Frotiul de snge periferic

Definiie: Frotiul de snge periferic este efectuat n scopul evalurii morfologiei elementelor figurate. Frotiul este un preparat microscopic care se realizeaz prin etalarea materialului biologic n monostrat pe lame portobiect. Tehnica frotiului de snge Materiale necesare - lame obinuite degresate - lame rodate - ace sterile - alcool, vat - hrtie de filtru, compese - stativ pentru aezarea lamelor Etape: I. Recoltarea: 1. La aduli: - partea lateral a pulpei mediusului sau inelarului de la mna stng 2. La copil i nou-nscut: - lobul urechii - partea lateral a halucelui. - pielea clciuluii -locul puncionrii se dezinfecteaz i se degreseaz cu ajutorul unui tampon mbibat n alcool sau eter. -se prinde degetul subiectului cu mna stng, fixndu-l ntre index i police, i printr-o micare rapid se puncioneaz locul dezinfectat cu un ac pentru injecii subcutane, sterilizat. -primele 2 picturi se terg cu ajutorul unei comprese usacte deoarece conin prea mult lichid interstiial sau impuriti de pe piele. II. Efectuarea frotiului propriu-zis:

-pictura de snge care apare pe pulpa degetului se ridic cu marginea mic a unei lame lefuite i se aplic pe una din extremitile unei lame portobiect aezate orizontal -n momentul contactului cu lama portobiect, se imprim lamei pe care se afl pictura de snge o micare de lateralitate pentru ca sngele s se ntind pe toat linia de contact -apoi se imprim lamei lefuite o micare de translaie n lungul lamei portobiect.

Frotiul este bine executat dac are: Dou margini laterale i se termin n franjuri O grosime potrivit: elementele figurate s nu fie suprapuse i totodat sufficient de dense

Grosimea frotiului de snge depinde de: Mrimea picturii de snge = pictur mic frotiu subire - Unghiul dintre lama lefuit i lama portobiect trebuie s fie de300-350 frotiu subire - Viteza de ntindere = vitez mare frotiu gros. II. Fixarea frotiului 1.Metode fizice: -uscare sau desicare la temperature laboratorului prin agitarea lamei pentru a obiene o uscare rapid. Uscarea lent duce la ratatinarea celulelor 2.Metode chimice: -alcool absolut timp de 15 miute -alcool etilic absolute i eter n pri egale timp de 515 minute -alcool metilic timp de 2 minute -vapori de OsO4, soluie 2% III. Colorarea frotiului de snge -trebuie s se realizeze imediat dup ntiderea lui sau n primele 24 de ore -pe lamele necolorate celulele i pierd afinitatea tinctorial -se folosete colorarea dubl cu soluie MayGrmwald-Giemsa 1.Reactivi i materiale necesare: - soluie May-Grmwald - soluie Giemsa - ap distilat - pipette Pasteur, pipette gradate 2.Etapele colorrii -se acoper frotiul cu soluie May-Grmwald i se las 2-3 minute (se realizeaz fixarea frotiului)

-se adaug apoi, peste soluia MayGrmwald, un numr egal de picturi de ap tamponat se omogenizeaz i se las 2minute (diluat, soluia May-Grmwald acioneaz ca un colorant) -se ndeprteaz colorantul fr splare i se acoper cu soluie Giemsa diluat cu ap distilat tamponat n proporie de 1/1 (1 pictur soluie Giemsa pentru un mililitru ap) i se las 15-20 minute. Pentru colorarea trombocitelor se va prelungi colorarea cu Giemsa la 45 de minute. -se spal lama sub jet de ap. Cnd dorim examinarea trombocitelor evitm splarea sub jet puternic de ap (acesta va antrena trombocitele -sugativare uoar -se aeaz n stativ pentru uscare. IV. Examinarea frotiului de snge

-la microscopul fotonic -se ncepe cu obiectivul de 10x pentru verificarea calitii tehnice a frotiului. -se pune la punct cu obiectivul cu imersie i se examineaz pe rnd: -morfologia eritrocitelor -frecvena i morfologia trombocitelor -frecvena i morfologia leucocitelor

Elementele figurate ale sngelui

A. Seria roie
I. Eritrocitele ( Hematiile, Globulele roii)
ERITRON= totalitatea elementelor masei eritrocitare. Este constituit din 3 mari compartimente: 1. Compartimentul de generare = elementele imature de la nivelul mduvei roii hematogene, 5 7 zile 2. Compartimentul circulant= elementele din torentul sanguin 100-120 zile 3. Compartimentul de distrugere = eritrocitele mbtrnite i modificate morfofuncional- n splin, n ficat i mduva roie hematogen. Hematia a fost descoperit n secolul al 17-lea de ctre Swammerdam (1658) i perfect descris de ctre Leeuwenhoek. Caracteristicile eritrocitelor: Numr: Este direct proporional cu intensitatea proceselor metabolice - mai mare la copii. Variaz n funcie de sex: la brbatul adult: 4.500.000 -5.500.000/mm3 i la femeia adult: 4.000.000 5.000.000/mm3; i n funcie de vrst: la natere: 4.500.000 7.000.000/mm3 i pn la 12 ani:4.000.000 -5.000.000/mm3 Creterea numrului de hematii se numete poliglobulie. Aceasta poate fi fiziologic la altitudine, la sportivii de preforman, n sarcin i la nou-nscut; sau poate fi patologic boli sangvine, boli sistemice. Scderea numrului de hematii se numete anemie. Se poate ntlni la presiuni pariale crescute ale O2. Eritropoiez: n mduva hematogen (hematopoietic, hematoformatoare) din oasele late (coxal, stern), epifizele oaselor lungi i corpurile vertebrale.

Eritropoieza reprezint totalitatea proceselor prin a cror succesiune rezult, n final, elementele mature ale seriei eritrocitare hematiile. 1) Celula stem pluripotent CSP sub aciunea unor stimuli se angajeaz spre linia eritroid. Celule progenitoare: 1) Celula bipotent CFU-E = Colony Forming Unit (pentru linia eritrocitar i megakariocitar) -apare morfologic ca o celul imatur -nucleu mare, cromatin nuclear fin; nucleoli mari, evideni -o zon perinuclear clar -citoplasm bazofil; pseudopode. 2) Celula BFU-E =Burst Forming Unit Erytroid -blast foarte imatur, uor ovalar -citoplasm moderat bazofil; uneori cu pseudopode fine -nucleul mare; cromatina foarte fin i nucleoli mari. Celule precursoare: 1) Proeritroblastul -posibil de identificat cu ajutorul tehnicilor actuale -celula cap de serie; celul mare - are dimensiuni de aproximativ 20 m diametru; -citoplasma este bazofil, redus, colorat n albatru nchis -nucleu mare i proeminent, rotund sau oval; cromatin fin granular i unul sau doi nucleoli ( aproximativ 80% din masa celulei). -ME: ribozomi liberi organite implicate n sinteza de proteine proprii, i vezicule mici de pinocitoz pline cu fier. -persist 20 de ore, timp n care se realizeaz mitozele; din fiecare mitoz rezult 2 celule mai difereniate. 2) Eritroblastul bazofil -celula are dimensiuni mai mici, aproximativ 16m diametru, -citoplasma mai abundent i intens bazofil este considerat celula cea mai bazofil din toat mduva osoas hematogen; se coloreaz n albastru nchis. Are loc o sintez crescut a hemoglobinei n

citoplasm dar cantitatea crescut de ARN o mascheaz. -nucleul este relativ mai mic (70% din masa celule); cromatina ncepe s se condenseze n grmezi dispuse predominant la periferia nucleului; nucleolii sunt abseni -ME: dezvoltare maxim de RER i a ribozomilor, cu rol n sinteza de globin. Prezena lor explic bazofilia citoplasmei. -persist 20 de ore. 7) Eritroblastul policromatofil -celul de dimensiuni mai mici, cu diametru de 10-12m -citoplasma are culoare intermediar, ntre bazofil i acidofil (albastru-gri), datorit scderii ribozomilor i acumulrii progresive de hemoglobin. -nucleul nu prezint nucleoli; are aspect dens deoarece cromatina este condensat; -ME: organite celulare reduse numeric i puin dezvoltate; se menin n schimb microfilamentele contractile -persist 25 de ore. La acest nivel nceteaz mitozele i ncepe procesul de maturare. 8) Eritroblastul ortocromatofil sau acidofil (normoblastul) -celul de 8-9m -citoplasm net eozinofil (saturat n hemoglobin); prezint coloraie roz-portocalie. -nucleu mic, rotund; cromatin foarte dens, fr nucleol, situat excentric -dup 2-3 zile emite pseudopode = se insinueaz prin porii celulelor endoteliale ale sinusoidelor mduvei osoase hematogene. celula ptruns n sinusoid va deveni reticulocit iar nucleul va fi fagocitat de macrofage. 9) Reticulocitul -stadiul premergtor eritrocitului matur -n citoplasm sunt resturi de RER i ribozomi care dispar n aproximativ 2 zile; seamn cu cea a eritroblastului acidofil; prezint culoare albstruie -n sngele periferic persist un procent de 1-2% ( considerat normal) -este evideniabil pe frotiul din sngele periferic prin coloraii speciale (albastru de metilen) 10) Eritrocitul -celula matur circulant Reglarea eritropoezei . a)Stimulatoare specifice - eritropoetina (EPO)- care se sintetizeaz n special n rinichi - nespecifice factori de cretere (GF) - factori hormonali (STH, h.androgeni, T4, insulina) b) Inhibitoare T.G.F ( factor de cretere cu transformare) cu efecte negative att aupra hematopoezei ct i asupra eritropoezei - lactoferine - prostaglandine G Aspecte morfologice Forma : rotunjit, vzute din fa i de disc biconcav vzute din profil. Anomalii de form pe frotiu: Forme reversibile: -sferocite: eritrocite rotunde de forma unui balon sau a unei sfere. Privite pe frotiu ele sunt bine colorate i mai mici dect eritrocitele normale. Ex: n icterul hemolitic congenital (sau sferocitoza ereditar) i n anemii hemolitice ctigate.

-echinocite: hematii de form sferic ce prezint pe suprafaa lor prelungiri de dimensiuni egale -epi, n numr de 20-30, localizate echidistant. Apar atunci cnd concentraia moleculelor de ATP scade n celul i n mediul extracelular. -eliptocite: eritrocite ovale care n mod normal se gsesc n snge, n proporie de 1015% din globulele roii. -stomatocite: hematii rotunde care prezint ntr-o anumit zon o gaur (stom). Apar la un pH uor sczut sub 7. Forme ireversibile: -acantocite: hematii de form rotunjit care prezint pe suprafaa lor 5-15 prelungiri de dimensiuni inegale i situate la distane inegale ntre ele. Sunt numite i spurr cells Ex:ciroze, anorexia nervoas. -knitocite: eritrocite din care s-a desprins un fragment. Ex: expunerea eritrocitelor la traumatisme importante (proteze valvulare). -drepanocite: hematii n corn sau secer. Ex: hemoglobinopatii, talasemie, deficit de fier n organism -poikilocitoz = variaii de form Dimensiuni : 7,2 m pentru celula uscat i 8,6 m pentru hematia proaspt, circulant. Anomalii de mrime pe frotiu: -microcite: hematii de dimensiuni mici, avnd diametrul de 5-6 m, uneori srace n hemoglobin.Ex: anemia feripriv, anemia hemolitic congenital. -macrocite: hematii cu volumul i diametrul mare, ntre 8-10 m. Ex: ciroze, tulburri de nutriie. -megalocite: hematii cu dimensiuni mi mari; diametrul peste 10 m. Ex: anemii megaloblastice -anizocitoz= variaii de diametru eritrocitar. Culoare: rou crmiziu pe frotiul de snge colorat cu soluia May- Grmwald Giemsa; mai palid central i mai intens periferic. Anomalii de colorabilitate: -hipocrome: eritrocite palide. Ex: anemia feripriv -hipercrome: imaginea fals dat de creterea nlimii hematiei i dispariia zonei centrale clare. Ex: anemia megaloblastic, sferocitoza -anizocromia=variaii de culoare ale eritrocitelor. -policromatofilia i bazofilia: prezena pe frotiu a celulelor tinere, incomplet maturate (normal pn la 1-2% din populaia celular) Nucleu: Hematiile mature sunt anucleate Citoplasma: este aproape plin de hemoglobin, elementul esenial pentru realizarea funciei respiratorii a eritrocitului. (95% din proteinele solubile ale eritrocitului). Este o cromoprotein porfirinic care conine fier constituit din 4 molecule de hem (cu un atom de Fe2+ - leag O2, CO2) i 4 catene polipeptidice (globine).

Sinteza hemului- la nivel mitocondrial din 2 precursori: succinatul i glicolul. Sinteza globinei la nivelul ribozomilor celulari. Funcia hemoglobinei: transportul O2, cu formare de oxihemoglobin (HbO2) i transportul CO2, cu formare de carhemoglobin (HbCO2) n urma eritropoiezei poate rmne n citoplasm membrana nuclear sub forma inelelor Cabot sau resturi de cromatin sub form de granule bazofile corpusculii Jolly. -inele Cabot apr ca formaiuni subiri filamentoase, n form de inel, de cifra 8, azurofiel, dispuse n centrul sau la periferia eritrocitului.Ex: anemiile foarte grave din leucoze, neolasme sau anemii aplastice. -corpusculii Jolly sunt resturi de cromatin nuclear, rotunzi, deni, cu afinitate tinctorial azurofil. Ex: anemii grave, mai ales megaloblastice. Ultrastructural prezint proteine structurale care formeaz citoscheletul, proteinenzime:LDH, G6PD, ATP-az, catalaz, anhidraz carbonic; vitamine (mai ales din grupul B) i mici cantiti de lipide. Membrana: este alctuit dup tipul unitar de biomembrane.. Prezint 3 straturi: 1)Stratul superficial: cu antigene (Ag) de suprafa i receptori membranari. -eritrocitele umane au un numr mare de antigene (Ag) pe suprafaa lor. Ag-ele sunt grupate n 30 de sisteme care definesc grupele sanguine, dintre care cele mai importante sunt ABO i Rh. -antigenele eritrocitare (aglutinogenele): sunt exprimate doar pe eritrocite (antigenele Rh), pe eritrocite i esuturi (antigenele ABO) sau pe alte celule sanguine i sunt carbohidrai sau peptide cu determinism genetic. -grupele sanguine ABO sunt definite de prezena antigenelor pe suprafaa eritrocitelor i a anticorpilor n plasm. Sistemul ABO este un sistem format din dou antigene: A i B exprimate pe eritrocite, dar i pe membranele endoteliale i epiteliale i doi anticorpi: i aflai n plasm. n sistemul ABO exist 4 grupe sanguine principale: O, A, B i AB. -importana lor clinic este legat de capacitatea alloanticorpilor (anticorpi mpotriva unor antigene pe care persoana respectiv nu le are) de a cauza distrucia hematiilor transfuzate sau de a traversa placenta i a declana hemoliza n circulaia fetal.

-sistemul Rh este definit de prezena sau absena antigenului D. Dac o persoan are pe suprafaa hematiilor antigenul D, atunci acea persoan are Rh pozitiv; absena antigenului D nseamn c persoana respectiv are Rh-ul negativ 2)Stratul mijlociu, lipidic: conine colesterol, fosolipaze, proteine care strbat grosimea membranei. Este foarte mobil avnd rol n realizarea plasticitii eritrocitare. 3)Stratul intern: asigur rezistena , forma i deformabilitatea eritrocitelor. Prezint o treea elastic de macromolecule: fibrilare (ex. spectrina, actina) i globuloase (ex. anchirina) Funciile eritrocitelor 1) Funcia de transport a O2 i CO2 2) Rol n meninrea echilibrului acido-bazic.

II.

Trombocitele (Plachetele)

Numr : 130.000 -300.000/mm3 Modificri cantitative: -trombocitopenii sub 100.000/mm3. Tendin crescut de sngerri spontane, mai ales hemoragii cutanate (peteii, echimoze) i mucoase (epistaxis, gingivoragii). Ex: hipoplazie/aplazie medular, deficit de trombopoietin, distrucie accelerat, splenomegalie -trombocitoze peste 400.000/mm3. Risc crescut de fenomene trombotice.Ex: efort fizic, dup intervenii chirurgicale majore, n procese inflamatorii i neoplazice, n splenectomii. Trombocitopoez: Reprezint ansamblul proceselor prin a cror succesiune se formeaz plachetele sangvine. 1)Celula multipotent Celule progenitoare: 1)BFU-MK =Burst Forming Units-Megakaryocyte -progenitorii cei mai primitivi 2)CFU-MK = Colony Forming Units Megacaryocyte Celule precursoare: 1)Megakarioblastul -celul foarte mare -nucleul are mai muli lobi; raportul nucleu/citoplasm este mare 2)Megakariocitul bazofil sau promegacaricitul - este o celula mai mare dect megacarioblastul nucleul polilobat -citoplasma este intens bazofil 3)Megakariocitul granular netrombocitogen -nucleu multilobat;raportul nucleu/citoplasm este mic citoplsama acidofil, plin de granule 4)Megakariocitul granular trombocitogen gruparea granulelor (10-12)

5)Trombocitul Reglarea trombocitopoezei: - citochina MK-CSF- acioneaz asupra celulelor progenitoare -trombopoietina INFLUENRAZ Aspecte morfologice Forma: -celul elipsoid, cu form de lentil biconvex cnd se afl n stare proaspt, n vasele sangvine -pe frotiu, celula prezint forme diferite, coluroase ca o stea, dicoidal, poligonal, depinznd de gradul de uscare a frotiului, de timpul ce s-a scurs ntre recoltarea sngelui i efectuarea frotiului. -tot pe frotiu apar agregate n grupuri mici i mari (cte 2-4 pn la 10-15 elemente) Dimensiuni: ntre 2-5m Culoare: n coloraie Giemsa se coloreaz n albastru violet. Nucleu: sunt fragmente citoplasmaticeanucleate. Citoplasm prezint o zon central, ntunecat, de culoare roie-purpurie sau violetnumit granulomer, i o zon periferic, ectoplasmic, clar, omogen, slab bazofil -numit hialomer. n granulomer exist vezicule de diferite mrimi care conin Membrana este lipoproteic Durata de via -8-10zile Funciile trombocitelor 1.Rol n hemostaza primar oprirea iniial a sngerrii i formarea dopului hemostatic plachetar 2.Rol n hemostaza secundar (coagulare) activitatea procoagulant 3.Rol n reglarea fibrinolizei 4.Rol n meninerea integritii peretului vascular.

B. Seria alb (Leucocitele, Globulele albe)

1.Granulocite -prezint numeroase granule n citoplasm a. Neutrofile Nummr : 3000-4500/mm3 -creterea numrului de n valoare absolut la peste 6500/mm3 poart numele de neutrofilie. Ex: infecii bacteriene, boli inflamatorii, tumori, stress (exerciii, emoii) -scderea numrului n valoare absolut sub 1500/mm3. Ex: infecii virale, medicamente. Origine -Granulocitele se formeaz n mduva osoas hematopoietic

-linia lor de maturaie constituie populaia majoritar din mduv. Raportul granulociteeritroblati este de aproximativ 3/1 1)Celula multipotent Celula progenitoare: 1)CFU-GM= Colony Forming Unit- Granulocyte-Monocyte Celule precursoare: 1) Mieloblastul -celula cap de serie, recognoscibil morfologic n microscopia optic; prezent n procentaj sczut n mduva normal (0,5 -2%) -are undiametru de 15-20 m (etalat); este oval, uneori rotunjit -nucleul are cromatina omogen, fin dispersat, cu nucleoli (2-5) bine delimitai -citoplasma este albastr, mai ncchis la periferie, cu rare granulaii azurofile, de talie mic 2) Promielocitul -celul mai voluminoas, prezent n proporie de 2-8% din populaia medular -nucleu voluminos, adesea excentric, discret ancoat; cromatina ncepe s se condenseze; nucleolii sunt uneori vizibili -citoplasma este abundent, puin bazofil, i bogat n granulaii -n microscopia optic se identific dou tipuri de granulaii:azurofile sau primare, de culoare roie-violacee, i neutrofile sau secundare, de culoare maro. 3) Mielocitul -celul de 15m -nucleu rotunjit; cromatin condensat n grmezi -citoplsma este acidofil, bogat n granulaii neutrofile, de culoare maronie deschis. Granulaiile azurofile sunt nvelite n mucopolizaharidaze cu pierderea capacitilor tinctoriale. 4) Metamielocitul -nucleu alungit i ncurbat; cromatina condensat n blocuri bine delimitate -citoplasma este acidofil 5) Neutrofil nesegmentat -nucleul alungit este total ncurbat, lund aspectul n potcoav. 6) Polinuclearul neutrofil Aspecte morfologice Forma: rotunjit n sngele circulant -aceast form se modific cnd neutrofilele se detaeaz pentru a prsi vasul i a trece n esuturi prin emitere de pseudopode ( form neregulat, adeseori de rachet) Dimensiuni: -au un diametru de 12-15m n sngele circulant i de numai 9-12m cnd celula este uscat (pe frotiul sanguin) Nucleu: - este segmentat prezentnd 2-5 lobi nucleari, legai ntre ei prin filamente fine de cromatin; aezarea lor n neutrofil realizeaz forme diferite asemntoare literelor din alfabet (U, V,W,T,S).

-este nesegmentat sau are 2-3 lobi n cazul elemetelor tinere. 50% din neutrofilele mature au 3 lobi si mai puin de 5% au 5 lobi sau peste. - la unul din lobii nucleari, la 1-5% din neutrofilele persoanelor de sex feminin, se observ prezena corpusculului Barr - n coloraia May-Grmwald-Giemsa are o tent roie violacee dat de eozinatul de albastru de metilen. Citoplasma: -este uor acidofil colorndu-se n roz palid -conine 2 tipuri de granule: azurofile sau primare i specifice sau secundare, colorate n brun mai mult sau mai puin nchis. -granulele azurofile - sunt prezente n exclusivitate n primele etape de dezvoltare a neutrofilelor la nivelul mduvei hematogene, reducndu-se treptat pe msura diferenierii celulei i trecerii ei n sngele periferic - sunt lizozomii neutrofilelor i conin hidrolaze acide, lizozim ce are rolul de a hidroliza glicozidazele din peretele bacteriilor agent bacteriostatic. - mai conin mieloperoxidaz prin care sunt bactericide acionnd asupra H2O2 ( elibereaz i ativeaz O2) -granulele specifice, neutrofile 70-80%, conin lizozim, lactoferin, fagocitine, cu rol bacteriostatic, fosfataz alcalin, acid lactic, acizi grai i lecitine. Membrana este lipoproteic, acoperit de glicocalix -emite frecvent pseudopode bogate n microfilamente de actin i microtubi ce asigur migrarea celulei din snge ctre i prin esuturi. Funciile neutrofilelor -funcie de aprare - microfag fagociteaz perticule de talie mic -funcie de secreie: produce transcobalaminn I, alfa-globulin care fixeaz i transport vitamnia B12 n ser. b. Eozinofile ( Granulocite acidofile) Numr: 100-200/mm3 -creterea numrului de eozinofile n valoare absolut peste 500/mm3 poart numele de eozinofilie. Ex: boli parazitare, boli dermatologice, bioli alergice -scderea numrului de eozinofilie sub 100/mm3 poart numele de eozinopenie. Ex: stresul acut i cronic, emoional, cauze endocrine (excesul de cortizon) Origine: mduva osoas hematopoietic Aspecte morfologice Forma: rotunjit Dimensiuni: Nucleu: de obicei bilobat 2 lobi unii prin puni fine de cromatin, lobii nucleari coninnd eucromatin dispus central i heterocromatin lng membrana nuclear. -n coloraia May-Grmwald-Giemsa are tent rou violaceu Citoplasma este intens acidofil, se coloreaz n rou -conine organite celulare mai bine reprezentate, comparativ cu neutrofilele

-frecvente granule colorate n portocaliu strlucitor, n coloraia May-Grmwald-Giemsa, care conin hidrolaze acide de tip lizozomal i histone Membrana- este organizat dup tipul general al biomembranelor -prezint pseudopode mici i rare, celula avnd micri ameboide Funciile eozinofilelor -microfag cu putere redus de fagocitoz, selectiv pentru factorii bacterieni solubili -rol antihistaminic, acumulndu-se n esuturile sau zonele cu histamin n concentraie ce depete normalul, intervenind astfel n bolile parazitare i alergice care sunt nsoite de eozinofilie. -n tumori, n special n boala Hodgkin, prezint reacii de tip imun -conin profibrinolizin prin care intervin n procesele de coagulare sangvin c. Bazofile Numr 10-20/mm3 -creterea numrului de bazofile peste 80/mm3 poart numele de bazofilie. Ex: leucemia mieloid cronic, splenectomie, varicel -scderea numrului de bazofile poart numele de bazopenie. Ex: reacia anafilactic Origine: mduva osoas hematopoietic Aspecte morfologice Forma uor rotunjit. Dimensiuni: - sunt mai mici dect neutrofilele i eozinofilele Nucleu: apare incomplet segmentat avnd adesea forma unei frunze incomplet lobate, a literei S, sau de trifoi. Citoplasma este bazofil -conine puine organite celulare -mai multe granule, de form i dimensiuni diferite, care apar colorate metacromatic n albastru-violet nchis. n unele bazofile sunt rspndite pe toat aria citoplasmei acoperind deseori i nucleul n timp ce n altele apar concentrate n ectoplasm sau perinuclear. O parte din aceste granule sunt lizozimi dar, cele mai multe, pot fi considerate granule specifice care conin histamin, heparin, serotonin i o substan slab reactiv de natur lipidic. Membrana este lipoproteic acoperit de glicocalix -prezint pe suprafaa extern receptori pentru IgE Funciile bazofilelor -n stri inflamatorii, stri de oc, de stress -se degranuleaz punnd n libertate heparina (intervine n hemostaz), histamina i serotonina (cu aciune asupra vaselor) 2.Agranulocite - nu prezint granule n citoplasm a. Limfocite Numr 1250-2400/mm3

-creterea numrului de limfocite peste 2500/mm3 poart numele de limfocitoz. Ex: infecii virale cu exantem (rujeol, rubeol, varicel), infecii bacteriene cronice (tuberculoz, sifilis), boli infecioase acute (mononucleoz infecioas). -scderea numrului de limfocite poart numele de limfopenie. Ex: sindroame de imunodeficien dobndite, tratament cu citostatice. Origine: organele limfoide primare: mduva osoas hematogen i timusul, responsabile de limfopoieza primar, i organele limfoide secundare, n care se realizeaz limfopoieza secundar. 1)Celula multipotent Celule progenitoare 1)Celula bipotent, CFU-BT 2)Celula unipotent, CF-B pentru limfocitele B, sau CF-T pentru limfocitele T Celule precursoare 1)Limfoblast -celule mari, cu diametrul ntre 8m-12m -nucleu rotund/ovalar; cromatin mai fin, lax; nucleol prezent- ocupnd o treime din suprafaa nuclear. -citoplasma este abundent, bazofil, bogat n poliribozomi. 2)Prolimfocit 3)Limfocit Aspecte morfologice Forma este rotunjit sau uor oval Dimensiuni: cea mai mic celul din sngele periferic. Nucleu - este mare i ocup o suprafa mare din citoplasm -n interiorul lui se gsete o cantitate mare de heterocromatin sub form de bulgri bazofili, ceea ce face ca n frotiul de snge s apar tahicromatic, intens colorat, ca o pat de cerneal Citoplasma este redus la un inel perinuclear -este bazofil, asemnat cu cerul senin -conine organite celulare slab reprezentate Membrana este lipoproteic, organizat n mozaic i acoperit cu un strat subire glicoproteic Funciile limfocitelor -sunt capabile s recunoasc antigenele graie receptorilor specifici. Dup interaciunea cu antigenul prolifereaz i secret substane efectoare care duc la distrugerea acestuia. Recunosc antigenele tisulare proprii (self-ul) i reacioneaz mpotriva lor fenomenul toleranei. -sunt prezente dou populaii de limfocite: T i B, cu implicaii diferite n rspunsul imun. Rspunsul umoral este efectuat de limfocitele B iar rspunsul celular este efectuat de limfocitele T. b. Monocite Numr: 240-480/mm3

-creterea numrului peste 750/mm3 poart numele de monocitoz. Ex: boli hematologice, boli vasculare de colagen sau neoplasme -scderea numrului sub 240/mm3 poart numele de monocitopenie. Ex: infecii masive i aplazii medulare. Origine: sistemul reticulo-histiocitar n toate organele i esuturile. 1)Celula multipotent Celula progenitoare 1)CFU-GM = Colony Forming Unit Granulocyte-Monocyte Celule precursoare: 1) Monoblastul -celul rar, la nivelul mduvei osoase normale; cu aspect blastic, -nucleu mare, cromatin fin, granular i uniform dispersat; nucleoli prezeni -devine evident n situaii patologice,ex: leucemii acute monoblastice 2)Promonocitul -nucleul este puternic ancoat, neregulat; -pentru o corect difereniere este util folosirea reaciilor citochimice. 3) Monocitul Aspecte morfologice Forma -rotunjit Dimensiuni cea mai mare celul din sngele periferic, 20-25m Nucleu nesegmentat, apare deseori reniform sau puternic ancoat, neregulat; ocup aproximativ jumtate din aria celular -cromatina are un aranjament mai particular, asemntor cu o tabl de ah n care heterocromatina reprezint zonele ntunecate iar eucromatina zonele clare Citoplasma este abundent, bazofil, se coloreaz n albastru-cenuiu -organite celulare relativ abundente Membrana este lipoproteic -prezint numeroase microviloziti, vezicule de pinocitoz i micropinocitoz -emite frecvent pseudopode prin care monocitul se deplaseaz n afara vasului, dar mai ncet dect granulocitul -conine recptori pentru IgG (subclasele IgG1 i IgG2 ) i pentru C3 Funciile monocitelor -fagociteaz n general particule de talie mare: bacterii, virusuri, complexe antigen-anticorp, corpuri strine anorganice, celule ntregi sau resturi de celule. -intervin n aprarea mpotriva unor clase de microorganisme, ndeprtarea unor celule lezate, precum i n reglarea funciilor limfocitelor.

Formula leucocitar:

Elemente figurate Granulocite neutrofile nesegmentate Granulocite neutrofile segmentate Granulocite eozinofile Granulocite bazofile Limfocite Monocite

procente 1-4% 50-70% 1-4% 0-1% 30-45% 4-8%

Numr absolut /mm3 50-320 3000-4500 100-200 10-20 1250-2400 240-480

Hemograma: 1)Eritrocite: la brbatul adult: 4.500.000 -5.500.000/mm3 i la femeia adult: 4.000.000 5.000.000/mm3; la natere: 4.500.000 7.000.000/mm3 pn la 12 ani:4.000.000 -5.000.000/mm3 2)Trombocite: 130.000 -300.000/mm3 3)Leucocite: Aduli: 4000-9000/mm3 La natere: 15000-25000/mm3