UNIVERSITATEA DE STIINTE AGRONOMICE SI MEDICINA VETERINARA BUCURESTI

FACULTATEA DE BIOTEHNOLOGII

REFERAT ENZIMOLOGIE TEMA: PAPAINA

COORDONATOR Asist. Univ. Dr. Simion Vasilica

STUDENTI Bobe Ovidiu Gheorghe Alin Grupa 6201

BUCURESTI 2011

CUPRINS

Introducere Enzima Papainapag 3 Capitolul I 1.1. Codul enzimei si denumirea sistemica...pag 4 1.2. Reactii catalizate de papaina..pag 4 Capitolul II 2.1. Raspandire si rol..pag 5 2.2. Metode de determinare a activitatii enzimatice (A.E.).pag 6 Capitolul III 3.1. Utilizari ale papainei....pag 7 Concluzii...pag 9 Bibliografie...pag 10

PAPAINA

Introducere
Papaina este cea mai importanta enzima aflata in frunzele si fructele plantei tropicale papaya. Aceasta enzima este asemanatoare cu pepsina produsa de organismul uman si intervine in descompunerea alimentelor. Principalul efect consta in predigestia carnii (adica pregateste carnea inca inainte de a ajunge in stomac si de a incepe digerarea ei). Majoritatea enzimelor de origine vegetala functioneaza identic atat in mediul acid, cat si in cel alcalin, actiunea lor extinzandu-se asupra intregului tract digestiv. Datorita acestei enzime este facilitata nu numai digestia alimentelor de origine animala, ci si vegetala

Capitolul I

1.1.

Codul enzimei Papaina si denumirea sistemica

Desi au existat o multime de ncercari de clasificare a enzimelor pna n 1955 nu s-a gasit o solutie satisfacatoare. De aceea s-a nfiintat la initiativa Uniunii Internationale de Biochimie, Comisia de Enzimologie cu misiunea de a elabora o clasificare si o nomenclatura unica a enzimelor si coenzimelor, de a stabili si defini unitatile n care se poate exprima activitatea unei enzime, precum si de a recomanda simboluri unice pentru cinetica enzimatica. Astfel enzimele sunt clasificate n clase dupa natura similara a procesului catalitic, n subclase, n functie de unele detalii privind gruparile chimice supuse transformarii si natura cofactorilor implicati n reactie. Fiecare enzima este desemnata printr-un cod format din patru cifre care contine informatii despre enzima respectiva Papaina are codul E.C. 3.4.22.2 si face parte din clasa HIDROLAZE, subclasa PEPTIDAZE, sub-subclasa CISTEIN-ENDOPEPTIDAZE ceea ce inseamna ca va cataliza reactiile de scindare ale legaturilor peptidice in prezenta apei. Denumirea sistemica a papainei este: Papaya peptidaza I.

1.2.

Reactii catalizate de papaina

Clasa hidrolazelor este o clasa ce cuprinde toate enzimele care catalizeaza reactii de transfer n care acceptorul principal este apa. Reactia generala catalizata de hidrolaze este:

Papaina catalizeaza hidroliza peptidelor, amidelor, si esterilor ce implica resturi ale unor aminoacizi bazici, ale leucinei sau glicinei.

Capitolul II

2.1. Raspandire si rol

Papaina este o proteinaza tiolica produsa de arborele Carica papaya unde se ntlneste n toate organele, cu exceptia radacinilor. Este cea mai importanta enzima continuta in fructele si frunzele plantei tropicale de papaya. Cea mai mare cantitate de papaina se gaseste n latexul fructelor care reprezinta totodata si sursa industriala de obtinere a acestei enzime. Aceasta enzima are puternice proprietati proteolitice (ajuta la digestia proteinelor), avand efecte asemanatoare pepsinei (enzima produsa de organismul uman cu un important rol in digestia alimentelor). Datorita continutului de papaina, consumul fructului de papaya este recomandat dupa mesele copioase bogate in proteine dar si lipide (papaya stimuleaza si secretia biliara cu rol primordial in digestia lipidelor), cum ar fi dupa consumul preparatelor din carne (fripturi, mici, carnati), lactate grase (smantana, cascaval), sosuri etc. De asemenea s-a demonstrat ca papaina are rezultate foarte bune in recuperarea bolnavilor operati la coloana vertebrala, avand actiune regenerativa. Molecula papainei contine o singura catena polipeptidica a carei secventa n aminoacizi este cunoscuta. O caracteristica a structurii primare a papainei o constituie absenta metioninei. Catena polipeptidica a acestei enzime contine trei punti disulfidice intracatenare si o singura grupa tiolica libera (cea care apartine restului Cys25). Aceasta grupa, mpreuna cu restul de His159 formeaza centrul activ al enzimei. Papaina prezinta o larga specificitate de substrat, ea putnd hidroliza orice tip de legatura peptidica cu exceptia acelora formate de prolina si acidul glutamic. Din aceasta cauza, papaina este des utilizata n studiul structurii primare a proteinelor.

Caracteristica importanta a papainei o constituie mentinerea activitatii ei catalitice ntr-un interval larg de pH si temperatura ceea ce face ca aceasta enzima sa fie foarte utila att n cercetarea fundamentala ct si n cea aplicativa.

2.2. Metode de determinare a activitatii enzimatice (A.E.)

Cantitile cele mai mari de papain (aproximativ 12% din substana uscat) se gsesc nfructele de papaia, nainte de coacere. Pentru obinerea industrial a papainei pure se recolteaz latex-ul care se depoziteaz la rece (+4C). Pentru nlturarea impuritilor se dilueaz cu ap distilat, se agit i se centrifugheaz sau se filtreaz pe kiesselguhr, dup care se liofilizeaz subvid la 50C. Se obine o pudr de culoare alb care ns se oxideaz relativ uor, devenind brun, datorit prezenei grupelor SH libere. Din aceast cauz, ambalarea se face n condiii carempiedic att oxidarea ct i contaminarea microbian. Activitatea proteolitic a papainei industriale astfel obinute oscileaz ntre 40.000 i 84.000 U.P. (uniti proteazice). Prin electroforez pe acetat de celuloz s-a demonstrat faptul c preparatele industriale de papain conin trei componente majore: Papaina, Chimopapaina i Lizozimul. Papaina nalt purificat a fost cristalizat prima dat n 1937 de ctre Balls, T. et al. Ea este o enzim tiolic ce conine 211 resturi de aminoacizi i are o mas molecular de 23 kD. Temperatura optim de aciune se situeaz ntre 55 60C, enzima avnd o termostabilitate crescut (denaturareatermic se observ abia la 65 70C), iar pH-ul optim se nscrie n domeniul de pH 5,0 7,0 ceea ce faciliteaz utilizarea sa n diferite procese biotehnologice. Papaina se utilizeaz n multe domenii industriale. Din cele aproximativ 300 de tone ct este consumul anual, aproximativ 75% reprezint consumul n industria berii, 10% n industria crnii, 5 % n f a b r i c a r e a h i d r o l i z a t e l o r d e p e t e i c a p u r i d e p a s r e p e n t r u n u t r i i a a n i m a l e l o r , 2 % n industria chimico-farmaceutic etc. Preparatele de papain imobilizat se folosesc la hidroliza latex-ului de arahide, hidrolizatele obinute utilizndu-se la stabilizarea fizico- chimic a sucurilor de struguri i mere.

Capitolul III

3.1. Utilizari ale papainei

Te protejeaza de bolile cardiovasculare Fructul de papaya este recomandat in prevenirea aterosclerozei si a diabetului. Continutul bogat in vitamina C, A si E previne oxidarea colesterolului (doar atunci cand este oxidat colesterolul are capacitatea de a se depune in peretii vaselor sanguine, favorizand formarea placilor de ateromatoase). De asemenea, si fibrele din papaya au rolul de a reduce colesterolul "rau". Acidul folic ajuta la convertirea substantei numita homocisteina, care in alte conditii poate sa distruga peretii vaselor de sange si la un nivel foarte ridicat poate favoriza un atac de inima.

Are grija de sistemul digestiv Nutrientii din fructul de papaya au un rol important in prevenirea cancerului de colon. Ajuta la digestie, fiind foarte bogata in enzime proteolitice. Ajuta la functionarea mai buna a ficatului si reduce producerea de metaboliti, adica substante partial digerate care incetinesc tranzitul intestinal; Reduce stresul oxidativ, datorita continutului bogat in carotinoizi. Aceasta inseamna ca are puterea reduce sau de a incetini procesele responsabile de imbatranirea cauzata de radicalii liberi. Contribuie la starea de bine a organismului furnizand o incarcatura energetica suplimentara; Furnizeaza energie, datorita continutului sau crescut de carbohidrati care sunt absorbiti rapid de organism, prezentei sarurilor si a vitaminelor din grupa B. Fructul proaspat este foarte util in perioadele de stres si de efort.

Are proprietati antiinflamatoare

Contine papaina si chimopapaina, ambele enzime fiind recunoscute pentru actiunea antiinflamatoare si de calmare/vindecare a arsurilor. Astfel este recomandata persoanelor care sufera de osteoartrita, artrita reumatoida si astm.

Intareste sistemul imunitar Vitamina C si A, care este produsa in organism datorita betacarotenului din papaya sunt necesare pentru buna functionare a sistemului imunitar. Asadar, fructul de papaya previne raceala, gripa si infectiile recurente la nivelul urechii. Usureaza simptomele osteoartritei si ale artritei reumatoide Fructul de papaya este bogat in vitamina C, care este unul dintre antioxidantii cei mai importanti care are rolul de a neutraliza actiunea radicalilor liberi ce pot interactiona cu sanatatea celulelor din organism (cauzand distrugerea membranelor si inflamatii in organism). De aceea, vitamina C s-a dovedit a fi foarte folositoare in reducerea simptomelor asociate osteoartritei si artritei reumatoide. Aceste rezultate au fost obtinute in urma unei analize atente a peste 20.000 de persoane sanatoase, iar riscul de aparitie a artritei s-a dovedit a fi de 3 ori mai ridicat in cazul celor care au consumat cantitati nesemnificative de alimente bogate in vitamina C.

Asigura sanatatea plamanilor Consumul alimentelor bogate in beta-criptoxantina, un carotenoid pe care il gasim in papaya, poate sa scada riscul de aparitie a cancerului pulmonar.Un studiu efectuat in 2003 pe un esantion de 60.000 de adulti care au consumat alimente bogate in acest carotenoid arata ca riscul de cancer pulmonar este cu 27% mai scazut. De asemenea, in urma unui studiu efectuat de specialistii de la Universitatea de Stat din Kansas s-a constatat ca o dieta bogata in vitamina A (care se gaseste in cantitate insemnata in fructul de papaya) amelioreaza simptomele cauzate de emfizemul pulmonar si protejeaza plamanii de cancer.

Protejeaza barbatii de cancerul de prostata Potrivit informatiilor redactate in publicatia Asia Pacific Journal of Clinical Nutrition, rezultatele studiilor realizate arata ca un barbat care consuma papaya cu regularitate si in cantitati moderate

prezinta un risc cu 86% mai scazut de a face cancer de prostata, comparativ cu cei care nu obisnuiesc sa consume.

Concluzii Papaina este cea mai importanta enzima aflata in frunzele si fructele plantei tropicale
papaya. Papaina are codul E.C. 3.4.22.2 si face parte din clasa HIDROLAZE, subclasa PEPTIDAZE. Papaina catalizeaza hidroliza peptidelor, amidelor, si esterilor ce implica resturi ale unor aminoacizi bazici, ale leucinei sau glicinei. Aceasta enzima are puternice proprietati proteolitice (ajuta la digestia proteinelor), avand efecte asemanatoare pepsinei. Intrebuintare: protejeaza de bolile cardiovasculare, are grija de sistemul digestiv, are proprietati antiinflamatoare, intareste sistemul imunitar, usureaza simptomele osteoartritei si ale artritei reumatoide, protejeaza barbatii de cancerul de prostata si asigura sanatatea plamanilor.

Bibliografie

1. Cojocaru D C, Enzimologie Generala, Editura Tehnopress, Iasi, 2007 2. Dumitru I F, Iordachescu D Enzime, Ed Medicala, Bucuresti, 1974 3. Georgescu L A, Enzimologie generala si aplicata, Editura Academica, Galati, 2003 4. http://www.chem.qmul.ac.uk/iubmb/enzyme/EC3/4/22/2.html 5. http://www.scritube.com/biologie/Enzime-proteolitice-vegetale23175213.php 6. http://www.scribd.com/doc/53974535/22/V-1-Surse-de-enzime