facebook instagram

Rezultate Analize Contact

Cauta (minim 3

 Servicii şi Tarife Ce vă oferim

 Pacienţi Informaţii utile
 Medici Informaţii medicale
 Companii şi spitale Cere o ofertă
 Despre noi Universul Synevo
 Centre de recoltare Ne găseşti uşor aici

Test Coombs direct

SynevoTest Coombs direct
32 Lei

Sinonime – test antiglobulinic direct.

Informaţii generale

Demonstrarea prezenţei de imunoglobuline sau a complementului pe suprafaţa hematiilor susţine

diagnosticul de distrucţie eritrocitară mediată imun1.

Există două clase majore de anticorpi care reacţionează cu eritrocitele. Anticorpii compleţi sau
salini aglutinează eritrocitele suspendate în soluţie salină; aceştia sunt de obicei de tip IgM (cel
mai bun exemplu de aglutinare salină la temperatura camerei este cea utilizată în grupajul ABO).
In vivo anticorpii IgM fixează complementul şi produc hemoliza imediată intravasculară.
Anticorpii care nu reacţionează vizibil în mediu salin şi produc reacţii de aglutinare numai prin
utilizarea de tehnici speciale sunt numiţi aglutinine incomplete şi sunt de obicei de tip IgG (cel
mai bun exemplu sunt anticorpii anti-Rh, care, dacă sunt prezenţi în serul primitorului de sânge
incompatibil, produc o reacţie hemolitică transfuzională întârziată, extravasculară)2.

Pentru a certifica faptul că hematiile unui pacient sunt învelite (sensibilizate) cu imunoglobuline,
complement sau ambele, se adaugă la o suspensie de eritrocite provenite de la pacient antiser cu
reactivitate faţă de moleculele de Ig şi/sau complement umane, care va determina aglutinarea
acestora. Iniţial testarea se face cu antiseruri polispecifice, care conţin anti-IgG, anti-C3d şi
ocazional şi activitate anti-lanţ uşor. Reactivii monospecifici diferenţiază în continuare între IgG,
C3d, existând şi seruri monospecifice pentru C3b, C4b, C4d şi lanţul greu al IgG. Antiseruri
specifice pentru IgM sau IgA sunt rar utilizate, deoarece IgM nu mai sunt găsite de obicei încă
ataşate pe suprafaţa celulară, iar IgA sunt foarte rar întâlnite pe suprafaţa eritrocitelor1.
Utilizând sânge recoltat pe EDTA sau pe citrat activarea in vitro a complementului de către
autoanticorpii la rece benigni este inhibată. Spălarea eritrocitelor îndepărtează globulinele
solubile sau ataşate nespecific, ceea ce permite detecţia imunoglobulinelor şi factorilor
complementului specific legate de eritrocite in vivo3.

Recomandări pentru efectuarea testului Coombs direct

 investigarea reacţiilor transfuzionale acute sau întârziate (demonstrarea fixării pe

suprafaţa eritrocitelor de la donator a aloanticorpilor prezenţi în serul pacientului);
 suspiciune de hemoliză autoimună;
 boala hemolitică a nou-născutului;
 hemoliză imună indusă de medicamente;
 atunci când martorul auto efectuat în cadrul grupajului sanguin, screening-ului prezenţei
de aloanticorpi şi testelor de compatibilitate este pozitiv3.

Pregătire pacient – nu este necesară o pregătire prealabilă4.

Specimen recoltat – sânge venos4.

Recipient de recoltare – vacutainer cu K3-EDTA4.

Cantitate recoltată – cât permite vacuumul4.

Cauze de respingere a probei – specimen coagulat4.

Stabilitate probă – testul se efectuează imediat, dacă acest lucru nu este posibil, proba se
păstrează 48 ore la 2-8°C4.

Prelucrare necesară după recoltare – o parte din eritrocite se spală de trei-patru ori cu soluţie
salină normală, urmată de prepararea unei suspensii eritrocitare în ser fiziologic steril 5%4;5.

Metode de determinare

În laboratoarele Synevo se utilizează următoarele metode:

1. hemaglutinare pe lamă cu antiglobulină umană polispecifică

2. aglutinare şi gel-filtrare pe carduri cu microtuburi ce conţin reactivi monospecifici anti-
IgG şi anti-C3d.
3. metoda de aderenţă în fază solidă (în Laboratorul Central Synevo), în godeuri căptuşite
cu proteina A (component al peretelui celular Staphylococcus aureus cu afinitate mare
faţă de porţiunea Fc a imunoglobulinelor). Plăcile de lucru (Solidscreen I ) conţin 12
stripuri test cu câte 8 godeuri fiecare. (1 godeu = 1 test). Într-o primă etapă, suspensia de
hematii de testat (preparată automat cu o soluţie cu încărcătură ionică scăzută, ce
accelerează reacţia antigen – anticorp) este pipetată în godeul de lucru. Probele sunt
mixate, apoi centrifugate. Supernatantul este aspirat, urmând două etape de spălare –
centrifugare, pentru îndepărtarea excesului de anticorpi. Serul polispecific anti –
 globulină umană adăugat ulterior, se va lega atât de anticorpii şi/sau complementul de
pe suprafaţa hematiilor (daca aceştia sunt prezenţi) cu porţiunea Fab, cât şi de proteina A
cu porţiunea Fc, inducând astfel faza solidă, de aderenţă. În etapa finală proba este iar
centrifugată.

Menţiune: serul polispecific anti – globulină umană conţine un amestec de anticorpi policlonali
anti – IgG şi anti – C3 ( iepure ) si anticorpi monoclonali murini, anti – C3d. Componentul anti –
IgG prezintă reactivitate faţă de lanţul uşor al IgG, prin urmare, poate interacţiona şi cu hematiile
acoperite cu anticorpi de tip IgA si IgM. Componentul anti – complement va reacţiona atât cu
fracţiunea C3b, cât şi cu fracţiunea C3d4.

Valori de referinţă – negativ4.

Interpretarea rezultatelor

În cazul metodei de hemaglutinare pe lamă rezultatul se raportează negativ/pozitiv în funcţia de

absenţa/prezenţa aglutinatelor eritrocitare.

Pentru metoda de aglutinare pe carduri o reacţie pozitivă se validează numai dacă microtubul de
control este negativ. Reacţia pozitivă se apreciază in funcţie de dispersia aglutinatelor în
microtub de la + la ++++, astfel : – rezultat pozitiv ( ++++) ; – rezultat slab pozitiv ( + pana la +
++ ) ; – rezultat negativ ( – ). De asemenea, în cazul unui rezultat pozitiv se va raporta
specificitatea anti-IgG şi/sau anti-C3d.

În cazul metodei de aderenţă, fiecare godeu al stripului de lucru este evaluat şi fotografiat
automat de către analizor, rezultatele fiind interpretate astfel:

 Reacţie pozitivă (prezenţa anticorpilor şi/sau a complementului la suprafaţa celulelor) –

hematii dispuse în strat uniform pe pereţii godeului (faza solidă); intensitatea este
apreciată de la 1+ la 4+
 Reacţie negativă – buton compact de hematii sedimentate în mijlocul godeului
 Reacţie neconcludentă – reacţia +/- se va interpreta de către medic

Toate imaginile şi rezultatele obţinute sunt verificate şi validate de medic4.

  Test Coombs direct pozitiv se asociază cu următoarele entităţi1;2;3;6:

Afecţiune Tipul Ac Specificitatea

TCD
Boala aglutininelor la rece primară AutoAc tip IgM, de obicei C3 (IgM
(idiopatică) sau secundară (asociată cu monoclonali (rar IgG sau disociază de pe
macroglobulinemie Waldenström şi alte IgA), cu specificitate anti-I/i, eritrocite şi nu
boli limfoproliferative, mononucleoza rar Pr sunt detectabile)
 infecţioasă, infecţii cu Mycoplasma
pneumoniae etc.)
Hemoglobinuria paroxistica la rece AutoAc tip IgG policlonali, C3 (IgG disociază
acută/tranzitorie (asociată cu boli cu specificitate anti-P (Ac de pe eritrocite la
infecţioase) şi cronică, idiopatică sau Donath-Landsteiner) cald)
asociată cu sifilisul tardiv sau congenital
Anemia hemolitică imună cu IgG1, mai rar IgG3, ocazional IgG şi/sau C3
autoanticorpi la cald idiopatică sau în asociere cu IgA sau IgM,
secundară (asociată cu boli autoimune, de tip panaglutinine
boli limfoproliferative, infecţii, tumori,
sarcină, deficienţe imune congenitale sau
dobândite)
Anemia hemolitică cu autoanticorpi la Ig M şi IgG IgG+C3
cald şi rece
Anemia hemolitică imună indusă Ac tip IgG cu specificitate IgG sau C3,
medicamentos (penicilina în doze mari, diferită în funcţie de tipul de ocazional
cefalosporine, quinidina, α-metildopa medicament IgG+C3
etc.)
Boala hemolitică a nou-născutului AloAc tip IgG, cu –
specificitate diferită în
funcţie de tipul
incompatibilităţii materno-
fetale: anti-D, anti-c, anti-K1,
anti-Fya etc.
Reacţii transfuzionale imediate AloAc IgM, mai rar IgG, de –
obicei anti-A sau anti-B, mai
rar anti-Jka, anti-K, anti-Fya
Reacţii transfuzionale întârziate AloAc IgG anti-D etc. –

Limite şi interferenţe1;3

 spălarea inadecvată a celulelor şi concentraţia mare de imunoglobuline în serul

pacientului influenţează testul.

În cazul obţinerii unui rezultat pozitiv trebuie luate în considerare următoarele posibilităţi:

 profilaxie antepartum la mamă cu imunoglobuline anti-D;

 prezenţa de autoanticorpi la cald benigni, fără acţiune hemolitică;
 modificări ale membranei eritrocitare induse de medicamente (ex.: cefalosporine) cu
adsorbţia nespecifică de proteine;
 adsorbţia nespecifică de globuline asociată cu hipergamaglobulinemia sau
paraproteinemia;
  activarea in vitro a complementului de către autoanticorpi la rece benigni (ca de exemplu
în sângele coagulat după răcire);
 poliaglutinare, dacă sunt expuse criptoantigene (T), iar reactivul este contaminat cu anti-
T.

Bibliografie

1. Neff, A. Autoimmune hemolytic Anemias. In Wintrobe’s Clinical Hematology. Lippincott Williams &Wilkins,

Philadelphia, 11th Ed., 2003, 1158-1177.
2. Galel, S. Malone III, J. Viele, M. Transfusion Medicine. In Wintrobe’s Clinical Hematology. Lippincott
Williams&Wilkins, Philadelphia, 11th Ed., 2003, 832-873.
3. Kretschmer, V. Sonneborn, H. Immunohematology. In Lothar Thomas. Clinical Laboratory Diagnostics –Use
and Assessment of Clinical Laboratory Results. TH-Books Verlagsgesellschaft mbH, Frankfurt /Main, Germany, 1
Ed., 1998, 877-934.
4. Laborator Synevo. Referinţele specifice tehnologiei de lucru utilizate 2015. Ref Type: Catalog.
5. Curs de imuno-hematologie, Institutul de Hematologie, Buc., 1993.
6. Eder, A. Manno, C. Alloimmune Hemolytic Disease of the Fetus and Newborne. In Wintrobe’s Clinical
Hematology. Lippincott Williams &Wilkins, Philadelphia, 11th, 2003, 1183-1200.

 Te-ar mai putea interesa şi …

Servicii şi tarife Laboratorul Central
de Referinţă Divizia de Servicii de Diagnostic, Medicover Ghidul serviciilor medicale de
laborator Synevo Explorează planșa anatomică

 PESTE
2000 de investigaţii
diferite de laborator

precum hematologie, chimie,

microbiologie, imunologie, alergologie, toxicologie, histopatologie, citologie,
genetică şi biologie moleculară.

 17 laboratoare
de analize medicale şi
105 de centre de recoltare proprii,

SYNEVO fiind în momentul de faţă cel mai mare

furnizor de servicii medicale de laborator din România.
Peste 100 de centre şi laboratoare de analize
private colaborează cu noi.
 PESTE
200.000 de pacienţi
trec pragul lunar

în laboratoarele
SYNEVO ROMÂNIA,
efectuându-se în medie
1.000.000 de teste.

 Servicii şi tarife
o Vezi toată lista de teste
 Teste de hematologie
 Teste de biochimie
 Teste de microbiologie
 Toxicologie
 Citologie cervico-vaginală
 Pacienţi
o Pacienţi
o Rezultate analize
o Atelierul de sănătate
o Oferte Speciale
o Pregătirea pentru analize
o Informaţii pentru asiguraţii CAS
o Satisfacţia clientului
 Medici
o Medici
o Profile
o Rezultate cu cont medic
o Informaţii medicale Medici
o Dicționar Medical
 Companii şi spitale private
o Companii şi spitale private
o Spitale publice
 Despre Noi
o Despre Noi
o Divizia de Servicii de Diagnostic, Medicover
o Cariere
o Presa
o Laboratoare şi centre recoltare
o Laboratorul Central De Referinţă
 Centre de recoltare
o Vezi toată lista de laboratoare
o Contact
 Termeni şi condiţii. | Politica de confidentialitate. | Politică privind fișierele cookies.

Autoritatea Naţională pentru Protecţia Consumatorilor Tel: 021.9551 www.anpc.gov.ro | Toate

drepturile rezervate Synevo Romania. Orice informaţie se poate copia doar cu acordul scris
Synevo şi cu menţionarea sursei prin link direct către aceasta.

Web Design & Seo by End Soft Design © 2019 Synevo