Radiofarmaceutice

Medicina
nucleara

Curs pentru rezidenti

Prof.dr. Cipriana Stefanescu,

S.l.dr. Irena Grierosu
5. Radiofarmaceutice(RF)
1. - Radionuclizi, radiofarmaceutice, productia radionuclizilor
2. - Generatorul Molibden-99/Technetium-99 (caracteristici fizico-chimice,
control de calitate)
3. - Kituri de legare cu Technetiu-99m ( mod de preparare, controlul calitatii)
4. - Alte RF ( I-131, I-123, Indium-111, Thalium-201, Xenon-133)
5. - Biocinetica radiofarmaceuticelor si mecanisme de localizare
6. - Criterii de alegere a radiofarmaceuticului optim
7. - Radiofarmaceutice utilizate in PET (ciclotronul, tipuri de RF)
1. - Radionuclizi, radiofarmaceutice, productia radionuclizilor
2. - Generatorul Molibden-99/Technetium-99 (caracteristici fizico-chimice,
control de calitate)
3. - Kituri de legare cu Technetiu-99m ( mod de preparare, controlul calitatii)
4. - Alte RF ( I-131, I-123, Indium-111, Thalium-201, Xenon-133)
5. - Biocinetica radiofarmaceuticelor si mecanisme de localizare
6. - Criterii de alegere a radiofarmaceuticului optim
7. - Radiofarmaceutice utilizate in PET (ciclotronul, tipuri de RF)
izotopi radioactivi:

SIMBOLUL UNUI ELEMENT

IZOTOPI - acelasi Z
Num\r de mas\ = Z+N - N diferit

Stabili
 Naturali
 Artificiali
ZA N
X
Radioizotopi: configura]ie
Nr. de instabila energetic (raport
Nr. atomic = neutroni protoni / neutroni)
nr. de protoni
Dezintegrare: N=N0 xe-lt
Emisie de radiatii
- energie de emisie
IZOMERI - A, Z, N identici  corpusculare: a, b
 necorpusculare: g
- stare energetica diferita a
- T1/2 diferit
nucleului Configura]ie stabila
Henry Becquerel (1852 - 1908)
P. Nobel (Fizica) - 1903
1 Bq = 1 dezintegrare pe secundă

1 Ci = 3,7 x 1010 dezintegrări pe

secundă
 DOMENIILE MEDICINII NUCLEARE:

in vivo (în organism): in vitro (în afara

organismului):
DIAGNOSTIC
dozarea unor
 pred. morfologic molecule prin RIA
SCINTIGRAFIA
 funcţional (ex. RIC)

TRATAMENT
Principiul imagisticii cu radioizotopi:

radiofarmaceutic
Administrare i.v. sau p.o

pacient
Interval de timp :
mecanism: circul\ `n sânge [i
se fixeaz\ specific pe ]esutul ]int\

detec]ie: imagini
 Principiul 1) Radiofarmaceutic
emiţător gamma adm.
metodei scintigrafice pacientului (p.o. sau i.v.)

2) Fixare specifică la niv.

organului explorat

3) Organul emite radiaţii

gamma

4) Captate de o gamma
cameră

5) Procesarea imaginii
(computer)

SCINTIGRAMĂ
Ce izotopi radioactivi se pot folosi?
Radioizotopi frecvent folositi in medicina
nucleara

Radioizotop T1/2 Radia]ii emise Energie de emisie

99m
Tc 6h gama 140 (90%)
201
Tl 73h EC 135 (2,6%)
167 (9,8%)
123
I 13h EC (100%) 160 84%
131
I 8z - 360 (8%)
111
In 2,8z EC (100%) 247
(95%)
1. - Radionuclizi, radiofarmaceutice, productia radionuclizilor
2. - Generatorul Molibden-99/Technetium-99 (caracteristici fizico-
chimice, control de calitate)
3. - Kituri de legare cu Technetiu-99m ( mod de preparare, controlul calitatii)
4. - Alte RF ( I-131, I-123, Indium-111, Thalium-201, Xenon-133)
5. - Biocinetica radiofarmaceuticelor si mecanisme de localizare
6. - Criterii de alegere a radiofarmaceuticului optim
7. - Radiofarmaceutice utilizate in PET (ciclotronul, tipuri de RF)
Generatorul de Technetiu
 Generatorul de 99mTc

 Principiul “filiatiei radioactive”

(radioizotop “parinte”,T 1/2 lung radioizotop fiu, T 1/2 scurt)

 + existenta unei metode de separare

  Principiul “filiatiei radioactive”
(radioizotop “parinte”,T 1/2 lung radioizotop fiu, T 1/2 scurt)

 + existenta unei metode de separare

 Functioneaza pe principiul filiatiei

radioactive
 Se obtine un radioizotop ‘fiu’ cu timp de
injumatatire scurt prin dezintegrarea unui
radioizotop ‘parinte’ cu timp de injumatatire
mai lung
 Contine si o metoda de separare a celor 2
specii de radioizotopi
 fisiunea uraniului

99
Mo molibdenat de amoniu
99m
Tc pertecnetat (TcO4) Coloana
pertecnetat de Na (TcO4Na) de
cromatografie
Al2O3
Eluat
5-25mL
 Generatorul de Tc99m

87.6%
99
Mo 99m
Tc

 140 keV
12.4% T½ = 6.02 h

ß- 442 keV Tc
99
Eluent Na Cl 0,9% Eluat Tc99mO4Na
 739 keV
T½ = 2.75 d

Colană de alumină

Blindaj de Pb
 Alcatuire
 Recipient invelit la exterior de un perete de Pb
 In recipientul din sticla/plastic - coloana cromatografica cu faza
stationara alumina(Al2O3) se introduce radioizotopul parinte-
Molibden 99Mo (obtinut prin fisiunea Uraniului)
 99Mo este adsorbit pe coloana de alumina si se dezintegreaza cu
emisie β- si rezulta 99mTc, stare intermediara, metastabila
 99mTc se dezintegreaza cu emisie γ in 99Tc stabil cu timp de
injumatatire de 6 ore
 In coloana 99mTc ramane neabsorbit sub forma de 99mTcO4- astfel
incat la trecerea unei solutii de ser fiziologic rezulta 99mTcO4Na
(pertecnetatul de Na) care este eluat din coloana(faza mobila)
 Soluţia obţinută se va injecta intravenos pacientului.
  Viata unui generator :
3-5T1/2 ale 99Mo
 in interiorul unui generator
100% radioactivitatea se modifica
88,91% in functie de timp
79,05%
(dezintegrarea 99Mo, a 99mTc, elutia)
70,28%
64,45%
55,55% 49,87%

12 3 4 5 6 ore de la extractie

Zile 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Activitate Tc
disponibila % 100% 78% 60% 47% 36% 28% 22% 17% 13% 10% 8%
 Modul de descrestere a activitatii 99mTc

Activitate maxima
la 23 h
1.0 Mo-99 Decay
T1/2=2.8 zile
Activitate relativa

0.5

Crestere

Tc-99m
0.2 T1/2=6 h Elutie Elutie
elutie

0.1

timp
1. - Radionuclizi, radiofarmaceutice, productia radionuclizilor
2. - Generatorul Molibden-99/Technetium-99 (caracteristici fizico-chimice,
control de calitate)
3. - Kituri de legare cu Technetiu-99m ( mod de preparare, controlul
calitatii)
4. - Alte RF ( I-131, I-123, Indium-111, Thalium-201, Xenon-133)
5. - Biocinetica radiofarmaceuticelor si mecanisme de localizare
6. - Criterii de alegere a radiofarmaceuticului optim
7. - Radiofarmaceutice utilizate in PET (ciclotronul, tipuri de RF)
The Quality Control Kit
(cu participarea As. DRD. JALLOUL Wael, rezid. Ruxandra Tibu – NMD 2019, Sinaia)
 Labeling
stability

Target
Target
Cell
Cell

Vector Labeling
Radioisotope
Molecule: LABELLING RADIOPHARMACEUTICALS
Uptake
mechanis Diagnostic
Diagnostic
m on Emitts
Emitts gamma
gamma
target cell rays
rays

Specific
Specific 99m
99m Tc:
Tc: 140
140 KeV
KeV
energies:
energies:
18
18 F
F FDG:
FDG: 511KeV
511KeV
The radiotracer
- Clasic: diagnostic
= radiolabeled molecule - Present: theranostic
 Technetium Misbehaving

99m
TcO-4 + SnCl2 +TRACER TcO-4 -TRACER
99m

Pertechnetate + Stannous chloride + Tracer Tc-tagged tracer

7+

Reduces the pertechnetate

3+, 4+, 5+

NORMAL CASE
 Technetium Misbehaving

99m
TcO-4 + SnCl2 + O2 TcO-4
99m
+
SnCl4
Pertechnetate + Stannous + AIR Free + Stannic
chloride Pertechnetate chloride

AIR CONTAMINATION
 Technetium Misbehaving

99m
TcO-4 + SnCl2 + H2O TcO2
99m
+
Sn(OH)2
Technetium
Pertechnetate + Stannous
chloride
+ WATER Dioxide + Colloid
(Hydrolyzed
Technetium)

WATER CONTAMINATION
 Tc MIBI
99m
99m
Tc MIBI: R = CH2C(CH3)2OCH3

Hexakis(methoxy-isobutyl-isonitrile)
technetium (99mTc): sestamibi
Coordinative complex
 Scans obtained for 2 men, both with thyroiditis, with cyclotron-produced (patient C8 [left]) and generator-
eluted (patient G2 [right]) 99mTc-pertechnetate. Svetlana V. Selivanova et al. J Nucl Med 2017;58:791-798
 Radiochemical Chromato method

purity: SE
PA 99mTc
Chromatography – RA unlabeled
separation method TI
O
N 99mTc

99mTc labeled
(+ vector
molecule)
Surface differential
retention,
on the stationnary phase

99mTc MIBI 99mTc HDP

Radiopharmaceutical Quality
Control in 4 Steps

 
1. - Radionuclizi, radiofarmaceutice, productia radionuclizilor
2. - Generatorul Molibden-99/Technetium-99 (caracteristici fizico-chimice,
control de calitate)
3. - Kituri de legare cu Technetiu-99m (mod de preparare, controlul calitatii)
4. - Alte RF ( I-131, I-123, Indium-111, Thalium-201, Xenon-133)
5. - Biocinetica radiofarmaceuticelor si mecanisme de localizare
6. - Criterii de alegere a radiofarmaceuticului optim
7. - Radiofarmaceutice utilizate in PET (ciclotronul, tipuri de RF)
Radiofarmaceutice
Radiofarmaceutice: exemple

Molecula marcata Organul explorat

99m
Tc + fosfa]i os
99m
Tc + microsfere pulmon
99m
Tc + coloizi ficat
99m
Tc + DTPA rinichi (filtrare glomerulara)
99m
Tc + DMSA rinichi (parenchim renal)
99m
Tc + MIBI cord
123
Iod
99m
Tc
201
Tl
18
F FDG
18
F NaF

C metionină
11
Caracteristici optime: radioizotopul ideal

¨ T 1/2 : mic (ore)

¨ Tip de emisie: gamma
¨ Energie: adecvata detectorului: 100 - 200 keV
¨ procurabilitate si cost
 Radiofarmaceutice clasice: exemple

Molecula marcatã Organul explorat

99m
Tc + fosfati os
99m
Tc + microsfere pulmon
99m
Tc + coloizi ficat
99m
Tc + DTPA rinichi
(filtrare glom)
99m
Tc + DMSA rinichi
(parench.renal)
99m
Tc + MIBI cord
 Radiofarmaceutic, radiotrasor:

radiofarmaceutic
Administrare i.v. sau p.o

pacient
Interval de timp :
mecanism: circulã în sânge si
se fixeazã specific pe tesutul tintã

detectie: scintigrame
1. - Radionuclizi, radiofarmaceutice, productia radionuclizilor
2. - Generatorul Molibden-99/Technetium-99 (caracteristici fizico-chimice,
control de calitate)
3. - Kituri de legare cu Technetiu-99m (mod de preparare, controlul calitatii)
4. - Alte RF ( I-131, I-123, Indium-111, Thalium-201, Xenon-133)
5. - Biocinetica radiofarmaceuticelor si mecanisme de localizare
6. - Criterii de alegere a radiofarmaceuticului optim
7. - Radiofarmaceutice utilizate in PET (ciclotronul, tipuri de RF)
 Tipuri de radiofarmaceutice
un atom singur un atom legat un atom legat
la o moleculã la un hormon

Thaliu
201
Tc MDP
99m In Somatostatin
111
Perfuzie si viabilitate Activitate osteoblasticã Receptori hormonali
miocardicã
Un atom legat Un atom legat
la un anticorp la o particulã

Iod
123
Organificarea
tiroidianã a iodului
Tc antiACE
99m 99m
Tc MAA
Antigene Perfuzie pulmonarã
membranare
Localizarea celulara a unor tipuri
de radiotrasori
Glucozã
18
F-FDG
Aminoacizi
Acizi grasi 13
N- Legare de
11
C- ADN
18
F-5FU
oligonucleotide
Celulã

Transport activ:
-Pompã Na+-K+ Receptori: Transport pasiv
201
Tl -crestere tumoralã transmembranar
- I, 123I
131 111
In-Octreotid 99mTc-izonitrili
- transferina -67Ga
Transport pasiv:
99mTc isonitrili
 99m
Tc MIBI, 99mTc Tetrofosmin

99m
Tc CºN-R+
 Monocation lipofil R = CH2C(CH3)2OCH3
 Molecula vectoare :
MIBI – metoxiizobutilizonitril C=N-R +
 Mecanism de captare:
C=N-R C=N-R
Influx ® pătrunde în celulă Tc
prin gradient electrochimic C=N-R
C=N-R
(ec. Nernst).
Eflux ¬ Pg P 70 C=N-R

(codată de gena MDR).

 Localizare intracelulară: « 90 % intramitocondrial
Ecuatii Nernst:

Tc-MIBIcitoplasm = Tc-MIBIextracel e -(Døplasma)/F/RT

Dø
plasma = RT/zF x ln (Tc-MIBIextracel/Tc-MIBIcitoplasm )

Dø
plasma = 2,3RT/zF x log10 Tc-MIBIextracel/Tc-MIBIcitoplasm

dar:
2,3 RT/zF = 60 mV
(pentru un ion monovalent)
99m
TcMIBI - evaluare terapeuticã

Imagini scintigrafice cu 99mTc-MIBI pre- si post-chimioterapie

(cancer mamar)
Captarea 99mTc MIBI pe Mycobacterium
Tuberculosis in comparatie cu miocite si fibroblaste
Tiroidă

ô ą 1
(cpm/mg prot, %)
Relative uptake

2
ô F
Cord
Ficat
ô Ů

ô f

,—€ w—Ę Č—
Cells: Myocites Fibroblastes Mycobacterium T.
Captarea celulara a trei radiofarmaceutice
in culturi de celule normale si neoplazice

45 99mTc MIBI
%from all radioactivity/

40 99mTc Mw
35 201 Tl
mg proteins

30
25
20
15
10
5
0
mioc ite fibrob la s te M3Da u M4Be u MCF7

cell types
Glioblastom grad IV, tomoscintigrama cerebrala cu 99mTc-
MIBI. M - hiperfixare periferica tumorala. N - hipofixare
centrala (necroza). P - tesuturi periferice cerebrale
Transport activ: Na+-K+ ATP-aza
 201
Tl
Cation monovalent
Proprietati similare cu K+

 Na+-K+ ATP-aza 70%; se cupleaza cu situsurile subunitatii a

 Cotransportul Na+-K+-Cl-, sensibil la furosemid
 Canal Ca2+ -dependent
SPECT cerebral cu 201Tl pentru diagnosticul unui glioblastom
Receptori membranari
90% - legat de proteine plasmatice (transferina) –
competitie cu fierul (care are afinitate mai mare)

influx celular: cuplare cu receptorul pentru

transferina (acelasi situs, afinitate mai mica)

endocitoza mediata de receptori

lizozomi (in celulele normale)

disociere ligand – receptor

67
Ga
stocare in vezicule CURL

legare cu proteine citozolice (lactoferina)

cresterea captarii celulare de 67Ga este asociata cu

faza G si cu proliferarea ribozomala
 Peptide radiomarcate
 Principiu: evaluarea prezentei la nivel tumoral a unui anumit tip de receptor,
utilizând liganzi specifici radiomarcati.
 Radioizotopi: 123I, 125I, 131I,99mTc, 111In, 67Ga, 68Ga.
 Tipuri: fragmente de anticorpi; analogi specifici ai structurilor de
recunoastere ale antigenilor specifici; peptide biologic active (din structura
hormonilor / factorilor de crestere / citokinelor).
 Exemple: 111In pentetreotid (Octreoscan); liganzi ai receptorilor pentru
estrogeni: 16a-18F-17b-estradiol; 16a-123I-iodo-17b-estradiol; 17a-123I-
iodovinil-11b-metoxi-estradiol; 123I-MIVEZ (permit studiul in vivo a
prezen]ei receptorilor estrogeni in neoplasmul mamar - recidive, metastaze,
indicatie de tratament hormonal.
 Indicatii: diagnostice (localizarea tumorii primare si a metastazelor;
radioterapie metabolica).
Analogi
metabolici:
 Radiofarma- Indicatii Tipul
ceuticul de studiu
18
F-FDG Studiul biologiei tumorale (neo PET, metab.
mamar, pulmonar, colorectal, glucidic
cerebral, testicular, limfoame,
melanom...)
11
C-metionina Caracterizarea metabolismului PET, metab.
(colina) tumoral si a raspunsului la tratament aminoacizilor
11
C-timidina Stadializare tumorala si raspuns la PET, timidina
tratament
!8
F-fluoro- Evaluarea receptorilor estrogeni PET, receptori
estradiol tumorali
18
F-oligo- Evaluarea unor markeri genetici PET, oligo-
nucleotide specifici nucleotide
Derivati de Studiul unor antigeni tumorali PET, SPECT,
anticorpi specifici markeri
radiomarcati tumorali
18
F-fluoro- Evaluarea reoxigenarii tumorale PET, hipoxie
mizonidazol tumorala

Radiofarmaceutice de perspectiva - oncologie

nucleara
Metabolismul
glucidic:
 Glicoliza in
celula maligna:

The germinating idea of PET: Nobel Prize Medicine

Laureat, Dr. Otto Warburg:

<The prime cause of cancer is the replacement of the

respiration of oxygen by normal body cells by a
fermentation of sugar>
 Celulele tumorale :
caracterizate prin
glicoliza crescuta
(ipoteza Warburg);
transport
transmembranar de
glucoza si analogi
(indeosebi GLUT1 si
GLUT3) crescut /
fosforilare
intracelulara crescuta.

Activarea genei care codifica sinteza de transportori

membranari pentru glucoza (GLUT1) , cu cresterea
impresionanta a numarului acestora la nivel celular,
reprezinta un marker precoce de transformare maligna
a unei celule.
 18
F FDG

Absenta gruparii OH in pozitia 2 determina

o blocare enzimatica cu acumularea de
FDG intracelular (sub forma de FDG-6-
PO4), in platou (proportional cu intensitatea
glicolizei) Þ vizualizarea tesuturilor cu
glicoliza crescuta.
 GLUT8

GLUT4

GLUT6
Modelul compartimental
al captarii FDG Fixarea crescuta de FDG cu
posibilitatea cantificare a
metabolismului glucidic
tumoral (model matematic).

Corelatie intre acumularea

tumorala de FDG si nivelul
de exprimare a GLUT1
(fractia proliferanta a tumorii).

FDG = marker al nivelului

de proliferare tumorala in
vivo.
 18FFDG
(18F-2fluoro-2deoxi-Dglucoza)

Factorii care au impus utilizarea 18F-FDG ca radiotrasor

principal (alte radiofarmaceutice PET: 10% din frecventa
de utilizare a FDG):
1.captarea 18F-FDG de catre celulele tumorale cu
activitate glicolitica crescuta; majoritatea tumorilor
maligne (pulmonare, mamare, de colon, limfoame,
melanoame) pot fi detectate cu 18F-FDG
2.timpul relativ lung de injumatatire al radionuclidului
(18F) - 110 min.
3.obtinerea 18F in cantitati suficiente in ciclotroane de
mici dimensiuni.
Semiologie PET normala
In mod normal, 18F-FDG
este captat la nivel:
- cerebral
-periocular
(mm.oculomotori)
-cavitate bucala,
nazofaringe, faringe
-miocardic
-tractului urinar
-hepato-splenic
-tractului gastro-
intestinal (stomac,
flexurile colonului si
sigmoid
-pulmonar, daca nu se
face o corectie
adecvata
Fixare patologica: neoplasm(caz1)

 Istoric: barbat, 68
ani, cu leziune
tumorala pulmonara
apicala stg. pe
imaginea Rx.
 Interpretare: studiul
PET si analiza
cantitativa efectuate
pentru evaluarea
potentialului malign
al acestei leziuni au
evidentiat o arie cu
captare crescuta a
18F-FDG apicala stg.,

de mari dimensiuni
(tumora maligna)
 Caz 2.

 Istoric: barbat, 64 ani,

diagnosticat cu cancer
pulmonar metastazat.
 Interpretare: examinarea
PET releva multiple arii
hipercaptante in ambele
campuri pulmonare,
precum si o arie
paraspinala
hipermetabolica,
adiacenta vertebrelor
toracice inferioare. Se
remarca, de asemenea, o
acumulare discreta a RF
in bazinetul renal stg. si
moderata in bazinetul si
ureterul dr.
Alti analogi
metabolici:
 Acizi aminati marcati cu
radioizotopi emitatori de pozitroni

 Principiu: masurarea transportului

aminoacizilor / nivelului sintezei proteice
(crescute in celulele tumorale)
= criteriu diagnostic de malignitate.
 Radioizotopi: frecvent, 11C, 18F
 Exemple: 11C-tirozina; 11C-metionina
(leucina, fenilalanina).
 Radiotrasori PET
ai sintezei de acizi nucleici
 Principiu: celulele tumorale au activitate
proliferativa crescuta, deci utilizarea precursorilor
nucleotidici este crescuta.
 Radioizotopi: 18F, 11C.
 Exemple: analogi de timidina, 5-
fluorouracil.
 Indicatii: evaluarea raspunsului tumoral si a
recidivei dupa iradiere.
 Oligonucleotide radiomarcate (PET):
 Clasa de radiofarmaceutice inca in studiu, domeniu care s-a
dezvoltat prin disponibilitatea oligonucleotidelor sintetice.
 ”Strategia antisens”= hibridarea unui oligonucleotid
complementar unei secvente definite de ARNm, blocând sinteza
unei anume proteine (J.P.Gauchez, 1998).
 Principiu: Oligonucleotidele radiomarcate (doze mici)
difuzeaza in organism fara a fi degradate, patrund in anumite
celule, se hibrideaza specific cu o secventa complementara
(tinta) de ARNm (in celulele care exprima acest ARN) Þ se pot
observa, scintigrafic, focare de acumulare de radioactivitate,
corespunzând supraexpresiei unei anumite gene (care codeaza o
anume disfunctie), in regiuni bine delimitate din organism.
Radiotrasori
- markeri
de hipoxie
tumorala
(R.P. Spencer, 1994)
 Concluzii…
 Mecanismele de fixare a radiofarmaceuticelor
conditioneaza specificitatea de captare la nivelul
tesuturilor tinta.
 Studiul lor constituie una din directiile majore de
dezvoltare a imagisticii nucleare.
 Discutii
 Intrebari
 Studii de caz
 Prezentari conexe