2) sunt separate de o membrană selectiv permeabilă numai pentru K + şi Cl-
. Compartimentul 1 conţine şi anionii proteici A-z iar compartimentul 2 conţine Na+. Preluat după Octavian
Călinescu, Curs de Biofizică Medicală (în pregătire).
Acest caz este ilustrat în Fig. 7 luând ca exemplu concret distribuţia ionilor în
compartimentele intra- şi extracelular ale fibrei musculare.
Fig. 7 Distribuţia speciilor ionice în cazul unei fibre musculare. in = intracelular; ex = extracelular.
Deoarece numărul de particule în unitatea de volum este acelaşi, presiunea osmotică este
aceeaşi în ambele compartimente (izotonicitate).
CURS DE BIOFIZICĂ 23
K
Cl
Na
K C 30 Na 14,5
in ex ex
ex
l
in
+
in
RT K
F K in
Observaţia privind faptul că Na rămâne mult mai abundent în spaţiul extracelular faţă
+
de citoplasmă, deşi atât gradientul de concentraţie cât şi cel de potenţial tind să-l introducă în
celulă, a dus la ipoteza că membrana celulară ar fi impermeabilă pentru Na +. Pe baza acestei
ipoteze potenţialul de repaus a fost asimilat cu potenţialul de echilibru al K+. S-a arătat ulterior
că Na+ poate intra pasiv în celulă, dar concentraţia rămâne constantă datorită scoaterii lui active
prin pompele ionice. Se creează astfel o stare staţionară. La blocarea transportului activ cu
toxine sau după moarte Na+ intră în celulă.
Măsurarea PR
PR poate fi măsurat direct, cu ajutorul microelectrozilor de sticlă, sau indirect, prin
utilizarea unor substanţe fluorescente ionizate (de exemplu tiocianatul). Microelectrodul de sticlă
utilizează o pipetă obţinută prin tragere la cald, având vârful mai mic de 0,5 m. Prin
străpungerea cu un asemenea microelectrod membrana celulară nu va fi lezată considerabil. De
asemenea, deoarece prin acţiunea tensiunii superficiale membrana se strânge în jurul vârfului de
sticlă, nu se va produce un contact de scurtcircuitare între citoplasmă şi fluidul extracelular.
Micropipeta este umplută cu o soluţie de electrolit (de obicei KCl, 3M) şi conţine un fir metalic
de Ag acoperit cu AgCl (electrodul propriu-zis). Se măsoară (Fig. 8) diferenţa de potenţial între
microelectrodul introdus în celulă (electrodul de lucru) şi un electrod de referinţă, nepolarizabil
(spre exemplu, un electrod de calomel sau un electrod de Ag/AgCl).
Relaţia Goldman-Hodgkin-Katz
Teoretic, potenţialul de repaus al celulei se calculează cu relaţia Goldman-Hodgkin-Katz:
P C
P A
E RTln i Ci i ex i Ai i in
F
i
PCi Ci in AiP i Aex
i
C+, A- – specii de cationi, respectiv anioni, difuzibili
P – permeabilitatea membranei pentru specia respectivă.
Se poate aplica formula Goldman-Hodgkin-Katz în cazul datelor numerice din Fig. 7
pentru celula musculară. Ţinând seama de faptul că PK = PCl = 1 şi PNa = 0,02:
CURS DE BIOFIZICĂ 23
PK K
Na
Cl
E RT ln ex ex in
84 mV
F PK K
in
PNa Na
in
PCl Cl
ex
PCl
PNa
S-a constatat că există o destul de bună concordanţă între valoarea calculată cu relaţia
Goldman-Hodgkin-Katz şi valoarea măsurată experimental. În cazul axonului gigant de calmar
permeabilităţile sunt: PK = 1, PCl = 0,45 şi PNa = 0,04, astfel încât se poate calcula şi în acest caz
diferenţa de potenţial pentru a fi comparată cu datele experimentale.
În repaus celula se află în stare staţionară, fluxurile pasive sunt echilibrate de cele active.
Ceilalţi ioni (Ca2+, Mg2+) au pondere mai mică în calcularea potenţialului de repaus. Ca 2+, însă,
joacă un rol important în contracţia musculară.
Dacă se notează cu EK, ENa, ECl, potenţialele de echilibru electrochimic ale diferiţilor ioni
şi cu RK, RNa, RCl, rezistenţele canalelor specifice în serie cu E, se obţine o baterie de trei
elemente legate în paralel a cărei tensiune electromotoare echivalentă va fi:
EK ENa ECl
Em RK RNa RCl gK EK gNa ENa gCl ECl g
gNa gCl
K
1 1 1
RK RNa RCl
Fig. 10 Potenţiale de acţiune. Stimuli electrici de intensităţi diferite (graficul inferior) declanşează potenţiale de
acţiune locale sau de tip tot sau nimic (graficul superior).
(+ 30 mV). Amplitudinea acestuia este de aproximativ 120 mV, depinzând de tipul de fibră
nervoasă. Odată declanşat, indiferent de amplitudinea stimulului, amplitudinea PA-tn rămâne
constantă (Fig. 10).
Potenţialul de acţiune tot-sau-nimic are următoarele caracteristici:
- amplitudine constantă (nu depinde de intensitatea excitantului atunci când stimulii sunt
liminari sau supraliminari);
- se propagă pe distanţe mari, cu viteze mari şi fără pierderi (nedecremental);
- amplitudinea potenţialului de vârf, pragul şi viteza de propagare sunt caracteristici ale
fibrei (sau celulei).
Toate celulele vii posedă reactivitate, răspunzând la acţiunea unui stimul. Capacitatea de
a răspunde prin potenţiale de acţiune locale, pe care o au toate celulele vii, se
numeşte iritabilitate. Proprietatea de a răspunde prin potenţiale de acţiune tot sau nimic se
numeşte excitabilitate şi se întâlneşte la trei tipuri de celule: celulele nervoase, musculare şi
glandulare.
Fazele potenţialului de acţiune
Între momentul acţiunii excitantului (stimulului) şi răspunsul celulei există un interval de
timp, caracteristic fiecărui tip de celule, numit perioadă de latenţă. Prima fază a potenţialului de
acţiune este reprezentată de un potenţial local şi se numeşte prepotenţial. Faza următoare
este potenţialul de vârf, cu fazele ascendentă şi descendentă. Faza a treia este alcătuită
din postpotenţialele pozitiv şi negativ.
Fig. 11 Fazele potenţialului de acţiune. A – potenţialul de repaus, B – prepotenţial, C – potenţial de vârf (faza
ascendentă), D – potenţial de vârf (faza descendentă), E – postpotenţial. Figură adaptată cu modificări după
Wikimedia Commons (https://commons.wikimedia.org/wiki/File: Action_potential.svg).
Din punct de vedere funcţional se disting două perioade refractare (Fig. 11), perioada
refractară absolută, în care celula nu poate fi excitată, în faza ascendentă şi parţial în faza
descendentă, şi perioada refractară relativă, în care excitabilitatea este redusă, în celelalte faze
ale PA.
Atunci când asupra fibrelor nervoase acţionează un stimul de durată are loc
o acomodare manifestată prin creşterea pragului de excitabilitate. Acomodarea poate fi rapidă
(fibrele din nervii motori) sau lentă (unele fibre senzitive). Dacă depolarizarea locală este
superioară pragului de excitabilitate, după perioada refractară absolută a unui spike se produce
un al doilea ş.a.m.d., fibra prezintă un răspuns repetitiv. Prin aceasta se realizează codificarea în
frecvenţă a amplitudinii stimulilor.
CURS DE BIOFIZICĂ 23
Fig. 12 Evenimentele la nivel molecular: (1) stare staţionară, canalele operate electric de sodiu şi potasiu au porţile
închise; (2) la o anumită valoare a potenţialului încep să se deschidă porţile externe ale canalelor de sodiu şi peste
prag sodiul intră în avalanşă; (3) se închid porţile interne ale canalelor de sodiu şi se deschid porţile canalelor de
potasiu; (4) se revine la starea iniţială.
Canalele de scurgere pentru potasiu sunt într-un număr mult mai mare decât cele de
sodiu. Fluxurile pasive de ioni sunt echilibrate de cele active (respectiv fluxurile de ioni
determinate de activitatea pompei de Na+, K+). În stare de repaus, porţile externe ale ambelor
tipuri de canale operate electric sunt închise, iar, în cazul canalelor de Na +, cele interne deschise
(Fig. 12 (1)). Potenţialul de repaus este apropiat de potenţialul de echilibru pentru potasiu (-86
mV). Ionii de Na+, aflaţi în concentraţie mare în mediul extracelular, sunt atraşi de interiorul
electronegativ al celulei. Stimulii de intensitate mică determină deschiderea unui număr redus
de canale de Na+, prin deschiderea porţilor externe ale acestora (Fig. 12 (2)). Prin intrarea Na + în
celulă scade electronegativitatea citoplasmei şi atunci când se ajunge la cca. – 60 mV se deschid
porţile canalelor de K+ sensibile la voltaj. Ionii de K + ies din celulă, se restabileşte valoarea
potenţialului de repaus. Concentraţiile ionice caracteristice stării de repaus se refac prin acţiunea
pompelor ionice (Na+,K+-ATP-aza). Acesta este mecanismul de producere a unui potenţial de
acţiune local (PA-l).
La creşterea intensităţii stimulului se vor deschide mai multe canale de Na +, iar la
depăşirea pragului de detonare (stimuli supraliminari) (Fig. 12 (2), Fig. 13) are loc procesul de
pătrundere în avalanşă a ionilor de Na+. Cu cât pătrund mai mulţi ioni în celulă, cu atât se
accentuează depolarizarea membranei şi prin aceasta se deschid mai multe porţi externe ale
canalului de Na+ (feed-back pozitiv). Valoarea potenţialului celular atinge zero şi apoi interiorul
CURS DE BIOFIZICĂ 23
Fig. 13 Evenimente moleculare în cursul potenţialului de acţiune. În faza de prepotenţial se deschid canale de Na +.
În faza ascendentă a potenţialului, din ce în ce mai multe canale de Na+ se deschid (în cascadă). În scurt timp se
atinge un maxim al potenţialului, canalele de Na+ se închid, şi se deschid canale de K+. Figură adaptată după
Wikimedia Commons (https://commons.wikimedia.org/wiki/File: Action_potential.svg).
Fig. 14 Propagare recurentă saltatorie (B) a potenţialelor de acţiune. Figură adaptată după Wikimedia Commons
(https://commons.wikimedia.org/wiki/File:Propagation_of_action_
potential_along_myelinated_nerve_fiber_en.svg).
4. Sinapsele neuronale
Sinapsa este o structură prin care se realizează contactul între doi neuroni sau dintre un
neuron şi o celulă musculară sau glandulară.
Sinapsele sunt de două tipuri: a) chimice; b) electrice
a. Sinapsa chimică
Elementele sinapsei chimice sunt următoarele (Figura 15): regiunea presinaptică cu
membrana presinaptică (ramificaţii axonale – butoni terminali, vezicule sinaptice), spaţiul
sinaptic (20-50 nm) şi regiunea postsinaptică cu membrana postsinaptică (în care se află
receptori şi canale ionice).
Etapele de funcţionare ale unei sinapse tipice sunt prezentate în Figura 16. În apropierea
membranei presinaptice există un mare număr de vezicule cu mediator chimic. La sosirea unui
PA local (depolarizare), membranele unor vezicule (diametru de cca 40 nm) fuzionează cu
membrana presinaptică şi conţinutul este expulzat prin exocitoză în spaţiul sinaptic (fanta
sinaptică). Moleculele de mediator (mesager prim) se combină cu moleculele receptoare din
membrana postsinaptică, activându-le. Acestea vor comanda deschiderea porţilor canalelor
ionice. În celula postsinaptică vor intra ioni şi în acest fel este generat un PA local. Are loc o
traducere a semnalului chimic în semnal electric. Conform unei teorii cuantice a transmisiei
sinaptice, eliberarea mediatorului se face sub formă de cuante. O cuantă (reprezentând conţinutul
unei vezicule, cca. 104 molecule de neurotransmiţător în cazul veziculelor cu acetilcolină -ACh)
va produce prin spargere un PA-l miniatural.
CURS DE BIOFIZICĂ 23
Fig. 16 Funcţionarea unei sinapse. Sosirea unui potenţial de acţiune (1) prin axonul neuronului presinaptic provoacă
deschiderea canalelor de Ca2+ (2). Ca urmare a pătrunderii de Ca2+ în celulă, veziculele ce conţin neurotransmiţător
(3) fuzionează cu membrana şi eliberează neurotransmiţătorul în spaţiul sinaptic (4). După difuzia
neurotransmiţătorului prin spaţiul sinaptic (5), moleculele de neurotransmiţător se leagă de receptori prezenţi pe
membrana postsinaptică (6), cauzând deschiderea de canale ionice ce pot depolariza membrana neuronului
postsinaptic. Ulterior, neurotransmiţătorul poate fi reabsorbit prin transportori (7) de neuronul presinaptic sau este
degradat. A, neuron presinaptic, B, neuron postsinaptic. Figură adaptată după Wikimedia Commons
https://commons.wikimedia.org/wiki/File:Synapse_diag1.svg).
Prin însumarea mai multor PA-l miniaturale apare un PA-l postsinaptic ce se deplasează
decremental spre axon. PA locale apărute simultan în mai multe puncte sau în acelaşi punct la
intervale mici de timp pot da naştere unui potenţial mai amplu prin sumaţie spaţială şi/sau
temporală. Ulterior, mediatorul este descompus enzimatic şi resintetizat tot enzimatic, după
revenirea prin membrana presinaptică în terminaţiile nervoase. De exemplu, în sinapsele
colinergice acetilcolinesteraza descompune şi colinacetilaza reface acetilcolina (ACh).
b. Sinapsa electrică
Sinapsele electrice (care fac parte din aşa-numitele joncţiuni membranare) funcţionează
fără mediatori chimici. Aceste sinapse nu sunt atât de răspândite ca sinapsele chimice. Se găsesc,
de exemplu, în anumite părţi ale creierului sau între celulele receptoare şi cele orizontale în
retină. Structura unei sinapse electrice este următoarea (Fig. 17): membrană presinaptică, spaţiu
sinaptic (mult mai mic – 2 nm), membrană postsinaptică.
Funcţionarea sinapselor electrice. Între canalele membranei presinaptice şi postsinaptice
ale sinapsei electrice există o contiguitate, ceea ce face ca o variaţie de potenţial la nivelul
membranei presinaptice să inducă o variaţie similară în membrana postsinaptică. Transmiterea
fiind directă este foarte rapidă. În timp ce în sinapsa chimică întârzierea este de 0,5 – 5 ms, în
cea electrică transmiterea este practic instantanee. Spre deosebire de sinapsa chimică, în sinapsa
electrică nu se poate face o gradare în intensitate. Este importantă în cazul sincronizării unui
număr mare de celule efectoare. În sinapsele electrice transmiterea poate fi bidirecţională, spre
deosebire de cele chimice în care este unidirecţională. Există şi sinapse în care depolarizarea şi
hiperpolarizarea se propagă în sensuri opuse – funcţie de redresare cu conducere unidirecţională.
CURS DE BIOFIZICĂ 23
5. Bioexcitabilitatea
Proprietatea unui sistem biologic de a răspunde prin excitaţie la acţiunea unor stimuli
(excitanţi) se numşte excitabilitate. Un excitant este o variaţie suficient de intensă, îndelungată şi
bruscă a proprietăţilor mediului, care poate să producă excitarea sistemului biologic. Parametrii
unui stimul (excitant) sunt următorii: formă, amplitudine, durată, frecvenţă de repetiţie (Fig. 18).
Fenomenul prin care excitantul modifică permeabilitatea membranei celulare pentru ioni
(închiderea sau deschiderea canalelor ionice) se numeşte excitare sau stimulare. Un factor fizic
sau chimic este excitant dacă este capabil să determine într-un fel sau altul deschiderea porţilor
canalelor ionice (de exemplu, canale operate electric sau canale operate de ligand). Totalitatea
fenomenelor care au loc în celulă ca urmare a excitării acesteia de către factorii excitanţi
(stimuli) constituie excitaţia celulară. Excitaţia are aspecte: electrice (PA), optice (modificări ale
transparenţei, refringenţei şi activităţii optice a celulei), radiante (emisie de IR, vizibil, UV),
chimice (hidroliza ATP, producere de NH3 etc.), calorice (producere şi absorbţie de căldură).
CURS DE BIOFIZICĂ 25
Reobaza şi cronaxia
Cantitativ, excitabilitatea se evaluează cu ajutorul mărimilor numite reobază şi cronaxie.
Reobaza este intensitatea minimă a unui excitant (stimul) cu durată de acţiune foarte
mare (teoretic infinită) care poate să declanşeze excitaţia în sistemul biologic.
Cronaxia reprezintă durata minimă a unui excitant de intensitate egală cu dublul reobazei
pentru care acesta poate produce excitarea.
Relaţia lui Weiss (Fig. 19) este relaţia care există între valorile intensităţii şi duratei unui
stimul care poate produce excitarea unui sistem biologic:
i = a/t + b
unde a, b – constante ce depind de sistem.
Pentru t → ∞, i = b (reobaza)
Pentru i = 2b, t = a/b (cronaxia)
Filamentele groase sunt alcătuite din molecule de miozină (500.000 D) care conţin în
jur de 300-400 molecule. Miozina este o proteină fibrilară, asemănătoare cu o baghetă subţire,
terminată prin două capete globulare (aspect de crosă de hochei) (Fig. 4 jos, Fig. 5). Partea
fibrilară este numită meromiozină uşoară (MMU) şi cea globulară - meromiozină grea (MMG).
Aceasta din urmă are două componente: S1 (solubilă în apă) şi S2 - legătura cu cea uşoară; între
ele se poate face îndoirea moleculei (Fig. 5). Filamentul de miozină este format din porţiunea
liniară, iar capetele globulare sunt orientate lateral, la exteriorul filamentului (Fig. 4), formând
aşa-numitele punţi transversale miozinice (expansiuni laterale). S1 are mare afinitate pentru
CURS DE BIOFIZICĂ 25
actină şi are, în prezenţa Mg++, activitate ATP-azică. La rândul ei, actina are o mare afinitate
pentru miozină. Prin legarea celor două (actina şi miozina) se formează complexul actomiozinic
care amplifică activitatea ATP-azică a miozinei de cca. 250 de ori.
2. Contracţia musculară
Contracţia fibrei musculare implică trei etape succesive:
1. excitaţia fibrei;
2. cuplajul excitaţie –contracţie;
3. contracţia propriu-zisă a fibrei.
CURS DE BIOFIZICĂ 25
1. Excitaţia. Nervul motor mielinizat are ramuri terminale nemielinizate. Acestea parcurg o
formaţiune specializată a sarcolemei formând sinapse neuro-musculare (placa motorie)(Fig. 8).
La nivelul acestor sinapse începe excitaţia fibrei musculare prin eliberarea moleculelor de
mediator chimic (acetilcolina) din terminaţia nervoasă în urma unui impuls nervos.
Fig. 8 Propagarea potenţialului de acţiune până la nivelul plăcii motorii şi eliberarea ACh în fanta sinaptică, urmată
de deschiderea canalelor ionice din membrana postsinaptică (adaptat după
https://en.wikipedia.org/wiki/Muscle_contraction)
Ionii de Ca2+ sunt eliberaţi din cisterne, iar concentraţia lor în sarcoplasmă creşte de la cca 0,1
µM la 10 µM (creşte astfel de 100 de ori). Troponina fixează ionii de Ca 2+ şi în urma unei
modificări conformaţionale deplasează moleculele de tropomiozină din şanţurile filamentului
subţire astfel încât locurile de legare ale actinei cu miozina nu mai sunt mascate (Fig. 6 jos ).
Fig. 10 Deschiderea canalului de calciu în urma depolarizării membranei tubulilor T (RS - reticul sarcoplasmic)
(adaptată după www.wikipedia.org)
3. Contracţia. Din acest moment se poate forma complexul actomiozinic şi contracţia începe.
Contracţia implică eliberarea energiei chimice necesare şi fenomenele mecanice care stau la
baza producerii forţei, respectiv scurtării fibrei. Aceasta se realizează în următoarele etape
(Fig. 11):
- În urma rearanjării troponinei şi tropomiozinei extremitatea globulară S 1 a miozinei
care dispune de 2 locuri de legare, unul pentru actină, altul pentru ATP, se fixează pe locul de
legare actinic. Complexul ATP- miozină are mare afinitate pentru G-actină.
- Prin formarea complexului actomiozinic activitatea ATP-azică creşte de 250 ori. ATP-
ul este scindat în ADP şi Pi şi se eliberează energia legăturii macroergice. Produşii de scindare
sunt eliberaţi rapid (după cum s-a menţionat anterior, miozina scindează şi în stare de repaus
ATP în ADP şi Pi dar eliberarea acestora este foarte lentă). Înainte de eliberarea produşilor de
scindare a ATP capul miozinic se află în poziţie aproape perpendiculară pe filamentul subţire.
Eliberarea Pi induce o modificare conformaţională a S2, iar puntea se înclină cu 45 0 faţă de
filament (Fig. 11), capul miozinic rămânând legat de filamentul subţire. Prin această înclinare ea
CURS DE BIOFIZICĂ 25
Relaxarea
După încetarea excitaţiei se produce relaxarea. Canalele de Ca2+ din cisterne se închid şi
se reface concentraţia de 103 ori mai mare în cisterne decât în sarcoplasmă, datorită activităţii
pompei de Ca2+. Prin scăderea concentraţiei calciului, troponina îsi reia conformaţia şi
tropomiozina maschează din nou locurile de legare ale actinei cu miozina. Atât contracţia cât şi
menţinerea stării de repaus se fac cu consum de energie. Există muşchi ale căror sisteme
contractile pot fi reglate de ionii de Ca 2+ prin acţiunea acestora asupra miozinei şi nu prin
intermediul sistemului troponină- tropomiozină precum şi muşchi care pot apela la ambele
sisteme de reglare a funcţiei contractile.
- Contracţia tetanică - Prin stimulare cu un impuls unic muşchiul se contractă sub forma
unei secuse unice (intervalul între stimuli trebuie să fie mai lung decât timpul necesar contracţiei
şi relaxării); la stimulare repetitivă cu o anumită frecvenţă, peste o limită dată, contracţiile
individuale fuzionează într-o contracţie unică - contracţie tetanică (Fig. 13). Frecvenţa la care se
produce tetanusul depinde de tipul de muşchi (este mai mare la muşchii rapizi). De exemplu,
pentru musculatura oculară este necesară o frecvenţă de 350 stimuli/secundă, iar pentru muşchiul
solear o frecvenţă de 30 stimuli/secundă.
- Alungirea muşchiului - dacă forţa exterioară este mai mare decât valoarea maximă a
forţei pe care o poate dezvolta muşchiul, acesta se alungeşte cu toate că se contractă activ.
Fig. 14 Dependenţa de lungimea sarcomerului a forţei dezvoltate de fibră (adaptat după Gordon, Huxley, şi
Julian, 1966)
Relaţia forţă-lungime
Forţa generată într-o contracţie musculară depinde de distanţa dintre extremităţile sale -
deci de lungimea sarcomerelor sale. Ea are valoarea maximă pentru o lungime iniţială a fibrei
(în repaus). Dacă este întinsă peste această lungime şi determinată să se contracte, sau contracţia
porneşte de la o lungime mai mică, forţa de contracţie descreşte (Fig. 14, dreapta). Pentru a
explica această dependenţă trebuie să se ţină cont de numărul de punţi transversale implicate în
contracţie (Fig 14, stânga). Dacă un muşchi este întins peste o lungime a sarcomerelor de 3,6
m, nu mai are loc întrepătrunderea filamentelor groase şi subţiri, deci nu se poate forma
complexul actomiozinic şi forţa va fi nulă. Forţa maximă va fi generată atunci când toate punţile
sunt implicate în interacţiunea actomiozinică. La muşchiul scurtat apare o interpătrundere
suplimentară a filamentelor subţiri aparţinând aceluiaşi sarcomer. Aceasta va repezenta un
obstacol în interacţiunea actomiozinică. Atunci când filamentul subţire atinge linia Z din partea
opusă, forţa dezvoltată va fi nulă (F =0).
CURS DE BIOFIZICĂ 25
Aceasta este ecuaţia unei hiperbole (Fig. 15). F- forţa de contracţie, v-viteza de
contracţie, a,b, -constante (a-dimensiune de forţă, b de viteză). Fmax - forţa maximă dezvoltată de
muşchi pentru o anumită lungime iniţială la care se declanşează contracţia (izometrică).
Fig. 15 Relaţia dintre forţă şi viteza de scurtare conform ecuaţiei Hill (curba continuă) şi curba puterii
(punctată).
Puterea este nulă pentru F = 0 şi F = F max (izometrică) (Fig. 15) Ecuaţia Hill corespunde
unei curgeri vâscoase (frecarea la nivelul punţilor în glisare).
rezultatul reacţiilor chimice şi proceselor mecanice (întinderea unor structuri elastice din
muşchi, frecări interne).
Fig. 16 Dineina trage o veziculă sau un organit înspre capătul negativ (înspre centrul celulei) iar kinezina trage
înspre capătul pozitiv (înspre marginea celulei)(adaptat după
https://cellbiology.med.unsw.edu.au/cellbiology/index.php/2014_Group_4_Project#Motor_Proteins)
molecule de ATP. Dineina trage materialele subcelulare înspre centrul celulei (Fig. 16) sau, în
cazul mitozei, spre polii fusului.
Kinezinele parcurg distanţe de ordinul mm de-a lungul microtubulilor în sensul invers
dineinei - spre marginile celulei (Fig. 16, 17). Un exemplu îl constituie transportul veziculelor
cu neurotransmiţători de-a lungul fibrei nervoase înspre terminaţiile acesteia. La fiecare pas, de
aproximativ 8 nm, este hidrolizată o moleculă de ATP.
Fig. 17 Transportul unei vezicule de către kinezină dinspre centrul înspre marginea celulei (ex. în terminaţiile
nervoase)(adaptat după http://www.wikilectures.eu/index.php/Molecular_motors
3. Motoarele moleculare rotative sunt actualmente intens studiate însă mecanismul lor
de funcţionare nu este elucidat complet. Un exemplu de motor molecular rotativ este cel al
ATP- sintetazei. Aceasta se prezintă ca un motor în care subunitatea alcătuieşte rotorul,
statorul fiind confecţionat din 3 subunităţi şi 3 subunităţi (Fig. 18).
1. Structura ochiului
2. Studiul ochiului din punct de vedere al opticii geometrice
3. Defectele geometrice ale vederii (ametropiile)
4. Biofizica recepţiei vizuale
Structura retinei; Structura şi funcţiile celulelor fotoreceptoare
Ciclul biochimic al rodopsinei; Discromatopsiile
5. Biopotenţialele retinei
6. Tehnici de investigare şi tratament
CURS DE BIOFIZICĂ 29
1. Structura ochiului
Ochiul are o formă globulară cu un diametru de cca. 2,5 cm (Fig.1).
Fig. 1 Structurile principale ale ochiului Fig. 2 Modelele optice ale ochiului
(adaptare după NIH, National Eye Institute, (adaptare după Duanes Ophtalomlogy, Ch. 33,
Wikimedia Commons) The Human Eye as an Optical System,
M Katz si P.B. Kruger)
a. Ochiul este redus la un dioptru prin care razele se propagă la fel ca în ochiul real. În
modelul Listing, ochiul este un dioptru sferic cu raza de 6 mm care separă aerul de un mediu
transparent cu indice de refracţie n = 1,337 (Fig.2). Modelul Gullstrand constă dintr-un un
sistem optic centrat în care un dioptru sferic unic cu raza 5,7 mm (care reprezintă practic
corneea: C 40 D) separă aerul de un mediu transparent de indice de refracţie 1,336. Centrul
optic este centrul de curbură al dioptrului. Distanţa dintre centrul optic şi retină este de cca. 15
mm. Retina se află în planul focal.
b. Ochiul este considerat un sistem optic centrat alcătuit din următoarele elemente:
- corneea, indice de refracţie n = 1,372, separată de aer printr-un dioptru anterior convex şi de
- umoarea apoasă, n = 1,336, printr-un dioptru posterior concav
- cristalinul, n = 1,413 (1,375-1,473) este separat de umoarea apoasă printr-un dioptru anterior
convex şi de
- umoarea vitroasă (n = 1,336), printr-un dioptru posterior tot convex.
Corneea, un ţesut avascular şi transparent, a cărui grosime variază între 0,5 mm (la
centru) şi 1,2 mm (la periferie), este mediul cel mai refringent, 40-43 D. Are cea mai mare
contribuţie la convergenţa totală de cca. 60 D. Cristalinul contribuie cu restul de 17-20 D.
Convergenţa cristalinului este mai mică decât a corneei deoarece acesta este mărginit de medii
cu indici de refracţie apropiaţi, în timp ce corneea se află în contact cu aerul care are indicele de
refracţie mult mai mic decât cel al acesteia. În plus, corneea este mai bombată decât cristalinul,
iar convergenţa unei lentile depinde, pe lângă indicele de refracţie relativ, de raza de curbură a
acesteia (cu cât lentila tinde să fie mai plată, respectiv raza de curbură a lentilei creşte, cu atât
convergenţa sa scade şi invers).
Cristalinul este o lentilă biconvexă cu R1 = 10 mm şi R2 = 6 mm (în stare neacomodată)
şi este compus din apă şi proteine transparente (care nu absorb lumina vizibilă). Proteinele sunt
dispuse ordonat, în cca. 20000 de straturi subţiri, concentrice, al căror indice de refracţie creşte
dinspre periferie spre centru. Această structură permite trecerea luminii cu pierderi minime, ceea
ce determină aspectul transparent al cristalinului. În plus, cristalinul (ca şi corneea) acţionează ca
un filtru care absoarbe o parte din radiaţiile electromagnetice cu lungimi de undă mici
(ultraviolete, X, γ), având rol în protecţia retinei. Convergenţa cristalinului este variabilă datorită
modificării curburii în cursul procesului de acomodare. Prin convergenţa sa variabilă cristalinul
realizează un reglaj fin al focalizării razelor de lumină pe retină. Ochiul fără cristalin se numeşte
ochi afac. Atunci când cristalinul este afectat de opacităţi apare cataracta.
Umoarea vitroasă conferă tensiune globului ocular.
Adaptarea la lumină
Irisul reprezintă o diafragmă care limitează fluxul luminos ce cade pe retină şi care
micşorează aberaţiile cromatice şi de sfericitate produse de lentilele ochiului. Când
CURS DE BIOFIZICĂ 29
luminozitatea este slabă, fibrele radiale ale irisului se contractă (midriază), diametrul pupilei
creşte. La iluminare excesivă, fibrele circulare ale irisului micşorează pupila (mioză). Acest
fenomen se numeşte adaptare la lumină.
Acomodarea
Într-un ochi normal (emetrop), imaginea unor obiecte foarte îndepărtate se formează pe
retină (Fig.3 stânga). Dacă obiectele sunt situate la o distanţă mai mică de 6 m de ochi, imaginea
lor s-ar forma în spatele retinei dacă cristalinul nu s-ar bomba mărindu-şi convergenţa. Pentru ca
imaginea să fie clară, ea trebuie să se formeze pe retină. Aceasta se realizează astfel: cristalinul
este înconjurat de un ligament circular, zonula lui Zinn, pe care se află înseraţi muşchii ciliari
circulari şi radiali. La contracţia fibrelor circulare, zonula se relaxează şi cristalinul iese de sub
tensiune, bombându-se sub efectul propriei elasticităţi (Fig.3 dreapta). Convergenţa sa va creşte
şi imaginea se formează mai aproape de centrul optic (mai în faţă, deci pe retină). Invers, la
contracţia fibrelor radiale, zonula este din nou pusă sub tensiune, cristalinul se subţiază şi îşi
micşorează convergenţa. În acest fel se realizează acomodarea care implică un cristalin elastic.
Odată cu înaintarea în vârstă, cristalinul devine mai rigid şi apare presbiopia.
Fig. 3 Varierea formei cristalinului in funcţie de acomodare. Cristalinul în formă relaxată (privire la
distanţă) (stânga); modificarea formei cristalinului pentru privirea către obiecte apropiate (dreapta)
(Băran ş.a., Curs de Biofizică Medicală, 2009)
Vederea clară se realizează între două puncte: punctum proximum (Pp) şi punctum
remotum (Pr). Pp este cel mai apropiat punct, văzut clar cu acomodare maximă. Pr este cel mai
depărtat punct, văzut clar fără acomodare. La ochiul normal (emetrop) Pp = 25 cm, Pr ~ 6 m.
(Fig.4a). Acest punct mai este numit si infinitul oftalmologic deoarece ochiul nu mai face
eforturi suplimentare de acomodare pentru obiecte mai depărtate de 6 m.
Miopia
Cea mai frecventă formă de miopie este miopia axială (Fig.4b). Axul anteroposterior
este mai lung, imaginea se formează înaintea retinei. Pp şi Pr se află mai aproape de ochi. Se
corectează cu lentile divergente. În miopia de curbură cristalinul are o curbură mai mare decât
în cazul ochiului normal şi din această cauză convergenţa va fi mărită (de obicei acest tip de
miopie est legată de oboseală). În miopia de indice, care apare în stări patologice, creşte indicele
de refracţie datorită creşterii concentraţiei saline.
Hipermetropia
În ochiul hipermetrop imaginea se formează în spatele retinei, Pp se află mai departe
decât la ochiul emetrop (Fig.4c). Hipermetropia axială apare când axul anteroposterior al
CURS DE BIOFIZICĂ 29
globului ocular este mai scurt decât în mod normal. Hipermetropia de curbură este caracterizată
printr-un cristalin mai alungit. Cristalinul trebuie să se bombeze în permanenţă pentru a aduce
imaginea pe retină. Corectarea hipermetropiei se face cu lentile convergente.
Fig. 4 Propagarea razelor de lumină paralele în situaţia normală (a) şi în situaţii patologice (b, c)
(adaptare dupa A. Iftime, Prezentare curs Biofizica vederii, UMF C. Davila 2016)
Presbiopia (presbitismul)
Presbiopia este o ametropie de elasticitate care apare, în general, după vârsta de 40 de
ani. Prin scăderea elasticităţii cristalinului bombarea se face mai dificil. Se folosesc lentile
convergente pentru a vedea obiectele apropiate.
Astigmatismul
Astigmatismul este o ametropie de curbură. Razele de curbură ale dioptrilor nu sunt
egale de la un meridian la altul al acestora (mai ales pentru cornee). Forma dioptrilor nu mai este
sferică. În general, există un meridian mai afectat (ochiul este aplatizat pe acel meridian).
Corectarea astigmatismului se poate realiza cu ajutorul lentilelor cilindrice.
Fig. 5 Structurile celulare principale ale retinei. Orientare anatomică: sclera este reprezentată în partea superioară a
imaginii, corpul vitros în cea inferioară. (Adaptare dupa E.R. Kandel, Principles of Neuroscience, Elsevier, ed.3)
laterală, în care celulele orizontale pot inhiba selectiv transmisia nervoasă pe căile de
comunicare care nu pornesc din imediata vecinătate a senzorilor puternic luminaţi. Astfel, atunci
când lumina cade pe retină, receptorii din zona de incidenţă sunt excitaţi puternic, în timp ce
receptorii aflaţi în jurul zonei de incidenţă sunt mai puţin luminaţi. Celulele orizontale elimină
semnalele senzorilor slab luminaţi, crescând în acest fel contrastul imaginii şi acuitatea vizuală.
Celulele bipolare alcătuiesc primul strat al neuronilor vizuali (de aceea retina poate fi
considerată o porţiune de creier periferic) (se mai numesc şi neuroni bipolari) şi realizează
legături între celulele receptoare sau orizontale şi celule amacrine sau ganglionare. În zona
foveală corespondenţa este biunivocă - fiecare con realizează legături sinaptice cu o bipolară şi
fiecare bipolară cu o ganglionară. Fiecare ganglionară primeşte astfel informaţii de la un singur
con. Spre periferia foveei şi în afara acesteia, mai multe celule receptoare realizează conexiuni
sinaptice cu o bipolară şi mai multe bipolare trimit informaţii unei singure ganglionare. Celulele
bipolare amplifică procesul de inhibiţie laterală. Există cca. 10 tipuri diferite de celule bipolare
care primesc semnale de la celule cu conuri şi un singur tip de celule bipolare care realizează
legături cu celule cu bastonaşe.
Celulele amacrine realizează conexiuni între neuronii bipolari şi celulele amacrine sau
ganglionare trimiţând informaţii dinspre centru spre periferie. Ca şi celulele orizontale, celulele
amacrine acţionează lateral, afectând semnalizarea celulelor bipolare învecinate, dar prezintă un
grad de specializare mult mai pronunţat. Există cca. 40 tipuri diferite de celule amacrine,
majoritatea fiind lipsite de axon. Fiecare tip celular amacrin se conectează cu anumite tipuri de
neuroni bipolari şi generează un anumit tip de neurotransmiţători. Celulele amacrine intervin în
procesarea imaginii în special la nivelul reglării luminozităţii imaginii şi al detecţiei mişcării
obiectelor.
Celulele ganglionare, reprezentând ultimul strat al retinei, fac sinapsă cu cele bipolare,
iar axonii lor alcătuiesc nervul optic. Pata oarbă (punctum caecum), lipsită de celule
fotoreceptoare, este locul în care nervul optic se îndreaptă spre corpii geniculaţi laterali, după ce
străbate învelişul globului ocular. Pata oarbă apare ca un oval alb, având o arie de cca. 3 mm 2. În
exteriorul globului ocular, axonii celulelor ganglionare sunt mielinizaţi. În medie, o celulă
ganglionară poate primi semnale produse de cca. 100 de celule fotoreceptoare, dar acest număr
variază mult cu localizarea pe retină. La om, retina conţine în jur de 1,2 - 1,5 milioane celule
ganglionare. Există cel puţin 5 clase de celule ganglionare, dintre care trei sunt specializate în
procesarea informaţiilor vizuale în funcţie de mişcare (clasa W), culoare (clasa X) şi intensitatea
luminii (clasa Y). Celelalte două clase cuprind celule ganglionare care asigură reflexul pupilar
(adaptarea la lumină) şi menţinerea ritmurilor circadiene; o mare parte din aceste celule sunt
fotosensibile - conţin un fotopigment, melanopsina, care le permite să răspundă direct la lumină,
chiar în absenţa celulelor cu conuri şi bastonaşe. Celulele ganglionare sunt singurele celule ale
retinei care generează potenţiale de acţiune de tip tot sau nimic, acestea fiind transmise creierului
prin nervul optic, pe când celelalte tipuri produc potenţiale electrice locale gradate şi transmit
semnalul nervos modulând cantitatea eliberată de neurotransmiţători în funcţie de fluxurile
membranare de sarcini electrice, care variază în mod continuu (conducţie electrotonică). În acest
fel, intensitatea semnalului primar, generat de celulele fotoreceptoare, este proporţional cu
cantitatea de lumină recepţionată.
sinapsă cu o altă celulă nervoasă, de tip bipolar sau orizontal. Celulele cu bastonaş asigură
vederea scotopică (la lumină crepusculară, deci, la luminozitate scăzută) având o mare
sensibilitate la lumină (o singură celulă poate sesiza un singur foton). Vederea scotopică nu
permite distingerea culorilor (vedere acromatică, alb-negru). Retina umană conţine cca. 100
milioane de celule cu bastonaş.
Fig. 6 Schema celulelor fotoreceptoare cu con şi cu bastonaş din retină. (Adaptare dupa E.R. Kandel, Principles of
Neuroscience, Elsevier, ed.3)
SEB are o structură specială, conţinând un mare număr de discuri membranare suprapuse
(până la 2000), astfel încât se măreşte considerabil suprafaţa cu care interacţionează semnalul
luminos. Membrana discurilor este formată din subunităţi membranare (cca 5 nm diametru) în
centrul cărora se găseşte pigmentul fotosensibil - rodopsina (10 7-108 molecule/bastonaş).
Rodopsina (Fig.7), proteină transmembranară care traversează membrana de 7 ori (are 7 -
helixuri), este alcătuită din opsină (partea proteică) şi cromoforul retinal (aldehida vitaminei A,
partea prostetică). Membrana SEB conţine o densitate mare de canale de Na+ operate chimic (se
deschid prin legarea c-GMP la proteina canal), care sunt parţial permeabile pentru Ca 2+, în
proporţie de 10-15%.
Fig. 7 Molecula de rodopsină. (Adaptare dupa A.Iftime, Prezentare curs Biofizica vederii, UMF C. Davila 2016)
staţionaritate, în care concentraţiile de Na+ şi Ca2+ sunt menţinute la valori ridicate constante.
Concentraţia ridicată de Ca2+ intracelular induce exocitoza veziculelor care conţin
neurotransmiţători, în special glutamat. Moleculele de glutamat sunt eliberate în spaţiul sinaptic
şi se leagă la receptorii de glutamat din terminalul celulei nervoase postsinaptice; ele pot inhiba
anumiţi neuroni bipolari şi pot excita alţi neuroni bipolari, în funcţie de tipul de receptori
(metabotropi sau ionotropi) pe care aceştia îi prezintă. Legarea glutamatului la receptori
declanşează răspunsul celular (o variaţie a potenţialului de membrană, care se propagă spre
celălalt capăt al celulei, unde se declanşează o nouă eliberare de neurotransmiţători), asigurând
transmiterea semnalului nervos la următoarele celule nervoase.
La lumină, în urma fotoexcitării şi activării rodopsinei, are loc cascada reacţiilor vizuale
(descrisă mai jos) având ca efect transformarea c-GMP în 5'-GMP. Ca urmare, se închid canalele
de Na+, curentul de întuneric dispare şi membrana se hiperpolarizează. Potenţialul de membrană
poate ajunge la -80 mV, depinzând de intensitatea luminii. La această valoare a potenţialului,
canalele de Ca2+ se închid, concentraţia celulară de Ca 2+ scade, iar celula eliberează mai puţin
glutamat decât la întuneric. Bastonaşele au o sensibilitate foarte mare: un singur foton poate
duce la blocarea intrării în celulă a 106-107 cationi/s - amplificare de putere. Fotonul este doar
declanşator (trigger), restul se datorează energiei proceselor metabolice.
Celulele cu conuri (Fig.6) sunt responsabile de perceperea culorilor (vedere fotopică -
diurnă). Retina umană conţine în jur de 5-6 milioane celule cu conuri. Ele sunt activate în
condiţii de luminozitate accentuată - au un prag ridicat de activare. Au forma de con, iar în loc
de discuri au o membrană faldurată. Neurotransmiţătorul eliberat de celulele cu conuri este
acetilcolina. Pigmentul fotosensibil al conurilor este iodopsina care are o structură similară
rodopsinei. S-au identificat trei tipuri de conuri, cu sensibilitate cromatică diferită şi care conţin
trei tipuri de pigmenţi iodopsinici cu maxime de absorbţie diferite: eritrolab (roşu, λ = 570 nm),
clorolab (verde λ = 535 nm) şi cianolab (albastru, λ = 445 nm). Acestea sunt valorile în cazul
retinei umane. Ele diferă, însă, de la o specie la alta.
De notat că pe ambele căi de semnalizare, în urma stimulării celulei fotoreceptoare (fie
cu bastonaş, fie cu con) se realizează un mecanism aparte de traducere de semnal, în sensul că
sistemul senzorial în cazul fotorecepţiei prezintă o caracteristică unică: stimulul (aici lumina)
reduce de fapt activitatea de semnalizare (aici prin reducerea cantităţii de neurotransmiţători
eliberaţi). Răspunsul neuronilor bipolari (variaţia de potenţial membranar produsă în urma
stimulării unei celule fotoreceptoare) depinde atât de tipul neuronului bipolar, cât şi de cantitatea
de neurotransmiţător eliberată de celulele fotoreceptoare, deci de cantitatea de lumină
recepţionată. Ca urmare, în urma fotorecepţiei, anumiţi neuroni bipolari sunt activaţi, iar alţii
sunt inhibaţi. Legăturile interneuronale complexe la nivelul retinei şi caracteristicile diferite ale
diverselor tipuri de neuroni retinieni aparţinând aceleiaşi clase contribuie la procesarea complexă
a informaţiei vizuale la nivelul retinei, înainte ca aceasta să fie preluată de nervul optic.
Semnalul nervos excită în final neuronul ganglionar, care generează trenuri de potenţiale de
acţiune de tip tot sau nimic. Acestea, pe calea nervului optic, ajung în corpii geniculaţi şi apoi în
scoarţa cerebrală (scizura calcarină) unde produc senzaţia vizuală.
Ciclul biochimic al rodopsinei
Cromoforul rodopsinei, retinalul, se află la întuneric în configuraţia 11-cis. Prin
fotoactivare, retinalul trece în 11-trans (all-trans) şi se desprinde de opsină. Transformarea
directă şi cu transformarea inversă reprezintă ciclul Wald.
CURS DE BIOFIZICĂ 29
Fig. 8 Transformarea retinalului la expunerea la lumină (hν). (Adaptare dupa A.Iftime, Prezentare curs
Biofizica vederii, UMF C. Davila 2016)
În starea în care retinalul este în forma trans-, rodopsina devine rodopsină activată R*
(Fig.9 şi 10) şi interacţionează cu traductina T (macromoleculă proteică membranară din clasa
proteinelor G), care la rândul ei este activată. Traductina, care în stare neactivată are legată o
moleculă de guanozin difosfat (GDP), va forma un complex R*T-GDP care pierde GDP şi leagă
GTP (guanozin trifosfatul) devenind R*T-GTP. Acest complex este instabil şi se descompune în
R* şi T-GTP. R* se combină din nou cu traductina neactivată etc. T-GTP se numeşte traductină
activată. Aceasta activează o moleculă de fosfodiesterază (PDE); se formează complexul PDE-
T-GTP (fosfodiesterază activată) care acţionează asupra c-GMP (acid guanozin-monofosforic
ciclic). c-GMP este transformat în acid guanozin-monofosforic 5'-GMP. Scăderea concentraţiei
de c-GMP provoacă închiderea canalelor de Na+ (c-GMP le menţinea deschise). Fosfodiesteraza
activată pierde un rest fosforic şi devine PDE-T-GDP care la rândul său se disociază în T-GDP
şi PDE. Acestea din urmă reintră în ciclurile biochimice respective.
hν
Fig. 9 Schema lanţului de reacţii ("cascada vizuală") declansaşată de expunerea unei molecule de rodopsină
la lumină (hν), care culminează cu închiderea canalelor de Na+. (Adaptare dupa E.R. Kandel, Principles of
Neuroscience, Elsevier, ed.3)
Astfel se pot distinge următoarele cicluri: ciclul Wald (R-R*), ciclul traductinei, ciclul
PDE şi ciclul c-GMP (c-GMP este refăcut sub acţiunea guanilat ciclazei, care se activează la
scăderea concentraţiei de Ca2+) (Fig. 10). Prin aceste cicluri se produce o amplificare
considerabilă a semnalului. Astfel, într-o secundă, o moleculă de rodopsină catalizează activarea
a cca. 100-500 molecule T, fiecare T activează 1 PDE şi fiecare PDE transformă 2000-4000 c-
GMP. Ca rezultat final, sunt hidrolizate 0,2-2 106 molecule c-GMP/s şi se închid cca. 250 de
canale de Na+ şi Ca2+/s. Ca urmare, ionii de Na+ şi Ca2+ se acumulează în exteriorul SEB şi
determină hiperpolarizarea membranei, proporţional cu intensitatea stimulului luminos.
Hiperpolarizarea se transmite şi SIB. Printr-o serie de alte procese biochimice este limitat
CURS DE BIOFIZICĂ 29
mecanismul de amplificare şi, la întuneric, R* devine din nou inactivă R (rodopsin kinaza
catalizează scăderea afinităţii R* pentru T, prin fosforilare).
Fig. 11 Planşă Ishihara. Numărul 74 este vizibil clar pentru persoanele cu vedere normală. Persoanele cu dicromazie
văd numărul 21, iar cei cu monocromazie nu văd niciun număr. (Wikimedia Commons, Wikipedia)
Pentru testarea discromatopsiilor se utilizează aşa-numitele planşe Ishihara care conţin
cercuri de puncte colorate plasate aparent aleatoriu. Unele dintre aceste puncte colorate
alcătuiesc un număr sau o formă care pot fi văzute clar de către o persoană cu vedere normală,
dar nu sunt vizibile pentru o persoană cu deficienţe de vedere colorată. Un alt set de puncte din
aceeaşi planşă conţine numere sau forme vizibile doar pentru persoana care prezintă o formă de
discromatopsie (Fig. 11).
Existenţa celor trei tipuri de conuri vine în sprijinul teoriei tricromatice a vederii
colorate (Young, Maxwell, Helmholtz) conform căreia orice culoare se poate obţine prin
combinarea a trei culori fundamentale. Matematic:
85 CU
RS
C = xR + yV + zA
x, y, z – coeficienţi cromatici (proporţia fiecărei culori); R - roşu, V - verde, A - albastru).
5. Biopotenţialele retinei
Potenţialul receptor iniţial – când retina este expusă la lumină, apare aproape instantaneu o
diferenţă de potenţial electric ce are o amplitudine proporţională cu intensitatea stimulului şi care
reflectă transferul de sarcină în moleculele de pigment fotosensibil. Depinde de păstrarea intactă
a structurii discurilor (poate fi obţinut şi în lipsa membranei bastonaşului).
Potenţialul de receptor – potenţialul celulelor fotoreceptoare, obţinut în urma hiperpolarizării
membranei. Depinde de intensitatea, iar în cazul conurilor şi de frecvenţa radiaţiei luminoase.
Electroretinograma (ERG) – potenţialul întregii retine. Răspunsul ON: a) celulele
fotoreceptoare, b) celule bipolare şi Müller (un tip de celule gliale retiniene), c) epiteliu
pigmentar şi celule fotoreceptoare. Răspunsul OFF: d) depinde de densitatea conurilor şi
bastonaşelor. Potenţialul receptor iniţial poate fi observat în ERG dacă un electrod este plasat pe
cornee.
1
Acest capitol se bazează parţial pe cartea "Elemente de Bioacustică", Constanţa Ganea, 1999
87 CU
RS
1,4 8310 300
c m/ s 348 m/ s
28,8
Fig. 1 Presiunea acustică: comprimări şi rarefieri ale aerului la propagarea undei longitudinale (a); variaţia presiunii
acustice în timp (b)(se observă că axa presiunii este întreruptă deoarece valoarea presiunii atmosferice este mult mai
mare decât presiunea acustică (după C. Ganea, 1999).
Impedanţa acustică. Mediile elastice prezintă o rezistenţă la traversarea de către unda acustică,
rezistenţă numită impedanţă acustică. Aceasta se exprimă ca fiind raportul dintre presiunea şi
viteza acustică v (v - viteza de vibraţie a particulelor mediului traversat de undă spre deosebire
de viteza c de propagare a undei):
p
Z
v
S-a calculat că impedanţa acustică în aer depinde de densitatea mediului şi de viteza de
propagare a undei, conform relaţiei:
Z = ρc
Impedanţa acustică se măsoară în Rayl (Rayleigh) sau Ohmi acustici. 1 Rayl
(1 Ohm acustic) = 1 kg/m2s. In condiţii de presiune şi temperatură bine determinate, impedanţa
unui mediu de densitate ρ0 se numeşte impedanţă caracteristică şi se notează cu Zc:
Zc = ρ0c
La temperatura de 22C şi presiunea atmosferică de 1 bar (1,0131015 Pa), densitatea
aerului este ρ0 = 1,206 kg/m3, iar viteza undelor acustice în aer este 340 m/s, deci impedanţa
caracteristică a aerului este Zc = 410 Rayl.
Valorile impedanţei acustice în diferite medii se situează în general în următoarele
domenii de valori (în Rayl):
Gaze: 102-103
Lichide: 106
Solide: 107
88 CU
RS
În audiologie s-a normalizat această valoare la 400 Ohmi acustici.Tabelul de mai jos prezintă
câteva valori ale impedanţei acustice de interes în medicină.
Intensitatea undei acustice, I, a undei acustice reprezintă energia acustică transportată de undă,
în unitatea de timp, prin unitatea de suprafaţă perpendiculară pe direcţia de propagare. Se poate
demonstra că între intensitatea acustică, presiune şi impedanţă există următoarea relaţie:
2
Ip
Z
Intensitatea unei surse sonore având amplitudinea minimă perceptibilă de către urechea
umană poate fi calculată cu această formulă, considerând impedanţa acustică a aerului, Z,
aproximativ egală cu 400 Ohmi acustici. Presiunea prag este de 20 Pa:
20 106
2
I 1012 W/m2
4 10 2
Deci, intensitatea pragului normal de audibilitate este 10-12 W/m2 = 1 pW/m2. Intensitatea
maximă percepută de urechea umană (la pragul dureros) este de 1 W/m2.
Frecvenţa undei acustice. Frecvenţa este o mărime caracteristică fenomenelor ondulatorii.
Domeniile de frecvenţă pentru semnalul acustic sunt următoarele:
Infrasunete: < 16 Hz
Sunete: 16 - 20.000 Hz
Ultrasunete : 20.000 - 109 Hz
Fig. 2 Sunet pur (a), sunet periodic complex (b), zgomot (c)
Fig. 3 Compunerea undelor sinusoidale de diferite frecvenţe, amplitudini şi faze. Funcţia rectangulară în reprezentare temporală (a) şi
spectrală (b) (după C. Ganea, Elemente de Bioacustică, 1999).
Matematicianul Fourier (1768-1830) a arătat că o funcţie f(t) continuă şi periodică, nesinusoidală, poate fi
descompusă într-o serie de termeni, primul constant şi ceilalţi sinusoidali. Fiecare termen sinusoidal, numit
armonică şi având pulsaţiile ω, 2ω, ...3ω..., nω, respectiv frecvenţele , 2, 3,..., n, este caracterizat printr-o
amplitudine şi o fază determinate:
f(t) = A0 + A1sin(t+1) + A2sin(2t+2)+...Ansin(nt+n) = A0+∑Aksin(kt+k)
Primul termen este numit armonica 1-a sau fundamentala, termenul al doilea este numit armonica a 2-a
ş.a.m.d. Coeficienţii diferiţilor termeni se calculează prin integrare, aplicând integralele Fourier. Determinarea
armonicelor unei funcţii f(t) reprezintă analiza Fourier a acelei funcţii. Se poate spune că o armonică este o undă a
cărei frecvenţă este un multiplu întreg al unei frecvenţe minime numită fundamentală. Descompunerea într-o serie
Fourier este reprezentată grafic în funcţie de frecvenţă şi se obţine în acest fel o reprezentare spectrală. Un acelaşi
fenomen vibratoriu poate fi reprezentat temporal (Fig. 3 (a) sau spectral (b)).
Sistemul auditiv periferic (Fig. 4) este alcătuit din urechea externă şi urechea medie care
sunt adaptate funcţiei de transmitere a semnalului acustic şi urechea internă care asigură analiza
vibraţiilor acustice şi traducerea semnalului acustic în semnal bioelectric, respectiv în influx
nervos.
Sistemul auditiv central conţine căile nervoase, care asigură transmiterea influxului
nervos, şi ariile auditive, la nivelul cărora este analizată informaţia şi generată senzaţia auditivă.
În cele ce urmează se vor discuta numai aspectele biofizice ale funcţionării sistemului auditiv
periferic.
Sistemul auditiv periferic asigură trei funcţii principale:
1) transmiterea vibraţiei acustice
2) analiza semnalului acustic
3) traducerea semnalului acustic în semnal bioelectric şi în influx nervos.
91 CU
RS
Fig. 4 Sistemul auditiv periferic: Secţiune longitudinală a aparatului auditiv uman, segmentul periferic: 1 - pavilion;
2 - conduct auditiv extern; 3 - timpan; 4 - casa timpanului; 5 - scăriţa; 6 - fereastra ovală; 7 - trompa lui Eustache; 9
- lama spirală; 10 - rampa timpanică; 11 - nerv cohlear; 12 - nerv auditiv; 13 - nerv vestibular; 14 - fereastra
rotundă; 15 - canalele semicirculare; 16 - nicovala; 17 - ciocanul; 18 - os temporal; 19 - ureche
(adaptat după Ch. Gelis, 1993)
(A) (B)
Fig. 5 Urechea externă (A)(1-pavilion, 2-conca, 3-CAE, 4-timpan)(adaptat după S. Blatrix,
http://www.cochlea.eu/cochlee) şi rezonanţa ansamblului CAE - concă (B)(după Ch. Gelis, 1993)
Ciocanul şi nicovala se rotesc ca un tot unitar în jurul unei axe care trece prin apofiza
scurtă a nicovalei şi de-a lungul părţii timpanice a ciocanului (Fig. 6). În raport cu această axă,
mânerul ciocanului este o pârghie mai lungă decât apofiza lungă a nicovalei determinând o
mărire a forţei de cca. 1,3 ori la nivelul ferestrei ovale. Acţiunea cea mai importantă a sistemului
timpano-osicular constă în amplificarea presiunii acustice datorită raportului mare dintre aria
timpanului şi cea a ferestrei ovale. < inând cont de valorile impedanţelor aerului şi lichidelor
urechii interne, se poate arăta că în absenţa sistemului timpano-osicular (care are rolul de
adaptare a impedanţelor) numai o miime din energia undelor acustice ar fi transferată urechii
interne, restul fiind reflectat. Acţiunea cea mai importantă a sistemului timpano-osicular constă
în amplificarea presiunii acustice datorită raportului mare dintre aria timpanului şi cea a ferestrei
ovale. Dacă se neglijează pierderile de putere prin frecare se poate calcula un raport teoretic al
presiunilor acustice la nivelul ferestrei ovale şi timpanului, raport care reprezintă funcţia de
transfer H a urechii medii:
pi
H Fi Se
pe Fe Si
unde pe, Fe, Se reprezintă, respectiv, presiunea la nivelul timpanului, forţa exercitată de apăsarea
pe membrana timpanică şi suprafaţa timpanului, iar pi, Fi, Si - presiunea, forţa de apăsare şi
suprafaţa în cazul ferestrei ovale. Aria membranei timpanice este în jurul valorii de 64 mm 2, iar
talpa scăriţei are aproximativ 3,2 mm2. Deoarece nu întreaga arie a timpanului contribuie la
transmiterea vibraţiei acustice datorită variaţiei cu frecvenţa a mişcărilor diferitelor porţiuni ale
acesteia, se estimează aria eficace la 60-70% din aria totală. De aceea, raportul ariilor Se/Si poate
avea valori între 13 şi 16. În acest caz funcţia de transfer are valori între: 13 1,3 = 17 şi 161,3 =
21. Funcţia de transfer a urechii medii are o mărime aproape constantă în domeniul de frecvenţe
important pentru auz (16 - 9.000 Hz). Prin intervenţia lanţului timpano-osicular este, astfel,
evitată interfaţa aer-lichid, interfaţă care prezintă un factor de transmisie foarte scăzut. Dar, deşi
acest sistem duce la o amplificare de presiune şi la o creştere a forţei, nu se produce şi
94 CU
RS
o amplificare a energiei. Din contra, punerea în mişcare a sistemului de oscioare absoarbe 40%
din energia incidentă, ceea ce corespunde unei atenuări de cca. 3 dB. Disfuncţiile lanţului
timpano-osicular au ca rezultat producerea unor surdităţi de transmisie şi pot fi puse în evidenţă
cu ajutorul audiogramelor în conducere aeriană.
Urechea medie nu are un rol de transmisie pur pasiv. Atât muşchiul ciocanului, cât şi
muşchiul scăriţei - stapedius - se pot contracta, limitând amplitudinea de deplasare a oscioarelor
şi diminuând nivelul de amplificare, realizând protecţia urechii interne prin reflexul stapedian.
Această protecţie este, însă, de scurtă durată deoarece muşchiul stapedius oboseşte. Fereastra
ovală transmite lichidelor urechii interne mişcările lanţului timpano-osicular. Semnalul acustic
se propagă prin canalul vestibular (rampa vestibulară), trece prin helicotremă şi se întoarce spre
urechea medie prin rampa timpanică (Fig. 7) la al cărei capăt se află fereastra rotundă. Fereastra
rotundă are un rol de membrană de expansiune pentru lichidele incompresibile ale urechii
interne. Mişcările platinei scăriţei nu s-ar putea efectua liber dacă rampa vestibulară ar fi un
spaţiu conţinând lichid, închis printr-un capăt rigid. Elasticitatea ferestrei rotunde dă posibilitatea
realizării deplasărilor coloanei de lichid, induse de mişcările scăriţei.
Cohleea este un tub osos care are o lungime de aproximativ 3 cm, înfăşurat în helix spiral
(elice spirală), efectuând două ture şi jumătate în jurul unei coloane centrale osoase numită
columelă. Din columelă porneşte o lamă osoasă plană, numită lama spirală (Fig. 7). În interiorul
columelei se află fibrele nervului cohlear care provin din ganglionul spiral al lui Corti, aflat într-
un canal din lama spirală. Lama spirală se continuă cu membrana bazilară, o porţiune
membranoasă care este întinsă între lama spirală şi ligamentul spiral extern. La extremitatea
apicală se află o deschizătură, numită helicotremă, care permite comunicarea între cele două
compartimente. Compartimentul aflat sub lama spirală este numit rampa timpanică (canalul
timpanic) şi conţine un lichid numit perilimfă. La capătul dinspre casa timpanului se găseşte
fereastra rotundă. Compartimentul de deasupra lamei spirale este, la rândul său, separat în alte
două compartimente, prin membrana lui Reissner (Fig. 8). Partea superioară, conţinând de
asemenea perilimfă, se numeşte rampa vestibulară (canalul vestibular) şi la capătul ei dinspre
casa timpanului se găseşte fereastra ovală. Între rampa timpanică şi rampa vestibulară se află cel
de-al treilea compartiment, canalul cohlear sau labirintul membranos. Canalul cohlear este
mărginit în partea superioară de membrana lui Reissner, iar în partea inferioară de membrana
bazilară, aflată în prelungirea lamei spirale. În interiorul canalului cohlear se află un lichid numit
endolimfă.
95 CU
RS
Fig. 9 Organul lui Corti. 1- celulă ciliată internă; 2 - celulă ciliată externă; 3 - pilierii lui Corti; 4 - membrana
tectoria; 5 - lama reticulară; 6 - tunelul lui Corti; 7 - membrana bazilară; 8 - celule Hensen; 9 - celule Claudius; 10 -
lama spirală; 11 - celule Deiters (celule de susţinere externe); 12 - celule bordante interne; 13 - celule de susţinere
interne; 14 - fibre nervoase; 15 - fibre spirale interne; 16 - fibre nervoase din tunelul lui Corti
(adaptat după Ch. Gelis, 1993).
De-a lungul unui diametru al cercului lungimea stereocililor creşte progresiv, iar în
direcţiile perpendiculare pe acest diametru lungimile cililor sunt egale, astfel încât, fasciculul are
un plan de simetrie bilateral. Spre deosebire de stereocilii celulelor ciliate externe, cei ai
celulelor ciliate interne nu intră în contact cu membrana tectoria (Fig. 11). La polul lor bazal,
celulele ciliate interne realizează legături sinaptice cu terminaţii nervoase aferente (95%) şi
eferente.
Fig. 10 Aranjamentul stereocililor în celula ciliată externă, micrografie electronică (stânga) (după M. Lenoir,
http://www.cochlea.eu) şi internă (dreapta) (după C. Ganea, 1999)
Funcţiile celulelor ciliate. Celulele ciliate au, în raport cu alte tipuri de celule senzoriale,
două proprietăţi remarcabile: extrema lor sensibilitate şi viteza deosebit de mare cu care
operează. Cercetările din ultimele decenii, în special cele de electrofiziologie, au arătat că, cele
două tipuri de celule ciliate, externe şi interne, îndeplinesc funcţii distincte. Astfel, se admite că:
- Celulele ciliate interne reprezintă veritabilii receptori, deoarece ele asigură traducerea
semnalelor auditive în influx nervos care poartă informaţia auditivă spre cortex, deşi traducerea
mecano-electrică are loc şi în celulele ciliate externe. De aceea, celulele ciliate interne fac
sinapsă cu un mare număr de fibre aferente.
- Celulele ciliate externe prezintă proprietăţi motrice datorate proteinelor contractile pe
care le conţin, contribuind la amplificarea cohleară a semnalului acustic şi la mecanismul de
analiză realizat de urechea internă.
97 CU
RS
Fig. 15 Amplificarea cohleară (A - adaptat după Ashmore & Kolstone 1994), (B - după C. Ganea, 1999)
(Obs. liniile longitudinale nu reprezintă cele 40.000 de fibre transversale, ci indică gradientul de rigiditate al
membranei bazilare).
Îmbătrânirea, nivelurile sonore ridicate, drogurile ototoxice sau anoxia duc la alterarea
celulelor ciliate externe şi în special a stereocililor. Leziunile sau disfuncţiile celulelor ciliate
externe se traduc printr-o atenuare sau chiar o dispariţie a mecanismelor active. Audiometric, în
aceste cazuri se pune diagnosticul de surditate neurosenzorială cohleară: presbiacuzie, surditate
traumatică, surditate ototoxică etc. În absenţa mecanismelor active subzistă doar mecanismele
pasive, fapt care are două consecinţe importante de ordin psihoacustic: ridicarea pragului de
audibilitate, prin scăderea amplitudinii de vibraţie a membranei bazilare şi diminuarea
selectivităţii în frecvenţă, prin creşterea lărgimii vârfului de rezonanţă. Prin protezare auditivă
este posibilă compensarea primei consecinţe, printr-o amplificare convenabilă a stimulului
sonor. Cea de-a doua consecinţă, reducerea selectivităţii în frecvenţă, nu poate fi compensată
prin amplificare. În protezare se încearcă, în acest caz, amplificarea selectivă a unor frecvenţe şi
ameliorarea raportului semnal/zgomot la ieşirea din proteză, având ca scop, în special,
îmbunătăţirea înţelegerii vorbirii. În acest sens, o importanţă deosebită o are dezvoltarea
protezelor numerice.
Transmiterea diferenţiată a semnalului acustic de la celulele ciliate externe la celulele
ciliate interne. Ca urmare a mişcării relative a membranei tectoria, amplificată prin contracţia
celulelor ciliate externe, stereocilii celulelor ciliate interne, care în mod normal (în stare de
repaus) nu ating membrana tectoria, vor intra în contact cu aceasta şi anume, în zona precisă în
care se situează maximul de amplitudine al undei. În urma acestei acţiuni mecanice, celula
ciliată internă va fi excitată printr-un mecanism specific, dând naştere unui influx nervos care se
propagă pe căile aferente spre sistemul nervos central. În acest fel, înălţimea tonală sub care se
percepe frecvenţa semnalului acustic este codificată spaţial, fiecare componentă a semnalului
acustic fiind trimisă sub forma unor potenţiale de acţiune într-o anumită regiune a cortexului
auditiv.
Otoemisiunile. În anul 1978 Kemp a evidenţiat existenţa unor emisiuni acustice din
cohlee, numite otoemisiuni, care se pot produce spontan, ca răspuns la stimulări acustice cu
intensităţi sub pragul de excitare neuronală sau în urma excitării cohleei cu un curent electric.
Aceste otoemisiuni se datorează vibraţiei celulelor ciliate externe. Faptul că otoemisiunile sunt
prezente la persoanele otologic normale a dus la propunerea folosirii lor în explorarea
funcţională cohleară. Se constată că în surdităţile cohleare otoemisiunile dispar.
100 CU
RS
8. Traducerea mecano-electrică a semnalului acustic
Funcţia de traducere a semnalului mecanic în semnal electric se realizează atât la nivelul
celulelor ciliate externe, cât şi la nivelul celulelor ciliate interne. Dar, conform datelor actuale,
traducerea semnalului acustic în influx nervos care poartă spre cortex informaţia auditivă se
efectuează numai în celulele ciliate interne.
Celulele ciliate interne sunt, prin aranjamentul lor spaţial, în contact atât cu endolimfa
din canalul cohlear, prin suprafaţa lor apicală, cât şi cu perilimfa din rampa timpanică, prin
partea lor bazală. Cele două lichide intracohleare au concentraţii ionice diferite. În endolimfă,
concentraţiile ionilor de K+ şi Na+ sunt asemănătoare cu cele din interiorul celulelor şi anume,
concentraţiile de K+ sunt mari şi cele de Na+ mici, în timp ce în perilimfă situaţia este inversă.
Potenţialul transmembranar al celulei va fi influenţat de condiţiile diferite în care se află zonele
apicală şi bazală ale celulei, ale căror contribuţii vor fi diferite. În repaus potenţialul
transmembranar are o valoare de cca. -60 mV. Potenţialul de membrană este modificat în urma
mişcării fasciculului de stereocili iar răspunsul este dependent de direcţie. Dacă vârful
fasciculului se mişcă pe axa de simetrie bilaterală înspre cilii cei mai lungi se produce o
depolarizare de până la -40 mV (Fig. 16 a). Dacă fasciculul este deplasat pe aceeaşi axă, dar în
direcţia opusă, se produce o hiperpolarizare, iar potenţialul transmembranar creşte până la -65
mV (Fig. 16 c). Sensibilitatea descreşte marcat în celelalte direcţii, ajungând la zero pe direcţia
perpendiculară pe axă. În felul acesta, celulele ciliate interne prezintă o sensibilitate direcţională.
Depolarizarea, respectiv hiperpolarizarea, se datorează deschiderii, respectiv blocării
suplimentare a unor canale ionice care se găsesc în zona apicală a celulelor ciliate externe şi care
lasă să treacă dinspre exterior spre interiorul celulei ionii pozitivi cu dimensiuni mai mici de 6 Å.
Este vorba în special de ionii de K+ care au concentraţii mari în endolimfă. Mecanismul de
deschidere a acestor canale a putut să fie descris ca urmare a unor cercetări de electrofiziologie,
în special pe baza lucrărilor lui Hudspeth şi ale colaboratorilor, care au arătat că în vâfurile
stereocililor se găsesc canale ionice (Fig. 17 C).
S-a calculat că celulele ciliate sunt atât de sensibile, încât o deflexie de ordinul
diametrului atomului de hidrogen este suficientă pentru a face să apară răspunsul celular. Prin
deschiderea canalelor ionice de la polul apical al cililor, în celulă intră un flux de ioni pozitivi. În
stare de repaus porţile canalelor ionice aflate în vârfurile stereocililor pot fi deschise prin
ciocnirile termice cu moleculele înconjurătoare şi în acest fel apare “zgomotul” electric al
celulelor. La înclinarea stereocililor în sens invers, se produce o hiperpolarizare a celulei prin
împiedicarea deschiderii aleatoare a porţilor canalelor ionice. Intrarea ionilor de K+ în celulă sub
efectul deformaţiei mecanice duce la depolarizarea celulei. Depolarizarea se propagă în întreaga
celulă, până în zona bazală. În porţiunea bazală a membranei se află canale de Ca 2+ iar în
apropierea lor se găsesc vezicule cu neurotransmiţători. Depolarizarea duce la deschiderea
canalelor de Ca++ sensibile la variaţiile de potenţial, cu intrarea consecutivă a ionilor de Ca ++.
Creşterea concentraţiei ionilor de Ca++ duce la accentuarea depolarizării şi antrenează fuzionarea
veziculelor cu neurotransmiţători cu membrana presinaptică. La fuzionarea veziculelor cu
membrana, neurotransmiţătorii sunt eliberaţi în spaţiul sinaptic şi declanşează apariţia şi
propagarea potenţialului de acţiune pe fibra nervoasă. Creşterea nivelului de Ca ++ duce, pe de
altă parte, la activarea unor canale de K+ aflate în membrana bazolaterală a celulei, care sunt Ca+
+
dependente. Ionii de K+ ies din celulă şi celula se repolarizează. Nivelurile ridicate de presiune
acustică, în apropierea pregului dureros, duc la suprastimularea celulelor ciliate şi la eliberarea
de neurotransmiţători în cantitate mult crescută astfel încât este lezată terminaţia nervoasă.
Activitatea electrică globală la nivelul nervului cohlear. Activitatea electrică globală, înregistrată cu
ajutorul unor electrozi plasaţi direct pe nervul cohlear, reprezintă suma activităţilor electrice ale tuturor fibrelor
care-l constituie. Potenţialul global conţine mai multe unde succesive. Asemenea înregistrări globale nu aduc
aproape nici un fel de informaţii privind mecanismele fundamentale ale proceselor bioelectrice care stau la
baza excitaţiei auditive.
ELEMENTE DE PSIHOFIZICĂ1
1. Noţiuni elementare
2. Mărimi de excitare şi mărimi de senzaţie
3. Pragurile în psihofizică
4. Legea Weber; Legea Weber-Fechner
5. Legea Stevens
6. Codificarea parametrilor excitanţilor
7. Exemple - Aplicaţii la percepţia auditivă. Noţiuni de psihoacustică
1. Noţiuni elementare
Psihofizica este ramura ştiinţei care studiază relaţiile dintre caracteristicile stimulilor şi
senzaţiile produse de aceştia, fiind o disciplină care se situează la graniţa dintre biofizică şi
psihologie. Elementele esenţiale în procesul de comunicare a omului cu mediul înconjurător sunt
stimulul, receptorul, senzaţia şi percepţia.
Stimulul reprezintă un semnal pentru organele de simţ dacă anumite celule ale acestora
sunt sensibile la existenţa sa. Astfel, undele electromagnetice cu lungimea de undă cuprinsă între
400 şi 750 nm reprezintă stimuli pentru analizatorul vizual uman, iar vibraţiile mecanice cu
frecvenţa cuprinsă între 16 - 20.000 Hz constituie stimuli pentru receptorul auditiv uman. În
schimb, undele electromagnetice cu alte lungimi de undă, deşi sunt de aceeaşi natură cu cele din
domeniul 400 şi 750 nm, nu pot fi detectate de către analizatorul vizual, iar vibraţiile mecanice
cu frecvenţe mai mici de 16 Hz şi mai mari de 20.000 Hz nu mai reprezintă semnale pentru
receptorul auditiv uman. Stimulii care pot fi recepţionaţi de organele specializate ale
organismului uman pot fi de mai multe feluri (optici, acustici, chimici, termici etc), însă nu
pentru toţi stimulii există organe specializate (de exemplu, pentru stimulii electrici) deşi aceştia
pot fi detectaţi prin efectele produse la nivelul organismului.
Receptorii sunt alcătuiţi din celule specializate sensibile la acţiunea unui anumit tip de
stimuli. Asemenea celule pot fi integrate în structuri complexe, alcătuind astfel analizatorii.
Analizatorii prelucrează informaţia recepţionată, generând senzaţii şi percepţii şi acţionând în
acest fel ca nişte traductoare. Cu alte cuvinte, informaţia primită din mediul înconjurător prin
intermediul stimulilor este tradusă în semnale specifice sistemului nervos, respectiv semnale
bioelectrice, iar acestea sunt transmise pe căile nervoase până la centrii superiori din cortex,
104 CU
RS
unde este generată percepţia finală. Receptorii pot fi calsificaţi în funcţie de provenienţa
stimulilor în trei categorii:
- proprioceptorii, care primesc informaţii din propriul nostru corp (muşchi, tendoane,
articulaţii etc.);
- interoceptorii, care furnizează informaţii asupra mediului intern (presiunea sângelui,
concentraţia unor substanţe în sânge etc.), informaţii care în general nu sunt conştientizate;
- exteroceptorii, care furnizează informaţii asupra mediului extern.
Organele de simţ se situează în categoria exteroceptorilor. Organele de simţ complexe,
respectiv analizatorii vizual şi auditiv, sunt sisteme senzoriale alcătuite din două părţi principale:
1) Sistemul periferic care include receptorul senzorial propriu-zis
2) Căile nervoase care prelucrează informaţia şi ariile corticale specializate care sunt
destinatarul informaţiei.
Senzaţia este o mărime subiectivă, spre deosebire de stimul care este o mărime obiectivă.
Ea reprezintă reflectarea pe plan psihic a unor caracteristici ale stimulilor şi conţine informaţii
1
Acest capitol se bazează parţial pe capitolul "Introducere în Psihoacustică" din cartea "Elemente de Bioacustică",
Constanţa Ganea, 1999
105 CU
RS
de ordin cantitativ sau calitativ. Ca informaţii de tip cantitativ se pot menţiona intensitatea unui
sunet sau intensitatea luminoasă, iar ca informaţii de tip calitativ culoarea sau timbrul sonor.
caracteristici care acţionează direct asupra organelor de simţ sau asupra receptorilor. Totuşi,
senzaţia se referă doar la o caracteristică distinctă, separată, a unui stimul şi nu permite
cunoaşterea integrală a caracteristicilor acestuia.
Integrarea caracteristicilor unui stimul se efectuează la nivelul creierului unde este
generată percepţia. Percepţia permite cunoaşterea fenomenelor lumii înconjurătoare în
totalitatea însuşirilor lor, necesitând intervenţia memoriei şi a inteligenţei.
Deşi senzaţia şi percepţia reflectă fenomene obiective, reflectarea acestora este
subiectivă. Astfel, un acelaşi stimul poate determina senzaţii diferite la indivizi diferiţi sau chiar
la acelaşi individ în funcţie de condiţiile în care acesta se află şi sunt influenţate de o serie de
factori cum ar fi: experienţa anterioară, starea psiho-afectivă, nivelul de cultură, starea fizică
(oboseală, adaptare etc.).
3. Pragurile în psihofizică
Metoda folosită pentru construirea scărilor de senzaţii este metoda pragurilor. Pragul, în
psihofizică reprezintă limita dintre două stări: starea pentru care apare răspunsul aşteptat şi
106 CU
RS
starea pentru care răspunsul nu mai apare. Sunt definite următoarele praguri: de detecţie sau
inferior, superior, diferenţial absolut şi relativ.
Pragul de detecţie reprezintă intensitatea minimă a unui stimul (excitant) care poate
genera o senzaţie. Un asemenea stimul este numit stimul liminar. Pragul de detecţie mai este
numit prag absolut sau prag inferior.
Pragul diferenţial absolut reprezintă cea mai mică diferenţă perceptibilă (intervalul
minim) dintre intensităţile a doi stimuli care sunt percepuţi ca distincţi. Dacă se notează cu E
intensitatea excitantului, pragul diferenţial va fi:
E=E -E0
unde E0 reprezintă intensitatea stimulului prag.
E
Se defineşte pragul diferenţial relativ E ca fiind raportul dintre pragul diferenţial
absolut ∆E şi valoarea intensităţii excitantului, E. În cazul unui organ de simţ, pragul diferenţial
relativ reprezintă puterea de rezoluţie a acestuia. Un acelaşi organ de simţ poate detecta stimuli
ale căror intensităţi baleiază intervale de până la 12 ordine de mărime (performanţă neegalată
încă de nici un dispozitiv tehnic de detecţie – microfon, cameră foto, etc).
Intensitatea maximă a unui stimul care poate fi prelucrat de către un organ de simţ
corespunde, în general, pragului dureros.
Fig. 1 Reprezentarea grafică a dependenţei dintre senzaţie si excitant (legea lui Stevens), în coordonate normale (a) şi
logaritmice (b). Pe ordonată este reprezentată tăria senzaţiei, iar pe abscisă intensitatea excitantului care poate fi de
exemplu intensitatea curentului care provoacă un şoc electric, lungimea unui obiect sau intensitatea (strălucirea) unei
surse luminoase. (Adaptare după D.Eremia, 1993)
85 dB 8 ore
90 dB 2 ore 30 minute
95 dB 48 minute
100 dB 15 minute
105 dB 5 minute
110 dB 1,5 minute
Fig. 2 Curbele izosonice ale percepţiei umane. (MAF - minimum audible field - pragul de audibilitate)(Adaptare
după C.Ganea, 1999)
În cazul sunetelor de frecvenţă superioară valorii de 1.000 Hz, liniile izosonice rămân
aproape paralele pe măsură ce nivelul creşte, deci tăria sonoră creşte direct proporţional cu
nivelul de presiune acustică. Se observă pe această reţea că pentru a părea la fel de intens ca un
sunet de 1.000 Hz şi 30 dB, un sunet de 125 Hz sau un sunet de 9.000 Hz trebuie să aibă un nivel
de 40 dB. Se spune că aceste trei sunete au un acelaşi nivel de tărie sonoră (izosonie). Fiecare
linie izosonică taie axa verticală de abscisă 1.000 Hz într-un punct în care este trasat un indice,
de valoare numeric egală cu numărul de decibeli corespunzător nivelului, dar exprimată în foni,
fonul fiind, deci, unitatea care serveşte pentru exprimarea nivelului de izosonie. Astfel, în cazul
celor trei sunete menţionate nivelul de izosonie este de 30 foni. Scara fonilor coincide cu scara
decibelilor pentru un sunet de 1.000 Hz. Fonul reprezintă un indice de tărie sonoră, făra a fi însă
o unitate veritabilă de senzaţie. Scara de senzaţie prin care se evaluează tăria sonoră este scara
sonilor. Această scară este puţin utilizată.
Aria acoperită de curbele izosonice se numeşte aria normală de audibilitate sau câmp
auditiv normal (Fig.3) Curba inferioară, notată de obicei cu MAF (minimum audible field),
obţinută pentru o populaţie de 51 subiecţi, în aceleaşi condiţii în care s-au trasat celelalte curbe
izosonice, este curba normalizată a pragului absolut de audibilitate în câmp liber (ISO, 1961).
Pragul dureros al auzului sau pragul auditiv superior este nivelul minim al presiunii acustice
care, pentru o frecvenţă dată, produce unui subiect o senzaţie de durere în ureche. Linia care
reprezintă pragul dureros de audibilitate nu este trasată explicit din cauza variaţiilor individuale
mari. Cea mai mică diferenţă de nivel acustic care permite să se perceapă o diferenţă de senzaţie
de intensitate se numeşte prag diferenţial de tărie sonoră sau prag de discriminare.
În audiometria clinică, determinarea pragului normal de audibilitate face parte din
examenul curent pentru explorarea funcţiei auditive în vederea diagnosticării şi evaluării
deficienţelor auditive, iar în audiometria protetică această determinare este utilizată în scopul
orientării şi adaptării protezelor auditive. Presbiacuzia este caracterizată, printre altele, prin
ridicarea pragului de audibilitate, în special în domeniul frecvenţelor înalte. O pierdere de 25 dB
duce la o degradare semnificativă a inteligibilităţii vorbirii.
110 CU
RS
Începând cu anul 1953, frecvenţa notei la a octavei a treia (la3) este fixată la 440 Hz.
Din punct de vedere psihoacustic, această divizare este departe de posibilităţile de
discriminare în frecvenţă ale urechii umane. Astfel, urechea poate să discearnă 620 trepte de
înălţime tonală, în timp ce un pian are la dispoziţie doar 85 de trepte.
Deşi utilizate pentru reprezentarea intensităţii tonale, octavele şi cele 12 semitonuri nu
reprezintă indici ai unei scări de senzaţie, ci ai unei scări logaritmice de frecvenţă, respectiv ai
unei scări de excitare (stimulare). Acest lucru se datorează faptului că proporţionalitatea dintre
înălţimea tonală şi logaritmul frecvenţei semnalului sonor se păstrează numai pentru frecvenţele
mai mici de 500 Hz. Deasupra acestei valori, înălţimea tonală creşte mai lent decât frecvenţa.
Aceste informatii sunt suplimentare
Unitatea de înălţime tonală care permite descrierea intervalelor muzicale este Savart-ul. Valoarea, exprimată în
Savart, a unui interval între două note de frecvenţe şi ' este
' dată de relaţia:
I 103 log
t
Savart
Dacă se consideră intervalul de o octavă, ' = 2 , şi în acest caz se poate scrie:
It 103 log 2 300 Savart
Astfel, scara fizică de înălţime tonală are la bază frecvenţa şi octava armonică.
Scări de senzaţie. Mel-ul şi bark-ul. În mod analog cu alcătuirea unei scări de senzaţie pentru aprecierea tăriei
sonore, scara sonilor, s-a stabilit o scară de senzaţie pentru măsurarea înălţimii tonale. Aceasta este scara de meli,
care a fost obţinută prin trasarea experimentală a curbei care reprezintă variaţiile de înălţime tonală în funcţie de
frecvenţă.
Fig. 4 Multiple semnale periodice simple se pot suma, rezultanta fiind un semnal complex. Procesul invers, de
aflare a frecvenţelor simple componente ale unui semnal complex se numeşte analiză Fourier a semnalului (sonor,
în exemplele din acest curs). (Adaptare după C.Ganea, Curs de Biofizică, UMF. C. Davila Bucureşti)
Nu numai în cazul instrumentelor muzicale, dar şi în cazul vocii umane se poate vorbi de
timbru sonor, care permite recunoaşterea vocii unei persoane.
Fig. 5 Dreapta: spectre de linii (analize Fourier) ale unor sunete complexe emise de vioară şi corn: Nota Re (octava
3) – la vioară (a) şi la corn (c). Nota La (octava 3) – la vioară (b) şi la corn (d). Stânga: spectrul sunetului unui
clopot. (Adaptare după C.Ganea,1999)
1. Elemente de hidrodinamică
Ecuaţia de continuitate
Ecuaţia Bernoulli
Vâscozitatea
Legea lui Poiseuille
Legea lui Stokes
Numărul lui Reynolds
2. Elemente de hemodinamică
Circulaţia sanguină
Legea lui Laplace
Structura pereţilor vaselor de sânge
Factori care influenţează presiunea arterială
Acumularea axială a eritrocitelor
Viteza de curgere a sângelui
Presiunea sângelui
Aspecte biofizice ale patologiei circulaţiei sângelui
1. ELEMENTE DE HIDRODINAMICĂ
Hidrostatica studiază fluidele aflate în repaus, iar hidrodinamica fluidele în mişcare.
Fluidele sunt substanţe care pot curge – gaze şi lichide. În timp ce lichidele sunt practic
incompresibile, gazele pot fi comprimate cu uşurinţă. Un fluid ideal nu prezintă frecări interne în
timpul curgerii (vâscozitate); în schimb, toate fluidele reale sunt vâscoase. Se numeşte linie de
curgere traiectoria unui element de volum al unui fluid în mişcare. Curgerea este staţionară
dacă orice element de volum care trece printr-un punct dat urmează aceeaşi traiectorie ca şi
elementele anterioare (viteza în orice punct din spaţiu este constantă în timp, dar poate să nu fie
constantă în spaţiu – poate varia de la un punct la altul). O linie de curent este curba a cărei
tangentă în orice punct are direcţia vitezei fluidului din acel punct (în curgerea staţionară liniile
de curent coincid cu liniile de curgere). Un tub de curent este delimitat de totalitatea liniilor de
curent care trec prin frontiera unui element de suprafaţă. În curgerea staţionară fluidul dintr-un
115 CU
tub de curent nu se amestecă cu cel din alte tuburi. Punctul de stagnare este un obstacol care RS
împarte tubul de curent. În curgerea laminară, straturile alăturate de fluid alunecă lin unele faţă
de altele. La viteze mari de curgere sau la variaţii mari ale vitezei datorate unor obstacole,
curgerea devine neregulată (curgere turbulentă) şi se produc amestecuri în fluid. Curgerea
turbulentă nu poate fi staţionară.
Ecuaţia de continuitate
Se defineşte debitul volumic de curgere, Q, ca fiind volumul de fluid care traversează
într-o secundă o secţiune a unui tub de curent. Viteza de curgere, v, este spaţiul parcurs de un
element de volum de fluid în unitatea de timp. În cazul unui fluid incompresibil aflat în curgere
staţionară, densitatea sa (ρ) nu variază în timpul curgerii. De aceea, din conservarea masei (nu
există acumulări de fluid) rezultă:
Q = S v = const.
Aceasta este ecuaţia de continuitate.
În cazul curgerii unui fluid incompresibil printr-un vas de secţiune variabilă, fără
ramificaţii, debitul rămâne constant indiferent de modul de curgere (laminară sau turbulentă),
datorită conservării masei de fluid care traversează vasul.
Aşadar, pe o porţiune fără ramificaţii a unui vas sanguin:
116 CU
RS
- debitul volumic Q are aceeaşi valoare în orice secţiune a vasului;
- viteza sângelui depinde de diametrul vasului;
- în zonele înguste ale vasului curgerea este mai rapidă decât în zonele cu deschidere mare.
Ecuaţia Bernoulli
Într-un fluid ideal incompresibil, de-a lungul unei linii de curent are loc relaţia:
p + ρg y + ρv2/2 = const.
unde g = acceleraţia gravitaţională, y = înălţimea faţă de sistemul de referinţă ales. Această
egalitate reprezintă ecuaţia lui Bernoulli. Ea este valabilă pentru fluide fără vâscozitate, aflate în
curgere staţionară.
În general, sunt folosite denumirile: p = presiune statică, ρgy = presiune hidrostatică,
ρv2 /2 = presiune dinamică.
2
Fiind un fluid vâscos, sângele nu satisface ecuaţia lui Bernoulli. De exemplu, presiunea
sângelui poate creşte considerabil la nivelul unei stenoze arteriale. Aerul satisface, cu o bună
aproximaţie, această ecuaţie.
Vâscozitatea
La fluidele reale, în timpul curgerii apar forţe de frecare internă între straturile
moleculare care curg cu viteze diferite. Aceste forţe, numite forţe de vâscozitate, tind să anuleze
mişcarea relativă a straturilor şi ele sunt cu atât mai mari cu cât viteza relativă a straturilor este
mai mare. În general, pentru un fluid aflat în curgere laminară, forţa de vâscozitate este
proporţională cu gradientul vitezei:
Forţa de vâscozitate = coeficientul de vâscozitate aria gradientul vitezei
v
=S
x
= coeficientul de vâscozitate (numit şi vâscozitate);
S = aria suprafeţei de frecare între straturi;
∆v = viteza relativă de curgere a straturilor;
∆x = distanţa între straturi (măsurată pe o direcţie perpendiculară pe direcţia de curgere);
gradientul vitezei = ∆v/∆x.
Coeficientul de vâscozitate se măsoară în Poiseuille: 1 Poiseuille (1 PI) = 1 Ns/m2.
O unitate utilizată frecvent în practică se numeşte poise: 1 poise (1 P) = 10-1 Ns/m2.
Vâscozitatea apei este 1 cP = 0,01 P la temperatura camerei, 0,7 cP la 37°C, iar
vâscozitatea sângelui (la 37°C) este cuprinsă între 1,5 şi 3 cP. Vâscozitatea sângelui variază cel
mai mult cu temperatura şi cu numărul de hematii pe unitatea de volum.
117 CU
RS
Fluidele reale care satisfac relaţia de mai sus se numesc fluide newtoniene. Vâscozitatea
acestor fluide (η) nu depinde de viteza de curgere şi nici de presiune (η = const.). Există şi fluide
reale nenewtoniene, care nu satisfac relaţia de proporţionalitate între forţa de vâscozitate şi
gradientul vitezei, deoarece vâscozitatea lor depinde de viteza de curgere sau de presiune.
Vâscozitatea sângelui depinde de concentraţia hematiilor, care, prin forma lor discoidală,
măresc rezistenţa la curgere (frecarea internă) a sângelui. În anemii, concentraţia hematiilor este
redusă, ceea ce micşorează vâscozitatea sângelui, în timp ce o concentraţie ridicată a hematiilor
creşte vâscozitatea. În plus, dacă viteza de curgere a sângelui creşte, hematiile tind să se
orienteze pe direcţia de curgere, astfel încât scade rezistenţa la curgere. Vâscozitatea sângelui
scade deci atunci când viteza de curgere creşte. Această proprietate defineşte sângele ca fluid
nenewtonian pseudoplastic şi se datorează faptului că sângele nu este un fluid omogen, ci o
suspensie. În componenţa sângelui intră plasma sanguină şi elementele figurate, cum ar fi
globulele roşii (eritrocite sau hematii), mai multe tipuri de globule albe (leucocite) şi trombocite
(Fig. 2). Plasma este un fluid newtonian. În condiţii normale, plasma sanguină este de 1,2-1,6 ori
mai vâscoasă decât apa, iar sângele de 2-4 ori. Dintre elementele figurate, practic numai
hematiile influenţează vâscozitatea sângelui (fiind mult mai numeroase – cca. 96%).
Vâscozitatea sângelui creşte aproximativ exponenţial cu hematocritul (H) (Fig. 3). Valoarea
optimă a hematocritului este definită ca valoarea pentru care cantitatea de hemoglobină ce poate
intra în capilare este maximă. Această cantitate este proporţională cu raportul H/. La bărbaţi,
H/ este maxim când H = 48%, iar la femei H = 41% (valoarea optimă a hematocritului).
Hematiile
Fig. 2 Elementele figurate: eritrocite, globule albe - diametru 10 m, concentraţie (4-11)103/mm3,
trombocite - diametru 1,5-3 m, concentraţie ~(15-40)104/mm3.
(Adaptat după https://www.thoughtco.com/blood-373480)
vascozitatea
sangelui
relativa la apa
H/ = maxim
Hematocrit H (%)
Un alt lichid nenewtonian este lichidul sinovial care umple cavitatea articulară (Fig. 4).
Introducerea unui fluid între două corpuri solide aflate în contact micşorează mult forţa de
118 CU
RS
frecare dintre ele. Frecarea solid - solid (între cele două cartilaje) este înlocuită cu frecarea
internă din fluid. Fluidul devine lubrifiant, iar efectul de micşorare a frecării se numeşte
lubrifiere. Vâscozitatea lichidului sinovial scade considerabil odată cu creşterea presiunii (lichid
nenewtonian pseudoplastic). Această proprietate se datorează prezenţei în lichidul sinovial a
moleculelor de lubricină şi acid hialuronic secretate de sinoviocitele din membrana sinovială.
Aceste macromolecule sunt foarte flexibile şi se aliniază cu uşurinţă atunci când presiunea din
fluid creşte, scăzând astfel frecarea în interiorul lichidului sinovial în timpul mişcărilor care
solicită articulaţia şi crescând mobilitatea articulară. În plus, se reduce semnificativ riscul
distrucţiei articulare, având în vedere că o presiune intra-articulară crescută poate duce la
diminuarea perfuziei sinoviale şi la alterarea procesului de difuzie a nutrienţilor în spaţiul intra-
articular.
extremitate osoasă
membrana
sinovială
cartilaj
capsulă fibroasă
cavitate plină cu
lichid sinovial
ligame
nte
v=0
(gradientul presiunii).
proporţională cu pătratul razei conductei şi cu variaţia presiunii pe unitatea de lungime (p1 - p2)/l
scade de la valoarea maximă (p1 - p2)R2/4l în centru, la zero lângă pereţi. Deci viteza maximă este
p1 - p2 = diferenţa de presiune de la capetele tubului; R = raza tubului; l = lungimea tubului. Viteza
v = (p1 - p2)(R2 - r2)/4l
Viteza de curgere într-un punct depinde de pătratul distanţei faţă de centru (r) conform relaţiei:
Fig. 4 Scăderea vâscozităţii lichidului sinovial odată cu creşterea presiunii duce la creşterea mobilităţii articulare.
(Adaptat după https://en.wikipedia.org/wiki/Synovial_fluid)
Vasodilatarea cu 19%
dublează debitul
Vasoconstricţia cu 16%
reduce debitul la 50%
Fig. 6 Sistemul arteriolar controlează eficient debitul sanguin prin vasoconstricţie sau vasodilataţie.
Un alt exemplu: dacă în timpul unui efort fizic debitul sanguin creşte de 5 ori, presiunea
sângelui ar trebui să crească de la 120 mmHg la 600 mmHg pentru a menţine un astfel de flux
sanguin în absenţa proceselor de vasodilataţie. Acest lucru nu este realizabil; creşterea debitului
este asigurată prin vasodilatarea arteriolelor la presiune constantă. Astfel, o creştere a razei
arteriolei de 1,5 ori determină creşterea debitului în arteriolă de 1,5 4 5 ori. Sistemul de
arteriole controlează în mare parte debitul sanguin în corp. Aceste vase subţiri (şi foarte
numeroase) pot reduce fluxul de sânge în anumite părţi ale organismului (prin vasoconstricţie),
crescând fluxul sanguin în alte părţi (prin vasodilataţie), în funcţie de cerinţele tisulare (Fig. 6).
Curgerea este laminară dacă Re < 2000 şi devine turbulentă dacă Re > 3000. În
intervalul 2000 < Re < 3000 există un regim de tranziţie, curgerea este instabilă şi poate trece
uşor de la un regim la altul (Fig. 7).
Obstacol Vârtejuri
Fig. 7 Tipul curgerii poate fi estimat în funcţie de numărul lui Reynolds (Adaptat după
http://cdn.iopscience.com/images/0143-0807/36/1/015001/Full/ejp502342f1_online.jpg)
2. ELEMENTE DE HEMODINAMICĂ
Circulaţia sanguină
Sistemul circulator este un sistem tubular închis în care inima acţionează ca o pompă
care împinge sângele într-o manieră pulsatilă în vasele de sânge de diferite calibre, având pereţi
parţial elastici.
Schema generală a circulaţiei arată numărul mare de căi prin care sângele curge din
regiunea cu presiune ridicată (aorta) spre regiunea cu presiune joasă (vena cavă) (Fig. 8).
Debitul sanguin cardiac este în medie de 5 litri/min. în repaus, şi poate ajunge la 25
litri/min. în timpul efortului fizic.
Aorta se ramifică în artere, arterele în arteriole. Patul capilar realizează transferul de
sânge în ţesut, spre venule, care transportă sângele spre vene, iar venele spre vena cavă.
Fluxul sanguin dinspre arteriole spre capilare este controlat de sfincterul precapilar,
un muşchi în formă de inel care, prin contracţie, reglează deschiderea vasului (Fig. 9). Sfincterul,
înconjurat de celule ale ţesutului, este sensibil la concentraţii mici de oxigen, aciditate,
concentraţii mari de CO2 şi concentraţii mari de ioni de potasiu (K +). Aceste condiţii determină
muşchiul să se relaxeze, permiţând fluxul de sânge dinspre arteriolă spre ţesut şi spre patul
capilar din ţesut. În caz contrar, muşchiul rămâne contractat, blocând fluxul de sânge spre ţesut.
În acest fel, fluxul sanguin capilar este reglat în funcţie de condiţia ţesutului. În general,
sfincterul precapilar rămâne deschis un timp scurt. La un anumit moment, în muşchiul aflat în
repaus numai 2-5% din capilare funcţionează simultan. Debitul în fiecare vas sanguin depinde
numai de presiunea eficace, deci de diferenţa dintre presiunea aortică medie (100 mmHg) şi
presiunea medie a venei cave (10 mmHg). Se observă că în curgerea de la aortă spre arterele
principale, apoi de la acestea la alte artere “în paralel”, la arteriole şi în final spre milioanele de
capilare, are loc o ramificare din ce în ce mai complexă a vaselor de sânge, concomitent cu
micşorarea diametrului lor.
CURS DE BIOFIZICĂ 120
Cap
Plamani
Vena cava
superioara
Aorta
Artera
pulmonara Vene pulmonare
Capilare
Fig. 8 Schema generală a circulaţiei sângelui
sfincter
ţesut
capilare
Fig. 9 Sfincterul precapilar controlează fluxul sanguin dinspre arteriole spre capilare
Relaţia de mai sus este valabilă pentru vase cilindrice, a căror grosime este neglijabilă în
raport cu raza, şi arată ce tensiune apare în peretele unui vas de sânge, care se comportă ca o
membrană elastică de formă cilindrică, atunci când sângele are o anumită presiune (presiunea
transmurală se poate aproxima cu presiunea sângelui).
Pentru membrane elastice de curbură variabilă, caracterizată de două raze principale de
curbură – meridională (R1) şi circumferenţială (R2), legea lui Laplace se scrie:
⎛ 1 1⎞
p T ⎜R R ⎟
⎝ 1 2 ⎠
- debitul sanguin cardiac (sau produsul cardiac) reprezintă produsul dintre rata cardiacă şi
volumul de ejecţie (volumul de sânge pompat de inimă la fiecare contracţie). Practic, debitul
cardiac reflectă eficienţa cu care inima controlează circulaţia sanguină în organism. Presiunea
arterială creşte cu debitul. Pentru un debit de 5 l/min. (în repaus) presiunea arterială este
125/80 mmHg. Pentru un debit de 15 l/min. (la efort fizic), presiunea este 180/125 mmHg.
- rezistenţa la curgere a vaselor de sânge este raportul dintre diferenţa de presiune de la capetele
vasului (∆p) şi debitul sanguin, Q:
p
Q
Conform legii lui Poiseuille: Q = (p/8l)R4
deci:
= 8l/R4
În condiţii normale, debitul sanguin Q este constant, deci presiunea arterială creşte odată
cu rezistenţa la curgere. Rezistenţa unui vas de sânge depinde de diametrul vasului şi de
netezimea pereţilor vasului. Rezistenţa este mai mare dacă vasul este mai îngust sau dacă
peretele vascular este mai rugos. Plăcile de aterom cresc presiunea sanguină. Substanţele
vasodilatatoare (cum ar fi nitroglicerina) scad presiunea arterială, în timp ce substanţele
vasoconstrictoare o măresc. Datorită presiunii diferite, sistemul arterial contribuie cu 93% din
rezistenţa totală a patului vascular, în timp ce sistemul venos cu 7%.
- elasticitatea pereţilor arteriali: presiunea arterială creşte când rigiditatea pereţilor arteriali
creşte. Există o clasă largă de medicamente antihipertensive care reduc rigiditatea arterială
acţionând ca antagonişti (blocanţi) ai canalelor de calciu din plasmalema celulelor musculare
parietale, ceea ce duce la relaxarea fibrelor musculare din peretele vascular. Este prevenită atât
rigiditatea vaselor de sânge, cât şi vasoconstricţia.
Datorită structurii complexe a peretelui arterial, elasticitatea parietală nu este constantă,
ci scade odată cu creşterea presiunii arteriale, astfel încât curba tensiune-distensie este neliniară
(Fig. 10). De aceea, la presiuni mici, vasele sanguine se dilată mai uşor, în timp ce odată cu
creşterea presiunii sanguine vasele devin din ce în ce mai rezistente, prezentând distensii din ce
în ce mai reduse. Prin contracţia musculaturii netede, rigiditatea parietală creşte, iar curba
tensiune - alungire se deplasează spre stânga.
În arteriole, unde predomină musculatura netedă, pentru o aceeaşi presiune, tensiunea în
peretele vascular este mai mică decât în arterele mari. În plus, datorită ramificaţiei vaselor,
presiunea în arteriole este mult mai mică decât presiunea în aortă. Deci peretele arteriolar este
supus unei tensiuni T foarte mici.
Elasticitatea pereţilor arteriali scade cu vârsta, de aceea presiunea arterială creşte cu
vârsta.
Tensiune
- vâscozitatea sângelui: dacă sângele este mai vâscos, presiunea arterială este mai mare.
CURS DE BIOFIZICĂ 123
vmax
Fig. 11 Datorită acumulării axiale, hematiile au aceeaşi viteză şi vâscozitatea sângelui devine constantă.
Presiunea sângelui
Sângele este expulzat în circulaţie în timpul sistolei ventriculare; în acest timp presiunea
din aortă devine egală cu cea din ventriculul stâng. Presiunea mare dezvoltată de ventriculul
stâng determină dilatarea iniţială a aortei. Datorită elasticităţii mari a peretelui aortic, în timpul
sistolei se acumulează în regiunea proximală o mare cantitate de sânge, acesta fiind trimis apoi
spre zonele distale datorită reacţiei elastice a aortei de revenire la forma netensionată.
CURS DE BIOFIZICĂ 124
Presiunea în aortă (sau presiunea centrală) variază în cursul ciclului cardiac (Fig.
12A). Porţiunea ascendentă începe în momentul deschiderii valvei aortice şi pătrunderii
sângelui în aortă şi artere, ai căror pereţi sunt destinşi şi înmagazinează energie potenţială
elastică. Se produce o undă de presiune care înaintează în sistemul arterial (unda transmisă) şi
care este urmată de reflexia în restul arborelui vascular (unda reflectată, care se propagă înapoi).
Suprapunerea celor două unde determină variaţia presiunii aortice conform diagramei din Fig.
12A. Maximul undei transmise este corelat cu o primă zonă de inflexiune, urmată de o creştere a
presiunii până la valoarea maximă, care este presiunea sistolică. La sfârşitul sistolei
ventriculare, înainte de închiderea valvei aortice, presiunea centrală scade, variaţia fiind
dominată de atenuarea undei transmise. După închiderea valvei aortice unda reflectată atinge
amplitudinea maximă, care induce o creştere tranzitorie - creşterea dicrotică - a presiunii. În
continuare presiunea în aortă scade treptat până la atingerea unei valori minime - presiunea
diastolică. Aceasta reprezintă presiunea exercitată exclusiv de arborele vascular asupra valvei
aortice.
t t
r
pd r
pd
t t
Fig. 12 Variaţia presiunii în aortă în cursul ciclului cardiac în cazul unei elasticităţi parietale normale (A) sau reduse
(B). Presiunile asociate cu unda transmisă (t) şi cu unda reflectată (r) dau prin însumare presiunea aortică (curba
roşie). ps - presiunea sistolică; pd - presiunea diastolică.
creşterea presiunii sistolice odată cu înaintarea spre zonele periferice (Fig. 13). Această variaţie
poate atinge 20-30 mmHg la nivelul arterei brahiale şi 40 mmHg la nivelul arterei radiale
comparativ cu aorta. De la aortă la artera radială, presiunea diastolică nu se modifică
semnificativ, deoarece în acest traseu elasticitatea parietală nu scade foarte mult. În schimb, în
traseul aortă ascendentă/toracică/abdominală - arteră iliacă - arteră femurală, în paralel cu
creşterea presiunii sistolice se observă şi o scădere progresivă a presiunii diastolice, care se
datorează diminuării semnificative a elasticităţii parietale.
p
psr
psb
psc
psa
pd
Aorta Artera carotidă Artera brahială Artera radială
Fig. 13 Amplificarea presiunii arteriale în timpul propagării dinspre aortă spre artera radială.
Presiunea arterială poate fi măsurată direct sau indirect. Metoda directă constă în
introducerea în arteră a unei sonde (cateter) prevăzută cu un manometru miniaturizat. Se
foloseşte rar, în serviciile de reanimare. Dintre metodele indirecte de măsurare se pot menţiona:
metoda palpatorie, metoda auscultatorie, metoda oscilometrică şi metoda reografică.
Aşa cum s-a discutat mai sus, valorile măsurate depind de locul în care se determină
presiunea arterială. În general, se consideră ca referinţă presiunea arterială măsurată la nivelul
arterei brahiale. Determinările la nivelul arterei radiale introduc o sursă largă de erori. În prezent
se consideră domeniul valorilor normale de 90-140 mmHg pentru presiunea sistolică şi 60-90
mmHg pentru presiunea diastolică, ambele măsurate la nivelul arterei brahiale. Valoarea limită
superioară pentru presiunea sistolică centrală (la nivelul aortei) normală creşte cu vârsta: 110
mmHg în categoria de vârstă 20-30 ani, 125 mmHg în categoria 50-60 ani. Conform legii
Laplace, tensiunea dezvoltată în pereţii arteriali este foarte mare, în timp ce pereţii capilarelor
sunt supuşi unor tensiuni foarte mici. Pentru o presiune sistolică brahială de 120 mmHg,
presiunea sângelui la intrarea în sistemul capilar este relativ mare, de ordinul a 30 mmHg, dar
tensiunea în pereţi este scăzută datorită razei mici a capilarelor. De aceea, structura peretelui
arterial prezintă o densitate mare de colagen, care îi conferă rezistenţă crescută la tensiuni mari
(protecţie contra anevrismului) (Fig. 15).
ARTERĂ
Vas cilindric T = pR
CAPILAR
p = 30 mmHg
p = 50 mmHg
Tensiunea în pereţii
p = 120 mmHg capilarului este foarte mică
Fig. 15 Conform legii lui Laplace, tensiunea în peretele capilar este mult mai mică decât în peretele arterial
(Adaptat după http://hydrogen.physik.uni-wuppertal.de/hyperphysics/hyperphysics/hbase/ptens3.html)
Fig. 16 Aranjamentul geometric ideal asociat cu un grad maxim de compactare a hematiilor, fără deformări.
vascular. Se îngustează lumenul arterial, creşte viteza de circulaţie a sângelui şi presiunea locală, crescând
riscul rupturilor vasculare. Dacă pereţii devin rugoşi, apar turbulenţe, care conduc la creşterea suplimentară
a rezistenţei la curgere şi la apariţia unor zgomote specifice numite sufluri.
Modificarea dimensiunilor inimii. În cardiomiopatia dilatativă, cavităţile inimii sunt mărite şi
cresc razele principale de curbură (Fig. 17). Conform legii lui Laplace, miocardul realizează un efort
suplimentar deoarece trebuie să producă, prin contracţie, o tensiune mai mare în pereţii cordului pentru a
asigura presiunea sistolică normală.
R2 R2
R1
R1
Fig. 17 În cardiomiopatia dilatativă dimensiunile cavităţilor inimii cresc. Cele două raze principale de curbură sunt prezentate
pentru ventriculul stâng în cazul normal (stânga) şi în cazul patologic (dreapta).
Anevrismul. Arterele mari sunt supuse unor tensiuni foarte mari, proporţionale cu presiunea
sângelui şi cu raza arterei (Legea lui Laplace). Dacă în peretele unei artere apare o leziune care dezvoltă o
regiune cu rezistenţă parietală scăzută, peretele începe, sub presiunea sângelui, să se întindă progresiv în
exteriorul arterei. Aparent, acest lucru ar duce la relaxarea locală a presiunii, însă, de fapt, extinderea arterei
determină o tensiune şi mai mare în peretele subţiat. Astfel procesul se amplifică progresiv, dezvoltând
anevrismul. Netratat, acesta duce în final la ruperea vasului de sânge.
ELEMENTE DE FOTOBIOLOGIE
1. Radiaţia electromagnetică.
2. Radiaţii neionizante.
3. Radiaţiile ultraviolete.
1. Radiaţia electromagnetică
Radiaţia electromagnetică este o undă care are două componente: câmpul electric (E) şi
câmpul magnetic (B). Cele două câmpuri variază periodic (oscilează) în timp şi spaţiu, fiecare
pe o direcţie perpendiculară pe direcţia de propagare a undei şi perpendicular unul pe celălalt
(Fig. 1). Un câmp electric oscilatoriu generează un câmp magnetic oscilatoriu, şi invers. În acest
fel se creează o undă care se propagă de la sine în spaţiu – unda electromagnetică.
129 CU
RS
Fig. 1 Undă electromagnetică. = lungimea de undă; E = amplitudinea câmpului electric; B = amplitudinea
câmpului magnetic. (Adaptat după Wikimedia Commons,
https://commons.wikimedia.org/wiki/File:Onde_electromagnetique.svg)
Cele mai joase frecvenţe şi energii le au undele radio extrem de lungi; lungimea de undă
este de ordinul a 10000 km, iar frecvenţa de ordinul a 30 Hz. Cea mai mare frecvenţă şi energie
o au radiaţiile γ, care pot atinge frecvenţe de 1024 Hz şi lungimi de undă mai mici de 10-14 m.
CURS DE BIOFIZICĂ 130
Un atom neutru aflat în stare fundamentală are energie minimă. Atunci când
interacţionează cu o undă electromagnetică, atomul poate absorbi energie de la aceasta, trecând
pe un nivel superior de energie. Dacă atomul nu a pierdut nici un electron, spunem că atomul
este într-o stare excitată (atom excitat, sau moleculă excitată în cazul moleculelor). Dacă însă
radiaţia a cedat suficientă energie pentru a scoate un electron din atom, se produce o ionizare,
rezultând un atom ionizat (încărcat electric) şi un electron liber (Fig. 4).
Fig. 4 Procesul de ionizare. Atomul interacţionează cu un foton, absorbindu-i energia, proces care permite unui
electron să părăsească norul electronic. (Adaptat după Wikimedia Commons;
https://commons.wikimedia.org/wiki/File:Stylised_atom_with_three_
Bohr_model_orbits_and_stylised_nucleus.svg)
Radiaţia electromagnetică poate fi emisă sau absorbită de electronii din molecule sau
atomi. În urma procesului de emisie sau absorbţie, electronii trec de pe un nivel de energie pe un
altul. Nivelele energetice sunt discrete, adică dispuse „în trepte”: electronii nu pot ceda sau
CURS DE BIOFIZICĂ 131
absorbi decât anumite cantităţi precise de energie. Spectrul de emisie sau absorbţie al unui atom
sau moleculă va conţine deci numai anumite frecvenţe (spectru discret), care definesc liniile
spectrale ale atomului sau moleculei respective. La moleculele organice cu grad înalt de
complexitate, unele nivele energetice ale diferiţilor atomi componenţi pot să se întrepătrundă,
dând naştere unor benzi spectrale (subdomenii continue ale spectrului moleculei).
2. Radiaţii neionizante
Radiaţiile pot fi ionizante sau neionizante.
Radiaţiile ionizante sunt radiaţii a căror energie este de cel puţin 10 eV (unde
1 eV = 1,6 10-19 J), având suficientă energie pentru scoate electroni din atomi sau molecule şi
producând astfel ionizări în mediul iradiat. Energia radiaţiei care produce o ionizare trebuie să
fie mai mare sau egală cu energia de legătură în atomul sau molecula respectivă a electronului
eliberat. Radiaţiile electromagnetice ionizante au 120 nm; acestea pot fi numai radiaţii , X
sau unele radiaţii UV.
Exemplu: Energia de ionizare a principalilor atomi care intră în structura biomoleculelor
este: 13,54 eV pentru hidrogen, 13,17 eV pentru oxigen, 11,24 eV pentru carbon şi 14,51 eV
pentru azot. Se observă că dintre aceste trei elemente, carbonul prezintă cea mai mică energie de
ionizare. Folosind relaţia lui Planck-Einstein se poate calcula lungimea de undă a radiaţiei care
are energia necesară pentru a produce ionizarea atomului de carbon: = hc/E = 110 nm.
Radiaţiile care au o energie mai mică de 10 eV nu pot produce ionizări în materie şi se
numesc radiaţii neionizante. Lungimea de undă a radiaţiilor electromagnetice neionizante
este mai mare decât 120 nm.
Radiaţiile electromagnetice din cea mai mare parte a domeniului UV (adică cele cu
120 nm), din tot domeniul vizibil şi infraroşu, microundele şi undele radio sunt radiaţii
neionizante.
3. Radiaţiile ultraviolete
În spectrul radiaţiilor electromagnetice, radiaţiile ultraviolete se află între radiaţiile X şi
radiaţiile vizibile, având lungimi de undă cuprinse între 10 şi 400 nm, iar energia cuprinsă între
3 şi 123 eV. Spectrul UV cuprinde cinci regiuni distincte:
UV extrem (10-190 nm),
UV îndepărtat (190-220 nm),
UVC (220-290 nm),
UVB (290-320 nm),
UVA (320-400 nm).
Soarele este cea mai importantă sursă naturală de radiaţii ultraviolete. Surse artificiale
sunt lămpile germicide, lămpile cu vapori de mercur, cu halogen, cu descărcări electrice sub
tensiune înaltă, sursele incandescente sau fluorescente, precum şi unele surse laser.
Radiaţiile UV neionizante pot conduce la ruperea unor legături chimice şi pot induce
reacţii fotochimice. Efectele biologice ale iradierii cu ultraviolete depind de lungimea de undă şi
de timpul de expunere.
Radiaţiile din domeniul UV extrem, UV îndepărtat şi UVC sunt aproape inexistente în
natură deoarece sunt absorbite complet în atmosferă.
Lămpile germicide emit radiaţie UVC. Aceasta poate induce dimerizarea unor baze
azotate ale ADN-ului (de exemplu dimerizarea timinei, Fig. 5) cu formare de legături covalente
între două baze consecutive aflate pe aceeaşi catenă ADN. Aceste leziuni premutagene alterează
structura ADN-ului prin destabilizarea legăturilor de hidrogen ale perechilor de baze
complementare afectate, şi inhibă polimerazele. Ca urmare, replicarea ADN-ului este blocată,
determinând oprirea diviziunii celulare şi în final moartea celulară (efect bactericid). Dimerii
pirimidinici persistenţi (nereparaţi) sunt mutageni şi reprezintă cauza principală a melanoamelor.
Pe lângă reacţiile de dimerizare, radiaţiile UVC mai pot induce şi alte efecte asupra
moleculei de ADN: ruperea unor legături chimice, hidratarea bazelor pirimidinice, rupturi ADN
uni-catenare, precum şi formarea unor legături covalente foarte stabile cu proteine aflate în
vecinătate, prin procesul de reticulare (engl., DNA-protein cross-links).
La om, radiaţiile UVC sunt puternic absorbite de stratul extern de celule moarte al
epidermei. Supraexpunerile accidentale la UVC pot produce inflamaţii şi arsuri ale corneei,
precum şi arsuri severe ale feţei. Acestea se vindecă de obicei în 1-2 zile, dar sunt extrem de
dureroase.
Radiaţiile UVB sunt cea mai distructivă formă a radiaţiilor ultraviolete deoarece au
suficientă energie pentru a produce leziuni în ADN prin reacţii fotochimice, şi nu sunt absorbite
complet în atmosferă.
CURS DE BIOFIZICĂ 134
Fig. 6 Transformarea tirozinei în melanină sub acţiunea UVA Adaptată după Blausen.com staff (2014). "Medical
gallery of Blausen Medical 2014". WikiJournal of Medicine 1 (2). DOI:10.15347/wjm/2014.010. ISSN 2002-4436.
Radiaţiile UVA (care sunt supranumite lumina neagră) sunt absorbite foarte puţin în
atmosferă. Efectul primar al UVA este pigmentarea pielii, însă expunerea excesivă produce
eritem. Sub acţiunea UVA, enzima tirozinază din melanocite transformă tirozina în melanină
(Fig. 6). Acest pigment are capacitatea de a absorbi radiaţiile ultraviolete în proporţie de 90-
100%, oferind în acest fel protecţie contra insolaţiei. Absenţa totală sau parţială a pigmentului,
determinată de lipsa tirozinazei (sau mutaţii ale acesteia), se manifestă în afecţiunea numită
albinism. Albinismul este însoţit de anumite defecte de vedere cum ar fi ambliopia, nistagmusul
şi fotofobia.
Supraexpunerea la UVA induce cataracta şi îmbătrânirea precoce a pielii. De asemenea,
afectează grav sistemul imunitar. Majoritatea lămpilor utilizate în fototerapie, precum şi cele
folosite pentru bronzare artificială sunt lămpi UVA.
Efectele fotochimice ale radiaţiilor ultraviolete (Fig. 7) pot fi amplificate de unele
medicamente cum ar fi tetraciclina, anticoncepţionalele, antidepresivele, precum şi de unele
componente ale produselor cosmetice. Protecţia faţă de ultraviolete este asigurată de
îmbrăcăminte, materiale din sticlă specială, materiale acrilice şi materiale plastice. Loţiunile de
soare oferă protecţie relativ redusă faţă de ultraviolete.
CURS DE BIOFIZICĂ 135
A Efe ct bactericid
100 D E
Eficacitate relativă (%) F B Erit em
C Efe ct antirahitic
75 D Efect cancerigen
E Pig mentare
B F Efe ct imunosupresor
50
25
A C
(nm)
200 250 300 350 400
136 CU
RS
Fig. 7 Efecte biologice ale radiaţiilor UV în funcţie de lungimea de undă.
Tratamente cu UV (fototerapia)
Fototerapia se utilizează în tratamentul unor afecţiuni ale pielii (psoriazis,
dermatită atopică, dermatită seboreică, vitiligo). Se expune zona afectată a pielii la
radiaţii ultraviolete (UVA, UVB sau o combinaţie de UVA şi UVB), pentru un
interval de timp bine precizat. În timpul tratamentului, restul suprafeţei pielii este
protejat cu îmbrăcăminte de protecţie; pacientul poartă ochelari de protecţie. În
anumite cazuri, este expus întregul organism, într-o cameră specială de expunere UV.
Pentru expunerea unor suprafeţe reduse ale tegumentului, se folosesc dispozitive de
UV de dimensiuni mici, care sunt manevrate manual.
În prezent, mecanismul de acţiune al ultravioletelor în cazurile de psoriazis nu
este bine definit. Se presupune că radiaţiile UV distrug celulele anormale sau
modifică reacţiile sistemului imunitar care se produc în piele. Intensitatea radiaţiei
UV utilizate depinde de condiţia tegumentului. Iniţial se expune o arie mică a pielii şi
se determină doza minimă pentru eritem (DME), adică doza minimă de radiaţie UV
care determină înroşirea pielii după 24 h. Tratamentul propriu-zis constă într-un ciclu
de 3-5 expuneri săptămânal pe o perioadă de 1-2 sau mai multe luni. Doza de pornire
este DME. La primele şedinţe de fototerapie timpul de expunere este scurt, fiind apoi
crescut progresiv pe parcursul tratamentului. În general se obţin rezultate bune
(ameliorare substanţială sau vindecare) după 18-30 expuneri. Ulterior se efectuează
tratamente mai scurte în mod periodic, pentru a preveni recurenţa.
Fototerapia poate fi utilizată ca atare sau împreună cu aplicarea unui agent
topic fotosensibilizator, care, în urma absorbţiei radiaţiilor UV, contribuie la limitarea
metabolismului anormal al pielii.
În general tratamentul UV se completează cu administrare de agenţi sistemici,
cum ar fi unele medicamente (metotrexat pentru cazuri severe de psoriazis) sau
derivaţi ai vitaminei A, numiţi retinoizi. În schemele terapeutice recente se foloseşte
ca sursă UVB o sursă laser în pulsuri.
ELEMENTE DE RADIOBIOLOGIE1
1
Acest capitol se bazează parţial pe cartea “Proliferare celulară versus apoptoză. Mecanisme şi particularităţi în
condiţii de stres genotoxic sau oxidative”, Irina Băran, 2014
138 CU
RS
2. Noţiuni de radioactivitate
Radioactivitatea este proprietatea unor nuclee instabile de a emite radiaţii în mod
spontan. În mod generic, spunem că un nucleu radioactiv se dezintegrează şi emite radiaţie (sau
că se produce o dezintegrare radioactivă).
Radioactivitatea poate fi artificială sau naturală.
Radioactivitatea naturală se datorează prezenţei elementelor radioactive naturale.
Atomii acestor elemente au nuclee instabile, care după un timp emit radiaţie, trecând astfel într-o
stare stabilă.
Radioactivitatea artificială este indusă prin bombardarea unor nuclee stabile cu fotoni,
neutroni sau particule încărcate. In acest fel nucleele bombardate devin radioactive.
Radiaţia poate fi:
- naturală, cuprinzând:
radiaţii cosmice
radiaţii terestre (produse de elemente radioactive naturale din roci, sol, radonul din
structura clădirilor etc.)
- artificială, cuprinzând radiaţii produse în diferite proceduri medicale (radioterapie,
radiodiagnoză), în laboratoare (de cercetare sau în sistemul de educaţie), radiaţii produse de
diferite dispozitive electrocasnice (televizoare, ceasuri luminoase, detectoare de fum etc.), sau
radiaţii datorate unor accidente nucleare, poluării etc.
Fondul natural de radiaţii reprezintă totalitatea radiaţiilor ionizante naturale prezente în
atmosferă.
Pentru a putea estima efectele unei surse radioactive, trebuie să cunoaştem activitatea
sursei, timpul său de înjumătăţire, precum şi tipul şi energia radiaţiei emise de sursă.
Efectele biologice (moarte celulară, mutaţii, inducerea cancerului etc.) ale radiaţiilor
ionizante depind de sistemul biologic, de tipul radiaţiei, de doza de radiaţie şi de debitul dozei.
În general, se determină efectul biologic în funcţie de doza absorbită.
5. Tipuri de doze
Doza absorbită este cantitatea de energie absorbită de unitatea de masă din materialul
iradiat.
D = Eabs/m
Eabs = energia absorbită de material;
m = masa materialului.
Unitatea de măsură este 1 Gy (Gray) = 1 J/kg.
Spunem că doza absorbită este de 1 Gy atunci când 1 kg de material absoarbe energie de 1 J.
O unitate tolerată este rad-ul: 1 rad = 0,01 Gy.
În general, dacă nu este specificat tipul dozei, prin doză se înţelege doza absorbită.
Debitul dozei (d) reprezintă rata cu care 1 kg din materialul iradiat absoarbe energie:
d = D/t
D = doza absorbită în timpul t.
Debitul dozei se măsoară în Gy/s sau rad/s.
80
40
20 CURBA BRAGG
0
0 10 20 30
adâncimea în ţesut (cm)
Fig. 1 Dependenţa dozei absorbite de profunzimea în ţesut pentru diferite tipuri de radiaţii ionizante.
144 CU
RS
Pentru iradierea selectivă a tumorilor aflate în profunzime, se folosesc fascicule multiple,
care sunt focalizate pe centrul tumorii. Totuşi, în numeroase cazuri în care tumorile se află în
apropierea unor organe vitale nu se poate aplica radioterapia cu radiaţii electromagnetice. De
asemenea, anumite tumori (ale pancreasului, ficatului şi glandei parotide) sunt rezistente la
radioterapia convenţională cu fotoni. În toate aceste cazuri este recomandată hadroterapia.
Pentru fasciculele monoenergetice de ioni grei (în care toţi ionii au aceeaşi energie),
adâncimea de penetrare în ţesut depinde de energia ionilor. În acest fel, prin reglarea precisă a
parametrilor fasciculului (diametrul şi intensitatea fasciculului, energia şi tipul ionilor) doza
letală va fi aplicată exact în volumul tumorii. În plus, doza absorbită de ţesutul sănătos traversat
de ioni este foarte mică datorită modului de absorbţie a energiei (curba Bragg), iar radiaţia nu
este împrăştiată în ţesutul sănătos ca în cazul radiaţiilor X.
Dacă se urmăreşte administrarea unei doze uniforme în volumul tumorii, se folosesc
fascicule modulate de ioni. Acestea conţin ioni având energii diferite, calculate astfel încât
maximul Bragg corespunzător fiecărei energii să se producă în interiorul tumorii. Doza absorbită
va fi maximă pe o distanţă de câţiva cm, în funcţie de mărimea tumorii.
Rezoluţia spaţială a tratamentului prin hadroterapie este de până la 1 mm. Deoarece
poate fi iradiată cu mare precizie orice parte a tumorii, tratamentul cu ioni grei este un tratament
conformal de mare acurateţe (fasciculele de ioni sunt configurate astfel încât volumul iradiat să
urmărească cu fidelitate forma tumorii).
Dozele administrate sunt fracţionate: 4-5 şedinţe de hadroterapie în 8-10 zile, totalizând o
doză cuprinsă între cca. 45 şi 85 Gy, în funcţie de caz. O singură iradiere durează în jur de 1
min.
În apă şi ţesut, radiaţia are o putere de ionizare foarte mare (de 1000 de ori mai mare
decât radiaţia ), ceea ce determină un parcurs foarte mic (de 100 de ori mai mic decât al
radiaţiei şi de 10000 de ori mai mic decât al radiaţiei ). Parcursul radiaţiei este de
aproximativ 2-8 cm în aer şi de 0,05 mm în aluminiu. În cazul iradierii externe a organismului,
particulele nu depăşesc stratul bazal al epidermei. În plus, îmbrăcămintea oferă protecţie totală
faţă de radiaţia . Radiaţiile sunt periculoase numai dacă iradierea este internă.
6.4 Interacţia neutronilor cu materia
Neavând sarcină electrică, neutronii nu interacţionează cu electronii. De aceea, neutronii
nu produc ionizări în mod direct, ci producând alte radiaţii în urma unor reacţii nucleare (prin
interacţii ale neutronilor cu nucleele atomice).
Neutronii cu energie mică, în jur de kT 0,025 keV, se numesc neutroni termici. Aceştia
pot induce reacţii nucleare prin care neutronul este absorbit de nucleu, care devine radioactiv, şi
anume:
- reacţii nucleare de rearanjare (n, ), cu emisie de particule ;
- reacţii de captură radiativă (n, ): neutronul termic este absorbit de nucleu, care devine
radioactiv şi emite radiaţie .
Neutronii rapizi sunt în general recunoscuţi, alături de radiaţia , ca cea mai periculoasă
radiaţie ionizantă. Există patru moduri de interacţiune a neutronilor rapizi cu materia:
1) reacţii nucleare cu emisie de particule încărcate, de tipul (n, p) sau (n, );
2) fisiune nucleară: în urma ciocnirii unui neutron cu un nucleu, nucleul se poate scinda în două
fragmente plus cel puţin doi neutroni;
3) ciocniri elastice cu nucleele: în urma ciocnirii unui neutron cu un nucleu, neutronul cedează o
parte din energie nucleului. Transferul de energie este maxim în ciocnirea neutron–proton
(ciocnirea cu nucleul de hidrogen). Cu cât masa nucleului este mai mare, cu atât energia
transferată este mai mică. În urma unei ciocniri elastice cu un neutron rapid, nucleul se comportă
145 CU
RS
ca o particulă grea încărcată electric având energie cinetică şi care produce mai departe ionizări
în materie.
4) ciocniri inelastice cu nucleele: neutronul intră în nucleu, care emite apoi un neutron cu
energie mai mică. Nucleul rezultat se află într-o stare excitată şi emite radiaţie . La energii mari
ale neutronilor pot fi emişi doi sau trei neutroni.
În radioprotecţia faţă de iradierea cu neutroni se folosesc trei ecrane:
1) un ecran pentru încetinirea neutronilor, constituit dintr-un material pe bază de hidrogen (apă,
apă grea, grafit, parafină);
2) un ecran de cadmiu pentru captura neutronilor termici prin reacţia de captură radiativă:
113
Cd + n 114Cd +
Într-un material pe bază de cadmiu, distanţa medie parcursă de un neutron termic înainte de a fi
capturat este mică.
3) un ecran de plumb sau fier pentru absorbţia radiaţiei emise de Cd.
În sistemele biologice, cele mai nocive reacţii nucleare induse de iradierea cu neutroni sunt cele
cu nucleele de hidrogen, carbon şi oxigen, în urma cărora sunt emise particule . De asemenea,
o pondere mare o au şi ciocnirile elastice şi inelastice cu nucleele H, C şi O.
Produşii moleculari ai acestor reacţii şi radicalii liberi care nu au reacţionat difuzează în mediu,
unde pot reacţiona cu alte molecule.
În prezenţa oxigenului, efectele radiaţiilor sunt mai severe. Acest efect al oxigenului este
important în radioterapie, deoarece tumorile cu aport sanguin redus sunt mai radiorezistente.
În prezenţa oxigenului se poate produce radicalul hidroperoxid HO2 prin reacţia:
O2 + H HO2
Hidroperoxizii produşi pot participa la reacţii de combinare între radicali:
HO2 + HO2 H2O2 + O2
HO2 + H H2O2
HO2 şi H2O2 sunt cei mai nocivi produşi ai radiaţiilor, având un timp de viaţă lung, dar ei sunt
produşi în cantităţi mici.
Radicalii liberi produşi care difuzează în celulă pot produce leziuni în proteine, lipide,
ADN. De exemplu, radicalii liberi afectează grupările proteice SH, care sunt grupările active a
numeroase enzime.
Produşii radiolizei apei pot reacţiona cu molecule organice (RH), ducând la formarea de
radicali liberi organici (R):
RH + OH R + H2O
În prezenţa oxigenului aceştia pot produce radicalii liberi peroxizi (RO2):
R + O2 RO2
Peroxizii pot reacţiona cu alte molecule organice, producând radicali liberi organici:
RO2+ R’H RO2H + R’
Peroxizii persistă mult timp după iradiere. Ei induc numeroase efecte întârziate ale iradierii
(mutaţii, instabilitate genomică, oncogeneză etc.), care se manifestă după mult timp de la
iradiere (luni-ani).
Radicalii liberi organici pot fi produşi şi prin scindarea unor molecule organice excitate
de radiaţie.
R–R’* R + R’
De asemenea moleculele organice excitate pot suferi o ruptură sau pot transfera energia de
excitare unei alte molecule:
M1* + M2 M1 + M2*
Vorbim despre efectele directe ale radiaţiilor ionizante atunci când ne referim la
excitările şi ionizările produse de radiaţia primară sau radiaţiile secundare (fotoni, particule
încărcate sau neutroni emişi în urma interacţiilor radiaţiei primare cu atomii şi moleculele din
substanţă).
147 CU
RS
Efectele indirecte ale radiaţiilor ionizante sunt excitările şi ionizările produse de
radicalii liberi care se formează prin reacţii radiochimice.
De exemplu, timpul de înjumătăţire al unei surse de plutoniu este de de 390000 ani, iar
timpul biologic de înjumătăţire este de cca. 100 ani în ţesutul osos. Rezultă că timpul efectiv de
înjumătăţire al plutoniului în organism este de cca. 100 ani.
De asemenea, sursele de radiu şi stronţiu au timpi efectivi de înjumătăţire foarte mari în
organism, de cca. 103 - 104 ani.
Iradierea totală a organismului este dată de contribuţia sumată a iradierii interne şi
externe a organismului.
În cazul în care este iradiat întregul organism, iradierea este globală.
Doza maximă admisibilă (DMA) reprezintă doza efectivă de radiaţii pe care o poate
primi un om într-un an fără a suferi o leziune observabilă (fără a se ţine cont de efectele genetice
ale iradierii).
DMA este stabilită anual de CIPR (Comisia Internaţională pentru Protecţia împotriva
Radiaţiilor).
DMA este determinată de sensibilitatea maximă a ţesuturilor.
DMA este de cca. 5 mSv/an, fiind determinată de radiosensibilitatea gonadelor şi a
măduvei hematogene.
Ţesutul tiroidian şi ţesutul osos admit o doză biologică maximă de 30 mSv/an fără a
suferi o leziune observabilă.
Doza efectivă corespunzătoare fondului natural de radiaţii este de cca. 1,5 mSv/an, iar
cea corespunzătoare fondului artificial de radiaţii este de cca. 0,3 mSv/an.
Într-o radiografie abdominală doza efectivă administrată este de 6,2 mSv, iar într-o
radiografie pulmonară de 0,3 mSv.
O doză efectivă de 6 Sv induce moartea într-o lună de la iradiere.
149
1. Termoterapia1
Prin termoterapie se produce încălzirea locală sau generală a organismului. În general,
termoterapia urmăreşte limitarea temperaturilor în zona afectată la valori < 60-65°C
(la temperaturi mai mari apare coagularea). O astfel de încălzire poate avea mai multe efecte
terapeutice, legate în special de dilatarea vaselor de sânge şi creşterea debitului sanguin, de
relaxarea musculară şi creşterea mobilităţii articulare, de reducerea senzaţiei dureroase, precum
şi de faptul că dezvoltarea tumorilor canceroase este inhibată la temperaturi mai mari de 43°C.
Încălzirea locală se poate face prin: conducţie, radiaţie, curenţi electrici, unde electromagnetice
150
şi ultrasunete.
- Prin conducţie are loc un transfer de căldură de la diferite obiecte calde (pernă electrică, pilotă
cu apă caldă, băi calde etc.) prin contactul dintre acestea şi zona ce trebuie încălzită.
- Încălzirea prin radiaţie se realizează prin expunere la soare sau la raze infraroşii. Radiaţiile
infraroşii pot fi produse de surse laser sau de lămpi de infraroşii (acestea sunt lămpi cu filament
incandescent care au un filtru de infraroşii ce lasă să treacă radiaţii cu lungimi de undă cuprinse
între 0,8 şi 40 m). Radiaţiile infraroşii pot pătrunde în piele până la adâncimi 3 mm;
- Procedeele terapeutice bazate pe curenţi electrici, unde electromagnetice şi ultrasunete poartă
numele de diatermie şi acestea pot fi de mai multe feluri:
a) diatermia cu unde lungi (D'Arsonvalizare) - se realizează prin aplicarea unor curenţi
electrici alternativi cu frecvenţa de 10 kHz prin intermediul unor electrozi aflaţi în contact cu
pielea;
b) în diatermia cu unde scurte se aplică ţesutului prin plăci metalice situate la o oarecare
distanţă (capacitiv) sau inductiv prin bobine (magnetodiaflux) utilizându-se unde
electromagnetice cu frecvenţa de 30 MHz. În acest caz se folosesc dispozitive care nu intră în
contact cu pielea;
c) diatermie cu microunde având frecvenţe între 3 şi 30 GHz. Apa, grăsimile şi
zaharurile absorb energia microundelor prin încălzire dielectrică: moleculele acestor substanţe
(în special apa) se comportă ca dipoli electrici, care se orientează în câmpul electric alternativ
produs de microunde în ţesut, fiind antrenate în mişcări de rotaţie. În timpul acestor mişcări
moleculele de apă ciocnesc alte molecule cu dipol slab, cedându-le energie. Efectul global este
încălzirea ţesutului. Contribuţia dominantă la încălzirea dielectrică a ţesutului o are apa,
deoarece lipidele şi zaharurile au un dipol mai slab decât apa. Încălzirea la 43°C pentru 60 de
minute, sau la 44°C pentru 30 min. are efect tumoricid. Tumorile au în general o structură
puternic neomogenă, sunt mai puternic vascularizate şi reţin mai mult timp căldura în interior,
comparativ cu ţesutul normal, ceea ce creşte eficienţa acestei metode terapeutice, în special în
cazul cancerului mamar, unde tumorile au un conţinut mult mai mare de apă decât ţesutul
normal, deci absorb mai multă căldură. Microundele se administrează fie plasând doi aplicatori
cu ghid de undă la o distanţă de câţiva centimetri de piele (fără contact direct), fie printr-un
cateter cu ghid de undă introdus în tumoră. În timpul procedurii temperatura este monitorizată
1
Acest paragraf se bazează parţial, respectiv punctele a), b), d), pe Cursul de Biofizică Medicală, D. Eremia, 1993
151
continuu cu ajutorul unor senzori termici aplicaţi pe piele şi cu o sondă cu senzor termic la
nivelul tumorii;
d) în diatermia cu ultrasunete se folosesc fascicule ultrasonore cu frecvenţe de ordinul
MHz. Efectul de încălzire locală are la bază capacitatea diferită de absorbţie a ultrasunetelor de
către ţesuturi iar prin direcţionarea fasciculului ultrasonor se obţine o bună localizare a încălzirii
acestora.
2. Crioterapia
Prin crioterapie se produc scăderi semnificative ale temperaturii în ţesut („cryo” = frig).
Efectele sunt legate de scăderea metabolismului celular (prin încetinirea reacţiilor enzimatice),
de creşterea viabilităţii celulare, reducerea durerii şi spasmelor, reducerea inflamaţiilor,
promovarea vasoconstricţiei şi reducerea cerinţei de oxigen, precum şi de scăderea vitezei de
transmitere a impulsului nervos.
În criochirurgie se aplică, localizat, temperaturi extrem de scăzute, folosind dioxid de
carbon solid (zăpadă carbonică) la -79ºC sau azot lichid (-196ºC), cu scopul de a distruge celule
anormale sau ţesuturi bolnave. La aceste temperaturi citosolul se cristalizează prin formarea
cristalelor de gheaţă, iar vasele de sânge care irigă ţesutul îngheaţă. Criochirurgia este o opţiune
viabilă în special pentru unele afecţiuni dermatologice, precum şi pentru diferite forme de cancer
hepatic, de prostată sau de piele, în cazuri fără metastaze şi cu tumori bine localizate, sau chiar
pentru distrugerea selectivă a unor nuclee din talamus, ca în cazul tratamentului maladiei
Parkinson. Prezintă avantajele sângerărilor reduse (efect hemostatic), ale durerii minime şi
cicatricilor uşoare.
În terapia cu criocameră (sau terapie crioextremă) pacientul este expus într-o cameră
criogenă (răcită cu azot lichid) la temperatura de -110ºC pentru un interval scurt de timp (până la
3 minute).
În crioterapia uzuală se aplică pe piele apă rece sau gheaţă (pungi sau comprese),
criopachete cu gel, sau criosprayuri cu flux de vapori. Efectul fiziologic este vasoconstricţia
imediată, reducerea metabolismului local, reducerea durerii şi inflamaţiei.
Fără a se încadra strict în crioterapie, tehnicile de realizare a hipotermiei controlate
(coborârea temperaturii corpului cu câteva grade) permit efectuarea unor operaţii pe cord în
condiţiile unei mai mici crize de timp.
De asemenea, obţinerea temperaturilor extreme este foarte importantă în transplantul de
organ, deoarece asigură menţinerea funcţionalităţii organului izolat timp de 2 zile. Este astfel
posibilă conservarea unor ţesuturi sau organe (spermă, măduvă osoasă etc.) în vederea
revitalizării şi/sau utilizării lor ulterioare.
3. Electroterapia2
Procedeele electroterapeutice se bazează utilizarea electricităţii sub diferite forme:
- curent electric continuu sau galvanizare
- curent electric alternativ sau faradizare
- pulsuri de curent
Curentul continuu de joasă tensiune utilizat în electroterapie poate fi generat de baterii,
acumulatori sau redresori de curent alternativ. Electrozii, respectiv anodul şi catodul, se aplică
ţesuturilor şi, astfel, prin acestea va circula un curent electric. Curenţii care circulă prin ţesuturi,
numiţi curenţi electrotonici, se dispersează sub formă de curenţi din ce în ce mai slabi, pe
măsură ce se depărtează de linia dreaptă ce uneşte electrozii. Curenţii din vecinătatea anodului se
numesc curenţi anelectrotonici şi au proprietatea de a micşora excitabilitatea ţesuturilor iar cei
din apropierea catodului, se numesc curenţi catelectrotonici şi au proprietatea de a mări
2
Acest paragraf se bazează parţial pe Cursul de Biofizică Medicală, D. Eremia, 1993
152
4. Ultrasonoterapia
Ultrasunetele (US) sunt unde acustice, produse prin vibraţiile mecanice ale unui mediu
elastic, cu frecvenţa mai mare de 20 kHz. Undele acustice sunt fluctuaţii ale presiunii în mediul
respectiv, fluctuaţii care se propagă sub forma unor unde. Acestea determină vibraţii ale
particulelor mediului care suferă deplasări pe direcţia de propagare a undei acustice. Spunem că
undele acustice sunt unde longitudinale.
Producerea ultrasunetelor cu ajutorul unor traductoare mecanoelectrice
Traductoarele mecanoelectrice sunt dispozitive care transformă o mărime mecanică într-
o mărime electrică sau în variaţia unei mărimi electrice care poate apoi să fie înregistrată. Dintre
traductoarele mecanoelectrice fac parte traductoarele piezoelectrice care operează cu variaţii ale
153
unor mărimi mecanice şi fac parte din categoria traductoarelor dinamice. Asemenea traductoare
piezoelectrice pot fi utilizate atât pentru producerea cât şi pentru recepţionarea ultrasunetelor. În
cazul producerii ultrasunetelor o variaţie a unei mărimi electrice este tradusă în variaţia unei
mărimi mecanice, pe când în cazul recepţionării lor are loc procesul invers şi anume o mărime
mecanică este tradusă într-o mărime electrică. Funcţionarea traductoarelor piezoelectrice are la
bază proprietatea unor materiale naturale sau sintetice, cum ar fi unele cristale naturale (cuarţ,
sarea Seignette, titanatul de Pb etc.) sau sintetice (ex. niobatul de Li), unele materiale ceramice,
unii polimeri etc., de a efectua o traducere mecanoelectrică. Cristalele piezoelectrice, tăiate după
anumite plane geometrice, au capacitatea de a separa pe feţele opuse sarcini electrice în urma
unor solicitări mecanice exterioare (Fig. 1). Undele acustice din domeniul ultrasunetelor
determină vibraţii mecanice ale mediului piezoelectric şi acesta efectuează traducerea
mecanoelectrică, astfel încât pe feţele opuse ale cristalului se vor separa alternativ sarcini de
semn opus. Prin plasarea unor electrozi pe aceste feţe şi inserarea acestora într-un circuit
electric, se poate culege o tensiune electrică alternativă. Alternanţele sunt determinate de
frecvenţa ultrasunetelor, iar mărimea tensiunii electrice este direct proporţională cu presiunea
aplicată. Astfel se pot recepţiona ultrasunetele.
Fig. 1 Traductor piezoelectric: anumite cristale (cuarţ, sarea Seignette etc.), tăiate după anumite plane geometrice,
separă pe feţele opuse sarcini electrice în urma unor solicitări mecanice exterioare. Prin plasarea unor electrozi pe
cele două feţe opuse ale cristalului se poate culege o tensiune electrică alternativă, a cărei mărime este direct
proporţională cu presiunea aplicată.
parte din undele acustice incidente părăsesc direcţia de propagare a ultrasunetelor incidente (ies
din fascicul), fiind împrăştiate în ţesut. Reducerea intensităţii undelor acustice prin absorbţie şi
împrăştiere determină atenuarea fasciculului de ultrasunete.
Intensitatea unei unde acustice (I) reprezintă energia transportată de undă în unitatea de
timp prin unitatea de suprafaţă perpendiculară pe direcţia de propagare. Cu cât distanţa parcursă
în mediu este mai mare, cu atât intensitatea fasciculului va fi mai mică. Datorită proceselor de
atenuare, intensitatea fasciculului scade exponenţial cu distanţa în material, conform legii lui
Lambert:
I = I 0e µx
5. Radioterapia
Radioterapia reprezintă tratamentul diferitelor afecţiuni, în special cancer, prin utilizarea
radiaţiilor ionizante. Pentru fiecare caz în parte trebuie stabilit tratamentul optim (tipul de
radiaţie, modul de iradiere – internă/externă); de asemenea trebuie calculate cu precizie doza de
radiaţie necesară şi rata (debitul) dozei, intensitatea şi diametrul fasciculului de radiaţii, astfel
încât tumora să primească doza corectă de radiaţii, iar ţesutul sănătos să fie iradiat cu doza
minimă posibil.
Radioterapia poate fi:
- teleradioterapie – iradierea este externă; se utilizează surse exterioare de radiaţii, care produc
fascicule ce pot fi proiectate din multiple direcţii asupra tumorii, în funcţie de localizarea
acesteia.
- brahiradioterapie – iradierea este internă; se introduce o sursă de radiaţii în interiorul
organismului.
Tipuri de radiaţii folosite în radioterapie:
Radiaţiile β pot fi produse prin:
dezintegrarea β (a neutronului sau protonului), care poate fi:
Exemplu: în hipertiroidism, tiroida produce în exces hormonul tiroxină, care conţine iod.
Pacientul ingerează o doză de iod radioactiv (131I, timp de viaţă de 8 zile) care este
preluat de tiroidă. Nucleele 131I se dezintegrează β-, iar radiaţiile β- produse distrug o
parte din celulele tiroidiene care secretă tiroxina.
Exemplu: 22
Na 22Ne + e+ + ν
formare de perechi electron-pozitron (numai sub acţiunea unei radiaţii γ cu energia ≥ 1,04
MeV);
156
60 (1,332 MeV)
28 Ni
Fig. 2 Dezintegrarea radioactivă a nucleului de cobalt. Liniile orizontale reprezintă nivelele energetice ale celor
două nuclee atomice (de cobalt şi respectiv de nichel). Pentru nucleul de nichel, nivelul inferior reprezintă nivelul
energetic fundamental, iar nivelele superioare sunt nivelele energetice ale celor două stări excitate ale nucleului.
Săgeţile indică dezintegrări radioactive cu emisie de radiaţie β- şi respectiv radiaţie γ.
60
În cobaltoterapie se folosesc surse de cobalt
27 Co foarte intense, având o activitate
radioactivă de 370 TBq (terabecquereli), adică 3,7·10 dezintegrări/secundă sau 10000 Curie.
14
Fig. 4 Schema unui contor Geiger-Müller cu numărător incorporat (adaptat după Wikipedia):
Detectorul Geiger- Müller este un tub cilindric ce conţine un amestec de gaze la presiune
scăzută, izolat de aerul atmosferic. Peretele cilindrului este metalic sau metalizat şi constituie
electrodul negativ. Un fir metalic central alcătuieşte electrodul pozitiv. Între cei doi electrozi se
stabileşte o diferenţă de potenţial de ordinul sutelor de V. În urma pătrunderii în cilindru a unei
radiaţii ionizante, corpusculare (radiaţie sau ) sau electromagnetice (foton X sau ) se vor
forma perechi de ioni, rezultaţi din smulgerea unui electron aparţinând unei molecule de gaz.
Ionii pozitivi formaţi sunt atraşi de catod iar cei negativi de anod şi se mişcă accelerat înspre
aceştia, ciocnind alte molecule de gaz pe care le ionizează. Apar astfel ioni secundari care se
dirijează la rândul lor înspre electrozi, producându-se o ionizare în avalanşă. Prin neutralizarea
unor sarcini electrice de pe cei doi electrozi de către ionii de semn contrar se produce o cădere
bruscă de tensiune în circuit. Această cădere de tensiune poate fi înregistrată ca un puls de
tensiune sesizat de către un numărător de impulsuri, iar acesta poate afişa rezultatul pe un ecran.
159
Pulsul de tensiune poate fi şi auzit printr-un poicnet într-un difuzor (Fig. 4). Numărul de
impulsuri este proporţional cu doza incidentă.
Detectoarele cu scintilaţie sunt, în momentul de faţă, cel mai frecvent utilizate
detectoare de radiaţii în aparatura biomedicală. În tehnicile imagistice ele sunt întâlnite, de
exemplu, la instalaţiile de tomografie computerizată cu radiaţii X sau cu emisie de pozitroni ori
la cele scintigrafice. Părţile principale ale unui detector cu scintilaţie sunt cristalul scintilator şi
fotomultiplicatorul (Fig. 5). Cristalul scintilator este, de regulă, un cristal de NaI, activat cu
thaliu. În urma interacţiunii radiaţiei incidente cu cristalul, în acesta au loc ionizări şi excitări ale
moleculelor sale. Moleculele excitate revin pe nivelul fundamental emiţând radiaţii luminoase
(scintilaţii) vizibile sau în UV apropiat. Radiaţiile luminoase cad pe fotocatodul
fotomultiplicatorului şi acesta emite electroni care sunt amplificaţi de către dinode. La anod se
culege un puls electric care poate fi înregistrat într-un dispozitiv electronic (numărător de
impulsuri).
Există şi scintilatori lichizi care se folosesc în cazul în care proba urmărită este un
emiţător de radiaţii foarte slab. În acest caz, proba se amestecă cu lichidul de scintilaţie şi
nivelul luminescenţei acestuia va fi proporţional cu numărul de radiaţii (electroni) emise.
Pentru supravegherea expunerii la radiaţii a personalului din unităţile nucleare, se
utilizează dozimetre bazate fie pe gradul voalării unui film fotografic (fotodozimetru), fie pe
apropierea foiţelor unui electroscop miniaturizat, încărcat în prealabil (stilodozimetru), ambele
dozimetre fiind la purtător şi cercetate periodic pentru notarea dozei de radiaţie încasate.
6. Fototerapia
Expunerea corpului la radiaţii electromagnetice neionizante (radiaţii infraroşii, vizibile şi
ultraviolete), efectuată în aşa numitele băi de soare sau băi de lumină (naturală sau artificială)
are efecte terapeutice în unele afecţiuni generale (de exemplu afecţiuni dermatologice). În cursul
de fotobiologie au fost menţionate câteva efecte biologice ale radiaţiilor ultraviolete care
justifică utilizarea procedurilor terapeutice de expunere la aceste radiaţii, fie ca atare, fie după o
administrare prealabilă de substanţe fotosensibilizatoare.
160
Fig. 6 Componentele unei surse laser: 1. mediu laser activ; 2. sursa de pompaj; 3. oglindă; 4. oglindă parţială; 5.
fascicul laser emergent. (Adaptare după Wikimedia Commons)
Mediul laser activ (Fig. 6) este un material care produce amplificare optică. Aceasta se
realizează prin emisie stimulată: o mare parte din moleculele sau atomii materialului sunt
stimulaţi de sursa de pompaj să treacă pe un nivel superior de energie, E 1. După un anumit timp,
atomii aflaţi în stare excitată încep să emită fotoni, revenind astfel pe nivelul energetic E 0
corespunzător stării fundamentale. Acest proces se numeşte emisie spontană. Oricare din aceşti
fotoni emişi spontan poate să fie absorbit de un atom rămas în stare fundamentală sau poate să
perturbe un atom excitat, fără însă a-i ceda energie. Deoarece o stare excitată este instabilă,
această perturbare determină tranziţia atomului excitat la starea fundamentală (care este stabilă),
prin emisia unui foton având aceeaşi energie, direcţie şi fază ca şi fotonul incident. Aceasta este
emisia stimulată.
O parte din fotonii emişi de atomii materialului sunt reflectaţi în interiorul mediului laser
activ printr-un sistem special de oglinzi, putând stimula emisia altor fotoni. În acest fel, sunt
emişi din ce în ce mai mulţi fotoni, realizându-se amplificarea optică. Sistemul de oglinzi în
dispozitivul laser formează o cavitate optică rezonantă: geometria sistemului de oglinzi este
realizată astfel încât să fie amplificate undele electromagnetice de o anumită frecvenţă
(frecvenţa de rezonanţă a cavităţii). Acestea se reflectă de mai multe ori pe suprafaţa oglinzilor,
iar prin compunerea tuturor undelor respective în interiorul materialului laser se obţine o undă
rezultantă cu aceeaşi frecvenţă, dar de intensitate mult mai mare. În interiorul cavităţii optice
rezonante, orice undă care se propagă perpendicular pe oglinzi şi are frecvenţa egală cu
frecvenţa de rezonanţă a cavităţii intră în rezonanţă cu cavitatea şi va fi amplificată. Fotonii
emişi spontan au direcţii aleatoare. Undele care nu se propagă paralel cu axa longitudinală a
cavităţii rezonante nu sunt amplificate şi nu sunt transmise în fasciculul laser. De aceea,
fasciculul laser este bine colimat. În plus, datorită proprietăţilor emisiei stimulate, toate undele
electromagnetice emise vor avea acelaşi plan de polarizare, deci radiaţia laser este total
polarizată. Oglinda parţială aflată la ieşire reflectă doar o parte din fotoni (între 20% şi 60%, în
funcţie de tipul laserului). Fotonii reflectaţi revin în mediul laser, contribuind la amplificarea
optică. Restul fotonilor sunt emişi printr-o apertură a oglinzii, formând fasciculul laser.
161
Mediul laser poate produce amplificare optică numai dacă numărul atomilor în stare
excitată (N1) din material este mai mare decât numărul atomilor în stare fundamentală (N 0). În
acest caz spunem că în mediu s-a produs o inversie de populaţii. Dacă însă N0 > N1, rata de
absorbţie este mai mare decât rata de emisie a fotonilor, astfel încât emisia de radiaţie se
atenuează. Dacă N0 = N1, nu există o rată netă de emisie. În acest caz mediul laser se numeşte
optic transparent.
Aceste informatii sunt suplimentare
Exemple de medii laser:
- anumite cristale dopate cu ioni ale pământurilor rare (neodimiu, iterbiu) sau ale unor metale (titan, crom). Cele
mai des utilizate cristale: granat de ytriu şi aluminiu (YAG), ortovanadat de ytriu (YVO4), rubin sau safir;
- sticle dopate cu ioni laser-activi;
- gaze: amestecuri de heliu şi neon (He-Ne), azot, argon, monoxid de carbon, dioxid de carbon sau vapori ale unor
metale (cupru, argint);
- excimeri (dimeri excitaţi): F2, ArF, XeCl, XeF;
- semiconductori: galiu-arseniu (GaAs), indiu-galiu-arseniu (InGaAs), galiu-azot (GaN).
În mediul laser activ inversia populaţiilor se realizează prin pompaj optic. Sursa de
energie pentru pompajul optic poate fi un curent electric (de exemplu în semiconductori sau
gaze, prin descărcări electrice la tensiuni înalte), lumina produsă de lămpi cu descărcare în gaz
sau de un alt laser, reacţii chimice (cazul laserelor chimice, de ex. laserul cu fluorură de
hidrogen: hidrogenul gazos reacţionează cu produşii de combustie ai etilenei în trifluorura de
azot), fisiune nucleară (lasere cu pompaj nuclear), sau fascicule de electroni de mare energie.
Pulsurile laser cu energie mică pot avea o intensitate extrem de mare atunci când
fasciculul este foarte îngust.
Aceste informatii sunt suplimentare
De exemplu, un puls laser cu durata de 0,1 ns, diametrul de 50 µm şi energia de 3 mJ are intensitatea:
3 103 J
I = 1,5 1016 W/m2
π (25 106 m)2 0,1 10 9 s
În astfel de cazuri se produce o undă de şoc mecanic, datorată numărului extrem de mare
de fotoni împrăştiaţi în ţesut, care produc o încălzire rapidă a ţesutului expus radiaţiei laser. Apar
întinderi elastice ale ţesutului şi procese de recul în urma ejecţiei materialului distrus. Toate
aceste procese generează o undă de şoc care se propagă în ţesut cu viteza sunetului (sau mai
mare), ducând la tensiuni foarte mari şi la distrugerea ţesutului. Datorită acestor efecte sunt
utilizate în tratamentul unor afecţiuni oculare (cataractă, remodelarea corneei), în cardiologie
(angioplastie, aritmii), chirurgie ortopedică (ablaţie de cartilaj sau os – genunchi, articulaţii),
stomatologie (perforaţii în carii, gingii).
Efecte fotochimice
Radiaţiile UV pot rupe unele legături chimice ale moleculelor. Polimerii sunt scindaţi în
molecule mici care, nemaifiind legate, difuzează în ţesut. Laserele cu excimeri produc radiaţie
ultravioletă şi sunt extrem de performante, având o rezoluţie spaţială < 1 µm. Un puls laser de
acest tip poate îndepărta extrem de precis secţiuni foarte fine (0,25 µm de ţesut). Procedurile
medicale care utilizează lasere cu excimeri au o mare acurateţe, acestea fiind utilizate în special
în corectarea defectelor de formă ale corneei.
ANGIOPLASTIA CU LASER
Este o procedură prin care se elimină placa ateromatoasă coronariană într-o zonă în care
placa blochează fluxul sanguin. Un cateter cu laser este introdus în arteră, traversând zona de
blocaj (Fig.7A).
A. B. C.
Fig. 7 A. Cateter cu laser introdus în placa de aterom pentru vaporizarea acesteia şi repermeabilizarea vasului.
B. Cateter cu un balon (dezumflat) introdus în lumenul redeschis. C. Restabilirea geometriei vasului prin
umflarea balonului (şi eventual montarea unei plase-stent pentru menţinerea acestuia. (Adaptare după
http://www.globalpatientservice.com/ (A) şi Wikimedia Commons (B,C))
Cateterul conţine fibre optice multiple, subţiri şi foarte flexibile, care facilitează
înaintarea şi poziţionarea laserului în arteră. Se utilizează un laser excimer care emite radiaţie
UV, în regim de pulsuri. Pulsurile laser vaporizează placa în straturi succesive, pulverizând-o în
molecule şi fragmente microscopice. Pe durata operării laserului, cateterul înaintează în zona de
blocaj, redeschizând artera. Dacă există blocaje multiple, cateterul este poziţionat la următorul
blocaj şi faza de ablaţie se repetă. După eliberarea blocajelor, cateterul este retras. Pentru
evaluarea rezultatelor se efectuează o radiografie cu contrast, în care este vizualizat fluxul
sanguin în arteră (se injectează intravenos o substanţă de contrast, apoi se efectuează radiografia
cu raze X). Dacă este necesar, se procedează la angioplastia cu balon. Se reintroduce un cateter
având ataşat în partea terminală un balon (Fig.7B). În zona afectată a arterei balonul este
CURS DE BIOFIZICĂ 16
expandat, netezind pereţii arteriali şi lărgind artera (Fig.7C). Cateterul este apoi retras şi circulaţia
sanguină restabilită.
LITOTRIPSIA CU LASER
Calculii renali sunt pulverizaţi utilizând pulsuri foarte scurte (250 µs) repetitive de radiaţie
laser în domeniul infraroşu. Radiaţia laser este transmisă printr-un endoscop cu fibre optice, care
se introduce în lumenul obstruat de calcul (ureter, etc.).
1. Introducere
2. Tehnici bazate pe utilizarea radiaţiilor X (Roentgen)
3. Tomografia computerizată cu radiaţii X
4. Tomografia computerizată RMN
5. Tehnici bazate pe utilizarea izotopilor radioactivi
5.a. Scintigrafia
5.b. Tomografia prin emisie de pozitroni
6. Ecografia
7. Termografia
1. Introducere
Imagistica medicală permite obţinerea unor informaţii privind starea organismului, pe
baza interpretării unor imagini ale corpului omenesc obţinute în urma interacţiunii acestuia cu
CURS DE BIOFIZICĂ 16
anumiţi factori fizici sau în urma emisiei unor radiaţii de către acesta. Imaginile respective se
construiesc folosind anumite tehnici speciale, fiecare dintre aceste tehnici având la bază
interacţiunea diferitelor ţesuturi cu un anumit factor fizic. În urma acestei interacţiuni, un
parametru al factorului fizic considerat va fi modificat. Prin convertirea în ultimă instanţă a
valorilor parametrului fizic în diferite grade de luminozitate, în culori sau tonuri de gri asociate
convenţional, se obţine o imagine a zonei investigate.
Dintre factorii fizici frecvent utilizaţi în imagistica medicală se pot menţiona: radiaţiile
X, câmpurile electromagnetice, radiaţiile ionizante emise de radioizotopi, ultrasunetele. Un loc
aparte îl ocupă termografia prin care sunt detectate radiaţiile infraroşii emise de corpul uman,
fără a aplica factori fizici din exteriorul acestuia.
Ca terminologie specifică domeniului, menţionăm pe aceea de tomografie. Imaginile
tomografice sunt imagini care pot fi obţinute cu oricare dintre factorii fizici menţionaţi anterior.
Caracteristica tehnicilor tomografice constă în posibilitatea de a obţine imagini pe secţiuni (gr.
"tomi" – secţiune) ale corpului. Odată aleasă secţiunea anatomică de investigat, aceasta este
împărţită (conceptual) în elemente de volum, numite voxeli (eng. "volume elements"),
vezi Fig.1.
Fig. 1 O secţiune anatomică în trei dimensiuni şi imaginea acesteia în două dimensiuni (adaptare după A.Popescu,
prezentare Curs Imagistică Medicală, UMF C. Davila Bucureşti)
De la fiecare voxel se obţine un semnal care reprezintă răspunsul la factorul fizic utilizat
(de ex. gradul de absorbţie a razelor X, etc). Semnalul provenit de la un voxel este detectat de
către un dispozitiv specific (un traductor), şi prin intermediul unui convertor analogo-digital este
introdus într-un calculator unde se reconstruieşte imaginea pe baza semnalelor primite de la toţi
voxelii. Fiecărui voxel îi corespunde un element de imagine digitală numit pixel (engl. "picture
element"). Elementele finale ale imaginii bidimensionale (2D) sunt ordonate într-o matrice, în
general pătratică, cu n linii şi n coloane, astfel încât numărul total de pixeli va fi n 2. Fiecărui
element (punct al imaginii) i se asociază convenţional o anumită culoare sau nuanţă de gri şi un
164
grad de luminozitate şi este afişată astfel pe un ecran sau tipărită pe un film transparent
radiologic.
Tehnicile imagistice pot furniza informaţii anatomice (topografice) sau funcţionale în
funcţie de factorul fizic utilizat, timpul de achiziţie a datelor şi mecanismele de interacţiune cu
ţesutul respectiv.
De asemenea, foarte important de reţinut este faptul că aceste tehnici pot afecta starea de
sănătate a organismului. Ca principiu general, o tehnică este denumită „invazivă” dacă în timpul
examinării în interiorul corpului este introdus orice obiect material (substanţe, ace, etc) sau orice
tip de energie, indiferent de mod (raze X, unde radio, ultrasunete, etc). O tehnică imagistică
ideală ar trebui să fie non-invazivă şi foarte precisă. Deocamdată tehnicile non-invazive folosite
în prezent oferă o cantitate limitată de informaţii medicale, de aceea clinicienii sunt nevoiţi să
apeleze la tehnici imagistice minimal invazive sau invazive. Cele minimal invazive sunt
preferate (deoarece nu au impact semnificativ asupra sănătăţii dacă sunt folosite corect). Mai jos
sumarizăm gradul de invazivitate al tehnicilor folosite curent în practica medicală.
electronilor incidenţi se transformă în raze X, restul se pierde sub formă de căldură (de aceea
tuburile Coolidge trebuie să fie răcite cu circuite de răcire).
Fig. 2 a) Generarea radiaţiilor X de frânare. b) Schema funcţionării unui tub Coolidge (adaptare după
A.Popescu, prezentare Curs Imagistică Medicală, UMF C.Davila Bucureşti)
Radiaţiile X generate au o mare putere de pătrundere prin ţesuturile vii, astfel încât ele
nu pot fi complet oprite de către un corp, ci doar atenuate (absorbite parţial). Dacă un corp
prezintă regiuni care absorb radiaţiile în mod diferit, intensitatea fasciculului emergent de
radiaţii va diferi în funcţie de zona străbătută. Prin proiectarea pe un ecran fluorescent, zonele
mai dense vor apărea mai întunecate, iar cele mai puţin dense luminoase.
În cazul unui examen radiologic, absorbţia radiaţiilor X depinde de tipul de ţesut pe care
acestea îl întâlnesc. De exemplu, oasele absorb mai puternic decât ţesuturile moi. Dacă se
doreşte să se facă o distincţie între vasele de sânge şi ţesuturile înconjurătoare cu compoziţii
foarte apropiate, este necesară mărirea contrastului imaginii. În acest scop se administrează
pacientului pe cale orală sau se injectează substanţe care conţin elemente cu greutatea atomică
mare (de ex. bariu sau iod) înaintea expunerii la radiaţii X. Se poate apoi urmări mişcarea
agentului de contrast (baritat sau iodat) prin structurile interne ale corpului prin înregistrarea
unei succesiuni de radiografii. Substanţele chimice respective trebuie să îndeplinească simultan
mai multe condiţii: 1) să absoarbă eficient razele X; 2) să fie non-toxice, inerte (să nu
interacţioneze cu nici un mecanism fiziologic cunoscut); 3) să se poată elimina complet şi rapid
din organism.
înregistrări care permit obţinerea câtorva sute de imagini, fiecare imagine fiind reprezentată în
calculator de către o matrice cu un număr de pixeli ce depinde de gradul de rezoluţie dorit.
Tabel 1
Tip de ţesut Unităţi Hounsfield
Aer -1000
Apa 0
esuturi moi, muşchi + 40
Calcului + 100 - + 400
Oase + 1000
Numărul tomografic al apei este, prin definiţie, egal cu 0; ţesuturile care au un coeficient
de atenuare mai mic decât al apei au un număr tomografic negativ, iar cele cu un coeficient de
atenuare mai mare decât al apei au un număr tomografic pozitiv (Tabel 1). Calitatea imaginii
tomografice depinde de o serie de factori care ţin atât de parametrii tehnici ai înregistrării cât şi
de modul de prelucrare digitală. Prin înregistrările realizate în planul unei secţiuni se obţine o
imagine bidimensională. Pentru realizarea unei imagini tridimensionale, pacientul poate fi
CURS DE BIOFIZICĂ 167
translatat, astfel încât, în final sa fie asamblate datele obţinute pentru fiecare secţiune.
Actualmente se folosesc, de asemenea, instalaţii în care înregistrarea se face în spirală, fie prin
deplasarea pacientului în mod continuu, simultan cu iradierea, fie sursa de radiaţii X şi reţeaua
de detectoare se rotesc solidar în jurul corpului pacientului pe o traiectorie elicoidală. În acest
caz se folosesc algoritmi de prelucrare de alt tip decât în cazul înregistrării pe secţiuni distincte.
Fig. 4 a) aranjament aleator al momentelor magnetice nucleare. b) aranjament aliniat indus de un câmp magnetic
exterior. c) Mişcarea de precesie (mişcare circulară în jurul unui punct excentric, similară cu cea a unui titirez).
1 Se mai numeşte şi frecvenţă Larmor (după fizicianul Joseph Larmor care a descris-o).
168
Fig. 5 Pacientul (P) este introdus într-un câmp electromagnetic intens (a). Un puls de unde radio (RF) este trimis
asupra corpului, iar semnalele radio re-emise de către nucleele atomice sunt înregistrate de un detector.
În materialele biologice există o serie de nuclee cu proprietăţi magnetice (1H, 13C, 23Na,
31
P, 39K). Cel mai abundent, însă, este protonul (nucleul de hidrogen) datorită conţinutului mare
în apă al organismului. De aceea, metoda RMN este în clinică una dintre metodele minimal
invazive de elecţie pentru studiul distribuţiei apei în sistemele biologice. De asemenea, metoda
RMN este intens folosită pentru studiul modificării în timp a concentraţiei unor molecule ce
conţin fosfor (ATP, CP, fosfatul anorganic din muşchi).
Din punct de vedere practic al desfăşurării unei înregistrării tomografice RMN, pacientul
este introdus într-o incintă în care se realizează un câmp magnetic uniform şi constant, creat de o
bobină supraconductoare răcită sub temperatura critică (Fig. 5.a).
Asupra regiunii corpului care trebuie investigată se trimite o succesiune de impulsuri de
radiofrecvenţă. Semnalele ecou emise după fiecare puls sunt înregistrate de către un detector
(Fig. 5.b) ca funcţii de timp. Semnalele sunt apoi analizate prin intermediul unei transformări
Fourier, obţinându-se astfel un spectru al acestora.
5.a. Scintigrafia
Prin tehnica scintigrafică se poate evidenţia modul în care o substanţă radioactivă se
incorporează într-un ţesut, incorporare care depinde de caracteristicile fiziologice ale acestui
ţesut şi de eventualele modificări patologice pe care le prezintă. Substanţa radioactivă aleasă
(trasorul radioactiv) trebuie să prezinte specificitate pentru un anumit tip de ţesut (de exemplu
131
I are specificitate pentru ţesutul tiroidian, 201Tl are specificitate pentru ţesutul cardiac, 99Te
pentru ţesutul osos şi pulmonar, etc). De asemenea, izotopii aleşi trebuie să aibă un timp de
înjumătăţire efectivă cât mai mic, astfel încât să se evite iradierea îndelungată a organismului.
Sunt preferaţi în scintigrafie radionuclizi care emit radiaţii gamma de mică energie. Substanţa
radioactivă este administrată pacientului sub forma unor compuşi simpli, uşor disociabili,
înaintea înregistrării scintigrafice. Mărimea înregistrată este activitatea radioactivă care este
direct proporţională cu concentraţia izotopului în ţesut. Pentru a obţine o imagine bidimensională
a distribuţiei izotopului în zona investigată, aceasta va fi scanată punct cu punct de către un
detector de radiaţii.
Într-o instalaţie scintigrafică modernă detectorul de radiaţii este camera gamma (sau
camera de scintilaţie) (Fig. 6). Elementele principale ale camerei gamma sunt: colimatorul,
cristalele de scintilaţie, reţeaua de fotomultiplicatoare, analizorul de impulsuri şi monitorul.
Colimatorul are rolul de a proiecta pe cristalele scintilatoare radiaţiile provenite de la zona
investigată astfel încât să se asigure claritatea imaginii şi o cât mai bună rezoluţie. Colimatorul
este o placă groasă confecţionată dintr-un material care absoarbe puternic radiaţiile gamma,
tungsten sau plumb, străbătută de o reţea de canale cilindrice înguste (sute sau chiar mii), foarte
apropiate unele de celelalte. Canalele sunt separate prin septuri a căror grosime depinde de
energia radiaţei gamma folosite (de la zecimi de mm pentru radiaţii având energii de ordinul keV
până la câţiva mm pentru energii de ordinul MeV). Orientarea canalelor poate fi paralelă,
divergentă sau convergentă şi determină dimensiunile imaginii. Colimatorul permite trecerea
numai a radiaţiilor care sosesc pe direcţia canalelor, fotonii gamma care intră oblic fiind
absorbiţi de către septurile de plumb sau tungsten. Pentru a preîntâmpina riscul ca unii fotoni să
traverseze septurile, cu cât energia pe care o au este mai mare, cu atât grosimea septurilor
trebuie să fie mai mare. Există şi colimatoare cu un singur orificiu („pin-hole camera”), prin care
se obţine o imagine răsturnată a sursei. De obicei, o instalaţie scintigrafică este prevăzută cu mai
multe colimatoare permiţând astfel alegerea celui mai adecvat unei investigaţii date.
Fig. 6 Camera gamma. (Adaptare după Wikipedia) Fig. 7 Exemplu de scintigrafie tiroidiană, care
arată distribuţia concentraţiei de iod în cei doi
lobi tiroidieni (tonurile mai deschise reprezintă o
concentraţie mai mare).
diametral opuse. Fotonii γ sunt detectaţi de către o pereche de detectoare, situate la 180 0 unul
faţă de celălalt, care se rotesc solidar.
Prin intermediul unui circuit de coincidenţă (Fig. 8), se iau în consideraţie numai fotonii
detectaţi simultan (care provin de la aceeaşi reacţie pozitron+electron). După detectarea unui
număr foarte mare (sute de mii) de reacţii de anihilare, se calculează distribuţia emiţătorilor de
pozitroni prin procedee de reconstrucţie tomografică. Se poate reconstitui în acest mod o
imagine bidimensională a distribuţiei izotopului în ţesutul investigat (Fig. 9). Se pot realiza
reconstrucţii nu numai pentru secţiuni transversale, ci şi pentru secţiuni înclinate şi, de
asemenea, se pot realiza reconstrucţii tridimensionale.
Fig. 9 Imagini PET prezentând distribuţia radionulidului în diverse organe în scopul detectării tulburărilor
metabolice, inclusiv cancer. A. Detecţia cancerului pulmonar (2), cerebral (1); B. Distribuţia radionuclidului în (1)
rinichi, (2) vezica urinară (adaptat după https://medical-
dictionary.thefreedictionary.com/positron+emission+tomography)
Aplicaţiile clinice majore ale PET sunt legate în special de detecţia tumorilor cerebrale,
mamare, ale plămânului, inimii şi colonului. De asemenea, această metodă permite urmărirea
activităţii receptorilor unor neurotransmiţători, cum ar fi receptorii de dopamină (Fig. 10),
serotonină sau noradrenalină, datorită rezoluţiei în domeniul de concentraţii nanomolare,
domeniu caracteristic celor mai multe proteine receptoare din organism.
Fig. 10 Imagini PET care arată diferenţele între creierul normal şi creierul persoanelor cu diferite dependenţe.
Aceştia din urmă au mai puţini receptori pentru dopamină: 1- fumător, 2- alcoolic, 3 - obez, 4- cocainoman, 5 -
nefumător, 6,7,8 - normal (adaptat după https://en.wikipedia.org/wiki/File:PET_-_Human_Addiction.jpg).
172
Ea este utilizată în scopul localizării unor suprafeţe de separaţie (S) din interiorul
ţesuturilor (de ex. fascii, capsule fibroase, septuri musculare, pereţi vasculari, etc.) pe baza
măsurării intervalului de timp dintre emisia unui puls ultrasonor (U) şi detecţia ecoului său (E)
produs prin reflexia pulsului pe suprafeţele respective. Prin măsurarea intervalului de timp dintre
pulsul emis şi cel detectat, se poate calcula distanţa dintre sursă şi suprafaţa studiată. Pulsurile
ultrasonore sunt emise şi detectate cu ajutorul unui cristal piezoelectric (CP). Aplicând un curent
electric alternativ pe cele două feţe ale cristalului (tăiate după anumite unghiuri) se obţin unde
ultrasonore. Undele reflectate determină în cristal vibraţii mecanice, în urma cărora între cele
două feţe ale cristalului apare o tensiune alternativă. Un acelaşi cristal este folosit atât pentru
producerea cât şi pentru recepţionarea ultrasunetelor.
Ultrasonografia Doppler. Dacă structura studiată este în repaus, frecvenţa undei
reflectate va fi identică cu aceea a undei emise. Dacă, însă, structura este în mişcare (ex.
hematiile), frecvenţa undei reflectate este mai mare sau mai mică decât cea a undei emise, în
funcţie de faptul că obiectul se îndepărtează sau se apropie de sursă. Modificarea frecvenţei este
funcţie de viteza de deplasare a obiectelor.
7. Termografia
Orice corp aflat la o temperatură mai mare decât 0 K emite energie sub formă de radiaţie
electromagnetică (datorită faptului că sarcinile electrice care compun corpul respectiv se află în
permanentă mişcare de agitaţie termică). Această radiaţie electromagnetică (fotoni cu diverse
lungimi de undă) se mai numeşte şi radiaţie termică. Corpul uman şi obiectele aflate la
temperaturi apropiate de acesta emit radiaţie electromagnetică în domeniul infraroşu.
Temperatura măsurată la suprafaţa corpului uman variază de la un punct la altul, în
special datorită afluxului diferit de sânge în diferitele zone ale ţesutului cutanat şi subcutanat.
Termografia este o tehnică prin care se obţin imagini ale distribuţiei valorilor de temperatură la
suprafaţa corpului şi care se bazează pe captarea radiaţiei infraroşii emise de corp (Fig. 12).
Termograful medical este un dispozitiv destinat să capteze radiaţia infraroşie emisă la un
moment dat de o suprafaţă limitată a corpului. Radiaţia captată este focalizată pe un detector,
după ce traversează în prealabil un filtru optic transparent numai pentru radiaţii infraroşii.
Detectorul (care trebuie menţinut la o temperatură mult mai mică decât cea a mediului ambiant)
produce semnale electrice având amplitudini proporţionale cu temperatura pielii din zona de
172
CURS DE BIOFIZICĂ 173
unde este emisă radiaţia captată. Aceste semnale sunt amplificate şi redate pe ecranul unui
monitor (zonele de temperatură mai mare sunt afişate cu tonalităţi mai deschise de culoare).
Fig. 12 Imagine termografică: A - simetrie termică normală, B - activitate vasculară semnificativă în sânul
drept indicând modificări fibrochistice (preluat din https://www.pinterest.com/michelangelo7/thermography-
scanning/ )
Deoarece termograful detectează diferenţe de temperatură de ordinul a 0,1ºC, este necesar ca,
înainte de termografie, pacientul dezbrăcat să stea nemişcat 20 de minute la o temperatură de
circa 21ºC şi în absenţa curenţilor de aer, pentru ca datele obţinute să aibă semnificaţie
diagnostică. Se pot detecta, printre altele: tulburări de circulaţie sangvină periferică
(vasoconstricţia determină scăderea temperaturii locale, vasodilataţia o creşte), vascularizare
anormală (hipo- sau hiper-), localizarea proceselor inflamatorii (acestea au o temperatură mai
mare decât restul ţesuturilor).