1

TESTAREA OMG























2


INTRODUCERE

Obinerea primului organism modificat genetic (OMG) (genetically
modified organism/GMO), la specia Escherichia coli, de ctre Cohen,
Boyer i Berg, n anul 1973 (Genome News Network, 2004), a demonstrat c
transferul informaiei genetice poate depi cu mult barierele naturale
i a constituit primul pas n acest nou domeniu. n 1978,compania
Genentech, fondat de Boyer, a creat o linie transgenic de E. coli,
capabil s sintetizeze insulina uman (Wikipedia, 2009j), iar astzi
majoritatea aplicaiilor biotehnologice moderne sunt destinate
sistemului sanitar. Cu toate acestea, plantele (de cultur) modificate
genetic (PMG) (genetically modified crop/GMC) se bucur de cea mai mare
notorietate, reprezentnd subiectul celor mai intense controverse
referitoare la introducerea i utilizarea biotehnologiilor moderne.
Plantele transgenice reprezint tehnologia agricol cu cea mai
rapid rspndire din istorie (Raney, 2006). Acestea au fost obinute
nc din anii 1980, momentul introducerii pentru prima dat n cultura
comercial fiind ns discutabil. Hails i Kinderlerer (2003) afirm c
pn la sfritul anilor 1980 varieti de tutun i tomate rezistente la
virusuri erau cultivate n China, iar Zhou et al. (1995), citai de Nap
et al. (2003), susin c tutunul rezistent la Virusul Mozaicului
Castravetelui (Cucumber Mosaic Virus) a fost cultivat n scop comercial
n China, ncepnd din 1992. James i Krattiger (1996) susin de asemenea
c varieti de tutun i tomate rezistente la virusuri au fost
comercializate n China, de la nceputul anilor 1990. Pe de alt parte,
conform informaiilor publicate de Chen et al. (2000), oficial, plantele
transgenice au fost comercializate n China ncepnd cu anul 1996 (Nap et
al., 2003).
n ceea ce privete utilizarea n alimentaia uman, tomatele
FlavrSavr, cu coacere ntrziat, reprezint primele plante de cultur
modificate genetic destinate acestui scop (Lthy, 1999; James i
/Krattiger, 1996). Aprobarea a fost obinut de Calgene n SUA, n anul
1994, tomatele procesate sub form de past fiind introduse pe pia n
1996.
Odat cu rspndirea PMG-urilor n culturile comerciale, a crescut
considerabil numrul liniilor transgenice disponibile (AGBIOS, 2009a;

3

Bruderer i Leitner, 2003). A crescut de asemenea i numrul speciilor
din care deriv liniile transgenice destinate cultivrii, printre
acestea enumerndu-se plante cu o importan deosebit n economia
mondial, ca porumbul, orezul, soia, bumbacul, grul, tomatele, prunul,
inul, floarea soarelui sau rapia, dar i plante cu impact economic mai
mic, cum sunt papaia, broccoli, pepenele galben sau cicoarea (AGBIOS,
2009a; Bruderer i Leitner, 2003).
Cu toate c PMG-urile au cunoscut o rspndire spectaculoas,
utilizarea acestora i a produselor biotehnologice n general, a generat
numeroase controverse, opiniile pe aceast tem ncadrndu-se n dou
curente. Pe de o parte, cultivarea la scar larg este vzut ca avnd
numeroase beneficii economico-sociale i ecologice. Susintorii
biotehnologiilor n principal companiile productoare, precum i o
mare parte a comunitii academice afirm c utilizarea plantelor de
cultur transgenice va determina creterea productivitii agricole
globale, va contribui la asigurarea securitii alimentare, scderea
srciei n rile n curs de dezvoltare i va reduce dependena
agriculturii de inputurile chimice, ajutnd la diminuarea polurii
(Altieri i Rosset, 1999).
De cealalt parte, opozanii noii tehnologii, reprezentai n
principal de adepii micrilor ecologiste i ai agriculturii biologice,
contest beneficiile menionate mai sus, insistnd asupra potenialelor
efecte negative pe care PMG-urile le pot provoca asupra echilibrului
ecosistemelor, economiei, sntii etc.
Complexitatea aspectelor referitoare la avantajele i
dezavantajele culturilor de plante transgenice, se datoreaz n
principal faptului c aceast tehnologie este relativ nou, iar
implicaiile ei nu au fost nc pe deplin nelese. Pn n prezent,
activitatea diferitelor organisme sau organizaii comerciale,
tiinifice, guvernamentale i neguvernamentale, a avut ca rezultat
publicarea unor evaluri i fundamentri contradictorii ale
beneficiilor, riscurilor i limitelor plantelor transgenice, care au
generat controverse la toate nivelurile, referitoare la introducerea
deliberat n mediu i utilizarea OMG-urilor ca alimente i furaje (Ponti
et al., 2005). Aceste controverse au proiectat o imagine lipsit de
transparen asupra OMG-urilor, motiv pentru care sunt privite cu
scepticism de ctre opinia public din ntreaga lume. Diferenele de

4

opinie se regsesc i n strategiile politico-ecomice ale diferitelor
state, prin poziia fa de OMG-uri i modul n care legifereaz i
sprijin utilizarea biotehnologiilor moderne n cadrul sectorului
public sau a celui privat.
n 1998, invocnd noul concept bazat pe principiu precauiei
(precautionary principle) adoptat n metodologia de evaluare a
riscurilor (risk assessment) asociate organismelor transgenice (Ponti et
al., 2005), UE a introdus un moratoriu care interzicea cultivarea i
comercializarea OMG-urilor n spaiul comunitar, rspunznd astfel
ngrijorrilor referitoare la: posibilele efecte adverse asupra mediului
i sntii omului, durabilitatea noii tehnologii agricole, impactul pe
care adoptarea ei l poate avea asupra societii n general (Hails i
Kinderlerer, 2003). Ulterior, Organizaia Mondial a Comerului (World
Trade Organization) a deliberat c moratoriul mpiedic libera circulaie
a mrfurilor, fiind necesar ridicarea interdiciilor referitoare la
OMG-uri (GMO Compass, 2006a).
Retragerea moratoriului a coincis cu adoptarea, la 18 aprilie
2004, a noii ligislaii referitoare la OMG-uri, i.e. Regulamentul
1829/2003 i Regulamentul 1830/2003 (Jank et al., 2005). Conform acestor
acte normative, n cadrul UE, cultivarea OMG-urilor i procesarea sau
comercializarea sub form de alimente, furaje sau material sditor se
face doar dup autorizare. Pentru a fi autorizate, OMG-urile trebuie s
ndeplineasc anumite cerine referitoare la siguran i libera alegere,
care au de fapt rolul de a asigura coexistena, la orice nivel, cu
produsele convenionale (Wikipedia, 2009s; GMO Compass, 2006c). Este
astfel protejat dreptul productorilor, comercianilor i consumatorilor
de a alege, iar instrumente ca trasabilitatea, etichetarea sau
monitorizarea post-market, introduse prin noile acte normative, au rolul
de a permite identificarea OMG-urilor de-a lungul lanului de producie
i consum. Modul concret prin care li se asigur consumatorilor
posibilitatea de face o alegere informat este etichetarea
corespunztoare a produselor, aceasta trebuind efectuat chiar i n
cazul n care ingredientul MG nu poate fi detectat n produsul final.
Previziunea este pus n practic cu ajutorul trasabilitii care
nlocuiete astfel, unde este cazul, dovezile analitice (GMO Compass,
2007).

5

Un alt instrument esenial n contextul etichetrii, este
reprezentat de testarea OMG. Din cele prezentate anterior se poate
concluziona c ingineria genetic i produsele derivate din aceasta
reprezint deja un domeniu important la nivel global, care se dezvolt
continuu, avnd potenialul de a genera numeroase beneficii dar i
efecte negative. Cu toate c pn n momentul de fa nu exist dovezi
clare care s fundamenteze temerile legate de posibile urmri
nefavorabile ale utilizrii OMG-urilor, se recomand o abordare
prudent.
n 1996, culturile comerciale de PMG-uri au ocupat 1,7 milioane
ha, fiind prezente n SUA, China, Canada, Argentina, Australia i Mexic
(Nap et al., 2003; James,1998). Ulterior, plantele transgenice s-au
rspndit rapid, fiind utilizate n prezent pe toate continentele
globului. Cea mai mare parte din culturile de plante transgenice este
concentrat n SUA, Argentina, Brazilia, India i Canada care, mpreun
cu alte cteva ri, sunt considerate marile cultivatoare de plante
transgenice ale lumii (biotech megacountries)
n ara noastr, soia i porumbul au fost singurele plante MG
cultivate n scop comercial. Dei opoziia publicului fa de aceste
culturi este, n general, evident, fermierii susin c beneficiile
economice obinute sunt considerabile. Aceste aspecte au fost
evideniate de rapoartele Serviciului Strin de Agricultur din cadrul
Departamentului de Agricultur al Statelor Unite (USDA Foreign
Agricultural Service) (Cionga, 2005; Higgins, 2000), precum i de
publicaii de diverse tipuri.
Astzi,cultivarea PMG-urilor n Romnia se face pe suprafee
relativ restrnse, n principal datorit implementrii legislaiei
europene care, odat cu aderarea rii noastre la UE, la 1 ianuarie
2007, a impus renunarea la soia MG. Aceast legislaie reglementeaz
strict domeniul biotehnologiilor, n special cultivarea PMG-urilor,
astfel c, n cadrul UE i implicit n Romnia, doar dou evenimente de
transformare la porumb (i.e. MON810 i T25) mai dein nc autorizare
pentru cultivare (Comisia European, 2009; GMO Compass, 2009). Trebuie
ns remarcat c au fost deja fcute demersurile pentru
acordarea/nnoirea autorizaiei de cultivare, conform legislaiei
adoptate n anul 2004, a peste 100 de evenimente de transformare,

6

inclusiv a celor dou menionate anterior (Comisia European, 2009; GMO
Compass, 2009).
n ceea ce privete activitatea de testare OMG, s-au creat i n
Romnia premisele dezvoltrii unui sistem adecvat, capabil s asigure
punerea n aplicare a noilor prevederi legislative europene (i.e.
trasabilitatea, etichetarea i monitorizarea post-market a produselor
alimentare care conin OMG-uri) menite s asigure o alegere informat i
contient (informed choice) de-a lungul lanului de producie i
comercializare (Lee et al., 2006; Zafar et al., 2004). Concomitent, prin
aceste mijloace se asigur i implementarea prevederii Protocolului
asupra Biosecuritii de la Cartagena (Cartagena Protocol on
Biosafety/CPB), referitoare la punerea la dispoziia statelor semnatare
a informaiilor necesare pentru luarea unor decizii informate n ceea ce
privete importul OMG-urilor pe teritoriul lor (el et al., 2008).
n vederea armonizrii politicilor naionale cu cele europene, n
ara noastr, au fost demarate procese de acreditare a unor laboratoare
de testare OMG, care s corespund standardelor acceptate la nivel
internaional.
Activitatea de monitorizare presupune efectuarea unor analize
moleculare specifice, concretizate prin detecia, identificarea i
cuantificarea materialului MG. n practica testrii OMG sunt folosite
metode analitice imunologice, bazate pe analiza proteinelor, sau metode
bazate pe tehnologia PCR (polymerase chain reaction) ce utilizeaz ADN-
ul ca analit, cele mai performante i deci cele mai utilizate fiind
metodele din a doua categorie (Morisset et al., 2009; el et al.,
2008).
Etapa de detecie stabilete dac proba analizat conine sau nu
material derivat din OMG-uri. n acest scop se utilizeaz metode
screening, iar rezultatul este calitativ (pozitiv/negativ). Se
efectueaz apoi o alt analiz calitativ care permite identificarea
precis a evenimentului de transformare, pentru a determina dac
prezena acestuia pe pia este autorizat. Ultima etap este
reprezentat de cuantificarea coninutului de OMG-uri, pe baza
rezultatului acestei analize lundu-se decizia de etichetare a
produselor, n conformitate cu legislaia n vigoare. Cele mai utilizate
protocoale de cuantificare sunt bazate pe tehnica real-time PCR. n

7

laboratoarele de testare, aceste etape se desfoar secvenial, fiind
integrate n cadrul unor metodologii specifice.
Datorit implicaiilor pe care le atrage dup sine, testarea OMG
reprezint unul dintre cele mai complexe tipuri de analize din cadrul
controlului oficial al alimentelor i furajelor (el et al., 2008). Un
aspect foarte important referitor la procesul de acreditare al
laboratoarelor OMG este reprezentat de necesitatea validrii metodelor
analitice.
Din cele prezentate anterior se poate desprinde concluzia c
testatea calitativ i cantitativ reprezint o component esenial a
cercetrilor i aplicaiilor actuale n domeniul OMG-urilor.

CAPITOLUL I. CAPITOLUL I. CAPITOLUL I. CAPITOLUL I.
STADIUL ACTUAL STADIUL ACTUAL STADIUL ACTUAL STADIUL ACTUAL N DOMENIUL OMG N DOMENIUL OMG N DOMENIUL OMG N DOMENIUL OMG- -- -URILOR URILOR URILOR URILOR
1.1. ORGANISMELE MODIFICATE GENETIC 1.1. ORGANISMELE MODIFICATE GENETIC 1.1. ORGANISMELE MODIFICATE GENETIC 1.1. ORGANISMELE MODIFICATE GENETIC
1.1.1. Introducerea OMG 1.1.1. Introducerea OMG 1.1.1. Introducerea OMG 1.1.1. Introducerea OMG- -- -urilor urilor urilor urilor
Exceptnd liniile modificate genetic (MG), rspndite astzi n
aproape toate regiunile globului, cultivarurile utilizate la scar larg
pentru obinerea produselor alimentare sunt rezultatul domesticirii
formelor slbatice iniiale. Acest lucru se poate realiza printr-un
proces continuu de selecie i ameliorare, n vederea creterii
productivitii i calitii recoltelor, a rezistenei la atacul
duntorilor i la condiiile nefavorabile de mediu, precum i a
pretabilitii la tehnologiile moderne de cultur (Querci et al.,
2004a). Procesele de selecie i ameliorare, presupun transferul sau
recombinarea caracteristicilor dorite prin ncruciri, n cadrul
speciei, sau ntre grupuri de specii nrudite i compatibile din punct de
vedere sexual.
Metodologia clasic de recombinare a genelor responsabile pentru
expresia caracterelor de interes, necesit un consum semnificativ de
timp i resurse materiale (Querci et al., 2004a). Un dezavantaj major
este reprezentat de incapacitatea introducerii unei singure
caracteristici, fr a fi necesar recombinarea genoamelor ntregi. De
aceea, selecia i introducerea pe pia a unor varieti noi, ct mai
stabile din punct de vedere genetic, este nc un proces ndelungat. Cel
mai important neajuns al ameliorrii clasice este reprezentat ns de
imposibilitatea transferului de material genetic ntre organisme

8

ndeprtate din punct de vedere taxonomic. Aceste dou limite pot fi
depite, cel puin n parte, prin aplicarea tehnologiilor de
transformare genetic.
n Articolul 3 al Protocolului asupra Biosecuritii de la
Cartagena, organismele vii modificate (living modified organisms/LMOs)
sunt definite ca fiind acele entiti vii (inclusiv cele sterile,
virusurile i viroizii) ce posed o nou combinaie de material genetic
obinut prin utilizarea biotehnologiilor moderne (CPB, 2000). Dei face
referire la aceeai categorie de fiine, Directiva Consiliului
2001/18/CE le numete organisme modificate genetic, denumire care a fost
preluat i este astzi utilizat n ntreaga lume, la toate nivelurile.
Conform Directivei, sintagma organism modificat genetic descrie
entitile vii, exceptnd fiinele umane, al cror material genetic a
suferit modificri ce nu pot fi generate prin mecanisme naturale de
hibridare sau recombinare. n acest caz, termenul organism subliniaz
capacitatea entitii biologice n cauz de a se nmuli i de a-i
trasmite informaia genetic n descenden. Aplicat speciilor
cultivate, sintagma se refer la plantele n genomul crora a fost
introdus stabil, prin transformare genetic, informaie genetic
provenit de la o alt specie, efectul dorit fiind exprimarea acesteia
n organismul gazd. Procesul de introducere i funcionare (exprimare) a
genelor n specii nenrudite este denumit transformare genetic.
Evenimentele de transformare pot avea un caracter temporar
(tranzitoriu) sau permanent (integrativ), pentru aceast lucrare
prezentnd interes doar cele din a doua categorie.
Tehnologia, care s-a dezvoltat rapid n ultimii ani, ofer
aplicaii pentru studierea structurii i funcionrii genelor, dar mai
important, pentru experimentele de inginerie genetic la bacterii,
drojdii, animale i plante superioare (Bruderer i Leitner, 2003). n
cazul plantelor, ingineria genetic presupune parcurgerea mai multor
etape: identificarea genei, construirea vectorului, transformarea,
regenerarea eficient, analiza expresiei genice, studiul transmiterii n
descenden, evaluarea n cmp, comercializarea.
Indiferent de carateristicile nou introduse, PMG-urile joac un
rol important n lrgirea fondului de germoplasm al speciilor
cultivate, oferind astfel soluii la anumite probleme legate de
tehnologia de obinere sau prelucrare i facilitnd sporirea beneficiile

9

productorilor i consumatorilor (Querci et al., 2004a; Bruderer i
Leitner, 2003).
1.1.2. Metode de ob 1.1.2. Metode de ob 1.1.2. Metode de ob 1.1.2. Metode de obinere a PMG inere a PMG inere a PMG inere a PMG- -- -urilor urilor urilor urilor
Conform CPB (2000), prin biotehnologii moderne se nelege
aplicarea:
tehnicilor in vitro care utilizeaz acizii nucleici; sunt incluse n
aceast categorie tehnica ADN-ului recombinant i injectarea direct de
acizi nucleici n celule sau organite celulare;
tehnicilor care depesc barierele naturale de recombinare sau
reproducere fiziologic, dar nu sunt utilizate n procedeele tradiionale
de ameliorare i selecie.
Tehnicile de modificare genetic la care se face referire n Anexa
I a Directivei 2001/18/CE sunt aceleai cu cele menionate n Protocol,
fcndu-se ns o delimitare clar ntre ADN-ul recombinant i
introducerea direct a ADN-ului ntr-un organism. Fuziunea celular este
de asemenea menionat separat. Transformarea presupune deci
introducerea unui segment de ADN care reprezint o combinaie sintetic
de elemente, ca promotori, gene structurale i terminatori, n genomul
unui organism denumit receptor (Bruderer i Leitner, 2003). Genele
inserate sunt preluate din organisme n care sunt prezente n mod
natural, uneori putnd suferi o serie de modificri nainte de a fi
efectiv introduse n genomul receptor (ex. Variantele genei Cry care
confer rezistena de tip Bt). Secvena promotoare, situat naintea
regiunii codificatoare, are rolul de a controla expresia acesteia n
plant. Prezena secvenei terminatoare, responsabil de ntreruperea
transcripiei i poliadenilarea captului moleculei de ARNm, este de
asemenea necesar la sfritul regiunii codificatoare. Aceast
construcie, promotor-gen-terminator, se numete caset genic (gene
cassette).
n mod frecvent, dou sau mai multe casete genice sunt utilizate
pentru realizarea unui insert (construcie genic). Pe lng gena de
interes i elememntele regulatoare ale acesteia, ntr-un insert pot fi
prezente i alte elemente genetice, rolul acestora fiind de a controla
i stabiliza funcia genei, sau de a facilita combinarea diferitelor
elemente ale construciei genice (Bruderer i Leitner, 2003).

10

Insertul va fi integrat doar pe unul dintre cromozomii prezeni n
genomul di- sau poliploid (inserare neomoloag) al organismului
transformat care este astfel heterozigot (hemizigot). De aceea,
transformarea este deseori urmat de backcrossing, n vederea obinerii
unei linii transgenice homozigote. Ulterior, cel puin n cazul
porumbului, companiile productoare de semine ncrucieaz elita
transgenic homozigot cu linii netransformate, n vederea producerii
unor hibrizi comerciali care prezint, att secvenele transgenice, ct
i caracteristicile superioare obinute prin ameliorare clasic. Aceti
hibrizi comerciali sunt astfel hemizigoi pentru caracterul transgenic
(Moens et al.,2005; Berdal i Holst-Jensen, 2001).
Prima metodologie folosit pentru modificarea genetic a plantelor
a fost creat n anii 1980 i utiliza specia bacterian Agrobacterium
tumefaciens pentru integrarea genei de interes n organismul gazd
(Querci et al., 2004a). Agrobacterium infecteaz n mod natural doar
anumite specii dicotiledonate, multe plante de interes economic fiind la
nceput inaccesibile acestui tip de transformare (ex. cerealele). Pentru
inducerea modificrilor genetice la aceste specii, au fost create alte
metode de transformare, directe sau indirecte, caracterizate ns print-
o frecven redus a transformrilor stabile (Davey et al., 1989). Cel
mai important avantaj al transformrii mediate de Agrobacterium rmne
ns reducerea numrului de copii ale transgenei inserate n genomul
receptor (Querci et al., 2004a).
Tehnicile menionate mai sus permit doar introducerea aleatorie a
genelor de interes n genomul plantelor (Bruderer i Leitner, 2003).
Casetele genice sunt inserate ntr-o singur copie sau repetate n
tandem, n forme trunchiate sau rearanjate, n unul sau mai muli loci.
Inseria aleatorie n genomul receptor poate cauza efecte pleiotrope i
de poziie, neprevzute. O posibil rezolvare pentru inseria aleatorie
este reprezentat de tehnica ZNF (zinc-finger nuclease) care permite
manipularea precis a genomului unui organism. Aplicaiile ZNF sunt nc
reduse. Pentru mai multe informaii se pot consulta urmtoarele surse:
Sigma-Aldrich (2009), Wikipedia (2009t), Zinc Finger Consortium
(http://www.zincfingers.org/default2.htm).
Metodele de transformare disponibile n prezent permit
introducerea sau modificarea caracteristicilor asociate cu expresia unei
singure gene. Cele mai importante caracteristici agronomice au ns o

11

expresie poligenic. Manipularea acestora prin metodele ingineriei
genetice necesit aprofundarea cercetrilor i crearea tehnicilor de
izolare, reconstruire i transfer n complex al poligenelor.
Pentru obinerea plantelor transformate genetic, cele mai utilizate
metode sunt urmtoarele: transformarea mediat de Agrobacterium
tumefaciens, transferul indirect prin bombardare cu microparticule
(metoda biolistic sau metoda tunului de particule), trasferul direct de
ADN (Zafar et al., 2004).
1.1.2.1. Transformarea mediat 1.1.2.1. Transformarea mediat 1.1.2.1. Transformarea mediat 1.1.2.1. Transformarea mediat de de de de Agrobacterium tumefaciens Agrobacterium tumefaciens Agrobacterium tumefaciens Agrobacterium tumefaciens
A. tumefaciens este o specie de bacterii patogene aerobe, care
triete n sol i are capacitatea natural de a transfera un segment de
ADN, denumit T-ADN (transfer DNA) i localizat la nielul plasmidului
Ti (tumor inducing), n genomul plantelor superioare pe care le
infecteaz (Zafar et al., 2004; Bruderer i Leitner, 2003). T-ADN-ul
este integrat stabil ntr-unul dintre cromozomii celulei gazd i
exprimat ulterior, determinnd proliferarea excesiv a esuturilor, sub
forma de rdcini sau excrescene canceroase specifice (McClean, 1998).
Ptrunderea celulelor bacteriene n planta gazd se realizeaz doar
prin rni deschise. A. tumefaciens infecteaz n mod natural peste 330
de genuri i 640 de specii de plante, majoritatea fiind dicotiledonate
(McClean, 1998).
Procesul de transfer are loc doar la nivelul materialului genetic
al celulelor infectate din cadrul organismelor gazd i a constituit
punctul de plecare pentru crearea unui protocol de transformare la
plante (Zafar et al., 2004). Ulterior, procedeul de transformare a fost
optimizat, realizndu-se progrese considerabile n obinerea OMGurilor,
iar transformarea mediat de bacteriile din specia A. tumefaciens a
devenit, probabil, cea mai eficient metod de tranformare (Bruderer i
Leitner, 2003).
Strategia transformrii mediate de A. tumefaciens presupune
eliminarea genelor bacteriene care produc tumora, n locul lor fiind
plasat insertul ce trebuie transferat. Aceasta are deci la baz
proprietatea conform creia orice fragment strin de ADN plasat
ntre secvenele ce mrginesc iniial T-ADN-ul, poate fi transferat n
celulele plantelor prin infecie. Este astfel posibil introducerea
genei de interes n celulele plantei fr a cauza tumora (Querci et al.,
2004a). Secvenele ce mrginesc T-ADN-ul sunt denumite TR (T-ADN

12

right) i TL (T-ADN left), doar prima fiind considerat
indispensabil procesului de transfer (McClean, 1998).
Dezavantajul major al acestui eficient sistem de transformare
rezid n capacitatea natural a bacteriilor A. tumefaciens de a infecta
doar anumite specii de plante (Bruderer i Leitner, 2003). Din aceast
cauz se ntmpin dificulti n generalizarea metodei de transformare
la toate plante de cultur, cea mai important excepie fiind grupa
cerealelor. Cercetrile din ultimii ani au determinat ns perfectarea
unor protocoale de transformare i pentru speciile considerate
recalcitrante (ex. Pcurar et al., 2008). Sistemul a fost intens
utilizat pentru trasformarea ctorva specii importante de cultur ca
tomate, canola, bumbac i cartofi, obinndu-se peste 40 de linii MG
(Bruderer i Leitner, 2003).
1.1.2.2. Transferul direct de ADN 1.1.2.2. Transferul direct de ADN 1.1.2.2. Transferul direct de ADN 1.1.2.2. Transferul direct de ADN
Transferul direct de ADN n celulele plantelor se poate realiza
utiliznd ageni fizici sau chimici, care au rolul de a media
ptrunderea i integrarea informaiei genetice. Pe aceste ci (n special
prin electroporare), au fost obinute o serie de varieti transgenice de
porumb i orez (ex. Bt11, MS3, MS6, T14 sau T25, respectiv LLRICE05 sau
LLRICE62). Pentru ca transferul s aib loc, pereii protectori ai
celulelor receptoare trebuie ndeprtai, rezultnd astfel protoplatii.
Acest tip de celul reprezint stuctura ideal pentru introducerea ADN-
ului i selecia evenimentelor transgenice deoarece pereii celulari
constituie un impediment major n calea integrrii informaiei genetice
strine n celul (Zafar et al., 2004).
Dezavantajul metodei este reprezentat de rata sczut de
regenerare a plantelor din protoplati (Querci et al., 2004a), motiv
pentru care aceast metod nu s-a rspndit foarte mult n practic.
Cele mai utilizate metode din aceast categorie sunt prezentate n
continuare.
Transformarea cu ajutorul substan Transformarea cu ajutorul substan Transformarea cu ajutorul substan Transformarea cu ajutorul substanelor chimice elor chimice elor chimice elor chimice
Un exemplu din aceast categorie este polietilenglicolul (PEG),
substan care are capacitatea de a modifica proprietile membranei
plasmatice, determinnd permeabilizarea reversibil a acesteia, ceea ce
permite ptrunderea macromoleculelor strine n citoplasm. Primul
succes utiliznd aceast metod a fost nregistrat n 1984 i a constat
n transferul i exprimarea T-ADN-ului provenit de la A. tumefaciens n

13

protoplati de tutun (Zafar et al., 2004).
Transformarea prin microinjec Transformarea prin microinjec Transformarea prin microinjec Transformarea prin microinjecie ie ie ie
Acest tip de transformare a cunoscut o larg rspndire odat cu
crearea i dezvoltarea tehnicilor de micromanipulare (Zafar et al.,
2004). Primele rezultate de transformare genetic utiliznd aceast
metod au fost obinute la oarece, specie la care microinjecia a
devenit o procedur de rutin. La plante ns, situaia difer mult
datorit particularitilor celulelor vegetale: pereii celulari conin
straturi de lignin i celuloz care sunt mai greu de penetrat cu
instrumentele disponibile n prezent, iar vacuolele conin diferite
hidrolaze i compui toxici a cror eliberare accidental n citoplasm
poate determina moartea celulei/protoplastului. O soluie pentru cea de-
a doua problem, este evacuolarea protoplatilor, eficiena regenerrii
scznd ns i mai mult. Metoda a fost aplicat cu succes pentru
transformarea celulelor germinale, precum i a grunciorilor de polen,
folosii ulterior pentru fertilizri in vitro.
Transformarea prin electroporare Transformarea prin electroporare Transformarea prin electroporare Transformarea prin electroporare
Metoda const n expunerea protoplatilor la impulsuri electrice
care determin permeabilizarea reversibil a membranei plasmatice,
facilitnd transferul ADN-ului (Zafar et al., 2004). Principalele
avantaje ale acestei metode, comparativ cu tratamentele chimice, sunt
simplitatea i frecvena mai mare de intregrare a ADN-ului (Zafar et
al.,2004). Electroporarea aplicat protoplatilor prezint totui
anumite limite, cauzate de specificitatea sistemului de cultur al
acestora, motiv pentru care transferul de ADN prin electroporare nu s-a
extins semnificativ.
1.1.2.3. Transferul genelor prin metoda biolistic 1.1.2.3. Transferul genelor prin metoda biolistic 1.1.2.3. Transferul genelor prin metoda biolistic 1.1.2.3. Transferul genelor prin metoda biolistic
O cale de eliminare a limitelor datorate dificultilor regenerrii
plantelor din protoplati i capacitii bacteriilor Agrobacterium de a
infecta doar anumite specii de plante, este reprezentat de utilizarea
bombardamentului cu microparticule. Procedeul se numete i metoda
tunului de particule sau metoda biolistic. n acest caz, transformarea
poate fi aplicat unei game foarte variate de explante, ca: suspensii de
celule embriogenice, meristeme, embrioni, embrioni imaturi i polen
(Zafar et al., 2004;Bruderer i Leitner, 2003).
n principiu, metoda presupune bombardarea celulelor sau
esuturilor cu particule de tugsten sau aur, de dimensiuni micoscopice,

14

cptuite cu ADN-ul care trebuie transferat. Avantajul acestei metode
este faptul c aproape orice tip de esut care are potenialul de a
regenera plante poate fi utilizat ca int pentru ADN-ul strin.
Primul dispozitiv folosit pentru transformare utiliza ncrcturi
cu praf de puc pentru accelerarea particulelor. Ulterior, au fost
create sisteme n cadrul crora accelerarea particulelor se face prin
intermediul aerului sau a altor gaze comprimate sau prin descrcri
electrice (puls electrostatic) (Zafar et al., 2004; Bruderer i Leitner,
2003).
n anul 1988, soia a fost prima specie modificat genetic,
utiliznd metoda biolistic (Zafar et al., 2004), iar ulterior au fost
obinute linii transgenice la ali peste 20 de taxoni printre care i
porumbul, tutunul su bumbacul (Bruderer i Leitner, 2003).
Unii autori includ metoda biolistic n grupa metodelor de transfer
direct (Zafar et al., 2004).
1.1.3. Genera 1.1.3. Genera 1.1.3. Genera 1.1.3. Generaiile de PMG iile de PMG iile de PMG iile de PMG- -- -uri uri uri uri
n vederea evalurii riscurilor i beneficiilor asociate plantelor
transgenice, este n primul rnd necesar s deosebim diferitele tipuri
sau generaii de PMG-uri. O astfel de clasificare a fost fcut de
Pretty (2000).
Prima generaie de PMG-uri a fost comercializat nc din a doua
jumtate a anilor 1990, servind n principal ca produse comerciale care
s aduc beneficii materiale companiilor productoare (ex. soia Roundup
Ready produs de Monsanto).
Principalele caracteristici noi introduse n plantele transgenice
din prima generaie sunt:
tolerana la ierbicide (herbicide tolerance/HT);
rezistena la insecte (insect resistance/IR);
coacerea rapid, introdus la tomate;
modificarea enzimelor bacteriene pentru utilizarea n diferite ramuri
ale industriei;
culoare modificat a speciilor floricole (ex. garoafe).
PMG-urile din a doua generaie au aprut spre sfritul anilor
1990, fiind mai puin rspndite ca produse comerciale. Principalele
caracteristici introduse sunt:

15

rezistena viral, introdus la orez, manioc, papaia sau prun;
rezistena la nematozi, introdus la cereale i alte plante de
cultur;
genele terminator;
tolerana la nghe introdus la cpuni, sfecla de zahr, tomate sau
cartof;
producerea substanelor cu importan farmaceutic (pharming).
PMG-urile din a treia generaie sunt n curs de dezvoltare,
direciile de inovare fiind urmtoarele:
tolerana la stresul abiotic;
modificri fiziologice ale plantelor de cultur pentru a crete
eficiena utilizrii resurselor naturale (ap, nutrieni, lumin),
determinndu-se astfel, o cretere mai rapid, o prelungire a duratei de
vegetaie, modificri ale coninutului hormonal sau ntrzierea
mbtrnirii frunzelor n scopul producerii unor cantiti mai mari de
carbohidrai;
obinerea plantelor de cultur apomictice care permit reutilizarea
smnei hibride;
obinerea plantelor vaccin;
crearea i utilizarea unor gene marker noi, care s le nlocuiasc pe
cele de rezisten la antibiotice (antibiotic resistant marker
genes/ARMGs);
extinderea aplicaiilor n domeniul farmaceutic.
n contrast cu primele dou generaii de PMG-uri, cea de-a treia
este mult mai bine direcionat nspre beneficiul utilizatorului final
(Pretty, 2000). Exist astfel direcii de cercetare ce vin n
ntmpinarea unor probleme cu care se confrunt rile n curs de
dezvoltare. Un exemplu n acest sens este stresul abiotic (i.e. seceta,
ngheul, excesul de sruri i metale grele) care reprezint o limit
major pentru producia agricol din regiunile srace (FAO, 2002) i care
primete tot mai mult atenie n ultima vreme.
Acelai trend se remarc i n cazul aa-numitelor plante vaccin.
1.1.4. Elementele genetice introduse 1.1.4. Elementele genetice introduse 1.1.4. Elementele genetice introduse 1.1.4. Elementele genetice introduse n OMG n OMG n OMG n OMG- -- -uri uri uri uri

16

Analiza elementelor genetice introduse n plantele de cultur MG
aprobate pentru comercializare, reprezint baza pentru crearea i
dezvoltarea metodelor de testare OMG.
Elementele frecvent ntlnite n plantele MG pot fi utilizate
pentru crearea unor metode de screening (i.e. detectarea concomitent a
prezenei ct mai multor OMG-uri). Trebuie totui avut n vedere faptul
c ntre elemente genetice de acelai tip pot exista deosebiri de
secven (Morisset et al., 2009; Bruderer i Leitner, 2003). Ulterior
deteciei, evenimentele de transformare vor fi identificate specific pe
baza elementelor care le compun. Aceste secvene vor fi utilizate i n
protocoalele de cuantificare.
n continuare sunt prezentate genele i elementele regulatoare
(promotori i terminatori) utilizate la obinerea plantelor transgenice
pentru care exista aprobare de comercializare la nivelul anului 2003.
Datele au fost publicate de Bruderer i Leitner (2003).
Cele mai rspndite elemente genetice prezente n PMG-uri provin de
la A.tumefaciens i Virusul Mozaicului Conopidei (Cauliflower Mosaic
Virus/CaMV). Dintre cele 66 de PMG-uri analizate n studiul menionat,
62 conin cel puin o secven genic derivat de la unul dintre
organismele menionate anterior. Datele statistice prezentate n studiu
nu au luat n considerare PMG-urile cultivate n Japonia i China i nici
plantele decorative, informaiile moleculare aferente acestor categorii
fiind lipsite de certitudine.
Unul dintre cei mai importani factori pentru atingerea nivelelor
dorite de expresie a transgenelor, este reprezentat de promotorul ales
pentru a controla transcripia. Se remarc prezena cte unei copii a
promotorului constitutiv 35S (P- 35S) de la CaMV, sau a unui promotor
derivat din acesta, ntr-un numr ridicat de plante transgenice
comerciale. Din acest motiv, P-35S este des utilizat ca int pentru
screeningul OMG-urilor. Compararea secvenelor promotorului P-35S
prezent n diferite OMG-uri a evideniat faptul c acestea nu sunt
perfect identice (ex. Morisset et al., 2009).
Trebuie menionat de asemenea c dintre cei 29 de promotori
utilizai n transgenez, 20 erau prezeni doar n cte un eveniment de
transformare.
Peste 40 de gene distincte au fost utilizate pentru obinerea
evenimentelor de transformare. Transgena cea mai frecvent utilizat este

17

nptII, provenit de la specia E. coli. Aceasta confer rezisten la
anumite antibiotice aminoglicozidice, fiind prezent, n 1996, n 61% din
plantele MG analizate. Conform sursei menionate anterior, doar 44% din
plantele transgenice conineau aceast gen. Dup nptII, cele mai
frecvente transgene sunt cele denumite generic Cry. Aceast categorie
include foarte multe variante optimizate ale genelor native de la
Bacillus thuringiensis, care produc forme diferite ale endotoxinei
delta. Dintre genele Cry, cele utilizate sunt formele Cry1A(b) i Cry3A.
Dup nptII i Cry urmeaz genele CP4 EPSPS i bar, prezente fiecare n
peste zece evenimente de transformare.
1.1.5. R 1.1.5. R 1.1.5. R 1.1.5. Rsp sp sp spndirea PMG ndirea PMG ndirea PMG ndirea PMG- -- -urilor urilor urilor urilor
Biotehnologiile moderne reprezint sectorul asociat sistemului
medical i agroalimentar cu cea mai rapid dezvoltare, iar transgeneza
are potenialul de a revoluiona n continuare aceste segmente, dar i de
a produce efecte negative asupra mediului i sntii (Pretty, 2000).
Exist aproximativ 2000 de companii n SUA i peste 700 n UE care
i desfoar activitatea n domeniul biotehnologiilor, majoritatea
aplicaiilor fiind ns destinate sistemului sanitar. n sectorul agro-
alimentar piaa este dominat doar de cteva companii multinaionale (ex.
Monsanto, Syngenta Seeds, Aventis CropSciences, DuPont, DOW
AgroSciences, Bayer CropScience sau Pioneer Hi-Bred), unele fiind lideri
i pe piaa de material semincer i pesticide (Pretty, 2000).
Majoritatea plantelor transgenice comercializate n momentul de
fa prezint cel puin una dintre urmtoarele caracteristici (James,
2007; James, 2005; Ponti et al., 2005; James, 2003; Querci et al.,
2004a; Pretty, 2000):
rezistena la un ierbicid total (ex. soia, sfecla de zahr i bumbacul
Roundup Ready sau rapia LibertyLink); permite utilizarea ierbicidului
pentru combaterea buruienilor far a afecta cultura; reprezint cea mai
rspndit caracteristic a PMG-urilor;
rezistena la insecte, n special n cazul porumbului i a bumbacului,
prin expresia unei gene de la Bacillus thuringiensis (rezisten de tip
Bt); toxina Bt cu aciune insecticid este exprimat n toate tesuturile
plantei, eliminnd insectele erbivore i reducnd necesitatea aplicrii
pesticidelor convenionale.

18

La mijlocul anilor 1990, cultivarea n scop comercial a OMG-urilor
era aproape inexistent, extinderea acestora n culturile agricole
fcndu-se ns foarte rapid n anii care au urmat introducerii lor pe
pia. Astfel, din 1996 i pn la sfritul anului 2008, suprafaa
global cultivat cu OMG-uri a crescut de aproape 80 ori, ajungnd n
prezent la 134 milioane hectare (Figura 6), ceea ce reprezint
aproximativ 8% din suprafaa agricol mondial. Principalele ri
cultivatoare de PMG-uri au fost i n 2009 SUA, Argentina, Brazilia,
India, Canada i China (James, 2009b).
n UE, cultivarea OMG-urilor se face la scar mult mai mic,
importurile pentru procesare sub form de alimente i furaje fiind ns
foarte frecvente.
n prezent, la nivelul UE, au fost autorizate sau sunt n curs de
autorizare 118 notificri (62 pentru evenimente de transformare la
porumb, 22 la bumbac, 12 la rapi, 11 la soia, cinci la plante
decorative, trei la sfecl de zahr, dou la cartof i unul la orez)
(Comisia European, 2009; GMO Compass, 2009). Date actualizate
referitoare la situaia procesului de autorizare, compania notificatoare
i modul de utilizare pot fi accesate pe site-ul Comisiei Europene (vezi
Comisia European, 2009) i pe site-ul GMO Compass (vezi GMO Compass,
2009). Trebuie menionat ns c numrul real al evenimentelor de
transformare prezente n aceast list este mai mic, deoarece unele au
fost autorizate n conformitate cu legislaia n vigoare nainte de 24
aprilie 2004, iar n prezent sunt naintate pentru autorizare i sub noua
legislaie, introdus dup data menionat anterior.
Speciile la care se ntlnesc cele mai mari suprafee cu linii
transgenice sunt soia, bumbacul, porumbul i rapia (James, 2009a; James
2009b; James 2008; Cardarelli et al. 2005).
Cionga (2005) precizeaz c, n 2001, n ara noastr erau cultivate
cu soia transgenic aproximativ 15.000 ha, suprafaa ajungnd la peste
50.000 ha la nivelul anului 2004. Romnia s-a meninut n categoria
rilor cu peste 50.000 ha culturi transgenice i n anii urmtori
(James, 2008), soia Roundup Ready deinnd n continuare cea mai mare
proporie n aceast categorie. Aceste informaii corespund celor oferite
de Direcia General Elaborare Strategii, Politici Sectoriale i de
Pia, din cadrul Ministerul Apelor, Pdurilor i Dezvoltrii Rurale
(MAPDR), cu ocazia celei de-a VII-a Conferine a Asociaiei

19

Bioagricultorilor din Romnia Bioterra (Dinu, 2006). Conform datelor
prezentate, n 2005, culturile de soia Roundup Ready ocupau o suprafa
de circa 86.000 ha, preconizndu-se c suprafaa va ajunge la 126.000 ha
spre sfritul anului 2006, ceea ce reprezenta aproximativ 10% din
suprafaa agricol total a rii. n perioada respectiv existau peste
1.100 de cultivatori de soia transgenic, rspndii n 31 de judee ale
rii, cele mai importante suprafee fiind localizate n Brila (~31.000
ha), Clrai (~24.000 ha), Ialomia (~20.000 ha), Timi (~17.000 ha) i
Iai (~6.000 ha). Au fost de asemenea identificate peste 4.000 ha de
culturi neautorizate de soia MG. Pentru acelai an, recolta de soia
transgenic a fost estimat la aproximativ 200.000 t.
Cultivarea soiei Roundup Ready n ara noastr nu mai este posibil
ncepnd cu 1 ianuarie 2007, data aderrii Romniei la UE. De aceea, n
anii 2008 i 2009, suprafaa atribuit culturilor transgenice n ara
noastr, a sczut sub nivelul de 50.000 ha (James, 2009a; James 2009b;
James, 2008).
1.1.6. Impactul poten 1.1.6. Impactul poten 1.1.6. Impactul poten 1.1.6. Impactul potenial al PMG ial al PMG ial al PMG ial al PMG- -- -urilor urilor urilor urilor
Biotehnologiile reprezint o colecie de tehnici ce pot fi
utilizate n domeniile agro-alimentar, sanitar i industrial. Unele
tehnologii, ca markerii moleculari, manipularea i transferul genelor,
pot fi aplicate n toate sectoarele agro-alimentare, n timp ce altele
sunt specifice doar anumitor ramuri: reproducerea vegetativ pentru
cultivarea plantelor, transferul de embrioni pentru creterea
animalelor, schimbarea sexului n piscicultur (FAO, 2002).
Opiniile referitoare la utilitatea i riscurile inerente
utilizrii PMG-urilor sunt foarte diferite. Pe de o parte, aceste
organisme sunt promovate ca fiind sigure i necesare societii umane, n
timp ce opozanii le consider neeseniale i potenial cauzatoare de
efecte negative asupra sntii i mediului. Niciuna dintre aceste
opinii nu poate fi ns corect din simplul considerent c PMG-urile nu
reprezint o categorie omogen, punerea n balan a beneficiilor i
riscurilor trebuind fcut pentru fiecare caz n parte (Pretty, 2000).
Este de asemenea foarte important ca utilizarea la scar larg a PMG-
urilor s se fac dup o evaluare judicioas, existnd numeroase exemple
ce evideniaz oportunitatea acestei abordri: introducerea iepurilor n
Australia, introducerea albinei africane n America de Sud, introducerea
zambilei de ap (Eichhornia spp.) n America de Nord i Africa de Vest,

20

introducerea rchitanului (Lythrum salicaria) n Noua Zeeland i
America de Nord.
Implica Implica Implica Implicaii tehnice pentru practica agricol ii tehnice pentru practica agricol ii tehnice pentru practica agricol ii tehnice pentru practica agricol
Cele mai importante categorii de PMG-uri utilizate pn n acest
moment prezint caracteristici de rezisten la atacul unor duntori
(ex. rezistena Bt mpotriva unor lepidoptere), sau la aciunea anumitor
erbicide totale (ex. glifosat sau glufosinat). Pe lng acestea, au fost
i vor fi mbuntite i alte caracteristici de producie (AgResearch,
2000a; Deisingh i Badrie 2005):
valoarea nutritiv;
capacitatea de producie;
perioada de pstrare, lucru ce poate favoriza transportul pe distane
mai mari;
rezistena la lovire (ex. tomate), n vederea reducerii pierderilor;
rezistena la condiii extreme de mediu (ex. secet, exces de sruri
sau temperaturi sczute).
Pentru productori, cultivarurile transgenice rezistente la
ierbicide, boli sau duntori nseamn n primul obinerea unor recolte
mai profitabile (MAF, 1996), ceea ce se poate reflecta n reducerea
preurilor de vnzare ctre consumatorul final (AgResearch, 2000a).
n urma studiilor efectuate, Raney (2006) a concluzionat c utilizarea
PMG-urilor prezint avantaje deosebite pentru fermele cu suprafee mai
reduse comparativ cu fermele de dimensiuni mari, precum i pentru micii
cultivatori din rile n curs de dezvoltare.
Totui, pentru ca fermierii s poat beneficia de pe urma
culturilor transgenice, este necesar existena unui sistem instituional
capabil s asigure i s favorizeze accesul acestora la resursele i
inovaiile potrivite.
Un alt avantaj oferit de tehnologia transgenic este posibilitatea
de a reduce durata programelor de ameliorare, grbind introducerea unor
genotipuri superioare n circuitul comercial (Querci et al., 2004a; MAF,
1996M).
n ceea ce privete posibilele dezavantaje ale PMG-urilor
rezistente la erbicide, exist o serie de factori care favorizeaz
adaptarea populaiilor de buruieni la metoda de control, ceea ce va face

21

inutilizabil evenimentul de transformre. Va fi astfel necesar
nlocuirea varietilor care au ncorporat transgena, aciune foarte
costisitoare, mai ales dac acestea sunt utilizate la scar larg.
Pericolul ca metoda de control s devin ineficient exist i n cazul
rezistenei de tip Bt (AgResearch, 2001; AgResearch, 2000b). n ambele
situaii este ns posibil aplicarea unor strategii menite s reduc
presiunea de selecie. Pentru culturile Bt este recomandat asocierea cu
liniile convenionale, care s reprezinte refugii pentru dezvolarea
indivizilor susceptibili la msura de control, iar n cazul rezistenei
la erbicide sunt necesare msuri integrate pentru controlul buruienilor.
Inputurile din agricultur Inputurile din agricultur Inputurile din agricultur Inputurile din agricultur
PMG-urile rezistente la boli, duntori sau ierbicide vor necesita
utilizarea unor cantiti mai reduse de pesticide, favorizndu-se astfel
reducerea inputurilor (substane de combatere, combustibili fosili) i
implicit a coninutului de reziduuri din produse i mediu (Deisingh i
Badrie, 2005; AgResearch, 2000a; MAF, 1996). n ceea ce privete
plantele rezistente la ierbicide, numeroase studii au artat ns c
nivelul de utilizare a substanelor de combatere nu a sczut n mod
semnificativ, n unele cazuri nregistrnduse chiar creteri (Duke i
Cerdeira, 2005; Pretty, 2000). Acest aspect nu este singurul care
trebuie avut n vedere. Astfel, Duke i Cerdeira (2005) consider c
rata de utilizare a unei substane active are o importan mai redus,
accentul trebuind pus pe gradul de toxicitate al acesteia. n acest
context, glifosatul i glufosinatul de amoniu, singurele substane de
combatere utilizate n combinaie cu PMG-urile rezistente la ierbicide,
nu se caracterizeaz printr-o rat redus de aplicare, dar sunt
considerate cu risc sczut n ceea ce privete toxicitatea pentru
consumatori i efectele asupra mediului.
Fluxul de gene Fluxul de gene Fluxul de gene Fluxul de gene
Dintre toate riscurile asociate PMG-urilor, acesta este probabil
cel mai important deoarece urmrile sale sunt ireversibile i dificil de
controlat (Duke i Cerdeira, 2005). n procesul de modificare genetic
se utilizeaz ca markeri pentru selecie gene de rezisten la
antibiotice. Odat introduse n mediu i alimentaie, genele pot fi
preluate de bacterii, ducnd la apariia microorganismelor rezistente la
antibiotice (superbugs) care nu vor mai fi controlate eficient de
sistemul medical (AgResearch, 2000b; Pretty, 2000; MAF, 1996). Trebuie

22

avut ns n vedere c majoritatea acestor gene au fost larg rspndite
n natur nainte de utilizarea lor de ctre ingineria genetic (ex.
nptII), fr a determina efectele adverse amintite anterior.
Apariia transferului orizontal de material genetic de-a lungul
filogeniei a fost demonstrat tiinific de diferii autori, prin
modelare. Un astfel de studiu a fost publicat de Drge et al. (1998),
care au concluzionat c premisele transferului orizontal a ADN-ului
recombinant exist, frecvena de apariie fiind ns neglijabil.
Un alt aspect de acest fel este reprezentat de posibila migrare
(introgresie) a genelor de rezisten la ierbicide, de la speciile
cultivate la plante slbatice nrudite,
conferindu-le acestora din urm rezisten la aciunea ierbicidelor. n
cazul n care plantele respective se dezvolt pe suprafee cultivate, pot
constitui o problem greu de ndeprtat, fiind necesar modificarea sau
chiar nlocuirea tehnologiei de baz (AgResearch, 2001; Pretty, 2000).
n cazul n care aceste plante constituie populaii slbatice exist
posibilitatea modificrii echilibrului natural n respectivele
ecosisteme.
Totui, se apreciaz c genele de rezisten la ierbicide nu pot
conferi singure avantaje majore pentru supravieuire, care s influeneze
selecia natural (Duke i Cerdeira, 2005). De asemenea, trebuie
subliniat c fluxul de gene este un fenomen foarte complex, pe lng
simpla nrudire taxonomic a celor dou specii i prezena lor n acelai
ecosistem existnd un numr foarte mare de factori care influeneaz
introgresia. n acest context, Conner et al. (2003) numesc 24 de
caracteristi genetice sau fiziologice, pe care le grupeaz n
urmtoarele categorii:
factori care determin hibridarea i intervin naintea fecundrii;
factori care determin hibridarea i intervin dup fecundare;
factori care influeneaz apariia i dezvoltarea hibrizilor;
factori care influeneaz persistena i propagarea plantelor hibride.
Dei clasificarea acestor factori este fcut diferit n alte lucrri
(ex. Wilkinson i Ford, 2007, sau Wilkinson et al., 2003), complexitatea
fluxlui de gene reiese clar i n aceste cazuri.


23

Impactul economic al PMG Impactul economic al PMG Impactul economic al PMG Impactul economic al PMG- -- -urilor urilor urilor urilor i investi i investi i investi i investiiile iile iile iile n domeniul n domeniul n domeniul n domeniul
biotehnologiilor biotehnologiilor biotehnologiilor biotehnologiilor agricole agricole agricole agricole
Biotehnologiile moderne reprezint n primul rnd o surs foarte
important de venituri. Piaa global a PMG-urilor a fost estimat
pentru anul 2008 la 7,5 miliarde USD (James, 2008), ea avnd un mare
potenial pentru rezolvarea anumitor probleme cu care se confrunt
domeniul agro-alimentar. De aceea, implicaiile de natur economic pe
care PMG-urile le genereaz, la toate nivelurile, sunt nsemnate, iar
activitatea de cercetare i dezvoltare este n continu cretere.
n domeniul biotehnologiilor agricole, existena marilor corporaii
multinaionale creaz premisele unei monopolizri a pieei libere, precum
i impunerea unor dependene restrictive pentru fermierii sraci
(AgResearch, 2001). Un astfel de exemplu controversat l reprezint aa-
numita tehnologie terminator (genetic use restriction
technology/GURT) (Rao, 2008; ISF, 2003) care constituie o soluie extrem
de eficient i sigur de eliminare a fluxului de gene (MAF, 1996). n
acest context, tehnologia terminator presupune de fapt crearea unor
linii transgenice sterile (MAF, 1996) utiliznd mecanisme moleculare de
inactivare genic (gene switching mechanisms) ce mpiedic germinarea
seminelor. Pentru companiile productoare de semine aceast tehnologie
ar putea constitui ns i un mijloc foarte eficient de protejare a
drepturilor de proprietate intelectual (intelectual property
rights/IPRs), dat fiind faptul c majoritatea fermierilor din rile n
curs de dezvoltare, precum i un numr surprinztor de mare de fermieri
din rile industrializate, pstreaz o parte din recolta de semine
pentru nfiinarea culturilor urmtoare (Pretty, 2000). Datorit faptului
c reprezint un subiect controversat, tehnologia nu a fost deocamdat
comercializat, dei aplicaii patentate exist nc din anul 1998 (Rao,
2008).
Un alt subiect sensibil, determinat de complexitatea problematicii
drepturilor de proprietate intelectual, este reprezentat de
posibilitatea creterii preurilor de vnzare a produselor
biotehnologice prin perceperea unor redevene de ctre companiile
productoare.
Majoritatea informaiilor publicate, referitoare la investiiile n
activitile de cercetare din domeniul biotehnologiilor agricole, conin
date ce vizeaz doar plantele de cultur. n cadrul acestei ramuri,

24

majoritatea fondurilor (aproximativ 90%) provin din sectorul privat al
rilor dezvoltate (FAO, 2002). Tot acestui sector i este atribuit cea
mai mare pondere n ceea ce privete desfurarea activitilor de
cercetare (65-80%). De aceea, produsele sunt destinate n principal
fermierilor din rile dezvoltate, acetia dispunnd de mai multe
resurse financiare ce le permit achiziionarea unor tehnologii scumpe.
Anumite componente ale biotehnologiilor prezint ns un potenial
extraordinar i pentru rezolvarea unor probleme cu care se confrunt
fermierii din rile n curs de dezvoltare (FAO, 2002). n urma
cercetrilor efectuate, Raney (2006) a concluzionat c tehnologia poate
avea impact pozitiv pentru agricultorii sraci, acesta fiind ns foarte
dependent de anumii factori instituionali, ca legislaia referitoare la
securitatea mediului i a alimentelor, capacitatea naional de
cercetare agricol, problematica drepturilor de proprietate intelectual
i piaa inputurilor agricole.
De aceea, ultimii ani, n special 2008, s-au remarcat printr-o
cretere semnificativ a utilizrii PMG-urilor n ri srace sau n curs
de dezvoltare (James 2009a; James 2009b; James, 2008).
n cazul rilor n curs de dezvoltare se remarc o activitate
intens din partea sistemelor naionale de cercetare n domeniul
biotehnologiilor agricole (FAO, 2002). n acest context merit amintit
exemplul Chinei, care datorit sprijinului acordat de guvern,
beneficiaz de o mare capacitate pentru cercetare n biologie
molecular. China a ajuns s dein mai mult de jumtate din investiiile
n biotehnologiile vegetale realizate n rile n curs de dezvoltare
(Pray et al., 2002, n FAO, 2002), fondurile provenind aporape n
ntregime din sectorul public. De asemenea guvernul chinez dorete s
investeasc n continuare n activitile de cercetare-dezvoltare din
acest domeniu (GMO Compass, 2008b), avndu-se n vedere ca pn n anul
2050 biotehnologiile s contribuie la creterea economic ntr-o
proporie de 25%.
Pn n 1996, cu excepia Chinei, toate aprobrile pentru
comercializarea liniilor MG au fost acordate unor companii din sectorul
privat (James i Krattiger, 1996). Aceast tendin s-a meninut pn n
prezent. Se dorete ns tot mai mult dezvoltarea aplicaiilor n
sectorul public, att n cazul statelor dezvoltate (ex. SUA, Australia,
Rusia sau UE), ct i al celor n curs de dezvoltare (ex. China, India,

25

Brazilia, Argentina, Mexic sau Africa de Sud i alte ri din Africa),
ca o msur de contracarare a influenei i controlului companiilor
multinaionale i n vederea favorizrii agricultorilor sraci.
Ca muli ali autori, Duke i Cerdeira (2005) subliniaz
variabilitatea n timp i spaiu a riscurilor i beneficiilor asociate
utilizrii PMG-urilor. De asemenea numeroase studii au artat c
biotehnologiile agricole genereaz o serie de efecte negative, fr ns
a aduce beneficii substaniale. Concluzia care se desprinde din cele
prezentate anterior este cea evidenait de Pretty (2000) i anume,
posibilitatea ca tehnologia s nu funcioneze ntotdeauna conform
ateptrilor. De aceea este foarte important utilizarea raional i
judicioas a acesteia, ntr-un mediu economico-social adecvat, crendu-
se astfel un potenial impresionant de profitabilitate la toate
nivelurile la care este utilizat.
Biodiversitatea Biodiversitatea Biodiversitatea Biodiversitatea
Biodiversitatea este esenial pentru continuitatea vieii pe
Terra, reprezetnd practic fondul genetic care va permite organismelor
s se adapteze i s fac fa schimbrilor viitoare din ecosisteme (MAF,
1996). Oponenii biotehnologiilor promoveaz ns ideea c introducerea
OMG-urilor n mediu va afecta biodiversitatea i astfel sustenabilitatea
vieii.
Utilizarea la scar larg a liniilor transgenice va determina
ngustarea numrului de genotipuri existente n culturi (AgResearch,
2000b), existnd posibilitatea pierderii acestora pentru totdeauna.
Problema apare doar dac varietile transgenice sunt extrem de
performante, caz n care nu trebuie trecut cu vederea faptul c se vor
obine recolte mai mari i de calitate mai bun. De asemenea, trebuie
remarcat similitudinea acestei situaii cu strategia agricol modern
care promoveaz cultivarea varietilor ameliorate n defavoarea celor
tradiionale (ex. Revoluia Verde n Mexic i India) (Wikipedia, 2009l).
Pentru a contracara acest fenomen au fost constituite bnci de gene (ex.
Biodiversity International, http://www.bioversityinternational.org/, sau
banca de gene destinat speciilor rare i pe cale de dispariie din
Transilvania, care este n curs de construcie n cadrul USAMV Cluj-
Napoca) care au ca obiectiv conservarea cultivarurilor locale n vederea
meninerii biodiversitii speciilor (MAF, 1996). Soluia este valabil
i n cazul OMG-urilor. De asemenea, sporirea produciilor la unitatea de

26

suprafa presupune reducerea ratei de luare n cultur a unor noi
suprafee, favoriznd astfel conservarea ecosistemelor naturale i
implicit a biodiversitii (James, 2005; James, 2003).
Avantaje pentru sistemul sanitar Avantaje pentru sistemul sanitar Avantaje pentru sistemul sanitar Avantaje pentru sistemul sanitar
Vaccinarea clasic reprezint o strategie foarte scump pentru
rile srace. O alternativ mult mai ieftin i uor de aplicat o
constituie producerea vaccinurilor n plante (Checkbiotech, 2005).
Concret, prin intermediul tehnicilor de inginerie genetic, se
realizeaz transferul unei pri din informaia genetic a agentului
patogen n genomul plantei. PMG-ul astfel obinut, denumit plant
vaccin, va sintetiza o nou molecul, care dup ingerare va funciona
ca antigen. Aceast alternativ prezint potenialul de a facilita
accesul la imunizare prin inoculare n rile srace (AgResearch, 2001;
AgResearch, 2000a).
O alt direcie de cercetare este trasformarea plantelor n scopul
mbuntirii valoarii nutritive prin modificarea coninutului de
vitamine, minerale, proteine, carbohidrai sau grsimi. Un astfel de
exemplu este orezul Golden Rice, concept introdus de Ingo Potrykus n
vederea creterii aportului de provitamin A n alimentaia populaiilor
cu diete deficitare din acest punct de vedere (ex. China) (Golden Rice
Project, 2009; Wikipedia, 2009k; AgResearch, 2000a).
Riscuri pentru s Riscuri pentru s Riscuri pentru s Riscuri pentru sn nn ntatea consumatorilor tatea consumatorilor tatea consumatorilor tatea consumatorilor i organismele non i organismele non i organismele non i organismele non- -- -int int int int
Aceste riscuri sunt discutate pe larg n numeroase articole sau
rapoarte oficiale (ex. Deisingh i Badrie, 2005, SOT, 2003, Pretty,
2000, Altieri i Rosset, 1999, sau Pretty, 1998). n ceea ce privete
sntatea consumatorilor, exist posibilitatea ca PMGurile i produsele
derivate din acestea s prezinte proprieti toxice sau alergenice
(AgResearch, 2001; AgResearch, 2000b; Pretty, 2000). Un exemplu n acest
sens este varietatea de soia n care a fost introdus o gen de la
Bertholletia excelsa n vederea mbuntirii calitilor nutriionale.
Ulterior transformrii s-a constatat c proteina introdus prezint
proprieti alergenice, linia transgenic nemaifiind comercializat
(MAF, 2006; Pretty, 2000). Influena asupra organismelor non-int a
constituit de asemenea obiectul a numeroase studii i este o surs de
intense controverse.
Cu toate c majoritatea autorilor au argumentat clar faptul c
potenialul toxic sau alergenic al OMG-urilor nu este diferit de cel al

27

varietilor convenionale (SOT, 2003), exist o serie de cercetri (vezi
Wikipedia, 2009b, 2009i) care evideniaz apariia efectelor adverse ca
urmare a cultivrii PMG-urilor sau utilizrii acestora n alimentaie.
Comunitatea tiinific internaional consider ns incorect
fundamentarea multora dintre problemele reliefate (ex. Wikipedia,
2009b), unele fiind infirmate de cercetri ulterioare (ex. Hellmich,
2008, sau Losey et al., 1999).
Asigurarea securit Asigurarea securit Asigurarea securit Asigurarea securitii alimentare ii alimentare ii alimentare ii alimentare
Fondul ONU pentru Populaie (UN Population Fund/UNFPA) preconizeaz
c pn n anul 2050 populaia Terrei va depi 9,2 miliarde, iar din
aceasta aproximativ 80% se va regsi n rile n curs de dezvoltare
(UNFPA, 2009), ceea ce va reprezenta o provocare major pentru
asigurarea necesarului de hran (Pretty, 2000). n acest context,
promovarea utilizrii PMG-urilor este determinat de potenialului
acestora de a contribui pozitiv la mbuntirea calitativ i
cantitativ a recoltelor (Royal Society, 2003b, n Deisingh i Badrie
2005; Pretty, 2000).
Un prim aspect care trebuie avut n vedere n aceast dezbatere este
producia global actual de hran. Astfel, dei la nivel mondial se
produc alimente care pot asigura o diet adecvat pentru toi locuitorii
planetei (doar pentru cereale se produceau 354 kg pe cap de locuitor
anual, nainte de 2000), exist totui peste 800 milioane de oameni fr
hran suficient (Pretty, 2000). La nivelul perioadelor 2004-2005 i
2005-2006, producia mondial de cereale pe cap de locuitor a sczut,
meninndu-se ns n jurul valorii de 300 kg (FAO, 2005). Se desprinde
astfel concluzia c lipsa hranei nu este cauzat de insuficiena
produciei agricole globale, ci doar de randamentul sczut n anumite
zone i de imposibilitatea distribuirii eficiente a surplusului de
alimente, din cele cu excedent spre cele deficitare. n aceste condiii,
sporirea produciei trebuie s se realizeze n primul rnd n zonele
srace cu hran insuficient.
Inovaiile tehnologice din ultimii ani, bazate sau nu pe
transgenez, nu reprezint ns soluia cea mai eficient pentru aceast
problem datorit preului ridicat de achiziie (Pretty, 2000). Cele mai
potrivite tehnologii sunt cele simple, ieftine i bazate pe principii
agro-ecologice cu impact redus asupra mediul nconjurtor (Pretty, 2000;

28

Altieri i Rossett, 1999). Nu se sugereaz prin aceasta c agricultura
ecologic reprezint o soluie mai bun, aceasta fiind deja utilizat n
regiuni din Africa, Asia i America Latin, dar fr a reui ns s
acopere necesarul de hran. n concluzie, se recomand combinarea
judicioas a diferitelor tehnologii de cultur, n msura n care acest
lucru este posibil, ntr-un cadru politico-economico-social adecvat
(James, 2005; James, 2003), fiind necesare n primul rnd msuri pentru
mbuntirea sistemului de distribuie al hranei la nivel global. n
ceeea ce privete strict ingineria genetic, trebuie acordat prioritate
obinerii plantelor care s tolereze condiii excesive de mediu
(temperatur, secet, terenuri srturate etc.), n vederea valorificrii
supafeelor de teren inutilizabile n condiiile actuale (Atkinson, 1998,
n Deisingh i Badrie, 2005).
Implica Implica Implica Implicaii de natur ii de natur ii de natur ii de natur etic etic etic etic sau cultural sau cultural sau cultural sau cultural (ethical, legal, and (ethical, legal, and (ethical, legal, and (ethical, legal, and
social issues/ELSI) social issues/ELSI) social issues/ELSI) social issues/ELSI)
Utilizarea OMG-urilor poate afecta anumite convingeri sau valori
culturale (AgResearch, 2001 i 2000b). Aceste probleme pot fi ns
depite prin etichetarea corespunztoare a produselor i punerea la
dispoziia publicului a informaiilor referitoare la caracterul
evenimentelor de transformare.
n sfera chestiunilor de natur etic sunt incluse: moralitatea
aplicaiilor biotehnologice, riscurile sociale, implicarea publicului
n luarea deciziilor, utilizarea drepturilor de proprietate intelectual
n cadrul tiinelor vieii etc.
O problem semnificativ este reprezentat de modalitile de
protest adoptate de opozanii biotehnologiilor moderne, care mbrac
deseori forme extreme (Anexa I). Unul dintre cele mai evidente exemple
de acest fel este termenul Frankenfood, inventat de Paul Lewis nc
din 1992 (Wikipedia, 2009i), care a devenit un laitmotiv al opoziiei
fa de PMG-uri i de alimentele derivate din acestea.

Efecte asupra mediului Efecte asupra mediului Efecte asupra mediului Efecte asupra mediului nconjur nconjur nconjur nconjurtor tor tor tor
Numeroase studii au abordat aceast problematic din foarte multe
puncte de vedere (ex. Ferry i Gatehouse, 2009, Mishra, 2007, Thomson,
2006, sau Dale, 2002). Concluzia general care se poate desprinde este
c agricultura n sine reprezint o activitate cu impact negativ asupra
mediului natural, n acest context neexistnd de fapt diferene

29

semnificaive n cazul culturilor de PMG-uri, comparativ cu cele
tradiionale.
Concluzie Concluzie Concluzie Concluzie
Din cele prezentate anterior se poate concluziona c utilizarea
PMG-urilor, ca n cazul oricrei alte tehnologii, prezint o serie de
avantaje, dar poate genera i riscuri pentru mediu i sntate.
Trebuie de asemenea subliniat c pericolul nu este reprezentat
ntotdeauna de tehnologia n sine, ci mai degrab de utilizarea
iraional.
O serie din situaiile prezentate demonstreaz clar posibilitatea
formulrii unor preri diferite, sau chiar opuse, pe baza aceleiai
informaii, datorit deosebirilor n ceea ce privete percepia, valorile
sociale, orientrile politice, sistemul legislativ i capacitatea de
aciune colectiv (Yogendra, 2004 n Deisingh i Badrie 2005).
De aceea considerm c informarea corect a publicului, precum i
implemetarea metodologiei de testare n laboratoare, sunt dou obiective
importante n conjunctura comercializrii PMG-urilor ca atare sau sub
form de produse alimentare derivate.