GENUL SALMONELLA.

MICROBIOLOGIA I
DIAGNOSTICUL DE
LABORATOR AL
SALMONELOZELOR

CLASIFICARE
Genul: Salmonella (Daniel Elmer Salmon, veterinar
american, care a descoperit bacteria n 1885)
Specii: Salmonella enterica, Salmonella bongori
(Salmonella subterranea (din 2004))
Subspecii ale speciei S.enterica: enterica,
salamae, arizonae, diarizonae, houtenae, indica
Majoritatea tulpinilor izolate din patologii umane
(99,5%) aparin ss S.enterica enterica cu peste 2500
de serovariante: S. London, S. Enteritidis, S. Typhi, S.
Paratyphi A, S. Paratyphi B, S.Choleraesuis, etc
Salmonellaenterica subspecia enterica serovar Typhi
sau
Salmonella Typhi

CLASIFICAREA KAUFFMANN-WHITE
(conform structurii antigenice)

Ag O 67 varieti antigenice (O1, O2, O3, ...

O65, etc), permite repartizarea salmonelelor n
serogrupe (A, B, C, D, E,...Z, O51,...)
Fracii antigenice majore desemneaz grupa:
O2 grupa A; O4 B, O6 C, O9 D, etc
Fracii antigenice minore O1, O12 - sunt comune
Ag H definete serovariante n cadrul grupei.
Structura flagelinei este determinat de 2 gene
cromozomiale diferite, care se exprim simultan
sau alternativ (variaie de faz, frecvena 10-4)
Ag H faza 1 (specific) Ha; Hb; Hc; Hd; Hg,m
Ag H faza 2 (nespecific) H1,2; H1,5; H1,7;

Serovar monofazic: O1,2,12:Ha (S.Paratyphi A)

Serovar difazic: O1,4,12:HbH1,2 (S.Paratyphi B)

Ag Vi (K), poliozidic, termolabil, prezent la

S.Typhi, S.Paratyphi C, S.Dublin. Este
concentrat la polii bacteriei. Mascheaza Ag
O.
S. Typhi O9,12:Hd:Vi+ / O9,12:Hd:ViConform patogenitii pentru gazd se disting:
I. Salmonele monopatogene (umane)
(S.Typhi, S.Paratyphi A, S.Paratyphi B)
II. Salmonele bipatogene (patogene pentru
om i animale, ubicvitare) - majoritatea

Grupa

Serovarul

Antigenul O Vi

Antigene H
faza 1 faza 2

Paratyphi A

1,2,12

Paratyphi B

1,4,5,12

1,2

Wien

1,4,12,27

l,w

Typhimurium

1,4,5,12

1,2

Derby

1,4,12

f,g

Paratyphi C

6,7

1,5

Virchov

6,7

1,2

Infantis

6,7

1,5

Bovismorbificans

6,8

1,5

Typhi

9,12

Enteritidis

1,9,12

g,m

Panama

1,9,12

l,v

1,5

Dublin

1,9,12

g,p

Gallinarum

1,9,12

London

3,10

l,v

1,6

Anatum

3,10

e,h

1,6

Caractere morfologice
Salmonella bacterii gram-, mobile
peritriche (S.Gallinarum, imobil),
asporogene.

Caractere de cultur

1. Medii de mbogire : Muller, Kauffmann (medii

cu bil, tetrationat), bulion cu selenit de Na
2. Medii DD de izolare a culturii pure: Endo, Levin ,
Ploskirev (colonii S, lactozo-); mediul cu sulfit de
bismut Wilson-Blair (colonii negre)
3. Medii DD de acumulare i difereniere: Olkeniki,
Kligler (glucoza AG, lactoza-, H2S+, ureaza-)
Teste primare: utilizeaz citratul de Na, produc H2S,
MR+, LDC+, mobilitate+, celelalte teste
negative.
Teste secundare: scindeaz glucidele AG, indol-,
ornitindecarboxilaza+, etc
EXCEPIE: S.Typhi citrat-, H2S-, scindeaz glucoza
pn la acid;
S.Paratyphi A H2S+/-, LDC-

FACTORI DE PATOGENITATE
Fimbrii (adeziune)
Capacitatea de a penetra n celule i de
multiplicare intracelular (Macrofage, celule epitel)
Endotoxina
Citotoxine (SLT) inhib sinteza proteic (necroz)
Enterotoxine (LT, ST) activeaz
adenilat/guanilatciclazele membranare (diaree)
Siderofori (captarea Fe)
Ag Vi (antifagocitar, inhib activarea C, rezisten
la activitatea bactericid a serului)

 Majoritatea salmonelelor (98%) sunt

sensibile la bacteriofagul O1. Exist
bacteriofagi cu specificitate de
specie i variant.
Habitat: intestinul omului,
animalelor, psrilor, reptilelor.
Rezistena n mediul extern:
salmonelele rezist la 70C 30 min.,
rezistente la frig i concentraii mari
de sare. Se nmulesc n produse
alimentare la temperatura camerei.

ROLUL SALMONELELOR N PATOLOGIA

UMAN

I.
II.
III.

SALMONELOZE:
Febre tifo-paratifoide (S.Typhi, S.Paratyphi A, B, (C)
Salmoneloze digestive (toxi-infecii alimentare,
gastro-enterite)
Manifestri extra-digestive:
- bacteriemii nontifoidice
- infecii pleuro-pulmonare
- afeciuni osteo-articulare (osteite, osteomielite,
artrite septice, etc)
- infecii nozocomiale
- infecii cardio-vasculare (pericardite, arterite)
- infecii urinare
- infecii abdominale (colecistite, abces al ficatului,
splinei)
- infecii ale SNC (meningite, abces al creierului,
abces epidural, etc)

FEBRELE TIFO-PARATIFOIDE
Agenii cauzali S.Typhi, S.Paratyphi A, B, (C)
Sursa de infecie omul bolnav, purttorul
Contaminarea fecal-oral (ap, alimente),
contact direct
Doza infectant 105 bacterii
PATOGENEZA
- Traversarea epiteliului intestinal intact
- Invazia i multiplicarea intracelular la nivelul
plcilor Peyer i esutului limfoid al tubului
digestiv (perioada de incubaie)
- Ptrunderea n ganglionii limfatici mezenterici
cu multiplicarea salmonelelor (perioada
prodromal)

I sptmn de boal (bacteriemie). Invadarea

fluxului sangvin, via sistemul limfatic
(diseminarea germenilor cu eliberarea
endotoxinei). Endotoxina pe cale sangvin
parvine la centrii neurovegetativi ai
ventriculului 3, determinnd febr, stare de
tifos, colaps cardio-vascular, leziuni intestinale
II sptmn de boal (difuzie parenchimatoas)
Bacteriile sunt fixate n organele SRE i se
multiplic n ficat, splin, mduv osoas,
esut limfoid, etc Din aceast perioad ncepe
eliminarea salmonelelor cu saliva, materiile
fecale, urina, bila, etc.
III-IV sptmn de boal (faza alergic). Din
ficat salmonelele ptrund n cile biliare, apoi
iari n intestin. La nivelul plcilor Peyer se
dezvolt o reacie de hipersensibilitate tip 4 necroz, ulceraii


I.
II.
III.

IV.

Manifestri clinice
Perioada de incubaie - 1-3 sptmni
Perioada prodromal (de invazie) 1-3 zile
Perioada de stare. Debut brutal, cu frison,
febr 39-41 grade, cefalee, stupoare,
somnolen, delir, com. Erupii cutanate
(rozeole) apar pe abdomen, torace, spate
n ziua a 8-9 de boal (embolii limfatice cu
bacterii). Diaree, constipaie, tulburri
cardiovasculare. Durata 7-10 zile
Complicaii: hemoragii intestinale,
perforarea intestinului, peritonit,
miocardit, meningit, psihoz etc.
Perioada de reconvalescen (1-3-6 luni)

 Imunitatea celular, umoral

5-10% convalesceni purttori pn la
3 luni (cu depistarea salmonelelor n
bil sau/i urin)
3-5% convalesceni (cu litiaz biliar)
purttori cronici (1-10 ani toat viaa)
Recidive sunt posibile (descrcri
bacteriemice din focare profunde, forme
L), se caracterizeaz prin simptome
atenuate i evoluie de scurt durat

DIAGNOSTICUL DE LABORATOR AL
FEBRELOR TIFO-PARATIFOIDE
PRELEVATE: snge (perioada febril,
n special I sptmn de boal),
urin (ncepnd cu a II sptmn),
materii fecale (II-III sptmn de
boal), exsudat din rozeole, ser
sangvin (din ziua a 7-ea), bil,
mduv osoas

METODE DE DIAGNOSTIC
Examenul microscopic RIF,
Gram

Examenul bacteriologic
Hemocultura 10-15 ml snge se
insmneaz n 100 ml bulion biliat,
mediul Rappoport, bulion glucozat 1%
pentru mbogirea salmonelelor. Se
incubeaz la 37 grade i n zilele 1, 2,
3, 5, 7 i 10 se repic pe mediile DD
(Endo, Levin, Ploskirev, W-B) pentru
izolarea culturii pure. Coloniile lactozose repic pe mediul Kligler (Olkeniki)
pentru acumularea culturii pure i
identificarea preliminar.

 Identificarea final - n baza studiului

caracterelor morfotinctoriale, de
cultur, biochimice, antigenice (RA pe
lam cu seruri imune polivalente
ABCDE, seruri monovalente anti-O de
grup (O2, O4, O6, O9, etc) , seruri
monospecifice anti-H (de variant),
seruri anti-Vi, sensibilitatea la
bacteriofagi).
Rezultatul definitiv negativ n ziua a
11.

 Rozeolocultura (exsudatul din rozeole se

ntroduce n 3-5 ml bulion biliat)
Mielocultura (0,5 ml mduva osoas din
stern n 3-5 ml bulion biliat)
Bilicultura (dup 3-6 luni de la vindecare,
5-10 ml bil se ntroduc n BP)
Se examineaz ca i hemocultura
Coprocultura (din spt. 2) 3-5 g materii
fecale se nsmneaz direct pe medii
DD i pe medii de mbogire.
Urocultura (10 ml urin se
centrifugheaz, sedimentul se
examineaz ulterior ca i coprocultura)

 Serodiagnostic (din II sptmn)

1. RA Widal (la diluii ale serului bolnavului se
adaug diagnosticuri OH din S.Typhi, Paratyphi A i
B). Titrul diagnostic 1/200 sau creterea n
dinamic a titrului
2. RA modificarea Felix (utilizarea separat a
diagnosticurilor O i H).
Anticorpii anti-O (Ig M) apar primii (ncepnd cu ziua
7-8) i dispar dup 2-3 luni (maximum spt. II-III).
Anticorpii anti-H (Ig M, apoi Ig G) apar mai trziu
(10-12 zi) i persist o durat mai lung. n debut
de reconvalescen (sptmna a IV) titrul Ac antiO i anti-H se egaleaz.
3. RHAI (cu diagnosticuri eritrocitare O)

INVESTIGAREA PURTTORILOR

Coproculturi repetate
Urocultura
Bilicultura
Serodiagnostic
1. Reacia de Vi-aglutinare (eritrocite
sensibilizate cu Ag Vi). Titrul diagnostic 1/40
2. Reacia de latex-aglutinare
3. Determinarea claselor de imunoglobuline Ig
M sau Ig G

TRATAMENTUL I PROFILAXIA
Tratament:
- Fluorochinolone
- Cefalosporine de generaia III
- Cloramfenicol
- Ampicilin
- Cotrimoxazol
Profilaxia specific: vaccinarea selectiv (zone
endemice, militari, personal medical, etc)
- Vaccinul chimic TABTe
- Vaccinul atenuat Ty2 (administrare oral, imunitate
local sIg A), contraindicat gravidelor, copiilor,
imunodeprimailor
- Vaccinul subunitar din Ag Vi (areactogen, imunitate 3-5
ani)

SALMONELOZE DIGESTIVE
(gastro-enterite, toxi-infecii
alimentare)
Consecutive consumului de alimente
contaminate cu salmonele (ou, maionez,
patiserie cu crem, carne, lactate, etc).
Agenii cauzali: salmonele bipatogene
Gr. B (S. Typhimurium, S. Paratyphi B, S.
Heidelberg, S. Derbi)
Gr. C (S. Choleraesuis, S. Newport, S. Paratyphi
C)
Gr. D (S. Enteritidis, S. Dublin)
Gr. E (S. Anatum)

PATOGENEZA GASTROENTERITELOR
Sursa de infecie: animalele domestice i psrile
(bolnave sau purttori cronici)
Transmiterea pe cale alimentar (alimente
contaminate direct de la surs sau pe parcursul
procesului tehnologic), prin ap sau contact direct.
Doza infectant 105-1010 microorganisme (n
funcie de receptivitatea gazdei, vrst, utilizarea
AB, inocul, etc)
Salmonelele colonizeaz mucoasa intestinului
subire, penetrnd si multiplicandu-se n enterocite,
celulele M i macrofage. Urmeaz o reacie
inflamatoare intens (gastroenterit,
gastroenterocolit acut). Enterotoxina provoac
diaree (activeaz adenilatciclaza sau guanilatciclaza
enterocitelor), endotoxina absorbit acioneaz
asupra SNC semne de intoxicaie.
Gastroenteritele pot fi urmate de bacteriemii.

 Manifestri clinice:
Perioada de incubaie 8 - 48 ore
Debut brusc i evoluie acut (1-3
zile) cu diaree, vom, febr,
cefalee, stare de ru.
Evoluie sever la sugari, btrni,
imunodeprimai (n special bolnavi
cu SIDA).

 TOXIINFECII ALIMENTARE
Survin ca urmare a ingestiei unui
aliment n care s-au acumulat cantiti
mari de mi/o (105 107). Nimerind n
intestin, bacteriile se distrug, iar
endotoxina eliberat provoac
semnele clinice de intoxicare.
Alte forme de salmoneloze
(septicemii, meningite, infecii urinare,
etc) se dezvolt la persoane cu
rezistena sczut

Diagnosticul de laborator al
salmonelozelor
Prelevate: mase fecale, mase vomitive,
snge, splturi gastrice, urin, puroi,
resturi de alimente suspecte.
Metode de diagnostic:
1. Examenul bacteriologic de baz
(coprocultur, hemocultur,
urocultur...)
2. RIF pentru diagnostic rapid
3. Serodiagnostic - RHAI

 Profilaxia salmonelozelor
nespecific
Tratamentul simptomatic,
antibioterapie la necesitate, n forme
grave de infecie