1

METABOLISMUL AMINOACIZILOR
AROMATICI
2
METABOLISMUL AMINOACIZILOR AROMATICI
CH
2
CH N H
2
COOH
CH
2
CH N H
2
COOH
OH
C
H
2
C
H
NH
2
COOH
O H
O H
C
H
2
C
H
2
NH
2
O H
C
H
C
H
2
NH
2
O H
OH
C
H
2
O
COOH
O H
CH
2
O
COOH
OH
OH
CH
2
COOH
OH
O H
CH
2
CH
2
NH
2
CH
2
O
COOH
Fenilalanina
Fenilalanin
hidroxilaza
Tirozina
Biosinteza hormonilor tiroidieni
Tirozin
hidroxilaza
Dioxifenil
alanina (DOPA)
Hormoni medulosuprarenali
(adrenalina, noradrenalina)
Melanine
(hormoni responsabili de pigmentarea pielii)
CO
2
Tiramina
(efect de cretere a presiunii arteriale) Octopamina
Hidroxilare
la catena
lateral
Acid ceto glutaric
Acid glutamic
Transaminare
Acid p-hidroxifenil piruvic
2-hidroxilaza
Acid 2,4 dihidroxifenil piruvic
Acid homogentizic
Homogentizat
1,2-dioxigenaza
Acid fumaric
+
Acid acetilacetic
Decarboxilare
Fenil etil
amina
Transaminare
Acid fenilpiruvic
Acid fenil acetic
Acid fenil lactic
Toxici ai celulei nervoase
1
a
b
c
d
2
3
CH
2
CH N H
2
COOH
Fenilalanina
CH
2
CH N H
2
COOH
OH
Fenilalanin
hidroxilaza
Tirozina
1
1. CI DE METABOLIZARE A AMINOACIZILOR AROMATICI N
COMPUI CU ROL BIOLOGIC
Biosinteza hormonilor tiroidieni
a
C
H
2
C
H
NH
2
COOH
O H
O H
Tirozin
hidroxilaza
Dioxifenil
alanina (DOPA)
b
Hormoni medulosuprarenali
(adrenalina, noradrenalina)
Melanine
(hormoni responsabili de pigmentarea pielii)
c
CO
2
C
H
2
C
H
2
NH
2
O H
Tiramina
(efect de cretere a presiunii arteriale)
Hidroxilare
la catena
lateral
C
H
C
H
2
NH
2
O H
OH
Octopamina
Acid ceto glutaric
Acid glutamic
Transaminare
d
C
H
2
O
COOH
O H
Acid p-hidroxifenil piruvic
2-hidroxilaza
CH
2
O
COOH
OH
OH
Acid 2,4 dihidroxifenil piruvic
CH
2
COOH
OH
O H
Acid homogentizic
Homogentizat
1,2-dioxigenaza
Acid fumaric
+
Acid acetilacetic
4
CH
2
CH N H
2
COOH
L- Fenilalanin
CO
2
CH
2
CH
2
NH
2
Feniletilamin
CH
2
COOH
C O
Acid
fenilpiruvic
NH
3
sau TRANSAMINARE
Acid fenil acetic
Acid fenil lactic
2. TRANSFORMAREA FENILALANINEI N METABOLII TOXICI
PENTRU CELULA NERVOAS
5
C H
2
CH
NH
2
COOH
FENILALANINA = aminoacid esenial
sau
CH
2
CH N H
2
COOH
L- Fenilalanina
6
1. Hidroxilarea fenilalaninei => TIROZIN
CH
2
CH N H
2
COOH
CH
2
CH N H
2
COOH
OH
L- Fenilalanin
L-Tirozin
fenilalanin 4-hidroxilaza
acid ascorbic
+ O
2
citP450
NADPH
2
NADP
+
H
2
O
1- a). Biosinteza hormonilor tiroidieni
Tirozin
Tironin Tiroxin (T
3
)
(aminoacid)
(intemediar)
(hormon)
7
CH
2
CH N H
2
COOH
OH
C
H
2
CH
NH
2
OH
OH
COOH
L-Tirozin
3,4-Dihidroxifenilalanin
(DOPA)
tirozin-hidroxilaza
(sau TIROZINAZA)
1
2
3
4
5
6
1- b.) Hidroxilarea tirozinei
Hormoni
medulosuprarenali:
adrenalina
noradrenalina
Melanine = Hormonii
responsabili de
pigmentarea pielii i a
prului, n melanocite
Dopamin
8
c.) Decarboxilarea tirozinei
CO
2
CH
2
CH N H
2
COOH
OH
C
H
2
CH
OH
NH
2
OH
C H CH
OH
NH
2
PLP
L-Tirozin
Tiramina
tirozin-decarboxilaza
hidroxilare la catena
laterala
Octopamina
(neuromediator)
Descoperit la caracati
(1948)
La lcuste- rol n contracia
muscular
amin biologic activ
(hormon tisular)
9
2-d.) Transaminarea tirozinei = cale de eliminare
COOH
OH
C
H
2
COOH
O H
OH
CH
2
OH
Acid 2,4-dihidroxifenil
piruvic
C O
Acid homogentizic
(acid 2,5-dihidroxifenilacetic)
p-hidroxifenilpiruvat
oxidaza
Acid fumaric
+
Acid acetil
acetic
homogentizat
1,2 -dioxigenaza
CH
2
CH N H
2
COOH
OH
CH
2
OH
COOH
CH
2
OH
OH
COOH
L-Tirozin
+ Acid -cetoglutaric
Acid glutamic
PLP
Acid
p-hidroxifenil
piruvic
C O
Acid
p-hidroxifenil
lactic
C H
tirozin aminotransferaza
2-hidroxilaza
Ciclu Krebs
10
2-d.) Transaminarea tirozinei = cale de eliminare
Transaminarea tirozinei are loc sub aciunea enzimei tirozin aminotransferaza PLP
dependent. n continuare, enzima para-hidroxifenilpiruvat oxidaza va genera acidul
homogentizic (acid 2,5-dihidroxifenilacetic). Aceast reacie este complex, i implic
decarboxilare, oxidare i hidroxilare, fiind dependent de acidul ascorbic.
Nucleul aromatic este apoi scindat sub aciunea homogentizat oxidazei
(homogentizat 1,2-dioxigenaza) i printr-o serie de reacii vor rezulta produii finali de
metabolismai tirozinei: acidul fumaric i acidul acetilacetic.
Fumaratul poate fi utilizat de celul n ciclul Krebs pentru producerea de energie sau
pentru gluconeogenez, iar acetoacetatul poate fi utilizat ca Acetil-CoA pentru sinteza
de lipide sau pentru producerea de energie.
Metabolismul aminoacizilor aromatici: enzime i produi finali
Aminoacidul esut Enzima Produs
intermediar
Produs final
Triptofan
Ficat Triptofan
dioxigenaza
N-formil
kinurenina
(FH
4
,PLP)
Alanina, acidul
nicotinic
esuturi
extrahepatice
Triptofan
hidroxilaza
5-hidroxi
triptofan
(PLP)
Serotonina,
melatonina
Fenilalanina
Ficat Fenilalanin
hidroxilaza
(ac. ascorbic)
Tirozina Tirozina
Tirozina
SNC Tirozinaza
(tirozin hidroxilaza)
(ac. ascorbic)
DOPA Dopamina,
adrenalina,
noradrenalina
Melanocite Tirozinaza DOPA Melanina
Glanda tiroid Tirozinaza Tiroglobulina Tiroxina (T3), T4
Ficat Tirozin
aminotransferaza
(PLP)
P-hidroxifenil
piruvatul
Fumarat,
acetoacetat
Maladii genetice cauzate de deficitul
unor enzime implicate n
metabolismul aminoacizilor
13
Anomaliile n metabolismul aminoacizilor sunt mai frecvente
dect n oricare alt metabolism.
Defectele enzimatice n metabolismul aminoacizilor sunt mai
frecvente la copii dect la aduli
Adesea sunt letale sau produc perturbri grave, ireversibile la
nivelul sistemului nervos dac nu sunt tratate rapid
Sunt puse n eviden prin determinri enzimatice specifice i
prin dozri de aminoacizi n lichide biologice (snge, urin).
Deficienele enzimatice n metabolismul
aminoacizilor
TIPURILE DE PERTURBRI
CARE POT APARE N METABOLISMUL AMINOACIZILOR
Aminoacidul
Evideniere Caracteristici
Glicocol
(glicin)
Glicinurie Defect de transport urinar de glicin (nu are loc
reabsorbia glicinei)
Hiperoxalurie
primar
Excreie urinar crescut de oxalat, de origine
endogen. Apare probabil n urma dezaminrii
exacerbate a glicinei la acid glioxilic, precursor de
acid oxalic.
Cistin
Cistinuria Eliminri de 20 30 ori mai mari de cistin datorit
defectului de reabsorbie renal. Concomitent
crete i excreia de lizin (cistin-lizinuria),
arginin i ornitin.
Datorit insolubilitii cistinei n mediul apos, boala
se complic cu precipitarea cistinei i formarea
calculilor de cistin la nivel renal.
14
Cistinoza Boal de depozit a cistinei.
Boal metabolic nnscut, caracterizat prin
depunerea cristalelor de cistin n diferite
esuturi i organe (de ex. n sistemul reticulo-
endotelial). Este nsoit de o excreie renal
crescut a tuturor aminoacizilor =>
aminoacidurie.
Cistein Hiper-
homocisteinurie
Hiper-
homocisteinemie
Boal ereditar caracterizat printr-o mrire a
concentraiei de homocistein i metionin n
plasm i printr-o diminuare a cisteinei, ca o
consecin a unui deficit n activitatea cistationin
sintetazei. Se caracterizeaz prin afectare
metabolic multisistemic, a esutului conjunctiv,
muscular, i a sistemului cardiovascular: plci de
aterom extinse i tromboz intra-vascular.
Tratamentul cu vitamina B
6
, ct i cel cu acid
folic, vitamina B
12
i betain, determin scderea
hiperhomocisteinemiei.
15
Histidin
Hiperhistidi-
nemia
Histidinuria
Creterea nivelului histidinei n snge i n
urin, pot fi asociate n mod fiziologic cu
sarcina, ca urmare a modificrilor funciei
renale, caracteristice acestei situaii.
Anomalia metabolic se datoreaz activitii
sczute a histidinazei i deci histidina nu se
mai dezamineaz cu formare de acid urocamic
i se acumuleaz n snge. n aceast
perturbare a metabolismului histidinei se
elimin n urin i acidul imidazolil-piruvic.
Fenilalanina Fenilceto-
nuria
(oligofrenia
fenilpiruvic)
Deficien enzimatic congenital de fenilalanin
hidroxilaz, manifestat la nou-nscui.
Fenilalanina nu mai poate fi convertit n
tirozin, se acumuleaz n snge, i trece n
urin. La nivelul creierului sunt inhibate o serie
de enzime, se acumuleaz compui toxici
derivai de la fenilalanin => afectarea
neurologic a copilului netratat (ntrziere
psiho-motorie i intelectual).
16
Tirozina
Albinismul Pielea i prul sunt lipsite de culoare, datorit
lipsei tirozin hidroxilazei, enzim ce transform
tirozina n compui necesari pentru sinteza de
pigmeni melaninici.
Alcaptonuria Acumularea acidului homogentisic n urin ca
urmare a deficienei de homogentizat 1,2-
dioxigenaza, enzim din catabolismul tirozinei.
Urina capt culoare brun n contact cu aerul.
n timp, la nivelul esutului conjunctiv din
cartilagii apare un pigment brun, proces nsoit
de reumatism cronic sever.
17
CH
2
CH N H
2
COOH
CH
2
CH N H
2
COOH
OH
CH
2
CH
2
NH
2
CH
2
C O
COOH
Fenilalanina
Fenilalanin
hidroxilaza
Tirozina
Decarboxilare
Fenil etil
amina
Transaminare
Acid fenilpiruvic
Acid fenil acetic
Acid fenil lactic
Toxici ai celulei nervoase
Oligofrenia fenilpiruvic
Fenilcetonuria
(oligofrenia
fenilpiruvic)
Fenilcetonuria (oligofrenia fenilpiruvic)
Fenilcetonuria (PKU) este cea mai frecvent maladie cauzat de deficitul unei
enzime implicate n metabolismul aminoacizilor
PKU determinat de absena genetic a fenilalanin-hidroxilazei
Nu se poate transforma fenilalanina n tirozin, ci se transform n acizi
fenilpiruvic, fenilacetic
Numele maladiei este determinat de faptul c se elimin urinar acid fenilpiruvic
i respectiv acid fenillactic, care determin mirosul specific, de urin de
obolan
Metaboliii menionai anterior se gsesc numai n urme n urina subiecilor
sntoi
Aceti metabolii sunt toxici pt SNC (perturb metabolismul glucozei i lipidelor
la nivel cerebral)
ntrzierea dezvoltrii mintale la copii netratai
La nou nscui vom, convulsii
Manifestrile clinice pot fi evitate prin administrarea unei diete complet lipsite
de fenil-alanin
La natere se realizeaz testarea obligatorie pentru evidenierea maladiei
Alcaptonuria
C
H
2
C
O
COOH
O H
CH
2
C O
COOH
OH
OH
CH
2
COOH
OH
O H
Acid p-hidroxifenil piruvic
2-hidroxilaza
Acid 2,4 dihidroxifenil piruvic
Decarboxilare
Acid homogentizic
Homogentizat
1,2-dioxigenaza
Acid fumaric
+
Acid acetilacetic
Acid p-hidroxifenil lactic
ALCAPTONURIA
Alcaptonuria
A fost prima maladie identificat din categoria "inborn error of
metabolism"
Frecvena: 2-5/1 milion de nou nscui
Absena genetic a homogentizat-oxidazei (homogentizat 1,2-
dioxigenazei); practic toat tirozina din diet se elimin urinar sub
form de homogentizat (incolor)
La copii - homogentizatul urinar i n contact cu aerul, se
autooxideaz la chinone i apoi polimerizeaz, formnd un pigment
brun-negru
Caracteristici la copii - coloraia brun-neagr a urinei
n timp, pigmentul brun-negru format se depune la nivel osos, la
nivelul esuturilor conjunctive i al organelor (ochronosis) =>
pigmentarea esuturilor conective
CH
2
CH N H
2
COOH
OH
C
H
2
C
H
NH
2
COOH
O H
O H
Tirozina
Tirozinaza
Dioxifenil
alanina (DOPA)
Melanine
(hormoni
responsabili de
pigmentarea pielii)
Absena tirozinazei (tirozin hidroxilaza) enzima care iniiaz hidroxilarea
tirozinei pentru formarea pigmenilor melaninici
Prul i pielea sunt decolorate
Lipsa melaninei din piele determin o sensibilitate crescut a pacienilor
la lumina soarelui, cu creterea riscului de instalare a cancerelor de piele
sau a arsurilor solare
Lipsa pigmentului de la nivel ocular poate determina fotofobie
Albinismul
II. Metabolismul amoniacului
23
1. Ci de formare a amoniacului n celul i n organism
2. Mecanisme de eliminare a NH
3
- Rolul acidului glutamic n metabolismul aminoacizilor i al NH
3
- Metabolismul glutaminei
- Ciclul ureei
- Metabolismul creatinei i creatininei
24
NH
3
N
N
NH
2
N
N
H
Adenina
N H
N
O
N
N
H
N H
2
Guanina
Formarea
amoniacului
DEZAMINAREA
unor compusi
biologic activi
Produs
de bacteriile
intestinale
din proteine alimentare
din ureea care ajunge
n tractul gastro-intestinal
dezaminarea aminoacizilor
dezaminarea nucleotidelor
purinice
dezaminarea nucleotidelor
pirimidinice
amide
glutamin
asparagin
din
N
N
H
NH
2
O
Citozina
(2-oxi-4-amino-pirimidina)
=> NH
3
+ CO
2
0,29 mg% n
sngele circulant
Mecanisme de eliminare a NH
3
1. NH
3
se poate elimina prin intermediul unor produi netoxici,
cum este cazul srurilor de amoniu
- petii vieuitoare amoniotelice
- psrile vieuitoare uricotelice (acid uric)
- omul ureotelice (uree)
2. NH
3
se poate fixa pe diferii aminoacizi => compui netoxici:
- acid glutamic => glutamin
- acid aspartic => asparagin
- arginin
- alanin
3. NH
3
se poate depozita sub forma creatinei i a creatininei
25
26
(o alt schem)
Creatina
Creatinina
Peti,
amfibieni
Mamifere
Psri, reptile
27
ROLUL CENTRAL AL ACIDULUI GLUTAMIC N
METABOLISMUL AMINOACIZILOR
Este colector (acceptor) universal al gruprilor AMINO
Poate prelua direct i indirect gruparea amino de la majoritatea
aminoacizilor
Poate regenera prin dezaminare/transaminare acidul -ceto-glutaric
care devine apt s accepte gruparea amino
AMINOACID
CETOACID
TRANSAMINAZE
-CETO-GLUTARIC
ACID GLUTAMIC
NADH
2
+
NH
3
NAD
+
+ H
2
O
NH
3
GLUTAMINA
GLUTAMAT-DEHIDROGENAZA

NADPH
2
NADP
+
28
COOH
CH
2
CH
2
CH
COOH
N H
2
COOH
CH
2
CH
2
COOH
O
NH
3
NADPH
H
+
Acid L-glutamic
NADP
+
+ H
2
O
Acid cetoglutaric
+ + + +
Glutamat-DH
FICAT
(NADH + H
+
)
(NAD
+
)
COOH
CH
2
CH
2
CH
COOH
N H
2
NH
3
ATP
ADP Pi
C
NH
2
CH
2
CH
2
CH
COOH
N H
2
O
Acid L-glutamic
+ +
+ +
L- Glutamina
n esuturi extrahepatice:
aminare direct (reductiv)
n FICAT:
C
NH
2
CH
2
CH
2
CH
COOH
N H
2
O
COOH
CH
2
CH
2
CH
COOH
N H
2
NH
3
+
L-Glutamina
H
2
O
GLUTAMINAZA
Acid L- glutamic
+
Glutamin-
sintetaza
Ciclul
ureei
Catabolismul gruprii NH
2
29
1. Amoniacul este toxic pentru esuturile animale, el fiind transformat succesiv n
compui netoxici acid glutamic (prin aminarea directa a acidului cetoglutaric) i
glutamin, nainte de a fi transportat prin circulaia sangvin, de la esuturile
extrahepatice la FICAT, unde este convertit n uree. Ureea este mai puin toxic
dect NH
3
i are o solubilitate mare.
2. Amoniacul liber n exces, n esuturile extrahepatice se combin cu acidul
glutamic, sub aciunea glutamin sintetazei, cu formare de glutamin.
Glutamina reprezint transportorul esenial de grupri NH
2
de la esuturile
periferice (cu excepia muchiului) la FICAT;
3. La FICAT amoniacul este eliberat n mitocondrie sub aciunea enzimei
glutaminaza.
4. Tot la nivel hepatic enzima glutamat-DH are capacitatea de a utiliza ambii
cofactori - NAD
+
sau NADP
+
i de a cataliza reacia reversibil de formare a NH
3
i a
acidului cetoglutaric. Acidul cetoglutaric poate intra n ciclul Krebs.
Catabolismul gruprii NH
2
n esuturile extrahepatice i n FICAT
30
TESUTURI
Glutamin sintetaza
Acid glutamic
+ATP
ADP + Pi
Singe
RINICHI
Singe
FICAT
Glutamina
Glutamina
NH
3
Glutamina
NH
3 NH
3
Acid glutamic
Acid glutamic
+
H
2
O
+
H
2
O
FICAT
UREE
Urina
NH
3
urinar
SCHEMA METABOLISMULUI GLUTAMINEI
Ciclul ureei
Acest circuit NU are loc i n
esutul muscular!
Snge Snge
31
- Glutamina se formeaz n:
- ficat
- mucoasa intestinal
- rinichi
- creier
- nu se formeaz n muchi !!
Glutamina reprezint transportorul esenial de grupri NH
2
de
la esuturile periferice (cu excepia muchiului) la FICAT;
METABOLISMUL GLUTAMINEI
Reacia are loc prin fixarea direct a
amoniacului sub aciunea glutamin
sintetazei din mitocondrie i cu
aport de ATP
32
- Glutamina ndeplinete roluri diverse, n funcie de esut:
- La ficat glutamina acioneaz ca tampon pentru
meninerea unor concentraii mici NH
3
; are rol de a menine o
concentraie constant a amoniacului, n perioadele dintre
dezaminri i formarea ureei. Deci are rol de detoxifiant i de
modulator al concentraiei de amoniac liber. Glutamina
sintetizat n ficat este transportat pe cale venoas la alte
esuturi unde va intra n diferite ci metabolice.
- amoniacul rezultat prin hidroliza glutaminei este eliminat ca
uree la nivel hepatic, i ca sruri de amoniu la nivel renal;
METABOLISMUL GLUTAMINEI
33
- n mucoasa intestinal glutamina este folosit ca surs de
energie deoarece membranele celulare sunt mai permeabile
pentru glutamin dect pentru acidul glutamic;
- La nivel renal glutamina este surs de amoniac, acesta
fiind implicat n reglarea echilibrului acido-bazic; ionii de
amoniu pot substitui Na
+
i K
+
, ce se elimin renal ca sruri,
economisind astfel fondul ionic al organismului;
- Amoniacul produs n celulele tubulare renale prin
dezaminarea glutaminei (sau a asparaginei) reprezint
aproximativ 60% din NH
3
eliminat la nivel urinar/zi;
- Deci originea NH
3
urinar nu este sangvin, deoarece sngele
conine cantiti foarte mici de NH
4
+
(maxim 0,3 mg% fr efecte toxice)
METABOLISMUL GLUTAMINEI
n muchiul scheletic, amoniacul n exces
este transferat pe molecula de acid piruvic,
cu formare de alanin (sub aciunea
alanin aminotransferazei).
Alanina joac un rol special n transportul
gruprii amino de la muchi la FICAT, sub
o form non-toxic, pe calea ciclului
glucoz-alanin.
La FICAT amoniacul este transformat n
uree iar piruvatul este utilizat pentru
gluconeogenez. Glucoza se rentoarce,
prin circulaie, la muchi.
Acest ciclu este un exemplu de eficien
metabolic a organismului viu !
Catabolismul gruprii NH
2
n muchiul scheletic
Ciclul ureei
35
I chose the study of the synthesis of urea in the liver
because it appeared to be a relatively simple problem.
Hans Krebs, articol n Perspectives in Biology and Medicine, 1970
Ciclul ureei (ciclul Krebs Henseleit, 1932) = principala cale de eliminare
a azotului aminic (NH
3
)
Hans Krebs
(1900 1981)
O H OH
O
C NH
3
HCO
3
-
NH
4
+
bicarbonat
amoniu
Etapa I Formarea carbamoil-fosfatului
(activarea acidului carbonic)
- enzima este carbamoilfosfat sintetaza
- activatori: Mg
2+
, acidul N-acetil glutamic
- se consum 2 ATP
- este o reacie de condensare
COOH
CH
2
CH
2
CH
3
COOH
HC NH
C
O
- are loc n mitocondrii esut hepatic
- se formeaz din compui anorganici
(NH
4
+
i HCO
3
-
)
Reacia global este:
NH
4
+
+ HCO
3
-
+ 2 ATP
C O
H
2
N
P
OH
OH
O
+ 2ADP + P
i
Carbamoil fosfat
O
36
NAcGlu
Reglator allosteric, fr de care
carbamoilfosfat-sintetaza nu este
activ
Subetapele sunt:
a)
b)
C
O
OH
O
-
+ ATP
Activatorii
Enzima
Mg
2+
Fosfocarbonat
C
O
P
OH
OH
O
+ ADP
O
O
-
NH
4
+
+ Fosfocarbonat C
O
H
2
N O
-
+ P
i
Carbamat
c)
C
O
H
2
N O
-
+ ATP
C
O
P
OH
OH
O
O
H
2
N
+ ADP
Carbamoil fosfat
37
- Activarea acidului carbonic
-Transferul gruprii NH
2
- Activarea carbamatului
Etapa II: Formarea citrulinei
enzima este ornitintranscarbamoilaza (OTC)
(transferaz) (EC: 2.1.3.3)
are loc n mitocondrie
enzim reglatoare a procesului
C
O P OH
OH
O
O
H
2
N
Carbamoil fosfat
+
NH
2
(CH
2
)
3
NH
2
COOH
HC
Ornitin
OTC
C
O
H
2
N
(CH
2
)
3
NH
2
COOH
HC
NH + P
i
Citrulin
38
Citrulina prsete
mitocondria iar restul etapelor
au loc n citoplasm
39
N H
2
NH
NH
2
COOH
COOH
N H
2
CH
2
COOH
N H
2
NH
NH
2
COOH
COOH
CH
2
COOH
C
O
(CH
2
)
3
HC
+
CH
Citrulin
Acid L-aspartic
arginin succinat sintetaza
+ ATP
AMP + Pi
H
2
O
C
(CH
2
)
3
HC
N CH
Acid arginin succinic
Etapa III: Formarea acidului arginin succinic
reacie de condensare
consum de ATP
enzima: arginin succinat sintetaza (EC: 6.3.4.5)
reacia de desfoar n CITOSOL
AMP + PP
i
40
N H
2
NH
NH
2
COOH
COOH
CH
2
COOH
COOH
COOH
N H
2
NH
NH
2
COOH
C
HC
CH
Acid arginin succinic
N
(CH
2
)
3
arginin succinat liaza
CH
HC
C
HC
Arginin
(CH
2
)
3
NH
Acid fumaric
Etapa IV: Formarea argininei
enzima este arginin succinat liaza (EC: 4.3.2.1)
are loc n CITOSOL
Ciclul
KREBS
41
N H
2
NH
NH
2
COOH
NH
2
NH
2
COOH
C
HC
Arginin
(CH
2
)
3
NH
arginaza
+ H
2
O
HC
Ornitin
(CH
2
)
3
C O
NH
2
NH
2
Uree
Etapa V: Formarea ureei
enzima este arginaza (EC: 3.5.3.1)
are loc n CITOSOL
C O
NH
2
NH
2
Uree
Acid aspartic
NH
3
Matrix mitocondrial
Reintr n ciclul ureei
n ser: 20 40 mg%
n urin: 20-30 g/ 24 ore
Reglarea ciclului ureei
- n cazul unui aport excesiv de proteine
(diet hiperproteic), componenta
ternar a aminoacizilor este utilizat ca
substrat energetic, iar organismul
produce o cantitate mare uree din
metabolizarea excesului de grupri
amino.
- n cursul inaniiei prelungite, cnd
organismul utilizeaz ca substat
energetic proteinele musculare, se
genereaz uree n exces.
- Reglarea ciclului ureei se realizeaz att
pe termen scurt (prin activarea
allosteric a carbamoil fosfat sintetazei
cu acidul N-acetilglutamic) ct i pe
termen lung (reglarea sintezei enzimelor
implicate n ciclu) .
43
Procesul de ureogenez
COMENTARII
1. Ureea este sintetizat aproape n exclusivitate la nivelul FICATULUI.
2. Amoniacul ajunge la nivel mitocondrial i este transformat n uree n
cursul a 5 etape enzimatice: 2 etape se desfoar n mitocondrie i 3 etape
n citosol, catalizate de enzimele:
- Carbamoil fosfat sintetaza
- Ornintin transcarbamoilaza
- Arginin succinat sintetaza
- Arginin succinat liaza
- Arginaza
3. Una din gruprile amino intr n ciclul ureei sub form de carbamoil fosfat,
iar cea de-a doua grupare NH
2
provine de la acidul aspartic. Atomul de
carbon din molecula de uree provine de la CO
2
(HCO
3
-
).
4. Ureea sintetizat trece n circulaia sangvin i este excretat prin urin la
nivel renal
Importana procesului de ureogenez
COMENTARII
- Procesul de ureogenez este o etapa final a degradrii
proteinelor, ureea fiind considerat produs de catabolism proteic;
- Ureogeneza poate fi considerat i proces anabolic, deoarece n
urma acestui proces rezult anumite biomoleculearginina, ureea,
acidul fumaric, cu rol de intermediari metabolici;
- Este un proces puternic endergonic (consumator de energie), spre
deosebire de celelalte procese catabolice (ale glucidelor i lipidelor)
care sunt generatoare de energie. Curele de slbire sunt bazate pe
diete proteice;
NH
4
+
+ HCO
3
-
+ 3 ATP + H
2
O
C
O
H
2
N
H
2
N
+ 2 ADP + 2 P
i
+ AMP + PP
i
- n realitate este un proces amfibolic;
- Este un proces ciclic (ornitina reintr n ciclu);
44
2
Reacia global:
-Este legat de ciclul Krebs prin intermediul acidului fumaric;
-Dac transformarea NH
3
uree, nu este suficient de rapid, acesta va
bloca transformarea acidul -cetoglutaric din ciclul Krebs => blocarea
proceselor oxidative (respiraia tisular) => oxigenare cerebral
insuficient se explic toxicitatea amoniacului (encefalopatie hepatic);
- n snge: 20 40 mg/dL uree, iar prin urin se elimin 20 30 g uree/24h;
-Cantitatea de uree format depinde de activitatea enzimelor:
carbamoilsintetaza, ornitintranscarbamoilaza (OTC), arginaza.
INSUFICIENA HEPATIC = incapacitatea ficatului de a produce ureea =>
NH
3
se acumuleaz n snge;
INSUFICIENA RENAL = incapacitatea rinichiului de a excreta ureea.
Importana procesului de ureogenez
COMENTARII
45
Calea argininosuccinat aspartat interconecteaz ciclul ureei i
ciclul Krebs (biciclul Krebs!)
1. Ciclul ureei i ciclul Krebs sunt interconectate prin intermediarul lor comun- acidul fumaric
2. Comunicarea ntre aceste dou procese depinde de transportul intermediarilor cheie ntre
mitocondrii i citoplasma celular.
3. Fumaratul (din ciclul ureei) este transportat ctre mitocondrie i poate intra n ciclul acidului citric
4. Aspartatul (din ciclul Krebs) este transportat ctre citoplasm i poate transfera gruparea amino
citrulinei
5. Sinteza ureei necesit consum energetic - ATP (pentru sinteza de carbamoilfosfat i de
argininsuccinat)
6. Ciclul ureei permite conversia oxalilacetatului la fumarat (prin intermediul aspartatului) iar
regenerarea oxalilacetatului genereaz NADH
7. Fiecare molecul de NADH genereaz 3 ATP (prin cuplare cu lanul respirator) reducnd astfel costul
energetic al sintezei de uree
Interconectarea
ciclului ureei cu
ciclul Krebs
reduce costul
energetic al
sintezei de uree !
Oxalilacetat
Lan
respirator
=> 3 ATP
Schema global
a catabolismului
aminoacizilor
Gruparea NH
2
i
scheletul ternar
sunt preluate de ci
separate dar
interconectate !
49
METABOLISMUL
CREATINEI I CREATININEI
50
H
2
C COOH
NH
2
COOH
NH
2
(CH
2
)
3
NH
NH
2 HN
COOH
NH
2
(CH
2
)
3
NH
H
2
C COOH
HN
HN
NH
2
Glicocol
HC
C
Arginin
+
HC
C
Acid guanidil acetic
arginin glicin
transamidinaza
Etapa I: TRANSAMIDINARE
enzima este arginin glicin transamidinaza
are loc n RINICHI
Ornitina
Ciclul
ureei
51
H
2
C COOH
HN
NH
NH
2
H
2
C COOH
N
NH
NH
2
C H
3
C
Acid guanidil acetic
+ CH
3

(SAM + FH
4
)
C
Acid N-metil guanidil acetic
CREATIN
metil transferaza
Etapa II: METILARE
enzima este o metiltransferaz dependent de SAM i FH
4
are loc n FICAT
snge
MUCHI
52
H
2
C COOH
N
NH
NH
2
C H
3
H
2
C COOH
N
NH
NH
C H
3
P
OH
OH
C
Acid N-metil guanidil acetic
CREATIN
ATP
ADP + Pi
Creatin fosfokinaz
(CPK)
C
~
O
FOSFOCREATIN
(rezervor de fosfat macroergic)
Activitatea CPK seric crete n infarctul de miocard
Izoenzimele CPK (ex: CPK-MB din muchiul cardiac) au rol diagnostic
Reacia este reversibil !!
CPK mitocondrial e implicat n formarea fosfocreatinei din ATP mitocondrial
CPK citosolic regenereaz ATP din ADP, utiliznd fosfocreatina
Etapa III: FOSFORILARE
enzima este creatin fosfokinaza (CPK)
are loc n MUCHI
FOSFOCREATIN + ADP CREATIN + ATP
53
Fosfocreatina depozit energetic
pentru esutul muscular
Fosfocreatina muscular >>> ATP muscular
54
H
2
C COOH
N
NH
NH
2
C H
3
H
2
C
N
NH
NH
C H
3
C
CREATIN
H
2
O
deshidratare intramolecular
C
C
O
CREATININ
(anhidrid)
Etapa IV: Formarea creatininei
are loc n MUCHI
PLASMA sangvin:
Creatin: 0,2 0,4 mg%
Creatinin: 0,6 1,5 mg%
URIN:
Creatin: 0,06 0,12 g%
Creatinin: 1 2 g%
55
Creatina, fosfocreatina i creatinina
- COMENTARII -
Sistemul creatin fosfocreatin joac un rol esenial n
metabolismul energetic normal al esutului muscular,
funcionnd ca un sistem reglator pentru concentraia de ATP
ATP + creatin fosfocreatin + ADP + Pi
Fosfocreatina este singurul compus cu legturi macroergice pe
care organismul l depoziteaz numai n esutul muscular
Fosfocreatina constituie n muchi o surs indirect de energie
necesar pentru contracia muscular; reprezint forma de
depozitare a energiei, pe seama creia se reface ATP consumat n
cursul efortului muscular
CPK
56
Creatina, fosfocreatina i creatinina
- COMENTARII -
n cursul efortului fizic susinut fosfocreatina regenereaz ATP
consumat printr-o reacie catalizat de creatinfosfokinaz (CPK =
regenerator de ATP in situ)
Regenerarea ATP pe seama CPK este mai rapid dect formarea
sa n lanul respirator sau din degradarea glucozei
70% din rezervele energetice disponibile n cursul efortului
muscular sunt reprezentate de fosfocreatin
Creatina este convertit neenzimatic n creatinin; creatinina nu
mai poate fi reconvertit la creatin, fiind excreatat la nivel renal
n condiii fiziologice, creatinina se elimin n mod constant prin
urin (aproximativ 2 g/zi)
57
Fiind produs aproape exclusiv n muchi, cantitatea de
creatinin format este proporional cu masa muscular
Creatinina este constant n urin, fiind un parametru la care ne
raportmi pentru alte substane eliminate prin urin
Clearence-ul renal reprezint eficiena cu care rinichiul
epureaz plasma
Determinarea clearence-ului de creatinin reprezint o
metod simpl de evaluare a funciei renale i musculare =
msura n care creatininemia este corelat cu debitul de filtrare
glomerular
Adaptarea posologiei la bolnavii cu insuficien renal se
realizeaz n funcie de clearence-ul de creatinin.
Creatina, fosfocreatina i creatinina
- COMENTARII -
58
Diferitele surse de energie
utilizate n contracia
muscular