21.09.

2010
1
GENUL SALMONELLA.
MICROBIOLOGIA I
DIAGNOSTICUL DE
LABORATOR AL
SALMONELOZELOR
CLASIFICARE

Genul: Salmonella (Daniel Elmer Salmon, veterinar
american, care a descoperit bacteria n 1885)
Specii: Salmonella enterica, Salmonella bongori
(Salmonella subterranea (din 2004))
Subspecii ale speciei S.enterica: enterica, salamae,
arizonae, diarizonae, houtenae, indica

Majoritatea tulpinilor izolate din patologii umane
(99,5%) aparin ss S.enterica enterica cu peste 2500 de
serovariante: S. London, S. Enteritidis, S. Typhi, S.
Paratyphi A, S. Paratyphi B, S.Choleraesuis, etc

Salmonella enterica subspecia enterica serovar Typhi
sau
Salmonella Typhi


CLASIFICAREA KAUFFMANN-WHITE (conform
structurii antigenice)
Ag O 67 varieti antigenice (O1, O2, O3, ... O65,
etc), permite repartizarea salmonelelor n
serogrupe (A, B, C, D, E,...Z, O51,...)
Fracii antigenice majore desemneaz grupa:
O2 grupa A; O4 B, O6 C, O9 D, etc
Fracii antigenice minore O1, O12 - sunt comune
Ag H definete serovariante n cadrul grupei.
Structura flagelinei este determinat de 2 gene
cromozomale diferite, care se exprim simultan
sau alternativ (variaie de faz, frecvena 10
-4
)
Ag H faza 1 (specific) Ha; Hb; Hc; Hd; Hg,m
Ag H faza 2 (nespecific) H1,2; H1,5; H1,7;

Serovar monofazic: O1,2,12:Ha (S.Paratyphi A)
Serovar difazic: O1,4,12:HbH1,2 (S.Paratyphi B)
Ag Vi (K), poliozidic, termolabil, prezent la
S.Typhi, S.Paratyphi C, S.Dublin. Este
concentrat la polii bacteriei. Mascheaza Ag
O.
S. Typhi O9,12:Hd:Vi+ / O9,12:Hd:Vi-
Conform patogenitii pentru gazd se disting:
I. Salmonele monopatogene (umane)
(S.Typhi, S.Paratyphi A, S.Paratyphi B)
II. Salmonele bipatogene (patogene pentru om
i animale, ubicvitare) - majoritatea
Grupa Serovarul Antigenul O Vi Antigene H
faza 1 faza 2
A Paratyphi A 1,2,12 a -
B Paratyphi B 1,4,5,12 b 1,2
Wien 1,4,12,27 b l,w
Typhimurium 1,4,5,12 i 1,2
Derby 1,4,12 f,g -
C Paratyphi C 6,7 + c 1,5
Virchov 6,7 r 1,2
Infantis 6,7 r 1,5
Bovismorbificans 6,8 r 1,5
D Typhi 9,12 + d -
Enteritidis 1,9,12 g,m -
Panama 1,9,12 l,v 1,5
Dublin 1,9,12 + g,p -
Gallinarum 1,9,12 - -
E London 3,10 l,v 1,6
Anatum 3,10 e,h 1,6
21.09.2010
2
Caractere morfologice
Salmonella bacterii gram-, mobile
peritriche (S.Gallinarum, imobil),
asporogene.
Caractere de cultur
1. Medii de mbogire : Muller, Kauffmann (medii cu
bil, tetrationat), bulion cu selenit de Na
2. Medii DD de izolare a culturii pure: Endo, Levin,
Ploskirev (colonii S, lactozo-); mediul cu sulfit de
bismut Wilson-Blair (colonii negre)
3. Medii DD de acumulare i difereniere: Olkeniki,
Kligler (glucoza AG, lactoza-, H
2
S+, ureaza-)
Teste primare: utilizeaz citratul de Na, produc H
2
S,
MR+, LDC+, mobilitate+, celelalte teste
negative.
Teste secundare: scindeaz glucidele AG, indol-,
ornitindecarboxilaza+, etc
EXCEPIE: S.Typhi citrat-, H
2
S-, scindeaz glucoza
pn la acid;
S.Paratyphi A H
2
S+/-, LDC-
21.09.2010
3
FACTORI DE PATOGENITATE
Fimbrii (adeziune)
Capacitatea de a penetra n celule i de multiplicare
intracelular (Macrofage, celule epitel)
Endotoxina
Citotoxine (SLT) inhib sinteza proteic (necroz)
Enterotoxine (LT, ST) activeaz
adenilat/guanilatciclazele membranare (diaree)
Siderofori (captarea Fe)
Ag Vi (antifagocitar, inhib activarea C, rezisten la
activitatea bactericid a serului)
Majoritatea salmonelelor (98%) sunt
sensibile la bacteriofagul O1. Exist
bacteriofagi cu specificitate de specie i
variant.
Habitat: intestinul omului, animalelor,
psrilor, reptilelor.
Rezistena n mediul extern: salmonelele
rezist la 70 C 30 min., rezistente la frig i
concentraii mari de sare. Se nmulesc n
produse alimentare la temperatura
camerei.


ROLUL SALMONELELOR N PATOLOGIA UMAN
SALMONELOZE:
I. Febre tifo-paratifoide
II. Salmoneloze digestive (toxi-infecii alimentare, gastro-
enterite)
III. Manifestri extra-digestive:
- bacteriemii nontifoidice
- infecii pleuro-pulmonare
- afeciuni osteo-articulare (osteite, osteomielite, artrite
septice, etc)
- infecii nozocomiale
- infecii cardio-vasculare (pericardite, arterite)
- infecii urinare
- infecii abdominale (colecistite, abces al ficatului, splinei)
- infecii ale SNC (meningite, abces al creierului, abces
epidural, etc)

FEBRELE TIFO-PARATIFOIDE
Agenii cauzali S.Typhi, S.Paratyphi A, B, (C)
Sursa de infecie omul bolnav, purttorul
Contaminarea fecal-oral (ap, alimente), contact
direct
Doza infectant 10
5
bacterii
PATOGENEZA
- Traversarea epiteliului intestinal intact
- Invazia i multiplicarea intracelular la nivelul plcilor
Peyer i esutului limfoid al tubului digestiv (perioada
de incubaie)
- Ptrunderea n ganglionii limfatici mezenterici cu
multiplicarea salmonelelor (perioada prodromal)

I sptmn de boal (bacteriemie). Invadarea
fluxului sangvin, via sistemul limfatic (diseminarea
germenilor cu eliberarea endotoxinei). Endotoxina
pe cale sangvin parvine la centrii neurovegetativi
ai ventriculului 3, determinnd febr, stare de tifos,
colaps cardio-vascular, leziuni intestinale
II sptmn de boal (difuzie parenchimatoas)
Bacteriile sunt fixate n organele SRE i se
multiplic n ficat, splin, mduv osoas, esut
limfoid, etc. Din aceast perioad ncepe
eliminarea salmonelelor cu saliva, materiile fecale,
urina, bila, etc.
III-IV sptmn de boal (faza alergic). Din ficat
salmonelele ptrund n cile biliare, apoi iari n
intestin. La nivelul plcilor Peyer se dezvolt o
reacie de hipersensibilitate tip 4 - necroz, ulceraii

21.09.2010
4
Manifestri clinice
I. Perioada de incubaie - 1-3 sptmni
II. Perioada prodromal (de invazie) 1-3 zile
III. Perioada de stare. Debut brutal, cu frison, febr
39-41 grade, cefalee, stupoare, somnolen,
delir, com. Erupii cutanate (rozeole) apar pe
abdomen, torace, spate n ziua a 8-9 de boal
(embolii limfatice cu bacterii). Diaree,
constipaie, tulburri cardiovasculare. Durata 7-
10 zile.
Complicaii: hemoragii intestinale, perforarea
intestinului, peritonit, miocardit, meningit,
psihoz etc.
IV. Perioada de reconvalescen (1-3-6 luni)
Imunitatea celular, umoral
5-10% convalesceni purttori pn la 3
luni (cu depistarea salmonelelor n bil
sau/i urin)
3-5% convalesceni (cu litiaz biliar)
purttori cronici (1-10 ani toat viaa)
Recidive sunt posibile (descrcri
bacteriemice din focare profunde, forme L),
se caracterizeaz prin simptome atenuate i
evoluie de scurt durat

DIAGNOSTICUL DE LABORATOR AL
FEBRELOR TIFO-PARATIFOIDE
PRELEVATE: snge (perioada febril, n
special I sptmn de boal), urin
(ncepnd cu a II sptmn), materii fecale
(II-III sptmn de boal), exsudat din
rozeole, ser sangvin (din ziua a 7-ea), bil,
mduv osoas

METODE DE DIAGNOSTIC
Examenul microscopic RIF, Gram
Examenul bacteriologic
Hemocultura 10-15 ml snge se
insmneaz n 100 ml bulion biliat,
mediul Rappoport, bulion glucozat 1%
pentru mbogirea salmonelelor. Se
incubeaz la 37 grade i n zilele 1, 2, 3, 5,
7 i 10 se repic pe mediile DD (Endo,
Levin, Ploskirev, W-B) pentru izolarea
culturii pure. Coloniile lactozo- se repic pe
mediul Kligler (Olkeniki) pentru
acumularea culturii pure i identificarea
preliminar.
21.09.2010
5
Identificarea final - n baza studiului
caracterelor morfotinctoriale, de
cultur, biochimice, antigenice (RA pe
lam cu seruri imune polivalente
ABCDE, seruri monovalente anti-O de
grup (O2, O4, O6, O9, etc) , seruri
monospecifice anti-H (de variant),
seruri anti-Vi, sensibilitatea la
bacteriofagi).
Rezultatul definitiv negativ-n ziua a 11.

Rozeolocultura (exsudatul din rozeole se
ntroduce n 3-5 ml bulion biliat)
Mielocultura (0,5 ml mduva osoas din
stern n 3-5 ml bulion biliat)
Bilicultura (dup 3-6 luni de la vindecare,
5-10 ml bil se ntroduc n BP)
Se examineaz ca i hemocultura
Coprocultura (din spt. 2) 3-5 g materii
fecale se nsmneaz direct pe medii DD
i pe medii de mbogire.
Urocultura (10 ml urin se centrifugheaz,
sedimentul se examineaz ulterior ca i
coprocultura)

Serodiagnostic (din II sptmn)
1. RA Widal - la diluii ale serului bolnavului se
adaug diagnosticuri OH din S.Typhi, Paratyphi A
i B. Titrul diagnostic 1/200 sau creterea n
dinamic a titrului
2. RA modificarea Felix (utilizarea separat a
diagnosticurilor O i H).
Anticorpii anti-O (Ig M) apar primii (ncepnd cu ziua
7-8) i dispar dup 2-3 luni (maximum spt. II-III).
Anticorpii anti-H (Ig M, apoi Ig G) apar mai trziu
(10-12 zi) i persist o durat mai lung. n debut
de reconvalescen (sptmna a IV) titrul Ac
anti-O i anti-H se egaleaz.
3. RHAI (cu diagnosticuri eritrocitare O)


INVESTIGAREA PURTTORILOR
Coproculturi repetate
Urocultura
Bilicultura
Serodiagnostic
1. Reacia de Vi-aglutinare (eritrocite sensibilizate cu
Ag Vi). Titrul diagnostic - 1/40
2. Reacia de latex-aglutinare
3. Determinarea claselor de imunoglobuline Ig M sau
Ig G
TRATAMENTUL I PROFILAXIA
Tratament:
- Fluorochinolone
- Cefalosporine de generaia III
- Cloramfenicol
- Ampicilin
- Cotrimoxazol
Profilaxia specific: vaccinarea selectiv (zone endemice, militari,
personal medical, etc)
- Vaccinul chimic TABTe
- Vaccinul atenuat Ty2 (administrare oral, imunitate local sIg A),
contraindicat gravidelor, copiilor, imunodeprimailor
- Vaccinul subunitar din Ag Vi (areactogen, imunitate 3-5 ani)
SALMONELOZE DIGESTIVE
(gastro-enterite, toxi-infecii alimentare)
Consecutive consumului de alimente contaminate
cu salmonele (ou, maionez, patiserie cu crem,
carne, lactate, etc).
Agenii cauzali: salmonele bipatogene
Gr. B (S. Typhimurium, S. Paratyphi B, S. Heidelberg,
S. Derbi)
Gr. C (S. Choleraesuis, S. Newport, S. Paratyphi C)
Gr. D (S. Enteritidis, S. Dublin)
Gr. E (S. Anatum)
21.09.2010
6
PATOGENEZA GASTROENTERITELOR

Sursa de infecie: animalele domestice i psrile (bolnave
sau purttori cronici)
Transmiterea pe cale alimentar (alimente contaminate
direct de la surs sau pe parcursul procesului tehnologic),
prin ap sau contact direct.
Doza infectant 10
5
-10
10
microorganisme (n funcie de
receptivitatea gazdei, vrst, utilizarea AB, inocul, etc)
Salmonelele colonizeaz mucoasa intestinului subire,
penetrnd si multiplicandu-se n enterocite, celulele M i
macrofage. Urmeaz o reacie inflamatoare intens
(gastroenterit, gastroenterocolit acut). Enterotoxina
provoac diaree (activeaz adenilatciclaza sau
guanilatciclaza enterocitelor), endotoxina absorbit
acioneaz asupra SNC semne de intoxicaie.
Gastroenteritele pot fi urmate de bacteriemii.

Manifestri clinice:
Perioada de incubaie 8 - 48 ore
Debut brusc i evoluie acut (1-3 zile) cu
diaree, vom, febr, cefalee, stare de
ru.
Evoluie sever la sugari, btrni,
imunodeprimai (n special bolnavi cu
SIDA).
TOXIINFECII ALIMENTARE
Survin ca urmare a ingestiei unui aliment n care
s-au acumulat cantiti mari de mi/o (10
5

10
7
). Nimerind n intestin, bacteriile se distrug,
iar endotoxina eliberat provoac semnele
clinice de intoxicare.
Alte forme de salmoneloze (septicemii,
meningite, infecii urinare, infectii
nosocomiale, etc) se dezvolt la persoane cu
rezistena sczut


Diagnosticul de laborator al salmonelozelor
Prelevate: mase fecale, mase vomitive,
snge, splturi gastrice, urin, puroi,
resturi de alimente suspecte.
Metode de diagnostic:
1. Examenul bacteriologic de baz
(coprocultur, hemocultur, urocultur...)
2. RIF pentru diagnostic rapid
3. Serodiagnostic - RHAI
21.09.2010
7
Profilaxia salmonelozelor nespecific

Tratamentul simptomatic,
antibioterapie la necesitate, n forme
grave de infecie