INSTITUTUL NATIONAL DE SANATE PUBLICA

LABORATORUL NATIONAL DE SANATE PUBLICA

SUBIECTUL NR .

COLORANTI SI COLORATII FOLOSITE CURENT IN LABORATORUL DE HEMATOLOGIE

FROTIUL DE SANGE-se poate executa cu sange recoltat direct din

pulpa degetului (frotiu din sangeperiferic) sau din sange venos recoltat pe EDTA.
Un frotiu bine executat trebuie :-sa fie mai ingust decat lama;sa aibe 2
marginidrepte si franjuri in partea terminala,celulele sa fie raspandite uniform,sa
nu fie distruse sau deformate.

Coloratia cea mai folosita este coloratia May Grunwald- Giemsa ,care permite
o analiza cromatica si observarea tuturor detaliilor structurale necesare
identificarii celulelor.

Tehnica

Pe o lama curata si degresata se pune o picatura de sange la un capat al ei;cu

o alta lama cu colturi rotunjite se intinde sangele pe toata lama (lama slefuita se
tine inclinata la unghi de 30 °) printr-o miscare dreapta , egala nu prea rapida ,
catre capatul opus picaturii , terminandu-se cu franjuri. Imediat se usuca lama
prin agitare in aer.

Se trece la colorarea propriu zisa dupa tehnica recomandata de furnizorul de

reactivi. In principiu se foloseste mai intai colorantul May Grunwald care
continand methanol face si fixarea frotiului (cam 3 min.)apoi prin diluare cu apa
distilata ( se pune acelasi numar de picaturi ca solutia de colorant si se lasa cam
2min) se coloreaza hematiile si citoplasma leucocitelor.

Se scurge colorantul prin inclinare si se acopera cu solutie Giemsa diluata

(coloreaza citoplasma si nucleul eozinofilelor si bazofilelor) ; se lasa cam 20 min ,
apoi se spala cu apa de la robinet si se lasa la uscat in stativ .