Numrarea eritrocitelor n camera Goreaev

Metoda cea mai rspndit i cea mai precis de numrare a eritrocitelor rmne
metodica microscopic de numrare a eritrocitelor n camera Goreaev.

Principiul: numrarea eritrocitelor la microscop ntr-un numr determinat de

ptrate a camerei cu calcularea ulterioar ntr-un mkl snge reeind din volumul
ptratelor i diluia sngelui.

Tehnica de lucru: se recolteaz 20 mkl snge capilar sau venos i se pipeteaz

ntr-o eprubet curat i uscat unde n prealabil se toarn 4ml sol de 0,9% de NaCl.
Conul pipetei se terge cu tifon sau hrtie de filtru i se aspir la fundul eprubetei, se
agit viguros pentru omogenizare. Pn la numrare pipeta rmine n poziie
orizontal.

Umplerea camerei de numrat: se aplic lamela pe lama celulei de numrat, fie

prin simpl adeziune. Este necesar o bun aderen ntre lam i lamel, care este
asigurat cnd se formeaz inelele Newton (inele colorate de refracie). nainte de
umplerea camerei se agit coninutul eprubetei timp de 2-3minute, apoi primele
picturi care se scurg snt lsate s cade pe o hrtie de filtru. Vrful pipetei se apropie
de marginea camerei acoperite cu lamela i se las s intre prin capilaritate,n
camer, o cantitate de lichid, n spaiul format ntre lam i lamel.

Este de dorit ca s se introduc dintr-o dat atta lichid nct spaiul dintre lam
i lamel s fie umplut n ntregime, fr ca lichidul s treac n anurile laterale,
fr ca lamela s se deplaseze, fr s intre bule de aer n camer; n caz contrar,
operaia se repet dup tergerea camerei. Se ateapt o minut pentru
sedimentarea elementelor pe cadrilajul camerei.

Camera Goreaev. Are un cadrilaj n care alterneaz ptrelele mici de 1/400 dintr-
un mm2 . Se examineaz camera la microscop (obiectivul x8, ocularul x10 sau
x15, n cmp ntunecat (diafragma seminchis sau condensorul uor lsat n jos).
 Se numr eritrocitele n 5 ptrate mari coninnd fiecare cte 16 ptrele mici
(5 x 16 = 80 ptrele mici) situate pe diagonal, deoarece eritrocitele se pot
distribui neuniform pe suprafaa cadrilajului. Conform regulii, se numr
eritrocitele din interiorul ptratelor mici, iar cele ce se afl pe intersecii se
numr numai pe dou laturi de sus i din stnga. Pentru a evita numrarea de
dou ori a aceluiai eritrocit, elementele situate pe intersecii pe latura de jos i
din dreapta nu se numr. Se recomand numrtoarea eritrocitelor la 2 3 ore
dup recoltare. n cadrul anemiilor hemolitice i megaloblastice probele trebuie
efectuate imediat dup recoltare, deoarece n aceste cazuri eritrocitele se distrug
rapid.

Calcularea rezultatelor. Numrul eritrocitelor n 1 litru de snge se calculeaz

dup formula:
a 4000 200 106
X= , unde:
80
X numrul de eritrocite n 1 l de snge;
a suma eritrocitelor numrate n 5 ptrate mari (80 mici);
4000 nmultitor, ce exprim rezultatul ntr-un microlitru de snge, fiindc volumul
unui ptrel mic e de 1/4000 l;
200 diluia sngelui;
80 numrul de ptrate mici numrate;
106 numrul de microlitri n un l.
Practic, cifra de eritrocite gsit pe 80 ptrele mici se nmuleste cu 10.000
i aflm numrul de eritrocite n un l de snge. Erorile metodei 2,5%.
Erori n numrtoarea eritrocitelor:
1. La recoltarea sngelui: neptur superficial sau n regiuni puin
vascularizare; stoarcerea degetului, ceea ce duce la diluia sngelui; erori de pipetare
i diluare.
2. Formarea chiagurilor de snge, care reinnd o parte de elemente, duce la un
rezultat micorat de eritrocite.
3. Nerespectarea condiiilor, care asigur nlimea corect a camerei din cauza
psuirii inerente a lamelei de acoperire. De asemenea are importan grosimea
lamelei de acoperire (ea trebuie s fie nu mai mic de 0,3 mm).
4. Numararea inoportun a elementelor imediat dup umplerea camerei, fr a
atepta 1 minut; n acest caz eritrocitele nu dovedesc s se sedimenteze pe cadrilajul
camerei. Rezultatele obinute vor fi mai joase.
5. Numrarea unui numr mai mic de ptrele de pe cadrilajul camerei.
6. Splarea defectuoas a materialului folosit; utilizarea pipetelor i eprubetelor
umede.
 7. Utilizarea reacivelor necalitativi pentru diluie ce poate cauza hemoliz
eritrocitelor.
Erori datorit examinatorului.

Modul diferit de numrtoare pe cadrilaj,

lipsa de atenie sau oboseal dup multe examene pot duce la erori.
Introducerea unei cantiti prea mici de lichid, care nu acoper toat lama, sau a unei
cantiti prea mari, care produce un curent de lichid nspre anurile laterale, trebuie
evitat. Prezena de bule face imposibel numrtoarea.

Erori inerente metodei: distribuia neregulat a elementelor pe suprafaa

cadrilajului d variaii care snt cu att mai mici cu ct numrul de elemente numrate
este mai mare.

n mod obinuit numrtoarea de eritrocite nu este enat de leucocite, acestea

fiind puine la numr. n caz de leucocitoze foarte mari (leucoze)- se va cuta s se
indentifice elementele albe, pentru a nu fi nglobate n numrtoare.

Valori normale: brbai 4,0 5,0 x 1012 pe litru;

femei 3,9 4,7 x 1012 pe litru .
Not:
1. n anemii hemolitice i megaloblastice numrtoarea eritrocitelor se
va face imediat dup recoltarea sngelui, fiindc la pstrare eritrocitele se
hemolizz rapid.
2. Pentru obinerea unui rezultat mai exact se vor numra eritrocitele n 2
camere diferite i se va calcula media aritmetic a rezultatelor celor dou numrtori.