Sunteți pe pagina 1din 11

C LA S IFIC A R EA

B A C TER IILO R .M ETO D E S I TEH N IC I


FO LO S ITE P EN TR U S TU D IER EA
M O R FO LO G IEI B A C TER IILO R

C LA SIFIC A R EA
B A C TER IILO R
1. CARACTERELE DE CULTURA:
. Exigentele de cultivare: - bacterii nepretentioase

- strict anaerobe
- strict aerobe
- facultativ anaerobe
- microaeorfile
. Morfologia coloniilor: - dimensiunea
- forma: punctiforme,
circulare, neregulate, filamentoase, dendritice, lenticulare
- relieful: plane, aplatizate,
convexe, bombate, acuminate, ombilicate
- marginile: intregi, ondulate,
lobate, zimtate, filamentoase

C LA SIFIC A R EA
B A C TER IILO R
Suprafata coloniilor: - neteda, umeda, lucioasacolonii S

- mata, uscata,
rugoasacolonii R
Densitatea optica: transparente, semitransparente, opace
Culoarea coloniilor: variaza in fct. de pigmentii produsi sau
de virajul culorii indicatorilor inclusi in mediul de cultura
Hemoliza pe agar-sange: - hemoliza partiala
- hemoliza completa
- halou de hemoliza
incompleta cu inverzire, inconjurata de o zona de hemoliza
clara, completa
- absenta hemolizei

C LA SIFIC A R EA
B A C TER IILO R
Mirosul coloniilor: -Pseudomonas

aeruginosaflori de iasomie
- Clostridiileputrid,
fecaloid
- Proteusulciocolata
arsa
Consistenta coloniilor: untoasa, mucoasafilanta, friabila
Aderenta la mediu: neaderente, putin
aderente, aderente, incastrate in mediu

Examinarea proprietatilor morfo-tinctoriale se poate

.
.

face direct din produsul patologic sau din cultura


pura=preparatul nativ sau pe preparat fixat si colorat
Preparatul nativ(umed)- examinarea se face intre
lama si lamela, la MO, cu obiectiv uscat
Preparatul colorat(frotiul)- se obtine prin
intinderea pe o lama bine degresata a unui produs
patologic sau a unei culturi microbiene pure
Se depune o picatura cu ansa pe mijlocul lamei, fara
a se atinge marginile lamei
Uscarea- la temperatura camerei sau deasupra
flacarii

Coloratiile: - simple (albastru metilen, fuxina)

- duble (Gram, Ziehl- Nielsen)


- speciale (cili, spori, capsula)
Coloratia simpla:- frotiul fixat se acopera cu
colorant-1-2min
- se spala sub jet de apa
- se usuca pe stativ
- se examineaza cu
obiectiv uscat, apoi cu imersie
- permite stabilirea
formei si dimensiunii bacteriene

Coloratia Gram- evidentiaza forma, gruparea si


.
.

.
.
.
.
.
.

afinitatea tinctoriala a germenului


G+: perete gros, simplu, rezista la decolorare si pastreaza
culoara initiala
G-: perete subtire dar complex ca structura, ce
favorizeaza patrunderea decolorantului, cu pastrarea
culorii celui de-al doilea colorant
Frotiul uscat si fixat se acopera cu violet de gentiana-2min
Se fixeaza cu Lugol-2min
Se decoloreaza cu alcool-acetona
Se spala
Se recoloreaza cu fuxina bazica diluata-2min
Spalare, uscare, examinare

Coloratia Ziehl-Nielsen: folosita pentru evidentierea


.
.
.
.
.
.
.
.

bacililor acido-alcolo-rezistenti
Acesti bacili au in perete substante lipidice care se
coloreaza greu, dar o data colorate nu-si mai pierd culoarea
Frotiul fixat se acopera cu fuxina bazica concentrata-10min
Lama se incalzeste de 3-4 ori pana la emisia de vapori
Se spala cu apa
Se decoloreaza cu un ameste de alcool-acid mineral pana
la nuanta roz a decolorantului
Se spala
Se recoloreaza cu albastru de metilen-1min
Spalare abundenta cu apa, uscare, examinare

Coloratiile speciale
. Pentru capsula- o picatura de suspensie

bacteriana se amesteca pe o lama cu o picatura de


tus de China
- se omogenizeaza
- se acopera cu o lamela
- se lasa 5min in repaus
- se examineaza cu obiectivul
cu imersie pe fond negru, capsula aparand ca o
zona clara, refringenta, de diferite marimi, in jurul
bacteriei

Pentru spori- frotiul uscat se fixeaza cu alcool etilic

absolut
- se coloreaza 10min cu verde
malachit, incalzindu-se pana la emisia de vapori
- se lasa lama sa se raceasca
- se spala cu apa
- se acopera frotiul cu fuxina Ziehl
diluata-1min
- spalare, uscare, examinare cu
imersie
- formele vegetative-rosii, sporii-verzi

Pentru cili-metoda Zettnov: dupa uscarea

.
.
.
.

frotiului se foloseste formol 10min, apoi lama


se introduce in mordant pentru 2 ore, la 60
Frotiul se spala cu apa distilata calda, apoi se
usuca
se coloreaza la cald cu o solutie de sulfat de
Ag amoniacal pana la culoarea cenusie-neagra
Se examineaza cu imersie
Corpul bacterian si cilii apar colorate in negru