LP 12.

Diagnosticul de laborator al infectiilor produse de helminti

OBIECTIVE: La sfarsitul acestei lucrari practice studentii trebuie sa cunoasca diagnosticul

de laborator in infectiile cu diferiti helminti

1. DIA GNOSTICUL DE LABORATOR IN TENIAZE

Agentul etiologic: Taenia solium, Taenia saginata (phylum Plathelmintes, clasa Cestoda)
Morfologie: adult si ou

T. saginata- adult T. saginata proglota-

preparat colorat cu carmin

Taenia sp. ou- in ex coproparazitologic colorat cu Lugol

https://www.cdc.gov/dpdx/taeniasis/index.html

Produs patologic: materii fecale; amprenta anala (in teniaza cu T.saginata)

Colectare si transportul probei: recoltarea probelor se face in colectoare speciale
(coprocultor); proba trebuie sa fie expediata la laborator in 2-3 ore de la recoltare; cand nu
exista posibilitatea expedierii vor fi pastratate la +4 0C sau conservate in solutii fixatoare
(formol 10%, iod)
Diagnostic direct:

1
-se bazeaza pe decelarea proglotelor si a oualor in materii fecale; identificarea microscopică a
proglotelor gravide (sau, mai rar, examinarea scolexului) permite determinarea speciilor.
a. Adultul

Adulții pot ajunge la o lungime de 2-8 metri, dar scolexul are numai 1-2 milimetri în
diametru. T. saginata poate atinge o lungime de 10 m, T. solium 3-4 m (mai mică decât T.
saginata)

b.Examenul unei proglote: Separarea T. saginata și T. solium este cel mai bine realizată prin
examinarea proglotelor mature
coloratie cu carmin/ tus de India
-evidentiaza ramificatiile uterine
- T.saginata- prezinta 12-30 ramificatii uterine laterale
- T.solium- 7-13 ramificatii uterine laterale

c.Examenul scolexului:
- La T.saginata- scolexul are 4 ventuze mari dar lipsesc rostrum si carligele
- La T.solium are 4 ventuze mari si un rostrum cu 2 randuri de carlige mari si mici
d.Examenul coproparazitologic:
-ouale de T.saginata sunt identice cu ouale de T.solium. Ouale masoara 30-35 µm in
diametru si prezinta striuri radiare; oncosfera din interior contine 6 carlige refractile
e. Examenul amprentei anale: decelarea oualor
f. Teste ELISA – detecţie Ag de Taenia în MF → dg în absenţa eliminării de proglote/ouă în
MF

2. DIAGNOSTICUL DE LABORATOR IN CISTICERCOZA

Agentul etiologic: larva Taeniei solium (Cysticercus celullosae)

-complicatie a infectiei cu T.solium, caracterizata prin dezvoltarea larvelor
(Cysticercus celullosae) in viscere sau tesuturi umane.
Morfologie:
Cysticercus celullosae are forme variabile in functie de organul parazitat.

Diagnosticul de laborator:
Diagnostic direct:
2
a. Diagnosticul definitiv consta in evidentierea cisticercului in tesutul examinat.
- examen macroscopic si microscopic al unui cisticerc extras prin biopsie, cutanata sau
musculara:
- Cisticercul extras prin biopsie chirurgicala se preseaza intre doua lame pentru
evaginarea scolexului si se examineaza cu lupa sau la microscop cu ob.x10
- Cisticercul este o formatiune veziculara, ovoida, transparenta, de marimea unui
bob de mazare (~1cm), plina cu lichid vascos care protejeaza un scolex. Locul
scolexului este indicat printr-o pata opaca, bine vizibila.
b. Detectare de antigene. Teste care detecteaza antigenele circulante in ser sau LCR sunt mai
utile in urmarirea raspunsului la terapie in formele subarahnoidiene si ventriculare din
neurocisticercoza.
d. Detectare moleculara. Teste PCR pentru detectarea ADN T. solium in LCR ; nu sunt
utilizate pe scara larga pentru diagnosticul clinic si de laborator al neurocisticercozei
Diagnostic indirect: detectarea anticorpilor specifici (EIA, imunoblot) in ser
Testul Immunoblot cu antigene purificate de T. solium este testul imunodiagnostic pentru
confirmarea diagnosticului clinic si radiologic prezumtiv de neurocisticercoza. Persoanele la
care se evidentiaza oua si proglote in materiile fecale ar trebui evaluate serologic deoarece se
poate produce autoinfectia, avand ca rezultat aparitia cisticercozei.

3. DIAGNOSTICUL DE LABORATOR IN HIDATIDOZA

Agentul etiologic: Echinococcus granulosus (phylum Plathelmintes, clasa Cestoda)

Morfologie: adult, ou si larva
Diagnostic direct:
Diagnosticul echinococozei se stabileste in principal prin ultrasonografie si/sau alte tehnici
imagistice sustinute de teste serologice pozitive. La pacientii cu serologie negativa dar cu
imagini compatibile cu echinococoza, biopsia cu ac fin ghidata echografic poate fi utila pentru
confirmarea diagnosticului; in timpul acestei proceduri trebuie luate masuri de precautie
pentru a controla reactiile alergice sau pentru prevenirea recurentei secundare in caz de
scurgere de lichid hidatic sau protoscolecsi.

Diagnostic indirect:

3
Imunodiagnosticul poate fi util in diagnosticul echinococozei si ar trebui utilizat inaintea
metodelor invazive. Reactiile fals- pozitive pot apare la persoanele cu alte infectii helmintice ,
cancer, boli cronice imune. Testele negative nu exclud echinococoza deoarece purtatorii de
chisturi nu au anticorpi detectabili.
-detectarea anticorpilor specifici (ELISA,EIA,IHA, IFA)

4. DIAGNOSTICUL DE LABORATOR IN ASCARIDIOZA

Agentul etiologic: Ascaris lumbricoides (phylum Nematoda, clasa Secernentea)

Morfologie: adult si ou

Ascaris lumbricoides- ou fertilizat in Ascaris lumbricoides- ou nefertilizat

ex. coproparazitologic (coloratie Lugol) in ex. coproparazitologic (coloratie Lugol)

4
Ascaris lumbricoides- ou fertilizat, decorticat Ascaris lumbricoides- adult femela
in ex. coproparazitologic (coloratie Lugol)
(Sursa: https://www.cdc.gov/dpdx/ascariasis/index.html)

Diagnostic direct:
Produs patologic: materii fecale
Examen microscopic:
-evidentierea oualor in materii fecale (oua fertile, nefertile, decorticate) – ex
coproparazitologic (coloratie cu solutie Lugol), cu sau fara concentrare anterioara

0u fertilizat:
- 45-75 µm lungime,
- rotunjit,
- invelis gros cu suprafata externa mamelonata, frecvent colorata in maro;
- in unele cazuri stratul extern este absent (ou decorticat);
Ou nefertilizat:
-90 µm lungime,
-alungit si mai mare decat oul fertilizat,
-invelis subtire,
-suprafata externa mamelonata este variabila, cu/fara protuberante mari,
5
 -contin o masa de granule refractile
-evidentierea larvelor in sputa sau aspirat gastric
Examenul macroscopic:
-decelarea parazitului adult eliminat prin materii fecale, nas sau gura
-adultii sunt viermi cilindrici
-femelele au 20-35 cm lungime, cu o coada dreapta
-masculii sunt mai mici, au 15-31 cm lungime si au o coada curbata
-adultii de ambele sexe poseda 3 „buze” la extremitatea anterioara a corpului

5. DIAGNOSTICUL DE LABORATOR IN ENTEROBIOZA

Agentul etiologic: Enterobius vermicularis (oxiur) (phylum Nematoda, clasa Secernentea)

Morfologie: adult si ou

E. vermicularis ou- ex. coproparazitologic E. vermicularis ou- ex. coproparazitologic

(preparat necolorat) (preparat cu solutie Lugol)
(Sursa: https://www.cdc.gov/dpdx/enterobiasis/index.html)
Diagnostic direct:
Produs patologic:
a. scaun emis spontan
b. amprenta anală (scotch-test)/ tampon anal
Examen microscopic:
a. oua: masoara 50- 60µm/ 20- 30µm, ovale, usor aplatizate pe o parte, partial embrionate
cand sunt eliminate
b. evidentierea oualor depuse in regiunea perianala
Examen macroscopic: adulti eliminati spontan vizibili pe suprafata materiilor fecale
-adultul mascul masoara 2,5 mm lungime/ 0,1-0,2 latime, posterior prezinta un spicul
6
-adultul femela masoara 8-13mm lungime/ 0,3-0,5 mm latime, prezinta o coada lunga
-la ambele sexe exista extinderi cefalice

6. DIAGNOSTICUL DE LABORATOR IN TRICHIUROZA

Agentul etiologic: Trichuris trichiura (phylum Nematoda, clasa Enoplea)

Morfologie: adult si ou

T. trichiura ou- in ex. coproparazitologic T. trichiura ou- in ex. coproparazitologic

(preparat cu solutie Lugol) preparat necolorat
(Sursa: https://www.cdc.gov/dpdx/trichuriasis/index.html)
Diagnostic direct:
Examen microscopic: se evidentiaza oua in materii fecale- – ex coproparazitologic
(coloratie cu solutie Lugol), cu sau fara concentrare anterioara

-oul masoara 50-55µm/20-25µm, are forma de butoi, perete gros, o pereche de ’’dopuri’’
polare la fiecare capat, neembrionate cand sunt eliminate in materii fecale
Rectoscopie: viermi adulti observati la rectoscopie
-adultii se localizeaza in intestinul gros, cec, apendice
- adultul mascul masoara 30-45 mm, cu un capat posterior incurbat
-adultul femela masoara 30-50mm, cu un capat posterior drept
-ambele sexe au un capat anterior in forma de bici

7. DIAGNOSTICUL DE LABORATOR IN STRONGILOIDOZA

Agentul etiologic: Strongyloides stercoralis (phylum Nematoda, clasa Secernentea)
Morfologie: adult si larve (strongiloide si rabditoide)

7
S. stercoralis larva rabditoida- S. stercoralis larva strongiloida-
materii fecale, preparat necolorat preparat necolorat
(Sursa: https://www.cdc.gov/dpdx/strongyloidiasis/index.html)
Diagnostic direct:
Produs patologic: materii fecale, lichid duodenal
Examen microscopic:
Evidenţierea larvelor rabditoide (ocazional şi strongiloide)
Larva rabditoidă: 180-380 µm, canal bucal scurt, cu un primordiu genital proeminent.
- este evidenţiată în:
-materii fecale- preparat umed:
• examen microscopic direct (din produsul patologic)
• dupa concentrarea materiilor fecale
• dupa cultivare
-conţinut duodenal
• recoltat prin tubaj duodenal
• recoltat cu ajutorul capsulei Enterotest (Se foloseste o capsula
gelatinoasă, enterosolubilă care conține un fir de nylon. Capsula este
ingerată după 12 ore de repaus digestiv. În intestin gelatina se dizolvă,
iar parazitii se fixeaza pe fir. Dupa 4 ore firul se extrage si se
examineaza microscopic).
Evidenţierea larvelor strongiloide:
• în spută, în cazul suspectării unei strongiloidoze generalizate
Larva strongiloidă: până la 600 µm lungime, coada este crestată, raportul esofag- intestin este
1:1, se găsesc în sol și invadează gazda umană prin penetrarea directă a pielii, pot fi gasite în
probe respiratorii în caz de autoinfecție.
Diagnostic indirect: detectarea Ac specifici (EIA), în strongiloidoza cronică

8
La lucrarea practica studentii vor observa:
1. Proglote de Taenia solium si Taenia saginata (coloratie cu carmin).
2. Oua de Taenia sp. (preparat nativ cu solutie Lugol).
3. Paraziti adulti -Taenia solium, Taenia saginata (preparate formolizate).
4. Cisticerci (preparat formolizat).
5. Chist hidatic (preparat formolizat).
6. Paraziti adulti- Ascaris lumbricoides (preparat formolizat).
7. Oua- Ascaris lumbricoides (preparat nativ cu solutie Lugol).
8. Paraziti adulti- Trichuris trichiura (preparat formolizat).
9. Oua- Trichuris trichiura (preparat nativ cu solutie Lugol).
10. Larve- Strongyloides stercoralis (preparat nativ cu solutie Lugol).

Bibliografie:
https://www.cdc.gov/dpdx/az.html#h
Luca Mariana. Parazitologie si Micologie medicala. Editura UMF. Iaşi, 2005, pag 163-172;
176-181, 200-203, 192-194, 196-198, 210-214.